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小鼠内皮抑制素基因的克隆及生物学活性的初步分析
以中国昆明种小鼠组织的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增得到小鼠内皮抑制素(ES)cDNA,与文献报道的序列(L22545)相比,ES cDNA测序结果ctg在第278碱基处与文献报道(gtg)存在一个碱基差异,导致编码的氨基酸由文献报道的Val变为Leu.该ES cDNA已被GenBank接受,登录号为GenBank AF257775.将该ES cDNA重组到真核表达载体pSec Tag2/HygroB上,转染COS-7细胞后,用Western blotting法检测.结果表明48和72h的pSecTag2-ES转录COS-7上清有明显的ES表达条带,取48h转染上清作用于人脐静脉内皮细胞,3H掺入实验显示内皮细胞的增殖明显受到抑制.该结果初步表明,本实验克隆的ES cDNA有生物学活性.
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白细胞介素8基因多态性与河南省汉族人群胃癌关系的研究
全球约25%的癌症与慢性感染或炎症有关[1],后者也是导致胃癌发生的重要因素之一[2].在慢性炎症发展为胃癌的病变过程中,炎症细胞因子起到了很重要的作用[3].白细胞介素8(IL-8)主要由中性粒细胞产生,属于趋化因子超家族,是一种中性粒细胞趋化因子和活化因子[4],并具有促进有丝分裂、诱导新生血管形成以及促进细胞运动等重要生物活性,与肿瘤的发生、生长和肿瘤浸润及转移密切相关[5].编码IL-8的基因位于染色体4q13-q21,含有4个外显子、3个内含子和1个近侧启动区[6],其编码序列上存在单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,其中- 251 A/T( rs4073)位点和781C/T( rs2227306)位点与IL-8的转录水平有关[7-8].笔者采用1∶1配对病例-对照研究,探讨IL-8 -251A/T、781C/T位点多态性在河南省汉族人群胃癌发病中的作用,现将结果报道如下.
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虎杖大黄素对RA大鼠炎症和新生血管形成的影响
目的:通过足跖部注射牛Ⅱ型胶原和不完全氟氏佐剂乳化剂,建立类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的胶原诱导型关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型,用相应指标观察虎杖大黄素干预炎症和新生血管形成情况.方法:Wistar大鼠40只随机分为2组,正常组,模型组,模型组采用等量的牛Ⅱ型胶原和不完全氟氏佐剂乳化后在雄性Wistar大鼠足跖部皮内注射0.4 mL(含胶原400 μg),14 d后同样方法于足跖部皮内注射0.1 mL加强,致炎20 d成模后,再将模型组分为模型、虎杖大黄素与醋酸地塞米松组,每组10只,此时虎杖大黄素组0.4 g·L-1虎杖大黄素0.8 mg· kg-1ig,醋酸地塞米松组用0.75 g·L-1醋酸地塞米松7.5 mg· kg-1ig,两药各自连用20 d,并用足跖厚度,足爪X射线,足爪大体图片,膝关节滑膜HE染色,ELISA检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,免疫组化检测膝关节滑膜TNF-α及CD34表达,观察成模大鼠的2个靶点变化.结果:与正常组比较,模型组类风湿性关节炎大鼠足跖厚度明显增加(P<0.01),大鼠血清TNF-α含量明显升高(P<0.01);给药后,与模型组比较,虎杖大黄素与醋酸地塞米松组明显降低大鼠足跖厚度,血清TNF-α含量(P <0.05,P<0.01);X射线结果显示,模型组大鼠足跖部出现不连续的低密度影,即为溶骨现象,且有明显的软组织肿胀阴影,而正常组、虎杖大黄素组、醋酸地塞米松组未见有不连续的低密度影,即未见溶骨现象,亦未见软组织肿胀阴影;HE染色显示,模型组大鼠膝关节滑膜可见有大量的炎症细胞浸润和大量的血管翳,而正常组未见炎症细胞浸润和血管翳,虎杖大黄素组和醋酸地塞米松组只见少量炎症细胞浸润和少量的血管翳;免疫组化结果显示,模型组膝关节滑膜中的CD34及TNF-α的表达明显增高,虎杖大黄素组和醋酸地塞米松组膝关节滑膜中的CD34及TNF-α的表达明显降低.结论:虎杖大黄素可通过影响炎症和新生血管形成两个靶点干预RA.
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参七寿世丸治疗糖尿病合并视网膜新生血管病变18例
糖尿病性视网膜新生血管病变(PDR)是糖尿病视网膜病变随病程和视网膜缺血发展而出现的血管变化,其基本的病理变化是眼底视网膜动脉硬化、视网膜缺血、新生血管形成,与糖尿病并发冠状动脉硬化致冠心病的机理是相同的,因而我们采用该方案治疗PDR亦取得了较好的效果.我们自1997年6月~2000年6月,对糖尿病性视网膜新生血管病变36例随机分为治疗组和对照组治疗观察,现报告如下.
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中医辨证联合激光治疗视网膜静脉周围炎17例
视网膜静脉周围炎又称Eales病,好发于青年男性,本病主要累及视网膜周边部小血管,以血管旁白鞘、广泛周边部无灌注区、新生血管形成及反复的视网膜玻璃体出血为特点,病因不明.目前常规西药治疗不理想,山东施尔明眼科医院采用中医辨证结合激光的方法治疗视网膜静脉周围炎取得了较好的疗效,现报告如下.
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骨髓间充质干细胞移植治疗小型猪急性心肌梗死
冠心病发病牢呈逐年上升趋势,目前仍然有大量患者由于广泛的冠状动脉粥样硬化而无法施行传统的血运重建术.有文献报道骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,MSCs)移植后能分化为心肌细胞、内皮细胞、血管平滑肌细胞等;能促进新生血管形成,改善心肌重构和左室功能并具有减少心肌凋亡的作用[1].我们采用直接注射方式将干细胞移植入急性心肌梗死模型,饲养动物3个月后观察其存活及转化情况,心脏功能改善情况,为临床干细胞治疗缺血性心脏病提供参考.
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雌激素信号途径与血管内皮生长因子信号途径的交互作用介导乳腺癌耐药性
作为激素依赖性乳腺癌以及血管依赖性乳腺癌,雌激素及其受体和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在乳腺癌发生发展中起着重要作用.雌激素内分泌途径与VEGF信号转导途径间的相互作用、雌激素内分泌治疗对乳腺癌VEGF蛋白表达的调节、雌激素内分泌途径与VEGF蛋白介导乳腺癌耐药性的机制等都是基础和临床的重要课题.目前认为雌激素呈ERα依赖性地上调VEGF的表达,ER、EGFR、VEGF途径之间存在着交互作用,能激活下游的p38/MAPK、PI3K/Akt-mTOR、Ras/Raf-MEK等途径,使雌激素效应与新生血管形成在乳腺癌细胞中相互补充、相互依赖、相互加强,促使癌细胞的恶性度更高,导致耐药性的产生.本文就雌激素及其受体对乳腺癌细胞VEGF的调节进行综述,提出新型雌激素受体GPER1与VEGF的可能关系,并着重论述雌激素内分泌途径与VEGF途径在乳腺癌耐药性中的关系,后对内分泌治疗联合抗VEGF治疗进行展望.
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不同强度的激光诱导建立兔脉络膜新生血管模型
脉络膜新生血管形成(choroidal neovascularization,CNV)见于老年性黄斑变性、各种原因引起的眼底炎症、高度近视等多种眼科疾病,常见于黄斑部,可引起眼底出血、渗出,导致严重视力障碍甚至失明.
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光动力学疗法治疗老年性黄斑变性合并黄斑下脉络膜新生血管的疗效观察
背景与目的老年性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)是引起北美50岁以上人口视力丧失的主要原因,它明显降低了这些人的生活质量.在未来的25年50岁以上人口将是目前的两倍.预防和治疗老年性黄斑变性是我们急需研究的课题.老年性黄斑变性引起视力丧失是脉络膜新生血管形成的结果.过去使用光凝治疗脉络膜新生血管,但光凝会损害正常组织.黄斑下的脉络膜新生血管不能使用光凝治疗.近光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)应用于黄斑下脉络膜新生血管的治疗,本研究目的是评价利用维替泊芬光动力学治疗老年性黄斑变性合并黄斑下脉络膜新生血管的疗效.
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高压氧对脑出血后血管新生影响的研究进展
脑血管疾病是神经系统常见病和多发病,新的流行病学资料表明,我国的脑血管疾病在人群死因中高居第二位,仅次于恶性肿瘤,且在不少城市中已占首位.而脑出血是脑血管病中的危重类型,至今仍无特别有效的治疗方法,其以较高的发病率、致残率和病死率严重地威胁人类的健康.脑出血的预后受多种因素影响,其中在缺血半暗带诱导新生血管形成,及时恢复受累脑组织的再灌注和供氧,减少神经元凋亡和坏死,是影响脑出血预后的关键因素[1].
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多层螺旋CT灌注成像活体评价肝VX2移植瘤新生血管生成
目的 应用多层螺旋CT灌注技术研究兔肝VX2移植瘤新生血管生成.方法 选取10只正常新西兰大白兔肝脏,以及15只种有肝VX2移植瘤的兔肝脏行多层螺旋CT灌注扫描,对比肿瘤边缘区、非肿瘤区肝脏、正常肝脏的肝血流量(HBF)、血容积(HBV)、平均通过时间(MTT)、毛细血管表面通透性(PS)和肝动脉灌注指数(HAI)的变化规律.结果 肿瘤边缘区HBF、HBV、HAI、PS增高与非肿瘤区肝脏和正常肝脏相比有统计学差异(P<0.05).肿瘤边缘区MTT降低与非肿瘤区肝组织和正常肝脏相比有统计学差异(P<0.05).各灌注参数在非肿瘤区肝脏和正常肝脏中无显著差异(P>0.05).结论 多层螺旋CT灌注成像能活体评价肝VX2移植瘤新生血管生成,提供量化功能信息.
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甲状腺结节的MR灌注加权成像:与血管生成相对照
目的 研究甲状腺结节的MR PWI表现与血管生成表现相关关系,评价PWI鉴别结节良恶性的价值.方法 对62例甲状腺结节患者行PWI扫描.所有病例均得到时间一信号曲线(TIC)、大斜率(SS)、峰值强化(PE)和达峰时间(TTP).其中50例测量微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF),并与灌注参数进行相关性分析.结果 甲状腺结节的TIC可分为4种类型,恶性结节均表现为I型曲线,84.62%(44/52)的良性结节表现为Ⅱ型和Ⅲ型曲线;良恶性结节间各灌注参数值差异无统计学意义,三种良性病变间的SS值差异有统计学意义(P<0.05);良恶性结节间VEGF差异有统计学意义(P<0.01),而MVD差异无统计学意义;甲状腺结节的灌注参数SS与MVD、PE与MVD和VEGF呈线性正相关(r=0.49、0.49、0.55,P<0.05),TTP值与MVD和VEGF均无相关性.结论 MR PWI对甲状腺良恶性结节的鉴别诊断有一定的意义;SS和PE值能一定程度上反映结节的血管生成情况.
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PHLPP1与肿瘤的关系及研究进展
PHLPP1( Pleckstrin Homology Domain Leucine-rich Repeat Protein Phosphatases 1)由美国加州大学圣地亚哥分校医学院药理学系的科研人员在人体中首次发现[1]。 PHLPP1在细胞质、细胞核和细胞膜上均有表达。 PHLPP1在人体大多数组织中呈不同程度的表达,而在某些肿瘤组织中PHLPP1表达水平显著降低,伴随丝/苏氨酸蛋白激酶 B ( Serine/Threonine protein kinase B,AKT,又称PKB)的磷酸化水平明显升高。 PI3K/AKT信号转导通路在肿瘤细胞的增殖、存活和抵抗凋亡、新生血管形成以及细胞迁移运动中发挥重要作用。 PHLPP1通过使AKT的疏水基团在Ser473位点去磷酸化,实现对AKT及其下游激酶活性的负调控,抑制了PI3K/AKT信号转导系统,从而发挥抑癌作用[2]。本文就 PHLPP1如何在肿瘤中发挥作用及其作用机制进行综述。
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多种激光联合治疗糖尿病视网膜病变一例
患者男,65岁,因"左眼前黑影飘动1周"就诊,既往糖尿病史17年,白内障人工晶体植入术后1年.查体:视力:右:手动/30 cm,左眼:0.08 D.右眼晶体混浊,玻璃体混浊,眼底见广泛增殖膜形成,新生血管形成,网膜前出血,左眼角膜透明,前房深度正常,瞳孔圆,直径约3 mm,瞳孔缘可见白色增殖膜形成,人工晶体(IOL)在位,后囊膜混浊,下方玻璃体少许积血,眼底模糊见视盘界清色可,静脉迂曲扩张,四象限可见点状出血,少许硬渗.
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超声造影在评估肾肿瘤血管生成中的应用进展
1971年Folkman提出"肿瘤的生长和转移都依赖于新生血管形成"的概念.经过大量实验研究,国内外学者已对此达成共识,即肿瘤的新生血管不仅为肿瘤提供充足的营养,同时还不断地向宿主输出肿瘤细胞,导致恶性肿瘤的生长和转移.
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视网膜病(2)
视网膜静脉周围炎(retinal periphlebitis):视网膜静脉周围炎为慢性和复发性静脉炎为主的炎症,导致视网膜周边部静脉闭塞和视网膜前新生血管形成。本例为视网膜静脉周围炎的患者,表现为视力下降。眼底造像检查图像(左图)见视网膜小静脉迂曲、扩张,有白鞘(白箭头),视网膜前有新生血管和白色机化膜(黑箭头),可牵拉视网膜血管导致玻璃体腔反复积血,荧光素眼底血管造影图像(右图)见受累静脉曲张,管壁染色、渗漏,毛细血管动静脉短路,大片无灌注区和新生血管。见图1。
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1缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸对新生血管形成的抑制作用
目的:研究缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸对肿瘤血管形成的影响.方法:通过将腺病毒包装的反义HIF-1α(Ad-antiHIF-1α)和腺病毒包装的lacZ标志基因(Ad-lacZ)注射入人大肠癌鸡胚移植模型的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)中,观察他们对鸡胚移植瘤新生血管形成的影响.结果:注射Ad-antiHIF-1α组血管稀疏、纤细,一级血管数(16.8±1.6 vs 45.2±2.8,t=2.42,P=0.02<0.05)及二级血管数(34.8±3.6 vs 58.4±5.3,t=2.97,P=0.005<0.01)均明显少于注射Ad-lacZ组.结论:Ad-antiHIF-1α能有效抑制鸡胚移植瘤新生血管的形成.
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原位种植肝癌新生血管的检测及血管内皮细胞生长因子mRMA的表达
目的:观察大鼠原位种植肝癌模型中的新生血管的生长情况,研究肿瘤血管生长因子基因的表达和肝癌新生血管之间的关系.方法:采用Walker256癌肉瘤接种40只Wistar大鼠制作原位种植肝癌模型,用微血管计数以及免疫组织化学染色法检测平滑肌激动蛋白(α-SMA)的表达来标志肿瘤新生血管.血管内皮细胞生长因子基因的检测采用原位杂交法进行.结果:Walker256癌肉瘤接种后1、2、3 wk肿瘤微血管密度分别为(15±4.3)/Hp、(17±3.6)/HP、(45±7.8)/HP.大血管及正常微血管(毛细血管除外)周围α-SMA呈强阳性染色.在肝癌组织中可见到一些形态不规则的微血管呈弱阳性或阴性染色是肿瘤诱导的新生血管,肝癌组织有大量新生血管形成,新生血管的数量与微血管密度呈正相关,Walkef256癌肉瘤接种后3 wk较前2wk有显著性增加.正常肝脏组织仅有少量VEGF mRNA表达,肝癌组织接种后1wk即有多种细胞表达VEGF.新生血管较密集的肿瘤组织VEGF的表达较多.VEGF的表达与微血管密度和肿瘤组织中新生血管的数量呈正相关.结论:原位接种肝癌中有大量新生血管形成,平滑肌激动蛋白(α-SMA)的表达可以用来标记肿瘤新生血管.肝癌组织中血管内皮细胞生长因子的表达增加可能和肿瘤新生血管的形成有一定的关系.
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糖尿病视网膜病变新生血管形成与治疗进展
作为糖尿病一项严重且较为常见的并发症,糖尿病视网膜病变(DR)同时也是导致患者失明的主要原因之一,其发生的重要病理表现便是新生血管形成.笔者对DR新生血管形成的治疗进展进行综述,以期为今后的临床治疗工作提供可靠参考依据.
关键词: 糖尿病视网膜病变(DR) 新生血管形成 治疗进展 -
培哚普利在糖尿病大鼠肢体缺血后血管再生中的作用
目的 探讨培哚普利在1型糖尿病(T1DM)大鼠肢体缺血后血管再生中的作用及相关机制. 方法 对T1DM大鼠模型予单侧肢体股动脉离断.分为对照(DM)组、培哚普利治疗(DMA)组和培哚普利+内皮型一氧化氮合酶(eNOS)阻断剂治疗(DML)组.治疗4周后比较各组缺血肢体血管再生情况以及eNOS、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的mRNA和蛋白表达水平. 结果 与正常对照(NC)组相比,DM组的缺血肢体微血管密度(MVD)、eNOS、VEGF和bFGF的mRNA和蛋白表达均下降,DMA组上述指标明显上调(P均<0.05).DML组的MVD、eNOS和bFGF的mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),而VEGF表达不受影响(P>0.05). 结论 T1DM大鼠的缺血性血管再生受损,与之有关的生长因子表达下调.培哚普利能促进T1DM大鼠缺血肢体的血管再生,其机制与eNOS、VEGF和bFGF的表达上调有关.