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脉冲电场空气消毒器对黑曲霉菌杀灭效果观察
目的 观察一种脉冲电场空气毒器对空气中黑曲霉菌的杀灭效果.方法 采用空气微生物采样器和平板沉降法,对该空气消毒器杀灭室内空气中黑曲霉菌和自然菌的效果进行观察.结果 在20 m3实验室内开启该脉冲电场空气消毒器运行60 min,对室内空气中黑曲霉菌的平均杀灭率为99.93％.在180 m3的办公室内密闭无人条件下,开启该脉冲电场空气消毒器运行1h,对室内空气中自然菌的平均杀灭率为93.15％,处理后的空气剩余存活菌范围在53～88 cfu/m3.结论 该脉冲电场空气消毒器对室内黑曲霉菌孢子具有较好的净化或杀灭作用,模拟现场和现场消毒实验均可在60 min达到消毒指标要求.
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八种化学消毒剂对黑曲霉菌杀灭效果的研究
目的 了解8种常用化学消毒剂对黑曲霉菌的杀灭效果.方法 用悬液定量杀菌试验法进行了观察.结果 75%乙醇作用1 min、4000 mg/L长链季铵盐作用5 min、4000 mg/L聚醇醚碘作用45 min、250 mg/L二氧化氯作用2.5 min、3000 mg/L有效氯的84消毒液作用10 min,对黑曲霉菌的杀灭对数值均＞4.00.用8000 mg/L醋酸氯已定作用20 min、5000 mg/L对氯间二甲苯酚作用30 min、4000 mg/L聚维酮碘作用60 min,对黑曲霉菌的杀灭对数值依次分别为0.60、0.86、0.83.结论 在常规使用浓度下,乙醇、长链季铵盐、聚醇醚碘、二氧化氯和84消毒液对黑曲霉菌杀灭效果较好;醋酸氯已定、对氯间二甲苯酚、聚维酮碘对黑曲霉菌杀灭效果较差.
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一种隐形眼镜护理液对两种霉菌的杀灭效果比较试验
鉴于ISO14729-2001隐形眼镜消毒产品的抗微生物活性方法规定的霉菌试验菌株为茄科镰刀霉菌(ATCC 36031),而ISO14730-2000方法规定中对霉菌试验的菌株为黑曲霉菌(ATCC 16404),本研究用一种隐形眼镜保养液对黑曲霉菌和茄科镰刀霉菌杀灭效果进行了比较观察.
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微生物转化灯盏乙素制备野黄芩素的研究
目的野黄芩素较其糖苷——灯盏乙素具有更好的生理活性，开发将灯盏乙素转化为野黄芩素的生物转化工艺具有潜在的应用价值。
方法筛选专一性高的微生物菌株，利用其发酵清液作为粗酶液转化灯盏乙素为野黄芩素，优化产酶发酵培养基和转化条件，提高野黄芩素转化得率和产率。
结果筛选到一株黑曲霉 JH-2菌株，该菌株产酶转化灯盏乙素为野黄芩素的专一性较高，产物降解性弱；优化后的较佳培养基组成为：蔗糖20 g/L，(NH4)2SO45 g/L，酵母浸出粉3 g/L，KH2PO41 g/L，MgSO40.5 g/L，FeSO40.01 g/L， pH 6.0；经转化条件优化后，提高了底物浓度和产物得率，在底物浓度为3 g/L，35℃下转化12 h，野黄芩素的得率可达93.7%。
结论成功开发了一种简便高效的野黄芩素制备方法，具有一定的应用价值。 -
黑曲霉菌pyrG基因的克隆与黑曲霉菌同源转化系统的建立
黑曲霉菌(Aspergillus niger)是一种不产生黄曲霉毒素的丝状真菌，它有生长迅速、易于培养、可大量产生分泌性蛋白质的特点，因此它除了在生产各种真菌代谢物及酶类的发酵工业上被广泛应用外，在基因工程中作为宿主菌生产蛋白质产物方面也受到很大重视和应用。为了将待表达的基因导入宿主菌，首先需要建立一个稳定有效的基因转化系统。以乳清酸核苷-5′-磷酸脱羧酶(pyrG)基因作为标志基因并以该基因的缺陷株真菌作为受体菌的转化系统已被证明是一种十分行之有效的基因转化系统。乳清酸核苷-5′-磷酸脱羧酶是尿嘧啶核苷酸合成中一种关键性酶，缺乏该酶的pyrG缺陷株不能在不含尿嘧啶核苷的培养基上生长。通过基因转化，向其导入含pyrG基因的质粒，可使其获得在不含尿嘧啶核苷培养基上生长的能力。如果将要导入的基因连接在该质粒上，此时pyrG可作为基因是否导入的标志。我们首次从黑曲霉菌ATCC 12049野生型菌株的基因文库中克隆获得全长pyrG基因，并在此基础上构建了表达性质粒载体，建立了pyrG基因为标志基因，以同型黑曲霉菌pyrG基因缺陷株为受体菌的同源基因转化系统。
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臭氧对医院被服类物品消毒效果和影响因素的实验研究
目的试验探讨一种适用于医院被服类物品消毒的臭氧消毒方法的可行性. 方法按卫生部<消毒技术规范>测定开机不同时间的臭氧工作浓度和工作环境空气中臭氧浓度,用载体定量杀菌试验和现场消毒试验检测臭氧对污染于被服类物品上的不同微生物的杀灭效果. 结果臭氧被服消毒机开机120 min塑料袋中臭氧浓度达1 765.43 mg/m3,而环境空气中臭氧浓度低于国家规定工作场所安全浓度;消毒80 min对布片载体上金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌杀灭率达100%;消毒120 min对布片载体上黑曲霉菌孢子杀灭率达100%;对医院使用中棉絮表面的自然菌杀灭率>90%;有机物对臭氧被服机的消毒效果没有影响. 结论臭氧对污染于被服类物品上的细菌和真菌具有很强的消毒效果,其在医院消毒领域具有良好的应用前景.
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双重荧光定量聚合酶链反应检测烟曲霉菌与黑曲霉菌的临床应用
目的 建立检测烟曲霉菌和黑曲霉菌的双重荧光定量聚合酶链反应方法,探讨其临床应用价值,为快速准确地鉴定侵袭性曲霉菌寻求新的检测技术.方法 设计可扩增烟曲霉菌和黑曲霉菌18s RNA引物和探针,建立双重荧光定量聚合酶链反应体系并进行方法学评价；选取45例临床确诊的侵袭性真菌感染(IF)患者和20例阴性健康对照者的全血,应用本方法对以上两种真菌进行DNA检测；结果与常规鉴定方法比较,评估该方法的敏感性和特异性.结果 对于纯化后的烟曲霉菌和黑曲霉菌DNA,该方法的敏感性为1拷贝,特异性达到100％,批内和批间试验均显示了较好的重复性；临床标本检测结果显示,该方法与常规方法比较,敏感性和特异性均为100％.结论 应用双重荧光定量聚合酶链反应方法同时检测烟曲霉菌和黑曲霉菌具有良好的敏感性、特异性和重复性,与常规鉴定方法结果相符,有利于烟曲霉菌和黑曲霉菌感染的早期快速诊断和实现对进展期感染者的动态监测.
关键词： 双重荧光定量聚合酶链反应 烟曲霉菌 黑曲霉菌 -
侵袭性霉菌性鼻窦炎误诊1例
侵袭性霉菌性鼻窦炎在临床上少见,而在霉菌中黑曲霉菌的破坏性强,难控制,临床罕见.患者,女性,65岁,因"头晕、视物重影2个月"以"腔隙性脑梗死"收入院.平素体健.入院检查:T36.8℃,BP17.3/10.6kPa,神志清,查体合作,皮肤粘膜无异常,浅表淋巴结不大.左眼睑略下垂,双瞳孔等大等圆,直径约3.50mm,光反应正常,眼球转动灵活.外耳道、鼻腔通畅,副鼻窦区无压痛.心肺听诊无异常,腹平软,肝脾肋下未触及,肝肾区无叩痛.四肢肌力、肌张力正常,生理反射正常,病理反射未引出.入院辅助检查:血、尿、粪常规正常;血糖、肝、肾功、血脂正常;头颅CT示:左基底节区腔隙性脑梗死(陈旧性).入院后按"腔隙性脑梗死"常规治疗1个月不见好转,头晕、复视加重.后在上级医院行磁共振检查示:左侧蝶骨、筛骨有浸润性病变.累及眶尖部.以"眶尖综合征"收入院.入院后行手术切除,病理切片未见肿瘤细胞,细菌培养有黑曲霉菌生长,后经2次手术切除及二性霉素B脂质体配合治疗,病情得以控制,但终致左眼失明.
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抗真菌蛋白质的分离纯化
目的试图从霉菌培养液中分离纯化抗真菌活性蛋白质.方法用离子交换层析法分离,用反向高效液相色谱法进一步纯化,经N-三(羟甲基)甲基甘氨酸凝胶电泳分析确定其相对分子质量.结果从黑曲霉菌培养上清液中分离出一种具有抗真菌活性的蛋白质(AFP).纯化后得到高活性的精制AFP.相对分子质量约为9 000,经MTT法检测5种真菌具有明显抗真菌活性.结论本研究为抗菌药物及防腐剂的开发提供了依据.
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胃癌患者化疗后引发黑曲霉菌血症的实验诊断和治疗
目的 探讨黑曲霉菌引起胃癌患者血流感染的实验诊断方法和治疗措施.方法 采用BacT/ Alert 3D全自动血培养仪进行血培养;仪器报警后,结合GM、G试验、sCRP和PCT等血清学结果,将标本转种于沙氏培养基行真菌培养.根据其菌落特点和镜下形态等特征鉴定真菌种类,采用MIC方法进行真菌体外药敏试验.结果 从该患者血培养标本中分离出真菌并鉴定为黑曲霉菌,体外药敏试验显示对伏立康唑、卡泊芬净有较低的MIC值,分别为0.25 μg/mL、0.06 g/mL.遂选用伏立康唑治疗取得满意效果.结论 通过行血培养,结合GM和G试验等血清学方法及sCRP和PCT等感染指标,可指导曲霉菌的培养和鉴定.
