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体外受精胚胎发育潜能的形态学评估
随着体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术的不断进步,如卵巢刺激方案和胚胎培养技术的革新,已促使妊娠率大幅度提高,而伴随的多胎妊娠率也升高.多胎妊娠危及母婴的安全,有悖于优生原则.减少移植胚胎的数目,推行单胚胎移植是降低多胎出生为有效的措施,但困扰胚胎学家的是如何选择具有发育潜能的胚胎用于移植.目前,胚胎体外发育潜能的评估方法仍主要依据胚胎形态学的评分,其他选择方法,如对胚胎的蛋白组学和代谢组学等方法的研究还很难被广泛地应用,仍无法代替简便、快捷、又不失效率的形态学评估方法.受配子/胚胎自身因素以及体外操作、培养环境的影响,胚胎在体外发育过程中常伴随出现一些形态学上的异常现象,而这些形态学特征往往与其发育潜能相关,但形态学并不能完全准确地反应配子/胚胎的发育潜能,尤其是单一时间点的形态学评分,因此综合考虑配子至胚胎各个阶段的形态学评分将有助于选择较高发育潜能的胚胎用于移植.
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玉米赤霉烯酮对小鼠胚胎体外发育的影响
目的 研究玉米赤霉烯酮(F-2毒素)对小鼠胚胎体外发育的影响.方法 将(8只/批)6～8周龄清洁级昆明妊娠4d小鼠处死,挑选形态良好的8-细胞(8-细胞期是早期胚胎发育过程中便于观察及深入开展胚胎在发育生物学、胚胎移植、转基因动物等领域研究工作的佳阶段).胚胎,采用微滴培养法,将形态良好的8-细胞胚胎(10 ～ 15个/孔)移入0(溶剂对照)、10-8、10-6和10-4 mol/L的F-2毒素培养液(含5％人输卵管液+10％胎牛血清)中,记录囊胚形成数及囊胚脱带数,并计算囊胚形成率和囊胚脱带率.每个剂量设5个平行.结果 与溶剂对照组比较,F-2毒素浓度在10-4和10-6 mol/L时囊胚形成率较低,差异均有统计学意义(P ＜0.05)；F-2毒素浓度在10-8、10-6和10-4 mol/L时,囊胚脱带率较低,差异均有统计学意义(P＜0.05).囊胚形成率和囊胚脱带率均随着F-2毒素浓度的升高呈下降趋势.结论 F-2毒素在小鼠胚胎发育过程中具有毒性作用.
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固肾安胎中药对小鼠早期胚胎体外发育的影响
固肾安胎中药在助孕保胎方面有着良好的临床疗效,其中尤以寿胎丸为经典名方.本研究旨在通过采用血清药理学及胚胎体外培养的实验方法,动态观察配有各种含药血清的培养基中早期胚胎各期(2CE至囊胚)的发育率,研究单味固肾安胎中药及寿胎丸对早期胚胎发育的作用,以探讨固肾安胎中药对早期胚胎发育的影响及作用机制.
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小鼠体外受精及其胚胎体外培养的比较研究
目的 通过比较不同品系小鼠体外受精情况以及不同培养液对C57BL/6J小鼠胚胎体外培养效果的实验,进一步完善小鼠体外受精和早期胚胎体外培养体系.方法 对C57BL/6J、DBA/2、FVB/NJ、BALB/c、KM、ICR及BARR Ⅱ小鼠进行超排和体外受精,并对C57BL/6J小鼠体外受精后的2-细胞胚胎用HTF、CZB、KSOM、M16、HECM五种培养液在相同条件下进行体外培养到囊胚,计算4-细胞～囊胚的发育率.结果 各品系小鼠平均排卵数为13.0～38.7个(P＜0.01),体外受精率为70.2%～92.8%(P＜0.05).不同培养液至4-细胞的发育率为60.3%～95.8%,其中KSOM的4-细胞发育率为95.8%,适合2-细胞向4-细胞的发育.8-细胞发育率为52.8%～91.1%,桑椹胚发育率为40.6%～87.5%,囊胚发育率为5.1%～75.4%,各阶段胚胎发育率均差异显著.其中适合于金黄仓鼠桑椹胚、囊胚发育的HECM-2并不支持C57BL/6J囊胚的发育,其囊胚发育率只有5.1%,CZB适合其囊胚的发育.结论 遗传背景是影响小鼠超排及体外受精效果的主要因素之一.葡萄糖的存在不利于克服2-细胞发育阻断,胚胎在8-细胞期以前,主要能源物质不是葡萄糖,直到桑椹胚后期,葡萄糖才是主要的能量物质.磷酸盐可引起胚胎发育阻断.氨基酸和EDTA有利于克服胚胎发育阻滞.
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精子核蛋白组型转换对胚胎体外发育的影响
目的 探讨精子核蛋白组型转换与精子DNA损伤、精子形态以及胚胎发育质量的相关性,评价其在辅助生殖中的诊断价值.方法 检测437例接受体外受精-胚胎移植治疗的不育男性精子核蛋白组型转换率,分析核蛋白组型转换率与精子异常形态率、精子DNA损伤率、受精率、正常受精率、卵裂率、可移植胚胎率、受精第3天(D3)优质胚胎率、囊胚形成率以及优质囊胚率之间的相关性.结果 核蛋白组型转换正常A组(异常率≤30％,135例)与核蛋白组型转换异常B组(30％＜异常率＜60％,170例)相比,精子正常形态率、精子DNA损伤、受精率、正常受精率、卵裂率、可移植胚胎率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚率之间差异无统计学意义(P＞o.05);核蛋白组型转换异常C组(异常率≥60％,132例)精子异常形态率、精子DNA损伤、正常受精率、可移植胚胎率、D3优质胚胎率、优质囊胚率与A组相比差异具有统计学意义(P＜0.01),而受精率、卵裂率和囊胚形成率同A组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 精子核蛋白组型转换异常可能与精子DNA损伤、精子形态以及胚胎发育密切相关.在辅助生殖技术治疗前,对男性的精子核蛋白组转换进行评估有临床价值.
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GnRH类似物促进人早期胚胎体外发育能力的实验研究
目的 研究促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对人类早期胚胎体外发育能力的影响.方法 IVF的受精卵进行体外培养.实验一的培养基中,GnRH类似物的浓度分别是0,0.1,0.2,0.5,0.8和1.0μg/mL;实验二的培养基中都含有0.5μg/mL的GnRH类似物,而GnRH拮抗剂的浓度分别为0,0.2,0.4,0.8,1.0和1.2μg/mL结果培养基中的GnRH类似物浓度在0.5 μg/mL及以上时,实验组的桑椹胚,囊胚生成率显著高于对照组(P<0.05),而且,实验组的8-细胞期胚胎形成率也同时显著高于对照组(P<0.05).培养基中含0.8μg/mL及以上浓度的GnRH拮抗剂时,实验组的桑椹胚,囊胚生成率显著低于对照组(P<0.05),而且8-细胞期胚胎形成率也显著降低(P<0.05).结论 GnRH类似物对体外培养的人早期胚胎有促进分裂的作用.这种促进早期胚胎发育的效果在8-细胞期就能显现出来.GnRH拮抗剂能抵消GnRH类似物对早期胚胎发育的促进效果.
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人晚期囊胚体外培养中的动态观察
近几年随着可用于人体外受精-胚胎移植(IⅥ-ET)培养液的不断改进,使人受精卵发育至囊胚期移植成为可能.囊胚期移植不仅减少了移植胚胎的数目,降低了多胎妊娠率,提高了临床妊娠率,也使人类胚胎体外发育的形态学研究不断深入[1].但是关于在体外培养条件下,人晚期囊胚自透明带内孵出后的动态描述,尚未见报道.本文将近来观察到的1例患者的卵母细胞在体外培养经过体外成熟、受精、卵裂以及发育至晚期囊胚,共经历176 h的形态学变化报告如下.
