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肿瘤的联合基因治疗
1 不同目的基因之间的联合应用1.1自杀基因与免疫基因之间的联合应用将HSV-tk基因与能增强抗瘤免疫力的免疫基因联合应用可提高疗效.Chen等于结肠癌肝转移模型上,直接瘤体内注射含mIL-2基因和HSV-tk基因和HSV-tk基因的重组腺病毒后发现,单用tk基因或与mIL-2基因联合均有明显的肿瘤坏死和消退.
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三氧化二砷抗肿瘤血管形成研究
目的:探讨三氧化二砷(As2O3)注射液抗肿瘤血管形成的作用及其相关机制.方法:采用MTT比色法、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管形成实验和免疫组化等方法观察As2O3对内皮细胞株ECV304增生、CAM血管形成以及对裸鼠肝癌移植瘤LCI-D20表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响.结果:As2O3有显著抑制内皮细胞增生作用;能抑制CAM血管形成,其机制与损伤形成血管的原始间充质细胞、破坏血管形成中的内皮细胞的结构和功能有关;As2O3并能降低裸鼠人肝癌转移模型肝移植瘤VEGF的表达.结论:As2O3注射液有明显的抗肿瘤血管形成作用,其机制可能与破坏内皮细胞结构和功能、抑制内皮细胞增生以及抑制肿瘤组织表达VEGF有关.
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传统化疗加用血管抑素或内皮抑素可加强肝转移模型的抗肿瘤效应
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人骨肉瘤原位移植模型的建立及生物学特征
目的用人骨肉瘤细胞系HOS-98建立人骨肉瘤裸鼠胫骨原位移植模型,以探讨宿主器官微环境对人骨肉瘤细胞侵袭及转移等生物学行为的影响.方法将人骨肉瘤细胞系HOS-98接种于裸鼠皮下,形成移植瘤,用传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植.分别于移植后4周和8周处死小鼠,进行病理形态学检查,并对两种方法在成瘤率、生长方式及侵袭、转移等生物学行为比较.结果两种移植方式在成瘤率及形态学上无明显不同,胫骨原位移植的潜伏期较短,并且生长快于皮下移植方式.皮下移植瘤呈局限性膨胀生长,有不完整的纤维包膜,瘤内类骨基质较少见,未见肺转移,观察8周时无明显消瘦;而胫骨原位移植瘤侵袭周围组织,可见发生肺转移,8周明显消瘦.原位移植的裸鼠血清ALP水平高于皮下移植者.原位移植的X线检查有明显的类似于人的骨性反应.结论用人骨肿瘤细胞系HOS-98皮下接种的移植瘤作为移植材料是建立肿瘤异位移植的可行途径,裸鼠胫骨微环境较皮下组织更适合于人骨肉瘤的侵袭及转移表达,裸鼠胫骨原位移植模型的恶性生物学行为更接近临床骨肉瘤患者的体内侵袭及转移实际,该原位移植模型为今后的实验研究提供了更加接近患者实际的实验模型.
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人肝门部胆管癌转移模型的建立及生物学特性研究
肝门部胆管癌根治性切除率低,术后易发生转移.为进一步了解肝门部胆管癌转移的生物学特性,我们利用肝门部胆管癌原发灶建立的细胞系,建立肝门部胆管癌的转移模型.
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经门静脉注射131I标记抗癌胚抗原单克隆抗体预防人结肠腺癌肝转移的实验研究
我们进行了经门静脉注射131I标记抗癌胚抗原(131I-CEA)单克隆抗体预防人结肠腺癌肝转移的实验研究,报告如下.材料与方法1.人源性结肠癌裸鼠肝转移模型:4~6周龄的BALB/C nu/nu裸鼠(第三军医大学实验动物所提供),雌雄兼用,体重17~25g,在无致病菌(SPF)条件中饲养.按左国华和葛海燕[1]方法制作结肠癌肝转移模型.
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槐耳清膏联合氟尿嘧啶抑制肝癌生长转移的实验研究
槐耳清膏的主要活性成分是多糖蛋白[1](polysaccharide of trametes robiniophila murr,PS-T),能诱导人直肠癌细胞株(HR8348细胞)发生凋亡[2],对血管内皮细胞体外构建新生血管有抑制作用[3].但槐耳清膏对肝癌在体内的生长和转移的干预作用尚无报道.本研究利用裸鼠人肝癌转移模型LCI-D20[4]进行了抑制肿瘤生长和转移的动物实验,现报道如下.
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卵巢癌原位移植-转移动物模型的建立
卵巢癌具有早期可发生盆腔、腹腔内种植转移或淋巴结转移的特点,不仅是病人死亡的主要原因,也是临床治疗的难题,卵巢癌转移动物模型将是研究卵巢癌转移的生物学行为和进行实验治疗的重要工具.常用的裸鼠皮下移植瘤模型和腹水瘤模型因与人卵巢癌自然生物学过程存在差距,在实际应用中受到限制.近年,人们发现如能将人肿瘤组织移植到受体动物的对应组织或器官(即原位移植),从而获得与人体内实际情况相似的微环境,不仅移植成功率高,而且移植瘤易发生类似病人的转移,且转移率高 [1].本实验即采用一株具有高转移特性的卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞株HO-8910PM,利用原位转移技术建立了裸鼠卵巢癌转移模型,现报道如下.
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人肝癌转移模型体系的建立
原发性肝癌(以下简称肝癌)的死亡率在全世界所有癌症中占第三位[1],是我国第二位癌症死亡原因.经过几十年的努力,肝癌临床和基础研究取得了许多进展,手术切除是肝癌获得长期生存的主要手段,在某些临床中心,肝癌根治性切除后5年生存率可达到40%以上(我所治疗的肝癌病人的5年生存率在小肝癌切除术者中约为60%,大肝癌切除术者约为30%).但术后5年复发率高达60%以上(小肝癌也达40%~50%)[2].转移复发已成为进一步延长肝癌病人生存期、提高远期疗效的瓶颈问题,也是终攻克肝癌的关键.
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大鼠乳腺癌骨转移模型的构建
乳腺癌转移到骨为常见,骨转移一旦发生,便很难逆转,患者的5年生存率由95% 降至20%.骨转移瘤常引起痛觉过敏、顽固性疼痛、病理骨折和神经压迫等并发症,严重影响患者的生存质量.因此,乳腺癌骨转移的防治已成为当前恶性肿瘤治疗的一个重点.
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裸鼠人异位移植胃癌肝转移和腹膜转移模型的实验研究
目的:建立稳定的人裸鼠异位移植胃癌肝转移和腹膜转移模型。方法采用异位移植技术,将MKN-45和TMK-1胃癌细胞接种于裸鼠脾脏被膜和腹腔内,建立肝转移模型及腹膜转移模型。制模3周或6周分别观察异位移植转移模型的成瘤率、侵袭与转移程度、组织形态学特征。结果 MKN-45和TMK-1胃癌细胞建立的异位移植模型成瘤率皆为100%(40/40)。异位移植胃癌肝转移模型中,发现区域淋巴结肿大或转移(2/20;10%),血性腹水(3/20;15%);异位移植胃癌腹膜转移模型中,发现血性腹水(4/20;20%),肺转移(5/20;25%);MKN-45和TMK-1胃癌细胞经脾肝转移制模3周组肝转移评分明显低于制模6周组,差异有显著性意义(均为P<0.01);MKN-45和TMK-1胃癌细胞注入腹腔制模3周组腹膜转移结节数明显少于制模6周组(均为P<0.01);两组模型的不同种类胃癌细胞株之间的局部和远处转移率无明显相关性(r=0.251,P>0.05)。组织病理学观察结果证实转移癌细胞形态特征与原发胃癌细胞相似。结论裸鼠胃癌异位移植模型为研究胃癌肝转移和腹膜转移的生物学机制和抗转移治疗提供了理想的实验动物模型。
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阿妥伐他汀对结肠癌裸鼠肝转移模型cyr61蛋白表达的影响
大肠癌患者肝转移发生率为50%[1].他汀类药物具有减少心血管急症发生率及抗肿瘤双重作用,我们前期进行了阿妥伐他汀对结肠癌细胞增殖抑制作用的体外研究[2],本实验建立人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型,探讨阿妥伐他汀对结肠癌裸鼠肝转移癌生长的影响,为临床应用提供实验基础和理论依据.
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人胃癌完整组织块裸鼠原位种植转移模型的建立
目的:建立人胃癌完整组织块裸鼠原位种植高转移模型.方法:人胃腺癌SGC-7901细胞株,裸鼠皮下注射(2×106/L细胞悬液),成瘤后反复传代形成实体瘤,以第6代瘤源为组织材料,打开腹腔,通过"生物胶粘贴法"用OB医用生物胶将瘤块粘贴在裸鼠胃壁胃大弯血管分布稠密处;待荷瘤鼠出现衰竭体征濒临死亡时处死解剖检查.结果:术后3~4周左右,上腹可触及0.1~0.4 cm结节,5~6周时逐渐增大.8~10周时肿块明显增大,局部包块透壁可见,直径约1.0~1.9 cm.此后动物极度消瘦,部分动物腹水形成,活动受限,逐渐衰竭,濒临死亡.解剖见原位肿瘤成瘤率100%,病理学检查胃周淋巴结转移率100%,肝脏转移率72.7%,部分动物腹膜、胰腺转移.结论:人胃癌完整组织块通过"生物胶粘贴法"原位种植于裸鼠胃壁,能较好地重现胃癌的临床转移过程,为人类胃癌生长、转移机制及抗转移治疗方面的研究提供了一种较理想的动物模型.
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高转移人肝癌细胞系转移相关因子的表达活性(摘要)
目的观察分析新建立的人肝癌转移细胞系(MHCC97)转移相关因子mRNA和蛋白表达水平,以探讨其转移的可能机制。方法利用裸鼠人肝癌转移模型(LCI-D20)的瘤组织,通过体外培养获得首株高转移人肝癌细胞系,除对其基本生物学特性进行观察外,还采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术(ABC法)观察转移相关因子在MHCC97细胞及其裸鼠肝内移植瘤和肺转移灶中的表达水平。结果该细胞异种动物接种成瘤率和原位接种(肝接种)肺转移率为100%;MHCC97细胞的整合蛋白α5、β1亚基、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和转移抑制基因nm23-HI mRNA的RT-PCR扩增产物均呈阳性;乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和X抗原(HBxAg)聚合酶链反应(PCR)扩增产物显示阳性;肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met原癌基因、uPAR免疫组织化学染色显示MHCC97细胞的肝内移植瘤和肺内转移灶中瘤细胞呈强阳性反应而α5、β1亚基仅在肝内移植瘤部分癌细胞中表达,肺转移灶癌细胞似无α5、β1表达;移植瘤和转移灶中均未见有E-钙粘素(E-cadherin)表达。结论该细胞系具有高表达转移相关因子uPAR和c-Met,但不表达转移抑制因子E-cadherin。其基因中可能有乙型肝炎病毒DNA的整合表达。[全文刊登于中华医学杂志 1999,79(6):479]
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生长激素联合早期腹腔化疗对小鼠结肠腺癌肝转移的影响
研究重组人生长激素(rhGH)联合早期腹腔化疗对小鼠结肠腺癌肝转移的影响,了解rhGH对化疗效果有无促进作用.取BALB/c小鼠42只随机分为化疗组、联合组、对照组,采用小鼠结肠腺癌细胞(CT26)经脾接种建立肝转移模型后,化疗组小鼠每天腹膜腔注射5-FU 20 mg/kg,联合组小鼠每天皮下注射rhGH 2 U/kg,同时腹膜腔注射5-FU 20 mg/kg,对照组用等渗盐水分别皮下及腹膜腔注射,均7天.
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中文文摘
1.量子点荧光探针检测人舌鳞状细胞癌荷瘤裸鼠模型早期下颌下淋巴结转移的研究/李艳芬…//华西口腔医学杂志.-2014,32(3).-273-277
传代培养人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞,接种于18只裸鼠舌体内(不过中线),建立人舌癌荷瘤裸鼠下颌下淋巴结转移模型。接种6周后,处死裸鼠,解剖下颌下淋巴结,将同一淋巴结分为两份。一份作石蜡包埋半连续切片,行 HE染色和 IHC 检测;另一份即刻液氮冷冻,制作冰冻切片行QDs605-CK(AE1/AE3)荧光探针检测。分别计算3种方法检测出的淋巴结转移率和微转移率。结果:量子点标记的免疫荧光染色检测出裸鼠下颌下淋巴结转移率为66.7%,其中微转移率为38.9%;IHC 染色检测的淋巴结转移率为61.1%,其中微转移率为33.3%;HE 染色检测的淋巴结转移率为27.8%。经统计学分析,3种方法的差异有统计学意义(P <0.05),量子点标记的免疫荧光染色和 IHC 检测都优于 HE 染色,但是量子点标记的免疫荧光染色和 IHC 染色间的差异无统计学意义(P >0.05)。结论:量子点标记的QDs605-CK(AE1/AE3)免疫荧光探针能准确定位于下颌下淋巴结转移的肿瘤细胞的细胞质内,发出红色荧光,其特异性强,分辨率高,背景清晰,能够用于淋巴结转移灶及微转移灶的检测。 -
人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型的建立和改进
目的:建立人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型.方法:用人胃癌细胞SGC-7901悬液接种于裸鼠皮下,形成稳定传代的皮下移植瘤.将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆肌层,观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化等生物学特性.结果:肿瘤组织块保留了人胃腺癌的组织学特点,人胃癌裸鼠原位移植模型成瘤率为100%(20/20),肝脏转移率为45%(9/20).结论:人胃癌裸鼠原位移植瘤模型的生物学行学与人胃癌自然生长和转移过程相似,为研究人胃癌转移机制提供了理想的模型.
关键词: 胃肿瘤 肿瘤细胞SGC-7901株 裸小鼠 原位移植 转移模型 -
125I标记CD44v5胃癌单抗的实验研究
本实验采用125I直接标记CD44v5单抗,对裸鼠的胃癌转移模型进行显像研究及125I-CD44v5单抗裸鼠体内脏器的分布研究,报道如下。材料和方法 一、试剂及仪器:胃低分化腺癌细胞株系GC-803细胞株,上海细胞所提供;8周龄的 BALB/C裸鼠,体重20g左右,上海肿瘤所提供;无载体Na125I,放射性活度14.6GBq/ml,中国核动力研究设计院产品;Iodogen,美国Pie rce公司产品;CD44v5单抗,北京中山生物有限公司提供;放射性活度测量仪,NE-1612英国核仪器公司产品;SPECT为德国西门子公司的EL-370 0型。 二、CD44v5单抗的125I标记及标记化合物的纯化:125 I标记CD44v5单抗采用Iodogen法[1],用三氯醋酸沉淀法测定放射化学纯度及检查125I-CD44v5单抗的体外稳定性。 三、裸鼠胃癌转移模型的建立:将胃低分化腺癌细胞系GC-803细胞株,置于含10%胎牛血清RPMI-1640培养液中,在5%CO2、37℃培养箱中培养传代,取第三代细胞,于每只裸鼠颈部皮下注射2×106个肿瘤细胞,共注射10只裸鼠,6周后观察有8只颈部皮下出现平均直径0.6cm、体积约0.3cm3大小的肿块,裸鼠一般状况较好。于注射125I-CD44v5单抗前三天开始口服0.3%的碘化钾溶液以封闭甲状腺。
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人胃肠道肿瘤肝转移动物模型研究进展
胃肠道肿瘤的发病率及病死率均位于前列,近期统计资料表明,我国死亡率高的恶性肿瘤在男性和女性均为胃癌,结直肠癌也位居第五[1].临床研究表明,胃肠道癌肿向肝脏等处广泛转移是其致死的主要原因之一,因而对胃癌及大肠癌转移机制及其防治对策的研究是当前的重要任务.人类肿瘤动物(主要是先天性无胸腺小鼠athymicmice,即裸鼠)移植模型是肿瘤学研究的重要方法,转移模型的研究更是目前的热点之一[2].本文就胃肠道肿瘤肝转移模型的研究进展综述如下.
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前列腺癌转移动物模型特性的比较学分析
前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见肿瘤,肿瘤转移是前列腺癌常见的并发症和致死因素.研究前列腺癌转移具有重要的临床意义,合适的前列腺癌转移模型是研究前列腺癌发生、进展、转移及药物研究的重要工具.该文介绍了目前常见的人前列腺癌转移模型,并从转移模型的操作、评估、应用等方面比较各种模型的特点,有利于前列腺癌的模型研究和选择.