肝硬化并肝性皮质盲5例临床分析

肝性皮质盲是肝性脑病的一种特殊表现,是肝病患者双侧外膝状体、内囊后肢、视辐射、视皮质受损而出现的双眼视力障碍,为肝病的一种少见并发症[1],以肝性脑病过程中出现的暂时性、可逆性双目视力障碍为特征,其中大部分患者因存在不同程度的意识障碍掩盖了症状,而影响本病的诊断,易误诊误治.现将我科收治的5例患者资料分析总结如下.

PGC-1,NRF-2α和mtTFA在视觉剥夺大鼠视皮质内的表达下调

目的 观察核呼吸因子-2α(NRF-2α)在正常发育及视觉剥夺大鼠视皮质内的表达.方法 构建视觉剥夺大鼠模型,利用半定量PCR和免疫印迹的方法检测过氧化物酶体增生激活受体γ协同刺激因子(PGC-1)、NRF-2α和线粒体转录因子A (mtTFA)在视皮质内的表达.结果 视觉剥夺大鼠视皮质内PGC-1、NRF-2α和mtTFA表达较正常组明显降低(P＜0.05).结论 NRF-2α的基因转录及蛋白表达水平依赖于正常视觉信号的刺激,异常的视觉经验使视皮质神经元兴奋性降低,造成NRF-2α表达的明显下调.

孕期酒精接触对子鼠视皮质神经元凋亡的影响

目的 探讨孕期酒精接触对子鼠视皮质神经元凋亡的影响.方法 从妊娠母鼠第5d酒精灌胃直至小鼠出生;采用激活的半胱氨酸天冬氨酸蛋白3(Caspase-3)免疫组织化学和原位末端标记(TUNEL)法观察P0、P7和P14小鼠视皮质神经元的凋亡.结果 酒精实验组妊娠时间延长,出现死胎和畸形(小头畸形、无脑儿和脊柱脊髓裂等).酒精实验组Caspase-3阳性率和凋亡指数明显高于对照组(P＜0.001),高剂量酒精组明显高于低剂量组(P＜0.01).随着酒精剂量的增加,子鼠视皮质神经元的凋亡明显增加.结论 孕期酒精接触可导致子鼠视皮质神经元凋亡,且有剂量依赖性和长时程效应.

急性寒冷暴露对小鼠中枢神经系统的影响

目的 探讨急性寒冷暴露对小鼠中枢神经系统的影响.方法 选择生后40 ～ 50d的成年雄性小鼠40只,置于温度为0～-4℃环境中饲养20d,建立急性寒冷暴露模型.采用免疫细胞化学标记雌激素受体;DiI散射方法标记视皮质锥体细胞树突棘;利用透射电子显微镜观察突触的超微结构.结果 急性寒冷暴露诱导小鼠视皮质锥体细胞树突棘的密度降低,形成的突触数量减少,部分突触出现树突胞质水肿、细胞器肿胀及微管减少等改变,明显抑制神经细胞增殖.结论 急性寒冷暴露可导致神经系统的结构和功能改变,与雌激素及其受体G蛋白偶联受体30(GPR30)直接参与寒冷应激反应过程有关.

孕期亚硝酸盐暴露对子鼠视皮质突触改变的影响

目的 建立亚硝酸盐暴露模型,探讨孕期亚硝酸盐暴露对子鼠视皮质突触数量的影响及其改变机制.方法 采用免疫荧光染色法观察对照组和模型组(低剂量组与高剂量组)子鼠出生后0d(P0)、P7、P14、P30的的视皮质突触素(SYN)和γ突触核蛋白(γ-synuclein)的改变,利用Western blotting和水迷宫实验对SYN蛋白的表达进行进一步验证.结果 横向比较(剂量)发现,亚硝酸盐暴露组SYN减少(P＜0.05)而γ-synuelein阳性细胞增多(P＜0.05),且与亚硝酸盐存在剂量依赖关系(P＜0.05).纵向比较(年龄)发现,P0、P7、P14、P30 SYN表达随着年龄增长而增多(P＜ 0.05),γ-synuclein表达减少(P＜0.05),剂量(MS =2.00,F=55.22,P＜0.05)与年龄(MS=1.11,F=30.68,P＜0.05)之间存在交互作用且剂量的影响作用更大.Western blotting和水迷宫实验结果与免疫荧光统计结果一致.结论 孕期亚硝酸盐暴露会影响子代视皮质突触的发育,减少突触数量,且对其影响与亚硝酸盐暴露剂量存在依赖关系,而γ突触核蛋白的过度表达可能是突触丢失的主要原因.

空间频率对视觉诱发磁场影响的脑磁图研究

目的用脑磁图来研究人脑视皮质对不同空间频率黑白棋盘格翻转刺激所产生视觉诱发磁场成分之一的M100的影响,包括峰值潜伏期、振幅和源位置三方面.方法测定9例健康志愿者对视角分别为25'、40'、50'、60'、80'、120'和240'的半视野棋盘格刺激的磁场反应.结果格大小对M100峰值潜伏期和振幅的影响有显著统计学意义(P<0.05).随着格变小,M100峰值潜伏期延长、振幅减小.偶极源位于刺激野对侧的枕叶距状裂附近.结论不同空间频率的棋盘格刺激对M100峰值潜伏期、振幅的影响均有显著意义,但对源位置无显著影响.

肝性皮质盲1例

肝性皮质盲又称肝眼综合征、肝-脑-眼综合征、肝脑中枢盲等，是指重症肝病时双侧外侧膝状体、内囊后肢、视辐射、视皮质受损而出现的一过性视力障碍，为继发于肝脏病变的少见并发症之一。近年来，随着国内学者对肝性皮质盲的研究不断深入，临床报道逐渐增多[1-5]。

左旋多巴诱发异动症大鼠皮质纹状体突触超微结构与功能的变化

目的探讨左旋多巴诱发异动症(levodopa induced dyskinesias,LID) 大鼠皮质纹状体突触结构和功能的变化.方法 6-羟多巴胺(6-OHDA)立体定位注射制备偏侧帕金森病(Parkinson disease,PD)大鼠模型,复方左旋多巴(L-dopa)甲酯腹腔注射治疗4周(20 mg*kg-1*d-1,每天2次)诱发LID大鼠模型.采用免疫组化及透射电镜方法对大鼠皮质纹状体突触界面的结构进行定量分析,并观察单次地佐环平(MK-801, 0.1 mg/kg)治疗后突触前谷氨酸(Glu)释放量的变化.结果透射电镜证实皮质Glu能纤维与纹状体神经元的树突棘构成不对称突触,与PD大鼠比较,LID大鼠Glu能非对称性突触中穿孔性突触进一步增加(P<0.01),且突触间隙变窄,突触后致密物质(post-synaptic density, PSD)厚度增加(P<0.05).同时伴有突触前Glu释放量的增多,但可被N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801所抑制.结论慢性L-dopa治疗使皮质纹状体突触功能进一步活化,其中涉及突触后形态和功能的改变及突触前活性的增强,这些突触可塑性变化与LID的发生密切相关.

偏头痛发作间期的静息态功能磁共振变化

目的 利用静息态功能磁共振技术描述偏头痛患者大脑自发神经元的活动特征及功能改变,以期更好地认识偏头痛的发病机制.方法 收集16例头痛发作间期的偏头痛患者(病例组)和16名性别、年龄、受教育程度与其相匹配的健康对照(对照组),进行静息态功能磁共振成像扫描,采用DPARSFA 2.2软件分析原始数据,得出全脑低频振幅值,比较偏头痛患者头痛发作间期与健康人群之间影像学表现的差异.结果 病例组左侧岛叶、左侧额下回三角部、左侧额下回眶部低频振幅值(0.956±0.243)显著低于对照组(1.277±0.274;t=-3.88,P＜0.01)；与对照组相比,病例组右侧枕叶、右侧距状裂、右侧楔叶低频振幅值(1.081±0.237)显著高于对照组(0.774±0.140;t=4.33,P＜0.01)；病例组右侧枕中回低频振幅值和偏头痛患者的年发作频次呈负相关(r=-0.529,P＜0.05).结论 偏头痛患者头痛发作间期疼痛调节相关的脑区功能异常,视觉皮质兴奋性增高,这有助于进一步理解偏头痛的发病机制.

视听觉屏蔽对特发性耳鸣患者脑内葡萄糖代谢分布的影响

目的 探讨视听觉屏蔽对特发性耳鸣患者脑内葡萄糖代谢分布的影响.方法 对1例慢性特发性耳鸣患者分别在视听觉屏蔽和开放条件下进行全脑正电子发射计算机断层显像(positron emission tomography,PET)检测,通过视觉观察和统计参数图方法分析脑内葡萄糖代谢分布的差异.结果 视听觉开放条件下患者双侧听觉皮层、视觉皮层的葡萄糖代谢明显增高,而在视听觉屏蔽条件下双侧听觉皮层、视觉皮层未见葡萄糖明显高代谢现象,但左侧Wernicke区出现葡萄糖代谢增高.结论 慢性特发性耳鸣的产生可能与听觉皮层异常无关,Wernicke区可能在耳鸣中枢感知中起到一定的作用.

突触蛋白及其在视觉发育可塑性中的作用

突触由突触前部、突触间隙和突触后部三部分组成,突触前可塑性在神经元发育可塑性中发挥着重要作用.突触蛋白(synapsin)是一种突触前特异性蛋白家族,参与突触前短时程可塑性、长时程可塑性以及脑源性神经营养因子介导的可塑性.在视皮质,突触蛋白的含量随发育增多,异常视觉经验可影响视皮质突触蛋白的表达及磷酸化水平,表明其在视觉发育可塑性中也发挥着重要调控作用.

青光眼患者的颅内段视神经、外侧膝状体及视皮质内的神经变性

屈光参差性弱视儿童脑磁图的初步研究

目的 应用脑磁图技术研究屈光参差性弱视儿童视皮层功能损害,探讨屈光参差性弱视发病的可能中枢机制.方法 记录4例健康儿童及5例屈光参差性弱视儿童在不同视野黑白棋盘格翻转刺激下的磁场反应,分析其M100振幅、峰值潜伏期及源定位.结果 (1)单眼全视野刺激时,非弱视眼比正常组优势眼峰值潜伏期延长、振幅增高;弱视眼比正常组非优势眼峰值潜伏期延长、振幅下降.(2)半侧视野刺激时,弱视眼及非弱视眼各自半侧网膜刺激峰值潜伏期、振幅均无统计学差异.(3)弱视组双眼总和VEFs比正常组降低.(4)双眼全视野刺激时,弱视组偶极源定位在左、右侧大脑半球的X轴位置、Z轴位置比正常组偏向于顶叶.结论 (1)弱视眼存在"单眼抑制",而非弱视眼存在功能亢进;(2)弱视眼无半侧网膜抑制现象;(3)弱视组双跟全视野VEFs的M100源定位脱离传统视觉皮质17区、18区,趋向于顶叶.

单眼剥夺大鼠视皮层及外侧膝状体中生长相关蛋白(GAP-43)的表达及其意义

目的研究生长相关蛋白(GAP-43)在正常大鼠与视觉剥夺性大鼠视皮层及外侧膝状体中的表达情况.方法缝合2周龄大鼠单侧眼睑30天,切取外侧膝状体和视皮质,应用免疫细胞化学SP法技术染色和计算机图像分析GAP-43在正常组和单眼视觉剥夺组大鼠外侧膝状体和视皮层的表达及变化.结果1. GAP-43在正常大鼠视觉系统的表达主要见于外侧膝状体全层和视皮质Ⅱ-Ⅳ层神经元胞膜中,呈环状或点状棕黄色免疫阳性反应;2.在敏感期内视觉剥夺眼对侧外侧膝状体和视皮质GAP-43表达的免疫阳性神经元染色变淡(P＜0.05),且免疫阳性神经元数目减少(P＜0.05).结论单眼视觉剥夺大鼠外侧膝状体和视皮质GAP-43表达均降低,提示GAP-43在视觉系统的作用可能是弱视发生的分子生物学基础之一.单眼剥夺性大鼠视觉系统的GAP-43表达降低可能是由于剥夺眼视觉系统神经元在发育敏感期内,长期视觉剥夺效应使其在双眼竞争突触位点时处于劣势,表达GAP-43的能力降低.

左旋多巴对弱视猫视皮质区神经细胞的影响

目的观察左旋多巴对剥夺性弱视猫视皮质神经细胞形态和超微结构的影响.方法正常组猫2只,弱视组猫、弱视服药组猫各4只.剥夺性弱视猫模型制作为14周.弱视服药组猫服息宁(左旋多巴/卡比多巴)40mg/kg,每日3次,连服8周.将3组猫处死后,切取双侧视皮质17区组织,在光镜和透射电镜下进行观察.结果光镜下弱视组猫视皮质与正常组猫相比较,均显示神经元体积变小,胞浆突起消失或变短;而弱视服药组猫视皮质神经元与弱视组比较,3/4送检标本的神经细胞形态与正常组的形态基本相同,另1/4标本有轻度改善.电镜下弱视组猫视皮质神经细胞全部显示早期类凋亡的改变,特点为核染色质呈碎粉末状,细胞核变形,胞浆减少,粗面内质网池呈囊性扩张,有髓神经髓鞘板层囊状分离等;弱视服药组猫视皮质中有2/3标本未显示有早期类凋亡,神经细胞的形态接近正常,余1/3标本显示轻度早期类凋亡.结论通过观察服用息宁前后弱视猫视皮质神经细胞的形态学变化,显示左旋多巴具有激活和重塑神经细胞的作用.

视觉发育可塑性的研究进展

人们早意识到视觉发育的可塑性,是在19世纪初运用健眼遮盖疗法治疗弱视取得成功以后.Huber和Wiesel在视觉发育方面作了开创性的工作[1],他们首先阐明了视觉剥夺影响视觉系统发育的脑内神经机制,提出在关键期内视觉发育具有可塑性,而且视功能的改变还会进一步引起视皮质相应区域的病理生理改变.近几年来,随着神经药理学、细胞和分子生物学的快速发展,人们对视觉发育可塑性的研究取得了令人瞩目的进展,深入到了分子水平.研究表明,在生后关键期内,神经元活动、神经生长因子和视觉经验对视皮层的神经连接及其功能发育都有着重要意义.

斜视性和屈光参差性弱视患者的功能磁共振成像研究

目的 比较斜视性弱视和屈光参差性弱视的机制的异同.方法 采用视觉电生理诊断系统及1.5 T磁共振成像仪分别记录18例斜视性弱视和15例屈光参差性弱视患者的视觉诱发电位与血氧水平依赖功能磁共振成像信号.比较斜视性弱视和屈光参差性弱视患者的双眼像素指数及不同刺激条件下双眼大脑皮层神经元的平均活动水平,分析大脑皮层神经元的平均活动水平与P100波潜时的相关性.结果 斜视性弱视患者的双眼像素指数较屈光参差性弱视患者明显减少(P＜0.05).选用任一空间频率(0.25、0.50、1.00、2.00c/d)刺激,屈光参差性弱视患者弱视眼驱使大脑皮层神经元平均活动水平均较对侧眼降低(P＜0.05),斜视性弱视患者仅在高空间频率刺激时(1.00和2.00c/d),其弱视眼驱使大脑皮层神经元平均活动水平较对侧眼降低(P＜0.01).P100波潜时与大脑皮层神经元平均活动水平呈负相关(P＜0.05).结论 两种不同类型的弱视不仅双眼异常相互作用的程度不同,而且对视觉系统不同空间频率神经通路的损害亦不同.

斜视性弱视猫发育过程中视皮层神经元NMDA-R1表达的免疫组织化学电镜观察

目的研究不同发育阶段斜视猫视皮层神经元N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚基1(N-methyl-D-aspartate receptor subunit 1, NMDA-R1)在超微结构水平的表达与变化.方法幼猫11只,其中6只猫在2周龄行1只眼外直肌断腱术产生单眼内斜.依动物处死时的年龄分为3组:3周龄组(斜视手术后1周),2只正常和2只斜视幼猫;5周龄组(斜视手术后3周),2只正常和2只斜视幼猫;成年组(6月龄),1只正常和2只斜视性弱视猫.3组动物均取初级视皮层组织进行冰冻切片,NMDA-R1单克隆抗体标记后,分Ⅱ～Ⅲ层、Ⅳ层及Ⅴ～Ⅵ层各为一个区块行常规电镜染色切片,透射电镜观察.结果 (1)电镜下分析328个视皮层神经元,发现3组正常猫的视皮层神经元NMDA-R1标记阳性细胞数均高于斜视猫(χ2= 4.28, 4.41, 4.89;P<0.05).(2)共计数1 320个NMDA-R1阳性突触,显示正常猫发育过程中,视皮层Ⅱ、Ⅲ层神经元细胞膜上的NMDA-R1受体突触数多于Ⅳ～Ⅵ层,且随年龄增长而增加(F=3.28,P<0.05); 斜视猫视皮层神经元细胞膜上的NMDA-R1受体突触数,3周龄组与正常幼猫组差异无显著意义(F=0.17,P>0.05), 5周龄组和成年组均较正常猫组显著减少(F=26.94,47.01;P<0.001).结论 (1)正常猫发育过程中,视皮层Ⅱ、Ⅲ层神经元的突触有较大的可塑性.(2)视觉发育可塑性关键期内产生的斜视性弱视,并未造成视皮层神经元细胞器的病理改变,而是导致了神经元突触分子水平的变化.

大鼠视觉可塑性关键期终止相关基因的筛选

目的 筛选视觉可塑性关键期终止相关基因,探讨视觉可塑性关键期终止的分子机制.方法 采用暗饲养及暗饲养后加光照刺激动物模型,应用抑制性消减杂交技术构建大鼠视皮层与视觉可塑性关键期终止相关的cDNA文库.并通过PCR筛选、反向Northern杂交验证、测序及同源性检索对差异表达基因进行分析.结果 成功构建了高消减效率的大鼠视皮层与视觉可塑性关键期终止相关的cDNA文库,经筛选、测序及同源性分析,得到14个视觉可塑性关键期终止时视皮层上调表达基因的片段.其中13个为已知基因,除β-Tubulin、Mbp、Cyclophilin基因有文献报道跟可塑性有关外,其余基因与视觉可塑性的关系以往少有报道.结论 通过大鼠视皮层与视觉可塑性关键期终止相关的cDNA文库的建立,筛选出一批与视觉可塑性关键期终止相关的候选基因,为进一步阐明视觉可塑性关键期终止的分子机制提供了重要的基础.(中华眼科杂志,2007,43:823-828)

代谢性谷氨酸受体1在单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮质17区的表达及超微结构观察

目的 探讨视觉形成关键期内单眼形觉剥夺弱视大鼠初级视皮质17区中代谢性谷氨酸受体1(mGluR1)的表达规律及神经元超微结构变化,为临床上揭示弱视的病理机制及防治提供依据.方法 随机对照同期动物实验.方法是建立大鼠单眼形觉剥夺弱视模型,经图形视觉诱发电位检测证实造模成功后,与正常对照组大鼠一起灌注、固定、取材、做石蜡切片,进行免疫组织化学染色和电镜观察,摄像显微镜分层照相,计算机图像分析系统进行图像分析,SPSS 11.5统计学软件进行方差分析.结果 弱视跟对侧大脑视皮质17区Ⅳ层与正常对照组大脑视皮质17区Ⅳ层和弱视眼同侧大脑视皮质17区Ⅳ层相比,mGluR1阳性着色神经元面积减少,差异有统计学意义(P＜0.01).其他各层之间3组分别对比差异均无统计学意义.电镜结果显示:弱视眼对侧大脑视皮质17区Ⅳ层可见部分神经元胞质轻度水肿,线粒体嵴和膜融合或消失,排列紊乱,粗面内质网脱颗粒显像明显,核膜皱缩.正常对照组大脑视皮质17区Ⅳ层和弱视眼同侧大脑视皮质17区Ⅳ层神经元胞核正常,核膜完整,线粒体嵴规则,高尔基体发达,粗面内质网发达.结论 单眼形觉剥夺弱视大脑视皮质17区Ⅳ层mGluR1的表达与正常相比减少.弱视眼对侧大脑视皮质17区Ⅳ层部分神经元发生形态改变,可能与视觉神经冲动传人减少致神经元萎缩所致.形觉剥夺致神经冲动传人减少,视皮质17区Ⅳ层mGluR1表达减少,突触可塑性变化,致神经元发生萎缩可能是弱视发病机制之一.