金属与阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)为一种神经退行性疾病,是导致成年人痴呆常见的原因之一.人们对于该病的研究虽历时数百余年,其中Aβ学说、tau学说在AD中的作用得到广泛认可,但是有关AD的具体发病机制仍不十分清楚.可以明确的是,AD是一种多因素引起的疾病,除了遗传、衰老和生活习惯外,环境因素也不容忽视,一些金属元素,如铜、铝、锌和铁等都可能与AD密切相关.本文就这些金属元素与AD的相关研究进行简要概述.

从药用亲缘学到药用基因组亲缘学:分子系统发育、进化与药物发现

近年随着高通量测序技术的迅猛发展,生物系统发育研究中开始采用基因组数据,因此出现一些新术语,如系统发育基因组学(phylogenomics,基因组系统学/基因组亲缘学)、药用基因组亲缘学(pharmacophylogenomics)、转录组亲缘学(phylotranscriptomics)等.系统发育基因组学是进化和基因组学的交叉学科,是将基因组数据用于进化关系重建的综合分析;药用亲缘学研究药用生物(特别是药用植物)的生物亲缘关系、化学成分和疗效(传统疗效和药理活性)间的相关性;系统发育基因组学方法可用于药物发现和开发的相关问题研究,在组学水平拓展了药用亲缘学的领域,由此衍生出药用基因组亲缘学.系统学(亲缘学)是生命科学各分支和交叉学科的根基所在,在生药学和药用生物学等药学相关领域起到提纲挈领的作用.在此对与药用亲缘学(pharmaphylogeny)密切相关的若干术语做-简要辨析.

抗肝纤维化的潜在作用靶点

肝纤维化是肝脏内弥漫性细胞外基质特别是Ⅰ型胶原a1过度沉积的病理过程,终导致肝硬化或者肝功能衰竭.由于肝纤维化及肝硬化前期可以逆转,因此控制肝纤维化这一可逆的过程,对于肝硬化和肝功能衰竭的预防及治疗十分重要.本文在大量文献基础上,就潜在的抗肝纤维化靶点予以综述,包括致肝纤维化重要的细胞因子之一TGF-β1以及近期发现的整合素av等,旨在为预防或治疗肝纤维化提供新的途径.

基于化学信息学方法预测药物靶点的研究进展

网络药理学与多向药理学等新兴学科的出现迫使科学家们重新认识与探索已有药物新的作用机制.药物靶点的预测对阐释药物分子作用机制和老药新用等领域都具有重大意义.本文结合近年来国内外多个课题组的研究成果,主要综述了当前几种基于化学信息学方法预测小分子潜在靶点的方法,包括基于配体结构特征的预测方法、基于蛋白结构特征的预测方法以及基于数据挖掘技术的预测方法,通过应用实例,说明这些方法的优势,并提出今后的发展方向.

肿瘤细胞中药物代谢酶表达和活性的研究与进展

肿瘤细胞具有十分独特的生存与代谢模式,研究肿瘤细胞的药物代谢特征对于了解药物在肿瘤细胞中的代谢和消除快慢进而评估并预测药效、基于代谢特征优化抗肿瘤药物/前体药物设计具有重要意义.本文综述了肝、肠、乳腺和肺等常见癌组织的主要药物代谢相关酶的表达/活性及其与正常组织的差异,阐述了部分典型抗肿瘤药物在肿瘤组织中的代谢特征,结合对应的常用体外培养肿瘤细胞株中药物代谢酶的表达/活性特征,探讨实体肿瘤组织(体内)和肿瘤细胞株(体外)中酶表达与功能的异同性及差异的产生原因.

PEG化葛根素在急性心肌缺血模型大鼠上的组织分布

为了探索PEG化葛根素在急性心肌缺血模型大鼠上的组织分布特点,采用健康雄性SD大鼠60只,随机分成两组,每组30只,均静脉注射给予PEG化葛根素,剂量为488 mg·kg-1,给药5 min后,一组设为正常大鼠,另一组大鼠腹腔注射给予异丙肾上腺素(剂量为50 mg·kg-1),造成急性心肌缺血模型.分别于给药后30、60、90、120、150和180 min处死部分动物,取心、肝、脾、肺、肾、脑组织脏器,利用HPLC测定各组大鼠组织脏器中葛根素的浓度.结果显示,PEG化葛根素在正常大鼠脏器中AUC大小顺序为肝＞肾＞心≈脾＞肺＞脑,而在急性心肌缺血模型大鼠中AUC大小顺序为肝≈心＞肾＞肺≈脾＞脑,其中,在模型大鼠心脏中AUC为正常大鼠心脏中的1.7倍,且存在显著性差异(P＜0.05).结果表明,PEG化葛根素在心肌梗死早期区域具有较好的心脏靶向性,可以将药物蓄积于缺血心肌,为该药的进一步研究开发和临床应用提供重要的参考依据.

小鼠脂肪性肝病超声影像学检测方法的建立

本文探讨了小鼠肝脂堆积程度的超声影像学半定量检测方法.选取正常C57BL/6J小鼠、高脂饮食诱导的轻度脂肪肝HFD小鼠模型和高热能饮食诱导的中重度脂肪肝KKAy小鼠模型,分别应用肝脏病理学分析和肝组织甘油三酯含量评价动物肝脏的脂质堆积程度.用小动物超声成像系统测定肝组织内与超声波传播同方向的一定距离间2处区域的超声波回声强度,并计算回声衰减系数α值.采用Spearman等级相关分析方法对动物肝脏甘油三酯含量和回声衰减系数α值进行相关性分析.结果显示:与CON组相比,HFD小鼠和KKAy小鼠均具有明显的肝脏脂质堆积,且KKAy小鼠的病变程度较HFD小鼠明显加重.超声波检测结果显示,与CON组相比,HFD小鼠、KKAy小鼠的回声衰减系数α值依次递增.小鼠的肝脏回声衰减系数α值与其肝脏甘油三酯含量具有明显的正相关性,相关系数r=0.744(P＜0.01).本研究表明,肝脏回声衰减系数法可以用来客观评价小鼠肝脏脂质堆积程度.该方法简便易行且具有无创性,可用于监测小鼠肝脏脂肪性病变过程及其药物治疗效果.

人参皂苷Rb3对ox-LDL诱导内皮细胞氧化应激与功能障碍的类雌激素样保护作用

人参皂苷Rb3 (ginsenoside Rb3,GRb3)是西洋参茎叶总皂苷(Panax quinquefolius Saponin of stem and leaf,PQS)的主要入血成分之一,既往研究显示其具有雌激素受体激动效应.本研究观察GRb3对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞氧化应激与功能障碍的保护作用.药物干预后检测细胞内SOD、NOS活性与MDA含量,ELISA法进行细胞培养上清液ET-1与NO含量的测定,real time RT-PCR方法检测细胞中eNOS和iNOS的转录水平,Western blotting方法测定丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Akt的磷酸化水平.与ox-LDL损伤模型组相比,GRb3增高细胞内SOD活力,降低细胞内MDA含量与总NOS活性,减少细胞ET-1和NO合成,升高eNOS的转录水平及降低iNOS的转录水平,且能调节Akt的磷酸化水平,从而发挥保护作用,给予雌激素受体抑制剂ICI182780预处理后上述保护作用消失.结果提示,GRb3可通过雌激素受体的介导发挥抗ox-LDL对内皮细胞的损伤作用,其作用效应与17β-雌二醇相似.

急性冠脉综合征患者氯吡格雷群体药动学-药效学结合模型研究

本研究旨在急性冠脉综合征患者中建立氯吡格雷的群体药动学-药效学模型.通过前瞻性收集59例急性冠脉综合征患者,分别以氯吡格雷活性硫醇代谢产物和血小板VASP磷酸化水平作为其药动学和药效学指标,同时考察人口学指标、实验室指标、合并用药、临床合并症和相关代谢酶的遗传变异等因素,运用NONMEM软件对数据进行分析.药动学模型选择一般线性模型作为基础模型拟合数据,药效学模型选择间接效应模型-Turnover模型作为基础模型拟合数据.结果表明,氯吡格雷原药到活性硫醇代谢产物前体转化参数K12、活性硫醇代谢产物表观清除率(CL/F)和表观分布容积(V/F的群体典型值分别为0.259 h-1、179 L·h-1和632 L,达大药效一半时药效学参数ECs0、药效生成参数Kin和大药效参数Emax的群体典型值分别为1.57 ng·mL-1、4.29和0.664.终模型显示,CYP2C19基因多态性对药动学模型中原药到活性硫醇代谢产物前体转化参数K12有影响,对临床合理使用氯吡格雷具有一定的参考意义.

虾青素对子痫前期大鼠的预防效果

探讨虾青素对防治L-亚硝酸左旋精氨酸甲酯(L-NAME)诱导的子痫前期大鼠模型的效果及其机制.采用L-NAME诱导建立子痫前期大鼠模型,在妊娠第5～20天,虾青素组灌胃25 mg·kg-1·d-1·bw-1虾青素;于妊娠第10～20天,L-NAME建模组和虾青素组皮下注射L-NAME 125 mg·kgl-1·d-1·bw-1.检测大鼠的血压、尿蛋白;测定血清中MDA、SOD、NOS、NO和内皮素;HE染色分析胎盘组织病变;免疫组化分析NF-κB (nuclear factorkappa B)、ROCK Ⅱ(Rho-associated protein kinase Ⅱ)、HO-1 (heme oxygenase)和Caspase3的表达.结果显示,L-NAME建模组产生典型的子痫前期症状;血液中MDA、内皮素增高,NOS、SOD下降等.而经虾青素处理后,血压显著降低,尿蛋白减少,血清中MDA显著下降,SOD明显增加(P＜0.05),NO升高,病理现象改善.免疫组化结果显示,虾青素组中的NF-κB、Caspase3 (P＜0.05)及ROCK Ⅱ的表达降低、HO-1的表达增加.本研究显示,虾青素有助于减少子痫前期大鼠胎盘的氧化应激状态,从而有效改善子痫前期孕鼠的高血压、高尿蛋白等病理反应.

黄芩汤在大鼠发热状态下药效学及药代动力学特征研究

研究发热状态下黄芩汤的药效学和药代动力学特征.大鼠酵母菌造模后,给予黄芩汤20 g·kg-1,不同时间点取血,同时测定血药浓度、炎性介质和直肠温度的变化.结果黄芩汤能降低酵母菌致发热大鼠的体温,能降低血中前列腺素PGE2、白细胞介素IL-1β和肿瘤坏死因子TNF-α的含量.发热状态下,黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A、甘草酸和甘草次酸等成分的吸收速率减缓,体内的清除率降低,体内滞留时间延长,Cmax和AUC增大,发热能影响黄芩汤体内的药代动力学行为;黄芩苷和汉黄芩苷,黄芩素和汉黄芩素、千层纸素A的体内过程类似,同属于中速吸收、中速消除类成分;黄芩素、汉黄芩素的血药浓度和黄芩汤解热效应之间具有较强的正相关关系.

仁昌南五味子戊素:仁昌南五味子中分离到的一个新的联苯环辛烯类木脂素

本文从仁昌南五味子中分离到一个新的联苯环辛烯类木脂素,命名为仁昌南五味子戊素(1),通过二维核磁共振等波谱学分析方法确定了其结构.

毛裂蜂斗菜中两个新的倍半萜硫酸酯

从毛裂蜂斗菜全草中分离得到两个新的倍半萜硫酸酯类化合物megastigman-7-ene-3,5,6,9-tetrol-3-O-β-D-6’-sulfonated-glucopyranoside (1)、3-O-β-D-6’-sulfonated-glucopyranosyl-6-(3-oxo-2-butenylidenyl)-1,1,5-trimethylcyclohexan-5-ol (2)和一个己知化合物icariside B1 (3).其中化合物icariside B1 (3)为首次从蜂斗菜属植物中分离得到.通过化学和波谱等方法对上述结构进行了鉴定.此外,还测定了3个化合物对4种肿瘤细胞(HepG2、HCT 116、H460和MCF7)的细胞毒活性.

新型苯甲酰胺类化合物的合成与抗疲劳活性研究

为寻找以AMPA受体为作用靶点的新型抗疲劳化合物,以1-(1,3-benzodioxol-5-ylcarbonyl)piperidine(1-BCP)为先导化合物,设计合成了10个新化合物,结构经1H NMR、ESI-MS及元素分析确证.采用小鼠负重游泳实验评价目标化合物抗疲劳活性,采用放射性配体受体结合实验测定化合物与AMPA受体的亲和力.结果表明,化合物5b具有显著的抗疲劳活性,且与AMPA受体的亲和力较强,值得进一步深入研究.

肿瘤靶向高分子碲化镉量子点复合纳米粒的制备及其表征

本文采用水热法合成N-乙酰-L-半胱氨酸稳定的碲化镉量子点(CdTe quantum dots,CdTe QDs),采用配体置换的方法制备得到氨基脱氧葡萄糖(2-amino-2-deoxy-D-glucose,DG)、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)与9聚精氨酸(9-D-arginine,9R)共同修饰的碲化镉量子点(9R/DG-CdTe QDs).通过紫外、荧光光谱、傅里叶红外光谱、核磁共振氢谱、高效液相-质谱联用、聚丙烯酰胺凝胶电泳和透射电子显微镜等手段对该复合量子点进行表征,并对该复合纳米粒的生物相容性、肿瘤靶向性及穿细胞膜的效果进行考察.结果表明,通过配体置换的方法可以成功构建DG、9R、PEG修饰的CdTe QDs复合纳米粒.TEM结果显示,该纳米粒分散性较好,粒径约为8～10 nm.化学修饰后的CdTe QDs吸收峰从480 nm红移至510 nm,发射峰从627 nm红移至659 nm.通过DG、9R、PEG的修饰还能进一步改善量子点的生物相容性,提高对葡萄糖转运体1高表达的肿瘤细胞的靶向性,增加量子点穿过细胞膜进入细胞浆的作用.

光纤传感过程分析测定蒜氨酸固有溶出率

应用UPLC-Orbitrap质谱分析鲜蟾酥与干蟾酥化学成分差异

为阐明鲜蟾酥的化学成分以及鲜蟾酥与干蟾酥化学成分差异,本研究对黑眶蟾蜍的新鲜耳后腺分泌液及干蟾酥中的化学成分进行了比较研究.采用超高效液相色谱串联静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Orbitrap MS)技术,以乙腈和水(含体积比0.1％甲酸)为流动相对其进行梯度洗脱,并在高分辨质谱正离子在线检测模式下,通过比对化合物的精确分子量及质谱碎片信息对其中39个主要色谱峰进行了鉴定.鲜蟾酥及干蟾酥主要成分的化学模式存在较大差别,与干蟾酥相比,鲜蟾酥在蟾毒配基类成分上的含量低、种类少.

基于代谢组学技术的杭麦冬和川麦冬药效差异性研究

运用超高效液相-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)结合多变量统计学分析,探讨利用代谢组学的研究方法比较杭麦冬和川麦冬对正常大鼠血浆内源性代谢物干预作用的差异性.结果显示川麦冬低、中剂量组与对照组相近,高剂量组则有明显区别;杭麦冬高、中、低剂量组与对照组明显不同,剂量越大距离越远;具有显著性差异的内源性代谢产物为溶血磷脂酰胆碱类物质,与心血管系统类疾病紧密相关.与川麦冬给药组相比,杭麦冬组对正常大鼠血浆内源性代谢产物的干预作用更显著.从药效学上看,杭麦冬和川麦冬差异显著.

基于代谢活化设计的索非布韦

1 NS5B RNA聚合酶及核苷类抑制剂的作用机制丙肝病毒(H-CV)为正链RNA病毒,含有9.6 kb基因,编码10个蛋白:3个结构性蛋白、7个非结构性蛋白.非结构性蛋白常常作为治疗HCV药物的靶标,例如其中称作NS3的丝氨酸蛋白酶,对于病毒蛋白的成熟和病毒颗粒的复制起主要作用,以NS3蛋白酶为靶标的抑制剂如波西匹韦等药物,己用于临床治疗HCV.另一个非结构性蛋白是NS5B RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp),负责HCV的RNA链的复制,在病毒基因复制、丙肝病毒在宿主细胞中的增殖是绝对必需的,因而也是治疗HCV的药物靶标.索非布韦是针对丙肝病毒NS5B RNA聚合酶上市的第一个药物.

白及属药用植物DNA条形码的确立及其应用

为建立白及属药用植物适合的DNA条形码,并以DNA条形码准确的鉴别白及属药用植物及其混伪品,本研究对41份样品基因组DNA的nrDNA ITS、LFY同源基因内含子2、叶绿体ycf1基因进行扩增、测序及序列分析;比较物种种内种间的变异,并基于K2P距离分析Barcoding Gap、构建NJ系统聚类树及BLAST1算法以评价不同序列的鉴定能力.结果显示,白及属物种nrDNA ITS和ycf1序列的种间变异(0.022～0.106和0.017～0.106)明显大于种内变异(0～0.012和0～0.015),NJ树也能准确地区分4个物种;而LFY同源基因内含子2序列未发现Barcoding Gap,不能有效的鉴别白及属物种.选用nrDNA ITS和ycf1构建NJ树成功鉴定了白及粉末状药材及其混伪品.结果表明,nrDNA ITS和ycf1序列可以作为白及属及其混伪品鉴定用的DNA条形码序列.市场上“巨茎白及”的nrDNA ITS序列和ycf1序列与安徽六安白及亲缘关系近,NJ树均与白及聚为一支;基于形态及分子数据可初步将安徽“巨茎白及”归为白及属白及植物.