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  • 原位种植肝癌新生血管的检测及血管内皮细胞生长因子mRMA的表达

    作者:彭林;区金锐;王卫东;孙建;简志祥

    目的:观察大鼠原位种植肝癌模型中的新生血管的生长情况,研究肿瘤血管生长因子基因的表达和肝癌新生血管之间的关系.方法:采用Walker256癌肉瘤接种40只Wistar大鼠制作原位种植肝癌模型,用微血管计数以及免疫组织化学染色法检测平滑肌激动蛋白(α-SMA)的表达来标志肿瘤新生血管.血管内皮细胞生长因子基因的检测采用原位杂交法进行.结果:Walker256癌肉瘤接种后1、2、3 wk肿瘤微血管密度分别为(15±4.3)/Hp、(17±3.6)/HP、(45±7.8)/HP.大血管及正常微血管(毛细血管除外)周围α-SMA呈强阳性染色.在肝癌组织中可见到一些形态不规则的微血管呈弱阳性或阴性染色是肿瘤诱导的新生血管,肝癌组织有大量新生血管形成,新生血管的数量与微血管密度呈正相关,Walkef256癌肉瘤接种后3 wk较前2wk有显著性增加.正常肝脏组织仅有少量VEGF mRNA表达,肝癌组织接种后1wk即有多种细胞表达VEGF.新生血管较密集的肿瘤组织VEGF的表达较多.VEGF的表达与微血管密度和肿瘤组织中新生血管的数量呈正相关.结论:原位接种肝癌中有大量新生血管形成,平滑肌激动蛋白(α-SMA)的表达可以用来标记肿瘤新生血管.肝癌组织中血管内皮细胞生长因子的表达增加可能和肿瘤新生血管的形成有一定的关系.

  • 人胆囊癌裸鼠原位移植瘤模型的建立及初步观察

    作者:常新忠;王占民;李志伟;孙建芝;马道新;赵志伦;刘博

    胆囊癌恶性程度较高,临床预后较差.为了寻找一种能更接近人体内胆囊癌特性的动物模型,我们通过瘤组织块原位接种建立了裸小鼠的胆囊癌原位移植瘤模型,现报告如下.

  • 利用PC-3M-1E8细胞亚系建立人前列腺癌淋巴道转移模型

    作者:储剑虹;吴建辉;朱焰;蒋秀蓉;刘桂明;何桂林;孙祖越

    目的建立裸鼠人前列腺癌淋巴道转移模型以便用于转移机制和控制方法的研究.方法分别采用原位接种及皮下接种两种方法将高转移性前列腺癌细胞亚系PC-3M-1E8接种于裸小鼠体内,40 d后检测其成瘤情况及局部淋巴结自发性转移情况.结果原位接种法的裸小鼠成瘤率及淋巴结转移率均达12/12,皮下接种法的裸小鼠成瘤率也达12/12,但未检测到任何淋巴结转移.结论对该细胞株采用原位接种法建立裸鼠人前列腺癌淋巴结转移模型获得成功,为前列腺癌转移机制的研究及试验性药物治疗提供了模型.

  • 乳腺癌微血管与肿瘤侵袭过程关系的实验研究

    作者:孙慧;战忠利;宁连胜;李雯;吴洁;王庆生

    我们通过对TA2小鼠原位接种MA737乳腺癌的方法,动态观察不同时期原位微环境与肿瘤侵袭的变化规律.采用免疫组化S-P法定性定位分析微环境中诱发因子VEGF、第八因子相关抗原与肿瘤增殖侵袭的相关性.从而揭示肿瘤原位微环境在乳腺癌生长起始阶段的作用.

  • 葡萄球菌肠毒素B对实验性原位接种胃癌抑瘤作用的研究

    作者:刘淼;金晓明;贺岩;李莹杰;黄元夕;王齐敏

    目的 建立胃癌的原位模型,研究葡萄球菌肠毒素B(SEB)对实验性原位接种胃癌的抑瘤作用.方法 采用人胃癌细胞株SCG-7901,27只裸鼠和SEB.将SCG-7901接种于裸鼠皮下,形成实体瘤.取出后分割成小块,再接种在裸鼠胃壁浆膜下.2周后行SEB治疗.观察原位移植瘤在模型组和治疗组的生长及侵袭转移的病理变化.结果 ①胃浆膜下原位接种肿瘤在2周后可达0.8cm3 .②SEB可大面积杀伤肿瘤细胞,但同时对周边非癌组织亦有破坏,并可导致肿瘤细胞的脱落、种植.结论 成功建立了胃癌原位模型,可为研究胃癌的侵袭转移提供与人胃癌相近的微环境.SEB具有很强的杀伤肿瘤细胞的作用,无淋巴道和血道的转移;但对周边非癌组织也有一定的破坏,并由于肿瘤细胞的坏死、脱落,可导致肿瘤细胞的种植.

  • 不同细胞株建立人前列腺癌裸小鼠移植模型及转移特性比较

    作者:李志玲;刘向云;张晓芳;王蕾;谢淑武;孙宇;谢琛静;吴建辉;曹霖;孙祖越

    目的 比较人前列腺癌细胞DU145和CWR22Rv1(22Rv1)(下面简称22Rv1)分别在皮下和前列腺原位接种后的成瘤性和转移率.方法 采用原位接种及皮下接种两种方法将前列腺癌细胞DU145和22Rv1分别接种于裸小鼠体内,以裸鼠出现恶液质、处于濒死状态作为观察终点,颈椎脱臼法处死.尸解并观察荷瘤部位肿瘤的生长情况及局部淋巴结自发性转移情况,并取皮下肿瘤、原位肿瘤、肝、肺、肾、膀胱、盆腔淋巴结标本,甲醛固定、石蜡包埋和HE染色后显微镜下观察.结果 原位接种22Rv1组的裸小鼠成瘤率达到10/10,淋巴结转移率为9/10;原位接种DU145组的裸小鼠成瘤率达到10/10,而淋巴结转移率为1/10.两种细胞皮下接种法的裸小鼠成瘤率均达10/10,但未检测到任何淋巴结转移.结论 对这两种细胞株采用原位接种法建立裸鼠人前列腺癌原位模型获得成功,用22Rv1细胞建立的原位模型淋巴结转移率高于DU145组,为前列腺癌转移机制的研究及筛药提供了模型.

  • 高转移人肝癌细胞系转移相关因子的表达活性(摘要)

    作者:田健

    目的观察分析新建立的人肝癌转移细胞系(MHCC97)转移相关因子mRNA和蛋白表达水平,以探讨其转移的可能机制。方法利用裸鼠人肝癌转移模型(LCI-D20)的瘤组织,通过体外培养获得首株高转移人肝癌细胞系,除对其基本生物学特性进行观察外,还采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术(ABC法)观察转移相关因子在MHCC97细胞及其裸鼠肝内移植瘤和肺转移灶中的表达水平。结果该细胞异种动物接种成瘤率和原位接种(肝接种)肺转移率为100%;MHCC97细胞的整合蛋白α5、β1亚基、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和转移抑制基因nm23-HI mRNA的RT-PCR扩增产物均呈阳性;乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和X抗原(HBxAg)聚合酶链反应(PCR)扩增产物显示阳性;肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met原癌基因、uPAR免疫组织化学染色显示MHCC97细胞的肝内移植瘤和肺内转移灶中瘤细胞呈强阳性反应而α5、β1亚基仅在肝内移植瘤部分癌细胞中表达,肺转移灶癌细胞似无α5、β1表达;移植瘤和转移灶中均未见有E-钙粘素(E-cadherin)表达。结论该细胞系具有高表达转移相关因子uPAR和c-Met,但不表达转移抑制因子E-cadherin。其基因中可能有乙型肝炎病毒DNA的整合表达。[全文刊登于中华医学杂志 1999,79(6):479]

  • 大鼠肝癌细胞系N1不同途径造模及比较

    作者:罗霞;阮思蓓;郭庆喜;刘勇;唐红;唐晓琴;唐明希

    目的 观察大鼠肝癌细胞系N1经肝、脾原位接种后肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生与转移等情况,比较及筛选适宜的HCC N1发生及肺转移动物模型.方法 N1细胞进行体外培养.24只8周龄雌性BALB/cA裸鼠随机分为2组(12只/组)并分别进行N1的肝、脾原位接种,观察并比较两组间小鼠的存活率,肝、脾成瘤及肝、肺转移率等肿瘤生物及病理学特征.结果 N1细胞肝原位接种组肝成瘤率为100%,肿瘤呈结节状生长,与腹壁及周围组织有不同程度的粘连侵袭,肺及肺门淋巴结转移率分别为44%和22%,未见脾转移.N1细胞脾原位接种组脾成瘤率为64%,肝转移率为91%,肿瘤呈结节状生长,与腹壁及周围组织亦有不同程度的侵袭粘连,肺及肺门淋巴结转移率均为18%.结论 N1细胞肝、脾原位接种均易成瘤,是良好的HCC发生、发展及相关干预的动物模型,其中,肝原位接种鼠可能更适合于HCC发生与肺转移机制及药物干预等研究.

  • 具有相同遗传背景的人结肠癌细胞系生物学特性的鉴定

    作者:张艳飞;刘莉;丁彦青

    目的 对三种取自不同转移部位的结肠癌细胞系进行生物学特性的鉴定.方法 从体内成瘤性、原位移植后的自发性转移能力,以及体外生长、克隆形成率、粘附、运动、侵袭能力等方面,探讨具有相同遗传背景的SW480、SW620以及SW480/M5三种细胞系生物学特性的差异.结果 体内实验证明SW480具有多器官转移的潜能,SW620只具有淋巴结转移的能力,SW480/M5只具有肝脏转移的能力,SW480/M5的皮下瘤生长速度快,其次是SW620细胞;体外实验证明W48/M5和SW620的体外生长、克隆形成能力均强于SW480细胞,而两者对纤维黏连蛋白的粘附能力较SW480细胞弱,SW480/M5的运动及侵袭能力强于SW480及SW620细胞.结论 与SW480细胞相比,SW480/M5和SW620细胞具有一定的器官亲和力,三者的遗传背景一致,是研究结肠癌晚期演进的遗传改变的重要资源.

  • 3种方法构建BALB/c裸鼠BEL-7402人肝癌模型

    作者:王诺;姚嘉琪;王弋;梁秋玲;饶子亮;邝少松

    [目的]以3种不同方法构建BALB/c裸鼠BEL-7402人肝癌模型,并观察BALB/c裸鼠肿瘤生长情况.[方法]将51只BALB/c裸鼠分为A、B、C 3组,每组17只.A组动物皮下注射0.2 mL BEL-7402人肝癌细胞,B组动物于肝脏原位注射0.05 mL BEL-7402人肝癌细胞与Matrigel Matrix的混合物,C组动物于肝脏原位接种BEL-7402人肝癌细胞瘤块组织.从接种后第2周至第5周,每周测定裸鼠体质量,且每组随机取3只动物解剖取肿瘤测量其大小和质量.第5周后,观察记录各组剩余动物(每组5只)的一般状态和存活天数.采用苏木素—伊红(HE)染色观察肿瘤组织病理学变化.[结果]A、B、C 3组实验动物成瘤率均为100%.5周后,A、B、C 3组剩余动物存活天数分别为(90.8±10.2)、(75.6±14.0)、(67.4±11.1)d.解剖所取肿瘤呈结节状,组织病理学检查可见肿瘤细胞呈一定方向排列,细胞呈梭形、多边形,异型明显,可见核分裂.[结论]本实验所采用的3种不同方法均能成功建立BALB/c裸鼠BEL-7402人肝癌模型.

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