严重烧伤早期痂下水肿液细胞因子及免疫功能的临床观察

目的:探讨严重烧伤早期痂下水肿液的炎症介质和免疫功能指标的改变与意义.方法:选择8例严重烧伤患者,分别采集伤后16、24、32、40和48 h 5个时间点的血液和痂下水肿液标本,对其肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、IL-8、白细胞总数、免疫球蛋白IgA、IgG、IgM及补体C3、C4含量进行对比观察;并用伤后48 h的痂下水肿液攻击20只Balb-c小鼠以观察其致死效应.结果:痂下水肿液中IgA、IgG、IgM及补体C3、C4含量仅为同一时间点血液含量的1/2左右(P均<0.01);白细胞总数为血液的1/100(P均<0.01);TNF-α、IL-6、IL-8含量与血液中水平基本保持一致(P均>0.05).而急性毒性实验显示无一只小鼠死亡.结论:相对于小分子物质而言,细胞及大分子物质如免疫球蛋白、补体等较难进入痂下水肿液;严重烧伤早期痂下水肿液无明显的局部炎症反应发生,亦无明确的致死作用;低白细胞计数、免疫球蛋白及补体含量提示局部抗感染能力低下,此时应注意抗生素的早期、有效使用.

烧伤前后大鼠血清对骨髓基质细胞生物学行为的影响

目的:观察烧伤前后大鼠血清对体外培养的大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)的生物学行为的影响,为BMSCs在创伤修复中的应用奠定实验基础.方法:取Wistar大鼠,处死,分离骨髓,原代培养BMSCs,传代后分别用含有体积分数为10%的胎牛血清(FCS,F组)、正常大鼠血清(N组)、烧伤后3 d大鼠血清(B1组)和烧伤后14 d大鼠血清(B2组)的F-12培养基培养,用噻唑蓝(MTT)法测定其生长曲线,碘化丙啶(PI)染色,流式细胞仪分析细胞周期、DNA含量和细胞凋亡率.结果:用含有10%大鼠血清的F-12培养基传代培养的细胞生长曲线相似,但与含有FCS的F-12培养基传代培养的明显不同,前者倍增时间缩短,N组、B1组、B2组细胞群体倍增时间分别为23.7 h、18.6 h和20.2 h,且平台期所能达到的细胞总数明显增加.烧伤后大鼠血清处理的细胞中G0/G1期细胞比例明显低于其他两组(P均<0.01),而S期细胞的比例则相反(P<0.01).大鼠血清处理的细胞中DNA含量明显高于FCS培养的细胞(P<0.05或P<0.01),而烧伤后的大鼠血清处理的细胞中DNA含量又明显高于正常大鼠血清处理的细胞(P<0.01).烧伤后3 d的大鼠血清处理的细胞的凋亡率比其他组细胞明显升高(P<0.01).结论:大鼠血清比胎牛血清能更好地促进大鼠体外培养的BMSCs生长;烧伤大鼠血清内可能含有多种能影响BMSCs生长的物质,且其含量随烧伤的时间改变而变化,对BMSCs生长的影响是复杂的.

烧伤早期心肌组织几种炎症相关基因表达变化的实验研究

目的:观察烧伤后心肌组织几种炎症相关基因表达变化,探讨其与心肌损害的关系.方法:采用大鼠40%体表面积Ⅲ度烫伤模型,于伤后0 h(正常组)、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测心肌组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)mRNA水平,四道生理记录仪监测左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)和左室压力大上升/下降速率(±dp/dtmax)变化.结果:烫伤后1 hTNF-α和cPLA2 mRNA表达显著上调(P均<0.01),此后一直维持高表达状态;IL-1β mRNA于伤后3 h表达明显升高(P<0.01),伤后12 h降至正常水平;iNOS mRNA水平除伤后1 h稍上调外,其余时间点反而下降.左室收缩功能(LVSP、+dp/dtmax)和舒张功能(LVEDP、-dp/dtmax)于伤后3 h显著下降(P均<0.01),12 h达谷底.左心功能变化与TNFα、cPLA2表达呈负相关(P均<0.05).结论:炎症相关基因TNF-α、cPLA2及IL-1β参与了烧伤后心肌局部失控性炎症反应,其上调表达可能是烧伤后心肌损害的重要原因之一.

内毒素血症大鼠脑内TRH及其受体对脑作用的研究

目的:探讨内毒素血症对大鼠脑内促甲状腺激素释放激素(TRH)与其受体含量及分布情况的作用.方法:建立内毒素血症加失血性休克双重打击模型,用放射免疫法测定模型动物脑内TRH及其受体含量.结果:在内毒素血症早期,脑内TRH含量显著减少,TRH受体总量增加,但与TRH亲和力下降,表现为可结合TRH的受体无显著性变化.结论:脑内TRH含量与外周不平行;内毒素血症早期脑内TRH减少及有活性TRH受体含量稳定可能与机体对脑组织的保护作用及遏制多器官功能障碍综合征进展有关.

低张胶体液对失血并腹腔海水浸泡伤实验犬的救治作用

目的:观察低张胶体液对失血并腹腔海水浸泡伤的救治效果.方法:建立腹腔海水浸泡伤动物模型.35只犬随机均分为对照组(A组)、质量分数为5%的葡萄糖治疗组(B组)、0.45%氯化钠治疗组(C组)、0.9%氯化钠治疗组(D组)及低张胶体液治疗组(E组),观察每组动物腹腔海水浸泡后平均动脉压(MAP)、心排血量(CO)、尿量、血浆渗透压及脑、肺组织的病理学变化.结果:低张胶体液可显著改善MAP及CO,增加尿量,降低血浆渗透压,预防脑、肺水肿的发生.结论:低张胶体液对失血并腹腔海水浸泡伤具有较好的救治效果.

低血压性二次脑损伤大鼠脑皮质第Ⅱ组代谢型谷氨酸受体改变及意义

目的:研究弥漫性脑损伤(DBI)及其合并低血压性二次脑损伤(SBI)后脑皮质第Ⅱ组代谢型谷氨酸受体(mGluRs)各亚型变化及意义.方法:SD大鼠140只,随机分为正常对照、假手术、单纯DBI及DBI合并SBI组.在Marmarou DBI模型基础上,制成低血压性SBI模型.伤后1、3、6、12、24、48和72 h进行脑皮质mGluR2,3 mRNA原位杂交,计数阳性神经元数.结果:与正常对照组相比,假手术组及单纯低血压组mGluR2,3 mRNA表达无明显改变(P均>0.05);单纯DBI组mGluR2,3在损伤12 h后开始减少,48 h降至低(P均<0.05); DBI合并SBI组mGluR2,3mRNA表达伤后6 h即开始减少,24 h降至低(P均<0.05).结论:在DBI及其合并SBI过程中,mGluR2,3 mRNA表达降低,mGluR2,3参与了DBI和SBI的病理生理过程,可能与脑保护有关.

肺炎双球菌肺炎老龄大鼠小肠组织自由基和前列腺素代谢变化

目的:研究老年肺炎的小肠损伤病理生理特点.方法:复制肺炎双球菌肺炎大鼠模型,分为青年和老龄对照组及模型组.主要观察肺脏和小肠组织含水量,小肠组织6-酮-前列腺素F1α(6-ketoPGF1α)、血栓素B2(TXB2)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:肺炎大鼠的肺组织损伤明显,肺脏和小肠组织含水量增高.青年模型组和老龄模型组小肠组织6-keto-PGF1α含量、SOD活性的降低和TXB2、NO、MDA含量的增高均较青年对照组和老龄对照组显著.与青年对照组比较,老龄对照组SOD活性降低,MDA含量升高.老龄模型组SOD活性的降低和MDA含量的增高较青年模型组显著.结论:前列腺素及自由基介导的损伤参与肺炎小肠组织损伤的发生和发展.由于增龄变化,肺炎老龄大鼠小肠自由基损伤较青年大鼠尤为严重.

热休克蛋白70对感染性脑水肿大鼠白介素和肿瘤坏死因子的影响及意义

目的:探讨白介素和肿瘤坏死因子在感染性脑水肿时的变化及热休克蛋白70(HSP70)对它们的影响.方法:将72只SD大鼠随机分为正常对照组(NS)、感染性脑水肿组(IBE)和热休克处理组(HSP),每组又分为4、8和24 h 3个时间点亚组.采用Western印迹杂交技术检测各组各时间点的HSP70的表达,采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测3组大鼠脑组织匀浆中白介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNFα)的含量.结果:Western印迹杂交分析经密度扫描后结果表明,感染性脑水肿及正常大鼠脑组织内均有一定量的HSP70表达,而HSP组的HSP70量明显高于IBE组(P均<0.01).与NS组比较,4、8和24 h IBE组的TNF-α含量明显增加,以8 h为明显(P均<0.01);而在4和8 h IBE组中,脑组织IL-1β含量明显增高,以8 h增高明显(P均<0.01),24 h则明显下降;热休克反应能降低IL1β及TNF-α在脑组织中的含量(P<0.05或P<0.01).结论:IL-1β及TNF-α参与了感染性脑水肿的病理过程,HSP 70能减轻感染性脑水肿的机制可能与其抑制IL-1β和TNF-α生成有关.

重组人血小板源性生长因子凝胶剂促进糖尿病大鼠创面愈合的实验研究

目的:研究重组人血小板源性生长因子(rhPDGF-BB)凝胶剂对糖尿病大鼠皮肤切割伤创面修复的作用及其量效关系.方法:13只糖尿病大鼠在背部各制备4个全层皮肤缺损创面,面积2.54 cm2,将创面分成5组,即rhPDGF-BB凝胶剂高剂量(14.0 μg/cm2创面)、中剂量(7.0 μg/cm2创面)、低剂量(3.5 μg/cm2创面)3组,凝胶剂基质对照组以及空白对照组.创面局部应用制剂14 d,观察伤后不同时间各组创面面积、伤腔容积变化及组织学改变.结果:伤后14 d rhPDGF-BB高、中、低剂量治疗组创面面积分别缩小至(0.22±0.30)cm2、(0.05±0.06)cm2和(0.32±0.32)cm2,中剂量组明显小于凝胶剂基质对照组(0.23±0.22)cm2(P<0.05)和空白对照组(0.22±0.25)cm2(P<0.05).伤后7 d rhPDGF-BB高、中、低剂量治疗组伤腔容积减小至(0.04±0.03)ml、(0.02±0.02)ml和(0.06±0.03)ml,只有中剂量组明显小于凝胶剂基质对照组(0.06±0.03)ml(P<0.05)和空白对照组(0.07±0.05)ml(P<0.05).组织学检查显示,经rhPDGFBB中剂量治疗的创面伤后7 d肉芽组织生长活跃,其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于其他组,伤后14 d rhPDGF-BB中剂量治疗的创面收缩与上皮生长明显,部分创面愈合,创面愈合情况好于其他组.结论:rhPDGF-BB对糖尿病大鼠切割伤创面有促修复作用,本实验中其有效作用剂量为7.0 μg/cm2.

烫伤合并绿脓杆菌感染大鼠红细胞趋化因子受体结合活性的变化

目的:探讨感染对烫伤大鼠红细胞趋化因子受体(ECKR)结合活性的影响.方法:SD大鼠随机分成假烫伤组和烫伤感染组及单纯感染组.烫伤感染组大鼠行总体表面积(TBSA)30%Ⅲ度烫伤,用ATCC 27853细菌菌液制备感染模型;应用酶联免疫吸附法(ELISA)以白介素-8(IL-8)为配体检测大鼠红细胞趋化因子受体的结合活性.结果:与假烫伤组比较,烫伤和未烫伤感染大鼠ECKR结合活性均呈极显著性下降(P均<0.01).与感染后6 h比较,感染后8 h大鼠ECKR结合活性两组均呈显著性上升(P均<0.01 ) .烫伤感染组与单纯感染组比较,烫伤感染组2 h与8 h两个时间点ECKR结合活性均显著低于单纯感染组(P均<0.05).烫伤感染组下降幅度较大,且低(2 h)出现时间比感染组(6 h)早.结论:感染可进一步加速烧伤大鼠ECKR结合活性的下降,在抗感染的过程中红细胞可能参与体内趋化因子家族的调控.

多发伤早期血小板计数变化及其对预后的影响

目的:探讨多发伤后早期外周血小板计数的变化规律及其临床意义.方法:选择伤后48 h内的90例多发伤者,连续观察入院后即刻、24、72、120和168 h的生命体征各指标及血小板、白细胞等变化,记录伤后器官功能变化、并发症及创伤严重等级评分(ISS)和急性生理学与慢性健康状况Ⅲ(APACHEⅢ)等评分.结果:伤后患者血小板计数总体呈下降趋势,72 h为低谷,120 h基本恢复正常.血小板降低组较血小板正常组伤情重[ISS评分为(29.60±9.80)分比(22.30±12.00)分,P<0.05;APACHEⅢ评分为(44.50±15.30)分比(30.60±10.60)分,P<0.05]、器官功能不全发生率高(83.9%比62.7%,P<0.05);血小板降低并死亡组血小板下降时间早[(30.1±10.3)h比(51.3±14.8)h,P<0.05],持续低值时间长[(63.7±11.0)h比(54.2±13.4)h,P<0.05].结论:多发伤后血小板呈消耗性降低,血小板快速下降和持续低值者提示预后不佳.

表皮细胞生长因子及其受体在难愈性溃疡组织中的表达特征

目的:探讨表皮细胞生长因子(EGF)及其受体(EGFR)在正常皮肤、溃疡边缘和溃疡组织中的分布、表达特征及其与溃疡形成的关系.方法:采用常规病理技术和免疫组织化学方法鉴定这两种蛋白在8例难治性皮肤溃疡患者8份不同类型的皮肤溃疡组织及其对应溃疡边缘和周围正常皮肤组织中的定位及表达量的变化规律.结果:在正常皮肤中,EGF主要存在于表皮细胞、真皮成纤维细胞、毛囊上皮细胞和内皮细胞的胞浆和胞外基质中;而EGFR的阳性信号则分布于这些细胞的细胞膜和胞浆中.从正常皮肤经溃疡边缘到溃疡中心,EGF及其受体的蛋白表达呈降低趋势,在溃疡组织中,EGF和EGFR呈弱阳性表达,两种蛋白的阳性表达率分别降低至正常皮肤的(7.1±5.2)%和(8.8±5.5)%,呈非常显著性差异(P均<0.01).结论:溃疡创面难愈性修复可能与EGF及其受体蛋白表达下降,细胞因子与受体结合发生障碍,修复信号不能正常传递有关.

SARS患者免疫球蛋白抗体动态监测及意义

目的:动态监测严重急性呼吸综合征(SARS)患者抗SARS病毒免疫球蛋白IgG和IgM抗体并探讨其意义.方法:采用间接酶联免疫吸附法,检测早期、恢复期SARS患者以及出院后SARS随访者、急诊一线未患SARS健康医务人员、健康体检者血清中抗SARS病毒IgG和IgM抗体的动态变化.结果:SARS不同时期和不同人群SARS病毒特异性IgG和IgM抗体阳性数有显著性差异(P均<0.005).在疾病早期,IgG抗体阳性率明显高于IgM抗体,而且在疾病恢复期和出院后随访时以及急诊一线未患病人群中,IgG抗体的阳性率始终高于IgM抗体.结论:SARS病毒抗体变化规律与一般传染病抗体产生规律不同,可用于流行病学调查和血清学诊断.

185例SARS死亡病例分析及原因探讨

目的:回顾性分析SARS患者死亡原因,为临床降低病死率提供可借鉴的经验. 方法:对185份2003年6月20日源自北京市各综合医院提供上报给北京市SARS治疗指挥中心的死亡病例资料进行回顾性分析,包括年龄、基础疾病、实验室检查、影像学检查以及治疗措施等.结果:185例SARS死亡病例中男102例,女83例;平均年龄56.4岁,大于60岁者85例.有基础疾病者147例(79.5%),其中心血管疾病57例,占第一位;糖尿病41例,占第二位;脑血管病19例,占第三位;消化道疾病15例.有并发症者52例(28.1%),依次为急性呼吸窘迫综合征(ARDS),继发感染,多脏器功能障碍综合征(MODS)等.部分入院资料齐全者显示入院时生命体征均稳定.血液学与动脉血气分析检查显示:疾病晚期与入院时相比,血糖、白细胞均升高(P均<0.001),而淋巴细胞显著降低(P<0.005),动脉氧分压(PaO2)、氧合指数进行性下降(P<0.005,P<0.001);有近一半的患者血生化指标异常.结论:年龄和基础疾病是SARS死亡十分敏感的指标,而SARS冠状病毒导致的肺损伤、顽固性低氧血症和高血糖代谢紊乱以及激素和抗生素的滥用所致继发感染均是SARS患者死亡的主要原因.

无创正压通气治疗SARS的临床评价

目的:分析无创正压通气(NIPPV)对严重急性呼吸综合征(SARS)患者的氧合作用, 并初步探讨机械通气时机把握问题.方法:对25例SARS合并呼吸功能不全而使用NIPPV治疗24 h后患者的生理指标和氧合功能进行分析,然后再将他们分为生存组与死亡组,比较两组患者NIPPV前后急性生理学与慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分、改良呼吸指数(PO2/FiO2,MRI)的变化.结果:虽然NIPPV 24 h内多数患者呼吸困难有不同程度缓解、心率(HR)和呼吸频率(RR)明显减慢(P均<0.05)、脉搏容积血氧饱和度(SpO2)和MRI显著升高(P均<0.05 ),但死亡组患者从发病到NIPPV治疗的平均时间明显晚于生存组患者,且死亡组患者经NIPPV 24 h后APACHEⅡ、RR仍显著高于生存组(P均<0.05);SpO2、MRI明显低于生存组(P均<0.05).结论:对重症SARS患者而言,NIPPV是机械通气的选择方式,但它无法替代有创机械通气治疗.治疗SARS时不能错过NIPPV或有创机械通气治疗时机,且绝不能拘泥于现行的无创或有创通气指征.

猪骨髓间质干细胞的分离培养及分化潜能的鉴定

目的:建立猪骨髓间质干细胞(MSCs)的体外分离培养和鉴定的方法,探讨体外培养的间充质干细胞的一些生物学特点,为利用猪的实验研究提供实验基础.方法:猪的髂嵴穿刺吸取骨髓,经密度梯度离心得到骨髓单个核细胞,接种后形成单层贴壁的成纤维样的细胞.检测细胞周期,多向诱导分化鉴定分离的细胞.结果:体外培养的原代MSCs 12～14 d达到融合,传代后仍具有分化成骨的能力,细胞周期显示有80%的细胞处于G0/G1期.结论:体外培养猪的MSCs具有分化成骨的潜能,生长稳定,传代后仍保持未分化状态.猪骨髓间充质干细胞分离培养体系的建立为基础研究和组织工程提供了一个有价值的动物模型.

22例SARS患者甲基氢化泼尼松治疗分析

2003年4月20日天津发现第一例输入性严重急性呼吸综合征(SARS)病例开始,共有确诊病例175例[1,2].作为支援天津医疗救治任务的我病区中共救治22例,现对SARS患者使用甲基氢化泼尼松的情况进行回顾分析.

CT立体定向脑内血肿置管引流术抢救重症高血压脑出血临床探讨:附32例报告(脑内病灶急诊定位技术临床应用系列研究②)

重症脑出血表现为高病死率,原因多由于早期的脑疝及后期的多脏器功能衰竭等并发症.我们自2000年以来应用CT立体定向脑内血肿置管引流术抢救重症高血压脑出血32例,效果满意,现报告如下.

急诊简化处理后尿道断裂的经验总结

1990年-2001年1月收治因骨盆骨折并发后尿道断裂73例.采取一次性尿道会师术,效果良好,报告如下.

基因工程技术在创面修复中的应用

烧伤创面是引发机体病理生理变化的基础,早期切削痂、及时封闭创面是提高大面积深度烧伤伤员成活率关键、有效的措施之一[1].但是,如何修复大面积深度烧伤创面仍是医学界的棘手问题[2].

无创血流动力学监测在心脏体外循环术后监护中的意义

血流动力学监测是判断心血管功能及反映机体氧合情况比较准确、可靠的指标,可用于指导危重病人的治疗.我科于2003年5月起使用无创血流动力学监测系统监测10例体外循环心脏手术术后患者的血流动力学变化,在使用过程中总结出以下经验.

创伤失血性休克大鼠肠系膜淋巴液诱导的内皮细胞损害与氧自由基有关

应用分子吸附剂再循环系统清除严重肝衰竭伴多器官功能障碍综合征患者体内一氧化氮和细胞因子

持续性血液透析治疗脓毒症的机制:峰浓度假说

间歇高通透性血液滤过调节伴多器官衰竭的脓毒症患者炎症反应

欧洲心脏病学会指南(三)经皮冠状动脉介入疗法(续一)

9.4 游离壁破裂:9.4.1 急性游离壁破裂:其特点为循环功能丧失并出现电机械分离,患者一般可在数分钟内死亡,而常规心肺复苏措施无效,基本不可能有时间行外科手术.