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云南省德钦县犬感染嗜吞噬细胞无形体的调查
目的 了解云南省德钦县犬感染嗜吞噬细胞无形体的状况.方法 对2013-2014年期间在德钦县采集的315份犬血标本,应用巢式聚合酶链反应进行嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因扩增和测序分析,并将所测序列与GenBank中注册的基因序列进行同源性和进化树分析.结果 315份犬血样本中共有18份扩增到目的片段,总阳性率为5.71％(18/315),其中中华田园犬的阳性率为7.14％(12/168),藏犬的阳性率为5.13％(4/78),哈巴犬的阳性率为2.99％(2/67),狼犬中未检出HGA.所检出的嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因与GenBank中收录的部分嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因序列的同源性高达99％～ 100％.进化树分析结果显示,当地无形体分为2类流行株,将其命名为Yunnan HGA1和Yunnan HGA2,分别占检出菌株的16.67％和83.33％.Yunnan HGA1与在乌拉圭、西伯利亚和远东地区发现的全沟硬蜱中检测到的无形体片段(HM366583)同源性为100％,Yunnan HGA2与加拿大发现的肩突硬蜱中检测到的无形体片段(HG916766)同源性为99％.结论 云南省德钦地区犬存在嗜吞噬细胞无形体的感染,进一步开展相应媒介、宿主及人群感染调查十分必要.
关键词： 犬 16S rRNA基因 嗜吞噬细胞无形体 -
2015年全球犬传播的人类狂犬病流行现况
1 背景狂犬病的病死率接近100％,是全球病死率高的疫苗可预防病毒性传染病之一,每年在全球造成许多人死亡.大约95％的人类狂犬病是由感染病毒的犬伤人传播的,本文重点介绍犬传播的人类狂犬病流行现况.世界卫生组织(WHO)被忽视的热带病路线图设立了包括消除狂犬病在内的公共卫生问题防控目标,该目标要求人类狂犬病零死亡.为了达到该目标,近几年一些国家开展的防控项目表明,犬传播的狂犬病可以通过犬的大规模免疫接种,结合加强监测、公众健康教育、改善暴露后预防等措施进行有效控制和终消除.
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甘肃省环县家犬棘球绦虫吡喹酮驱虫情况调查
目的 评估甘肃省环县包虫病流行区家犬吡喹酮驱虫情况,了解影响驱虫工作的因素,以进一步促进家犬驱虫的效果.方法 将环县12个乡镇按犬粪棘球绦虫抗原阳性率分为高、中、低3层,在每层中随机抽取1个乡镇,每个乡镇再随机抽取1个自然村,对抽中自然村的养犬户全部调查.通过问卷调查养犬户主,了解犬驱虫药的发放频率、投喂方式、犬主对犬驱虫的态度及认知情况.结果 2016年7月至2017年6月,138家养犬户中21.74％(30/138)按要求做到了“月月驱虫”.每10个月发放一次驱虫药的村庄,养犬户中做到“月月驱虫”的比例为8.51％(4/47);每6个月投放一次驱虫药的村庄,“月月驱虫”比例为26.83％(11/41);每4个月投放一次驱虫药的村庄,“月月驱虫”比例为30.00％(15/50)(趋势x2=5.8,P＜0.05).未做到“月月驱虫”的原因主要包括养犬户忘记投药(26.85％,29/108)、未配备驱虫药(25.93％,28/108)、记错投药频率(24.07％,26/108)等.犬只对驱虫药的吞食率为75.00％(135/180).结论 犬对驱虫药的吞食率较高,但是养犬户做到“月月驱虫”的比例尚不高.未做到“月月驱虫”的主要原因为养犬户忘记投药或记错投药频率.建议当地能提高驱虫药的发放频率,定期提醒养犬户投药.政府在包虫病防治中应发挥主导作用,统一协调各部门,建立监督管理机制,保证做到“犬犬投药、月月驱虫”.
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北京市东城区狂犬病控制现状
目的 总结北京市东城区人和犬狂犬病控制现状,分析东城区狂犬病防控工作成绩和不足,为进一步完善狂犬病控制措施提供建议.方法 通过调查收集人和犬狂犬病控制工作资料.结果 东城区的致伤人群大幅增加,夏秋季致伤人群数量较多,女性多于男性,以青壮年为主,但是0～14岁儿童和学生也是不容忽视的人群;致伤部位多见于手部和下肢,就诊及时率较高,Ⅲ级暴露人群的被动免疫制剂使用率较低;犬的免疫率较低.结论 东城区的狂犬病防控形势较好,但仍需提高Ⅲ级暴露人群的被动免疫制剂使用率和犬的免疫覆盖率.建议加强对高危人群,特别是缺乏自我保护的儿童的暴露前免疫,加强狂犬病相关知识的健康教育.
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彗星试验检测硫芥对淋巴细胞DNA损伤的研究
硫芥(sulfur mustard)作为化学战剂使用已有80余年的历史,由于它具有高度的化学活性和广泛的生物学作用,迄今仍未失去"毒剂之王”的重要地位.硫芥是双功能烃化剂,攻击的主要靶分子是DNA,能引起DNA链断裂,导致细胞死亡[1].近年来,流行的DNA损伤与修复的检测方法--彗星试验,利用单细胞凝胶电泳(Single Cell Gel Electrophoresis;SCGE)技术检测单个细胞DNA断裂,可直接观察单个细胞的DNA损伤,该试验具有诸多优点[2].为此,本研究应用彗星试验探索硫芥对人、鼠、犬淋巴细胞DNA的损伤规律,为寻找硫芥中毒早期敏感的观察指标,为临床诊断提供新技术、新方法[3].
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硫芥对犬外周血淋巴细胞DNA损伤的作用
硫芥是典型的双功能烃化剂,进入体内后产生烃化作用,攻击的主要靶分子是DNA.目前,单细胞凝胶电泳(SCGE)技术发展很快,国内、外将该法作为DNA损伤检测的基本方法之一.先前我们用此法进行硫芥对人外周血淋巴细胞DNA损伤的体外实验[1],本次选用犬外周血淋巴细胞,观察体内、外硫芥染毒后DNA损伤的剂量效应与时间效应关系,为寻找研究硫芥细胞毒性作用及中毒早期敏感的检测方法提供实验依据.
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犬髂动脉狭窄冷冻扩张成形术影响血管内膜增殖和凋亡的实验研究
目的 探讨冷冻扩张成形术治疗犬髂动脉狭窄在影响内膜增殖和凋亡方面的价值.方法采用手术结扎和缝扎方法建立犬髂动脉狭窄模型.将髂动脉狭窄成模犬随机分成冷冻组(冷冻扩张组)和球囊组(球囊扩张组),每组8只.两组犬于相应治疗2周后进行数字减影血管造影检查血管狭窄程度,并取出目标血管行免疫组化和Western blot方法检测与血管内膜增殖相关的基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达;采用TUNEL法检测平滑肌细胞凋亡情况.结果免疫组化结果显示,与球囊组比较,冷冻组TIMP-2表达明显增强,而MMP-2表达明显减弱.Western blot结果同样显示,与球囊组比较,冷冻组TIMP-2表达明显增多(t=-9.441,P<0.01),而MMP-2表达明显减少(t=9.315,P<0.01),差异均有统计学意义.TUNEL法结果显示,与球囊组比较,冷冻组平滑肌细胞凋亡明显增多(t=-8.95,P<0.01),差异均有统计学意义.结论与普通球囊治疗法相比,冷冻扩张成形术可通过诱导TIPM-2蛋白表达,降低MMP-2蛋白表达,并且诱导平滑肌细胞凋亡,从而抑制狭窄血管扩张治疗后的内膜增生及胶原纤维的合成,有助于减轻或预防术后血管再狭窄.
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犬和人心房颤动时改良房室结对心室率的影响
目的:本文观察犬和人心房颤动时经导管射频消融改良房室结慢、快径区域对心室率的影响.方法:杂种犬6条,体重10.4±1.1kg.房室结折返性心动过速(AVNRT)患者10例,年龄26-62岁.阵发性房颤患者5例,年龄60-72岁,其中2例为短P-R间期综合症.诱发房颤方法:(犬)静滴氯化乙酰胆碱后猝发脉冲电刺激,(人)直接猝发脉冲电刺激.先消融房室结慢径区域,若房室结有效不应期或房颤时平均R-R闯期无明显变化,则加行房室结快径区域(室侧/和房侧)消融.结果:10例AVNRT患者中8例经消融阻断慢径,房室结前传导有效不应期(AVN-ERP)及诱发房颤时平均R-R间期(RRAf)明显延长(P<0.01),无并发症.6条犬及5例阵发性房颤(Af)患者经心内电生理检查证实均无房室结双径路现象,选择性消融"慢径区域"后,AVN ERP和RRAt无明显变化,加行"快径区域"消融(犬:先室侧后房侧,人:室侧),AVN-ERP和RRA,明显延长(P<0.01),1例阵发性房颤患者术后3天出现Ⅲ°AVB,2周后恢复为I°AVB.结论:选择性射频消融AVN慢径区域对减慢伴房室结双径路的房颤患者的心室率是安全和有效的方法.而无房室结双径路表现的房颤患者,则取决于慢、快径区域有效不应期的差异情况,当二者相当时,可能需要同时消融慢、快径区域,方可降低Af时的心室率.本文观察到在消融犬快径区域时,房侧靶点(A/V>1)较室侧靶点(A/V<1)更易于造成Ⅲ°AVB.故选择快径室侧消融靶点较安全.
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犬胰右叶缺血模型的建立及意义
目的:建立犬胰腺右叶缺血模型,探讨胰腺缺血治疗的可行性.方法:结扎犬胰右叶供血血管.包括胰十二指肠前、后动脉及胰尾动脉,建立犬胰腺右叶缺血模型,观察犬胰右叶缺血后的WBC计数,血清淀粉酶水平、血糖变化及胰岛素水平,犬胰及十二指肠的病变改善,并发症的发生情况.结果:10条犬术后均存活,无十二指肠穿孔、坏死、梗阻等并发症发生;WBC计数术后1、3天较术前明显升高(P＜0.01),第7天恢复正常;缺血后血淀粉酶水平在术后3、7天较术前升高(P＜0.01),至第11天恢复正常水平;缺血后1、2、4个月的血糖水平及胰岛素水平与术前对照组无统计学差别(P＞0.05);十二指肠病理变化为肠壁纤维增生,粘膜萎缩;胰腺病理变化早期表现为无菌性坏死,晚期表现为纤维组织增生及修复.结论:缺血治疗具有其可行性.
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左旋精氨酸对体外循环未成熟犬肺损伤的保护作用
目的探讨L-Arg对体外循环未成熟犬肺损伤的保护作用.方法月龄幼犬(＜30d)18只,随机分为3组:正常对照组:CPB对照组;L-Arg组,观察术后肺静脉血血气分析,肺组织W/D,肺组织MDA、N0含量及光镜、电镜下改变.结果L-Arg组肺静脉血血气、肺组织N0含量较CPB组明显改善(PaO2,CO2,N0,p<0.02),而肺组织湿干比(w/D)明显降低(P＜0.01).L-Arg显著改善了CPB所致的肺泡壁断裂,肺泡腔出血渗出以及电镜下Ⅱ型上皮细胞板层体排空,内皮细胞肿胀等损伤性改变.结论术前及体外循环间给予L-Arg对体外循环未成熟犬肺损伤有较好的预防作用,可明显保护肺组织Ⅱ型上皮细胞和血管内皮细胞的损害.
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严重烧伤后小肠粘膜病变的扫描电镜研究
目的探讨烧伤后小肠粘膜病变的构型改变.方法应用扫描电镜对烧伤后小肠粘膜病变的立体构形进行了观察.结果烧伤后小肠粘膜有严重损伤,大多数绒毛顶端上皮层及微绒毛均有剥脱,部分上皮层剥脱外翻呈花瓣状,剥脱区绒毛固有层裸露,并可见大量血细胞及纤维蛋白渗出,毛细血管外露.结论烧伤后肠道的屏障功能严重破坏,而肠道屏障功能破坏可能是导致烧伤后感染和多器官功能衰竭的一个重要原因.
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中国狂犬病毒感染分布状况调查
目的 了解中国狂犬病不同流行区狂犬病毒的感染分布情况.方法 采集中国狂犬病高、中、低发病区动物脑组织以及疑似病例标本,利用直接免疫荧光法(DFA)和RT-PCR法检测狂犬病毒感染.结果 DFA法检测3007份犬脑组织标本,狂犬病毒阳性率为8.4%(254/3007),再经RT-PCR法验证,狂犬病毒阳性率为30.7%(78/254).DFA法检测93份伤人犬和猫的脑组织标本,狂犬病毒阳性率为67.7%(63/93),再经RT-PCR检测全部为阳性.此外,调查区域的黑线姬鼠、鼬獾和疑似病例标本中也检测到狂犬病毒.不同省份以及同一省份不同发病地犬狂犬病毒感染率差异无统计学意义.结论 中国狂犬病流行区家养犬(猫)中存在较高的狂犬病毒感染率,野生动物中也有狂犬病毒感染.
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新疆伊犁地区不同品种犬博尔纳病病毒自然感染调查
目的 调查新疆伊犁地区不同品种犬博尔纳病病毒(BDV)流行现状和分析其可能的种系来源.方法 采用改进的巢式反转录PCR(nRT-PCR)方法,检测犬外周血单核细胞(PBMCs)BDV磷蛋白(p24)RNA基因片段.用BDV核蛋白(p40)RNA片段和质粒PMD19标准品验证p24阳性产物,排除可能的假阳性.验证后的阳性产物进行基因测序、同源比对、氨基酸序列和系统发生学分析.结果 8个品种150只犬中,仅哈萨克牧羊犬检出BDV p24片段,阳性率为11.0%(10/91).基因序列与德国马He/80和德国绵羊S6病毒株同源相似度分别为99.2%和95.7%,氨基酸相似度为100%和89.3%,亲缘关系与He/80近,其次为S6.结论 新疆伊犁地区哈萨克牧羊犬可能存在BDV自然感染,其流行株与该地区伊犁马感染的He/80和引进德国美利奴绵羊的S6病毒株有关.
关键词： 博尔纳病病毒 磷蛋白RNA 巢式反转录-聚合酶链反应 TaqMan探针 犬 -
心宁胶囊对麻醉犬心肌缺血及血液生化指标的影响
目的 探讨心宁胶囊对麻醉犬心肌缺血及血液生化指标的影响.方法 将30条犬随机分为模型组、阳性药组、中药对照组和心宁胶囊高、中、低剂量组.观察各组动物心外膜心电图、心肌梗死面积、血清肌酸激酶(CK)、血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮前列腺F1α(6-Keto-PGF1α)指标的变化.结果 与模型组比较,心宁胶囊具有降低心肌缺血范围,改善冠脉血流,缩小心肌梗死面积的作用(P<0.05,P<0.01).结论 心宁胶囊对心肌缺血犬具有抗心肌缺血、保护心肌细胞及缩小心肌梗死面积的作用.
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芒果叶提取物芒果苷安全性评价Ⅱ:小鼠及犬急性毒性试验
目的:观察动物24 h多次灌胃给予芒果苷的急性毒性.方法:将40只KM种小鼠随机分为给药组和对照组,6只Beagle犬随机分为给药组和对照组,均以大耐受量(MTD)法灌胃给药进行毒性试验,给药后均观察14 d.结果:小鼠给药后,其外观、行为活动、饮食等均未见明显异常,体重增长正常,试验结束时全部存活,大体解剖未见肉眼可见病理变化;犬给药后,均出现一过性灰白色粪便,给药组在给药后次日出现TBIL明显升高,发生率为1/4,但观察结束后又恢复至给药水平,其余外观、血液生化指标等均无明显异常,大体解剖未见肉眼可明显异常.结论:小鼠灌胃给予芒果苷54 g/kg未产生明显毒性反应;犬灌胃给予芒果苷MTD＞ 9.0 g/kg体重;有1/4例动物在给药次日TBIL明显升高,提示芒果苷有可能影响TBIL代谢,但能自行恢复.
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芪龙胶囊对犬急性心肌缺血的影响
目的:观察芪龙胶囊对犬急性心肌缺血缺血、心肌梗死的保护作用.方法:采用犬冠脉前降支结扎的方法建立犬急性心肌缺血模型.36只犬随机分为6组,每组6只动物,分别为:模型对照组,合心爽组(0.5 mg/kg),复方丹参片(0.24片/kg)组,芪龙胶囊256、128及64 mg/kg剂量组;采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度,定量组织学(N-BT染色法)测定心肌梗死范围,超声多普勒血流计测定心脏冠脉血流量,血气分析仪测定心肌耗氧量,全自动生化分析仪测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化.结果:芪龙胶囊经十二指肠给药可明显减少N-BT所示的犬心肌梗死面积/心室面积的比率;明显减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度(药后15 min ～ 180 min),与模型组比较均有显著差异;可减小由心外膜电图标测的心肌缺血范围(药后15 min～180 min);增加冠脉流量(药后30 min ～ 45 min);对心肌缺血及心肌梗死引起的血清CK、LDH活性升高有明显抑制作用,对急性心肌缺血后动脉、静脉血氧含量未见明显影响.结论:芪龙胶囊对犬急性心肌缺血模型表现出较好的心肌保护作用,可能与增加冠脉血流量,改善心肌供血有关.
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银杏蜜环口服溶液改善犬急性心肌缺血的研究
目的:观察银杏蜜环口服溶液对犬急性心肌缺血的保护作用.方法:36只犬随机分为6组,模型组,合心爽组(5.0 mg/kg);天麻蜜环粉组(100 mg/kg);银杏提取物组(3.0 mg/kg);银杏蜜环口服溶液高剂量组(206 mg/kg)和银杏蜜环口服溶液低剂量组(103 mg/kg).通过结扎犬冠状动脉前降支的方法复制急性心肌缺血模型.观察心肌缺血后不同时间点冠状动脉血流量、血氧含量、心肌耗氧量及心肌氧利用度,心肌梗死范围的变化.结果:与模型组比较,银杏蜜环口服溶液大、小剂量组以及蜜环粉组和银杏提取物组心肌梗死范围明显下降(P＜0.05);同时银杏蜜环口服溶液高剂量组在缺血后30 min静脉血氧含量明显下降(P＜0.05),在缺血后15、30、60 min心肌耗氧量和心肌氧利用度明显增加(P＜0.05),在缺血后60-180 min时冠状动脉血流量明显升高(P＜0.05).结论:银杏蜜环口服溶液可在心肌急性缺血状态下短期内促进心肌氧供给和氧消耗;有效增加冠脉血流量,增加心肌的供血供氧,提高心肌氧利用度.药效作用优于银杏提取物和天麻蜜环粉.
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黄芪皂苷注射液对戊巴比妥钠所致心衰犬心脏舒缩功能的影响
目的:观察黄芪皂苷注射液对实验性心衰犬心脏舒缩功能的影响.方法:采用中枢抑制药.戊巴比妥钠诱发麻醉犬在体急性心衰模型,iv黄芪皂苷注射液,同时测定左心室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、收缩压大上升速率(+dp/dtmax)、舒张压大下降速率(-dp/dtmax) 心率(HR)等心功能指标.结果:黄芪皂苷注射液能明显增加心衰犬LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax,对LVEDP和HR无明显影响.结论:黄芪皂苷注射液具有增强心肌收缩力,改善心脏收缩和舒张功能,对急性心衰有明显的治疗作用.
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三羊益心康胶囊对犬急性心肌缺血损伤保护作用的实验研究
目的:观察三羊益心康胶囊的抗心肌缺血作用.方法:采用结扎犬冠状动脉前降支法制备急性心肌梗死模型,利用心外膜电图标测法计算心肌缺血程度,硝基四氮唑蓝(NBT)组织化学染色法测定心肌梗死面积,血液检测天门冬氨酸氨基转换酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH),在电镜下观察心肌病理组织改变,观察了三羊益心康胶囊对心肌缺血损伤保护作用.结果:三羊益心康胶囊可明显降低心肌缺血程度(∑-ST),减少心肌缺血范围(N-ST),缩小心肌梗死面积(MIS),并能显著降低血清AST和CPK含量,明显减轻心肌细胞损伤程度.结论:该药对犬急性心肌缺血具有明显的保护作用.
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心衰宁丸治疗犬慢性心功能衰竭的实验研究
目的:研究心衰宁丸对犬慢性心衰的影响.方法:采用犬腹主动脉结扎法制作慢性心衰模型,观察犬日服用心衰宁丸分别为0.3g·kg-1、0.6g·kg-1、1.2g·kg-1连续4周后心功能及心肌病理指标的变化.结果:心衰宁丸中、高剂量可增加慢性心衰模型犬的心输出量、心输出指数、每搏心输出量、每搏输出指数、左室做功指数;还可降低肺动脉楔入压、外周血管阻力、左室舒张末压及改善心肌的肥厚程度,降低心脏重量指数.光镜下发现模型组心内膜显著增厚伴黏液变性,部分心肌脂肪变性,心肌间质灶状、网状纤维组织增生及不规则片状纤维瘢痕形成;心衰宁丸中、高剂组心内膜及心肌间质的病变均较模型组明显减轻.结论:心衰宁丸可改善慢性心衰模型犬的心脏收缩和舒张功能.
