HPLC-FLU法测定血清中黄藤素的含量

目的建立血清样品中黄藤素的高效液相色谱-荧光检测法.方法色谱柱为LiChrosorb SI 60(5 μm) 20 cm×4.0 mm ID;流动相为二氯甲烷-甲醇-二乙胺-冰醋酸(90∶9∶0.4∶0.5);流速为1.0 mL·min-1;荧光检测Ex＝365 nm,Em＝510 nm.血清样品加13-甲基小檗碱(内标),用三氯乙酸-氯仿提取,水浴加温、氮气吹干,用二氯乙烷溶解进样.结果黄藤素和内标的保留时间分别为8.4 min和7.1 min.黄藤素的低检测浓度为0.1 ng·mL-1.在0.1～10.0 ng·mL-1有良好线性关系(γ=0.9999).血药浓度测定天内、天间精密度分别为0.94%～1.85%和0.15%～6.47%.结论用高效液相色谱-荧光检测法测定黄藤素的血药浓度,有灵敏、专一和快速的优点,可满足药代动力学研究的需要.

莪术油明胶微球用于肝动脉栓塞

目的制备符合肝动脉栓塞要求的莪术油明胶微球(ZT-GMS).方法用正交设计优化了微球的制备工艺,对微球的制备工艺、粉体学性质、体外释药、初步稳定性和初步药效进行了研究.结果球径在40～160 μm的微球占97.16%,平均产率为89.73%,平均含药量为2.13%,平均包封率为19.36%(均以莪术醇计).体外释药12 h达80%,符合一级动力学模型,释药机理为溶蚀加扩散.稳定性考察实验结果表明其稳定性较好.肝动脉栓塞荷瘤大鼠实验结果表明大鼠平均生存率显著延长(P<0.01),肿瘤体积显著减小(P<0.01).结论微球的制备工艺及粒径分布较好,体外释药有明显的缓释作用,有一定疗效.

白蛋白微球的热变性对其水溶性及酶降解性的影响

目的研究白蛋白喷雾干燥微球经加热变性后的水溶性及酶降解性,探讨热变性机理.方法用喷雾干燥工艺制成粉末状白蛋白微球,进一步加热变性处理.热变性条件分别为:温度120℃,时间3～24 h;温度100～160℃,时间6 h.用紫外分光光度法测定微球在水中的溶解百分率,在37℃的恒温水浴中以胰蛋白酶的磷酸盐缓冲介质考察微球被酶解完全的时间.以傅立叶变换红外光谱法研究热变性引起白蛋白二级结构的改变.结果白蛋白微球的水溶性随热变性时间的延长和温度升高而显著降低,酶解时间也随之延长.热变性条件对蛋白质酰胺I谱带所表征的空间构象影响较大.结论加热变性程度对白蛋白微球的水溶性及酶解性均有显著的影响,这可能与白蛋白二级结构的改变及疏水性基团的暴露有关.通过选择适当的加热条件,可以调控白蛋白微球的体外溶解与降解特性,提示以白蛋白喷雾干燥微球作为药物载体时可调控载药白蛋白微球的释药速率.

离子抑制色谱法测定琥乙红霉素含量及有关物质

目的建立离子抑制色谱法测定琥乙红霉素原料的含量及有关物质的方法,并研究其影响因素.方法采用Zorbax SB-C18色谱柱,以0.02 mol.L-1 KH2PO4-乙腈(45∶55,用氨试液调至pH 6.8)为流动相,流速1.2 mL.min-1,检测波长210 nm,柱温(30±0.5)℃.结果在选定固定相条件下,流动相对组分的洗脱和选择性影响大,柱温次之,琥乙红霉素在乙腈中比较稳定.测定了有效主成分琥乙红霉素A的含量以及7个有关物质的总含量.琥乙红霉素A的平均回收率为99.45%,(RSD=2.24%, n=5).结论本法可用于琥乙红霉素原料的含量测定和有关物质的检查.

抗癌抗生素力达霉素与抗IV型胶原酶单链抗体的基因工程组装融合蛋白

目的以IV型胶原酶为靶点,研制兼具有抗肿瘤侵袭转移和强烈杀伤肿瘤细胞的新型单抗导向药物.方法力达霉素(LDM)分子由力达蛋白(LDP)和力达发色团(LDC)两部分组成.从基因工程转化菌中提取融合蛋白(LDP-Fv)并与LDC 组装重建,制备高效抗癌抗生素力达霉素与单链抗体的组装融合蛋白(LDM-Fv).通过ELISA、酶谱分析、Boyden 小室体外侵袭实验及克隆形成测定,观察其生物学活性.结果 LDM-Fv能特异性与肿瘤细胞的IV型胶原酶结合并抑制其活性,LDP-Fv有阻断肿瘤细胞侵袭的能力,但无细胞毒性,加入LDC制成的组装融合蛋白LDM-Fv对肿瘤细胞有强烈的杀伤作用,并明显强于丝裂霉素和阿霉素.结论 LDM-Fv可能成为一种新型高效、小型化抗肿瘤导向药物.

用渗滤理论研究乙基纤维素骨架片的适压片力范围

目的用渗滤理论研究制备阿司匹林-乙基纤维素骨架片的适压片力范围.方法使用不同的压片力(3～30 kN)制备了含阿司匹林40%的阿司匹林-乙基纤维素骨架片,测定了溶出曲线,用Higuchi方程和Ritger-Peppas方程对溶出数据进行拟合.将拟合的Higuchi方程的斜率b值和计算得到的片剂的孔隙率ε,代入渗滤理论推导出的公式中,可计算出表观扩散系数D和片剂溶出性能参数β,分别以D对ε及β对ε回归,可得到临界孔隙率εc,由β-ε,D-ε和β-ε0曲线可推知适压片力范围.结果压片力在9～18 kN时,药物释放遵从Higuchi模型方程,片剂以骨架扩散机制释药,且释药速度适中,因此9～18 kN为适压片力范围.低于9 kN时,片子的初始孔隙率太大,药物溶出过快;高于18 kN时,药物溶出过慢,呈异常扩散机制释放药物.结论渗滤理论可较清楚地阐明阿司匹林骨架片的释药机制,并可得到制备阿司匹林片的适压片力范围.

桉叶苷的分离和结构

目的研究垂枝赤桉Eucalyptus camaldulensis var. pendula Blak. et Jacobs叶的化学成分.方法采用各种色谱技术进行分离纯化,用IR, MS, 1HNMR, 13CNMR(DEPT), 1H-1H COSY, 13C-1H COSY, COLOC和X-射线单晶衍射鉴定化合物.结果分离得到了5个化合物:三十烷醇(I),β-谷甾醇(II),对羟基苯甲酸(III), 胡萝卜苷(IV), 5,7-二羟基-2-甲基-苯骈吡喃酮-7-O-β-D-{6-O-[4R-(1-甲基-1-羟基)-乙基环己-1-烯]-甲酰基}-吡喃葡糖(V).结论所有化合物均为首次从该植物中分得,V为一个新化合物,命名为桉叶苷(camaldulenside).

FAB-MS/MS法研究4(20)-双键5/7/6型紫杉烷类二萜化合物的质谱裂解特征

目的研究4(20)-双键5/7/6型紫杉烷类二萜化合物的质谱裂解特征,以及取代基种类及位置对质谱裂解的影响,探讨该类化合物的质谱裂解规律.方法利用FAB技术测定该类型3种化合物的[M+H]+和[M+Na]+等不同加合离子,以及由其产生的特征碎片离子的CID-MS/MS谱,并对有关特征离子进行了高分辨测定.结果 C-10位为BzO取代的化合物1和2主要以[M+Na]+离子形式存在,该离子主要进行失去HOBz的裂解反应,而C-10位为OH基的化合物3主要以[M+H]+离子形式存在,该离子以失去1个和2个H2O的裂解反应为主导.另外,化合物1和3终裂解产生m/z 237离子,而化合物2产生m/z 253离子.结论 MS/MS技术可以有效地进行结构差异甚微的相关化合物的结构解析.

固相萃取结合GC-MS系统分离分析生物体液中常见毒物药物

目的研究生物体液中7类47种常见毒物药物的系统分离分析方法.方法选用通用性较好的新型紧压式三相混合填料的固相萃取柱(SPEC Multi-Modal),采用酸性和碱性两步洗脱,建立同时提取血浆中几十种具不同理化性质的酸性、中性和碱性药物的系统化固相萃取方法.GC-MS系统分析方法将色谱系统的保留性质和质谱系统的特征离子、谱库检索相结合实行多指标定性.利用所选的每类药物及其代谢物代表碎片离子的质量色谱,对几类药物及其代谢物进行筛选.结果测定了21种常见药物毒物在血浆中的绝对回收率,回收率均在78%以上,相对标准偏差小于7%(n=5).所建系统分析方法对急性中毒病人进行了定性定量分析,取得满意的结果,使方法在实际应用中得到了验证.结论此方法系统性强、选择性好、灵敏度高,结果可靠.

四倍体板蓝根中的两个新生物碱

目的研究四倍体菘蓝Isatis indigotica Fort.根的化学成分.方法应用硅胶柱色谱对乙酸乙酯萃取部分中化学成分进行分离纯化,根据理化常数测定和光谱(IR, MS, 1HNMR, 13CNMR, 2DNMR)分析技术鉴定结构. 结果从乙酸乙酯萃取部位分离得到4种生物碱类化合物,分别鉴定为:色胺酮(I), 2,5-二羟基吲哚(II), 2,3-二氢-4-羟基-2-氧-吲哚-3-乙腈(III),吲哚-3-乙腈-6-O-β-D-葡糖苷(IV).结论 II为首次从该种植物中分离得到,III,IV为新化合物.

反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中左旋黄皮酰胺及其主要代谢产物和药代动力学

目的探讨左旋黄皮酰胺[(-)clau]及其主要代谢产物6-OH-clau在大鼠体内的药代动力学.方法建立了RP-HPLC-UV法.固定相为Kromasil-100 C18(5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-甲醇-水(21∶16.5∶62.5), DM-9384作内标,氯仿作提取溶剂.结果测得(-)clau的回收率为96.91%～105.74%,日内、日间RSD低于7%,低检测浓度为24 ng.mL-1,(-)clau和6-OH-clau分别在0.047～968 μg.mL-1和0.049～200 μg.mL-1,线性关系良好(γ=0.999);(-)clau和6-OH-clau血浆浓度-时间曲线符合二室开放模型,同时求得两者的药代动力学参数.结论数据表明(-)clau在大鼠血浆中的分布、代谢转化和消除均较快.

人抑制素βB亚基片段的合成及其单克隆抗体的制备

目的合成人抑制素βB亚基两个片段βB(1-28) (GLECDGRTNLC-CRQQFFIDFRLIGWNDW), βB(85-115) (LSTMSMLYFDDEYNIVKRDVPNMIVEECGCA) 并制备其单克隆抗体.方法应用固相多肽合成法人工合成了2个βB亚基片段,以化学合成的片段作为半抗原,经抗原的制备、单抗的制备获得4株杂交瘤细胞株.单抗的鉴定及特异性分析实验表明这些单克隆抗体具有特异性,敏感性和实用性.对抑制素α,βA,βB亚基的单抗进行了进一步的纯化.用纯化后的单抗进行了乳腺癌的免疫组化研究.结果相关肿瘤组织对各亚基单抗的免疫组化反应无明显差异;乳腺癌对各亚基单抗的免疫组化反应阳性率无明显差异.结论在现有实验的基础上建立血清抑制素的测定方法是可能的.

人参皂苷Rb1对小鼠性功能的改善作用及其机制探讨

目的研究人参皂苷Rb1对小鼠性功能的影响及其作用机制.方法小鼠ip Rb1,每天进行性行为检测, 3周后,测定小鼠血清睾酮浓度、阴茎海绵体组织(MCC)cGMP及NO水平;离体温孵破坏内皮组织的兔海绵体组织(RCC),检测在NO供体硝普钠(SNP)存在下,Rb1对RCC中cGMP水平的影响.结果 Rb1 5.0,10.0 mg.kg-1给药后d 14及d 16,小鼠跨骑和交配次数显著增加,血清睾酮浓度、MCC中cGMP及NO水平提高;Rb1 0.05,0.50, 5.00 μmol.L-1可明显提高离体RCC cGMP浓度.结论 Rb1可显著改善小鼠性功能,其作用机制可能通过提高雄激素水平、激活NO/cGMP通路而起作用.

苯并异硒唑酮磺酰胺类化合物的抗炎作用

目的研究苯并异硒唑酮磺酰胺类化合物A和B抗炎作用.方法 Boyden 小室法测定中性粒细胞趋化;紫外分光光度法测定髓过氧化物酶活性;染色法测定肥大细胞脱颗粒.结果化合物A和B均可抑制fMLPP诱导的兔外周血中性粒细胞趋化反应;外涂给药均可抑制巴豆油引起的小鼠髓过氧化物酶的升高.在10-7～10-5 mol.L-1浓度下可抑制化合物48/80诱导的肥大细胞脱颗粒,并与浓度呈正相关.结论苯并异硒唑酮磺酰胺类化合物A和B有明确的抗炎作用.

非普拉宗对环氧酶活性的影响

目的研究非普拉宗(feprazone, Fep)对环氧酶-1和环氧酶-2活性的影响. 方法用放免法测定PGE2含量反映环氧酶-2活性,测定6-酮-前列腺素F1α含量反映环氧酶-1活性. 结果 Fep在0.1,1.0,10.0 μmol·L-1能剂量依赖性抑制小鼠腹腔巨噬细胞PGE2生成,在相同浓度下对小牛主动脉内皮细胞6-keto-PGF1α生成抑制作用较弱.结论 Fep显著抑制PGE2生成,对PGI2生成影响较小,提示其对环氧酶-2有较强的抑制作用.

特异性p38 MAPK抑制剂SB203580对乳鼠小脑颗粒神经元的保护作用

目的研究p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)选择性抑制剂SB203580对乳鼠小脑颗粒神经元凋亡的保护作用.方法 SD乳鼠小脑颗粒神经元培养,琼脂糖凝胶电泳,SAPK/JNK分析试剂盒作激酶分析.结果 PI-3-K的特异性抑制剂LY294002诱导小脑颗粒神经元凋亡,但SB203580通过抑制细胞凋亡而促进小脑颗粒神经元的存活,且有浓度依赖性.LY294002诱导凋亡的颗粒神经元中c-Jun的表达量和磷酸化水平均升高,JNK被激活.但是,当小脑颗粒神经元生长在含SB203580的高钾培养基中,c-Jun的表达量、磷酸化水平和JNK的活性都明显的降低.结论 SB203580通过抑制JNK的活性,降低c-Jun的表达和磷酸化水平,对小脑颗粒神经元产生保护作用.

水杨梅属植物化学成分及其生物活性的研究进展

There are about 70 species in the genus Geum, of these 6 species are found in China[1～4]. Some species, such as G.aleppicum Jacq, G.japonicum Thunb. and G.japonicum Thunb.

选择性雌激素受体调节剂的研究进展

雌激素(estrogen)是人体中一类重要的激素类物质.当妇女进入绝经期后,体内雌激素水平下降,由此引发更年期综合症、骨质疏松、老年性痴呆和心血管疾病等.目前临床上普遍采用替代疗法来治疗或预防这些绝经期易出现的症状.但在治疗中存在的一些问题已经引起医疗界的高度重视,如:阴道出血、乳腺疼痛.尤其是如何确定用替代疗法的佳时机和需要持续多长时间才能达到佳治疗效果均尚待解决[1].

大茴香酸-硫酸荧光体系测定黄芪甲苷

黄芪甲苷(astragaloside)是中药膜荚黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.和蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao的主要活性成分,有抗炎、降压、镇痛、镇静、升高血浆中cAMP水平、促进小鼠再生肝DNA的含量[1,2]以及促进免疫功能等生理活性.黄芪甲苷的测定方法主要有：紫外分光光度法[3,4]、薄层扫描法[5,6]和HPLC法[7,8].

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