中华微生物学和免疫学杂志
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 중화미생물학화면역학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.59
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0254-5101
- 国内刊号： 11-2309/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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贵阳地区224例哮喘患儿IL-17基因多态性及其与血清TIgE水平的相关性研究
目的 探讨白细胞介素17A(interleukin-17A,IL-17A)基因启动子区-152G/A和IL-17F基因外显子区7488T/C位点单核苷酸多态性(SNPs)对儿童支气管哮喘及血清总IgE(TIgE)水平的影响.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法(PCR-RFLP)检测224例哮喘组儿童[男性152例,女性72例,男女比例为2.11:1,平均年龄(6.11±3.27)岁]和150例健康对照组儿童[男93例,女57例,男女比例为1.63:1,平均年龄(5.61±3.55)岁]IL-17A-152G/A位点和IL-17F 7488T/C位点的基因多态性,并选取部分样本进行PCR产物测序,对酶切结果进行验证;采用贝克曼库尔特实验系统IMMAGE800特定蛋白分析仪以散射比浊法自动检测哮喘组和对照组儿童血清TIgE水平.结果 IL-17A-152G/A在哮喘组和对照组均检出AA、AG、GG三种基因型,此位点的基因型频率分布在两组间的差异有统计学意义(P<0.05).IL-17A-152G/A位点的A变异等位基因携带者患病的危险性高于非携带者,差异有统计学意义(P<0.05).IL-17F 7488T/C位点在哮喘组和对照组均检出TT、TC、CC三种基因型,该位点两组基因型和等位基因的频率分布差异有统计学意义(P<0.05);哮喘组和对照组血清TIgE水平比较差异有统计学意义(P<0.05);IL-17A-152G/A位点哮喘组AA、AG、GG三种基因型对应血清TIgE水平比较差异有统计学意义(P<0.05),AA基因型高于AG基因型(P=0.001)和GG基因型(P=0.001);对照组3种基因型间血清TIgE间比较差异无统计学意义.IL-17F 7488T/C位点哮喘组和对照组TT、TC、CC三组基因型间血清TIgE水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);结论 IL-17基因两位点多态性与贵阳地区儿童哮喘的发病有相关性.IL-17A-152G/A多态性位点是贵阳地区哮喘的重要候选基因;变异等位基因A与血清TIgE水平升高相关;IL-17F 7488T/C多态性位点是贵阳地区哮喘的重要候选基因;C等位基因可能对哮喘有弱保护作用;该位点多态性不影响血清TIgE水平的变化.
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苦艾提取物对树突状细胞成熟及其功能的影响
目的 检测苦艾(Artemisia absinthium L.)提取物对树突状细胞(dendritic cell,DC)成熟和功能的影响.方法 制备苦艾水提物(Artemisia absinthium water extract,AAW)和醇提物(Artemis-ia absinthium ethanol extract,AAE),用含不同多糖浓度AAW(5μg/ml、50μg/ml、150μg/ml)和含不同黄酮浓度AAE(0.6μg/ml、3μg/ml、6μg/ml)处理DCs,通过流式细胞术检测AAW及AAE对DC活性、抗原吞噬能力和DC成熟的影响.酶联免疫吸附法检测DC分泌的细胞因子水平,Western blot检测核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3(janus kinase/signal transducer and activator of transcription,JAK2/STAT3)信号通路关键分子的活化水平.结果 AAW促进DC的成熟,显著降低DC的抗原吞噬能力,提高白细胞介素-12p40(interleukin-12p40,IL-12p40)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌水平.AAE显著增强DC表面共刺激分子的表达,降低DC的抗原吞噬能力,对DC的细胞因子水平没有影响,但是显著降低了细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的TNF-α、IL-12p40和IL-6水平.进一步研究表明,AAW和AAE能激活p38、细胞外信号调节蛋白激酶(extra-cellular signal regulated kinase,ERK)、IKKα/β、NF-κBp65及JAK2的磷酸化水平,AAE还能激活c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)的磷酸化水平,但是AAE与LPS联用抑制了LPS激活的NF-κB抑制蛋白(inhibitor of NF-κB,IκB-α)、IKKα/β、NF-κBp65、p38、ERK及JAK2的磷酸化.结论 AAW具有免疫增强作用,AAE具有抗炎作用.
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1例人感染H7N4禽流感病毒分子溯源研究
目的 对1例人感染H7 N4禽流感病毒进行分子诊断和溯源.方法 通过荧光定量PCR法对标本进行流感病毒分型检测.在下一代测序平台上对原始标本和病毒分离物进行全基因组测序,利用BLASTs、ClustalX和MEGA 6.1等软件进行序列比对和系统进化分析.结果 2018年1月检测到1例人感染H7 N4亚型禽流感病毒病例.从患者家养的鸡鸭中分离到7株高度同源的病毒.病毒是一种新的基因重配H7 N4亚型禽流感病毒,其8基因节段来源于欧亚大陆的野生水禽.病毒HA蛋白的裂解位点含有1个碱性氨基酸精氨酸(R),属于低致病性禽流感病毒.HA蛋白的受体结合位点226～228位氨基酸是谷氨酰胺-丝氨酸-甘氨酸(Q-S-G氨基酸排序按照H3亚型HA序列),保留了对禽类受体 α2-3半乳糖苷唾液酸(SAα2-3Gal)的结合活性.与禽分离病毒PB2蛋白627E不同,人病毒的PB2蛋白627位氨基酸为赖氨酸(K),增强了该病毒对人的适应力.结论 报道了一起人感染H7 N4禽流感病毒病例,揭示中国南方庭院式养殖模式为禽流感病毒的跨种传播提供了便利.
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青岛市柯萨奇病毒A12型VP1区基因特征及相关重症手足口病临床表现
目的 了解2011—2016年柯萨奇病毒A12型(CV-A12)青岛分离株的基因特征及所致重症手足口病临床特点.方法 人横纹肌肉瘤(human rhabdomyosarcoma,RD)细胞和人喉癌(human laryngeal carcinoma,Hep-2)细胞分离自2011—2016年青岛地区儿童手足口病及部分疱疹性咽峡炎和流感样病例咽拭子标本中非EV-A71、非CV-A16毒株,半巢式反转录PCR扩增肠道病毒部分VP1序列,结合序列分析鉴定CV-A12毒株;对全部CV-A12分离株进行VP1基因全长序列扩增及基因序列测定,以MEGA7.0软件进行遗传进化及分子特征分析;收集CV-A12所致重症手足口病临床资料并分析其特征.结果 青岛市手足口病、疱疹性咽颊炎和儿童流感样病例中CV-A12分离率分别为0.3％(18/6798)、1.2％(2/169)和0.1％(1/676).CV-A12感染所致手足口病在2013年及以前以轻症病例为主(84.6％,11/13),2013年以后以伴有神经系统症状的住院重症病例为主(100％,5/5).VP1区遗传进化分析显示,全球CV-A12分为A、B两个基因型,2011—2016年青岛地区毒株均属于B基因型且88.9％(16/18)位于B2亚型;2013年后致手足口病重症病例毒株均为B2亚型B2b分支毒株.结论 CV-A12是青岛儿童手足口病、疱疹性咽颊炎和流感样疾病的病原之一;B2亚型毒株为近年来青岛CV-A12主要流行毒株,其感染所致手足口病能导致神经系统损害.
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HSV1和HSV2对呼吸道及阴道上皮细胞的感染及其诱导的细胞内固有免疫应答信号分子表达特征分析
目的 探讨1型和2型单纯疱疹病毒(HSV1和HSV2)感染对诱导呼吸道及生殖器上皮细胞中固有免疫信号分子表达的影响,以期初步了解单纯疱疹病毒原发性感染部位——上皮组织中的感染特征以及病理学特性.方法 利用光学显微镜及扫描电镜观察病毒感染人胚肺细胞KMB17及人阴道上皮VK2细胞后,细胞形态及内部结构的变化;采用蚀斑法和微孔细胞病变法,并结合实时定量PCR,检测病毒在两种细胞中的增殖情况;使用实时定量PCR方法分析病毒感染两种细胞后,诱导的固有免疫信号分子的表达情况.结果 HSV1和HSV2均能够感染KMB17及VK2细胞,并在12 h后出现明显的细胞病变及内部微结构破坏损伤的现象.两种病毒在两种细胞单层上均能够形成形态各异的蚀斑,但HSV2在KMB17细胞和VK2细胞上增殖速度慢于HSV1.两种病毒感染两种细胞后,诱导的固有免疫相关的信号分子表达特征有相应的差别.结论 HSV1和HSV2均能以动力学增殖模式感染呼吸道及阴道上皮细胞,两种病毒在两种细胞上的增殖特性稍有区别,但其诱导固有免疫应答信号分子的表达特征有显著差异.
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搭载小鼠IL-33重组溶瘤病毒的构建及其对肿瘤协同抑制作用的研究
目的 构建重组溶瘤病毒vvmIL33,靶向感染肿瘤细胞后能稳定分泌小鼠IL-33蛋白(mIL-33),同时研究观察其对肿瘤的协同抑制作用.方法 采用PCR法扩增小鼠IL-33基因序列,将其插入真核表达载体中构建pCMS1-mIL33重组子;脂质体法将重组子导入已被亲本溶瘤病毒(vJS6)感染的细胞内,重组获得重组溶瘤病毒vvmIL33,经流式分选、纯化重组溶瘤病毒;酶联免疫吸附法(ELISA)检测vvmIL33感染肿瘤细胞后培养上清中mIL-33蛋白的含量;重组溶瘤病毒vvmIL33和亲本病毒vJS6分别感染肿瘤细胞,通过空斑形成试验和MTS试剂盒分别检测溶瘤病毒的复制能力及其对肿瘤细胞的溶解能力;经T细胞共培养实验观察vvmIL33感染肿瘤细胞后诱导T细胞的抗肿瘤能力.结果 重组子pCMS1-mIL33酶切电泳结果表明成功插入了mIL-33基因;与对照组相比,vvmIL33感染MC38细胞后能高剂量稳定分泌mIL-33蛋白;空斑形成试验结果显示vvmIL33或vJS6感染CV1、MC38细胞在各个时间点产生相似量的病毒,差异无统计学意义(P>0.05);不同感染复数下(MOI),vvmIL33感染后对肿瘤细胞的溶解能力与vJS6相似,差异无统计学意义(P>0.05);经T细胞共培养实验后发现,相比较vJS6组,vvmIL33感染MC38细胞组中T细胞所产生的INF-γ蛋白浓度明显升高(P<0.05),同时诱导T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用也明显增强(P<0.05).结论 成功构建了重组溶瘤病毒vvmIL33,mIL-33的表达不损害溶瘤病毒的复制能力和诱导杀肿瘤细胞溶解的能力,溶瘤病毒搭载mIL-33增强了T细胞的免疫效应,增加了抗肿瘤作用.
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B族链球菌感染致不良妊娠结局机制的研究进展
B族链球菌(group B Streptococcus,GBS),可在妊娠期妇女的阴道内定植,并上行感染至子宫及胎儿,是导致早产等不良妊娠结局的重要感染性因素.GBS通过产生黏附和侵袭因子、溶血素及透明质酸酶等毒力因子,促进其阴道定植并逃避宿主免疫清除.宿主对GBS的免疫应答,可导致一系列炎性因子的释放,促发胎膜早破、早产及胎儿损伤等事件的发生.本文对GBS阴道定植并上行感染引起不良妊娠结局的致病机制作一综述.
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重组诺如病毒GⅡ.17型类病毒颗粒免疫学效果初步评价
目的 评价重组诺如病毒(Norovirus,NoV)GⅡ.17基因型VP1蛋白类病毒颗粒(virus like particle,VLP)的免疫学效果.方法 对纯化后的GⅡ.17型VP1 VLP进行SDS-PAGE和Western blot鉴定,利用透射电镜和动态光散射对VLP大小、形态及粒径分布情况等进行检测,将GⅡ.17型VP1 VLP与含铝佐剂吸附后免疫BALB/c小鼠,利用酶联免疫吸附试验(enzyme linked im-munosorbent assay,ELISA)和组织血型抗原(histo-blood group antigen,HBGA)-VLP阻断试验检测小鼠血清特异性抗体水平和阻断抗体活性,并分析GⅡ.17型VP1 VLP蛋白免疫后血清与GⅠ.1和GⅡ.4 VP1 VLP蛋白的交叉反应和交叉阻断情况.结果 纯化后的重组NoV GⅡ.17型VP1 VLP蛋白纯度大于90％,Western blot检测到特异性条带.VLP直径在30～50 nm之间,形态良好,分布均匀,颗粒形态与天然病毒类似.免疫小鼠血清可检测到高滴度特异性抗体,且对GⅠ.1和GⅡ.4型VP1 VLP具有一定程度的交叉反应,但是无交叉阻断作用.结论 应用含铝佐剂的GⅡ.17型VP1 VLP免疫小鼠,可诱发较高滴度的HBGA阻断抗体,可作为诺如病毒疫苗的候选靶抗原.
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不同氢氧化铝佐剂和吸附方式对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗免疫效果的影响
目的 研究不同氢氧化铝佐剂含量、两种吸附方式以及不同厂家氢氧化铝佐剂对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(DTaP-sIPV)免疫效果的影响.方法 用0.42 mg/ml、0.47 mg/ml、0.52 mg/ml终浓度的铝吸附相同剂量的百白破5种抗原,用顺序吸附和分别吸附两种方式吸附抗原,使用进口和自制氢氧化铝,比较各抗原的吸附率、各抗原抗体水平以及百日咳、破伤风、白喉疫苗效价.结果 0.52 mg/ml铝含量组吸附率高,0.42 mg/ml铝含量组吸附率低;顺序吸附和分别吸附两种吸附方式没有明显差异;使用进口氢氧化铝佐剂和自制氢氧化铝佐剂组分抗体反应各有不同,差异无统计学意义.结论 0.52 mg/ml铝含量、自制氢氧化铝佐剂和分别吸附的方式适用于DTaP-sIPV疫苗的制备.
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免疫球蛋白不同注射部位对狂犬病疫苗免疫效果的影响
狂犬病是一种暴露后致死性疾病,但是可以通过及时的暴露后预防( PEP)进行100％的规避. 对于Ⅲ级暴露来说,人用狂犬病免疫球蛋白( HRIG)是 PEP的重要组成部分. 探究HRIG在免疫效应中的作用对提高 PEP 的有效利用具有一定的现实意义. 国内外学者曾针对狂犬病疫苗( PVRV )和 HRIG联合应用效果展开研究,但就 HRIG 全身免疫对PVRV免疫效果的影响仍不清楚. 因此,本实验通过 HRIG 联合 PVRV 按照Ⅲ级暴露后免疫程序对小鼠进行不同部位系统注射,以研究 HRIG 对于 PVRV的免疫效果的影响.
关键词： -
免疫荧光法检测杆状病毒滴度的建立及验证
目的 建立并优化生产用重组杆状病毒滴度间接免疫荧光检测方法,并进行初步验证.方法 将96孔板贴壁培养的SF9细胞,接种杆状病毒溶液共孵育一定时间后间接免疫荧光法显色.通过对细胞使用浓度、孵育时间及优化显色处理条件(固定液、封闭液、抗体种类及使用条件),建立杆状病毒滴度间接免疫荧光检测方法,进行特异性、准确性、重复性和中间精密度验证,并与杆状病毒滴度酶联检测试剂盒检测结果进行比较.结果 细胞使用浓度为0.6×106个/ml、共孵育时间为3d;显色条件优化后确定了冰冻甲醛-丙酮溶液为适固定溶液和5％的山羊血清封闭液,一抗和二抗稀释比例均为1:200、37℃温育1 h时显色效果佳.用该方法检测不同样品,仅杆状病毒组出现特异性荧光斑点.本方法与试剂盒酶联法检测结果趋势相同,其线性相关系数R2=0.996,表明两种方法具有良好的正相关性;重复性及中间精密度验证结果的变异系数CV均<10％.结论 建立了重组杆状病毒滴度的间接免疫荧光检测方法,该方法具有良好的特异性、准确性、重复性和中间精密度,可用于生产中病毒滴度的检测.
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黏菌素耐药细菌mcr-1基因TaqMan PCR快速检测方法的建立
目的 建立一种快速灵敏准确的分子检测方法用来检测临床分离菌株中的mcr-1基因.方法 根据mcr-1基因的序列设计一对特异性引物和一条TaqMan探针,同时构建含有mcr-1基因片段的重组质粒作为阳性标准品,采用TaqMan探针荧光定量PCR方法检测耐药基因mcr-1,并对方法的敏感性、重复性和特异性进行评价.结果 TaqMan探针荧光定量PCR结果显示起始模板量与Ct值之间存在良好的线性关系(R2>0.999),检出下限为10拷贝/μl,比常规PCR敏感性高100倍;特异性检测显示只有含mcr-1基因的菌株结果为阳性,其余菌株为阴性;组内及组间重复性试验的变异系数均小于1％.利用所建立的方法对150株临床分离的耐药菌株进行检测,检测到2株菌株携带mcr-1耐药基因,2株菌株鉴定均为大肠杆菌.结论 建立的TaqMan探针荧光定量PCR检测耐药基因mcr-1的方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的优点,可用于临床检验上特异性检测携带mcr-1基因的临床耐药菌株,为临床药物治疗提供更好的依据.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
