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益气、活血、益气活血类中药复方对S180荷瘤小鼠免疫抑瘤作用的比较研究
目的:比较益气、活血、益气活血类中药复方对S180荷瘤小鼠免疫抑瘤作用.方法:本研究以S180荷瘤小鼠为实验对象,对补气的四君子汤、活血的桃红四物汤、益气活血的加味八珍汤对免疫功能及抑瘤作用的影响做对比研究.结果:荷瘤对照组的NK活性、IL-2分泌水平及腹腔巨噬细胞吞噬能力均明显低于正常对照组,经灌胃中药2周后,益气组、活血组、益气活血组的NK活性、IL-2分泌水平及腹腔巨噬细胞吞噬能力均接近或高于正常对照组.以加味八珍汤治疗组的效果好.且加味八珍汤组的抑瘤率高达45.9%.结论:在肿瘤的治疗中,将益气活血类方药联合应用的作用强于单纯的益气组和活血组.
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加味八珍汤对S180荷瘤小鼠的免疫抑瘤作用
目的:研究加味八珍汤对S180荷瘤小鼠的免疫抑制作用.方法:以S180荷瘤小鼠为模型,系统地观察加味八珍汤对瘤重和脾细胞免疫功能的影响.结果:加味八珍汤对S180荷瘤小鼠的平均抑瘤率高达45.9%,且剂量依赖性地抑制瘤重,明显促进NK活性和IL-2分泌,增强腹腔巨噬细胞吞噬能力.结论:加味八珍汤增强荷瘤小鼠细胞免疫功能是其抑制肿瘤效应的机制.
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蝎皮蛋白质组分的提取分离及体外活性成分筛选
目的:为了证明蝎皮对免疫功能的影响并探讨蝎皮中含有的活性成分,通过提取分离蝎皮中的水溶蛋白质和角蛋白质组分,经过体外药理活性筛选,观察其对细胞或体液免疫系统的影响,以期获得具有生物活性的蛋白质组分.方法:采用水提与盐析法获得水溶性总蛋白(ST1),还原法获得总角蛋白(ST2),通过Sephadex G-50凝胶色谱对水溶总蛋白和总角蛋白进行分离,并对获得的各种蛋白组分进行了体外药理筛选.结果:发现蝎皮的蛋白质组分在体外药理实验中显示对T/B淋巴细胞转化具有显著促进作用,但对NK活性无明显作用.结论:蝎皮蛋白提取组分具有一定的免疫调节生物活性,研究结果对蛋白质药物开发提供了基础数据.
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牛膝多糖对小鼠免疫功能影响的研究
目的:探讨牛膝多糖(ABP)对正常及免疫低下小鼠免疫功能的影响.方法:ABP经腹腔注射给药后,测定各组小鼠外周血中NK细胞以及肿瘤坏死因子(TNF)活性的变化.结果:ABP 60 mg/(kg@d)10 d能显著提高免疫低下小鼠NK细胞和小鼠外周血中TNF的活性,还能促进正常小鼠外周血中YNK细胞及TNF活性的增强.结论:ABP是一种免疫调节剂,能提高正常及免疫低下小鼠的免疫功能.
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正海复方煎剂对小鼠NK细胞杀伤活性的调节作用
目的研究正海复方煎剂对免疫低下小鼠NK细胞杀伤活性的调节作用，为其开发应用提供实验依据。方法制备荷S180移植肿瘤模型和环磷酰胺制备免疫低下模型，用阳性对照药云芝肝泰和不同剂量正海复方煎剂灌胃进行免疫治疗，采用LDH释放法检测小鼠NK细胞杀伤活性。结果正海复方煎剂500%和250%剂量治疗荷瘤小鼠后，其NK活性分别为23.55%±4.17%、和22.66%±4.52%，接近于阳性对照组的23.98%±4.02%，显著高于荷瘤对照组的16.31%±5.29%。500%正海复方煎剂治疗免疫低下小鼠后，其NK活性为26.01%±6.71%，接近于阳性对照组的25.94%±4.89%，显著高于免疫低下对照组的17.60%±6.62%，并均达正常鼠水平。结论正海复方煎剂具有提高免疫低下小鼠NK活性的免疫调节作用。
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戴氏虫草胞外水溶性多糖在体外对细胞免疫及细胞因子的影响
目的研究虫草属新种戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖在体外对人扁桃体淋巴细胞和水鼠脾细胞免疫功能的影响.方法采用3H-TdR 掺入法测定淋巴细胞增殖,乳酸脱氢酶法(LDH)测定NK细胞活性,L929细胞杀伤法测定肿瘤坏死因子(TNF),MTT法测定白细胞介素-2(IL-2)活性.结果戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖不仅能够促进人扁桃体及小鼠脾活化T细胞的增殖,而且能恢复环磷酰胺抑制免疫小鼠脾活化T细胞的增殖.它能增高小鼠脾细胞NK活性及分泌IL-2,也能增进人扁桃体活化T细胞分泌TNF β.结论戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖是具有增强细胞免疫功能的生物免疫反应调节剂.
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IL-2对脐血有核细胞增殖与NK活性的影响及意义
目的 探讨IL-2对脐血有核细胞(Cord Blood Nucleus Cells,CBNC)体外增殖及NK活性的影响.方法 采用3H-TdR掺入法测定CBNC对IL-2的反应性及IL-2诱导后的NK细胞活性变化.结果 IL-2诱导后CBNC增殖能力和NK活性均增强(P<0.001,P<0.05,与对照组相比).结论 IL-2可以增强CBNC的体外扩增能力和NK细胞杀伤活性.
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小鼠白细胞介素21原核表达载体的构建及活性鉴定
目的:白细胞介素21是近年发现的由T细胞分泌的细胞因子,具有广泛的免疫调节作用和抗肿瘤活性.为进一步观察其体内外免疫作用,拟构建小鼠白细胞介素21(mIL-21)原核表达载体,并对其表达的活性进行鉴定.方法:实验于2006-03/2007-05在南京医科大学附属南京儿童医院儿科研究所和东南大学基础医学院病原生物学与免疫学系完成.实验材料:实验中所用BALB/c小鼠由扬州大学比较医学中心提供,六七周龄,雌雄兼备,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.pcDNA3.1/mIL-21质粒由东南大学基础医学院免疫学实验室提供.实验方法:以pcDNA3.1/mIL-21质粒为模板,PCR获得长度为369 bp的mIL-21基因片段.将其定向克隆至pET-28a(+)质粒中,采用PCR酶切和测序等方法对重组质粒进行鉴定.并对重组蛋白进行IPTG诱导表达、Western blot及体外生物学活性检测.结果:构建了重组原核表达载体pET-28a(+)/mIL-21,经鉴定后证实重组质粒构建正确.SDS-PAGE显示含重组质粒的诱导菌在Mr16 000位置出现一蛋白条带.Western blot结果显示该蛋白具有良好的免疫原性.体外生物学功能检测显示该重组蛋白能够增强小鼠脾细胞中的NK细胞杀伤活性.结论:成功构建了重组原核表达载体pET-28a(+)/mIL-21,表达的mIL-21具有良好的免疫原性.
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双歧杆菌总DNA对小鼠IL-2、NK活性影响的研究
目的从双歧杆菌、大肠杆菌提取DNA,用DNA免疫小鼠,观察免疫功能的变化,探讨双歧杆菌DNA对小鼠免疫功能的影响,并作对比研究.方法肌肉注射提取的双歧杆菌DNA、大肠杆菌DNA,颈椎处死后,检测脾细胞的免疫功能,同时提取IEL细胞与DNA共孵育,检测它对IEL细胞的激活情况及细胞因子产生情况,以自然杀伤细胞(NK)活性,白细胞介素2(IL-2)产生能力为指标,测定小鼠上述各项指标变化.结果双歧杆菌DNA、大肠杆菌DNA肌肉注射后,小鼠以上两项指标与相应对照组相比较均明显提高(P<0.05).双歧杆菌DNA提高小鼠NK活性与IL-2水平程度大于大肠杆菌DNA的作用(P<0.01).结论双歧杆菌DNA可快速激活NK活性,提高体内IL-2水平.其效能优于大肠杆菌DNA.
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周围神经损伤后免疫系统变化的动物实验观察
目的:检测周围神经损伤后免疫系统的变化.方法:用MTT法检测了坐骨神经损伤1,2,5,7和14 d的大鼠脾细胞NK活性及淋巴细胞转化功能,并用PEG沉淀法检测了大鼠血清中循环免疫复合物(CIC)的含量.结果:坐骨神经损伤后7和14 d大鼠脾细胞的自发转化率较对照组(同样手术应激但无坐骨神经损伤)略有增高;循环免疫复合物的含量术后7 d明显增高,14 d时增加明显;而NK活性则无明显变化,后期变化如何尚待进一步研究.结论:周围神经损伤后,机体发生了免疫变化.
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低剂量辐射对淋巴细胞肿瘤杀伤活性的影响
应用单克隆抗体铺皿法,从人外周血中分离出CD4,CD8,CD19(B)和CD57(NK)4种淋巴细胞亚群,观察了各亚群细胞的肿瘤杀伤活性和相互调节以及小剂量辐射对CD57细胞功能和亚群间调节的影响.结果发现,以上4种淋巴细胞亚群均具有肿瘤杀伤活性,其中以CD57细胞的杀伤活性强.CD4和CD57细胞混合培养后的总NK活性超过两者之和,而CD8,CD19分别与CD57细胞混合培养后,总NK活性与两者单独培养之和相比无显著性差异.50cGy和80cGy的r线照射可使CD57细胞的功能增强.照射CD4或CD57细胞后两者混合培养的总NK活性比未受照的混合培养组显著升高.而CD8或CD19分别与CD57混合培养则无此现象.结果表明小剂量辐射可增强CD4和CD57细胞间的协同作用.外周血NK细胞受到多种亚群细胞的影响,外周血NK活性反映了多种细胞自然杀伤活性的总和.
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CD3AK细胞对烧伤患者免疫功能的影响
通过检测患者淋巴细胞转化功能及NK细胞活性,调查CD3AK细胞对烧伤患者免疫功能的影响.结果发现:CD3AK细胞使T细胞转化为母细胞能力增强,NK细胞活性升高,表明CD3AK细胞能改善烧伤患者免疫功能低下的状态,促进细胞免疫功能的恢复.
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慢性肾脏疾病患者外周血T细胞亚群、NK活性、IL-2的变化
目的探讨慢性肾脏疾病患者外周血T细胞亚群(CD4、CD8、CD4/CD8)、自然杀伤细胞(NK)活性及白细胞介素-2(IL-2)的变化.方法正常对照组(A组)23例,慢性肾脏疾病患者分二组;肾功能正常组(B组)44例、肾功能异常纽(C组)31例.所有病例均抽取外周静脉血,用链菌素亲生物素-过氧化酶连接(S.P)法测定T细胞亚群、NK活性,用双抗体夹心ABC-ELISA法测定IL-2,用常规生化等方法测定血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr),血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(A1)以及补体C3、免疫球蛋白(IgG),用双缩脲法测定24h尿蛋白(Pr/24 h)等指标,用SPSS 10.0进行统计学分析.结果B组Pr/24 h、Scr(P＜0.01)、CD8、BUN(P＜0.05)高于A组;TP、A1、IgG(P＜0.01)、CD4/CD8、C3(P＜0.05)低于A组;CD4,NK、IL-2虽低于A组,但二组间无明显差异(P＞0.05).C组BUN、Scr(P＜0.01)、CD8、Pr/24h(P＜0.05)高于A组,CD4/CDD8(P＜0.01)、IgG(P＜0.05)明显低于A组;CD4、C3、NK、IL-2虽低于A组,但二组间无明显差异(P＞0.05).慢性肾脏疾病组CD4与CD4/CD8(P＜0.01)呈明显正相关,与BUN、Scr(P＜0.05)呈负相关.CD8与CD4/CD8(P＜0.01)、IL-2、TP、A1(P＜0.05)呈负相关,与Pr/24 h呈正相关(P＜0.01).CD4/CD8与CD4(P＜0.01)呈正相关,与CD8、Pr/24 h(P＜0.01)、BUN、Scr(P＜0.05)呈负相关.IL-2与IgG、TP(P＜0.01)、NK、A1(P＜0.05)呈正相关,与CD8(P＜0.05)呈负相关.BUN、Scr与CD4、CD4/CD8、C3呈负相关.结论慢性肾脏疾病患者存在T细胞功能紊乱,体内NK活性、IL-2含量与机体免疫力相关,机体免疫状态与尿蛋白、IgG及C3补体的丢失相关,亦与肾功能改变有一定的相关关系.因此,慢性肾脏疾病患者免疫紊乱的问题,我们期望在临床上通过使用某些免疫调节药物使其得到缓解或纠正,使患者获得良好的预后.
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川芎嗪对S180荷瘤小鼠的免疫抑瘤作用
以S180荷瘤BALB/C小鼠为模型,较系统地研究了川芎嗪(TTMP)对瘤重和脾细胞免疫功能的影响.结果表明,TTMP在20mg/Kg·d)腹腔注射剂量下,给药8天能显著抑制瘤重,活化T细胞增殖能力,明显促进NK活性和IL-2分泌水平,提示TTMP抑瘤作用与增强机体细胞免疫功能有关.
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鼻康胶囊对免疫功能的影响
目的:了解和评价鼻康胶囊对免疫功能的影响.方法:用碳粒廓清法观察小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能,用鸡红细胞作免疫原观察小鼠血清中溶血素抗体形成数量,用DNCB作过敏原观察小鼠超敏反应,用细胞培养法观察大鼠淋巴细胞转化率、NK活性.结果:鼻康胶囊能明显提高胸腺指数和脾脏指数,显著增强小鼠网状内皮系统单核巨细胞的吞噬功能,促进小鼠溶血素抗体生成,明显抑制DNCB所致的小鼠DTH反应,提高淋巴细胞转化率,促进NK活性.结论:鼻康胶囊治疗急慢性鼻炎、过敏性鼻炎与增强非特异免疫和体液免疫功能、抑制细胞免疫有关,免疫作用机理与改善淋巴细胞转化率和提高NK活性有关.
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rIFNα-2b对小鼠脾脏NK细胞活性的影响
目的研究重组干扰素α-2b(rIFNα-2b)对小鼠脾脏NK细胞杀伤活性的影响,了解该干扰素的生物学活性.方法采用皮下给药的体内实验及3H-TdR掺入抑制法检测小鼠脾脏NK细胞活性.结果 rIFNα-2b能显著提高小鼠脾脏NK细胞杀伤活性,且呈剂量依赖性,其高、中、低剂量各组的NK活性分别为65.19±17.56、44.19±14.30、35.46±17.49,与空白对照及阴性对照均有显著性差异.结论 rIFNα-2b能提高NK细胞活性,并有剂量依赖性.
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姜黄煎剂对小鼠NK细胞杀伤活性的调节作用
目的研究姜黄对免疫低下小鼠NK细胞杀伤活性的调节作用.方法制备荷S180移植肿瘤模型和环磷酰胺制备免疫低下模型,用阳性对照药云芝肝泰和姜黄煎剂灌胃进行免疫治疗.采用LDH释放法检测小鼠NK细胞杀伤活性.结果不同浓度姜黄煎剂治疗荷瘤小鼠后,其NK活性分别为23.53%±4.15%和20.66%±4.32%,接近于阳性对照组的23.98%±4.02%, 显著高于荷瘤对照组的16.32%±5.1%.高浓度姜黄煎剂治疗免疫低下小鼠后, 其NK活性为25.09%±6.43%,接近阳性对照组的25.94%±4.89%,显著高于免疫低下对照组17.60%±6.61%,并均达到正常小鼠水平.结论姜黄具有提高免疫低下小鼠NK活性的免疫调节作用.
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慢性肺心病患者红细胞免疫功能及 NK细胞活性的检测
肺心病为我国较常见的一种心脏病，平均患病率达 0.4％。本病除心、肺和血液动力学出现变化外，其他脏器也有损害，并与机体的免疫调节功能失调有着密切的关系。为此，我们对 87例慢性肺原性心脏病急性发作患者的红细胞免疫功能及 NK细胞的活性进行了检测。
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抗氧化剂对脐血自然杀伤细胞活性及化学发光的影响
目的:探讨褪黑素,亚硒酸钠,N-乙酰半胱氨酸(NAC)及槲皮素对脐血自然杀伤细胞(NK)活性及化学发光的影响.方法:采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)进行NK活性测定;化学发光法进行NK细胞杀伤靶细胞过程中发光强度(CL)的测定.结果:褪黑素1～100μmol/L组,亚硒酸钠0.43～6.96μmol/L组可明显增强脐血单个核细胞对K562细胞的杀伤作用;褪黑素10μmoL/L组,亚硒酸钠0.87～3.48μmol/L组,槲皮素6.25μmol/L组可明显增强脐血单个核细胞杀伤K562细胞过程中化学CL.褪黑素,亚硒酸钠,NAC及槲皮素等4种抗氧化剂均使化学发光时间延迟,褪黑素组、槲皮素组出现明显的双峰.结论:抗氧化剂脐脐血NK细胞具有免疫调控作用,可能与新生儿出生时存在的氧应激状态有关.
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恶性肿瘤患者自体CIK细胞免疫治疗后生物学活性测定
目的探讨恶性肿瘤患者细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)治疗前后单个核细胞(PBMC)的NK活性.方法 cs-3000采集患者外周血,用淋巴细胞分离液分离患者末梢血单个核细胞(PBMC),用含有IFN-γ、IL-2和CD3单抗的培养液进行培养扩增,于培养的第十一天和第十二天回输给病人,并检测CIK细胞治疗前后患者的外周血单个核细胞的NK活性.比较治疗前后的疗效参数.结果肿瘤患者输注CIK细胞一疗程后,其PBMC的NK杀伤活性由61%升高到83%,平均升高22%(P＜0.01).结论用自身CIK细胞过继性回输治疗能明显提高肿瘤患者PBMC杀伤癌细胞的生物活性.
关键词： 肿瘤 过继性 免疫治疗 细胞因子诱导的杀伤细胞 NK活性
