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中华微生物学和免疫学

中华微生物学和免疫学杂志

Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 中国科学技术协会
  • 主办单位: 中华医学会
  • 影响因子: 0.59
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 0254-5101
  • 国内刊号: 11-2309/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 北京市经济技术开发区经海二路38号
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1981
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中华微生物学和免疫学杂志编辑委员会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 沈心亮
  • 类 别: 预防医学与卫生学
期刊荣誉:
  • 土拨鼠α干扰素新亚型基因的克隆及生物学活性分析

    作者:卢银平;徐飏;王宝菊;董继华;陆蒙吉;杨东亮

    目的克隆土拨鼠α干扰素(IFN-α)新亚型基因,用于土拨鼠HBV模型探索IFN-α治疗慢性乙型肝炎策略;调查慢性土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus,WHV)感染的土拨鼠外周血单个核细胞(PBMC)干扰素功能状况.方法poly(I-C)体外刺激正常和慢性WHV感染的土拨鼠PBMC,分析其表达的干扰素生物学活性.利用分子克隆技术对土拨鼠IFN-α家族基因进行克隆,并对所克隆的系列基因进行测序、分型并进行真核表达后检测表达产物生物学活性.结果poly(I-C)刺激体外培养的土拨鼠PBMC后,慢性感染土拨鼠PBMC分泌的干扰素的活性显著差异低于正常土拨鼠(P<0.01).获得36个土拨鼠IFN-α基因序列克隆,测序分析后,发现有10个克隆是新亚型基因,其中8个为功能基因亚型,2个为假基因亚型,病毒保护试验证明只有功能基因亚型具有生物学活性.结论慢性WHV感染的土拨鼠细胞免疫功能受损.新的土拨鼠IFN-α亚型基因的克隆为在土拨鼠HBV动物模型上进行干扰素基因治疗和研究干扰素治疗策略提供了新的材料.

  • 酒精性肝病大鼠肝组织Toll样受体4及血清细胞因子的变化

    作者:周俊英;姚树坤;甄真;赵彩彦

    本实验应用乙醇灌胃建立酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)大鼠模型,动态观察血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量及Toll样受体4(TLR4)在肝组织中的表达状况,结合肝脏病理学指标探讨免疫机制在酒精性肝病发病机理中的作用.

  • CRP诱导单核细胞表达CD11b和CCR2并影响脂蛋白对CD11b和CCR2表达的观察

    作者:车京津;黄体钢;周丽娟

    目的探讨C反应蛋白(CRP)对单核细胞表达CC趋化因子受体2(CCR2)和CD11b的作用以及与脂蛋白之间的相互作用.方法以不同浓度的CRP和/或脂蛋白处理THP-1单核细胞,应用流式细胞仪检测细胞表面CCR2、CD11b蛋白的表达,并应用半定量RT-PCR方法检测CCR2的mRNA表达,同时检测处理后的单核细胞与内皮细胞的黏附率以及培养液中NO含量.结果CRP以剂量依赖性方式增加单核细胞表达CCR2和CD11b,RT-PCR结果显示CRP在转录水平上诱导CCR2的表达.不同脂蛋白对CCR2和CD11b的表达作用不同:氧化的低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导CCR2和CD11b的表达(P<0.01),而高密度脂蛋白(HDL)抑制此二者的表达(P<0.01),天然低密度脂蛋白(LDL)则对其无显著影响(P<0.01).CRP抑制OX-LDL所诱导的CCR2(115.7±6.40比99.0±3.65,P<0.01)和CD11b(121.3±4.79比98.5±4.90,P<0.01)的表达增加;但与LDL显著地协同上调CCR2(LDL 50μg/ml比LDL 50μg/ml+CRP 10μg/ml;CRP 10μg/ml比LDL 50μg/ml+CRP 10μg/ml,均P<0.01)和CD11b(LDL 50 μg/ml比LDL 50μg/ml+CRP 10μg/ml;CRP 10μg/ml比LDL 50μg/ml+CRP 10μg/ml,均P<0.01)的表达;CRP削弱HDL对CCR2和CD11b表达的抑制作用.培养液中的NO含量与CCR2和CD11b密切相关.结论CRP诱导单核细胞表达CCR2和CD11b,并调节脂蛋白对CCR2和CD11b的作用;NO可能是此过程中的信使之一.

  • TLR3参与poly(I-C)所致流产的作用

    作者:林羿;曾耀英;曾山;冯铮;狄静芳

    目的研究Toll样受体3(toll-like receptor 3,TLR3)在poly(I-C)诱发小鼠流产中的潜在作用.方法多聚次黄苷酸-胞苷酸[polyinosinic-polycytidylic acid,poly(I-C)]是一种双链RNA,腹腔注射时能够诱发小鼠流产.在预先用单抗阻断或不阻断TLR3情况下,注射poly(I-C)建立小鼠诱发性流产模型,应用流式细胞术分别检测CD45+DX5+和DX5+CD69+细胞百分率.结果不用抗TLR3抗体预处理,单用poly(I-C)刺激同种异基因交配模型BALB/c×C57BL/6,可使CD45+DX5+和DX5+CD69+细胞百分率均显著升高.但是,应用抗TLR3抗体预处理的雌鼠,用poly(I-C)刺激时上述百分率不改变.与此相应,poly(I-C)刺激可显著增高胚胎吸收率,而抗TLR3抗体预处理可消除这种作用.结论poly(I-C)与TLR3结合可能对母-胎界面NK细胞活化至关重要,并可促进小鼠胚胎吸收.

  • 诱导细胞凋亡的抗hDR5单抗的研究

    作者:刘广超;马远方;李淑莲;白慧玲;张军;卢峰;杜耀武;赵粤萍;都景芳

    目的研制能诱导肿瘤细胞凋亡的抗人DR5单克隆抗体(McAb).方法以可溶性人死亡受体(death receptor,DR)5胞外段免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备抗人DR5的McAb;MTT方法筛选分泌有细胞毒活性McAb的杂交瘤细胞;亲和层析方法纯化McAb;夹心ELISA法测定McAb亚型;Western blot和斑点ELISA法检测McAb的抗原表位类型;间接ELISA法检测McAb的特异性;流式细胞仪检测FITC-annexinV/PI双色标记的Jurkat细胞的凋亡率;DNA琼脂糖凝胶电泳测定凋亡细胞的DNA片段化.结果获得1株杂交瘤细胞,其分泌的McAb命名为mDRA-6,为IgG1;其抗原表位类型为构象表位;其特异性识别hDR5,与hFas、hDR4等无交叉反应.mDRA-6对Jurkat细胞具有细胞毒作用;经McAb mDRA-6处理后,Jurkat细胞膜表面高表达丝氨酸磷脂,并导致Jurkat细胞中的DNA片段化.结论mDRA-6是一个具有诱导细胞凋亡活性的新的抗人DR5功能性抗体,在以TRAIL/DR5系统进行肿瘤治疗和探讨DR5的功能结构域研究方面具有广泛应用前景.

  • 一株携带三种β内酰胺酶基因铜绿假单胞菌的发现

    作者:王继东;王春新;糜祖煌;周丽珍

    近年来铜绿假单胞菌(Pa)耐药率不断增加,已经出现对三代头孢菌素和亚胺培南耐受的Pa菌,给临床治疗带来极大困难.我们从一例脑外伤合并严重肺部感染患者的气管分泌物中分离出1株多重耐药Pa菌,并对其进行了12种β内酰胺类耐药相关基因的检测与分析.

  • 甲型副伤寒杆菌鞭毛蛋白H1a基因原核表达系统构建及其表达产物的免疫原性和保护作用

    作者:阮萍;林晓骥;李晶;周晓辉;严杰

    目的构建甲型副伤寒杆菌(Salmonella paratyphi A)H1a基因原核表达系统,确定表达产物rH1a免疫原性和保护作用,检测甲型副伤寒杆菌临床菌株H1 a基因携带和表达情况.方法采用高保真PCR从甲型副伤寒杆菌临床株JH01中扩增H1a基因,T-A克隆后测序,构建H1a基因原核表达系统pET32a-H1a-E.coli BL21DE3.采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检查rH1a表达情况,Ni-NTA亲和层析法收集rH1a.采用Western blot鉴定其免疫反应性和免疫原性.建立PCR和ELISA检测98株甲型副伤寒杆菌临床菌株H1a基因携带和表达频率.观察rH1a对甲型副伤寒杆菌50001株感染小鼠的免疫保护作用.结果与报道的相关序列比较,所克隆的H1a基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为99.59%.rH1a表达量为细菌总蛋白的60%左右.甲型副伤寒杆菌全菌抗血清能识别rH1a并与之结合.rH1a免疫家兔可产生抗体.100%(98/98)甲型副伤寒杆菌临床菌株均含有H1a基因并表达H1a.500μgrH1a灌喂或皮下注射免疫小鼠受甲型副伤寒杆菌50001株攻击后的存活率均为50.0%,若加入5μgrLTB,存活率分别上升至75.0%和66.7%.结论本研究成功地从甲型副伤寒杆菌临床菌株中构建了H1a基因高效原核表达系统.rH1a有良好的免疫原性和一定的免疫保护作用.甲型副伤寒杆菌临床菌株广泛存在H1a基因并高频率表达.

  • 临床分离铜绿假单胞菌β-内酰胺类耐药相关基因的研究

    作者:王春新;祁国阳;糜祖煌;陈国千

    目的调查临床分离铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)β-内酰胺类耐药相关基因的流行状况.方法采用VITEK-32全自动微生物系统对26株临床分离的Pa进行抗生素敏感试验,PCR方法检测11种β-内酰胺酶和外膜蛋白oprD2编码基因.结果26株PaTEM、IMP、OXA的阳性率分别为42.3%、30.8%、3.8%,oprD2基因缺失高达92.3%,而SHV、CTX-M-1、PER、VEB、GES、VIM、DHA、MIR基因均阴性.结论我院临床分离Pa对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因为产TEM、IMP型β-内酰胺酶和缺失外膜蛋白oprD2.

  • 酪酸梭菌(CGMCC No.0313-1)对小鼠免疫功能的影响

    作者:彭珊瑛;刘洋;王文杰;万阜昌;崔云龙;李雄彪

    酪酸梭菌(CGMCC No.0313-1)是人体肠道内暂住的细菌,能与双歧杆菌、乳酸杆菌等肠内有益菌共生,并促进其增殖和发育,抑制有害菌和腐败菌的生长和增殖,改善肠道微环境.目前,酪酸梭菌对免疫系统功能的影响研究较少.本实验用氢化可的松造成免疫功能低下小鼠模型,观察了酪酸梭菌对免疫功能低下小鼠非特异性和特异性免疫功能的影响.

  • 乳酸杆菌小分子抗菌肽产生菌的筛选及鉴定

    作者:雷虹;齐桂云;李秀凉;平文祥

    乳酸链菌肽(Nisin)是由乳酸链球菌通过其核糖体合成产生的小分子抗菌肽,具有抑制细胞生长的作用,可用做食品天然防腐剂.其抑菌机制是小肽作用于细菌的细胞膜,在膜上形成离子通道,引起胞内物质的外漏使细菌失活.本文从酸菜汁中分离筛选出的乳酸杆菌HD1.7也能合成小分子抗菌肽,并且抑菌范围广.本研究扩大了小分子抗菌肽高产菌株的选育范围,有一定的实用意义.

  • 金黄色葡萄球菌调节基因mgrA高表达对苯唑西林耐药性的影响

    作者:连建奇;崔龙洙;平松启一

    目的观察金黄色葡萄球菌调节基因mgr高表达对苯唑西林耐药性的影响.方法用PCR方法从金黄色葡萄球菌N315的染色体中扩增包括mgrA基因的片段(717bp),克隆到温敏穿梭载体pYT3的BamHⅠ位点,将所构建的载体pYT641电转化导入受体,同时利用同源重组技术敲除mgrA基因,观察高表达株N315(pYT641)和基因敲除株N315△641对苯唑西林耐药性的变化程度;利用高压液相技术分析mgrA基因高表达和基因敲除对细菌细胞壁交联度的影响,RNA印迹杂交进一步分析mgrA基因对细菌耐药相关基因和细菌毒力调节基因、细菌毒力基因的影响.结果高表达株N315(pYT641)mgrA的表达量明显增加,低抑菌浓度(MIC)测定表明高表达株N315(pYT641)对苯唑西林的敏感性比受体菌N315降低了16倍,MIC从8 mg/L增加到128 mg/L,而基因敲除株N315△641的敏感性比受体菌N315增加了2倍;细菌细胞壁成分分析表明基因敲除株的细菌细胞壁交联度明显降低,提示mgrA基因可能影响细菌细胞壁的合成;RNA印迹分析表明mgrA基因不仅可使sigB和agrA基因高表达,而且影响细菌毒力基因spa和细胞壁合成相关基因pbp4、fmtB的表达.结论mgrA可能是除agrA、sarA、sigB外一个新的影响细菌耐药水平的调节基因.

  • 质粒介导的RNAi技术对截短HCMV IE2基因表达的抑制作用

    作者:高荣保;胡勇;王明丽

    目的应用质粒介导的RNA干扰技术研究siRNA抑制截短HCMV IE2基因的表达的作用.方法以pLL3.7质粒为模板,采用半套式PCR的方法扩增出含U6启动子的siRNA表达片段,连接pMD-T simple vector构建效应质粒表达重组体pMD-T-shRNAR1和pMD-T-shRNAR2.同时采用RT-PCR方法从HCMV AD169株基因组中调取目的截短基因IE2,定向克隆到带有绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因的真核表达载体pEGFP-C1上,构建HCMV AD169株截短IE2基因重组表达质粒pEGFP-C1-IE2;用脂质体共转染效应质粒和靶基因表达重组体至Hep-2细胞中,荧光显微镜下观察效应质粒的RNA干涉作用,并观察RNA干扰的时效和量效改变.结果三组质粒重组体构建成功,克隆到的2个shRNA表达载体对截短IE2基因的表达都有干涉作用.在与靶基因质粒量比为1:1和1:2时,其中pMD-T-shRNAR1 48~72 h间干涉效应为100%,可完全封闭IE2的表达;pMD-T-shRNAR2使IE2处于极低水平表达,48~72 h间干涉效应达到98.4%~99%.结论通过质粒介导的RNAi技术能够有效地抑制HCMV IE2基因的表达,为治疗HCMV感染的药物开发提供了思路.

  • 特异性的VP1-siRNA对CVB3复制抑制作用的研究

    作者:陈杰斌;许从峰;陈瑞珍;虞勇;李丽;杜九中;郭棋;杨英珍;邓晖;李双杰

    目的研究特异性的CVB3-VP1 siRNA对CVB3体外复制的抑制作用的量效关系与时效关系.方法CVB3感染HeLa细胞,利用脂质体介导将CVB3-VP1 siRNA转染HeLa细胞,用RT-PCR法检测CVB3-VP1 RNA水平,免疫荧光检测CVB3-VP1蛋白的表达水平.结果60pmol/L CVB3-VP1 siRNA是抑制CVB3 RNA及VP1表达的佳剂量;在转染后的48 h,siRNA对CVB3-VP1的抑制作用达到佳状态.结论特异性的CVB3-VP1 siRNA对CVB3-VP1蛋白表达水平及CVB3-RNA复制水平呈明显的剂量依赖关系和时效关系,转染后48 h呈现出完全抑制作用.

  • 小发卡RNA抗呼吸道合胞病毒效应的研究

    作者:崔玉霞;周娟;王莉佳;蒋利萍;赵耀;杨锡强

    目的为从基因水平抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的复制,针对RSV的M2-2基因构建小发卡结构状RNA(short hairpin RNA,shRNA)重组质粒,在细胞水平观察shRNA对RSV复制的影响.方法将成功构建的针对RSV M2-2基因的重组质粒pshRNA8260转染HEp-2细胞,利用光镜观察pshRNA8260对RSV致HEp-2细胞病变效应(cytopathogenic effect,CPE)的影响并计算CPE抑制率,空斑形成实验检测RSV滴度变化.结果成功构建了针对人RSV M2-2基因mRNA的pshRNA8260重组质粒,研究发现pshRNA8260能明显改善RSV所致的病变效应,降低RSV在细胞内复制的病毒滴度.结论针对RSV M2-2基因的pshRNA8260重组质粒具有明显的特异性抗RSV效应的作用.

  • 特异siRNA抑制宫颈癌细胞中人乳头状瘤病毒16型E6表达的研究

    作者:栾怡;于修平;赵蔚明;周亚滨;白晓卉

    目的优化HPV-16 E6癌基因特异的U6质粒表达的siRNA,抑制HPV癌基因表达及其对子宫颈癌细胞生长繁殖的影响.方法选择4个分别针对HPV-16E6mRNA外显子和内含子序列为靶序列,合成DNA链,构建表达HPV-16E6短发卡样dsRNA的重组pSilencer1.0-U6载体,导入HPV-16 DNA阳性的宫颈癌细胞株CaSki中,观察该细胞中HPV-16 E6、E7基因表达水平及其蛋白含量的变化,并观察细胞生长被抑制的情况.结果4种HPV-16E6 siRNA均能降低宫颈癌细胞CaSki的生长速率.通过细胞生长曲线观察到HPV-16 E6 shRNA表达质粒导入细胞0-96 h内,可降低细胞生长速度.荧光定量RT-PCR检测HPV-16 E6 siRNA可使宫颈癌细胞株CaSki中HPV-16 E6、E7基因转录的mRNA水平降低,其中针对E6 mRNA内含子的重组shRNA只抑制E6基因的表达水平.West-ern blot分析表明,4个HPV-16E6siRNA作用72 h后,未能检测到宫颈癌细胞中HPV-16E6蛋白.结论HPV-16 E6siRNA能使宫颈癌细胞CaSki生长缓慢;选择针对E6内含子的siRNA作用位点,特异性抑制E6表达;而针对E6外显子的siRNA作用位点,可抑制E6和E7基因的表达,是用于治疗HPV阳性宫颈癌细胞的理想靶位.

  • 伤寒Vi结合疫苗的研究

    作者:杜琳;谭小梅;蒋奕;刘月萍;谢贵林

    目的制备伤寒Vi结合疫苗并研究其特性.方法载体蛋白质重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)经ADH衍生后,与伤寒Vi多糖结合制备结合物,并对结合物进行化学特性和生物学特性的研究,尤其是研究结合物对小鼠的免疫原性.结果制备的伤寒Vi结合物相对分子质量(Mr)明显大于游离的伤寒Vi多糖和载体蛋白质,其多糖和蛋白质比值为1.2,结合物含量测定证明至少有70%的多糖是以结合状态存在,HPLC(TSK5000)的结果显示伤寒Vi结合物中Kd(partition coefficient)≤0.2占94%,内毒素含量、过敏原性、豚鼠和小鼠的动物毒性试验等都证明结合物安全,免疫双扩散试验证明结合物的多糖和蛋白质组分的抗原性都完好保持,在小鼠上的免疫原性试验证明结合物具有与单纯Vi多糖完全不同的免疫学特性,可以产生更高的特异性免疫应答,并具有明显的加强免疫效果.结论按试验设计方案制备的伤寒Vi结合疫苗,经化学和生物学检测,证明结合物确以多糖蛋白质结合状态存在,并证实该结合物具有较好的生物安全性和免疫学效果.

    关键词: 伤寒 结合疫苗 特性
  • 核酸疫苗Sj14-3-3联合CpG和mIL-12免疫小鼠抗日本血吸虫攻击感染的研究

    作者:徐元宏;胡元生;沈继龙

    目的在证明核酸疫苗pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3具有部分抗血吸虫感染的基础上,联合使用CpG和pcDNA3.1(+)-mIL-12,观察此二种佐剂在攻击感染小鼠的免疫效果及其抗血吸虫感染的保护机制.方法分别用pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3+pcDNA3.1(+)-mIL-12、pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3+CpG、pcDNA3.1(+)-mIL-12和CpG免疫小鼠.攻击感染后6 w计数成虫负荷和肝虫卵数;检测免疫后0 w、6 w和12 w小鼠血清总IgG、IgG1和IgG2a水平;检测小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4;流式细胞术检测免疫鼠脾细胞中CD4+和CD8+T细胞的比率.结果pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3+pcDNA3.1(+)-mIL-12和pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3+CpG免疫小鼠的减虫率分别为41.2%和28.7%;减卵率分别为52.6%和41.2%.单独使用pcDNA3.1(+)-mIL-12和CpG也有一定的免疫保护作用.保护性免疫主要通过诱导宿主产生CTL、TH1型和体液免疫应答.结论pcDNA3.1(+)-mIL-12和CpG具有较强的增强核酸疫苗pcDNA3.1(+)-Sj14-3-3抗血吸虫攻击感染作用.

  • 地方株HPV16 L1基因免疫保护性研究

    作者:高慧;王琴;成蓓;李厚达

    人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)至今已鉴定的HPV型超过200个,约40个型能感染生殖道,以性接触方式传播.分子流行病学证据显示HPV是引起浸润性宫颈癌和宫颈上皮内癌的主要原因,其中HPV16型在宫颈癌中检出率高,约50%的宫颈癌患者肿瘤组织能被检测到,HPV16也是我国妇女宫颈癌的主要型别.因为HPV感染性疾病的难治性、复发性和潜在致癌性,研制开发安全、有效的HPV疫苗有一定的实用意义.

  • 脂质体介导弓形虫SAG1与SAG3复合基因诱导小鼠免疫应答研究

    作者:周永安;余新炳;陈海峰;郑焕钦;殷国荣;吴忠道;陈观今

    目的评价弓形虫SAG1与SAG3基因真核表达质粒DNA免疫小鼠的免疫应答效果.方法以PCR方法扩增出SAG1与SAG3目的基因片段,并插入载体pEGFP-N3以构建重组质粒pE-SAG1/SAG3,瞬时转染细胞Cos-7.质粒pESAG1/SAG3以10μg剂量,脂质体介导肌肉注射BALB/c小鼠,免疫3次,后一次免疫后4周,观察体液和细胞免疫.RT-PCR方法检测注射部位目的基因的转录;斑点杂交方法检测目的基因是否与小鼠染色体基因组整合.结果质粒pESAG1/SAG3转染细胞后观察到绿色荧光;Western blot显示pESAG1/SAG3表达识别条带在相对分子质量(Mr)66.2×103附近.小鼠免疫后,血清产生抗弓形虫速殖子抗体,诱导IFN-γ及IL-2水平高于对照组.RT-PCR显示首次免疫15 d后,目的基因在肌肉组织中仍有转录,斑点杂交显示目的基因未与小鼠的基因组发生整合,混合质粒注射的小鼠抗弓形虫感染的存活时间延长.结论脂质体介导弓形虫SAG1与SAG3复合编码基因质粒接种小鼠能明显诱导体液和细胞免疫应答.

  • HIV-1 B'亚型gag-env融合基因的DNA疫苗构建和免疫原性分析

    作者:任莉;仇超;黄相刚;潘翔;徐建青;邵一鸣

    目的构建HIV-1 B'亚型中国流行株gag和env融合基因的DNA疫苗,对其免疫原性进行研究.方法根据已报道的HIV-1 B'亚型RL42分离株gag和env基因的氨基酸序列按哺乳动物密码子使用频率进行优化并人工合成基因,插入真核表达载体pDRVISV1.0中,构建表达RLA2 gag-env融合蛋白的DNA疫苗,pSVRL/GE.用Western blot和抗gag p55抗体细胞内染色的方法体外检测pSVRL/GE的表达效率.DNA疫苗pSVRL/GE免疫BALB/c小鼠后,用ELISPOT检测小鼠的细胞免疫反应.结果限制性内切酶鉴定表明融合基因已成功插入pDRVISV1.0载体中,Western blot证实融合基因可有效表达融合蛋白;细胞内染色结果表明,pSVRL/GE转染的293T细胞中49.8%表达gag p55,荧光强度均值为924;而空载体pDRVISV1.0转染的293T细胞中非特异背景染色只有0.5%.经免疫的小鼠脾细胞体外用H-2d限制性表位肽AMQMLKET刺激后,ELISPOT检测显示,pSVRL/GE免疫小鼠每106脾细胞形成226个斑点(SD=140),而空载对照组每106脾细胞形成29个斑点(SD=16)(P<0.05).结论所构建的DNA疫苗pSVRL/GE可高效表达相应抗原蛋白,并可有效激活机体的细胞免疫反应.

    关键词: HIV-1 B'亚型 DNA疫苗
  • 表达hCGβ的重组乳酸杆菌经阴道免疫小鼠后的体液免疫应答

    作者:姚晓英;李大金;袁敏敏

    目的用表达hCGβ的重组乳酸杆菌活疫苗经阴道黏膜途径免疫不同品系小鼠产生抗hCGβ免疫应答及机制.方法用108、109、1010个重组乳酸杆菌Lb hCGβ经阴道黏膜免疫6~8周龄雌性BALB/c和C57BL/6小鼠.3周后用相同剂量加强免疫一次.间接ELISA检测初次免疫后2~8周血清和阴道灌洗液中抗hCGβIgG和IgA抗体滴度.分离免疫小鼠脾、子宫、阴道黏膜的淋巴细胞,流式细胞仪分析其中B和T细胞的增殖情况,ELISPOT分析分泌抗hCGβIgG和IgA抗体分泌细胞的克隆数.结果对不同品系小鼠黏膜接种109、1010 Lb hCGβ可诱导相近的免疫应答;而108诱导的抗体滴度较低.在加强免疫后,109和1010Lb hCGβ诱导的抗血清中和hCGβ抗原的能力>100ng/ml.Lb hCGβ阴道黏膜免疫后T和B细胞增殖;脾脏、子宫及阴道内均存在抗hCGβIgG及IgA抗体分泌细胞.结论重组乳酸杆菌活疫苗Lb hCGβ可经阴道黏膜免疫诱导有效的免疫应答,产生的应答与免疫剂量呈正相关.黏膜局部及全身T和B细胞克隆增殖;子宫及阴道内抗hCGβIgG和IgA分泌细胞可能是Lb hCGβ阴道黏膜免疫诱导体液免疫的主要来源.

  • CD80作为分子佐剂增强HPV11 E7免疫效果的观察

    作者:李莉华;黄朝晖;郭子健;任金冬;刘志辉;宋明旭;周希科;王飞;毕志刚

    构建的人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)11型E7基因DNA真核表达质粒,在真核细胞获得有效表达.为增强其作为尖锐湿疣治疗性疫苗的免疫效果,现将E7基因与协同刺激分子CD80(所-1)进行连接重组,构建HPV11E7-CD80嵌合DNA真核表达质粒,并将其免疫小鼠,研究其诱导的免疫效应.

  • 著名病毒学家李河民研究员传略(1922-)

    作者:周国安;佘清;张瑞

    我国著名病毒学家和疫苗学专家李河民研究员1922年6月1日出生于我国台湾省高雄县一个手工业制造者家庭,原名蔡川燕.他的童年和青少年时代是在日本殖民统治下度过的.由于受日本侵略者压迫,他在进步思想影响下,从年轻时起立志科学救国,强烈盼望祖国强大昌盛,渴望台湾回归祖国的怀抱.

  • 黏膜传递系统和黏膜佐剂研究进展

    作者:王冠;沈叙庄

    黏膜传递系统和佐剂被认为是疫苗的重要组成部分.多年来,这一领域的研究不断深化,包括作为传递系统的重组减毒活细菌或病毒、质粒DNA、脂质体,以及霍乱毒素和大肠杆菌不耐热肠毒素等传统的黏膜佐剂.但由于这些物质存在着毒副作用等局限性,新的更加有效和安全、经济的黏膜传递系统和佐剂一直是人们探索的目标.本文拟对一些近年有关菌影、芽孢等新的黏膜传递系统以及ADP核糖基化肠毒素类佐剂及单磷酰脂质A、CpG-ODN等佐剂新的进展简介如下.

  • 中华微生物学和免疫学杂志编排规范

    作者:

中华微生物学和免疫学分期目录
期数
2019 01 02
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