沙眼衣原体呼吸道感染诱导γδT 细胞在肺组织增殖并产生大量 IFN-γ及 IL-17

目的：探讨小鼠沙眼衣原体呼吸道感染不同时期γδT细胞的增殖、活化及细胞因子的产生。方法 C57BL／6小鼠鼻腔吸入3×103 IFU（inclusion-forming units）沙眼衣原体小鼠肺炎株（ Chlamydia muridarum，Cm）建立小鼠沙眼衣原体肺炎模型。取感染后不同时间点小鼠肺组织进行单个核细胞分离，利用流式细胞术检测小鼠肺CD3＋TCRγδ＋T细胞百分率，并检测γδT细胞表面分子CD69的表达水平；利用细胞内细胞因子染色技术检测γδT细胞IFN-γ和IL-17的产生。结果一定剂量的Cm经呼吸道感染诱导小鼠衣原体肺炎。与未感染的对照组比较， Cm感染诱导小鼠肺组织γδT细胞百分率及γδT细胞总数逐渐升高，于感染后第7天达到高峰，随后逐渐下降；肺组织γδT细胞表面活化分子CD69表达于感染后第3天达高峰，此后略有降低。 Cm感染诱导γδT细胞分泌大量IFN-γ、IL-17，于感染后第3天达到高峰；相比αβT细胞，γδT细胞主要在感染早期（感染后前3天）分泌大量IFN-γ和IL -17，而后期CD3＋CD4＋T细胞产生IFN-γ和IL-17的能力逐渐高于γδT细胞。结论一定剂量的Cm呼吸道感染可以诱导小鼠γδT细胞在感染局部大量聚集及活化，γδT细胞是宿主抗衣原体免疫应答早期分泌IFN-γ和IL1-7的主要细胞类型。

应用 Luminex xMAP 液相芯片技术研究miRNAs 对 THP-1细胞产生细胞因子的影响

目的：研究let-7e单独作用或miR-106b和miR-20a共同作用对THP-1细胞产生细胞因子的影响。方法用Cy3标记的miRNA阴性对照瞬转THP-1细胞24 h、36 h和48 h，免疫荧光法检测其转染效率；let-7e、miR-106b及miR-20a mimic分别瞬转THP-1细胞24 h、36 h和48 h，qRT-PCR检测各miRNA表达量并筛选各miRNA的佳转染时间；1 mg／L LPS刺激各miRNA转染的THP-1细胞1 h后，Luminex xMAP液相芯片技术检测THP-1细胞产生的IL-8、干扰素诱导蛋白-10（ IP-10）、单核细胞趋化蛋白-1（ MCP-1）、IL-1α、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-α和 IFN-β，并进行差异性分析。结果转染后90％以上的THP-1细胞带有红色荧光；let-7e mimic的佳转染时间是48 h，miR-106b及miR-20a mimic的佳转染时间是24 h；相对于各自的对照组，let-7e mimic组IL-8、IP-10和MCP-1表达量增加，而在miR-106b和miR-20a mimic共转染组各趋化因子表达量减少。结论 let-7e促进THP-1细胞中IL-8、IP-10和MCP-1的表达，miR-106b和miR-20a共同抑制它们的表达。

《中华微生物学和免疫学杂志》书写规范

1．根据GB／T 7408－94《数据元和交换格式信息交换日期和时间表示法》，由特定起点与终点定界的时间段的表示，起点与终点之间以一字线为分隔符，而不再用波纹线。

《中华微生物学和免疫学杂志》征订启事

白细胞介素15促进 Vδ2γδT 细胞杀伤人白血病 K562细胞

目的：研究细胞因子白细胞介素15（IL-15）对Vδ2γδ（Vδ2）T细胞杀伤人白血病K562细胞的影响。方法分离人外周血单个核细胞，唑来膦酸联合IL-2扩增Vδ2T细胞；体外IL-15刺激，流式检测Vδ2 T细胞活化和功能变化。结果唑来膦酸可以大量扩增Vδ2 T细胞，IL-15能活化Vδ2 T细胞，增强Vδ2 T细胞脱颗粒能力和分泌IFN-γ功能，并能促进Vδ2 T细胞杀伤人白血病细胞K562。结论 IL-15刺激可以显著活化Vδ2T细胞，增强杀伤K562细胞功能。

浙江地区幽门螺杆菌对喹诺酮类药物体外耐药情况分析

目的：分析幽门螺杆菌（ Helicobacter pylori， HP）临床分离株对常用喹诺酮类抗生素的体外耐药情况，为喹诺酮类药物在临床HP根除治疗中的应用提供依据。方法对2013年4月至2013年6月由浙江省不同地区多家医院胃镜标本中分离得到的713株HP菌株进行体外药物敏感试验，分析其对左氧氟沙星与莫西沙星的耐药性。药物敏感试验根据美国实验室标准化协会（ clinical and laboratory standards institute，CLSI）推荐方法，采用耐药临界点药物琼脂稀释法进行药敏试验，将抗生素溶液加入琼脂中稀释成相应的临界点浓度，倾注平板，接种菌悬液，若接种点有菌生长则该菌株判读为耐药。结果713株HP菌株对左氧氟沙星与莫西沙星耐药率均为19．50％，HP菌株对左氧氟沙星与莫西沙星的耐药情况完全一致。除金华地区外，其他7个地区耐药率均达15％以上；其中，温州地区高，达到26．40％，明显高于金华地区（P＜0．05），与其他地区差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论同阿莫西林和呋喃唑酮相比，浙江地区HP菌株对左氧氟沙星与莫西沙星的耐药率偏高。由于左氧氟沙星与莫西沙星两种抗生素药物耐药机制相同、药物作用靶点相似，有相同的耐药特征。在临床HP根除时应避免左氧氟沙星与莫西沙星耐药时相互替换使用。

类泛素-蛋白酶体系统对耻垢分枝杆菌生长活力的影响

目的：研究原核类泛素（ Pup）-蛋白酶体系统对分枝杆菌生长活力的影响。方法分别敲除耻垢分枝杆菌Pup-蛋白酶体系统中pup和蛋白酶体β亚基基因（ prcB）。选取待敲除基因的上下游侧翼序列设计引物，构建自杀性载体，靶基因同源序列和菌株基因组发生同源重组后获得基因敲除的菌株。分别连续测定野生型和基因敲除株在正常及低氧和厌氧应激培养条件下的吸光度值，比较菌株生长活力的变化。结果正确构建敲除pup和prcB基因的突变株，分别命名为△SM-Pup和△SM-prcB。△SM-Pup菌株生长速度快于野生型菌株和△SM-prcB株。 prcB基因的敲除对细菌的生长活力没有产生明显的影响。结论 Pup-蛋白酶体系统对耻垢分枝杆菌的生长产生了一定作用，但具体机制仍需要进一步研究探讨。

B 细胞及其 IgG 亚类在非小细胞肺癌患者中的分布及临床意义

目的：研究非小细胞肺癌（ non-small cell lung cancer，NSCLC）患者外周血中B细胞亚群及IgG亚类的分布情况，探讨不同B细胞及IgG在NSCLC疾病进展过程中的作用。方法应用流式细胞仪，在55例处于不同临床分期的非小细胞肺癌患者及25例健康对照中检测外周血幼稚B细胞、记忆性B细胞和成熟B细胞的分布；应用ELISA方法检测不同分期的NSCLC患者血清中IgG1、IgG2、IgG3和IgG4含量及其在总IgG中所占的比例。结果幼稚B细胞和记忆性B细胞在CD19＋B细胞中所占比例与非小细胞肺癌的发展呈正相关，同时IgG4／IgG比例也随着非小细胞癌疾病发展逐渐升高，而其他3种IgG亚类与健康对照组相比则无明显变化。结论非小细胞肺癌患者体内B细胞亚群分布失衡及IgG4／IgG比例升高与非小细胞肺癌进展密切相关。明确B细胞亚群分布特点及其是否与IgG4比例升高有直接关系，这对我们寻求有效的非小细胞肺癌免疫治疗方法具有重要的意义。

B细胞活化因子及其特异性受体BAFF-R在B细胞性非霍奇金淋巴瘤中的表达及其意义

目的：探讨B细胞活化因子（ BAFF）及其特异性受体BAFF-R在B细胞性非霍奇金淋巴瘤（ B-NHL）中的表达及其意义。方法 ELISA及荧光定量-聚合酶链反应（ RTQ-PCR）测定临床标本BAFF及其特异性受体BAFF-R蛋白与mRNA的表达水平；RT-PCR、Western blot、荧光免疫细胞化学法和激光共聚焦技术鉴定人Burkitt′s淋巴瘤细胞Raji中BAFF及BAFF-R的表达与定位；运用免疫组化的方法分析B-NHL患者肿瘤组织中BAFF的表达；WST细胞增殖试验及TUNEL法检测BAFF及其受体BAFF-R对B-NHL Raji细胞生长、存活与凋亡的影响。直线相关分析LDH浓度与BAFF蛋白及mRNA表达水平的关系。结果（1）B-NHL患者BAFF蛋白或mRNA表达水平显著高于正常对照组（P＜0．01）；（2）Raji细胞表达BAFF及其受体BAFF-R，并定位表达于Raji细胞的质膜上；（3） BAFF在B-NHL患者的表达量与B-NHL组织亚型有关，BAFF在小B细胞恶性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、黏膜相关淋巴瘤和滤泡性淋巴瘤中表达量较高，而在套细胞淋巴瘤中表达量较低。（4） BAFF促进Raji细胞的生长与存活；（5）直线相关分析显示乳酸脱氢酶（LDH）与BAFF蛋白及mRNA表达水平呈显著相关性。结论 BAFF及其特异性受体BAFF-R对于B-NHL的发生、发展起着重要的作用。

Toll样受体4和核因子-κB 在危重型手足口病中的表达及艾司洛尔的干预作用

目的：探讨Toll样受体4（TLR4）和核因子-κB（NF-κB）在危重型手足口病（HFMD）中的表达，观察艾司洛尔的干预作用。方法选择2014年5月至2015年5月收治于我院重症监护室的52例危重型HFMD患儿为研究对象，采用随机数字表分为A组及B组，每组各26例。 A组予常规治疗，B组加用艾司洛尔治疗。另选取同期感染科收治的30例普通型HFMD作为疾病对照组，门诊健康体检30例儿童为健康对照组。比较3组儿童TLR4、NF-κB及TNF-α、IL-6的表达情况。治疗24 h、72 h及5 d后比较危重型HFMD患儿2亚组TLR4、NF-κB及TNF-α、IL-6的表达情况。结果（1）危重型HFMD患儿TLR4、NF-κB及TNF-α、IL-6的表达显著高于疾病对照组和健康对照组（ P＜0．01）。（2）治疗前危重型HFMD患儿2亚组间TLR4、NF-κB及TNF-α、IL-6的表达差异均无统计学意义（ P均＞0．05）；与治疗前相比较，治疗后24 h、72 h及5 d两组危重型HFMD患儿TLR4、NF-κB及TNF-α、IL-6的表达均显著降低，差异有统计学意义（P均＜0．05）。与常规治疗组（A组）相比较，B组患儿治疗24 h及72 h后NF-κB及TNF-α、IL-6的表达进一步降低，差异有统计学意义（P均＜0．05），而TLR4的表达差异无统计学意义，治疗5 d后2组患儿上述指标差异均无统计学意义（ P均＞0．05）。结论 TLR4／NF-κB／促炎因子信号通路可能参与了危重型HFMD的病理生理过程，艾司洛尔能一定程度上抑制NF-κB表达，减少炎性因子生成，减轻炎性反应。

《中国药典》2015年版人用疫苗总论概况

《中国药典》（ChinesePharmacopoeia，ChP）2015年版［1］于2015年6月5日发布［国家食品药品监督管理总局关于发布《中华人民共和国药典》（2015年版）的公告（2015年第67号）］，于12月1日起实施［国家食品药品监督管理总局关于实施《中华人民共和国药典》（2015年版）有关事宜的公告（2015年第105号）］。“人用疫苗总论”为新版药典三部的重要新增内容之一，规定了疫苗全面质量控制的基本要求，对于规范生产、加强监管、引导研发具有重要意义。本文介绍了人用疫苗总论的起草情况，并对其通用性技术要求、对于疫苗质量控制的意义以及与欧美药典的比对进行了讨论。

NK细胞受体：抗结核免疫中的角色

固有免疫是生物体在长期种系发生和进化过程中逐渐形成的，是机体抵御病原体侵入的首道防线，亦是激发适应性免疫的基础。自然杀伤细胞（ NK）作为固有淋巴细胞（ in-nate lymphoid cells，ILCs），其激活不受MHC限制，不依赖于抗体，通过表达多种受体，释放穿孔素、颗粒酶和一系列细胞因子等杀伤靶细胞，在早期发挥控制和清除病毒、细菌或寄生虫感染的作用。大量证据支持NK细胞介导的固有免疫应答与多种感染的清除密切关联，特别是在呼吸道和肠道黏膜中。 NK细胞能够清除巨细胞病毒（ cytomegalovirus）［1］、流感病毒［2］、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）［3］、新型隐球菌（ Cryptococcus neoformans）［4］、肺炎克雷伯杆菌（ Kleb-siella pneumonia）［5］、嗜肺军团菌（Legionella pneumophila）［6］等呼吸道病原体感染的靶细胞；对于诸如单核细胞增生李斯特氏菌（ Listeria monocytogenes）和沙门氏菌（ Salmonella）［7］等肠道病原体，NK细胞也具有拮抗作用。 NK细胞还能杀伤肠道啮齿柠檬酸杆菌（ Citrobacter rodentium）［8］、小球隐孢子虫（ Cryptosporidium parvum）［9］，但小肠结肠炎耶尔森菌（ Yersin-ia enterocolitica）［10］对NK细胞活化起到抑制作用。

重组痘苗病毒HIV疫苗肌注初免蛋白疫苗滴鼻加强后激发高强度黏膜IgA应答反应

目的：研究痘苗病毒载体HIV疫苗和蛋白疫苗联合运用所激发的黏膜免疫应答，探讨不同途径免疫产生黏膜免疫应答的异同，进一步证实MF59佐剂在激发疫苗黏膜免疫应答方面的效果。方法以表达HIV-1中国流行株 CN54 Gag-Pol-Env 基因的重组痘苗病毒天坛株rTV，重组HIV-1膜蛋白gp140三聚体为抗原，辅以水包油型佐剂（ oil-in-water） MF59，在小鼠模型上，通过不同免疫途径组合联合免疫BALB／c小鼠，即重组痘苗病毒初免，免疫途径为滴鼻或肌注，gp140与MF59混合物加强免疫，免疫途径为滴鼻、肌注或皮下，探讨能诱导高效黏膜免疫应答的免疫策略。通过ELISA方法对小鼠血清中HIV-1特异性的IgG和IgA及唾液和阴道分泌物中IgA进行检测。结果MF59是一种良好的黏膜佐剂，能显著增强HIV蛋白疫苗的黏膜免疫应答，所激发的黏膜IgA滴度与鞭毛素蛋白（ SF）和霍乱毒素B亚单位（ CTB）的黏膜佐剂活性相当；重组痘苗病毒初免（肌注），gp140与MF59加强（滴鼻）联合免疫策略能诱导高水平的血清IgA和黏膜IgA抗体（P＜0．05），其抗体滴度分别高达1∶15000和1∶600。结论重组痘苗病毒天坛株rTV系统途径免疫小鼠后蛋白疫苗黏膜途径加强能激发高强度黏膜免疫应答，这一免疫策略及组合可为阻断通过口腔和阴道黏膜传播的艾滋病疫苗研究提供参考。

本刊启用稿件远程管理系统

为顺应当今期刊网络化、数字化的发展趋势，更好地为广大作者、读者提供高质量的服务，中华医学会杂志社开发了稿件远程管理系统。该系统根据中华医学会系列杂志稿件处理流程、编辑加工规范、审稿制度、管理规范等业务需求设计，采用先进的数据库及网络技术，具有强大的数据处理和分析能力。稿件远程管理系统将协助作者、编辑、审稿专家、编委、定稿会专家、总编等相关人员多位一体地进行稿件业务处理，解决编辑部对稿件网络化流程管理的需要，并实现各类查询功能。2009年9月，本刊正式启用稿件远程管理系统，访问中华医学会网站（ http：／／www．cma．org．cn）首页上方“业务中心”进行稿件处理操作。

本刊“流行病学调查”栏目征稿

本刊使用的医学缩略语

为了精简文字，使文章读起来更简练易懂，现将本刊常用且基础医学领域中所熟知的专业名词缩略语公布如下（按英文首字母顺序排列），本刊在论文中将不再注释。

上海市闵行区水痘减毒活疫苗效价监测分析

目的：了解水痘减毒活疫苗（ varicella attenuated live vaccine， VarV）在不同季节及社区冷链系统各环节中经运输、储存后的效价，评价冷链系统运转状况和疫苗热稳定性，为疫苗管理、引进和研发提供依据。方法在上海市闵行区13家社区中分别随机抽取2012—2013年间水痘暴发罹患率高与低社区各4个，在2013年11月及2014年2、5、8月份分别对入库前、入库后30 d的VarV效价进行测定。疫苗效价测定采用定量的蚀斑形成试验计算病毒滴度。结果总疫苗合格率为90．63％，几何平均滴度（geometric mean titer，GMT）为3．67（LgPFU／0．5 ml），C公司生产疫苗合格率高，为96．88％，GMT为3．89（ LgPFU／0．5 ml）；B公司生产疫苗合格率为91．67％，GMT为3．75（LgPFU／0．5 ml）；A公司生产疫苗合格率为80．00％，GMT为3．29（LgPFU／0．5 ml）；三者间合格率差异有统计学意义（χ2＝8．288，P＝0．016）。距闵行区疾病控制中心近点的社区合格率为91．67％，远及中点均为100％，三者间合格率差异无统计学意义（χ2＝3．441，P＝0．179）。 B公司及C公司除第三季度外合格率均为100％，第三季度合格率较低， A 公司为70．00％， B 公司为66．67％， C 公司为87．50％，三家公司季度间合格率差异均无统计学意义（χ2＝1．25，P＝0．7412；χ2＝6．545，P＝0．088；χ2＝6．194，P＝0．103）。三家公司疫苗效价在入库前、入库后30 d合格率差异均无统计学意义（χ2＝0．625，P＝0．347；χ2＝0．000，P＝1．000；χ2＝2．065，P＝0．492）。结论闵行区在疫苗的储存、运输等环节中冷链系统管理、运转良好，C公司疫苗热稳定性优于其他两家公司，A公司疫苗效价还需加大监测力度进一步观察疫苗效价。

河北省2012-2014年水痘减毒活疫苗的疑似预防接种异常反应安全性监测分析

目的：分析河北省2012—2014年水痘减毒活疫苗（ varicella attenuated live vaccine， VarV）上市后，疑似预防接种异常反应（ adverse events following immunization，AEFI）的发生特征，评价VarV预防接种的安全性，为制订河北省水痘预防控制策略提供参考依据。方法通过中国AEFI信息管理系统，收集河北省2012—2014年VarV发生的AEFI个案数据，采用描述流行病学方法进行统计分析。结果共收集到河北省2012—2014年接种VarV发生的 AEFI个案239例，报告发生率为25．51／10万剂。其中严重AEFI病例1例，报告发生率为0．11／10万剂。所有AEFI病例中，男、女性别比为1．44∶1；主要集中在≤3岁组儿童；以散居儿童和托幼儿童为主；一般反应的病例主要症状为发热、局部红肿和局部硬结，异常反应病例的诊断主要为过敏性皮疹。结论河北省VarV的AEFI报告发生率在预期范围内，但一般反应报告发生率高于中国2010—2012年水痘减毒活疫苗上市后安全性监测分析报道的数据，所以我们仍有必要关注预防接种后的疑似预防接种异常反应的发生情况。

2009-2012年广西 HIV-1耐药状况调查

目的：调查2009—2012年广西HIV-1感染者的耐药状况，同时探讨耐药与亚型的关系。方法在广西各地随机募集HIV／AIDS患者，提取患者血液样本的HIV RNA，逆转录后扩增pol基因并测序，使用在线分析工具Genotyping结合MEGA 5．03软件进行亚型分型，使用斯坦福大学的HIV耐药数据库确定耐药突变位点及药物耐受情况。结果获得196份pol区序列，其中接受抗病毒治疗样本103例（52．55％），未经治疗样本93例（47．45％）；亚型分布为95例CRF01＿AE（48．47％）、88例CRF08＿BC（44．90％）、12例CRF07＿BC（6．12％）以及1例B亚型（0．51％）；接受抗病毒治疗患者耐药率为10．68％，未经治疗患者耐药率为7．53％；在196例研究对象中发现低度耐药14例，中度耐药3例，高度耐药4例；1例针对核苷类逆转录酶抑制剂（ NRTIs ）和非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTIs）发生二重耐药；不同类型药物耐药结果：蛋白酶抑制剂（PIs）、NRTIs、NNRTIs及整合酶抑制剂（INs）相关耐药率分别为6．63％、3．06％、11．22％、8．67％；CRF01＿AE、CRF07＿BC和CRF08＿BC亚型发生PIs相关突变的频率分别为6．32％、41．67％和2．27％；A71V／T在CRF07＿BC毒株中出现多（75％），E138A仅出现在CRF08＿BC毒株中（100％）。结论广西HIV-1患者耐药发生率高于全国水平，不同亚型HIV-1流行株的耐药发生率不同。