人参与金银花、何首乌、黄芪配伍的化学成分变化研究及抗氧化活性测定

采用高效液相色谱(HPLC)与电喷雾质谱技术(ESI-MS),对人参分别与金银花、何首乌和黄芪配伍过程中人参皂苷的变化规律进行了系统研究;同时应用铁离子还原/抗氧化能力测定(FRAP)法测定了人参单煎液及人参分别与金银花、何首乌和黄芪共煎液中正丁醇提取物和水提物的抗氧化活性.实验结果表明,不同剂量的金银花与人参配伍,对人参皂苷溶出量的影响不是线性变化;加入少量的何首乌有利于人参皂苷的溶出;人参-黄芪共煎液的人参皂苷含量明显高于单煎液.以抗坏血酸做对照,人参与金银花、何首乌、黄芪配伍溶液的抗氧化活性比人参单煎液好.

重组嵌合抗CD20 IgG1型单克隆抗体的结构验证

本文选择一种重组嵌合抗CD20 IgG1型单抗.应用液质联用仪及N-末端测序仪对其进行结构验证.对该单抗进行还原、烷基化、酶解等处理后,对其氨基酸序列、二硫键配对方式、糖链类型及糖基化位点进行分析测定.结果显示,该单抗轻、重链氨基酸序列与理论一致.通过液质肽图的解析,对单抗10条二硫键的配对方式进行了验证;通过比较单抗重链切糖前、后的相对分子质量,预测单抗所含糖链类型为岩藻糖化的双触角复杂型N-糖,糖基化位点位于重链的Asn301上.本方法可为该类重组单抗制品的质量控制及其参考品的结构确证提供参考.

Synthesis and anti-inflammatory activity of 2-substituted-((N, N-disubstituted)-1, 3-benzoxazole)-5-carboxamides

丹参乙酰CoA酰基转移酶基因全长克隆和SNP分析

乙酰CoA酰基转移酶(acetyl-CoA C-acetyltransferase,AACT)为萜类化合物生物合成甲羟戊酸(MVA)途径的起始酶,催化使2个分子的乙酰CoA缩合为乙酰乙酰CoA.利用基因芯片结合RACE方法,从丹参毛状根中得到一个AACT基因(SmAACT,accession No.EF635969),该基因全长1 623 bp,含有1个1 200 bp的开放阅读框(open reading frame,ORE),编码399个氨基酸,对应基因组序列含有9个内含子.序列同源性分析和分子进化分析表明SmAACT是一种与植物类异戊二烯MVA途径相关的蛋白,其表达量受到生物和非生物诱导子酵母和Ag+的诱导,并伴随丹参酮类成分积累.在丹参根、茎、叶中均有表达,根中的表达量明显高于茎和叶中的表达量.单核苷酸多态性分析表明,在第6至第9内含子约600 bp范围内,SmAACT共存在33个多态位点,且表现出产地特异基因型.该基因的克隆分析为研究丹参酮类成分的次生代谢调控机制奠定了基础.

一种大鼠慢性哮喘模型的建立与评价

本实验旨在探讨一种新的大鼠慢性哮喘模型建立方法.采用组胺激发对SD大鼠进行筛选,模型组经腹腔和皮下多点注射OVA(卵清白蛋白)致敏大鼠,1%OVA雾化激发1周建立急性模型,0.1%OVA雾化激发12周建立慢性模型,对照组以生理盐水代替.通过检测大鼠肺组织病理切片、BALF(肺泡灌洗液)炎性细胞构成、血清总IgE和OVA特异性IgE、肺功能等指标变化情况及被动皮肤过敏试验对模型进行评价,并对急、慢性模型进行了比较.结果显示,慢性哮喘模型组气道平滑肌及基底膜厚度、杯状细胞增生及胶原沉积情况、皮肤蓝斑溶出物光吸收度值、血清总IgE和OVA特异性IgE含量等指标均显著高于急性模型组,但气道炎性细胞浸润程度及BALF中嗜酸性粒细胞比例低于急性模犁组;急、慢性模型组呼吸速率及呼气流量间无显著性差异;急、慢性哮喘模型组中以上各指标均显著高于正常对照组.因此,本实验成功制备大鼠慢性哮喘模型,基本复制了人哮喘病理生理特征.

毛橘红醇提物中柚皮苷、柚皮素在大鼠尿液和粪便中的代谢与排泄

为分析毛橘红醇提物中柚皮苷、柚皮素在大鼠尿液和粪便中的代谢与排泄,本文给健康SD大鼠连续灌胃毛橘红醇提物3天,于第3天给药后,收集0～24 h的粪便和0～4、4～8和8～24 h的尿液,使用UPLC-Q-TOF/MS仪器与Metabolynx TM软件分析.结果显示,在大鼠含药尿液中存在柚皮苷及其6个代谢产物、柚皮素及其4个代谢产物:在含药粪便中存在柚皮苷及其3个代谢产物、柚皮素及其2个代谢产物.

虎耳草的化学成分研究

为研究虎耳草[Saxifraga stolonifera(L.)Meeb.]的化学成分,用柱色谱方法进行分离,根据其理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构.分离得到了10个化合物,分别鉴定为5.甲氧基异虎耳草素(1)、3,4-二羟基烯丙基苯-4-O-β-D-葡糖苷(2)、(7R,8S)-4,9,9'-三羟基-3-甲氧基-7,8-二氢苯骈呋喃-1'-丙基新木脂素-3'-O-β-D-葡糖苷(3)、槲皮素-3-O-β-D-木糖-(1→2)-β-D-半乳糖苷(4)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(5)、(3S,5R,6R,7E,9R)3,5,6,9-四羟基-7-megastigmane(6)、苄基-O-α-L鼠李糖-(1→6)-β-D-葡糖苷(7)、对羟基苯乙酮(8)、连苯三酚(9)和对羟基苯酚(10).其中化合物1为新化合物,化合物2～10为首次从该植物中分离得到.

In vitro-in vivo correlation study on nimesulide loaded hydroxypropylmethylcellulose microparticles

孕期酒精暴露对子鼠视皮质突触数量影响的体视学研究

建立孕期酒精暴露(PAE)模型,研究孕期酒精暴露对小鼠视皮质突触数量的影响.利用免疫荧光染色技术标记对照组与PAE模型组(低剂量和高剂量)子鼠出生后0、7、14及30 d视皮质突触前体的synaptophysin 蛋白表达,以此来代表突触,观察其数密度变化,并利用Western blotting检测对各实验组子代小鼠视皮质synaptophysin的表达量进行半定量分析.突触数密度值统计学分析显示:对照组、低剂量和高剂量组间比较差异显著(P<0.05),0、7、14及30 d差异显著(P<0.05),年龄与剂量之间存在交互作用(P<0.05)且剂量的影响作用更大.Western blotting检测结果与免疫荧光统计结果一致.这表明PAE对突触的影响具有长时程效应和剂量相关性,突触丢失的长时程放大效应可能是患儿精神发育迟滞和记忆力下降的主要原因.

胆木叶生物碱类成分研究

为了研究胆木叶中的化学成分,采用硅胶、Sephadex LH-20、反相键合硅胶柱色谱等方法从胆木叶的95%乙醇提取物中分离得到8个生物碱类化合物,并通过NMR、MS等波谱技术鉴定了化合物的结构,分别为naucleactonin C(1)、strictosamide(2)、vincosamide(3)、pumiloside(4)、angustoline(5)、angustine(6)、18,19-dihydroangustine(7)和naucleofficine D(8).化合物1为一新的吲哚类生物碱,化合物6和7为首次从该植物中分离得到.

玻璃体腔注射伏立康唑缓释微球对兔烟曲霉菌性眼内炎的抗感染作用

评价玻璃体腔内注射伏立康唑缓释微球(voriconazole microspheres,VCZ-MS)对兔烟曲霉菌性眼内炎的治疗作用,为治疗真菌性眼内炎开辟新途径.制备VCZ-MS并对其理化性质进行考察.采用新西兰大白兔右眼玻璃体腔内注入1×103 CFU·mL-1烟曲霉孢子悬液建立烟曲霉菌性眼内炎模型,建模成功的动物随机分为A组(空白对照组)、B组(玻璃体切除联合100 μg·0.1 mL-1伏立康唑眼内注射)、C组(玻璃体切除联合0.5 mgVCZ-MS注射)、D组(玻璃体切除联合1.0 mg VCZ-MS注射)和E组(玻璃体切除联合1.5 mg VCZ-MS注射).术后不同时间点观察前房闪辉、房水细胞及玻璃体混浊程度,评价治疗效果,并进行组织病理学检查.制备的微球球形圆整,微球载药量和包封率分别为29.94%和73.5%,具有显著的体外缓释特性.药效结果表明,A组眼内炎发生率为100%,迅速发展为全眼球炎,导致眼球萎缩.B、C、D、E组炎症反应均较A组轻(P<0.05).B组玻璃体混浊度较C、D、E组重(P<0.05).C组有2只眼在接种烟曲霉菌后3～5 d出现后极部积脓,失去控制.D和E组接种烟曲霉菌后8周,所有炎症控制眼的眼底清晰,无复发.组织病理学结果表明,治愈眼结构正常;炎症未控制眼多萎缩,球壁结构破坏.该研究证实玻璃体腔内注射VCZ-MS明显优于传统制剂玻璃体腔注射给药,玻璃体腔注射VCZ-MS能安全有效地抑制烟曲霉菌性眼内炎的发展,以含伏立康唑1.0 mg VCZ-MS较佳.

同位素稀释质谱法测定人血浆中奥氮平的方法学及生物等效性研究

建立简便、可靠、灵敏的同位素稀释质谱法测定血浆中奥氮平的浓度.50μL血浆样品中加入稳定同位素(奥氮平-D3)为内标,经特丁基甲醚提取后进样分析.色谱柱为Xbridge Shield RP 18(100 mm×2.1 mm,3.5 μm,Waters).乙腈-缓冲液(氨水-醋酸铵,pH 8)为流动相,等度洗脱,流速0.4 mL·min-1.扫描方式为正离子多离子反应监测(MRM).定量下限均为0.1 ng·mL-1,线性范围为0.1～30 ng·mL-1.对特异性、线性、准确度、精密度、回收率、介质效应均进行了方法学考察,且各项结果均符合要求,可以用于奥氮平的生物等效性研究.

新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂的合成及抗肿瘤活性研究

为寻找新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂,设计合成了酰胺类、脲类和酰肼类全新结构类型的12个目标化合物,并测定了体外HDAC酶抑制活性.目标化合物的结构经 1H MNR、元素分析及MS分析确证.体外HDAC酶抑制活性评价结果表明,化合物Ia的抑酶活性较好,值得进一步研究,化合物Ⅰa、Ⅱb、Ⅲa～Ⅲi具有一定的抑酶活性.

贯众总多糖对空肠弯曲杆菌诱导的系统性红斑狼疮样综合征小鼠的作用

观察贯众总多糖(Ms)对空肠弯曲杆菌CJ-S131诱导的红斑狼疮样综合征小鼠的防治作用.BALB/c小鼠随机分为6组,即正常组、模型对照组、SLE模型组、贯众总多糖(30和15 mg·kg-1)组以及泼尼松(5 mg·kg-1)组,采用CJ-S131免疫诱导小鼠疾病模型.检测贯众总多糖对小鼠体重和脏器指数、对抗自身抗体和总IgG水平以及尿蛋白和肾损伤的影响.结果表明,与SLE模型组相比,贯众总多糖可显著改善SLE模型小鼠体重降低(P<0.05),显著降低小鼠抗自身抗体和总IgG水平、抑制尿蛋白的升高,改善肾病理损伤.结果表明,贯众总多糖对狼疮样综合征小鼠有保护作用.

神经突触核蛋白-γ过表达降低肝癌细胞对抗微管药物的敏感性

肝癌是中国常见的恶性肿瘤之一.目前,紫杉醇(paclitaxel,PTX)和长春新碱(vincristine,VCR)等抗微管药物是临床上肝癌化疗的常用药物,然而此类药物对患者的疗效差别很大.因此,发现影响抗微管药物作用的细胞内因子具有重要意义.本研究采用人肝癌细胞株HepG2稳定过表达synuelein-γ(SNCG)模型,研究SNCG是否影响肿瘤细胞对抗微管药物的敏感性.实时定量PCR(real-time RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测HepG2/SNCG细胞稳定高表达SNCG,与HepG2/Neo细胞相比,SNCG mRNA表达上调13.6倍,增殖活性增高(66±5)%.经PTX或VCR分别处理,SNCG过表达可降低抗微管药物诱导的细胞有丝分裂期阻滞,HepG2/SNCG细胞的G2/M期比例较HepG2/Neo细胞分别下降(19±2.9)%和(27±1.7)%;HepG2/SNCG、HepG2/Neo和HepG2细胞对PTX的有丝分裂指数分别为0.47、0.64和0.67,对VCR的有丝分裂指数分别为0.14、0.30和0.34.HepG2/SNCG细胞对PTX、VCR的敏感性显著降低,耐药指数分别为21和15.研究结果表明,SNCG在肝癌细胞过表达后可显著降低其对抗微管药物的敏感性,在肝癌化疗中SNCG是潜在的抗微管药物使用的生物标志物.

聚乙二醇修饰脂质体的ABC现象研究进展

通常聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)修饰脂质体被认为几乎没有或仅有很低的免疫原性.新的文献报道,重复注射PEG修饰脂质体发生了免疫反应.当向同一动物体内重复注射(间隔几天)PEG化脂质体时,二次注射的PEG化脂质体导致体内循环时间降低,于肝和脾的聚集量增加,这种现象称为"加速血液清除"(accelerated blood clearance,ABC)现象.该免疫反应使PEG化制剂的发展和临床应用面临严峻的挑战,可能造成药物或基因治疗效率的下降,甚至引起临床的毒副作用.本文综述了ABC现象的定义、验证ABC现象的方法和手段、ABC现象成因的研究进展及影响因素,并对其他PEG修饰载体是否也会发生ABC现象进行了探讨.

HIV—1病毒感染因子Vif及其相关抑制剂的研究进展

HIV-1(human immunodeficiency virus type 1)病毒感染因子Vif(viral infectivity factor)是高度保守的碱性磷酸化蛋白质,是HIV-1的辅助调节蛋白之一.Vif蛋白的主要功能是能够介导宿主细胞体内载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G (apolipoprotein B mRNA editing enzyme catalytic polypeptide like 3G,APOBEC3G)的降解,从而增强病毒的感染性.此外,它还具有调节病毒的逆转录和复制晚期以及诱导细胞G2期停滞等功能.目前,许多实验室已经针对Vif蛋白进行抑制剂的设计.本文简要叙述了Vif蛋白的结构与功能,并主要对其抑制剂的新进展进行了综述.

基于微流控芯片的酶及其抑制剂的研究进展

近20年来,随着微流控芯片加工技术的不断发展,微流控分析已从一个概念发展为当前世界上前沿的科技领域之一,微流控芯片上酶及其抑制剂的研究也取得重要进展.微流控技术用于酶及其抑制剂研究时在减少试剂用量、缩短分析时间、自动化等方面提高了分析性能.本文综述了微流控芯片上酶及其抑制剂的研究.

小檗碱调节血糖血脂代谢紊乱机制研究进展

小檗碱是从中药黄连等中提取的异喹啉类生物碱,长期以来用于治疗腹泻及消化道感染.近年来,陆续有报道小檗碱可对糖尿病代谢紊乱状态发挥有益作用.其机制研究亦涉及疾病发生的多个环节,包括调节血胆固醇、甘油三酯;降低血糖;改善胰岛素抵抗状态;影响胰岛β细胞功能等.

小分子化合物ZL-004升高白细胞的作用

化疗、放疗、手术治疗单独或联合是目前治疗恶性肿瘤的主要手段.放疗、化疗引起的骨髓抑制,造成外周血白细胞减少,是常见和较严重的合并症[1].临床上除了一般的支持治疗,控制感染,必要时输注粒细胞外,主要的是应用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF, 如赛格力)和重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSE,如特尔立),缩短白细胞低下维持的时间,促使白细胞尽快恢复,使化疗或放疗顺利按计划进行[2,3].

基于小鼠温度趋向行为学表征的左金丸及反左金丸寒热属性

中药四性又称"四气",是指药物寒、热、温、凉四种不同的药性,它反映了药物对人体阴阳盛衰、寒热变化的作用倾向.四性理论作为中医理论体系的重要组成部分,是在前人长期的医疗实践中,对各种药物的性质及其疗效不断深化认识的基础上.结合药物作用于人体的不同表现进行概括和总结而来.其中,"寒和凉"与"温和热"属性相同而程度有异,热是大温,凉即微寒[1].

二甲双胍对2型糖尿病大鼠肝纤维化形成的影响

近年来,糖尿病的发病率日益增加,目前全球糖尿病患者已达2.85亿[1].糖尿病主要表现为高血糖,以及由高血糖引起的糖尿病大血管、微血管并发症,糖尿病肝纤维化是糖尿病慢性并发症之一,有学者认为高血糖对肝纤维化有明显的促进作用[2].