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猫血压法测定骨瓜提取物注射液降压物质方法的研究
目的:确定合理的骨瓜提取物注射液降压物质检查方法及限值,建立骨瓜提取物注射液降压物质检查法.方法:采用猫血压法确定骨瓜提取物注射液降压物质检查方法,并对我公司10个批次的骨瓜提取物注射剂进行考察.结果:骨瓜注射液降压物质检查限值确定为0.2ml/kg较为合理.结论:骨瓜提取物注射液按限值0.2ml/kg进行降压物质检查结果安全可靠.
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家猫咬伤致狂犬病1例
1临床资料患儿,男性,7岁,马里共和国马尔格拉市人.因恐风、恐水、失语、发热伴烦躁不安4 d入院.患儿频繁呕吐、流涎、头痛、极度兴奋、定向力差;嗜啃咬及奔跑,躁动有时呈间歇性;听见流水声或试图饮水时,出现呕吐和恐惧;左下肢局部疼痛,感觉异常;无牙关紧闭和角弓反张.一个月前患儿左下肢小腿部曾被家中饲养的猫咬伤,半月前猫已经死亡.患儿被咬伤后未注射狂犬疫苗.
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左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫视网膜c-fos表达的影响
目的:研究左旋多巴甲酯(LDME)对剥夺性弱视猫视网膜细胞凋亡情况以及c-fos表达及其分布的特点,并探讨其作用机制.方法:健康2周龄幼猫30只随机分成6组:模型对照组及正常对照组,左旋多巴阳性对照组,LDME低、中、高剂量组,每组5只.除了正常组,各组幼猫于4周龄时单纯缝合左眼建立剥夺性弱视,12周后打开缝合眼并开始给药,每天灌胃LDME 20,40,80 mg· kg-1,阳性组为左旋多巴40 mg· kg-1,正常组与模型组为等量生理盐水,持续30 d.TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡情况,经原位杂交技术、免疫组化检测视网膜中c-fos mRNA和c-fos蛋白的表达.结果:与模型对照组比较,LDME明显减少弱视猫视网膜组织的细胞凋亡指数(P ＜0.05或P＜0.01),显著上调c-fos mRNA在视网膜中的表达(P＜0.05或P＜0.01),同时增加c-fos免疫阳性细胞数量(P＜0.05或P＜0.01).结论:左旋多巴甲酯有效地保护剥夺性弱视造成的视网膜损伤,其机制可能与抑制细胞凋亡以及促进c-fos表达有关.
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福耳心痛散对正常家猫心功能的影响
目的:观察福耳心痛散对正常家猫心功能的影响.方法:用ASU-DIC型彩色多普勒超声诊断仪观察测定给药前后家猫心功能.结果:福耳心痛散有明显增加正常家猫射血分数、每分心输量、左心室舒张末期容积的作用.结论:福耳心痛散有明显改善正常家猫心功能的作用.
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猫α-synuclein蛋白的表达纯化及生物学特征分析
目的：对猫突触核蛋白（α?synuclein ）进行克隆、表达及纯化，并探讨其生物信息学特征。方法在Genebank中α?synuclein基因的保守区域内设计引物，从猫脑cDNA文库中PCR扩增得到猫的α?synuclein基因，再将此基因双酶切后克隆到pET28a原核表达载体中，构建重组质粒，测序正确的重组质粒转化BL21（ DE3）大肠杆菌，采用IPTG诱导表达。然后对猫α?synuclein氨基酸的同源性和疏水性进行分析。结果实验成功从猫脑cDNA文库中扩增出α?synuclein基因，基因全长381个碱基，编码126个氨基酸。获得的全长基因成功克隆进入pET28a，后转染大肠杆菌BL21（ DE3），获得可溶性表达的α?synuclein蛋白质，蛋白质分子量为13?12kD，与预期分子量一致。生物信息学分析显示猫α?synuclein蛋白与人源及鼠源α?synuclein氨基酸具有很高的同源性，分别为87?35％和83?15％，但是与鼠和人的氨基酸序列比较，猫α?synuclein氨基酸缺失41～54位氨基酸。蛋白质结构预测显示猫α?synuclein具有很好的疏水性，有助于诱导表达时形成可溶性蛋白，这一结果在本研究中得到证实。结论本研究首次克隆了猫α?synuclein基因，并在大肠杆菌中实施了可溶性表达，为后期研究α?synuclein的进化、蛋白晶体结构、生物学功能和帕金森动物模型的构建奠定了一定的基础。
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猫初级听皮层γ-氨基丁酸能神经元和星形胶质细胞年龄相关变化
目的 探讨青年猫和老年猫初级听皮层(AI)的年龄相关变化及可能产生的生理作用.方法 Nissl染色示两组猫初级听皮层的分层结构并进行细胞计数;免疫组织化学染色示两组猫γ-氨基丁酸(GABA)能神经元和星形胶质细胞的形态、密度及分布.结果 与青年猫相比,老年猫的初级听皮层细胞平均密度无显著的年龄相关变化,GABA-IR细胞的密度显著下降(尤其是Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ层),阳性胞体较小,阳性反应明显减弱;老年猫的GFAPIR细胞密度显著增大,阳性胞体膨大,突起稠密粗大,阳性反应明显增强,其中的Ⅰ层和白质尤为明显.结论 GABA能神经元显著的年龄相关性改变可能为老年性听觉功能衰退的神经机制在皮层水平提供了直接的形态学证据;而星形胶质细胞活动增强可能是导致GABA能神经元及GABA递质含量减少的重要原因之一.
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部分背根切断对备用背根节NT-3表达的影响
目的探讨部分去背根后备用背根节(L6)各类细胞NT-3及其mRNA的含量变化. 方法对成年雄性猫行单侧部分背根切断术(切除一侧L1～L5,L7～S2 DRG,保留L6为备用根).取正常组一侧和术后3d及7d组手术侧的L6 DRG制作20μm厚冰冻切片,分别用NT-3抗体及NT-3 cRNA探针行免疫组织化学及原位杂交染色.观察NT-3及其mRNA在DRG各类细胞的分布,测定NT-3及其mRNA在神经元和卫星细胞的光密度值,所得数据用q检验进行统计分析. 结果部分去背根后,各时相备用背根节大神经元内NT-3的光密度值较正常者进行性减少,(P<0.05),而NT-3mRNA的光密度值术后3d减少,7d回升至近正常者水平.比较之,小神经元和卫星细胞NT-3及其mRNA的光密度值进行性增多(P<0.05). 结论部分背根切断对备用背根节各类细胞NT-3表达的影响不同,其功能意义可能与NT-3参与脊髓Ⅱ板层可塑性有关.
关键词： 部分去背根 备用背根节 神经营养因子-3 免疫组织化学及原位杂交 猫 -
神经激肽B受体在猫三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓内的分布
目的了解神经激肽B受体(NK3受体)与伤害性信息的传递和调制的可能关系,调查NK3受体在三叉神经尾侧亚核和脊髓内的分布状况. 方法免疫组织化学技术. 结果 NK3受体样免疫反应产物在三叉神经尾侧亚核和脊髓内的分布基本一致.致密的免疫反应产物分布于Ⅱ内层(inner part),而Ⅰ层和Ⅱ外层(outer part)染色浅淡.NK3受体阳性神经元胞体主要见于三叉神经尾侧亚核和脊髓的Ⅰ层和Ⅱ层,少量分布于脊髓后角深层. 结论提示三叉神经尾侧亚核和脊髓内的NK3受体可能与初级伤害性信息的传递和调控有密切关系.
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Ⅰ型和Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体在大鼠、猫和猴脊髓内的定位分布
目的观察Ⅰ型和Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体(VGluT1和VGluT2)在大鼠、猫和猴脊髓内的定位分布.方法免疫组织化学技术. 结果 VGluT1和VGluT2在大鼠、猫和猴脊髓灰质内均有分布.VGluT1在大鼠和猫脊髓背角Ⅱ层内侧部(ⅡI)及Ⅲ～Ⅵ层的内侧部分布为密集,在Ⅰ层和Ⅱ层外侧部(Ⅱo)的分布较稀疏,其他层能观察到中等密度的分布.而在猴脊髓,VGluT1的分布与大鼠和猫有所不同,Ⅰ层、ⅡI层、Ⅲ层及Ⅳ～Ⅵ层内侧部分布密集,在Ⅱ o层及Ⅳ～Ⅵ层外侧部较稀疏,甚至观察不到阳性结构.在猴的脊髓前角,仅在Ⅸ层观察到较稀疏的阳性产物,而其他层未见阳性产物.除此之外,在猴的脊髓后索内侧部能见到散在的阳性结构,而在大鼠和猫未观察到.VGluT2阳性产物在3种动物脊髓灰质内均呈中等强度的分布,其中在Ⅰ层、Ⅱ层和Ⅹ层内呈密集分布,在Ⅲ～Ⅵ层内侧分布较稀疏.在猴的背角深层外侧部,阳性产物非常少.在大鼠的外侧脊核(LSN)能见到中等强度的VGluT2阳性产物,而在猫和猴中并未观察到.在3种动物脊髓中,VGluT1和VGluT2阳性产物均呈点状分布. 结论 VGluT1和VGluT2在3种动物脊髓内均有分布,但其分布有一定的种属差异.提示它们可能在不同动物脊髓兴奋性神经元的活动中发挥重要作用.
关键词： 囊泡膜谷氨酸转运体定位分布 Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体 Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体 脊髓 免疫组织化学 大鼠 猫 猴 -
部分背根切断改变备用背根节神经元和卫星细胞脑源性神经营养因子的基因表达
目的探讨部分去背根后备用背根节(L6)各类细胞脑源性神经营养因子(BDNF)及其mRNA的量变情况. 方法对成年雄性猫行单侧部分背根切断术(切除一侧L1～L5、L7～S2 DRG,保留L6为备用根).取正常组一侧和术后3d及7d组手术侧的L6 DRG并分别行免疫组织化学及原位杂交染色.观察BDNF及其mRNA在DRG各类细胞的分布,测定BDNF及其mRNA在神经元和卫星细胞的光密度值. 结果部分去背根后3d,中小神经元内BDNF及其mRNA的光密度值较正常者明显减少(P<0.05),而7d时又恢复近正常水平(P>0.05).BDNF及其mRNA在大神经元的光密度值术后3d无明显变化,而7d时较正常者明显减少(P<0.05).比较之,卫星细胞BDNF及其mRNA的光密度值术后7d时明显升高(P<0.05),术后3d与正常者比未见明显变化. 结论部分背根切断导致备用DRG各类细胞BDNF的表达水平发生不同程度的改变.提示备用DRG内BDNF的变化与脊髓Ⅱ板层可塑性有关.
关键词： 部分去背根 备用背根节 脑源性神经营养因子 免疫组织化学及原位杂交 猫 -
腹腔-肠系膜上神经节内腹部内脏器官的代表区
目的探讨支配腹部内脏器官的交感节后神经元在腹腔-肠系膜上神经节内的代表区. 方法用HRP逆行标记法,显微镜描图仪做连续切片描图记录,计数标记细胞的面数密度,并经统计学处理. 结果猫脾、胰、肾、十二指肠和空回肠交感节后神经元在腹腔-肠系膜上神经节内具有各自的集中分布区和分散分布区,亦即各自的局部定位区.支配脾的交感节后神经元集中区位于该节的左侧上部;支配胰的交感节后神经元集中区位于该节两侧的上中后部;支配左、右肾的交感节后神经元集中区位于该节的中下部的两侧;支配十二指肠的交感节后神经元集中区位于该节的右侧后上部;支配空回肠的交感节后神经元集中区位于该节的两侧中下部.支配上述各器官的交感节后神经元的分散区则分别位于其各自集中区的周围. 结论腹腔-肠系膜上神经节内存在上述器官各自的功能代表区.
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节制饮食增强猫视皮层γ-氨基丁酸和脑源性神经营养因子的表达
目的：探讨节制饮食对猫初级视皮层内抑制性神经递质γ-氨基丁酸（ GABA）和脑源性神经营养因子（ BDNF）表达的影响。方法 Nissl染色示初级视皮层分层并用于神经元计数；免疫组织化学方法标记6只猫GABA和BDNF免疫阳性神经元。切片于Olympus光学显微镜下观察摄片，用Image-Pro Express 6.0软件进行细胞计数和免疫阳性反应的吸光度值统计。结果与正常饮食对照猫相比，节制饮食组猫的初级视皮层神经元平均密度无显著变化， GABA 免疫阳性神经元密度显著增大，阳性反应的平均吸光度值显著升高； BDNF免疫阳性细胞的密度和阳性反应的平均吸光度值亦明显增大。结论节制饮食能显著增强猫视皮层内GABA和BDNF的表达，这可能对视皮层神经元的结构和功能有保护作用，从而延缓衰老进程。
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一种应用振荡切片显示神经元的Cox染色法
目的 探索一种快捷、简便的大脑锥体细胞和小脑普肯耶细胞的染色方法. 方法取猫、家兔、大鼠和豚鼠的大脑和小脑组织,升汞.重铬酸钾.铬酸钾固定液固定、浸染后,部分组织按传统的Cox法制片,即固定后进行火棉胶包埋、滑式切片机切片;部分组织用改良法制片,即组织不经包埋而直接进行振荡切片. 结果与传统Cox法相比,应用振荡切片的Cox法减少了操作程序,大大缩短了制片时间,神经元染色均匀,神经元突起更为完整,小突起细节显示更为满意,且背景浅淡,非特异性沉淀颗粒极少. 结论应用振荡切片的Cox改良法快捷、简便,神经元染色效果明显优于传统Cox法.
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欧美的猫弓形虫感染情况及影响因素研究进展
弓形虫可以感染多种动物和人导致人兽共患弓形虫病,猫可以将具有抵抗力的弓形虫卵囊排至体外,在弓形虫感染的传播中起重要作用.随着人与猫的接触逐渐增多,猫的弓形虫感染情况及影响因素不容忽视.本文对欧美的猫弓形虫的感染情况及影响因素研究进展进行了综述.
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PRU株弓形虫感染家猫实验动物模型的建立
目的 建立家猫弓形虫有性生殖实验动物模型,获取并纯化卵囊,为弓形虫相关研究奠定基础. 方法 将6只3月龄雄性华南本地家猫分为2组,实验组经口感染600个PRU株弓形虫包囊,对照组口服生理盐水.通过镜检猫的粪便,鉴定弓形虫卵囊的排放.将收集到的弓形虫卵囊以CsCl梯度离心法进行纯化,观察不同条件下卵囊的孢子化情况.用不同数量的孢子化卵囊感染KM小鼠,检测卵囊的感染活性. 结果 实验猫感染PRU株弓形虫后于第5d开始排出卵囊并持续至感染后第11～13 d,排出的卵囊数为1.0亿～1.5亿个/只,以CsCl梯度离心方法纯化卵囊得率为20％.新鲜采集的卵囊孢子化率为95％.以100、50和10个孢子化卵囊的剂量感染小鼠,8～10 d后的死亡率分别为100％,66.7％和0％. 结论 用PRU株弓形虫感染华南本地家猫,成功建立了弓形虫有性生殖实验动物模型,收集、纯化的卵囊易孢子化且具感染活性,为弓形虫感染的防治提供了基础.
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唐山市犬、猫肠道寄生虫感染情况调查
随机收集唐山市犬、猫粪样,采用直接涂片法和饱和盐水浮聚法查肠道寄生虫虫卵或卵囊.共收集粪便标本100份,包括犬粪82份,猫粪18份.其中家养犬、猫粪37份,流浪犬、猫粪21份,宠物市场犬、猫粪42份.结果犬、猫粪阳性27份,检出肠道寄生虫7种,犬、猫感染率分别为38.10％和33.33％.其中家养犬、猫感染率为13.51％,流浪犬、猫感染率28.57％,宠物市场犬、猫感染率38.10％.调查结果显示唐山市犬、猫肠道寄生虫感染率较高,人群存在潜在人兽共患寄生虫病危害.
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浙江省家猫中汉赛巴尔通体感染的流行病学调查
目的 查明浙江省家猫汉赛巴尔通体感染情况.方法 采集家猫股静脉血,一半留全血,一半分离血清,用分离培养和聚合酶链反应检测全血,用ELISA检测血清,计算感染情况.结果 浙江省各地家猫汉赛巴尔通体抗体阳性率平均为34.5%,江山、龙游、安吉、淳安、建德和上虞市(县)的阳性率分别为37.5%、30.0%、33.3%、40.0%、50.0%和28.6%,各地之间阳性率差异无统计学意义;雌性猫阳性率为36.0%,雄性为33.3%,二者间的阳性率差异亦无统计学意义.结论 浙江省各地家猫汉赛巴尔通体抗体阳性率均较高,存在传播给人的风险,必须采取措施加以控制.
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猫中脑髓外压迫性损伤模型的建立
目的 探讨建立中脑压迫性损伤实验动物模型的方法和意义.方法 采用84只普通家猫,体重2.5～4.0 kg,全麻下开颅在中脑背侧置入微型硅胶水囊,造成中脑髓外压迫性损伤,根据不同压迫容量(0.25 ml、0.50 ml、1.00 ml、1.50 ml和2.00 ml)和不同压迫时间(2 h、12 h、24 h和48 h)分组,观察损伤后动物意识、呼吸、运动功能、瞳孔及神经反射情况,同时记录脑干听觉诱发电位(BAEP)变化,评估动物神经系统功能损伤程度,评价模型的稳定性.结果 硅胶水囊置入猫中脑背侧后,可以造成可控的中脑损伤,并引起相应的病理生理改变,包括意识水平下降、运动障碍和神经反射异常等,压迫容量和持续时间与中脑损伤程度呈正相关.同时,损伤动物BAEP波潜伏期明显延长,与脑干BAEP的异常程度明显相关.结论 应用硅胶水囊置入猫中脑背侧,建立中脑损伤的实验动物模型稳定、可控,可以应用于中脑损伤的实验研究.
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猫急性脑血管痉挛早期脑血流和脑组织谷氨酸的变化
目的 观察猫大脑中动脉(MCA)受机械性刺激痉挛后早期(2 h内)的血管直径、脑血流量和谷氨酸变化.方法 6只猫开颅暴露右侧MCA,机械刺激MCA 30 min,测量刺激前后MCA直径的变化,监测皮层脑组织灌流指数,测定脑皮层细胞间隙中谷氨酸浓度的变化.结果 机械性刺激MCA后,MCA直径缩小,为刺激前的68.2%.脑组织灌流指数下降到刺激前的48.7%.刺激结束后2 h,MCA直径恢复正常.脑组织灌流指数恢复到刺激前的63.8%.机械刺激期间谷氨酸浓度迅速增加,可达到正常值的40倍,在撤除刺激后,谷氨酸浓度没有明显减少.结论 机械性刺激可致脑血管痉挛,脑血流量降低,兴奋性氨基酸升高.
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颅脑手术中机械性脑血管痉挛后大脑中动脉内皮细胞的凋亡
目的观察猫大脑中动脉(MCA)受机械性刺激痉挛后早期(2 h内),血管壁和内皮细胞超微结构的变化.方法6只猫,眶后入路,暴露右侧MCA,机械刺激MCA 30 min,应用显微目镜的显微尺测量MCA直径的改变.激光多普勒仪纪录皮层脑血流灌流指数.电子显微镜观察刺激后2 h MCA血管壁和内皮细胞超微结构的变化.结果机械性刺激MCA后,MCA直径缩小,为刺激前的68.77%.脑组织灌流指数下降到刺激前的42.59%.刺激结束后2 h,MCA直径恢复正常.脑组织灌流量恢复到刺激前的61.87%.电镜结果发现,MCA经急性机械性刺激后早期(2 h)内皮细胞染色质边集,凝聚成新月形小体.线粒体嵴模糊不清.结论机械性刺激猫脑MCA可致血管壁痉挛.刺激后早期(2 h)即出现内皮细胞超微结构的变化,显示内皮细胞的凋亡现象.提示颅脑手术或动物实验中对脑血管的机械性刺激应尽可能的轻微,尽量减少对脑血管的机械性刺激,避免急性脑血管痉挛的发生,以减少副反应或假阳性实验反应.
