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中华微生物学和免疫学

中华微生物学和免疫学杂志

Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 中国科学技术协会
  • 主办单位: 中华医学会
  • 影响因子: 0.59
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 0254-5101
  • 国内刊号: 11-2309/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 北京市经济技术开发区经海二路38号
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1981
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中华微生物学和免疫学杂志编辑委员会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 沈心亮
  • 类 别: 预防医学与卫生学
期刊荣誉:
  • 人U937细胞吞噬IgA免疫复合物的研究

    作者:郭彩云;崔薇;张伟

    目的对IgA Fc受体(FcαRⅠ)介导的U937细胞吞噬IgA免疫复合物进行研究. 方法以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的8.9NIP/BSA为抗原,与抗NIP的IgA或IgG抗体结合,分别形成IgA免疫复合物(IgA IC)和IgG免疫复合物(IgG IC),再与经佛波醇乙酯(PMA)刺激分化为单核细胞样的U937细胞孵育,流式细胞仪分析U937细胞吞噬IgA IC和IgG IC的情况. 结果 U937细胞表面FcαRⅠ表达量高于3种IgG Fc受体(FcγRⅠ、FcγRⅡ、FcγRⅢ).PMA刺激后细胞表面FcαRⅠ上调明显,吞噬IgA IC能力增加.FcαRⅠ介导的U937细胞对IgA IC的吞噬作用高于FcγRⅠ和FcγRⅡ介导的对IgG IC的吞噬作用,且这种吞噬作用是特异性的.在补体受体CR1和CR3作用下,U937细胞对IgA IC的吞噬作用有所增强. 结论 FcαRⅠ介导单核细胞非常强的吞噬IgA IC的作用.

  • 分化抗原gp42表达对B细胞株增殖和血清撤除致死的影响

    作者:汪燚;刘音;马凤蓉;崔薇;史耕先;赵方萄;朱立平

    目的研究分化抗原gp42表达对3D5 B细胞株功能的影响. 方法以生长曲线检测细胞的增殖,碘化丙啶(PI)染色,DNA流式细胞仪分析细胞周期,Annexin-Ⅴ/PI染色检测细胞死亡,间接免疫荧光染色流式细胞仪分析CD分子的表达,用Fluo-3 AM作探针激光共聚焦显微镜观察胞内Ca2+浓度的变化. 结果分化抗原gp42表达抑制的3D5细胞生长明显加速(P<0.001),从S期进入G2/M期的比率明显增加.对血清撤除所致的死亡发生抵抗.分化抗原gp42表达抑制的3D5细胞间的粘附消失,CD11c的表达明显减弱.在McAb 5D4的刺激下,3D5细胞胞内的Ca2+浓度随时间逐步增高. 结论分化抗原gp42表达抑制致使3D5细胞生长加速,细胞间粘附消失.分化抗原gp42是一个信号传导分子.

  • 分化抗原gp42在人免疫细胞的表达

    作者:汪燚;刘音;马凤蓉;史耕先;赵方萄;朱立平

    目的明确gp42蛋白为分化抗原,检测它在人免疫细胞的表达. 方法用gp42蛋白免疫小鼠,制备抗gp42蛋白的单抗.用反义技术制备gp42蛋白表达抑制的3D5细胞.用免疫荧光染色和Western印迹确定gp42单抗的特异性.用胞膜蛋白免疫沉淀和流式细胞术确定gp42蛋白为分化抗原.用双色免疫荧光染色流式细胞术检测gp42分化抗原在多种人免疫细胞的表达. 结果制备了抗gp42蛋白的特异性单抗.用gp42单抗作探针,从3D5细胞膜免疫沉淀到相对分子质量(Mr)为42*!000的一条蛋白带,并在活3D5细胞见阳性免疫荧光染色.gp42分化抗原在人外周围血CD19+、CD14+、CD4+、CD8+和CD56+细胞的表达率分别为59.71%±11.36%、89.08%±4.87%、26.03%±9.75%、24.24%±15.29%和24.20%±15.72%,在人免疫细胞株的表达率分别为58.0%(Nalm6)、72.7%(3D5)、53.6%(BJAB)、61.0%(Daudi)、6.9%(SKW6)、6.3%(Jurkat)、5.8%(Peer)、21.3%(K562)和39.1%(U937). 结论 gp42蛋白为一个分化抗原,在人外周围血CD14+细胞的表达率高,其次为CD19+细胞,CD4+、CD8+和CD56+细胞的表达率较低.

    关键词: 分化抗原 5C5 gp42
  • 空肠弯曲菌脂多糖诱发实验性周围神经病变的免疫学致病作用

    作者:高玉兴;蔡方成

    目的探讨空肠弯曲菌(CJ)诱发的周围神经病变中,其脂多糖(LPS)诱导的免疫学致病机理. 方法以亲和层析方法,从CJ LPS全身免疫后大鼠免疫血清中,高纯度提取CJ LPS特异性IgG抗体;免疫组化、免疫荧光方法检测CJ LPS特异性IgG抗体与正常大鼠、人坐骨神经的亲和力;神经外膜下注射CJ LPS特异性抗体,观察其神经病理学改变;ELISA法检测CJ LPS特异性抗体及GM1抗体含量,免疫组化、免疫荧光技术检测病变神经上CJ LPS的特异性免疫球蛋白表达;免疫吸附法去除CJ LPS 抗体的免疫血清作神经外膜下注射,并进行病理学检查;原位杂交法检测病变神经上TNF-α mRNA表达. 结果 (1) 特异性CJ LPS-IgG引起健康大鼠坐骨神经显著病变,原纤维总病变率达20.7%,与对照(4.8%)比较,P<0.01;(2) 免疫组化和免疫荧光均证实CJ LPS特异性抗体与正常人体或大鼠神经表现强阳性结合;(3) CJ LPS特异性抗体与GM1交叉反应吸光度(A)值大于正常对照的7倍;(4) 轴索变性及混合病变型原纤维特异性IgG免疫组化和免疫荧光染色全部强阳性,而髓鞘脱失者仅有60%呈弱阳性;(5) 经CJ菌体抗原吸附后CJ LPS免疫血清组原纤维病变率为35.0%,低于未吸附组(62.5%),但仍明显高于对照组(6.0%);(6) 经CJ LPS或CJ多次免疫后,各有84%和80%病变神经上有TNF-α mRNA高表达,对照组无明显表达. 结论在CJ感染诱发的周围神经病变中,作为其致病的关键抗原成分CJ LPS,诱导其特异性抗体及TNF-α等,参与CJ相关的GBS发病过程.

  • 乳酸菌Z222产胞外多糖(EPSⅠ)对免疫细胞功能的影响

    作者:顾笑梅;王富生;孔健;马桂荣

    目的检测乳酸菌Z222产胞外多糖 EPSⅠ对体外免疫细胞功能的调节作用. 方法不同浓度的EPSⅠ作用于小鼠的腹腔巨噬细胞和脾细胞,分别用中性红染色法检测巨噬细胞的吞噬能力,用MTT法检测淋巴细胞在体外的转化能力、NK细胞杀伤肿瘤细胞Yac-1的能力和产细胞因子IL-2的活性. 结果 (1) EPSⅠ单独作用小鼠脾细胞就能促进体外淋巴细胞增殖,且表现出剂量依赖关系.EPSⅠ亦可促进Con A诱导的体外小鼠淋巴细胞转化.(2) EPSⅠ体外作用于小鼠腹腔巨噬细胞均可提高 MΦ的吞噬能力,与对照组比较差异都有显著性.(3) 与对照组相比EPSⅠ能增加体外NK细胞的活性,杀伤率大值达62.41%±2.54%.(4) EPSⅠ使小鼠脾细胞产IL-2的能力与对照组比较,差异有显著性. 结论乳酸菌多糖EPSⅠ对小鼠的免疫功能有一定的调节作用.

  • 从血液中分离出一株山夫顿堡沙门菌

    作者:张广玲;王开升;孙连芹

    2002年9月,从1例高热患儿的血液中分离出山夫顿堡沙门菌(S.senftenberg).患者,女,13个月.腹疼、腹泻,体温39.5℃,实验室检查:血WBC 2.5×109/L.粪便稀,WBC 2~6/HP,RBC 1~3/HP;血培养2次均分离出沙门菌属的细菌.

  • 表皮葡萄球菌生物膜形成与ica操纵子的相关性研究

    作者:王勇翔;李华林;李平洋;倪语星;闻玉梅

    目的研究表皮葡萄球菌(表葡)生物膜形成与ica操纵子存在之间的相关性并比较3种检测表皮葡萄球菌生物膜形成的方法. 方法通过PCR法扩增icaA基因以检测ica操纵子的存在.用半定量粘附实验、扫描电子显微镜法和光学显微镜法检测自临床分离到的19株表葡的粘附能力. 结果在19株表葡中,通过PCR法测得7株为icaA阳性,通过半定量粘附实验测得5株icaA(+)菌株为粘附株;大多数菌株在含糖培养基中所测得的吸光度(A)值大于不含糖培养基中所测得的A值. 结论 ica操纵子的存在与表葡生物膜形成在统计学上显著相关(P<0.025).培养基中补充葡萄糖有利于大多数表葡的粘附.半定量粘附实验和光镜检测法适用于细菌粘附的初步测定和筛选,而扫描电镜检测法有更高的灵敏度以区分粘附菌株和非粘附菌株.

  • 重组LTB蛋白在水弧菌VSP60中的高效表达与纯化

    作者:王静;李琳琳;孔令洪;于军;郑瑾;韩俊宏;来宝长;司履生;王一理

    目的优化重组大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位(rLTB)工程菌(VSP60)高效表达的条件. 方法以UVP凝胶照相系统扫描以及改良Lowry′s法检测rLTB表达量并分析各种因素对其影响.利用Sephacryl S-100凝胶层析纯化rLTB蛋白. 结果工程菌30℃振荡培养至吸光度(A600)值达0.2~0.3时加IPTG(终浓度为0.5mmol/L),诱导培养18~22h为rLTB蛋白表达的佳条件.Sephacryl S-100凝胶柱一步层析后,rLTB蛋白纯度可达98.1%. 结论本研究所用的培养和纯化工艺简单易行,可获得高产量、高纯度的rLTB蛋白.

  • 合肥地区淋球菌流行株gyrA和parC基因突变位点的分析

    作者:周文明;曹慧敏;赵建龙;李伟;沈玉君;张学军

    淋球菌gyrA和parC基因突变与喹诺酮类药物耐药密切相关.本文用测序法对2002年合肥地区分离的50株淋球菌流行株进行gyrA和parC基因突变位点检测,并与4种喹诺酮类药物的药敏结果比较分析.

  • 异烟肼耐药结核分支杆菌katG基因分析

    作者:黄海南;韩金祥;王进鸿;高雪芹;鲁艳芹

    结核分支杆菌(M tuberculosis, TB)的katG基因是位于细菌染色体上的结构基因,全长2223bp,它的编码产物是过氧化氢-过氧化物酶,而后者在维系异烟肼(Isoniazid, INH)杀菌毒性中,发挥重要作用.因此,katG基因结构的正确性是编码产生功能正常的过氧化氢-过氧化物酶的先决条件,也是发挥INH特有的药理作用的重要基础.通过检测katG基因的分子结构,尤其是检测某些关键位点的碱基突变,可以快速发现TB对INH耐药的变异情况,对及时的指导临床用药,具有重要的意义.

  • 聚合酶链反应检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA和femB基因

    作者:熊咏民;莫晓燕;陈群;薛莉

    近年来耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染率逐年上升,已成为全世界医源性感染的重要病原菌之一.目前国内多采用PCR方法检测编码耐药菌特异的青霉素结合蛋白(PBP2a)的mecA基因来鉴定MRSA,但近缘的细菌难以区分.如凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中也发现具有修饰PBP2a的mecA基因.该基因具有属内种间的一致性, 耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)与MRSA mecA基因之间的DNA序列有99%以上是一致的.

  • 乙型肝炎病毒全基因克隆及序列分析发现一D/C基因型重组株

    作者:黄维金;张华远;王佑春;林京香;吴星;周诚;李河民

    目的构建含有adr、adw、ayw 3个血清型的HBV全基因组质粒,并进行测序及序列分析. 方法从HBsAg携带者的血清中扩增出S区克隆,筛选出adr、adw、ayw血清型的血清,然后扩增HBV的全基因组,对扩增产物进行克隆测序.利用DNAStar的MegAlign,Phylogenetic tree对HBV全基因序列以及分段序列进行比较和进化树分析. 结果构建了含有adw、adr、ayw 3种血清型的HBV全基因组质粒,代码分别为:H1、H2、H3,对3株完成序列测定,按照S区核苷酸顺序划分基因型分别为B、C、D,全序列分型显示H1、H2为B、C基因型,与按S区的分型一致,但H3为C基因型,与按S区的分型不同,进一步的序列分析表明H3为一株异常的基因型,按照S区和preS2区分型为D基因型,但是全基因组/C/P/X区的进化树分析,H3株均位于C基因型,提示该异常的基因型可能是由于D/C基因型间基因重组引起,对重组位点进行了分析:3181nt~10nt、799~834nt为可能的重组位点所在区. 结论 H3病毒株的发现进一步证明了HBV基因型间的基因重组,但澄清该问题需要在HBV感染的高流行区进一步的积累HBV异常基因型的全序列,以及发现新的基因型资料.

  • 一例输入性非典型肺炎患者病原体的分离鉴定及其变异性研究

    作者:张欣;李晖;郑夔;陈秋霞;万卓越;黄吉城;钟豪杰;周惠琼;黄平;张万里;刁丽梅;陈经雕;张勤奋;崔金明;黄小俊;张景强

    目的对一例输入性非典型肺炎病例的病原体进行分离鉴定,研究其变异情况,为该病的诊断和防治提供依据. 方法用Vero E6细胞对病人的咽拭标本进行分离培养,并对分离物使用电镜、间接免疫荧光(IFA)、巢式PCR及S基因核苷酸序列测定等方法进行分析. 结果在该病人的咽拭标本中,成功地分离到一株冠状病毒(F69),将部分S基因测序并与不同地区非典型肺炎病人分离株进行比较,表明分离到的毒株为一种新型冠状病毒. 结论目前存在冠状病毒的变异株,病毒核苷酸序列与广东省原发性SARS病人分离到的冠状病毒有所不同.

  • 共表达中国株HIV-1 gp120与hIL-6的重组鸡痘病毒研究

    作者:江文正;金宁一;李子健;张立树;王宏;金洪涛

    目的构建共表达中国株HIV-1 gp120与人白细胞介素6(IL-6)的重组鸡痘病毒. 方法分别将HIV-1 gp120基因和hIL-6基因插入到鸡痘病毒表达载体pUTAL复合启动子ATI-P7.5和P7.5串联启动子下游,构建重组鸡痘病毒表达质粒pUTA-GP-IL6.利用脂质体法将重组质粒和鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞.经BUdR加压筛选3次后,重组病毒分别用PCR、间接免疫荧光试验和Western blot进行鉴定,并进行小鼠免疫研究. 结果重组病毒基因组中可扩增出1.4kb大小片段,重组病毒感染细胞表面有绿色荧光物质,表达产物的Western blot分析表明重组病毒可表达gp120和hIL-6蛋白.重组病毒可刺激小鼠产生特异性体液免疫应答. 结论成功构建了共表达中国株HIV-1 gp120与hIL-6的重组鸡痘病毒,为研制HIV-1基因工程活载体疫苗提供有益的资料.

  • C3d-P28增强乙型肝炎病毒特异性基因免疫效果的研究

    作者:王立新;徐薇;关庆东;熊思东

    目的观察补体C3d-P28对基因免疫的调节作用及其不同拷贝数对调节作用的影响,为增强基因免疫效果寻求新方法. 方法 PCR法获得补体C3d-P28编码基因并以头尾串连方式将1~4拷贝C3d-P28编码基因克隆至pVAON33,构建pVAON33-P28.[1~4]重组质粒,然后将HBV-preS2/S编码基因分别插入pVAON33和pVAON33-P28.[1~4]质粒获得pVAON33-S2/S和pVAON33-S2/S-P28.[1~4]重组质粒.肌肉注射各重组质粒DNA(每只100μg/100μl)初次免疫小鼠,并以pVAON33为对照;12周后皮下注射HBsAg蛋白加强免疫各组小鼠,ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗-HBs-IgG. 结果 pVAON33-S2/S重组质粒免疫小鼠可诱导产生特异性抗-HBs-IgG,含不同拷贝C3d-P28编码基因的重组质粒可诱导更高的特异性抗体,其中pVAON33-S2/S-P28.4重组质粒诱导的抗体水平高(P<0.01).蛋白加强免疫后,含C3d-P28编码基因重组质粒免疫组抗-HBs-IgG迅速上升,并明显高于pVAON33-S2/S重组质粒免疫组(P<0.05),pVAON33-S2/S-P28.4重组质粒诱导的抗体仍维持高水平. 结论不同拷贝的C3d-P28能不同程度地增强HBV-preS2/S基因免疫诱导的特异性体液免疫及其蛋白加强后的回忆反应,其中4拷贝C3d-P28的增强作用较为显著.

  • EB病毒相关胃癌组织中病毒潜伏期基因表达的研究

    作者:罗兵;王云;王笑峰;梁华;黄葆华;丁守怡;西连寺刚

    Epstein-Barr virus(EBV)与多种人类恶性肿瘤如鼻咽癌、Burkitt淋巴瘤和免疫功能缺陷病人的淋巴组织过度增生性疾病等密切相关,近年来研究表明约2%~16%的胃癌组织EBV阳性.EBV具有潜伏感染的特点,通常认为EBV潜伏期基因如核抗原家族基因(EBNAs)和潜伏膜蛋白基因(LMP)1与病毒的细胞转化功能有关.明确EBV在肿瘤组织中的存在状态和表达活动,是研究其致癌机理的基础.

  • 含EBV-LMP2基因重组腺病毒疫苗的构建及其诱导CTL应答的初步探讨

    作者:左建民;周玲;王琦;曾毅

    目的构建包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗并探讨它在体内外的免疫性质. 方法采用pAdeasy-1系统构建包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗,并用IFA、PCR和TCID50等方法对其特异性进行鉴定.通过重组腺病毒感染人树突状细胞(DC),在体外活化自体T细胞;以及通过重组腺病毒感染小鼠淋巴细胞,皮下免疫同种小鼠,体内活化CTL评价其免疫效果. 结果通过PCR以及间接免疫荧光试验分别证实了病毒目的基因LMP2的存在以及蛋白在293细胞中的表达.采用TCID50方法,测定第6代的病毒滴度为2×108.体内外的免疫实验结果显示通过这两种方式均可以有效地引发针对EBV-LMP2的CTL反应. 结论包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗可以在体内外有效地引发CTL应答,这些资料为下一步临床应用含LMP2的重组腺病毒作为疫苗治疗和预防EBV相关肿瘤奠定了基础.

  • 56609株钩体lipL32基因的克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的初步表达

    作者:寇志华;孙树汉;施柯;郭瀛军;陈祖欢

    钩体病是一种临床表现多样的人兽共患疾病,致病性钩端螺旋体(钩体)根据交叉凝集反应被分为25个血清群和大约250个血清型.如此多血清型的钩体所引起的临床症状和体征复杂多样,经常造成误诊而延误治疗.因此,建立一种简单、快捷、敏感、特异的诊断方法很有必要.

  • 变形链球菌GbpA的GBD融合蛋白诱导SD大鼠产生免疫应答

    作者:吴补领;苏凌云;范继红;陆群

    目的研究变形链球菌葡聚糖结合蛋白A(glucan binding protein-A, GbpA)的GBD融合蛋白免疫SD大鼠时,其所诱导的血清和唾液特异性免疫反应. 方法用纯化的变形链球菌GbpA的GBD融合蛋白皮下免疫SD大鼠,免疫后间隔一定的时间收集大鼠的血清及唾液,间接ELISA检测血清及唾液中特异性抗GBD抗体. 结果 GBD融合蛋白免疫大鼠,可引起血清中IgG及唾液中IgA的显著提高.另外,GBD融合蛋白免疫大鼠,38d采血,血清中抗GBD抗体效价高,后逐渐降低. 结论变形链球菌GbpA的GBD融合蛋白具有免疫原性,可供研制防龋疫苗参考.

  • 靶向核糖核酸酶在体外抑制乙型肝炎病毒复制的研究

    作者:李英辉;刘军;薛采芳;丁劲;宫卫东;赵亚

    目的观察HBV靶向核糖核酸酶(targeted ribonuclease,TR)的体外抗病毒作用. 方法将包含HBV核心蛋白(HBVc)和人类嗜酸性粒细胞来源的神经毒素(hEDN)编码基因克隆入pcDNA3.1(-),构建HBV TR重组真核表达载体p/TR.构建包含HBV核心蛋白、人类嗜酸性粒细胞来源的神经毒素以及突变失活的HBV TR编码基因的重组真核表达载体p/HBVc、p/hEDN、p/TRmut (hEDN的Lys113→Arg,失去其RNase活性)作为对照.脂质体转染p/TR、p/HBVc、p/hEDN、p/Trmut、pcDNA3.1(-)进入2.2.15细胞.转染后,RT-PCR证实转染基因的表达,通过观察转染细胞的形态核MTT法检测转基因表达的细胞毒性.用固相放免法测定转染细胞培养上清HBsAg浓度. 结果转基因在2.2.15细胞内都有表达,且对细胞无毒性.与空转染组相比,pcDNA3.1(-)/TR转染组HBsAg含量下降58%;对照各质粒无此变化. 结论 TR在体外可以抑制HBV复制,同时对宿主细胞无毒性.TR可以作为一种新型的抗病毒制剂治疗乙肝病毒感染.

  • 结核病患者外周血T细胞亚群、mIL-2R与sIL-2R的测定

    作者:蔡茹;王健;李朝品;朱玉霞;杨庆贵

    采用生物素-链霉亲和素(BSA)系统检测85例结核病患者T细胞亚群及经PHA诱导前后其mIL-2R表达水平,用ELISA法测定其血清sIL-2R水平,同时选取健康献血员25名为正常对照,操作按说明书进行.资料分析采用t检验.

  • 抗人卵巢癌×抗人CD3双特异单链抗体介导的效应细胞在体外对卵巢癌细胞的杀伤作用

    作者:赵瑞;方敏;李骅;林晴;郭蔼光;薛菘;黄华樑

    目的研究双特异单链抗体(scBsAb)介导的Jurkat细胞(CD3+)及人外周血单个核细胞(PBMC)在体外对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞的杀伤活性,从而探讨其用于卵巢癌治疗的可能性. 方法以抗人卵巢癌×抗人CD3 scBsAb激活效应细胞,以SKOV3为靶细胞,用MTT法测定不同实验条件下的杀伤活性. 结果 (1) 以重组白细胞介素2(rIL-2)、抗CD3单克隆抗体、抗CD28重链单域抗体(VH)预刺激Jurkat及PBMC细胞比单纯用scBsAb激活效应细胞杀伤活性高;(2) 以Jurkat细胞或PBMC细胞作为杀伤细胞可得到相似的杀伤活性,高杀伤率均在75%左右;(3) 杀伤活性与scBsAb的浓度、作用时间及效靶比有关.对于Jurkat细胞,在抗体终浓度为21μg/ml,反应时间为48h,效靶比为10∶1时达到大杀伤率74.8%;对于PBMC细胞,在抗体浓度为20μg/ml,反应时间为72h,效靶比为1∶1时达到大杀伤率73.1%.(4) 多因子联合应用能有效提高杀伤活性. 结论 scBsAb在体外能够有效介导效应细胞杀伤肿瘤细胞,有明显的抗癌作用,具有潜在的应用前景.

  • 一氧化氮对哮喘气道细胞因子表达的调控作用

    作者:张宁;徐永健;张珍祥;李超乾;熊维宁;刘先胜

    目的探讨内源性一氧化氮(NO)对支气管哮喘肺组织核因子-κB(NF-κB)活性的调节作用及NO对哮喘关键性炎症介质--白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、gamma干扰素(IFN-γ)的调控作用是否通过NF-κB介导. 方法采用病理学观察、免疫组织化学技术、原位组织杂交、电泳迁移率改变试验(EMSA)、NO代谢产物测定等方法,应用NO供体左旋精氨酸(L-Arg)、一氧化氮合酶抑制剂硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)、NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)作为工具药,从哮喘动物模型的整体水平上观察内源性NO对支气管哮喘肺组织NF-κB蛋白表达和活性的影响及其对IL-4、IL-5、IFN-γ mRNA表达的影响. 结果整体应用大剂量的L-Arg能使哮喘气道增多的炎性细胞减少(P<0.05),NAME能拮抗这一作用(P<0.05),PDTC亦能使哮喘气道增多的炎性细胞减少(P<0.05);L-Arg能使哮喘气道P65表达及NF-κB的活性降低(P<0.05),NAME能拮抗这一作用(P<0.05),PDTC亦能使哮喘气道P65表达及NF-κB的活性降低(P<0.05);大剂量的L-Arg还能使哮喘气道表达增高的IL-4、IL-5 mRNA的表达降低(P<0.05),而对IFN-γ无影响(P>0.05),PDTC亦能使哮喘IL-5 的表达降低(P<0.05),而对IL-4、IFN-γ无影响(P>0.05);哮喘肺组织p65核阳性染色平均吸光度(A)值、肺组织EMSA DNA结合条带灰度值与肺组织均浆NO代谢产物NO-2含量呈显著负相关(r分别为-0.89、-0.84,P<0.05).哮喘组肺组织核蛋白NF-κB结合活性与IL-4 mRNA的表达量无明显相关关系(r=0.38,P>0.05);与IL-5 mRNA的表达呈显著正相关(r=0.90, P<0.05,);与IFN-γ mRNA的表达无明显相关(r=-0.24,P>0.05);哮喘NO工具药组肺组织NO-2含量与IL-4 mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.94,P<0.05,);与IL-5 mRNA表达呈显著负相关(r=-0.89,P<0.05);与IFN-γ mRNA表达的相关性不明显(r=0.19,P>0.05). 结论高浓度的内源性NO能对哮喘气道炎症反应发挥反馈性抑炎效应;NO能通过抑制NK-κB而负调节IL-5基因的表达,NO的抑炎效应可能与此有关;NO对IL-4基因的表达亦有负调控作用,但不是由NF-κB介导的.

  • 肌动蛋白样分子参与TNFRⅡ介导的TM-TNF-α杀瘤活性的研究

    作者:郑芳;李卓娅;李新平;姜晓丹;冯玮;徐勇;熊平;龚非力

    目的寻找并研究参与TM-TNF-α杀瘤的协同分子,进一步揭示TM-TNF-α发挥生物学作用的特征,阐明其与S-TNF-α功能差异的分子机制. 方法利用免疫共沉淀法、质谱分析、Western blot及细胞毒实验探索参与TM-TNF-α杀瘤功能的协同作用分子并确定其性质. 结果 TM-TNF-α免疫共沉淀产物中发现一相对分子质量(Mr)为43×103蛋白分子,用质谱分析及Western blot证实该分子属于肌动蛋白家族;用抗肌动蛋白抗体封闭效应细胞和/或靶细胞后,TM-TNF-α对主要表达TNFRⅡ的肿瘤细胞HL-60的杀伤作用显著下降,而对主要表达TNFRⅠ的肿瘤细胞MCF-7则无影响. 结论 Mr为43×103的肌动蛋白样分子可能参与并增强TM-TNF-α通过TNFRⅡ介导的杀瘤功能.

  • 树突状细胞诱导的CTL抗乙型肝炎病毒效应

    作者:李用国;兰英华;梁增伟;何维;任红

    目的研究乙肝表面抗原(HBsAg)负载的树突状细胞疫苗在抗乙肝病毒中的作用. 方法从健康人外周血中分离出单核细胞,在GM-CSF和IL-4的作用下培养7d诱导出DC,然后以DC为刺激细胞在体外诱导出HBsAg特异性CTL;将携有HBV-S基因的pLXSN/S重组质粒,电击导入肝癌细胞系(HepG2),建立表达HBsAg的靶细胞模型HepG2-S;用DC激活的HBsAg特异性CTL与HepG2-S细胞同时接种于BALB/c裸鼠或用HBsAg特异性CTL治疗HepG2-S荷瘤裸鼠,观察肿瘤的发生和生长情况. 结果在接种后的38d内,治疗组肿瘤明显比对照组小,差异有显著性(P<0.05),而且治疗组有3只荷瘤鼠肿瘤消退(60%). 结论 DC激活的HBsAg特异性CTL细胞对HepG2-S移植瘤有治疗作用.

  • SARS疫苗研究及与其关联的免疫问题

    作者:赵铠

    [编者按] 疫苗是遏制传染病流行的有效武器.1910年东北三省发生了肺鼠疫的流行,由于肺鼠疫是飞沫传播,不易隔离,疫情蔓延迅速,难以控制,一年多的时间病死近四万人.当时政府迫于形势派请在细菌学、流行病学颇有造诣的伍连德博士前往疫区组织防疫工作.伍博士经过临床观察、细菌学试验、病理解剖从流行病学的观点全面分析,采取了严格隔离患者--切断传染源,焚烧尸体--消灭病原,接种疫苗--减少易感人群.这些措施行之十分有效,经过努力控制了大流行.在传染病流行时国内外资料均证明接种疫苗减少易感人群是切断流行的重要一环,人们在与传染病斗争中总是考虑开发有效的疫苗.研制SARS疫苗必然是当前的热门课题.

中华微生物学和免疫学分期目录
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