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Ⅰ型和Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体在大鼠、猫和猴脊髓内的定位分布
目的观察Ⅰ型和Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体(VGluT1和VGluT2)在大鼠、猫和猴脊髓内的定位分布.方法免疫组织化学技术. 结果 VGluT1和VGluT2在大鼠、猫和猴脊髓灰质内均有分布.VGluT1在大鼠和猫脊髓背角Ⅱ层内侧部(ⅡI)及Ⅲ～Ⅵ层的内侧部分布为密集,在Ⅰ层和Ⅱ层外侧部(Ⅱo)的分布较稀疏,其他层能观察到中等密度的分布.而在猴脊髓,VGluT1的分布与大鼠和猫有所不同,Ⅰ层、ⅡI层、Ⅲ层及Ⅳ～Ⅵ层内侧部分布密集,在Ⅱ o层及Ⅳ～Ⅵ层外侧部较稀疏,甚至观察不到阳性结构.在猴的脊髓前角,仅在Ⅸ层观察到较稀疏的阳性产物,而其他层未见阳性产物.除此之外,在猴的脊髓后索内侧部能见到散在的阳性结构,而在大鼠和猫未观察到.VGluT2阳性产物在3种动物脊髓灰质内均呈中等强度的分布,其中在Ⅰ层、Ⅱ层和Ⅹ层内呈密集分布,在Ⅲ～Ⅵ层内侧分布较稀疏.在猴的背角深层外侧部,阳性产物非常少.在大鼠的外侧脊核(LSN)能见到中等强度的VGluT2阳性产物,而在猫和猴中并未观察到.在3种动物脊髓中,VGluT1和VGluT2阳性产物均呈点状分布. 结论 VGluT1和VGluT2在3种动物脊髓内均有分布,但其分布有一定的种属差异.提示它们可能在不同动物脊髓兴奋性神经元的活动中发挥重要作用.
关键词： 囊泡膜谷氨酸转运体定位分布 Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体 Ⅱ型囊泡膜谷氨酸转运体 脊髓 免疫组织化学 大鼠 猫 猴 -
单侧坐骨神经完全结扎术后Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体在大鼠腰髓、背根神经节和结扎远侧端神经干内表达的变化
目的研究单侧坐骨神经结扎对大鼠腰4～5脊髓节段和相应的背根神经节(DRGs)内VGluT1样免疫阳性反应产物表达的影响以及VGluT1通过轴浆流向外周转运的情况.方法采用免疫组织化学方法观察单侧坐骨神经结扎后不同时间内腰4～5脊髓节段、DRGs和结扎部位的近、远侧端神经干内VGLuT1样免疫阳性反应强度的变化.结果(1)坐骨神经结扎后第1和第2天,VGluT1样免疫阳性产物在结扎的同侧腰4～5脊髓节段和相应节段的DRGs内未检测到明显变化;但自术后第4天开始,可观察到VGluT1样免疫阳性产物的表达在上述部位逐渐减弱;VGluT1样免疫阳性产物表达的降低在上述部位所出现的时间和程度相平行.(2)结扎后第1天即可观察到VGluT1样免疫阳性产物在坐骨神经结扎部位近侧端的表达有所升高,但自术后第4天开始逐渐降低;而VGluT1样免疫阳性产物在坐骨神经结扎部位远侧端的表达自结扎后第1天起就逐渐降低,至第4周时已完全消失.结论(1)DRG神经元合成VGluT1,并通过轴浆流将VGLluT1向中枢突和周围突运输,故腰髓内部分VGluT1样阳性末梢起源于DRG神经元;(2)外周神经的损伤很易影响到DRG神经元内VGluT1的合成.
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大鼠三叉神经本体觉中枢通路中VGluT1样阳性胞体和终末的生后发育、分布以及与PAG样阳性神经元的联系
本研究应用免疫组织化学和免疫荧光组织化学技术,在光镜和激光共聚焦显微镜下观察了大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体(VGluT1)样阳性神经元胞体和纤维终末的生后发育、表达和分布以及与磷酸激活的谷氨酰胺酶(PAG)样阳性神经元之间的联系.结果显示:(1)新生(P0)大鼠所有的三叉神经中脑核(Vme)神经元的胞体内均可观察到VGluT1的表达,3 d(P3)时,VGluT1的表达强,之后至P11,VGluT1的表达随着发育逐渐下降.P11后,在Vme神经元的胞体内未检测到VGluT1样免疫阳性产物,但在阴性胞体周围可观察到VGluT1样免疫阳性终末分布;(2)生后0 d,三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部及其邻接的外侧网状结构(Vodm-LRF)、三叉神经感觉主核背内侧部(Vpdm)和三叉上核尾外侧部(Vsup-CL)内已可观察到VGluT1样阳性纤维终末分布.生后7 d,VGluT1样阳性纤维终末开始在三叉神经运动核腹侧区(AVM)、上橄榄核背侧区(ADO)出现;(3)激光共聚焦显微镜下,于生后12 d在Vme、Vodm和Vpdm内和生后21 d在Vsup-CL内分别观察到一些VGluT1样阳性终末与PAG样阳性神经元的胞体或树突形成密切接触.以上结果提示:VGluT1可能与生后发育过程中大鼠脑干内三叉神经本体感觉中枢通路的兴奋性联系的建立密切相关.
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单侧坐骨神经完全结扎对大鼠腰段背根神经节内VGluT1阳性神经元的影响
本实验将大鼠分为两组(正常对照组和单侧坐骨神经完全结扎组),采用免疫细胞化学和中性红复染的方法分别观察了正常大鼠和单侧坐骨神经完全结扎后存活不同时间组大鼠腰4(L4)节段的背根神经节(DRG)内Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体(VGluT1)样阳性神经元的分布及其数量的变化.结果如下:(1)正常大鼠L4节段的DRG内可观察到VGluT1样阳性产物呈点状或斑状分布于胞浆内,有大约71.5%的DRG细胞表达VGluT1样免疫阳性,其中以大型(＞40 μm)和中等大小(20～40 μm)的神经元为主(分别占整个VGluT1样阳性细胞总数的30.7%和65.9%);(2)坐骨神经结扎后第1、2 d,在结扎同侧L4节段的DRG内未检测到VGluT1样阳性神经元数量的明显变化;但自术后第4 d开始,VGluT1样阳性神经元的数量随术后存活时间的延长逐渐减少.结扎1～4周大鼠DRG内VGluT1样阳性神经元数量在同一个动物的手术侧与对照侧相比有明显减少(P＜0.01);而结扎1～4周大鼠的手术侧DRG内VGluT1样阳性神经元的数量也明显低于结扎1～3 d大鼠的手术侧(P＜0.05或P＜0.01).以上结果表明,DRG内合成VGluT1样阳性物质的神经元主要是大、中型细胞,DRG细胞可通过轴浆流将VGLluT1向周围突运输,故外周神经的损伤很易影响到DRG神经元内VGluT1的合成.
关键词： Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体 免疫细胞化学 背根神经节 坐骨神经 大鼠
