地塞米松对高氧肺损伤大鼠肺组织基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达的影响

目的观察地塞米松对高氧暴露大鼠肺组织中基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制剂(TIMPs)表达的影响,探讨地塞米松治疗高氧肺损伤的作用机制.方法2周龄Wistar大鼠32只,随机分为空气组和高氧组(各16只).高氧暴露7 d后,取两组大鼠各8只检测支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量和肺湿/干重比(W/D),并观察肺组织病理学改变.余16只大鼠行肺组织培养,空气组8只作为空气对照组,高氧组8只各设高氧对照组,高氧+地塞米松1×10-8、1×10-6和1×10-4mol/L组,培养24 h后用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达.结果①与空气组相比,高氧组肺组织出现水肿、出血、炎性细胞浸润;BALF中蛋白含量、W/D明显增高.②高氧对照组MMPs、TIMPs mRNA表达和MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1比值较空气对照组明显增高.③地塞米松能剂量依赖性下调MMP-2、MMP-9 mRNA表达;对TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达有一定程度的抑制效应;随地塞米松浓度的增加,MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1比值亦逐渐降低.结论地塞米松下调MMPs mRNA表达,调节MMPs/TIMPs之间的失衡,可能是其减轻高氧肺损伤的机制之一.

高迁移率族蛋白B1诱导巨噬细胞Janus激酶/信号转导及转录激活子通路活化的研究

目的初步探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)致炎效应的信号转导机制.方法清洁级雄性Wistar大鼠,取其腹腔巨噬细胞,培养3 d后以10 mg/L HMGB1刺激.刺激完毕后直接在培养瓶中裂解细胞,分别采用免疫沉淀、免疫印迹法和凝胶阻滞分析等技术观察不同时间点Janus激酶2(JAK2)、信号转导及转录激活子-1(STAT1)以及STAT3的活化情况.结果HMGB1可诱导大鼠腹腔巨噬细胞STAT1、STAT3在短时间内(2 h)活化,其中STAT3活化为迅速,10 min即可达到活化高峰.但HMGB1不能在短时间内(2 h)诱导JAK2活化.结论 JAK/STAT途径可能参与了HMGB1致炎效应的信号转导机制.

急性肺损伤肺间质巨噬细胞TLR4的表达及意义

目的观察严重胸部创伤致急性肺损伤肺间质巨噬细胞TLR4基因及蛋白表达水平的变化,并探讨其意义.方法建立严重胸部创伤致急性肺损伤模型.肺组织机械剪碎,然后用胶原酶、DNA酶消化肺组织,分离、培养肺间质巨噬细胞,利用免疫印迹蛋白、Northern Blot等分子生物学技术检测创伤前以及创伤后2、4、8、16和24 h肺泡巨噬细胞TLR4蛋白及基因表达.结果利用小型多功能生物撞击机以400kPa驱动压力对大鼠右侧上胸壁进行致伤,能够建立稳定可靠并且符合临床特点的严重胸部创伤模型;严重胸部创伤可以上调TLR4蛋白及基因在肺间质巨噬细胞内的表达,表达高峰在伤后8和16 h,伤后24 h恢复正常.结论TLR4的上调参与了创伤后失控性炎症反应的病理生理过程.

N-乙酰半胱氨酸对偏二甲基肼和四氧化二氮吸入性肺损伤的保护作用

目的观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大剂量火箭液体推进剂偏二甲基肼(UDMH)和四氧化二氮(N2O4)吸入性急性肺损伤(ALI)的保护性作用.方法42只大鼠随机平均分为对照组、毒物暴露组(暴露组)和毒物暴露+NAC治疗组(NAC干预组).制模动物在静式染毒柜中染毒,UDMH和N2O4质量浓度分别为0.98 mg/L和0.19 mg/L,均染毒10 min.NAC干预组染毒后立即经尾静脉注射NAC150 mg/kg,3 h后再次补充50 mg/kg NAC腹腔注射;另两组均以等量生理盐水代替.各组动物均于实验后6 h测定肺组织湿/干质量比(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性、肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和血浆丙二醛(MDA),并观察动物一般情况及组织病理学变化.结果与对照组相比,暴露组大鼠肺W/D、BALF中蛋白和LDH以及血浆MDA等均明显增加,而肺组织SOD、GSH-Px活性则明显降低;NAC干预组上述指标均有不同程度改善.暴露组大鼠有明显憋喘症状,病理学表现为明显的肺泡内渗出和肺间质水肿;而NAC干预组上述改变明显减轻.肺W/D与肺组织SOD和GSH-Px活性均呈显著负相关,相关系数r分别为-0.662和-0.707(P均＜0.01).结论NAC对大剂量UDMH和N2O4吸入性ALI有保护性治疗作用,其作用机制可能与其抗氧化和防治脂质过氧化损伤有关.

流动便携式重症监护治疗病房的创建

目的为了适应突发灾害事故、载人航天航天员的医疗保障救护以及局部战争中伤员现场救护的需要,提倡和实施现代救护的新概念和技能,探讨创建流动便携式重症监护治疗病房(ICU)的方法和意义.方法回顾分析参与载人航天航天员意外伤害医疗紧急救治工作的体会,从设备配置、人员强化培训及组织等方面提出创建流动便携式ICU的可行性.结果流动便携式ICU在我国载人航天首飞航天员的医疗保障及救护中得到了应用,能达到"快速反应、立体救护"的目的,使危重病现场救治规则、卫勤保障原则更趋于合理,提高抢救成功率.结论危重病特种伤现场急救需要"快速反应、立体救护"的现场急救新模式,流动便携式ICU的创建可达到这一目的,能降低突发灾害及局部战争中伤员的伤残率和死亡率.

内毒素致伤大鼠肺组织促炎与抗炎细胞因子mRNA表达的时相性研究

目的研究不同剂量内毒素致伤大鼠肺组织促炎和抗炎细胞因子mRNA表达的时相性,并探讨这些细胞因子在全身炎症反应失控和急性肺损伤中的可能作用.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同剂量脂多糖(LPS)致伤大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-4、IL-10和IL-13的mRNA表达.结果随着LPS剂量增加,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10和IL-13的mRNA表达均增强(与生理盐水对照组比较,P均＜0.01);LPS≥6 mg/kg组上述细胞因子表达显著高于此剂量以下组(P均＜0.01).表达峰值时间:TNF-α为1 h,IL-6为4 h,其他均在2 h.结论内毒素致急性肺损伤中,TNF-α是早期表达的促炎细胞因子,而IL-6在炎症进一步发展中发挥作用;抗炎细胞因子IL-4、IL-10、IL-13高表达亦可能促进炎症的放大而不是起保护作用.

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对大鼠肺微血管内皮炎性损伤效应的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其受体对大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVECs)单层通透性的影响.方法在体外培养Wistar大鼠RPMVECs基础上,使用微型针头式滤器分别检测不同浓度脂多糖(LPS)作用不同时间前后RPMVECs单层滤过系数(Kf)的变化,AngⅡ对LPS致内皮通透性损伤作用的影响,以及AngⅡ的Ⅰ型受体(AT1-R)拮抗剂[Sar1,Ile8]-AngⅡ的干预作用.结果与正常对照组相比,LPS可致RPMVECs Kf明显升高;AngⅡ可显著恶化LPS致RPMVECs Kf升高的效用,而AT1-R拮抗剂[Sar1,Ile8]-AngⅡ干预后可明显抑制上述变化.结论AngⅡ可显著恶化LPS对大鼠肺微血管通透性的炎性致伤作用,而AT1-R拮抗剂对炎性介质致大鼠肺微血管通透性损伤有明显的保护作用.

去甲肾上腺素对山羊急性呼吸窘迫综合征吸入一氧化氮疗效的影响

目的观察去甲肾上腺素(NE)对山羊感染性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)吸入一氧化氮(NO)疗效的影响.方法静脉注入小剂量内毒素诱导山羊感染性ARDS模型6只,在吸入体积分数为40×10-6的NO 30 min后,联合静脉泵入NE 0.5μg·kg-1·min-1治疗.通过肺动脉导管、动脉和混合静脉血气分析,测定基础、ARDS时、NO吸入治疗30 min和联合NE静脉泵入治疗30 min后血流动力学指标和肺气体交换参数.结果NO吸入治疗能显著降低ARDS山羊的平均肺动脉压(MPAP),增加动脉氧分压(PaO2),减少肺泡动脉氧分压差[P(A-a)O2]和肺内分流率(Qs/Qt);联合NE静脉泵入不影响吸入NO后降低的MPAP,增加吸入NO后升高的PaO2,降低NO吸入后减少的P(A-a)O2和Qs/Qt,升高吸入NO后无改变的平均动脉压(P＜0.05或P＜0.01);吸入NO及联合应用NE治疗均不改变ARDS山羊的心排血量.结论静脉注入NE能增强吸入NO后改善感染性ARDS肺气体交换的疗效.

α-黑色素细胞刺激素对二次打击急性呼吸窘迫综合征大鼠肺血管内皮细胞凋亡的影响

目的研究α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)对急性失血性休克加肺内毒素(LPS)损伤二次打击致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型大鼠肺血管内皮细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法雄性SD大鼠10只,体质量(337±25)g,随机分为ARDS模型组和α-MSH治疗组,每组5只.所有动物均行机械通气,吸入氧浓度(FiO2)为0.50;在20 min内自颈动脉放血至平均动脉压为(45±5)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPα),于休克1 h后开始液体复苏,在2 h内回输全部采集血液及等量平衡液;然后气管内给予LPS200μg/kg以建立ARDS动物模型.α-MSH治疗组在LPS致伤的同时和致伤后3、6 h各时间点均给予α-MSH 1.7 mg/kg.在LPS致伤9 h后处死大鼠,取肺组织,分别行光镜及电镜检查,观察组织病理改变和肺血管内皮细胞凋亡情况.结果ARDS组大鼠肺泡腔内大量纤维蛋白性渗出,其中见大量红细胞,间质内大量炎症细胞浸润,肺泡壁小血管扩张充血;电镜下可见肺血管内皮细胞凋亡发展至晚期阶段,染色质明显边集,胞浆内大量空泡形成.α-MSH治疗组大鼠肺泡腔内未见炎症细胞渗出,可见少量浆液性渗出,毛细血管扩张充血不明显,间质中少量炎症细胞浸润;电镜下可见肺血管内皮细胞染色质边集程度较轻,凋亡为早期阶段.结论α-MSH可抑制急性失血性休克加肺内LPS损伤二次打击ARDS模型大鼠肺血管内皮细胞凋亡,因此可能对ARDS产生保护作用.

盲式取材技术在呼吸机相关肺炎病原学诊断中的价值

目的评价保护性毛刷盲取技术(BPSB)结合细菌定量培养(QC)在呼吸机相关性肺炎(VAP)病原学诊断中的价值.方法采用前瞻性、自身对照临床研究设计,研究时间自1999年6月-2002年6月,研究人群为54例机械通气患者的125例次临床拟诊VAP发作,同步对照评价了BPSB-QC和纤维支气管镜引导保护性毛刷(FOB-PSB)-QC两种技术在106例次(48例)确诊VAP发作中的诊断准确度及一致性,两种技术分离细菌的诊断阳性截断点设定为≥103 cfu/m1.结果106例次(48例)临床拟诊VAP发作被确诊(84.8%),BPSB-QC和FOB-PSB-QC诊断技术的准确度分别为80.8%(101/125例次)和83.2%(104/125例次),二者完全一致为75.2%(94/125例次),以分布于阳性截断点103cfu/ml上下来比较,诊断一致率为84.8%(106/125例次),不同病变分布的诊断阳性率和两种诊断技术在不同病变分布的诊断阳性率比较均无显著的统计学差异.结论BPSB-QC和FOB-PSB-QC诊断技术有相似的诊断准确度和同等的可行性,且BPSB操作简单、安全性高和费用低,可作为首选的QC取材技术.

控制性肺膨胀对急性呼吸窘迫综合征家兔肺外器官炎症反应的影响

目的研究控制性肺膨胀(SI)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)家兔肺外器官炎症反应的影响.方法生理盐水肺泡灌洗法复制ARDS家兔模型.实验动物随机分为对照组、ARDS组、小潮气量(VT)+佳呼气末正压组(LVBP组)和SI组.机械通气4 h后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝、肠组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)mRNA表达;酶联免疫吸附法检测肝、肠组织TNF-α和IL-10浓度,同时测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量.结果SI组肝、肠组织TNF-α mRNA表达明显低于ARDS组和LVBP组(P均＜0.05);肝、肠组织IL-10 mRNA表达均显著低于ARDS组和LVBP组(P均＜0.05).各组间肝、肠组织TNF-α、IL-10、MPO和MDA含量比较无统计学差异.结论SI可抑制ARDS家兔肺外器官细胞因子mRNA的表达,下调肺外器官炎症反应.

内毒素抑制肝细胞白蛋白表达的分子机制研究

目的观察内毒素抑制大鼠肝细胞白蛋白表达的分子机制.方法采用1 mg/L内毒素刺激大鼠肝细胞24 h.使用20、40和100μmol/L的蛋白合成抑制剂环己酰亚胺预处理30 min.用逆转录-聚合酶链反应检测不同浓度环己酰亚胺预处理后肝细胞白蛋白的表达,同时检测肝细胞上清中自细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.结果内毒素刺激肝细胞24 h后白蛋白mRNA表达明显下降;环己酰亚胺预处理可以完全阻断白蛋白mRNA表达的下降,而且这种阻断作用存在剂量依赖性;同时内毒素刺激后肝细胞上清中IL-6和TNF-α水平较对照组明显升高(P均＜0.05),环己酰亚胺预处理后两者水平明显下降(P均＜0.05).结论内毒素通过抑制细胞因子IL-6和TNF-α释放间接抑制大鼠肝细胞白蛋白mRNA的表达.

肺组织活检术对弥漫性间质性肺疾病诊断价值的临床研究

目的评价肺组织活检术在弥漫性间质性肺疾病中的诊断价值.方法回顾性分析1997年7月-2002年12月在我院住院治疗的17例行肺活检术的间质性肺疾病患者临床资料.结果1 7例患者均获病理确诊,其中结节病3例,肺泡蛋白沉积症2例,普通型间质性肺炎1例,闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎1例,非特异性间质性肺炎1例,Castleman病(浆细胞型)1例,淋巴管平滑肌瘤病1例,肺泡细胞癌2例,类风湿性关节炎肺间质纤维化合并肺鳞癌伴肺内多发转移1例,肺淋巴管癌2例,肺鳞癌伴肺内淋巴管转移1例,肺原发性副神经节细胞瘤1例.结论肺活检术获取肺组织是弥漫性间质性肺疾病、不典型肺疾病或罕见疑难病症直接的诊断方法,对常规、胸部高分辨CT检查等未能确诊的病例,具有较高的诊断价值.

血液净化抢救急性重症毒鼠强中毒6例

我们于2004年2月7日-4月16日对某县6例毒鼠强集体中毒患者采用血液净化方法抢救成功,报告如下.

二巯基丙磺酸钠联合维库溴胺治疗毒鼠强中毒的临床效果

回顾性分析我院1998年6月-2004年4月有心搏骤停的毒鼠强中毒患者的临床资料,报告如下.1临床资料1.1病例:入院后2 h内发生心搏骤停10例患者中男3例,女7例;年龄5～41岁;儿童3例,成人7例;均有明确的毒鼠强中毒史以及典型的毒鼠强中毒临床症状.

8例SARS合并上消化道出血患者的临床特点分析

分析8例病历资料较完整的重症严重急性呼吸综合征(SARS)合并上消化道出血患者的临床特点,试图找出其中规律,为临床治疗总结有益的经验.

脓毒症中细胞免疫紊乱的机制

脓毒症是临床危重患者主要的死亡原因之一,在美国每年约有75万脓毒症患者,其中21.5万患者终因脓毒症而死亡[1].随着对脓毒症病理生理过程认识的加深和现代分子生物学技术的应用,人们对于脓毒症的发病机制有了更深的了解.大量研究表明,脓毒症的发生与免疫功能紊乱密切相关.因此,深入探讨脓毒症中免疫功能紊乱的病理生理基础,可进一步阐明脓毒症的发病机制,并为其预防和治疗开拓的思路.

肺炎衣原体感染在哮喘发病中的作用及意义

肺炎衣原体(chlamydia pneumoniae,CP)是一种重要的呼吸道病原体.近年来研究发现,CP感染在哮喘的发作中可能起重要作用[1,2].我们应用免疫荧光法测定哮喘患者血清中CP特异性抗体,采咽拭子用聚合酶链反应(PCR)进行DNA扩增检测CP,采外周血计数嗜酸粒细胞,以健康体检者作对照,探讨CP感染在哮喘发病中的可能作用.

胸外提-压法复苏对肺潮气量测定的影响

对于心搏骤停患者而言,当无条件即刻建立人工气道,尤其是在经气管插管连接呼吸器通气尚未实施前,尽早维持有效的肺通气极为重要.但目前有关心肺复苏(CPR)早期应急人工通气尚缺乏满意的方法.本研究中应用自行研制的杠杆吸盘式心肺复苏器,采用吸盘吸附胸廓主动提拉与按压相结合,即胸外提-压方法,对12例心跳、呼吸停止后的患者进行了潮气量的测定研究,为进一步探讨CPR早期新型通气方法和机制、提高CPR成功率提供了可靠的依据.报告如下.

血液吸附联合血液透析在肾移植免疫排斥治疗中的应用

采用血液吸附联合血液透析方法治疗肾移植术后排斥反应,报告如下.

重症监护治疗病房患者血循环超抗原水平的检测

肠道缺血-再灌注时细菌与脂多糖能激活缺氧诱导因子-1蛋白

5-脂氧化酶抑制或基因剔除减轻内毒素血症引起的多器官功能障碍

环氧化酶、血红素氧化酶以及泛素蛋白分解通路在人类脓毒症肌病中的作用

连续性血液净化抢救毒鼠强中毒合并多器官功能衰竭1例

1病历资料患者男性,27岁,因服毒自杀,意识不清6 h,于2001年6月23日入院抢救.在急诊科经洗胃、静脉滴注甘露醇后无效转入我科.查体:体温39.5℃,脉搏100次/min,呼吸频率22次/min,血压120/70 mm Hg(1 mmHg=0.133 kPa).浅昏迷状态,双瞳孔等大等圆,对光反射迟钝;两肺呼吸音粗,可闻及少许湿性啰音;心率100次/min,律齐,未闻及杂音.实验室检查:血白细胞24.0×109/L,中性分叶核细胞0.97,血红蛋185g/L,血小板205×109/L;尿糖(+),尿蛋白(+++),心肌酶升高,肝功能异常,血肌酐128 μmol/L,尿素氮8.3 mmol/L.呕吐物检查:毒鼠强阳性.

胆囊肠道瘘所致急腹症的处理(附1例报告)

胆囊结石移位造成胆囊肠道瘘比较罕见.我院曾于2002年12月收治1例直肠癌合并胆囊十二指肠瘘急性穿孔致弥漫性腹膜炎患者,报告如下.1病历简介患者女性,75岁,无明显诱因排脓血便1个月,纤维结肠镜检查发现直肠肿物,病理诊断直肠腺癌,术前1 d突发全腹持续性疼痛,伴恶心、呕吐,疼痛向腰背部放射,无寒战、高热,为进一步诊治转我院.既往患糖尿病5年,陈旧性脑梗死10年.查体:体温37.4℃,皮肤、巩膜无黄染,全腹膨隆,未见胃肠型,全腹压痛、反跳痛,肌紧张,肠鸣弱.

多器官功能障碍综合征救治中争议问题的商榷

多器官功能障碍综合征(MODS)是当前急危重症造成死亡的直接病因,鉴于有多个器官的损害,病情错综复杂、纵横交错,涉及多学科,常常观点不一,救治中矛盾重重,往往顾此失彼,造成临床医生的困惑.根据国内外文献和作者的临床体会,现将MODS救治中的争议问题浅谈个人认识,以供商榷.

应加强对未来灾难现场抢救的方法研究

当今世界,重大突发事故、局部战争和恐怖事件不断出现,对特种意外伤害的抢救就显得特别重要.在灾害或意外发生时,第一时间内现场死亡人数多,对于现场急救来说,时间就是生命,传统的急救观念往往使得处于生死之际的伤员丧失了宝贵的"救命的黄金时间".所以必须提倡和实施现代救护的新概念和技能.

《2004严重感染和感染性休克治疗指南》系列讲座(4)糖皮质激素在感染性休克中的应用

糖皮质激素用于治疗严重感染及感染性休克一直存在争论.近年的研究显示,大剂量、短疗程糖皮质激素冲击治疗并不能改善感染性休克的预后,而应激剂量(中小剂量)、较长疗程的糖皮质激素治疗感染性休克,有利于休克的逆转,改善器官功能损害,降低病死率.<2004严重感染和感染性休克治疗指南>就糖皮质激素的应用提出推荐性的意见,以指导感染性休克的治疗[1].

抢救有机磷农药中毒呼吸肌麻痹的3个关键环节

在对急性重度有机磷农药中毒(AOPP)患者的救治中,早期恰当处理、预防中间综合征等并发症的发生,对发生中间综合征者积极合理地应用机械通气并加大复能剂的力度,对机械通气患者早期及时补充营养,是治疗的3个关键环节.结合我院收治的23例AOPP并发中间综合征患者的治疗,介绍救治体会如下.

天津市与新加坡院外急救服务的比较

作者于2000-2003年分别在天津市"120"急救中心与新加坡急救中心参与院外急救工作,发现两地运作方式及人员应用等不同,将心得体会介绍如下.