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30%茚虫威水分散粒剂的液相色谱分析
采用反相液相色谱法,用甲醇-水为流动相,选用Hypersil ODS2250 mm×4.6 mm(i.d)色谱柱对其中有效成分茚虫威进行定量分析;采用正相液相色谱法,用正己烷-异丙醇-乙醇为流动相,选用CHIRALCEL OD-H 250 mm×4.6 mm(i.d)手性色谱柱对茚虫威的R-异构体和S-异构体进行分离,运用面积归一化法测定S-异构体的比例。
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婴幼儿配方奶粉中的反式脂肪酸评价
近年来,在媒体的宣传下,人们几乎谈反式脂肪而色变。反式脂肪酸(Trans-Fatty Acids,以下简称TFA)是碳链上存在一个以上非共轭反式双键不饱和脂肪酸及其所有异构体的总称,是人体非必需脂肪酸,空间构象接近直线型(如图1),其异构体顺式脂肪酸(Cis-Fatty Acids)中氢原子在碳链同侧,空间构象接近U型。TFA有两个来源:天然来源和工业生产过程来源,经大量研究证实,过量摄入工业化来源的TFA有增加罹患心血管疾病的风险,而日常膳食摄入的天然来源TFA则没有危害,且有研究表明它对人体健康有益。
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孕激素受体与妊娠
人体中存在一种孕激素受体基因,该基因可产生至少两种不同的雌激素依赖的孕激素受体异构体(PRA和PRB).本文也将涉及其他孕激素受体异构体.PRA在受体的N末端比PRB少了164个氨基酸.PRB似乎对于女性生殖道孕激素依赖的生理反应是必不可少的.PRA对于卵巢和子宫正常行使功能不可或缺,但在乳腺却不然.PRB对于子宫维持静息状态是必需的.第三种受体异构体称为PRC,也已被克隆,可调节PRA和PRB的转录活动,但对于这一点还有争议.孕激素是妊娠期主要激素,其作用与孕激素受体密切相关.对于植入过程中滋养层细胞侵润以及包括动脉壁松弛在内的螺旋动脉系统的建立是必需的.妊娠的正常进展需要建立针对半同种异源基因胎儿的免疫平衡,并与孕激素通过孕激素受体发挥多方面的作用相关,如细胞因子、自然杀伤细胞活性和抗体生成.母体产生的一种称为孕激素诱导阻断因子(PIBF)的特殊蛋白,是母体对胎儿产生免疫耐受的主要原因.循环中的孕激素水平与妊娠结局密切相关.自然流产与反复流产患者不仅孕激素水平低下,其孕激素胞浆受体及核受体水平也降低.有研究指出孕激素受体基因可能存在某种多态性,可能影响妊娠的发展和结局.然而,这种说法未能被其他研究证实.统言之,孕激素的产生、分泌及孕激素受体决定了一次正常妊娠的发展.
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血浆中游离梭曼的电鳐乙酰胆碱酯酶抑制测定法
梭曼是一种对体内乙酰胆碱酯酶(AChE)有强烈抑制作用的有机磷化合物.由于梭曼毒性强且在体内降解迅速,国外目前主要通过大进样量气相色谱或气-质联用方法来检测[1,2],其优点是:(1)灵敏度较高,如检测下限可达1.5 pg/ml血浆;(2)可以将梭曼的4个异构体分开,以便研究各异构体在体内的动力学过程.
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甲磺酸帕珠沙星右旋异构体拆分方法研究
目的:建立甲磺酸帕珠沙星右旋异构体的HPLC拆分方法.方法:采用C18柱,流动相为:乙腈-甲醇-手性溶液[取D-苯丙氨酸1.65g,氯化铜(CuCl2@2H2O)1.85g,加水800ml,加0.2mol/L的枸橼酸缓冲液(pH3.0)10ml,超声溶解,加水至1000ml,摇匀,即得](5:15:80),荧光发射波长为335nm,检测波长为400nm,流速1.0ml/min.结果:甲磺酸帕珠沙星在0.625 10 μg/ml浓度范围内,峰面积与浓度呈良好线性关系(r=0.9999),低检测限为0.1ng,制剂辅料无干扰.结论:本法简便、专属、重现性好,可用于测定甲磺酸帕珠沙星右旋体含量.
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二恶英及其类似物Ⅲ食品测定方法
食品中PCDD/Fs分析属超痕量(pg-fg)、多组分(同系物、异构体的分离)和复杂前处理技术,对特异性、选择性和灵敏度的要求极高,成为当今食品和环境分析领域的难点.目前仅在发达国家的少数实验室能够开展.
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微囊藻毒素与食品安全
由于人类活动,如生活污水、工业废水的排放以及农田肥料的流失等因素的影响,内陆水体中蓝藻(Cyanobacteria)水华的发生日益严重.蓝藻在爆发生长过程中往往会产生内源性毒素,对动物和人群健康构成严重威胁.微囊藻毒素(microcystins, MC)即是由某些种属的淡水蓝藻,主要是铜绿微囊藻产生的一个结构相似的环七肽家族,已知有60余种异构体(图1)[1].
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污染区人群耵聍和乳汁中多氯联苯负荷水平的研究
多氯联苯(PCB)是公认的全球性污染物.近年来,从其众多的异构体中分离出毒性更高、致畸和致癌作用更强的类二NFDAB英PCB后,人们对其污染的深入研究给予了新的关注.我们通过对我国大废旧电器拆解主要集散地人群耵聍和乳汁中PCB的调查,以期反映该地区人群体内PCB蓄积和近期负荷水平.
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六种市售奶粉氯化二苯并二噁英和氯化二苯并呋喃的定量检测分析
二(口恶)英类化合物共包括210种同系物和异构体.但对人类具有毒性意义的化合物是其中的17种2,3,7,8位氯原子取代的二(口恶)英和呋喃.氯化二苯并二(口恶)英(PCDDs)和氯化二苯并呋喃(PCDFs)是一类对人类危害十分严重的环境内分泌干扰物.
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液相色谱串联质谱法分析饮用水中微囊藻毒素
微囊藻毒素是一类具生物活性的单环七肽,目前所检测到的微囊藻毒素异构体已超过50多种,其中主要的有MC-LR、MC-YR和MC-RR三种.
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万寿菊中新的单宁类化合物
从万寿菊花中分离得到新的葡萄糖异头物:3,4-二丁香酸-α-D-葡萄糖(1)和3,4-二丁香酸-β-D-葡萄糖(2),运用1D,2D NMR和HR-ESI-MS等波谱法鉴定了其结构.通过HPLC-ESI-MS进一步对该新异头物的混合物分析的表明:在混合物中化合物1和2在tR =3.22 min(m/z 538.9[M - H] -,39.97%)和3.25 min(m/z 538.9[M- H] -,57.88%)被检测到.
关键词: 万寿菊 异构体 单宁 HPLC-ESI-MS -
6种人DNA甲基转移酶3B典型异构体的克隆、表达及对293A细胞增殖的影响
目的 构建6种人DNA甲基转移酶(DNMT)3B典型的异构体的真核表达载体并对其进行过表达,初步探讨其在人胚肾细胞系293A中的生物学作用.方法 以人HCT116 cDNA为模板,采用高保真PCR获得DNMT3B1和DNMT3 B2的全长,并以DNMT3B2为模板,利用特异的引物扩增出DNMT3B3、DNMT3B4、DNMT3B5和DNMT3B7,将PCR产物连接到真核表达载体pCMV-2B上,并对上述载体进行BamH Ⅰ、EcoRⅠ双酶切和测序鉴定,鉴定正确后,将重组质粒转染293A细胞并利用G418筛选出稳定表达的克隆株,MTT法检测细胞增殖活力.结果 双酶切和测序结果表明克隆了6种人DNMT3B异构体CDS序列,经蛋白印迹检测,DNMT3B异构体在293A细胞中获得稳定表达;稳定过表达DNMT3B3、DNMT3B4和DNMT3B7可以抑制细胞增殖.结论 构建了人DNMT3B异构体真核表达载体及获得了其稳定表达细胞株,DNMT3B异构体蛋白对胚肾细胞系293A的增殖有不同的作用.
关键词: DNA甲基转移酶3b 异构体 胚肾细胞293A 增殖 -
病毒上清液促进体外培养INS-1细胞系胰岛素分泌
信号传导与转录激活因子(signal transducer and activitor of transcrrption,STATs)是一类通过酪氨酸磷酸化激活的转录因子家族.STAT5是这一家族的重要成员,有STAT5A和STAT5B两种异构体,两者具有高度同源性,它们可以在接受生长激素、催乳素、干扰素以及促红细胞生成素等多种激素或细胞因子刺激后,通过酪氨酸磷酸化偶联形成二聚体,获得进入细胞核的能力,影响目的基因的转录,从而广泛参与细胞的增殖和分化,调节细胞的凋亡.
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冠心病病人载脂蛋白E与血脂水平的相关性
人类载脂蛋白E(apo E)有三种主要异构体E2、E3、E4,是由三个等位基因编码,不同的apo E异构体受体结合活性不同,从而影响了脂蛋白的代谢,出现异常的脂蛋白血症.本实验研究探讨天津地区汉族人群apo E等位基因的频率分布及对血脂水平的影响,分析正常人与冠心病病人apo E基因分布频率的差异.
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HIF-1α选择剪接异构体的结构及其功能
选择剪接是"一个基因-mRNA组-蛋白质组"的新概念,由一个基因产生的多种结构相似的蛋白质家族成员的内在联系是后基因组学的重要内容.缺氧诱导因子1(HIF-1)是诱导与缺氧应激反应有关的基因表达有效的转录因子,是缺氧信号转导的整合平台.HIF-1α是HIF-1功能调节的核心.目前多种HIF-1α选择剪接异构体被克隆,它们对HIF-1α功能的竞争性抑制作用是大多数HIF-1α选择剪接异构体的主要特点,提示了一种HIF-1活性的新的调控机制, 也为缺氧信号转导和基因表达调控研究提供了新的线索.
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p63、calponin和SMM-HC联合标记在乳腺增生性病变中表达的比较
在乳腺良性增生性疾病中,腺体周围肌上皮存在,而恶性病变出现浸润时肌上皮消失.因此乳腺肌上皮细胞是否存在对鉴别良、恶性病变具有重要的鉴别诊断价值.以前认为肌动蛋白异构体是乳腺肌上皮细胞较好的标记物,后又发现肌动蛋白结合蛋白(calponin)和平滑肌球蛋白重链(SMM-HC)的特异性优于肌动蛋白异构体,但仍未解决平滑肌细胞和肌纤维母细胞共同表达的问题.近年来,p63蛋白的应用解决了以上抗体交叉后反应的问题,使得一些构象复杂的乳腺上皮性病变易于诊断.本文应用p63、calponin和SMM-HC 3种抗体联合标记,对41例乳腺良、恶性病变进行比较,探讨3种抗体联合应用在乳腺疾病诊断中的意义.
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Ikaros和Helios异构体在白血病中的表达特征及机制的初步研究
本研究旨在阐明对造血调控中起重要作用的Ikaros家族成员Ikaros和Helios的两个异构体Ik-6和He-i的表达特征、发生机制、临床意义和关联性.对163例白血病患者的骨髓细胞进行了PCR分析.结果显示,Ik-6和He-i高表达于不同的白血病亚型,Ik-6高表达于BCR/ABL融合基因阳性的急性淋巴细胞白血病,而He-i则高表达于T细胞急性淋巴细胞白血病.克隆和测序结果显示,异构体Ik-6和He-i具有不同的遗传学改变.本研究未观察到Ik-6和He-i之间具有统计学意义的关联性.结论:虽然Ikaros和Helios是具有极其相似锌指结构的同一家族成员,但其异构体Ik-6和He-i在白血病中的表达特征、发生机制和临床意义有差异.Ik-6和He-i缺失的外显子分别含有或不含有DNA结合功能域,这种差异可能导致两者具有不同的生物学功能.两者之间的相互作用和关联性有待深入研究.
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肝癌组织中诱导型一氧化氮合酶的表达及其与血管形成、bcl-2和细胞增生的关系
一氧化氮合酶(NOS)是NO合成的关键限速酶,它的生物学活性直接决定着NO的合成量.NOS有两个异构体,即结构型NOS(cNOS)和诱导型NOS(iNOS).通常iNOS与肿瘤的免疫相关,且产生NO的能力较cNOS高出100~1 000倍.NOS活性的增高与肿瘤血管形成关系密切[1].另有研究显示,iNOS产生的NO可通过bcl-2介导途径抑制细胞凋亡并有利于生长停止的肿瘤细胞的存活[2].
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HLA-G mRNA差异表达对细胞膜表面HLA-G异构体分子表达的影响
目的 探讨HLA-G异构体(HLA-G1~6)mRNA差异表达对HLA-G分子在细胞表面表达的影响.方法 通过RT-PCR方法分析卵巢癌细胞株HO-8910、H0-8910PM、OVCAR-3,白血病细胞株Jurkat、K562、HL60、MUTZ-1,绒癌细胞株JEG-3、JAR内HLA-G异构体mRNA的表达种类,采用流式细胞术分析上述细胞株细胞表面及细胞内HLA-G分子的分布及表达水平.结果 阳性对照JEG-3细胞内表达HLA-G1~6 mRNA,阴性对照JAR不表达HLA-G1~6 mRNA.HLA-G1 mRNA在HO-8910、HO-8910PM、OVCAR-3、MUTZ-1、Jurkat细胞内表达.除阳性对照JEG-3外,其他细胞均不表达HLA-G2 mRNA;表达HLA-G3 mRNA的细胞有HO-8910、HO-8910PM、K562、HL60、MUTZ-1、OVCAR-3、Jurkat;表达HLA-G4 mRNA的细胞有HO-8910、HO-8910PM、HL60、Jurkat;表达HLA-G5mRNA的细胞为Jurkat.FACS分析显示在JEG-3、HO-8910PM、Jurkat细胞膜表面表达HLA-G分子,而除JAR细胞外,其他细胞内均表达HLA-G分子.结论 HLA-G2、-G3、-G4、-G5、-G6均不能在细胞表面表达,而HIJA-G1分子则能在特定的细胞表面表达.
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重组大鼠TGF-β1在大肠杆菌的表达及初步鉴定
β型转化生长因子(TGF-β)有5种不同的异构体,其中TGF-β1研究为深入,由于TGF-β1对多种脏器纤维化及肿瘤的发生、发展有关而倍受关注。