中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中华医学会
- 影响因子: 0.59
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0254-5101
- 国内刊号: 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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SDF-1/CXCR4轴对人绒毛膜癌细胞侵袭、迁移能力的影响及意义
目的 研究SDF-1/CXCR4轴对人绒毛膜癌细胞株JAR细胞侵袭、迁移能力的影响及AMD3100对CXCR4的阻断作用,同时研究对下游PI3K/AKT信号通路的影响作用,进而探讨SDF-1/CXCR4轴在子痫前期发病中的作用机制.方法 将JAR细胞分为4组:AMD3100处理组(100 ng/ml)、SDF-1处理组(50 ng/ml)、SDF-1+AMD3100混合组(100 ng/ml AMD3100孵育2 h后再加入50 ng/ml SDF-1)、空白对照组.RT-PCR检测SDF-1和AMD3100处理后JAR细胞中CXCR4 mRNA表达水平的变化;Western blot 检测CXCR4及下游p-AKT蛋白的表达水平.采用MTT增殖试验,在0 h、24 h、48 h、72 h时间点分别检测不同浓度的SDF-1(10、30、50、100 ng/ml)对JAR细胞增殖能力的促进作用;Transwell侵袭试验、划痕试验分别检测不同处理因素条件下4组JAR细胞侵袭和迁移能力的变化情况.结果 (1)RT-PCR结果显示:SDF-1处理组JAR细胞中CXCR4 mRNA的表达(1.839±0.083)明显高于空白对照组(1.372±0.086)、AMD3100处理组(0.694±0.045)、SDF-1+AMD3100混合组(0.703±0.093),差异有统计学意义(F=30.67,P<0.05);与空白对照组比较,AMD3100处理组JAR细胞中CXCR4 mRNA的表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).(2)Western blot结果显示SDF-1处理组JAR细胞中CXCR4及p-AKT蛋白表达水平明显高于空白对照组、AMD3100处理组、SDF-1+AMD3100混合组;与空白对照组比较,AMD3100处理组JAR细胞中CXCR4及p-AKT蛋白表达水平显著降低.(3)MTT结果显示:与10、30、100 ng/ml浓度的SDF-1处理组相比,50 ng/ml SDF-1对JAR细胞的促增殖作用强;且在48 h时,促增殖效应大,与调零组及空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).(4)Transwell侵袭试验显示:SDF-1组侵袭细胞数(70.49 ± 2.42)明显多于空白对照组(54.36±2.26)、AMD3100处理组(21.68±8.31)、SDF-1+AMD3100混合组(28.18±4.61),差异有统计学意义(F=116.26,P<0.01);与空白对照组比较,AMD3100处理组侵袭细胞数显著减少,差异有统计学意义(P<0.05).(5)划痕试验结果显示,24 h之后,SDF-1组相对迁移距离(1.162±0.034)明显高于空白对照组(0.823±0.101)、AMD3100处理组(0.160±0.047)、SDF-1+AMD3100混合组(0.183±0.064),差异有统计学意义(F=30.500,P<0.05);与空白对照组比较,AMD3100处理组相对迁移距离显著减少,差异有统计学意义(P<0.01).结论SDF-1可增强人绒毛膜癌细胞株JAR的侵袭、迁移能力,但能被AMD3100阻断,因此推测在子痫前期发病过程中SDF-1/CXCR4轴可能受到抑制,并引起下游PI3K/AKT信号通路活化异常,进而引起滋养细胞的增殖异常、侵袭迁移不足,导致胎盘形成异常.
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长春地区幽门螺杆菌cagA基因及EPIYA基序多态性分析
目的 研究长春地区就医人群中幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)毒力基因cagA携带率及其3′端编码CagA蛋白EPIYA基序多态性,并探讨其结构特征的差异与疾病的关系.方法PCR法扩增临床分离株Hp的cagA基因并测序,DNAMAN软件将测序后的核苷酸序列翻译成氨基酸序列,然后利用软件MEGA6.0对测序Hp的cagA基因碱基和蛋白质氨基酸序列进行多重对比分析和构建系统发育进化树.结果 收集298例胃黏膜标本,共分离60株Hp菌株.Hp检出率与性别和年龄无关(P>0.05),消化性溃疡(PUD)组的Hp分离率高于非溃疡性消化不良(NUD)组(P<0.05).cagA基因阳性率为90%(54/60).其中成功测序的26株中,23株为东亚型,占88.4%;3株为西方型,占11.6%.东亚型菌株中22株为EPIYA-ABD,1株为EPIYA-ABBD;西方型菌株中,2株为EPIYA-ABC,1株为EPIYA-BC.经构建进化树发现,序列聚类为东亚型群和西方型群两大类,在东亚型群中疾病分布并没有出现明显聚集,西方型群均来自PUD组.4株来自PUD组的Hp发生了氨基酸突变且均发生在EPIYA-B这个片段.结论 本地区分离的Hp cagA基因阳性率为90%,分布与胃肠疾病类型无关;EPIYA分型以毒力强的东亚型EPIYA-ABD 型为主(84.6%,22/26).EPIYA-B片段氨基酸突变与消化性溃疡密切相关;cagA 3′端DNA序列变化不大,没有明显的地区聚集性.
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肺炎链球菌StkP激酶与β-内酰胺类抗生素结合能力及耐药相关性分析
目的 确定肺炎链球菌丝氨酸/苏氨酸激酶StkP与耐药相关性及其胞外区与β-内酰胺类抗生素结合的能力.方法 采用插入失活法构建肺炎链球菌ATCC6306株stkP基因敲除(ΔstkP)突变株.采用E-test检测青霉素(PCN)和头孢噻肟(CTX)对Δstkp突变株及其野生株的低抑菌浓度(MIC).采用生物信息学软件确定肺炎链球菌ATCC6306株丝氨酸/苏氨酸激酶编码基因(stkP)胞外区(EC-StkP)、构建EC-StkP三维空间结构模型、分析EC-StkP结构与功能关系.采用PCR扩增stkP基因胞外区片段(EC-stkP),T-A克隆后测序.构建EC-stkP原核表达系统,SDS-PAGE联合凝胶图像分析系统检查目的重组蛋白(EC-rStkP)表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯EC-rStkP.采用等温滴定量热法(VT-ITC)和表面等离子共振法(Biacore)检测EC-rStkP与PCN和CTX结合能力.结果 肺炎链球菌ATCC6306株对PCN和CTX敏感(MIC=0.06和0.12 μg/ml),但ΔstkP突变株对PCN和CTX高度耐药(MIC=16和32 μg/ml).肺炎链球菌ATCC6306株StkP C端295 aa片段为胞外区,该胞外区有4个青霉素结合蛋白和丝氨酸/苏氨酸激酶相关(PASTA)功能结构域.克隆的stkP胞外区序列与GenBank中相应基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99.6%和100%.构建的EC-stkP原核表达系统可表达可溶性EC-rStkP.PCN和CTX均能与EC-rStkP结合,但后者结合EC-rStkP能力强于前者.结论 肺炎链球菌stkP基因与β-内酰胺类抗生素耐药性密切相关,其表达产物丝氨酸/苏氨酸激酶StkP具有识别并结合β-内酰胺类抗生素的能力.
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新疆出血热病毒糖蛋白Gc不同区段抗原DNA疫苗诱导小鼠的免疫应答
目的 构建新疆出血热病毒(Xinjiang hemorrhagic fever virus,XHFV)糖蛋白两个区段抗原的DNA疫苗,并观察其免疫应答效果.方法 分别将XHFV YL04057株糖蛋白Gc上的两个抗原区段GcⅠ(1 229~1 349 aa)和GcⅡ(1 443~1 566 aa)编码的DNA序列插入真核表达载体pVAX1中,构建真核质粒pVAX1-GcⅠ和pVAX1-GcⅡ;经酶切和测序鉴定,质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验、细胞因子含量测定和ELISA法检测抗体对其诱导的免疫应答效果进行评价.结果 经双酶切鉴定和测序证实重组质粒构建正确;实验组小鼠IgG产生水平与pVAX1对照组相比有明显升高;pVAX1-GcⅠ和pVAX1-GcⅡ免疫组小鼠血清中的抗体效价均高于1:3 200;pVAX1-GcⅡ免疫组的小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,IFN-γ的表达水平也高达160.27 pg/ml,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论 成功构建XHFV糖蛋白两个区段抗原DNA疫苗,靶抗原在体内可有效表达;各免疫组均激起了较强的体液免疫及细胞免疫应答,pVAX1-GcⅡ实验组免疫原性和免疫效果较好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗.
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狂犬病病毒CTN株糖蛋白膜外区可溶性高效表达及纯化
目的 探索原核可溶性目的蛋白表达系统对狂犬病病毒糖蛋白膜外区(Ex-GP)进行高效制备及纯化的方法.方法 构建含有融合标签的狂犬病病毒糖蛋白膜外区表达质粒,筛选可溶性表达条件,采用亲和层析和凝胶过滤层析对目的蛋白进行纯化,以获得高效表达的可溶性目的蛋白.结果 成功建立应用原核表达系统高效制备重组可溶性狂犬病病毒糖蛋白膜外区蛋白的方法,获得的目的蛋白具有ELISA抗原活性,推测其构象与天然狂犬病病毒糖蛋白膜外区具有相似性.结论 本研究建立的目的蛋白高效制备方法,操作简便,表达量高,目的蛋白具有抗原性活性,适合目的蛋白规模制备,为深入研究狂犬病病毒糖蛋白生物学功能,解析糖蛋白结构,揭示狂犬病病毒致病机制及开展狂犬病诊断试剂的研发提供了思路.
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登革病毒感染的人脐静脉内皮细胞与人CD4+ T细胞相互作用对黏附分子和抑炎细胞因子表达的影响
目的 探讨Ⅱ型登革病毒(DENV-2)感染的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)与CD4+T细胞的共培养对HUVECs表达细胞间黏附分子(ICAM-1)、血管细胞黏附分子(VCAM-1) mRNA和 CD4+T细胞表达IL-10、TGF-β1 mRNA产生的影响,以进一步了解DENV感染的免疫学机制.方法 S1P1选择性激动剂CYM-5442处理HUVECs 24 h,用103半数组织培养感染剂量(TCID50)的DENV-2感染HUVECs后与人CD4+T细胞共培养.于4、8、12、24、48及72 h,分别收集细胞样本,用real-time PCR检测DENV-2非结构蛋白1(NS1)、鞘氨醇激酶1(SPHK1)、ICAM-1、VCAM-1、IL-10、TGF-β1 mRNA表达变化.结果 HUVECs被DENV-2感染后,病毒NS1 mRNA的表达呈一定时效性,在24 h达到高峰.在DENV-2感染的不同实验组中,CYM-5442处理和未处理组,DENV-2 NS1 mRNA的表达均无明显差异.HUVECs被CYM-5442处理和DENV-2感染后,SPHK1 mRNA表达明显上升,差异有统计学意义(P<0.05);在DENV-2感染的HUVECs与CD4+T细胞共培养的情况下,HUVECs ICAM-1和VCAM-1 mRNA高表达,相对HUVECs仅被DENV-2感染组和未处理组差异有统计学意义(P<0.01),CD4+T细胞TGF-β1 mRNA表达无明显差异,IL-10 mRNA表达上调,差异有统计学意义(P<0.05).结论 实验证明DENV-2能在HUVECs内复制增殖,CD4+T细胞可抑制DENV-2增殖;CD4+T细胞对DENV-2感染的HUVECs产生黏附分子VCAM-1和ICAM-1有明显的促进作用,CD4+T细胞可促使HUVECs活化,增强炎症反应,这可能与DENV-2感染诱发血管通透性升高有关.DENV-2感染的HUVECs对CD4+T细胞IL-10 mRNA表达有一定上调作用,对TGF-β1的表达没有明显的影响.
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Toll样受体激动剂在疫苗研发中的研究进展
固有免疫细胞具有抗感染和疾病防御作用.这方面的核心是通过建立广泛的特异性联系,即通过固有免疫细胞表达模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)来检测病原体相关模式和危险物相关模式.Toll样受体(TLR)是模式识别受体中研究的为广泛的一种受体.因此,TLR的激活具有促进固有炎症因子的释放和诱导特异性免疫两种作用.充分利用TLR的特点,在疫苗设计中加入相应的TLR受体激动剂,可以加速疫苗的免疫应答,产生更持久的保护.
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马尔堡病毒G蛋白相关抗体和疫苗的研究进展
马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)是一种可引起致命性出血热的病毒.它与埃博拉病毒同属丝状病毒科.二者的病毒结构、感染机制及引起的临床症状极为相似.然而相对埃博拉病毒而言,对于马尔堡病毒的研究较少.本文将对马尔堡病毒的病毒结构,特别是决定病毒侵染宿主的关键蛋白G蛋白(glycoprotein,GP)的结构、功能、针对G蛋白的保护性抗体和疫苗等新研究进展进行综述.
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三结构域蛋白(TRIM)家族结构及功能的研究进展
三结构域蛋白(TRIM)家族具有高度保守RBCC结构域,从N端到C端的顺序依次是RING锌指结构,一个或两个B-box结构域和一个卷曲螺旋结构域,RBCC结构域后是高度可变的C端结构域.TRIM蛋白家族不仅能够维持机体正常生理功能,还参与多种疾病发病机制的调控过程.本文主要对TRIM家族的结构特点及其在病毒感染、肿瘤、神经退行性疾病中发挥的功能进行综述.
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HIV-1亚型与CD4+T淋巴细胞计数自然变化趋势的相关性分析
目的 了解不同HIV-1亚型感染者CD4+T细胞计数自然变化情况,分析HIV-1亚型和CD4+ T细胞计数自然变化的关系.方法 94例在南京市诊断的抗病毒治疗前至少有过2次CD4+ T细胞计数检测的HIV-1感染者被纳入研究.描述分析不同亚型感染者CD4+ T细胞计数自然变化情况.运用多元Logistic回归分析探索影响CD4+ T细胞计数变化的因素,运用非参数检验分析HIV-1亚型与CD4+ T细胞计数变化的关系.结果 94例HIV-1感染者的CD4+T细胞计数月均自然变化速率为-2.20(IQR:-11.36~2.13)细胞/μl.其中24例(25.5%)研究对象末次计数水平较首次显著下降(≥30%).多元Logistic回归分析显示,CRF07_BC和其他亚型感染者出现CD4+ T细胞计数显著下降的风险分别是CRF01_AE感染者的0.28(95%CI:0.08~0.95)倍和0.16(95%CI:0.03~0.80)倍.非参数检验分析结果进一步表明,CRF01_AE感染者(M=-21.54,IQR:-30.97~-11.92 细胞/μl)比CRF07_BC感染者(M=-11.26,IQR:-14.06~-5.63细胞/μl)具有更快的CD4+ T细胞计数下降速率(P=0.033).结论 HIV-1亚型对CD4+T细胞计数自然下降速率具有显著影响,应密切关注CRF01_AE感染者的免疫状况,尽早开始抗病毒治疗.
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2013-2015年乌鲁木齐市外环境标本中禽流感病毒监测结果分析
目的 了解乌鲁木齐市外环境中禽流感病毒的分布情况,为乌鲁木齐市人禽流感防控提供参考依据.方法 采用实时荧光RT-PCR法对收集的外环境标本进行流感病毒A型核酸监测,其中阳性标本进一步作H5、H7、H9亚型的分型检测.监测数据采用SPSS21.0软件进行统计分析.结果 2013-2015年共收集1 043份禽流感外环境标本,核酸检测 FluA 阳性123份,阳性率为11.79%,其中H9亚型阳性检出率高,为7.77%;阳性检出率高峰每年不同;城乡活禽市场的阳性检出率高 (14.23%);禽类饮水和其他标本阳性检出率较高,分别为18.44%和19.44%.结论乌鲁木齐市外环境中常年有H5、H7、H9等多种亚型禽流感病毒,病毒活跃期每年不同,有人感染禽流感的风险,全年均应加强监测.
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 03 04 06 |
1998 | 01 02 03 04 05 06 |