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LPS刺激来自人单核细胞的树突状细胞在调节自体CD4+CD25+T细胞活性作用研究
树突状细胞(DC)是现今被认为具潜能的专职抗原呈递细胞.应用不同方法在体内诱导细胞毒T细胞(CTL)来识别肿瘤相关抗原的肿瘤免疫治疗研究已有报告.然而,在体内免疫治疗的有效性可能仅限制在局部或系统抑制CTL产生和功能.为了检测LPS刺激人单核细胞的DC来抑制自体CD4+CD25+T细胞能力,使用HLA-A2限制性p53264-272肽作为肿瘤抗原,用LPS(DC-LPS+)或不用LPS(DC-LPS-)产生的DC分别与自体T细胞共同培养.结果显示:在DC-LPS+活化的T细胞的CD4+CD25+T细胞群比DC-LPS-活化的T细胞要低.这个结果提示,DC-LPS+与CD4+CD25+T细胞群有关联,而且这种特性可能是由于T细胞对肿瘤相关抗原的调节作用.
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CD4+CD25+调节性T细胞在川崎病免疫发病机制中的作用
目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞在川崎病(KD)免疫发病机制中的作用.方法 急性期KD患儿25例,正常同年龄对照组25例,KD患儿分别于静脉丙种球蛋白(IVIG)治疗前后直接取血备检,未加任何体外丝裂原刺激培养.采用流式细胞术分别检测外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例及CD14+细胞表面共刺激分子的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及荧光定量PCR检测外周血CD4+T细胞中Foxp3、CTLA-4和GITR基因mRNA的表达.结果 急性期KD患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例明显低于同年龄对照组(P＜0.01),IVIG治疗后显著上升(P＜0.01);急性期KD患儿外周血CD4+T细胞中Foxp3、CTLA-4和GITR基因mRNA表达水平均明显低于正常对照组(P＜0.01),IVIG治疗后均有不同程度的恢复(P＜0.01);急性期KD患儿CD14+细胞明显过度表达CD80及CD86等共刺激分子(P＜0.01),IVIG治疗后CD80及CD86表达均显著下降.结论 急性期KD患儿CD4+CD25+调节性T细胞数量减少可能与KD免疫调节功能紊乱有关.
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急性期川崎病Foxp3基因甲基化改变及意义初探
目的 探讨急性期川崎病(KD)Foxp3基因甲基化状态及其在KD免疫发病机制中的作用.方法 急性期KD患儿30例,正常同年龄对照组18例,KD患儿分别于静脉丙种球蛋白(IVIG)治疗前后直接取血备检.甲基化特异性定量PCR(MSQP)检测CD4+T细胞Foxp3基因启动子、调节性T细胞(Tr)特异性甲基化区(TSDR)CpG岛甲基化状态;流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Foxp3+Tr的比例;荧光定量PCR检测CD4+T细胞Foxp3、CTLA4、GITR、LAG3、CCR8、UBD、LGALS3等基因mRNA表达.结果 (1)急性期KD患儿CD4+T细胞Foxp3基因启动子CpG岛非甲基化水平明显低于同年龄对照组(P＜0.01),经IVIG治疗后明显升高(P＜0.01);TSDR区CpG岛非甲基化水平各组间差异无统计学意义(P＞0.05);(2)急性期KD患儿CD4+CD25+Foxp3+Tr细胞比例及CD4+T细胞Foxp3 mRNA表达水平明显低于正常对照组(P＜0.01),且与Foxp3基因启动子CpG岛非甲基化水平呈正相关(CD4+CD25+Foxp3+Tr:r=0.76,P＜0.01;Foxp3:r=0.89,P＜0.01),IVIG治疗后显著上升(P＜0.01);(3)急性期KD患儿CD4+CD25+Foxp3+Tr细胞相关因子CTLA4、GITR、LAG3和CCR8等基因mRNA水平显著降低(P＜0.01),IVIG治疗后均有不同程度的恢复(P＜0.01);Foxp3依赖性分子UBD和LGALS3表达水平亦低于正常对照组(P＜0.01),IVIG治疗后基本恢复至正常水平(P＜0.01).结论 急性期KD患儿Foxp3基因启动子非甲基化水平低下可能与KD免疫调节功能紊乱有关.
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CD4+CD25+调节性T细胞的一般特性及其在银屑病发病中的作用
CD4+CD25+调节性T细胞是一组具有免疫调节作用的T细胞群,对于维持机体免疫耐受和免疫应答稳态具有非常重要的作用.越来越多的研究表明,银屑病是多基因遗传背景下T细胞介导的免疫性疾病,CD4+CD25+调节性T细胞的免疫反应及其分泌的细胞因子在银屑病的发病中有着重要作用.本文主要就CD4+CD25+调节性T细胞的一般特性及其在银屑病发病机制中作用的研究进展作一综述,帮助我们更深入地了解银屑病的发病机制并为今后临床诊断和治疗提供依据.
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1型糖尿病患者外周血中CD4+CD25+与CD8+CD28-调节性T细胞水平的研究
流式细胞仪检测1型糖尿病(T1DM)患者外周血CD4+CD25+与CD8+CD28-调节性T细胞的水平,发现其外周血CD4+CD25+ T淋巴细胞水平[(2.02±0.43)%]显著低于2型糖尿病(T2DM)组[(6.79±1.75)%]和健康对照(NC)组[(7.84±1.45)%],而CD8+CD28-调节性T细胞水平三组间无差异.
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小鼠肝癌模型中CD4+CD25+调节性T细胞数量的改变和Foxp3的表达
调节性T淋巴细胞(regulatory T cell,Treg)是一类具有独特免疫调节功能的T淋巴细胞亚群.近年来,国内外认为Treg是形成肿瘤免疫耐受的关键细胞.Foxp3是一种新发现的转录因子,在Treg细胞上特异性表达,且在Treg细胞的发育和功能卜是必需的[1].
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门静脉高压症脾功能亢进患者脾脏和外周血中CD4+CD25+CD1271ow/-调节性T细胞表达的研究
本研究通过流式细胞术检测门静脉高压症( portal hypertansion,PHT)脾亢患者外周血及脾脏组织中CD4+CD25+ CD127low/-调节性T细胞(CD4+ CD25+ CD127low/-Treg)的表达情况,探讨PHT脾亢患者脾脏免疫功能变化的可能机制,从而为PHT脾亢患者脾脏免疫功能的评估、具体手术方式的选择提供理论参考.
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中国HCV/HIV合并感染者淋巴细胞CD25表达和血清IP-10的研究
目的 研究淋巴细胞表面受体CD25和血清干扰素诱导蛋白10(IP-10),在丙型肝炎病毒(HCV)单纯感染,人类免疫缺陷病毒(HIV)单纯感染和HCV/HIV合并感染中的表达及意义.方法 采用流式细胞术,检测HCV感染组(n=21)、HIV感染组(n=14)、HCV/HIV感染组(n=28)及正常对照组(n=30),T淋巴细胞表面CD25的表达,ELISA方法检测血清IP-10含量.结果 血清IP-10水平在HCV感染组、HIV感染组和HCV/HIV合并感染组都明显升高,HIV感染组及HCV/HIV合并感染组CD4+T细胞表面CD25表达显著降低(P＜0.01);HCV感染组CD4+T细胞表面CD25表达轻度升高,但差异无统计学意义.结论 中国HCV/HIV合并感染与CD4+T细胞CD25表达及血清IP-10水平密切相关.
关键词： CD4+CD25+ 调节性T细胞 IP-10 HCV/HIV合并感染 -
慢性丙型肝炎患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞与病毒载量和肝功能损害的相关性研究
目的：研究慢性丙型肝炎（CHC）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞与丙型肝炎病毒（HCV）－RNA载量和丙氨酸转氨酶（ ALT ）活性的相关性。方法流式细胞术计数66例CHC 患者和30例健康对照者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞，实时荧光PCR检测HCV－RNA载量，乳酸脱氢酶法检测ALT浓度。结果 CHC患者外周血CD4＋CD25＋调节性 T 细胞显著高于健康对照组（ P ＜0．01），且随着 HCV－RNA 载量增高，患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞含量逐渐升高（P＜0．001），且与HCV－RNA载量取对数后呈正相关（r＝0．603，P＜0．01），与ALT水平呈正相关（r＝0．638，P＜0．01）。结论 CHC患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞显著升高，与HCV－RNA载量和ALT的升高相关性具有统计学意义。提示CD4＋CD25＋调节性T细胞可能参与丙型肝炎的进展，为丙型肝炎的诊疗研究提供了新的思路。
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恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞CD25的测定与临床检验学研究
目的 探讨恶性肿瘤患者T淋巴细胞CD25+水平的临床意义.方法 用流式细胞仪检测70名正常人和274例恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+和CD8+CD25+水平.结果 恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+水平比正常人高,差异有统计学意义(P < 0.05);恶性肿瘤患者外周血CD8+CD25+水平与正常人比较,差异无统计学意义(P > 0.05).其中,食管癌、肝癌和肺癌的CD4+CD25+水平与正常人比较,差异有统计学意义(P < 0.05);肠癌、胃癌和鼻咽癌的CD4+CD25+水平与正常人比较,差异无统计学意义(P > 0.05).结论 恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25水平的增高可作为恶性肿瘤免疫诊断的参考指标.
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FOLFOX方案化疗对胃癌术后患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞细胞增殖及功能的影响
目的 探讨FOLFOX方案化疗对胃癌术后患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg细胞)比例及功能的影响.方法 选择43例胃癌术后化疗患者,于化疗前1天、化疗结束后第5天采集外周血.采用流式细胞法检测外周血Treg细胞的比例；RT - PCR法检测外周血Treg细胞FoxP-3 mRNA表达水平；将分选的Treg细胞和CD4+ CD25 -T细胞按单纯Treg细胞组、1∶1混合细胞组,单纯CD4+ CD25 -T细胞组培养,3H - TdR掺入法检测Treg细胞体外抑制CD4+ CD25 -T细胞增殖的能力.结果 43例胃癌患者化疗前1天外周血Treg细胞占CD4+T细胞的比例为17.63％±6.31％,化疗后降至13.79％±4.82％ (P ＜0.01)；化疗后FoxP -3表达水平较化疗前显著下降(P＜0.01)；化疔后Treg细胞对CD4+ CD25 -T细胞的增殖抑制率由化疗前的54.64％±5.15％下降至24.63％±2.34％ (P ＜0.01).结论 FOLFOX化疗方案可减少胃癌患者外周血Treg细胞数量,下调其表面标志物FoxP3基因的表达水平,减弱Treg细胞的免疫抑制功能,有利于诱生抗肿瘤免疫效应.
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支气管哮喘患者外周血CD4+、CD8+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞表达水平与肺功能的相关性研究
目的 探讨支气管哮喘患者外周血CD4+、CD8+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞表达水平与肺功能的关系.方法 收集2012年3月～2015年6月北京市房山区中医医院呼吸科收治的支气管哮喘患者106例,其中急性发作(急性发作组)患者59例,非急性发作(非急性发作组)患者47例,同时以72例健康者作为对照组.对所有入组研究对象进行肺活量(VC),一秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC％)及呼气流量峰值(PEF)检查,采用流式细胞仪检测外周血CD4+、CD8+T细胞及CD4+CD25+调节性T细胞水平,并对急性发作期患者CD4+、CD8+T细胞、CD4+CD25+Treg水平与肺功能的相关性进行分析.结果 ①非急性发作组及急性发作组的肺功能指标与对照组比较均显著降低(P＜0.05);与非急性发作组比较,急性发作组患者肺功能指标均明显偏低(P＜0.05).②非急性发作组及急性发作组患者CD4+T细胞水平、CD4+CD25+Treg水平及CD4+/CD8+比值明显低于对照组,CD8+T细胞水平、CD4+CD25+Treg/CD4+比值显著高于对照组(P＜0.05);与非急性发作组比较,急性发作组CD4+T细胞水平、CD4+CD25+Treg水平及CD4+/CD8+比值显著下降,CD8+T细胞水平、CD4+CD25+Treg/CD4+比值显著上升(P＜0.05).③急性发作期患者外周血CD4+T细胞水平与肺功能指标均呈正相关(r=0.47、0.50、0.45,P＜0.05);CD8+T细胞水平与肺功能指标均呈负相关(r=-0.54、-0.49、-0.56,P＜0.05);CD4+CD25+Treg水平与肺功能指标均呈正相关(r=0.39、0.42、0.40,P＜0.05).结论 CD4+、CD8+T细胞及CD4+CD25+调节性T细胞在支气管哮喘疾病的发生、发展过程中发挥着重要作用,其水平可用来评估支气管哮喘病情的严重程度.
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CD4+CD25+调节性T细胞及其相关基因Foxp3在非小细胞肺癌患者外周血中的变化
目的:探讨非小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)数量变化及其相关基因Foxp3 mRNA的表达改变.探讨CD4+CD25+调节性T细胞在诱导肿瘤免疫耐受中的作用.方法:采用流式细胞术检测患者外周血中CD4%D25+调节性T细胞数量变化:采用半定量RT-PCR方法检测肺癌患者外周血PBMC中Foxp3 mRNA的表达水平.选取30名非肿瘤患者作为对照.结果:肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量明显高于正常组(P＜0.05);Foxp3 mRNA在肺鳞癌和肺腺癌患者外周血PBMC中的表达明显增强(P＜0.05).结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能在肺癌免疫耐受中发挥重要作用.
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CD4+CD25+调节性T细胞在儿童特发性血小板减少性紫癜患者中的表达及意义
目的 探讨儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达及意义.方法 用流式细胞术检测27例ITP患儿和21例健康儿童外周血T淋巴细胞亚群的比例,以及CD4+T淋巴细胞表面CD25、FasL和Fas的表达率.结果 ITP患儿CD3、CD4、CD4/CD8比值与对照组比较显著降低,CD4+CD25+调节性T细胞明显减少,CD4+CD25-细胞无明显改变,CD4+FasL+增多,CD4+Fas+减少.结论 儿童ITP患者CD4+CD25+调节性T细胞显著减少,破坏自身免疫耐受,在ITP的发病中起重要作用.
关键词： 儿童 特发性血小板减少性紫癜 CD4+CD25+ 调节性T细胞 -
免疫功能失调与急性冠脉综合征发病关系的研究
目的 观察急性冠脉综合征(ACS)患者免疫功能变化情况,探讨其与斑块稳定性之间的关系.方法 急性冠脉综合征(ACS)组、稳定型心绞痛(SA)组及正常对照组3组病例于清晨空腹抽取静脉血,采用流式细胞术测定外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)、CD4+T细胞和CD8+T细胞表达百分比,采用ELISA方法测定外周血中细胞因子转化生长因子β(TGF-β)、白介素-10(IL-10)水平.常规检测血糖及血脂水平.结果 ACS组外周血中Treg表达百分比显著低于SA组和对照组(P<0.05),ACS组CD4+/CD8+T细胞表达百分比的比值显著高于SA组和对照组(P<0.05).ACS组的TGF-β、IL-10水平显著低于SA组和对照组 (P<0.05).结论 急性冠脉综合征患者体内存在效应性T细胞和调节性T细胞之间的失衡,免疫调节功能紊乱参与了动脉粥样斑块的发生发展过程.
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再生障碍性贫血患者治疗前后外周血中单个核细胞FOXP3水平的检测及其意义
CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)在维持自身免疫耐受及阻止自身免疫反应的发生中所起的重要作用被日益关注.转录因子(forkhead box P3,FOXP3)特异性表达于CD4+CD25+Treg,与CD4+CD25+Treg的生长发育和功能维持密切相关[1].有研究报道,重度再生障碍性贫血(SAA)患者外周血中CD4+CD25+ Treg减少,不能抑制自身反应性T细胞的活化增殖,导致免疫耐受被打破,骨髓造血功能衰竭[2].本研究利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,分析再障患者FOXP3的水平,以期从免疫耐受方面探索FOXP3在再障患者发病机制中的作用.
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异基因脐血干细胞穴位移植对类风湿关节炎大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞的影响
目的:观察异基因脐血干细胞(hUCBSCs)穴位移植对类风湿关节炎大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg)的干预作用及相关机制.方法:先进行脐血CD34+细胞分选,将100只大鼠随机分为正常对照组、模型组对照组、hUCBSC尾静脉注射治疗组、hUCBSCs外关穴注射治疗组、甲氨喋呤(MTX)灌胃治疗组,每组20只.采用邓安梅法建立胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型.于大鼠免疫后第31天(除正常组及模型组用等体积蒸馏水)向外关穴、尾静脉注射0.5 mL氯化钠注射液和0.5mL hUCBSCs悬液(含干细胞2×107/mL),4周后采用流式细胞仪,对外周血CD4+ CD25+细胞的百分含量及其在CD4+T淋巴细胞中所占的比例进行检测.结果:hUCBSCs外关穴注射治疗组外周血CD4+ CD25+细胞的百分含量及其在CD4+T淋巴细胞中所占的比例与甲氨喋呤组比较明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01),hUCBSC尾静脉注射治疗组与甲氨喋呤组比较,无显著性差异(P＞0.05).结论:hUCBSCs外关穴穴位注射治疗可能通过上调CD4+ CD25+调节性T细胞水平,抑制关节炎症和关节骨破坏吸收,有助于类风湿关节炎的治疗.
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CD4+CD25+调节性T细胞在上皮性卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义
目的:研究上皮性卵巢癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量及其相关基因Foxp3 mRNA的表达特点,探讨CD4+CD25+调节性T细胞在诱导肿瘤免疫耐受中的作用.方法:采用流式细胞术检测卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血PBMC中Foxp3 mRNA表达水平.结果:卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量均明显升高(P＜0.05);Foxp3 mRNA在卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血PBMC中表达明显增高(P＜0.05).结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能在卵巢癌免疫耐受中发挥重要作用.
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Treg细胞在VIP治疗实验性类风湿性关节炎中的作用研究
目的:本研究探讨血管活性肠肽(VIP)治疗实验性类风湿性关节炎的免疫调节机制及Treg细胞参与的调节.方法:本研究以鸡Ⅱ型胶原(CCⅡ)诱导的Wistar大鼠实验性类风湿性关节炎(CIA)为动物模型,分析大鼠关节指数评分和关节病理变化,通过细胞因子检测分析Th1/Th2平衡关系;通过流式细胞术和功能实验分析Treg的变化,评价VIP的治疗作用和机制.结果:我们的研究显示体内经VIP治疗的CIA大鼠在临床和组织学水平均得到了保护和缓解.其抑制作用与下列因素有关:抑制致病性T细胞的增殖,免疫应答由Th1型应答向Th2型应答转换,以及上调了具有抑制T细胞活化和增殖作用的CD4+CD25+ Treg细胞数量与功能.结论:本研究揭示了VIP可通过调节Th1/Th2平衡和上调Treg细胞来抑制致病性T细胞的活性,从而保护、缓解实验性关节炎.
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小儿支气管哮喘经治疗后血液CD4+CD25+调节性T细胞、白细胞介素-4和IFN-γ水平情况
目的：观察布地奈德雾化吸入对支气管哮喘患儿外周血调节性T细胞细胞的比例和血清细胞因子白细胞介素-4、IFN-γ水平的影响。方法：选取笔者所在医院收治的40例哮喘患儿随机分成对照组和试验组(布地奈德雾化吸入组)，流式细胞仪检测治疗前后外周血单个核细胞(PBMCs)中调节性T细胞的比例，ELISA方法检测治疗前后血清中细胞因子白细胞介素-4，IFN-γ水平。结果：经治疗后，两组患者血清白细胞介素-4浓度水平明显减少(P<0.05)；IFN-γ水平和调节性T细胞细胞的比例显著增加，试验组的变化更为明显(P<0.05)。结论：布地奈德可有效治疗儿童哮喘，其机制可能与促进调节性T细胞的产生，调节Th1/Th2平衡有关。
