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  • 联合检测子宫内膜中DNA、CEA、EMA、KT及端粒酶诊断子宫内膜癌

    作者:胡云;滕长波

    目的检测子宫内膜癌的DNA含量,细胞膜抗原定位和端粒酶的研究.方法以流式细胞仪检测32例子宫内膜癌的DNA含量、以免疫组化方法检测细胞膜抗原癌胚抗原(CEA)、上皮膜抗原(EMA)、角蛋白(KT)在子宫内膜癌上的定位,以原位杂交方法检测端粒酶活性.结果DNA含量及SPF值是判定子宫内膜组织分化程度的重要指标;细胞膜抗原在子宫内膜癌中高表达;端粒酶在子宫内膜癌组织中活性显著增高,与正常内膜组织相比P<0.05.结论DNA非整倍体是子宫内膜癌分子生物学的特异性标志;细胞膜抗原在子宫内膜癌中的阳性染色分布特点是其诊断的重要标志;端粒酶活性增高在子宫内膜癌的临床诊断中有重要意义,可能成为早期诊断的指标.

  • 蛋白质:生命的基石

    作者:孟庆玲

    组成人体的基本单位是细胞,而构成细胞的主要成分之一是蛋白质,包括白蛋白、球蛋白、肌肉蛋白、角蛋白等。因此,蛋白质是生命的物质基础和生命存在的表现形式。

  • 汽油对皮肤细胞DNA、蛋白质及皮脂合成能力的影响

    作者:贾晓东;肖萍;金锡鹏;沈光祖;金泰廙

    目的研究溶剂汽油对皮肤细胞的损害作用机制.方法采用皮肤角蛋白细胞和成纤维细胞原代培养技术,以及3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)、3H-脯氨酸(3H-Pro)、3H-亮氨酸(3H-Leu)和14C-亚油酸掺入实验方法,观测溶剂汽油对皮肤细胞DNA、蛋白质及皮脂合成能力的影响.结果接触0.01%的溶剂汽油后,角蛋白细胞的3H-TdR、成纤维细胞的3H-TdR和3H-Pro的掺入受到明显抑制,抑制率分别为68.5%、45.1%和40.6%;而在接触0.001%溶剂汽油时,角蛋白细胞的3H-Leu和14C-亚油酸的掺入就已表现出显著性降低,抑制率分别为20.2%和41.2%.皮肤细胞的掺入抑制率与接触溶剂汽油的剂量有关.结论溶剂汽油对皮肤细胞具有一定的毒效应,可干扰皮肤细胞的正常生理代谢过程,影响其DNA、蛋白质及脂质合成能力,使皮肤各项生理功能受到影响,这可能是溶剂汽油造成皮肤损害的机制之一.与成纤维细胞相比,角蛋白细胞更易受到溶剂汽油的影响.

  • 指甲有凹槽是啥病

    作者:林星

    指甲是角蛋白所形成的角质层,这种蛋白也存在于人体皮肤和毛发之中;指甲是从指甲根部的表皮处生长出来的.随着新细胞的生长,衰老的细胞会变硬和变得紧凑,终从指尖处脱落.健康的指甲是光滑、不会变色和没有槽沟的.随着年龄的增长,指甲上会出现纵脊,但这是无害的.受伤也会导致指甲上出现白斑,但它会自行消失.美国医学专家近日对能从指甲上辨别出的一些疾病进行了总结.

  • 头发也要防紫外线

    作者:王继萍

    头发是由角质细胞组成的,角质细胞内绝大部分是角蛋白.角蛋白是由一种颇长的氨基酸链组成的,这种氨基酸链约有20种氨基酸,而且大多数是胱氨酸.阳光照射时,头发中胱氨酸可吸收紫外线从而保护头皮.但阳光曝晒后,胱氨酸吸收大量的紫外线会使其本身的二硫键断裂、分解,头发中的角蛋白会因此变性、断裂.头发会失去原有的水分和营养,毛发皮质逐渐脆弱,从而导致头发发黄、分叉、干燥、易断.

  • 化瘀泄浊方对肾间质纤维化实验大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

    作者:潘利敏;王彦凯;王月华;王凤丽;范焕芳

    目的:观察化瘀泄浊方对肾间质纤维化实验大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响.方法:选用健康、雌性SD大鼠50只,用单侧输尿管结扎方法复制大鼠肾间质纤维化模型,将其随机分为缬沙坦组[予缬沙坦5.3mg/(kg·d)经口灌服]、化瘀泄浊方组[化瘀泄浊方5.7g/(kg·d)经口灌服]、阿魏酸哌嗪分散片组[予阿魏酸哌嗪分散片6.7mg/(kg·d)]与模型组[予同等量生理盐水经口灌服],并设假手术组,每组10只大鼠.行HE、Masson染色观察实验大鼠梗阻侧肾脏组织形态学改变并用免疫组化方法检测实验大鼠梗阻侧肾脏α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及角蛋白(ck)的表达.结果:模型组及各治疗组与假手术组相比均呈现程度不同的病理损害(P<0.05),α-SMA的表达也增加(P<0.05),ck的表达明显减少(P<0.05).各治疗组与模型组比较,病理损害减轻(P<0.05),α-SMA表达明显减少(P<0.05),ck表达明显增强(P<0.05),治疗各组间比较,化瘀泄浊方组优于阿魏酸哌嗪分散片组(P<0.05),其他各组间均无明显差异(P>0.05).结论:输尿管梗阻后肾组织呈现程度不同的病理损害,这可能与α-SMA蛋白及其mRNA的表达增加有关,化瘀泄浊方对其有一定的抑制作用.

  • 蝎皮蛋白质组分的提取分离及体外活性成分筛选

    作者:吴立;张莉;杜冠华;吕扬

    目的:为了证明蝎皮对免疫功能的影响并探讨蝎皮中含有的活性成分,通过提取分离蝎皮中的水溶蛋白质和角蛋白质组分,经过体外药理活性筛选,观察其对细胞或体液免疫系统的影响,以期获得具有生物活性的蛋白质组分.方法:采用水提与盐析法获得水溶性总蛋白(ST1),还原法获得总角蛋白(ST2),通过Sephadex G-50凝胶色谱对水溶总蛋白和总角蛋白进行分离,并对获得的各种蛋白组分进行了体外药理筛选.结果:发现蝎皮的蛋白质组分在体外药理实验中显示对T/B淋巴细胞转化具有显著促进作用,但对NK活性无明显作用.结论:蝎皮蛋白提取组分具有一定的免疫调节生物活性,研究结果对蛋白质药物开发提供了基础数据.

  • 人发角蛋白对大鼠肝、肾、心功能和血象的影响

    作者:吕浩然;邹云雯;刘尚礼;丁悦;黄东生

    目的 评价人发角蛋白材料的组织相容性及对机体的影响.方法 健康Wistar大鼠54只,随机分为3组,每组18只.将人工材料、正常人发、生理盐水制成悬液注入大鼠腹腔.15、30和45 d时测血常规部分指标及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 未经处理的正常人发可使血液中的白细胞、血小板明显升高,而人发角蛋白人工肌腱及生理盐水的影响并不明显.三组材料对心肌损伤无显著影响,均呈现开始阶段升高,后降低,以后又逐渐升高.对肾功能亦无显著影响,生理盐水组无变化,其余二组开始升高,以后逐渐降至正常.对肝功能无显著影响.各组GSH-Px活性无变化,30 d后人发角蛋白人工肌腱组GSH-Px活性明显高于正常对照组及正常人发组,人发组GSH-Px活性受到抑制,45 d后恢复至正常对照组水平.结论 人发角蛋白材料的组织相容性好,对机体无明显影响.

    关键词: 角蛋白 细胞 毒理 生化
  • 自发永生性转化人胚肺上皮细胞系HLEC的建立及鉴定

    作者:张志谦;胡颖;王冰晶;赵威;林仲翔

    目的对源自人胚肺组织原代培养、形态似上皮类型的细胞系--人肺上皮细胞(HLEC)的生物学特性进行鉴定,为相关研究和应用提供模型和依据.方法分别采用相差显微镜下观察、细胞计数、β-半乳糖苷酶染色、免疫荧光细胞化学.人Alu序列PCR扩增、染色体计数、软琼脂集落形成实验和裸鼠致瘤实验对HLEC的形态学特征、生长特性、衰老状态、上皮细胞标志物、来源、细胞遗传学特点和恶性转化等生物学特性进行研究鉴定.结果HLEC角蛋白和上皮型细胞间黏附分子钙黏着素E-cadherin免疫荧光染色阳性,染色体众数在41~44,人Alu序列PCR扩增结果阳性,β-半乳糖苷酶阳性细胞的比例未见随细胞代数的增加而升高,软琼脂和裸鼠体内均不生长,微丝及黏着斑结构正常.结论HLEC细胞具有永生化细胞特征、属相对正常人肺上皮亚二倍体细胞,可用于肺癌癌变机理研究和癌细胞的相对正常对照.

  • 膀胱浆细胞样变异型尿路上皮癌临床病理观察和不同分子质量角蛋白的表达

    作者:耿敬姝;石清涛;宋鸿涛

    目的 探讨膀胱浆细胞样变异型尿路上皮癌的临床病理特征、诊断及不同分子质量细胞角蛋白的表达模式.方法 运用光镜、特殊染色及免疫组化染色对1例罕见的浆细胞样变异型尿路上皮癌进行观察并复习文献.结果 瘤细胞弥漫分布呈浆细胞样特征,细胞胞质透亮或嗜酸性,核增大、偏位、深染.瘤细胞弥漫浸润黏膜固有层及浅肌层,可见伴随的低级别非浸润性尿路上皮癌成分.特殊染色:瘤细胞AB/PAS(+).免疫组化:CK20和CK7(++),CK5/6(-/+),CK8/18、CK18、CEA、CD138、EMA和AE1/AE3(+),E-cadherin、p63、CD38、ICA和vimentin(-).结论 浆细胞样变异型尿路上皮癌罕见,其不同分子质量角蛋白的表达存在差异,因其具有浆细胞样特征需与其他肿瘤相鉴别.

  • 角蛋白阳性的间质网状细胞肿瘤临床病理观察

    作者:王卓才;崔华娟;赖晃文;张余;廖秋林;赖续文

    目的 提高对角蛋白阳性的间质网状细胞肿瘤(CIRCT)的认识.方法 对1例CIRCT患者的临床表现、病理形态、免疫组化及超微结构进行分析,并复习相关文献.结果 CIRCT是一种罕见肿瘤,以成年男性为主,好发于淋巴结.肿瘤细胞中等至较大,圆形、卵圆形或梭形,胞质丰富,核圆形或椭圆形;部分瘤细胞界限不清,胞质浅嗜酸呈“合体细胞样”.瘤细胞呈弥漫束状或旋涡状,部分巢团状排列.免疫组化示肿瘤细胞CK8、CK18和vimentin弥漫(+),SMA和desmin灶性(+),p53(+),Ki-67阳性率为43%.超微结构示细而长的细胞突,不成熟细胞连接和核周包绕成束的中间丝.原位杂交EBV(-).结论 CIRCT是罕见的恶性肿瘤,其诊断有赖于病理形态、免疫组化及超微结构的综合分析.p53过表达、转移和复发提示愈后较差.

  • 细胞角蛋白和Ret蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达

    作者:周炜洵;肖雨;刘彤华;罗玉凤;曹金伶

    目的探讨甲状腺乳头状癌中细胞角蛋白(CK)和ret的表达及其在病理诊断中的价值.方法分别采用免疫组织化学EnVision法及LSAB法检测CK19、CK17、CK8、CK20及ret在69例甲状腺乳头状癌、14例结节性甲状腺肿和42例癌旁正常滤泡中的表达.结果 CK19、ret在乳头状癌组织的阳性率(85.5%、68.1%)明显高于结节性甲状腺肿和正常滤泡组织阳性率(25.0%、5.4%),二者差异有统计学意义(P<0.01).CK17在乳头状癌中有少量表达(15.9%),主要集中在鳞化及分化差或小灶浸润区域.分别有75.4%及26.8%的乳头状癌及良性区域CK8染色阳性,所有病例CK20阴性.结论 CK19、CK17及ret在甲状腺乳头状癌中表达增加,在病理诊断中有一定价值.

  • 细胞角蛋白在乳腺导管内增生性病变鉴别诊断中的应用

    作者:张景丽;张红英;魏兵;郎志强;步宏

    目的研究细胞角蛋白(CK)在乳腺导管内增生性病变的表达情况,寻求帮助乳腺导管内增生性病变鉴别诊断的分子标记.方法按Page标准选病例,收集本院1993~2002年病理标本,乳腺导管内增生性病变92例(石蜡包埋标本)、冷冻切片30例以及导管上皮普通性增生原代培养上皮细胞和浸润性导管癌细胞株T-47D和MCF-7.采用EnVision标准二步法研究CK34βE12、CK8以及CK14表达情况.结果(1)石蜡组织中CK34βE12在导管上皮普通性增生、不典型性增生、导管原位癌以及浸润性导管癌的阳性结果分别为95.2%、33.3%、19.2%和12.5%;导管上皮普通性增生、浸润性导管癌的冷冻切片CK34βE12阳性率为100%和55%;CK34βE12在MCF7呈阴性染色,在普通性增生原代培养细胞及T-47D中呈阳性染色;(2)CK8与CK14在乳腺导管上皮普通性增生的表达模式与其他病变不同.结论CK34βE12有助于乳腺导管内增生性病变的鉴别诊断,但还不适用于术中冷冻快速诊断;CK8与CK14在乳腺导管内增生性病变中的表达模式可有助于鉴别诊断.

  • Twist基因蛋白表达在甲状腺乳头状癌诊断与鉴别诊断中的意义

    作者:何春年;Lili He;Jin Q Cheng;陈士超;赵焕芬;翟金萍;张静

    目的 探讨Twist基因蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达状况,寻找更特异的标记物,用于甲状腺乳头状癌(PTC)与滤泡状腺瘤(FA)和良性乳头病变(BPL)的鉴别诊断.方法 以50例PTC为研究组,以48例FA和47例BPL作对照组.在自制组织芯片上行免疫组织化学(SP法)标记,检测Twist基因蛋白和HBME-1,并以CK19进行对照.结果 3种指标(Twist、HBME-1、CK19)阳性表达率:在PTC组分别为100%(48/48)、94.0%(47/50)和78.0%(39/50);在FA组分别为0、6.7%(3/45)和0;在BPL组分别为7.0%(3/43)、2.1%(1/47)和0.PTC组分别与FA和BPL组比较差异均有统计学意义(P=0.000).3种指标在鉴别诊断甲状腺良、恶性病变的灵敏度分别为:100%、96.4%和97.7%,特异度分别为:94.0%、95.7%和95.1%,准确度分别为:78.0%、100%和91.9%.结论 Twist可应用于辅助诊断PTC,并可应用在对FA或BPL的鉴别诊断.

  • 免疫组织化学标记物在乳腺细针吸取细胞学鉴别诊断中的意义

    作者:狄方;王念黎

    目的 探讨免疫标记物对鉴别乳腺细针吸取细胞学(FNAC)良性病变和癌的意义.方法 收集135例有随访资料、活检和组织病理学诊断对照的乳腺FNAC资料:良性病变88例,包括非增生性病变43例和增生性病变45例;乳腺癌47例,对其FNAC涂片和相应的石蜡切片作细胞周期蛋白(cyclin)D1、c-erbB-2、Ki-67、p21CIP1/WAF1(简称p21)和34βE12的免疫组织化学APAAP和ABC法检测.利用SPSS11.5软件进行分析.结果 (1)以上各标记物在良性非增生性和增生性病变中的标记差异无统计学意义.(2)以上各标记物在良、恶性病变中的标记差异均有统计学意义(P<0.001).多因素的logistic回归分析显示有意义的组合标记物为cyclin D1(P<0.001)、34βE12(P<0.001)和c-erbB-2(P=0.003). cyclin D1、c-erbB-2阳性和34βE12阴性提示为癌,其组合诊断的敏感性和特异性高.组合标记物共同判断,cyclin D1和34βE12任一判断为癌,诊断的敏感性和特异性分别为95.7%和94.3%;这三个标记物任一判断为癌,诊断的敏感性进一步上升至97.9%,特异性下降至92.0%;这三个标记物任两个共同判断为癌,诊断的敏感性为72.3%,特异性为100.0%.(3)在癌组中,根据Robinson细胞学分级把癌分为3级,cyclin D1、34βE12和p21在各级癌中的表达差异不大,而c-erbB-2和Ki-67在1级癌的阳性表达率低,仅为40.0%和33.3%,在3级癌中阳性表达率高.组合cyclin D1和34βE12,cyclin D1和34βE12,任一判断为癌,1级和2级癌的检出率为93.3%和96.2%.结论 所检测的免疫标记物对良、恶性病变的鉴别诊断价值较大,组合cyclin D1、34βE12和c-erbB-2可有效地提高癌的诊断敏感性和特异性.对鉴别分化好的乳腺癌和乳腺良性病变,有效的组合为cyclin D1和34βE12.

  • 细胞角蛋白7和20在卵巢转移癌中的表达

    作者:戴林;宋秋静;李丽华;钟大军;回允中

    目的观察卵巢转移癌的临床资料、病理形态和免疫组织化学改变,为鉴别卵巢转移癌与原发癌提供依据。方法对27例卵巢转移癌(其中胃癌12例,结肠癌11例,其他4例)进行了临床和病理形态观察,同时采用免疫组织化学(SP法)对其分别进行细胞角蛋白[CK(AE1/AE3)]、细胞角蛋白7 ( CK7)、细胞角蛋白20(CK20)、癌胚抗原、波形蛋白、nm23抗原检测。结果卵巢转移性胃癌12例中11例为双侧实性,卵巢转移性结肠癌11例中7例为单侧囊实性。组织学检查胃癌卵巢转移12例全部以印戒细胞癌或低分化腺癌散在分布为特征,而结肠癌卵巢转移则11例中8例与子宫内膜样癌相似。CK20阳性染色使卵巢转移性胃癌7例及结肠癌8例得到明确诊断,在转移性结肠癌中CK20有稳定的表达。卵巢转移性胃肠道癌中CK7多数阴性。癌胚抗原、波形蛋白、nm23的联合使用使转移性胃癌11例,结肠癌10例得到明确诊断。结论 C K7和CK20在鉴别来自胃肠道的卵巢转移癌中具有重要意义,当几种抗体联合使用时意义更大。

  • 人巨细胞病毒对腮腺导管上皮细胞表型的影响及其机制

    作者:杨国嵘;黄高昇;白海;王恩华;宋继谒;郭英;王娟红;梁蓉;王哲

    目的研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对腮腺导管上皮细胞表型所产生的影响及其可能的机制.方法用免疫组织化学方法研究腮腺巨细胞包涵体病石蜡包埋组织中巨细胞病毒立即早期抗原、广谱角蛋白、组织蛋白酶D等的表达.结果腮腺导管上皮细胞感染HCMV后,作为上皮性标志物的角蛋白表达转为阴性,而组织蛋白酶D的表达转为强阳性.结论HCMV感染后腮腺导管上皮细胞角蛋白丢失,其机制可能与组织蛋白酶D的表达增强有关.

  • 甲醛诱导获得性过敏体质致哮喘发病机理研究

    作者:乔永康;严彦;杨继文;鲁志松;杨旭

    甲醛可介导多种毒性效应,特别是甲醛诱导型哮喘.传统观点认为,甲醛是一种半抗原,可以与血浆清蛋白或皮肤角蛋白形成完全抗原,通过Ⅰ型超敏反应诱发哮喘.但是有关的研究指出,在甲醛所致哮喘的病例中,只有部分的个体可以在体内检出甲醛特异性IgE(FA-IgE),多数个体体内没有发现FAIgE,提示甲醛诱导型哮喘有其不同于传统理论的发病机理.

  • 联合检测AKA、RF及CCP抗体在类风湿诊断中的应用

    作者:刘淑敏

    类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是自身免疫性疾病,可导致关节畸形和运动功能丧失,因此,早期诊断具有重大意义.目前,RA的诊断主要依靠临床表现、自身抗体及X线检查,但不典型、早期RA常被误诊或漏诊.我们联合检测角蛋白(AKA)抗体、类风湿因子(RF)及环瓜氨酸肽(CCP)抗体,有助于提高RA的早期诊断.

  • 链替换技术提高抗角蛋白人Fab抗体的亲和力

    作者:王刚;刘玉峰;王琰;化冰;乔媛媛

    目的通过链替换技术对一株人源性抗角蛋白Fab单抗进行体外亲和力成熟。方法分离、扩增多样性人免疫球蛋白轻链基因和IgG/IgM重链Fd段基因,分别构建轻链库和重链库。先以原始克隆的重链与轻链库随机搭配进行轻链替换,对形成的换链库采用解离速率筛选法(off-rate selection)选取亲和力提高的克隆;然后再将获得的轻链基因与重链库基因重组进行重链替换,筛选亲和力进一步提高的克隆并进行亲和力测定、可变区基因序列分析等一系列鉴定。结果替换轻链后所获抗体的亲和力提高到原来的10倍;替换重链后亲和力进一步提高达到7.9×1010/mol/L,是原始克隆的近23倍。结论链替换技术是提高抗体库中所获Fab抗体亲和力的有效手段。

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