核因子与白细胞介素-6在骨质疏松模型中的表达特征

目的探讨白细胞介素(IL)-6和核因子变化对绝经后骨质疏松的影响,以及其在骨质疏松发病过程中的关系及意义.方法 4月龄成年雌性BALB/C小鼠随机分假手术对照组和去卵巢骨质疏松模型组,术后第12周测量全身骨密度后处死,用免疫组织化学方法测定股骨下端骨组织中核因子及IL-6的蛋白含量及表达水平并进行细胞定位,对照研究骨密度(BMD)和骨微环境中核因子及IL-6水平.结果去卵巢骨质疏松模型组小鼠与假手术对照组相比,骨密度下降,骨小梁稀疏;免疫组织化学染色结果显示,核因子及IL-6蛋白在模型组蛋白含量明显高于对照组且与骨密度呈显著负相关(P<0.01或P<0.05),NF-κB p65与IL-6呈显著正相关(P<0.01).结论绝经后骨质疏松症骨组织及骨髓中核因子的蛋白含量及表达水平升高,可能激活破骨细胞分化因子IL-6的转录,使其表达增加,骨吸收活动增强,造成骨组织形态改变并导致骨质疏松.

乳腺癌患者ST13、Hsp70、pS2、雌激素受体和孕激素受体表达及其与生存的关系

目的研究乳腺癌患者ST13、Hsp70、pS2、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达及其与生存关系.方法选择1993至1994年间有完整随访资料和蜡块的乳腺癌患者45例,以免疫组织化学法检测ER、PR、pS2、Hsp70和ST13在乳腺癌组织中的表达及相关性分析;并进行Kaplan-Meier生存率分析和COX生存分析.结果 (1)本组乳腺癌组织中ER、pS2、PR、ST13 和Hsp70表达的阳性率依次分别为77.8%、68.9%、66.7%、64.4%和62.2%.其中ST13分别与ER、PR和pS2三者呈显著正相关性(分别为P<0.01、P<0.05和P<0.05).而ER与PR也呈非常显著的正相关性(P<0.01).(2)Kaplan-Meier生存率曲线及Log Rank显著性检验发现,仅ST13和Hsp70阳性者明显提高乳腺癌患者的5年生存率(P<0.05).COX生存分析也发现ST13和Hsp70阳性提高乳腺癌患者5年生存(P<0.05).结论 (1)ER、PR、pS2、ST13 和Hsp70在乳腺癌组织中均高表达,其中ER与PR及ST13与ER、PR和pS2呈非常显著的正相关性.(2)Kaplan-Meier 生存率分析和COX生存分析均提示ST13和Hsp70阳性者明显提高乳腺癌患者的5年生存率(P<0.05).

生存素反义寡核苷酸对胃癌细胞的抑制作用

目的研究生存素(Survivin)反义寡核苷酸(ASODN)对胃癌细胞系HS-746T的抑制作用.方法应用Survivin ASODN转染胃癌细胞,设空白、脂质体和正义链对照组,100、200和400 nmol/L反义链组.电镜下观察细胞超微结构,流质细胞术、四甲基偶氮唑盐(MTT)法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法检测转染后2～48 h细胞凋亡指数(AI),生长抑制率(IR),Survivin mRNA和蛋白表达的变化.结果转染后反义链组均能够下调Survivin mRNA含量和蛋白表达,凋亡细胞增多.转染后24 h 100、200和400 nmol/L反义链组AI为14.8%、19.4%及53.8%;IR(%)为45.98±2.99、50.96±3.38、72.79±2.48,反义链组高于其他对照组.结论 Survivin反义寡核苷酸能够抑制胃癌细胞增殖.

脾源性酪氨酸激酶基因的再表达对乳腺癌细胞生长、转移的影响

目的探讨脾源性酪氨酸激酶(Syk)基因的再表达对裸鼠乳腺癌肿瘤生长和转移的影响.方法 5-氮-2'-脱氧胞苷处理人乳腺癌细胞株MDA-MB-435s,甲基化特异性PCR(MSP)检测Syk基因的甲基化,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Syk基因的再表达,并用此处理过的细胞株和未经处理的细胞株分别接种于10裸鼠皮下,观察裸鼠成瘤率及肿瘤转移情况.结果 MSP检测用5-氮-2'-脱氧胞苷处理过的人乳腺癌MDA-MB-435s细胞株,Syk基因启动子没有甲基化,RT-PCR可检测到Syk基因,用有Syk基因再表达的MDA-MB-435s细胞株接种于10只裸鼠皮下,8周后有2只形成肿瘤,无1例肺部转移,而无Syk基因表达细胞株10只都形成肿瘤,并在肺部形成转移灶.对照组的成瘤率及肺转移率显著高于治疗组.结论 5-氮-2'-脱氧胞苷通过去甲基化使MDA-MB-435细胞株中Syk基因再表达,Syk基因的再表达可抑制荷瘤裸鼠乳腺癌的生长和转移.

提高冻存胚胎胰岛移植效果的实验研究

目的探讨三维组织细胞旋转培养系统(RCCS)对胚胎胰岛冻存复苏后质量的影响.方法将胚胎胰岛平均分为3组,实验组1、2为胚胎胰岛冻存前后分别用RCCS培养和普通培养,对照组新鲜胰岛经RCCS培养.切取胚胎胰腺,胶原酶V消化,纯化.然后进行标准冻存步骤,复苏后继续培养.并检测各组胰岛数量、活性、胰岛素刺激实验结果.结果纯化后收获胰岛多每个胚胎5 012.73 IEQ,少2 432.68 IEQ,平均(3 548.07±273.46) IEQ.微重力培养组胰岛细胞存活率、胰岛素释放量、胰岛素刺激指数等均高于普通培养组.移植经过微重力培养的(2 000±1)% IEQ新鲜胚胎胰岛或冻存胚胎胰岛在移植后1周内可达100%纠正糖尿病.结论微重力旋转培养有利于胰岛细胞的生长繁殖,使胰岛具有更好的胰岛素分泌能力,该方法同胰岛冻存相结合,可以进一步提高胰岛的冻存效果,为胰岛库的成功建立探索出一条新的途径.

雪旺细胞对共培养不同发育阶段纹状体生长的影响

目的观察雪旺细胞(SCs)在体外对纹状体生长的影响.方法将SCs分别与胎鼠、新生鼠及成年鼠的纹状体在体外进行共培养,分别在3 d,1、2、3、4周进行观察纹状体周围神经突起的生长及细胞的迁移情况.结果共培养组中,胎鼠纹状体周围在第3天就出现了神经突起的生长,第3周达到高峰;新生鼠纹状体周围在第1周出现了神经突起;成年鼠纹状体在第2周出现神经突起的生长.共培养组中,胎鼠纹状体周围第1周出现细胞的迁移,随后逐步增多;新生鼠纹状体周围第2周出现细胞的迁移;成年鼠纹状体在第3周出现少量的细胞迁移,但与对照组比较差异亦有统计学意义(P<0.05).结论 SCs在体外能促进共培养不同发育阶段纹状体神经突起的生长及细胞的迁移,可用于神经退行性疾病的移植治疗.

脑胶质瘤增殖活性与转化生长因子-β1的关系

目的探讨胶质瘤中转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白与增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白在胶质瘤中的表达及相互关系.方法根据WHO标准进行分类,采用免疫组织化学方法对35例胶质瘤和7例正常脑组织石蜡标本中TGF-β1与PCNA蛋白的表达水平进行检测,并比较两者的相关性.结果 TGF-β1和PCNA蛋白在胶质瘤细胞中有不同程度的表达,两者呈正相关(r=0.78,P<0.01),且它们在正常脑组织,低、高级别胶质瘤之间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论人脑胶质瘤TGF-β1蛋白的阳性表达与细胞增殖活性和组织学分级密切相关,它可能参与了人脑胶质瘤细胞的恶性转化.

玻璃化法保存血管异体移植的免疫反应

目的评价玻璃化法保存异体血管移植后的免疫反应.方法对玻璃化法保存14 d的新西兰兔股动脉进行异体移植,在4周时对移植动脉进行组织学观察,分别于0、2、4、6、8、12、16和24周采血测定血清抗体滴度和抗体细胞毒作用,并与新鲜新西兰兔股动脉和低温冷冻法保存的新西兰兔股动脉进行比较.结果异体血管移植后在局部和全身均产生了免疫排斥反应.血清抗体滴度的峰值出现于术后第4周,玻璃化法保存的异体血管组织匀浆抗体滴液为0.120±0.023,和新鲜异体血管(0.198±0.020)的差异有统计学意义(P<0.01),和低温冷冻法保存的异体血管(0.130±0.024)的差异无统计学意义(P>0.05).结论经玻璃化法和低温冷冻法保存的血管免疫原性降低.

基因微矩阵技术在骨肉瘤发病相关基因研究中的应用

目的探索骨肉瘤发病相关基因,研究基因表达水平对于骨肉瘤发病的重要意义.方法采用3个公认的骨肉瘤细胞株及1个成骨细胞株,提取总RNA,合成生物素标记的cRNA与Affymetrix GeneChip U133A芯片杂交.随机挑选10个差异表达基因,分别设计合成引物,用嵌合荧光法(SYBR Green I)实时RT-PCR法定量测量9 例术中收集的新鲜骨肉瘤标本中各基因的表达水平,应用ABI Prism 7000分析其与成骨细胞株之间的表达差异.结果以表达差异≥2.0倍为限,在Affymetrix HG-U133A芯片包含的所有基因(约22 000个转录本)中,3个骨肉瘤细胞株与成骨细胞株相比较,共同上调58个基因;共同下调142个基因.随机挑选10个差异表达基因的实时RT-PCR结果与芯片结果完全相符.结论骨肉瘤是一种多基因病变,应用微矩列有助于发现该肿瘤的基因变化规律以及研究肿瘤内基因与基因的相互作用关系.

Smac和Survivin基因在肝癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨Smac 和Survivin在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及两者在肝癌细胞凋亡中的作用和关系.方法免疫组织化学法检测50例肝癌组织、20例癌旁组织和15例正常肝组织中Smac和Survivin蛋白表达情况.逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Smac和Survivin mRNA表达情况.结果 50例HCC标本中表达Smac有21例(42.0%),而除2例癌旁组织外,其他癌旁组织和正常肝组织中均见Smac表达;Survivin在癌组织、癌旁组织和正常肝组织中分别有46例、2例和0例表达;50例肝癌组织中Smac阳性率为40.0%(20/50),肝癌组织和非肝癌组织中Smac的表达差异具有统计学意义,Survivin在肝癌组织、癌旁组织和正常组织中阳性率分别为90.0%(45/50)、10.0%(2/20)和0%(0/15),肝癌组织和非肝癌组织中Survivin的表达差异具有统计学意义(P<0.05).结论 Smac在肝癌组织中低表达,其表达和Survivin呈明显的负相关,两者可能是肝癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环.

坐骨神经慢性压迫性损伤对大鼠脊髓星形胶质细胞增生和突触重塑的影响

目的探讨坐骨神经慢性压迫性损伤大鼠脊髓星形胶质细胞变化及其与突触重塑的关系.方法 12只SD雌性大鼠随机分为2组:对照组(假手术组),模型组制备慢性压迫性损伤模型(CCI组).定期观察大鼠机械痛阈的变化,所有大鼠第14天测定痛阈后行组织灌注固定,应用免疫组织化学双重标记法同时显示胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和突触囊泡蛋白--突触体素在脊髓组织的表达.结果 (1)与对照组相比,CCI组在第4天痛阈明显降低,此后痛阈一直稳定在较低水平即痛敏状态.(2)CCI组GFAP阳性产物主要定位于脊髓患侧背角浅层,其吸光度值(5.74±0.36)与对照组(3.98±0.51)相比差异有统计学意义(P<0.01),突触体素免疫阳性产物表达的分布与上述GFAP阳性分布基本一致.(3)CCI组患侧GFAP阳性细胞的周围有密集的突触体素免疫阳性产物的表达,后者吸光度值(21.13±0.85)与对照组(12.66±1.21)相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 CCI后脊髓背角突触体素和GFAP的表达均明显增多,两者可能同时参与了病理性神经痛及其调节过程.

腺苷A1受体激动剂预处理对保存心脏效果的影响

目的探讨腺苷A1受体激动剂预处理延迟效应对低温St.Thomas液保存大鼠心脏的影响及其与心肌ATP敏感性钾通道的关系.方法 Wistar 大鼠随机分6组,A、C、D组在缺血前24 h以高选择性A1受体激动剂CCPA预处理,B、E注射生理盐水;而D、F组在缺血前应用ATP敏感性钾通道阻滞剂氯磺环己脲.然后A、B组4 ℃ St.Thomas液保存4 h,复灌1 h,而另4组低温缺血3 h,复灌1 h.观测心功能、CK-MB、ATP含量等.结果 A组左室内压上升与下降大速率恢复率(±dp/dt max,%)为62.83±17.27,66.81±18.99,心肌ATP含量(10-3 μmol/wet.g)3.67±1.42;而B组分别为40.41±18.29,44.70±25.14,1.46±0.54;A组都明显高于B组,差异都有统计学意义(P<0.01或P<0.05).C组±dp/dt max恢复率、ATP含量都明显高于D、E、F组(P<0.01或P<0.05),而D、E、F组间差异无统计学意义(P>0.05).结论以腺苷A1受体激动剂可诱导预处理的延迟效应,改善低温St.Thomas液保存离体大鼠心脏的保存效果,而该效应与心肌ATP敏感性钾通道开放有关.

输注脂肪乳剂对伴高甘油三脂血症胰腺炎大鼠胰腺的影响

目的观察静脉输注脂肪乳剂对伴高甘油三脂(TG)血症胰腺炎大鼠胰腺的病理损害程度.方法 SD大鼠静脉滴注蛙皮素(cerulein)诱导水肿性胰腺炎,静脉注射辛基苯基聚氧乙烯醚(Triton WR 1339)诱导高TG血症.60只大鼠随机分为5组:A组(胰腺炎组);B1组(轻度高TG血症+胰腺炎组);B2组(轻度高TG血症+胰腺炎+脂肪乳剂组);C1组(中度高TG血症+胰腺炎组);C2组(中度高TG血症+胰腺炎+脂肪乳剂组).定期测定血清TG值,淀粉酶(AMS)值,测定胰腺湿重,腹水评分以及光镜观察胰腺组织病理损害程度.结果 B2组血清TG值、AMS值,胰腺湿重测定,腹水评分及胰腺病理组织学评分与B1组比较差异无统计学意义;C2组血清TG值及AMS值均较C1组明显升高(P<0.05),胰腺湿重测定,腹水评分及胰腺病理组织学评分较C1组加重.结论伴高TG血症的胰腺炎大鼠,当其血清TG值达到一定程度≥(3.86±0.36) mmol/L时,静脉输注脂肪乳剂,将导致血清TG水平进一步升高,胰腺炎病理损害加重.

改进手术技术制作的犬囊状动脉瘤模型

目的改进手术技术,简化模型制作程序,提高动脉瘤模型制作成功率.方法运用改进的手术技术将犬的颈外静脉囊吻合到颈总动脉(CCA)建立动脉瘤(AN)模型,包括:侧壁型15个,分叉部 6个,末端型6个,术后7～14 d行影像学检查,大体观察证实动脉瘤的形成情况.结果术后动物全部健康成活,建立AN模型27个,制作成功率90%(27/30).模型可持续存在达9周.结论显微手术技术对模型形成的影响很大,该改进方法制作的模型较为理想,能模仿出人类动脉瘤的血流动力学,瘤体大小及载瘤动脉管径,且能进行常规导管介入神经外科操作.

亚砷酸诱导骨髓基质干细胞向神经细胞的分化作用

目的研究亚砷酸体外诱导骨髓基质干细胞(MSCs)向神经细胞分化的作用.方法应用亚砷酸诱导体外培养的人胚胎和成年小鼠MSCs,观察诱导过程中的形态学变化;应用抗Nestin、抗MAP2、抗βⅢ-tubulin、抗磷脂碱性蛋白(MBP)及抗胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体进行免疫细胞化学染色,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测mRNA表达,以2-巯基乙醇(BME)作为对照.结果经亚砷酸和BME诱导后,MSCs均表现为神经元细胞的形态特征.亚砷酸诱导组细胞形态变化较BME诱导组出现晚,且死亡率远低于后者.免疫细胞化学示Nestin、MAP2和βⅢ-tubulin阳性表达,MBP及GFAP为阴性表达.RT-PCR可见Nestin、MAP2、β-actin和βⅢ-tubulin mRNA阳性表达.结论亚砷酸和BME均可在体外诱导人胚胎和成年小鼠MSCs向神经细胞分化,但亚砷酸诱导更为缓和.

甲壳素短纤维对聚己内酯体内的降解作用

目的对纯聚己内酯(PCL)和甲壳素短纤维增强PCL复合材料进行体内降解实验研究,观察其理化性能变化及组织反应情况,为临床应用提供有价值的实验依据.方法将纯PCL和甲壳素短纤维增强PCL植入兔背部脊柱两侧肌肉内,于2、4、8、12、16、24周取材,分别测试两种材料的生物吸收率、弯曲强度和弯曲模量,并行组织学和透视电镜观察.结果甲壳素短纤维增强PCL初始强度大于纯PCL,在体内植入过程中,生物吸收率大于纯PCL,力学性能先高后低,强度和模量值24周时与初始值相差不大.未见材料周围组织变性、坏死或肉芽肿异常增生现象.结论PCL复合甲壳素纤维后,加快降解速度,提高力学性能,材料-组织界面炎性反应轻,是一种具有开发价值的新型胸壁缺损修补及骨科内固定材料.

嗅鞘细胞对神经干细胞增殖分化的影响

目的研究嗅鞘细胞(OECs)和神经干细胞(NSCs)分别及共培养的相互作用,为CNS神经损伤修复提供移植的理论依据.方法分离培养NSCs和OECs,在无血清DMEM/F12液中NSCs和OECs共培养,用免疫细胞化学和激光共聚焦显微术来分析结果.结果共培养7 d观察OECs能促进NSCs增殖分化,分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,其中神经元比例高达78.2%.结论 OECs可促进NSCs的增殖分化,其分化的神经元比例高.

KiSS-1基因及其受体在乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨人类转移抑制基因KiSS-1及其受体hOT7T175在乳腺癌中的表达情况及临床意义.方法以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测40例癌组织和癌旁正常组织中KiSS-1 mRNA 和hOT7T175 mRNA的表达.结果 40例乳腺癌组织中,17例(42.5%)KiSS-1基因表达阳性,10例(25%)hOT7T175基因表达阳性;正常组织中29例(72.5%)KiSS-1基因表达阳性,20例(50%)hOT7T175基因表达阳性.KiSS-1基因和hOT7T175基因失表达与临床分期、肿瘤大小等均无显著相关性,而KiSS-1基因在淋巴结阴性者表达阳性率为63.6%,阳性者仅为16.7%,两者差异有统计学意义(P<0.01).结论 KiSS-1基因失表达与乳腺癌的淋巴结转移密切相关,提示该基因的表达可能是乳腺癌中一个重要的监控淋巴结转移的生物学标志.

葡聚糖磁性纳米颗粒在基因转染人树突状细胞中的研究

目的评价葡聚糖磁性纳米颗粒作为基因载体在针对人树突状细胞转染中的可行性.方法用紫外分光光度计及琼脂糖凝胶电泳法分析检测葡聚糖磁性纳米颗粒结合DNA的能力,再将葡聚糖磁性纳米颗粒作为基因载体连接绿色荧光蛋白pEGFP-C1质粒报告基因在体外转染人树突状细胞,并在转染后72 h采用MTT比色法测定这种载体对人树突状细胞增殖和功能的影响以了解其细胞毒性.结果在葡聚糖磁性纳米颗粒表面修饰多聚赖氨酸后,以静电引力作用结合DNA,其DNA结合率可达到75.6%,修饰多聚赖氨酸的葡聚糖磁性纳米颗粒可作为基因载体将报告基因转染至人树突状细胞内并成功表达,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光细胞.与相同条件下脂质体为对照,转染后的人树突状细胞的增殖活性及功能略优于对照组,有效的证明了葡聚糖磁性纳米颗粒的细胞毒性稍低于脂质体的细胞毒性.结论葡聚糖磁性纳米颗粒可作为有效转染人树突状细胞的基因载体之一.

多药耐药基因在原发性肝癌的表达及其临床意义

目的探讨多药耐药基因(MDR)在原发性肝癌中的表达及其临床意义.方法取肝细胞癌标本64例,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法半定量检测肝癌多种多药耐药基因的基因表达情况,分析其临床意义.结果 (1)各多药耐药基因的表达率高,各耐药基因的表达率差异无统计学意义.(2)各多药耐药基因的表达量差异无统计学意义.(3)MDR1、多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽S转移酶(GST)-π和肺耐药蛋白(LRP)的mRNA表达量有随分级而增高的趋势;DNA拓扑异构酶(TOPOⅡ)的mRNA表达量有随分级而下降的趋势.(4)肝癌MDR基因mRNA表达量与肿瘤大小、有无转移、有无包膜和结节数目有关,与AFP水平、肝硬化情况、肝功能状况无关.(5)在有效组中MDR1、MRP、GST-Ⅱ LRP mRNA的表达量低于无效组;TOPOⅡ mRNA的表达量有效组高于无效组,差异无统计学意义.结论在肝癌多药耐药基因mRNA的表达率高;在肝癌多药耐药的基因mRNA的表达与肿瘤大小、有无转移、结节数目、有无包膜相关,与化疗的疗效相关.

机械性损伤诱导体外培养皮层神经元Homer1蛋白表达及其意义

目的探讨体外培养皮层神经元机械性损伤后Homer1蛋白各亚型表达变化规律,阐明神经元损伤与Homer1基因表达的关系及意义.方法大鼠皮层神经元体外培养7 d,以细小的微量移液器塑料滴头划割培养之神经元,造成机械性损伤.伤后不同时间点(10、30 min、1、3、6、12、24、72 h),裂解细胞,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,Western blot法检测Homer1蛋白各亚型表达变化情况.对照组不进行机械性划割,其他处理同损伤组.结果 Homer1-a蛋白相对分子质量为28×103,对照组无Homer1-a表达,机械性损伤后10 min,Homer1-a少量表达,伤后30 min起,Homer1-a表达明显增加,一直持续至伤后72 h.Homer1-b/c蛋白相对分子质量为47×103,损伤前后Homer1-b/c表达量无明显变化.结论微量移液器塑料滴头划割造成培养之皮层神经元机械性损伤,创伤刺激诱导神经元Homer1-a表达量迅速增加,而损伤前后Homer1-b/c表达量无明显变化.Homer1-a表达呈动态变化,与Homer1-b/c共同调节第I组代谢型谷氨酸受体的功能.

肝细胞癌门静脉癌栓形成的分子生物学机制研究

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者门静脉癌栓(PVTT)形成的分子生物学机制.方法采用免疫组织化学,原位杂交等方法分别对HCC伴有和不伴有PVTT的组织标本252例进行相关指标的检测,分析多种基因在PVTT形成中的意义.标本分为:A组,未发现转移和PVTT的原发肝细胞癌组织,78例;B组,伴PVTT的原发肝细胞癌组织,50例;C组,PVTT,92例;D组,癌旁组织,32例.结果内皮钙黏附蛋白(E-CD)的表达为癌旁组织(D组)>伴PVTT的原发癌组织(B组)>门静脉癌栓组织(C组);尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)/其受体(uPAR)的表达规律为门静脉癌栓组织(C组)>伴PVTT的原发癌组织(B组)>无转移肝癌组织(A组)(P均<0.01);增殖细胞核抗原(PCNA)的表达为门静脉癌栓组织(C组)>伴PVTT的原发癌组织(B组)>无转移肝癌组织(A组);血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达为门静脉癌栓组织(C组)>伴PVTT的原发癌组织(B组)>无转移肝癌组织(A组)(P均<0.01).结论 PVTT组织中VEGF、PCNA、uPA/uPAR高表达,E-CD低表达为共同参与肝细胞癌门静脉癌栓形成的分子生物学机制.

肝细胞癌中β-链接素基因突变及异常表达

目的检测乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌(HCC)组织及癌旁组织中β-链接素(β-catenin)基因第3外显子突变及其表达异常,探讨其在HBV相关肝细胞癌中的作用.方法采用聚合酶链-单链构象多态性(PCR-SSCP)、直接测序、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学技术等方法,检测27例HBV相关肝细胞癌及27例癌旁组织β- catenin基因第3外显子点突变以及β-catenin mRNA表达差异性.结果 (1)HCC组织中,β- catenin基因第3外显子的点突变率约26%(7/27),分别为密码子37(TCT→TGT),丝氨酸→半胱氨酸;密码子45(TCT→TTT),丝氨酸→苯丙氨酸;密码子35(ATC→ATG),异亮氨酸→蛋氨酸.癌旁组织均未发现突变(P<0.05).(2)β- catenin mRNA在癌组织中的表达量明显高于癌旁组织(0.86±0.07比0.33±0.04,P<0.05).(3)β-catenin蛋白在癌细胞胞浆及核内聚集.结论β- catenin基因第3外显子突变及β-catenin的过度表达对HBV相关肝细胞癌发生起到重要作用.

缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸对胶质瘤细胞化疗敏感性的影响

目的研究缺氧诱导因子(HIF)-1α反义寡核苷酸(ASODN)对人胶质瘤细胞化疗药物敏感性的影响.方法人工合成HIF-1α ASODN经阳离子脂质体包裹后瞬时转染人胶质瘤细胞株U251.采用RT-PCR和免疫细胞化学检测转染后HIF-1α基因表达,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖抑制率(PI),亚啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色及末端标记法(TUNEL)检测U251细胞转染后顺铂诱导的细胞凋亡指数(AI).结果 HIF-1α ASODN转染使U251细胞HIF-1α基因表达明显下调,其AI和PI分别为(42.0±3.5)%和(72.5±4.8)%,,与各对照组比较均差异有统计学意义(P<0.01),而空白对照组,脂质体组和SODN组的AI和PI分别为(7.1±0.3)%,(8.2±0.2)%,(12.3±0.4)%和(30.7±2.9)%,(34.2±3.5)%,(38.6±3.1)%,AI和PI在各对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05).结论阳离子脂质体转染HIF-1α ASODN具有促进化疗药物诱导胶质瘤U251细胞凋亡及增强化疗药物敏感性作用.

人嗅鞘细胞的免疫学特性研究

目的探讨人嗅鞘细胞的免疫学特征.方法应用流式细胞仪分析人嗅鞘细胞的相应标记抗原的阳性表达率,用单向混合淋巴细胞反应测定人嗅鞘细胞的组织相容性和免疫耐受性,并与骨髓间充质干细胞对比.结果人嗅鞘细胞与骨髓间充质干细胞表面与移植免疫排斥发生密切相关的标志:HLA-DR、B7-1(CD80)、B7-2(CD86)、CD40和CD40L均为阴性.单向混合淋巴细胞反应显示人嗅鞘细胞、骨髓间充质干细胞均对混合淋巴细胞反应无明显的刺激作用.结论人嗅鞘细胞可能是一种免疫缺陷细胞,在体外有诱导细胞移植免疫耐受性的作用.

实验用细胞可吞噬钛微粒的制备与表征分析

目的探讨从国产工业纯钛粉中分离细胞可吞噬钛微粒的方法,为人工关节假体松动相关研究提供材料.方法将1 000 mg工业纯钛粉置入玻璃烧杯中,加入无水乙醇1 500 ml,充分搅拌混合,室温下静置后,从上层混悬液中收集钛微粒,采用粒度分析仪及扫描电镜观察钛微粒表征.结果获得的钛微粒平均粒径约为(1.169±0.484) μm,99.7%的粒径<3 μm,粒径分布曲线呈正态分布;扫描电镜观察见钛微粒呈类球形,均匀,分散性好.结论无水乙醇重力液力分级法能有效地分离实验用细胞可吞噬钛微粒,其表征与国外所用相关材料相似.

胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗的构建和体外转染

目的探索胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗的构建,以进一步研究对胰腺癌的治疗作用.方法首先对VNTR编码基因进行了重组设计,氨基端插入人单核细胞趋化蛋白Ⅰ信号肽基因序列,起始码前插入KOZAK促真核翻译序列.将人工合成的重组人VNTR基因定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1/Myc-his(+) A质粒的MCS中.将通过测序鉴定的含有准确插入序列的pcDNA3.1-VNTR/Myc-his(+) A重组质粒转染COS7细胞,进行体外转染实验和Western blot检测VNTR在细胞内外的表达.结果自转化平板筛选的阳性克隆通过测序鉴定,pcDNA3.1-VNTR/Myc-his(+) A重组质粒含有完整的阅读框架和目的基因.重组质粒可在COS7细胞内外表达VNTR,以胞内为主.所表达的VNTR分子量比人工合成的VNTR多肽大.结论自行构建的胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗序列准确,可在哺乳动物细胞中表达VNTR.

细胞外信号调节激酶1/2及c-fos在门静脉高压症患者脾静脉壁的表达及意义

目的探讨丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号传导通路是否参与门静脉高压性血管病变的发生过程.方法实验组为乙肝后肝硬化门静脉高压症患者18例,住院期间行择期脾切除加贲门周围血管离断术.对照组选取同期因外伤性脾破裂急诊入院行脾切除术患者10例.采用Western blot方法检测脾静脉组织总蛋白中磷酸化细胞外信号调节激酶丝裂原ERK1/2的表达.采用免疫组织化学方法观察c-fos在脾静脉组织中的表达情况.结果实验组脾静脉壁ERK1/2活性较正常组明显增高(P<0.01).实验组脾静脉壁c-fos表达增高,平均染色指数为6.267 5±0.312 4,正常组脾静脉壁c-fos表达增高,平均染色指数为1.821 3±0.504 1,两者比较差异有统计学意义(P<0.01).c-fos在平滑肌细胞中强阳性表达.结论 ERK1/2/c-fos信号传导途径与门静脉高压性血管病变的发生有关,ERK1/2/c-fos信号传导途径可能是血管平滑肌细胞表型转变的重要调控途径.

大肠癌中p21、p27及c-Met的表达

我们对50例大肠癌采用免疫组织化学方法,检测p21、p27、c-Met的表达变化并与临床病理进行对比研究,探讨它们在大肠癌组织中表达的意义.

改进的组织扩张术兔模型的建立

本实验旨在研究兔的皮肤血供的特点及3种不同固定方法组织扩张术在手术时间、感染几率、固定效果、死亡率的差别,建立一种适用于组织扩张研究的兔模型.

胆石病胆囊缩胆囊素受体及其基因表达的研究

胆囊缩胆囊素受体(CCK-1R)异常在胆固醇结石胆囊收缩功能损害中起重要作用.本研究采用受体放射配基结合法检测胆囊CCK-1R的大结合容量(Bmax) 和平衡解离常数(Kd),同时采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定CCK-1R mRNA在胆囊平滑肌中的表达,旨在探讨胆汁胆固醇对胆囊CCK-1R功能及其基因表达的影响和作用机制.

亚砷酸对BEL-7402细胞凋亡及线粒体跨膜电位、c-myc蛋白表达的影响

我们用人肝癌BEL-7402细胞株作为实验对象,在体外观察亚砷酸(AA)对肝癌细胞的诱导凋亡作用并探讨了其可能的细胞及其分子学机制.

门奇静脉断流术前后胆囊与Oddi括约肌协同运动关系的研究

人迷走神经对胆囊及Oddi括约肌(SO)运动均有调节作用,但对两者的协同运动的影响尚不十分清楚.本研究利用两种门奇静脉断流术对迷走神经的处理完全不同的特点,应用放射性核素动态显像的方法,对比研究术前术后胆囊及SO运动功能的变化,为进一步阐明人迷走神经在胆囊与SO协同运动中的作用提供有力依据.

一种新的动物离体肺灌注模型的建立

肺缺血再灌注损伤(LIRI)是体外循环(CPB)后发生肺部并发症的主要原因之一.持续性的非搏动血流灌注对肺也有一定程度的损伤.本研究旨在探讨通过滚压式血泵建立一种操作较为简单并且更为接近临床实际的乳猪离体肺持续灌注和缺血再灌注模型,并比较持续性灌注与缺血再灌注对肺的保护作用.

胆道化学性栓塞治疗肝内胆管结石的可行性初探

肝内胆管结石虽是亚太地区的常见病,其术后的高复发率与特殊部位肝切除的手术高风险至今仍是肝胆外科中尚未解决的问题[1].基于肝内胆管结石的节段性特点和胆道阻塞可导致所属肝段的纤维化、"自截"的特征,我们提出了应用胆道化学性栓塞进行化学性肝切除来治疗肝内胆管结石的设想,并应用胆色素结石动物模型对其可行性和疗效进行了初步探讨.

hTERT和β-catenin在胆囊癌中的表达及其临床意义

胆囊癌是胆道系统常见的恶性肿瘤,但其发病机制尚未完全阐明.端粒酶重要组分端粒酶逆转录酶(hTERT) mRNA表达与肿瘤恶性表型及端粒酶活性一致[1].近来研究显示β-catenin蛋白(β-cat)异位表达与胆囊癌的不良预后有关[2],但是hTERT蛋白和异位β-cat蛋白表达关系尚鲜见报道.

RECK基因在前列腺组织中的表达及其与基质金属蛋白酶-9的关系

RECK基因是近来发现的一种新基因,本研究旨在探讨RECK基因在前列腺组织中的表达及其意义.

脑星形细胞瘤Livin基因表达与细胞增殖的关系

Livin是近发现的凋亡抑制蛋白(IAP)家族的新成员,其基因位于染色体20q13.3,全长46 kb,有α及β两种异构体,分别编码长度为298及280个氨基酸的蛋白质[1,2].近期研究表明Livin基因在某些恶性肿瘤中表达,但该基因与神经系统肿瘤的关系至今国内外尚未见报道.本研究采用实时逆转录-聚合酶链反应(real-time RT-PCR)的方法检测脑星形细胞瘤中Livin α、β的表达,并结合免疫组织化学检测细胞增殖活性,现报告如下.

硝苯吡啶体外对家兔阴茎海绵体平滑肌的舒张作用

阴茎海绵体平滑肌可表达L型电压依赖性钙通道,钙拮抗剂通过选择性作用于钙通道,阻滞细胞的外钙内流而舒张阴茎海绵体平滑肌,在犬阴茎海绵体内注射维拉帕米能诱发阴茎勃起[1].本实验旨在观察硝苯吡啶(NIF)对高K+诱发的离体家兔阴茎海绵体平滑肌条收缩的影响,并探讨其舒张效应和机制.

Survivin表达与脑胶质瘤增殖、凋亡及血管生成的关系

Survivin是凋亡蛋白抑制因子(IAP)家族的一个新成员,具有强大的抗细胞凋亡、促有丝分裂以及促血管生成作用,并与人类多种肿瘤的形成密切相关[1,2].本研究检测了Survivin蛋白在脑胶质瘤中的表达水平,进一步分析了其与脑胶质瘤恶性增殖、凋亡以及血管生成的关系.

hMAM mRNA在乳腺癌患者中的表达及其临床意义

我们通过利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术敏感性高、特异性强、简单快速的优点,检测皮肤人乳腺球蛋白(hMAM) mRNA表达,以进一步了解乳腺癌患者皮肤微小转移的情况,明确是否术中可以保留更大范围的皮瓣,为乳房重建提供方便,减少手术范围过大给患者带来的损伤.

树突状细胞与细胞因子诱导杀伤细胞共培养体外抗肾癌的效应

细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)为非特异性杀伤免疫效应细胞,杀伤活性有待提高.树突状细胞(DC)是目前发现的功能强的专职抗原提呈细胞(APC),可诱发抗原特异性免疫应答.本研究旨在探讨肾癌(RCC)肿瘤冻融抗原致敏的DC与CIK共培养后能否提高DC-CIK细胞对RCC的特异性杀伤活性.

骨桥蛋白在脑胶质瘤中的表达及与其预后的关系

骨桥蛋白(OPN)首先是在骨基质中发现的一种分泌型钙结合糖磷酸化蛋白,有促进细胞的趋化、黏附、迁移和增殖等作用[1].近年发现OPN在肿瘤组织及其转移灶中高表达.我们通过检测脑胶质瘤中OPN的表达,探讨OPN与脑胶质瘤临床、病理及预后之间的关系,进一步了解OPN在脑胶质瘤发生、发展中的作用.

生长激素对梗阻性黄疸血白细胞介素-2及其受体的影响

梗阻性黄疸体内过高的内毒素水平对免疫系统的损害非常严重.麻醉和手术的打击进一步加重梗阻性黄疸围手术期免疫系统损伤,可能因此加重感染.生长激素对于减轻梗黄内毒素性肠屏障损伤及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的作用已经得到证实[1],本实验旨在探讨对免疫系统的影响.

兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的血流动力学变化

蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛,损害脑血管自身调节功能,使脑血流量减少,加重脑水肿,可引起迟发性缺血性神经功能缺失和脑梗死,从而使致残率和死亡率增加,因此早期发现脑血管痉挛(CVS)至关重要.

Fas/FasL、p27、增殖细胞核抗原在老年大肠癌中的表达

我们通过应用免疫组织化学技术对100例老年大肠癌患者中Fas/FasL、p27、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达进行了研究,探讨Fas/FasL及P27、PCNA在老年大肠癌发生、发展中的作用.

枸橼酸氢钾钠防治尿石症研究进展

在过去20年里,枸橼酸盐已成为治疗尿石症的常用药物,枸橼酸氢钾钠便是其中的一种.现简述该药的生理意义、作用机制和应用原则.

RGD肽在组织工程领域的应用

种子细胞、生物材料和组织器官再生构成组织工程三大要素,其中细胞和材料间相互作用是主要研究内容.将某些生物活性分子固定在高分子或生物源性材料的表面,修饰其结构特征,提高材料的生物相容性和细胞亲和力,为种子细胞黏附、增殖、扩展和分化提供良好界面,促进细胞外基质(ECM)产生,是构建组织工程产品的重要措施.生物活性分子以生长因子和多肽常用,后者又以RGD肽研究为深入[1].本文就RGD肽的生物学效应、种类、检测、固定方法等作一综述.

高强度聚焦超声治疗兔肾癌细胞株VX2的CT动态观察

目的评估CT在高强度聚焦超声治疗兔VX2肾癌近期随访中的价值.方法纯种新西兰白兔14只,建立原位肾癌动物模型.所有兔行CT检查后随机分成2组:对照组(5只),行高强度聚焦超声(HIFU)假照射,1月后CT检查;治疗组(9只),HIFU治疗后1周、1个月和2个月行CT检查.结果 (1)肿瘤强化:治疗前,所有肿瘤都有强化.对照组肿瘤在假照射后1个月依然都有强化;治疗组在治疗后1周,66.7%的肿瘤强化消失;治疗后1个月,88.9%的肿瘤强化消失;治疗后2个月和1个月相比肿瘤强化无明显变化.(2)肿瘤钙化:治疗后1月,治疗组77.8%的肿瘤出现钙化,对照组肿瘤始终无钙化.(3)肿瘤体积:对照组兔处死前的末次CT检查测得肿瘤体积和解剖后测得肿瘤体积比较,配对t检验,差异无统计学意义(P>0.05);同法比较治疗组肿瘤体积,差异无统计学意义(P>0.05).(4)治疗前CT测得体积和HIFU治疗点数之间有较好相关性(r＝0.667,P<0.05).(5)病理观察:治疗后肿瘤细胞凝固性坏死,随访期中示纤维化、钙化改变;未治疗肿瘤生长旺盛.病理和CT结果一致.结论 CT检查可以为制定HIFU治疗计划提供参考;CT可以作为HIFU治疗肾癌后良好的随访手段;CT随访宜在治疗后1个月进行.

新西兰兔尿道海绵体平滑肌细胞的原代培养及鉴定

目的为构建新西兰兔组织工程尿道提供种子细胞.方法取新西兰兔阴茎头,用含10%胎牛血清的高糖DMEM作体外原代培养,并行免疫组织化学法鉴定.结果经10～14 d培养后,培养瓶底铺满梭状细胞,免疫组织化学法鉴定确认为兔尿道海绵体平滑肌细胞.结论兔阴茎头平滑肌细胞可在体外条件下生长传代、扩增,可作为构建组织工程尿道的种子细胞.

表皮生长因子信号通路对前列腺癌细胞DU145黏附和迁移能力的影响

目的探讨表皮生长因子(EGF)信号通路对雄激素非依赖型前列腺癌细胞株DU145黏附和迁移能力的影响.方法应用细胞黏附能力测定和划痕实验测定EGF对DU145黏附和迁移能力的作用,应用流式细胞术测定EGF对DU145细胞表面整联蛋白α5和β1表达的影响,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot测定EGF对DU145细胞整联蛋白α5和β1亚基总蛋白和mRNA表达的影响.结果 EGF可促进DU145对纤连蛋白(Fn)的黏附和迁移作用,同时,Fn的受体α5β1的表达发生了变化,EGF上调细胞表面β1亚基的表达,而丝裂源激活蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制剂PD98059则具有相反的作用,这种调节作用主要发生在mRNA水平上.结论 EGF可能通过MAPK信号通路,上调β1的表达,从而促进DU145细胞的侵袭能力.

小鼠CD154真核表达质粒的构建及其对膀胱癌细胞体内成瘤性的影响

目的构建小鼠CD154真核表达质粒,观察其转染膀胱癌细胞后对癌细胞体内成瘤性的影响.方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增T739小鼠CD154 cDNA,重组到 pcDNA3.1/Zeo(+)构成重组质粒,经阳离子脂质体转染小鼠膀胱移行细胞癌细胞BTT739,将转染后的细胞接种T739小鼠,观察肿瘤在体内的生长情况.结果 RT-PCR产物进行凝胶电泳可见0.8 kb处的目的基因条带,序列测定结果正确;CD154重组质粒转染BTT739细胞后能够在肿瘤细胞内表达;转染CD154的肿瘤细胞在小鼠体内不能成瘤.结论成功构建小鼠CD154真核表达质粒,将其转染肿瘤细胞后能抑制肿瘤细胞的体内成瘤性.

缺氧诱导因子-1对肾微血管内皮细胞缺氧再复氧损伤免疫调节作用

目的探讨低氧诱导因子-1(HIF-1)在肾微血管内皮细胞(HGMECs)缺氧再复氧损伤中的免疫调节作用.方法建立HGMECs缺氧再复氧模型,应用特异性脯氨酰羟化酶抑制剂3,4-DHB和环氧酶-2阻断药物NS-398预处理HGMECs,设对照、缺氧复氧、3,4-DHB和NS-398四组.采用逆转录-聚合酶链反应、免疫印记和酶联免疫吸附试验等方法检测各组细胞HIF-1α、血红素氧合酶-1(HO-1)的mRNA和蛋白的表达及上清中可溶性细胞间黏附因子-1(sICAM-1)的水平;将各组HGMECs与异体淋巴细胞混合培养(MELR),检测淋巴细胞增殖程度和MELR上清中白细胞介素-2(IL-2)的表达水平.结果与对照组相比,HGMECs经缺氧复氧损伤后HIF-1α蛋白和HO-1 mRNA表达水平显著增高(P<0.01),上清中sICAM-1(14.55±1.13 vs 7.90±1.61) ng、异体淋巴细胞增殖率(0.191±0.053 vs 0.069±0.032)和MELR上清中IL-2(40.0±5.0 vs 18.0±3.0) pg水平均有显著增高(P<0.01).与缺氧复氧组比较,3,4-DHB干预组HIF-1α蛋白和HO-1 mRNA表达水平显著增高(P<0.05),而淋巴细胞增殖率(0.079±0.038,P<0.01)及IL-2(25.7±6.1 pg,P<0.01)和sICAM-1(8.71±1.32 ng,P<0.01)水平则显著下调.与缺氧复氧组比较,NS-398干预组HIF-1α蛋白和HO-1 mRNA表达水平显著减低(P<0.01),而淋巴细胞增殖率(0.268±0.079)及IL-2(51.0±11.0) pg和sICAM-1(20.33±3.05) ng表达水平则显著增高(P<0.05).结论缺氧复氧会对HGMECs造成免疫学损伤,HIF-1α稳定表达可起到保护性作用.

雄激素共激活物DDC在氟他胺对前列腺癌细胞LNCaP作用中的表达变化

目的观察雄激素受体(AR)共激活物DDC在氟他胺对前列腺癌雄激素敏感细胞系LNCaP的作用的表达变化.方法噻唑蓝比色法(MTT),流式细胞术等技术,研究氟他胺对LNCaP细胞的作用,并使用基因芯片对其DDC在其中的作用作了初步探讨.结果 LNCaP细胞在7 d内受到氟他胺的刺激而加速生长,但5代后细胞增殖受到抑制.此种效应与剂量相关.细胞增殖主要被阻断于G1/S期.其相关机制主要是AR共激活物DDC的表达受到抑制.结论氟他胺对LNCaP的作用为双向,即在低浓度和较短作用时间内为增殖,在高浓度和较长作用时间后为抑制.此种抑制效应可能是通过抑制DDC的表达,影响下游细胞周期相关基因的表达,从而阻断细胞周期于G1/S调控点.

大鼠肾脏缺血再灌注损伤与重组成骨蛋白-1的关系

目的探讨鼠重组成骨蛋白-1(rOP-1)在大鼠肾脏缺血再灌注损伤过程中对氧自由基、细胞凋亡的影响及其对肾脏的保护作用.方法观察静脉应用rOP-1 250 μg/kg体重,大鼠肾脏缺血60 min,再灌注24 h后,血浆超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醇(MDA)、内皮素-1(ET-1)的变化,及其对肾脏细胞凋亡的影响.结果 rOP-1组和缺血再灌注组血浆SOD分别是(108±20)和(86±11) KNU/L,MDA分别是(8.90±0.49)和(11.70±0.81) μmol/L,ET-1分别是(130±39)和(179±45) ng/L,rOP-1组SOD水平显著性高于缺血再灌注组(P<0.05),而MDA和ET-1水平显著性低于缺血再灌注组(P<0.05).两组肾脏细胞凋亡指数分别是(5.72±3.08)%和(8.85±3.52)%,rOP-1组显著性低于缺血再灌注组(P<0.01).上述两组肾脏的的Miller's评分分别是(2.0±0.3)和(3.4±0.5),rOP-1组显著低于缺血再灌注组(P<0.01).结论 rOP-1减轻氧自由基对肾脏缺血再灌注损伤,降低肾脏细胞凋亡指数,对肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用.

大鼠原位肾脏移植模型的显微外科技巧

目的探讨建立稳定、可靠的大鼠原位肾脏移植模型的显微外科手术技巧.方法供体手术经腹主动脉以4 ℃乳酸钠林格注射液对供肾进行原位灌洗.受体手术采用将供肾的血管与受体的同名的血管作端端吻合的大鼠原位左肾移植.结果共施行大鼠原位肾脏移植手术120例,手术成功率为91.5%;非干预组中,同系移植大鼠1个月存活率为82.9%.结论肾动、静脉和输尿管的重建均采用端端吻合法而无须阻断腹主动脉和下腔静脉,大大减少了对受体循环系统的影响.该模型稳定性强、重复性好,适合于移植免疫的基础研究.

氟他胺耐受前列腺癌动物模型的建立

目的建立SCID鼠前列腺癌氟他胺耐受模型.方法运用我们前期建立的氟他胺耐受前列腺癌细胞LNCaP-flu (5×106个/0.1 ml),结合应用Matrigel胶,将LNCaP细胞、LNCaP-flu细胞分别各接种20只SCID雄鼠皮下,成瘤后将LNCaP细胞种植荷瘤鼠随机分为两组(LNCaP组、LNCaP/flu组),同时将LNCaP-flu细胞种植荷瘤鼠也随机分为2组(LNCaP-flu组、LNCaP-flu/flu组),每组6只,其中LNCaP/flu组、LNCaP-flu/flu组两组给予SCID鼠氟他胺20 mg/kg体重皮下注射,每周2次,另2组作为对照组,动态观察肿瘤的生长状况.21 d后测量瘤体大小,应用免疫组织化学方法检测种植瘤组织AR和PSA的表达.结果模型建立过程中,LNCaP细胞接种成瘤率75%(15/20),LNCaP-flu细胞接种成瘤率60%(12/20),种植瘤组织组化染色AR均为阳性,而PSA均为阴性,未观察到肿瘤的远位转移.LNCaP组、LNCaP-flu组、LNCaP-flu/flu组3组间瘤重、瘤体积之间的差异无统计学意义(P>0.05),与LNCaP/flu组差异有统计学意义(P<0.05).结论成功建立了前列腺癌细胞氟他胺耐受动物模型,为进一步研究并解决临床氟他胺耐受现象提供了重要的动物模型.

一种改进大鼠肺移植模型的建立

目的改进大鼠原位单肺移植实验方法,建立稳定的动物模型.方法取近交雄性SD大鼠,行原位灌洗和供体心肺联合切取,应用cuff技术吻合肺动、静脉,prolene线连续吻合支气管.术后通过胸部X线和动脉血气分析监测移植肺存活情况.结果共完成26例大鼠肺移植手术,成功23例,失败3例,手术成功率为88.5%,术后7 d存活率为100%.手术操作简便,技术稳定.结论该模型的改进为肺移植及其免疫学等方面的研究奠定了良好的基础.

膀胱癌病因学研究进展

膀胱癌是一个重要的公共卫生问题,世界上每年诊断的膀胱癌超过200 000例,在美国,膀胱癌位于常见的恶性肿瘤中的第4位,女性膀胱癌的发病率约为男性的四分之一.尽管对于膀胱癌的研究已经取得了巨大进步,但是从其病因、病理发生过程到诊断和治疗等各个方面都仍然有无数个问题在等待人们去回答,本文仅就国内外膀胱癌病因学研究作简单论述.

我国前列腺癌实验研究的现状和展望

前列腺癌(PCa)在美国位于男性恶性肿瘤的发病率第1位,死亡率第2位,近年来,我国的前列腺癌发病率呈上升趋势.上海市统计数据显示,前列腺癌的发病率已从1991年的2.9/10万男性上升到目前的12.6/10万男性.PCa发病隐匿,很多患者就诊时已有淋巴结或骨转移.

加强青年科技创新人才的培养

21世纪是知识经济占主导地位的世纪,而创新则是知识经济的灵魂.江泽民同志在第三次全国教育工作会议上指出:"我们必须把增强民族创新能力提高到关系中华民族兴衰存亡的高度来认识.教育在培养民族创新精神和创造性人才方面,肩负着特殊的使命."因此,培养创新人才,特别是培养青年科技创新人才具有十分重要的意义,也已引起社会各界的高度重视.

本刊关于参考文献著录和核对的要求