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山东省胜利油田石油工人肝癌患者肝炎病毒检测分析
为了解胜利油田石油工人肝癌患者血清肝炎病毒标志物的状况,对151例研究对象进行了检测分析.
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单克隆抗体3A5-复方中药安迪偶联物的肝癌导向治疗
目的:探讨单克隆抗体3A5-复方中药安迪粉针剂偶联物(3A5-Andi)的肝癌导向治疗作用.方法:用单克隆抗体3A5与安迪粉针剂(Andi)制备偶联物,ELISA检测3A5-Andi偶联物保持对人肝癌BEL-7402细胞的免疫反应性;采用小鼠/裸鼠移植性肿瘤模型,5-FU为阳性对照组,观察12、24和50mg/kg的导向治疗作用.结果:克隆生成法显示,3A5-Andi具有比Andi更强的细胞毒性,二者的IC50分别为2.8 mg/L和5.1 mg/L(P<0.01).24 mg/kg和50 mg/kg3A5-Andi ip对小鼠移植性腹水型H22肝癌的生命延长率(LPR)分别为133%和167%(P<0.05);而12mg/kg和24mg/kgAndi的LPR分别为112%和138%(P<0.05).24 mg/kg 3A5-Andi和12 mg/kg Andi iv对裸鼠移植性人肝癌BEL-7402细胞瘤的瘤重抑制率分别为63.5%和52.2%(P>0.05).24 mg/kg 3A5-Andi和12 mg/kg Andipt对BEL-7402人肝癌的抑制率分别为75.4%和61.0%(P>0.05).结论:3A5-Andi偶联物具有一定的肿瘤导向治疗作用;3A5-Andi与Andi比较,3A5-Andi对裸鼠移植人肝癌BEL-7402具有较强的治疗作用;pt方式3A5-Andi比iv疗效更好.
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参臼胶囊诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡
目的:研究"参臼胶囊"(SJ)诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用.方法:采用HE染色、透射电镜观察、原位末端标记技术(TUNEL)等方法,观察SJ作用于SMMC-7721细胞后细胞形态的改变.结果:HE染色及透射电镜分别从微观、超微观水平观测肿瘤细胞经SJ作用后的形态学变化:细胞变圆、缩小,折光性增强,细胞破碎,经HE染色后,细胞核呈兰黑色,胞质呈淡红色,细胞出现凋亡改变,单个散在分布,表现为核染色质致密浓缩,核碎裂或核染色质断裂,形成大小不等的凋亡小体,证实10 μg/mL SJ作用SMMC-7721 48 h后细胞出现典型的凋亡征象;TUNEL法检测到发生在各期的凋亡细胞.结论:SJ可诱导SMMC-7721细胞凋亡,可望作为一种新的细胞凋亡诱导剂用于肝癌的治疗.
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人鼠嵌合Fab抗体通用表达载体的构建和抗人肝癌相关抗原HAb18G嵌合Fab抗体的表达
目的:构建一个在大肠杆菌中表达人鼠嵌合Fab抗体的通用载体,并用于抗人肝癌相关抗原HAb18G人鼠嵌合Fab抗体的表达.方法:利用特异引物PCR扩增人IgG3的CHl和Ck基因,分别克隆到表达载体pComb3中,从而构建成人-鼠嵌合Fab抗体的通用表达载体pComb3C.然后将扩增的mAbHAbl8的VL和VH基因分别组装到通用表达载体中,酶切去除gⅢ片段后,连接成为HAb18嵌合Fab抗体的分泌型表达载体pComb3C/cFab.转化大肠杆菌后诱导其表达,通过ELISA检测产物的表达和定位.后,利用亲合层析纯化表达产物,进行SDS-PAGE电泳和Western-blot检测,同时采用ELISA和免疫荧光法检测表达产物的亲和力和特异性.结果:测序及酶切鉴定表明,人IgG3的CHi和Ck基因正确插入到pComb3中,大小分别为324bp和333 bp,同时mAb HAb18的嵌合Fab基因也分别获得正确组装和表达.表达产物的分子质量约为45 ku,主要位于周质腔中.另外,ELISA和免疫荧光检测证实,表达产物含有人的抗体片段,并具有与相应抗原特异结合的活性,亲和力约为亲本抗体的10%.结论:成功构建了人鼠嵌合Fab抗体的通用表达载体并制备了抗人肝癌小分子嵌合Fab抗体,为其进一步在肝癌诊断与治疗中的应用奠定了基础.
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肿瘤转移抑制基因KAI1对MHCC97-H肝癌细胞粘弹性的影响
目的:探讨肿瘤转移抑制基因KAI1对高转移潜能肝癌细胞MHCC97-H粘弹性的影响.方法:采用微管吸吮技术研究我们前已转染人类KAIl全长正或反义结构基因的人肝癌MHCC97-H细胞粘弹特性.结果:MHCC97-H肝癌细胞的粘弹性系数K1,K2,μ在转染KAI1正义基因后明显增加(P=0.007),在转染KAI1反义基因后明显降低(P=0.000),而转染空载体后则无明显变化(P=0.444).结论:KAI1基因对肝癌细胞的粘弹性有明显影响,这为肝癌侵袭和转移机制的研究提供了重要线索.
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裸鼠肝内种植人肝癌组织的肿瘤特征
目的:观察裸鼠肝内种植人肝癌组织能否再现肿瘤特征,为在活体内研究肝癌的生物学特性,指导临床个体化治疗提供一种研究方式.方法:用组织学完整的新鲜人肝癌组织种植于裸鼠肝脏,观察种植瘤的存活率、生长曲线、组织细胞病理特征、转移情况以及肝癌的其他生物学特征,并与皮下、皮下-肝原位种植瘤模型比较.结果:来源于l例患者肝癌组织的第一代种植瘤存活率100%,自发性肝内转移75.0%,肺转移37.5%,骨转移37.5%;并保持分泌AFP的特性;流式细胞仪分析DI值为1.63.组织细胞病理、器官转移特征以及其他生物学特性与原肝癌相似.结论人肝癌组织裸鼠原位种植瘤的生物学特征与肝癌患者基本相似,基本模拟了人肝癌的自然过程,是目前体内研究人肝癌生物学特征、筛选有针对性敏感化疗药的较理想方法.
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鸡腿蘑多糖对肿瘤生长的抑制作用
目的:研究鸡腿蘑多糖(CCP)对肝癌细胞体外增生的抑制作用和对小鼠Slso腹水瘤与实体瘤的抑制作用.方法:人肝癌SMMC-7721细胞与CCP共培养后,MTF比色分析法检测活细胞数;显微镜直接计数法测定CCP对小鼠S180腹水瘤细胞有丝分裂指数的影响;腹腔注射CCP,用ANAE法测定CCP对T淋巴细胞增生的作用;观察不同浓度的CCP对肝癌SMMC-7721细胞及小鼠S180腹水瘤、实体瘤生长的影响.结果:CCP对人肝癌SMMC-7721细胞的体外增生有一定抑制作用,在50-200mg@L-1范围中作用与浓度呈正相关(r=0.8,P<0.01);显著抑制小鼠S180实体瘤和腹水瘤的生长(P<0.05),治疗组50mg@kg-1的CCP对小鼠移植性实体瘤抑瘤率达59%;能明显降低腹水瘤有丝分裂指数(P<0.05),50mg@kg-1的CCP可使小鼠S180水瘤有丝分裂指数从3.4%降低到1.5%;50mg@kg-1的CCP使T淋巴细胞数量增长35.38%(P<0.05),通过上调T细胞数量进一步调节细胞免疫,增强机体对肿瘤的免疫能力.结论:鸡腿蘑多糖(CCP)能抑制肿瘤的生长,具有预防和治疗癌症的潜在价值.
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树突状细胞体内外对肝癌细胞的抑制作用
目的:研究树突状细胞对肝癌等肿瘤细胞的直接作用.方法:用rhGM-CSF和rhIL-4从健康人外周血诱导树突状细胞,用ELISA和MTT法分别检测DC培养上清液中IL-12和TNF水平,用MTT法检测DC对肝癌细胞SMMC-7 721、QGY-7703、HEPG-2、Alexander,胃癌细胞SGC-7901,慢性髓原性白血病细胞K562、Burkitt's淋巴瘤细胞Raji和正常人二倍体细胞的抑制作用,同时用流式细胞术检测DC表面FasL的表达,后用DC进行人肝癌裸鼠皮下抑制瘤的抑制试验.结果:诱导7 d的DC对4种肝癌细胞和胃癌细胞均有不同程度抑制作用,随着效靶比的增加,DC对肝癌细胞和胃癌细胞的抑制作用逐渐增加;DC预防人肝癌裸鼠皮下移植瘤,其抑制率为97%.结论:DC进入机体后也可以非特异性抑制方式发挥抑癌作用,本研究丰富和拓展了肝癌DC疫苗的内容,为今后肝癌DC疫苗的研究奠定了基础.
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肝癌DC疫苗活化的CTL对人肝癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用
目的:本研究探讨肝癌DC疫苗活化的CTL对人肝癌裸鼠皮下抑制瘤的抑制作用.方法:将负载肝癌相关抗原DC经BCG HSP7 0活化后制成肝癌DC疫苗,用此肝癌DC疫苗诱导的肝癌特异性淋巴细胞预防和治疗人肝癌裸鼠皮下移植瘤,同时观察DC对人肝癌裸鼠皮下移植瘤的直接预防作用和冷冻复苏后肝癌特异性淋巴细胞对人肝癌裸鼠皮下移植瘤的预防和治疗作用.结果:DC对肝癌细胞的抑制率为97%,用冷冻复苏后的CTL预防人肝癌裸鼠皮下移植瘤,对肝癌细胞的平均抑制率为96%;冷冻复苏后的CTL治疗人肝癌裸鼠皮下移植瘤,对肝癌细胞的抑制率为98%.结论;本研究结果为肝癌DC疫苗的进一步深入研究及今后的临床应用奠定良好的基础.
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老年人肝癌动脉化疗栓塞术并发症125例分析
回顾性分析1992年2月至1998年4月125例老年肝癌患者行肝动脉化疗栓塞术的副反应、并发症及其处理方法.
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胃肠多肽对人肝癌细胞生长的调控作用
近年的研究表明,部分胃肠多肽具有抗肿瘤的效应,由于其不具有细胞毒性,可提高患者带瘤生存的时间和生活质量,并已在原发性肝细胞肝癌 (HCC)细胞上发现多种胃肠多肽受体的表达.由于实验条件、实验对象不同,目前并不清楚哪些胃肠多肽可影响HCC细胞的生长.尽管少量临床研究应用生长抑素(SST)类似物奥曲肽延长了晚期肝癌患者的生存时间,但尚不明确奥曲肽是否直接抑制了HCC细胞的生长.我们通过细胞体外培养,观察7种胃肠多肽对人HCC细胞株SMMC-7721 增殖的影响,以寻求治疗肝癌的新途径.
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新城疫病毒对人肝癌TIL的作用
我们曾将NDV注入晚期肝癌病人肿瘤组织,发现肝癌缩小,血液中淋巴细胞转化率和E玫瑰花结形成率均升高[1].本文旨在证实NDV对人肝癌TIL的作用.
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人肝癌组织GRP、GRPR的表达及临床意义
胃泌素释放肽(gastrin-releasing peptide,GRP)是与蛙皮素同源的小的调节肽,GRP和GRP受体(gastrin-releasing peptide receptor,GRPR)在较大范围的人类肿瘤高度表达,GRP作为有丝分裂因子促进肿瘤的进展.我们利用人肝癌组织标本,通过免疫组化检测肝癌组织中GRP、GRPR的表达,分析表达与肝癌临床病理指标的关系.
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奥曲肽抑制体外培养人肝癌细胞生长的实验研究
我们通过观察奥曲肽对体外培养的7402人肝癌细胞株生长的影响,探讨生长抑素抑制肝癌细胞生长的机理.
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甲磺酸加贝脂抑制人肝癌HepG2细胞增殖及相关机制
甲磺酸加贝脂(gabexate mesilate,GM)是一种人工合成的丝氨酸蛋白酶抑制剂,近年来有文献报道将GM用于直肠癌、胰腺癌等肿瘤治疗的探索性研究,初步显示GM可能是一种新型的基质金属蛋白酶抑制剂[1-2].我们探索GM在体外对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响,探讨其可能的作用机制.
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水飞蓟宾对荷人肝癌BALB/c鼠NK细胞的免疫活性的调节作用
水飞薊宾是菊类植物水飞薊的提取物.近来,体外研究发现水飞薊宾可以直接抑制肝癌细胞株生长[1].我们观察水飞薊宾对荷人肝癌BALB/c鼠自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)的Fas配体(Fas ligand,FasL)表达及NK细胞活性的影响,探讨水飞薊宾对于肝细胞癌宿主细胞免疫的影响.
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槐耳清膏联合氟尿嘧啶抑制肝癌生长转移的实验研究
槐耳清膏的主要活性成分是多糖蛋白[1](polysaccharide of trametes robiniophila murr,PS-T),能诱导人直肠癌细胞株(HR8348细胞)发生凋亡[2],对血管内皮细胞体外构建新生血管有抑制作用[3].但槐耳清膏对肝癌在体内的生长和转移的干预作用尚无报道.本研究利用裸鼠人肝癌转移模型LCI-D20[4]进行了抑制肿瘤生长和转移的动物实验,现报道如下.
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抗人肝癌免疫毫微粒的制备及体外免疫学性质的鉴定
目的:研究抗人肝癌免疫毫微粒的制备以及对靶细胞的杀伤作用。方法使用异型双工能SPDP对人肝癌以及载阿霉素(ADR)和人血清蛋白微粒进行偶联,通过实验对其的免疫特性进行测试。检测的方法使用MTT法,这种方法的检测对免疫毫微粒是否能够对体外具备杀伤的作用十分有效。检测后在人肝癌老鼠模型上使用HAb18-HSA(ADM)-NS、HSA(ADM)-NS 和ADM,来测试其对肝癌的抑制情况。结果 HAb18抗体可以偶联到毫微粒上,对体外杀伤的细胞值为45.5μg/mL,与ADM的366.1μg/mL比较下,明显了降低。免疫毫微粒能够和靶细胞结合并且对靶细胞具有杀伤和选择功能。结论偶联的方法适用制备肝癌免疫毫微粒,并且免疫毫微粒在对抗肝癌治疗上有着明显的效果,值得推广使用。
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人肝癌组织中p16基因及p16蛋白表达缺失的研究
抑癌基因的缺失和变异在肿瘤的发生和发展中起着十分重要的作用.p16基因,又称MTS1(mu ltiple tumor suppresor 1)或CDK4I(cyclin dependent kinase 4 inhibitor),位于人染色体9p21,编码Mr16 000蛋白即p16蛋白.现已证实,p16基因的变异及p16蛋白表达的缺失涉及许多肿瘤的发生和发展[1,2].本研究用PCR法及免疫化学技术检测人肝癌和肝硬化组织中p16基因缺失和p16蛋白的表达情况,现报告如下.
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冷沉淀治疗肝癌术后创面广泛渗血4例
国人肝癌85%合并肝硬化,所以肝功能较差,在行肝癌切除手术后,极易出现凝血功能障碍 ,导致肝脏创面广泛渗血.我们收治4例病人,因术后肝脏创面广泛渗血险致病人死亡,在及时应用冷沉淀后,使病人得以转危为安.