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带蒂自体脾异位移植加门奇静脉断流术治疗门静脉高压症的研究
我国的门静脉高压症中85%～90%是由肝硬化所致.目前在肝硬化门静脉高压症治疗中,外科介入主要目的就是治疗食管胃底静脉破裂引发的大出血及消除脾功能亢进.国内一般采用全脾切除联合断流术或分流术对症治疗.近几年随着脾脏外科的发展,人们对脾脏功能的认识逐步深入,脾脏又重新为人们所重视.我们从1992-2005年行带蒂自体脾异位移植加门奇静脉断流术治疗肝硬化门静脉高压症90例,现总结如下.
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兔卵巢组织冷冻移植后卯母细胞成熟及受精发育能力的研究
目的 探讨兔卵巢组织冷冻复苏后移植对卵母细胞生长、成熟、受精发育潜能的影响. 方法 25只性成熟新西兰雌兔随机分为对照组(5只)、新鲜移植组(10只)及冷冻复苏移植组(10只),卵巢组织均自体多点移植于子宫系膜内.卵巢移植90d后对兔联合使用促排卵、体外成熟培养和卵泡浆内单精子注射技术,观察卵子的成熟情况以及体内和体外成熟卵子的受精率、卵裂率和囊胚形成率. 结果新鲜移植组和冷冻复苏移植组获卵数均低于对照组(P<0.05),而两移植组间获卵数差异无显著性;各组末成熟卵子所占比率以及未成熟卵子体外成熟后的成熟率间均无显著性差异;各组间体内成熟卵子、体外培养成熟卵子的受精率、卵裂率和囊胚形成率的差异不明显;各组内体内成熟卵子与体外培养成熟卵子相比受精率、卵裂率间无显著性差异,但体外培养成熟卵子囊胚形成率明显低于体内成熟卵子(P<0.05). 结论兔卵巢经冷冻复苏自体移植后,其卵泡能够重新生长发育;通过体外成熟和受精技术,体内和体外成熟卵子均可产生正常的胚胎.提示卵巢组织冻融移植结合辅助生殖技术可作为一种生育力保存的方法.
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二步法大鼠原位全小肠移植模型的建立与改进
目的:建立一种简单稳定、死亡率低的二步法大鼠原位小肠移植模型.方法:整块获取带肠系膜上动脉的腹主动脉和门静脉的全小肠,血管重建采用供体腹主动脉和受体腹主动脉端侧吻合、供体门静脉和受体左肾静脉端套管吻合.受体第一步手术时,供肠远端端侧吻合于受体的末端回肠,已结扎的供肠近端固定于右侧腹壁(不做腹壁造口).7 d后行第2步手术,自Tritze韧带下1 cm到回肠吻合口上1 cm切除受体小肠,受体空肠残端端侧吻合于供肠近端.结果:共进行二步法大鼠原位小肠移植手术174次,正式实验44次,手术成功率90.9%.受体第1次手术时间约50±15 min,其中动脉吻合时间约为20±5 min,静脉吻合时间2±1min,受体第2次手术时间约35±15 min.4只大鼠死于第一次手术后5 d内,2只死于肠瘘,1只死于麻醉意外,1只死于肠梗阻.第2次术后没有大鼠死亡,40只大鼠均长期存活(超过3 mo).结论:二步法大鼠原位小肠移植方法安全可靠,并发症少,生存率高.
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FK506对大鼠小肠移植排斥反应bcl-2/bax表达及预后的影响
目的:观察FK506对大鼠小肠移植排斥反应bcl-2/bax表达及预后的影响方法:选用近交系F344/N(RT Ⅰ1)和Wistar大鼠进行全小肠异位移植,随机分为对照组、同基因移植组(F344/N-F344/N)、异基因移植组(F344/N-Wistar)、FK506治疗组(F344/N-Wistar+FK506).观察大鼠的一般状况及存活时间,并于术后第3、5、7 d取移植,应用免疫组化检测术后移植肠组织中bcl-2及bax在的表达.结果:异基因移植组术后第3 d,bcl-2的表达显著低于对照组(P＜0.05),并随着移植天数的增加,差异更加显著(P＜0.01);bax的表达与对照组比较差异无显著性(P＞0.05),但bcl-2/bax呈下降趋势,大鼠在术后第3、5、7 d病理学检查移植肠出现排斥反应,大鼠存活时间与其他3组有显著差异;FK506治疗组bcl-2及bax表达与对照组比较,差异均无显著性(P＞0.05).同基因移植组、FK506治疗组无明显排斥,可长期存话.结论:FK506能明显抑制小肠移植急性排斥反应的产生,显著地延长移植物存活时间.bcl-2表达水平可作为早期诊断急性排斥反应的一个有意义参考指标.
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大鼠小肠移植排斥反应期移植肠RANTES表达的变化
目的:探讨移植肠RANTES(regulated upon activation,normal T cell expressed and secreted活化T细胞调节的,正常T细胞表达和分泌的因子)的表达在小肠移植急性排斥反应中的意义,以及他克莫司(FK506)对他的影响.方法:选用成年健康♂ SD和Wistar大鼠进行全小肠异位移植.实验分4组,第l组:非手术对照组(Wistar);第2组:同基因移植对照组(Wistar→Wistar);第3组:异基因移植组(SD→Wistar);第4组:FK506治疗组[SD→Wistar+FK506(1 mg/kg-1/d-1,im)].移植术后3,5,7 d取各组大鼠移植肠标本进行病理学检查,并采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦显微镜技术对移植肠RANTES的表达进行连续定量测定.结果:异基因移植组大鼠的移植肠RANTES表达在术后均非常显著高于其他3个对照组(P＜0.01),其动态变化与急性排斥反应的进程呈正相关;FK506治疗组大鼠移植肠RANTES的表达明显低于未治疗组(P＜0.01).结论:RANTES阳性细胞在小肠移植急性排斥反应中发挥了重要作用,动态检测移植肠RANTES的表达变化,可能成为小肠移植急性排斥反应有效的诊断指标之一.
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大鼠腹腔异位心脏移植模型的建立与评价
目的 建立一种稳定可行的大鼠腹腔同种异体异位心脏移植模型.方法 选用40只SD大鼠作为供体和受体,随机分为A、B两组,在Ono创建的大鼠腹腔异位心脏移植模型的基础上,对麻醉方法、供心摘取、受体准备、吻合方法等进行了部分改进,术后统计手术时间及手术成功率.结果 正式实验20例存活14例,存活率70％.术中吻合口出血致死1例;术中移植心脏复跳后停跳l例;术后24h死亡4例,供心阻断时间为(30±5)min,手术时间为(50±5)min.结论 对经典的Ono大鼠腹腔异位心脏移植模型的手术步骤和操作流程进行优化和改进后,降低了建模的难度,缩短了手术时间,供体心脏保护好,手术成功率高.
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幼猪小肠冷保存再灌注模型制作的麻醉和围手术期处理
小肠冷缺血再灌注模型制作是研究小肠保存的主要技术.通常采用离体小肠灌注冷保存、原位或异位移植.我们对传统方法进行改进,成功建立了在体小肠冷缺血再灌注模型.现介绍模型制作的麻醉方法和围术期处理.
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1例右小腿异位移植于左小腿患者的术后护理
随着显微外科技术的深入发展,在某种特定的情况下,对于断肢无再植条件,而另一肢体有毁损性严重挫伤的病例,为了恢复部分功能,可以施行异位再植手术.2011年3月我院收治了1例外伤患者,并为其做了异位移植手术,取得了巨大成功,也填补了我省下肢断肢再植手术的空白,现将术后护理体会报道如下.
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1例废弃足全足皮瓣自体游离异位移植患儿的护理
游离皮瓣移植术是显微外科常见的术式之一,但利用废弃足全足皮瓣自体游离异位移植却因病例特殊、方法独特、手术难度大,国内外尚未见报道.我科1999年10月6日收治 1例双下肢被火车压伤的患儿,当即采用废弃足全足皮瓣自体游离异位移植修复右足皮肤缺损,完整地保留了一侧下肢.经术后精心治疗及护理,获得成功,现报告如下.1 病例介绍王某,男,7岁,学生.于1999年10月6日14:00被火车压伤双下肢,4 h后转送我院.体检发现:左小腿中段完全性离断,创面不规则,断端皮肤及软组织挫伤达15 cm,伴大段骨缺损,创面污染严重,无原位再植条件.右小腿中段至前足足庶趾关节部近端皮肤撕脱性缺损,跟骨及足部肌腱外露,第3趾、第4趾毁损,第1趾、第2趾、第5趾有血液循环. 诊断:左小腿中段完全性离断,右小腿远端至前足跖趾关节平面皮肤缺损.治疗经过:入院后即行补液、输血、抗休克治疗.当患儿生命体征稳定后行左小腿残端清创缝合,将较完整的废弃左足行全足皮肤游离解剖并异位移植于右小腿及足部皮肤缺损区.术后异位移植的皮瓣红润、充盈良好,无明显肿胀,经术后抗感染、解痉、扩血管、抗凝、对症治疗,皮瓣顺利成活,保留的右下肢外形良好,术后1月可扶拐行走.
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带蒂自体脾异位移植加门奇静脉断流术治疗门静脉高压症的研究
我国的门静脉高压症中85%～90%是由肝硬化所致.目前在肝硬化门静脉高压症治疗中,外科介入主要目的就是治疗食管胃底静脉破裂引发的大出血及消除脾功能亢进.国内一般采用全脾切除联合断流术或分流术对症治疗.近几年随着脾脏外科的发展,人们对脾脏功能的认识逐步深入,脾脏又重新为人们所重视.我们从1992-2005年行带蒂自体脾异位移植加门奇静脉断流术治疗肝硬化门静脉高压症90例,现总结如下.
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右足左接异位再植患者一例围手术期护理体会
目的:探讨医护人员践行医学伦理原则,帮助患者适时选择符合个人特征的应对方式[1],通过医患互动克服心理挫伤的有效性和实用性.方法:针对异位移植患者围手术期不同阶段心理活动循症护理.结果:尊重患者的自主选择权,选择佳诊治方案并在实施中尽大努力,把不可避免但可控伤害控制在低限度之内[2].结论:成功实施异位移植围手术期护理.
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胃癌实验动物模型构建研究简况
胃癌动物模型可模拟胃癌在人体的发生与发展,建立合理、有效的动物模型是中医药实验及临床研究的重要前提.可用于构建胃癌模型的动物有非人灵长类动物,犬、兔子、大鼠、小鼠、裸鼠等,考虑到成本、诱发率、饲养等,大鼠、小鼠、裸鼠较为常用.①自发型胃癌很少发生在实验动物体内,获得比较困难,不适合大批量、短期实验.基因工程转染模型造价相对昂贵,多为单个基因突变,与临床多个基因互相作用发生胃癌距离较大,实际应用有一定限制;长期诱发型常用诱导剂有MNNG、Hp等,可单独亦可联合应用.②单因素法操作较为简单,构建喂食途径,成模持续时间较长、诱导癌变率不甚理想,包括给药物浓度、给药方式及时间等对成瘤率也都有很大影响.③多因素法选用多个胃癌相关因素对动物联合攻击复制胃癌模型,较单因素法周期短,且癌发率较高,诱导过程中动物意外死亡率亦高.④原位移植能大程度地模仿人胃癌发生发展,涉及手术开腹并在胃部移植肿瘤,增加造模难度,需操作者注意很多细节,不严格无菌操作、术中技术不熟练及术后感染等易导致实验动物死亡.⑤胃癌腹膜种植播散模型对研究胃癌腹膜播散及转移机制具有重要价值,可用于模拟晚期胃癌癌细胞腹腔内转移.⑥皮下移植操作简单、观察方便,是异位移植胃癌模型中常选择的移植部位,但局部侵犯和远处转移率都较低,腹腔联合皮下移植造模成功率更高.⑦免疫抑制法是一种联合方法造模方法,利用射线或免疫抑制剂先处理实验动物,再接种细胞悬液或肿瘤瘤块到动物皮下或肾包膜下,成瘤率较高.中药药理研究动物模型可用于评价疗效、筛选中药成分、健全中药实验研究体系等;大致分为证候动物模型、疾病动物模型及病证动物模型等.胃癌动物模型建立方法各不相同,各有优缺点,应根据中医药实验目的选用.
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小鼠卵巢器官不同部位移植的效果比较
背景:佳移植部位的选择对于保证卵巢的存活起着很重要的作用.目的:比较小鼠卵巢器官不同移植部位自体移植后的生长发育情况.设计、时间及地点:动物实验观察,于2008-09/11在宁夏医科大学生殖与遗传重点实验室完成.材料:清洁级健康ICR品系雌性小白鼠60只,按照不同的移植部位随机分为对照组、自体肾被膜下、颈部皮下、腹腔内及下肢根部肌肉内移植组,12只/组.方法:①对照组:新鲜取卵巢后立刻固定.各移植组在切除双侧卵巢后,立即进行自体异位移植.②肾被膜移植组:在肋脊角处逐层切开两侧的皮肤和肌肉,充分暴露小鼠双侧肾脏,用显微手术镊将完整卵巢由肾被膜切口移入肾脏下端.③颈部皮下移植组:在颈部双侧靠近颈动脉处切口,钝性分离皮下组织,用缝线将附近结缔组织缝成荷包,将完整卵巢植入荷包内并缝合.④腹腔移植组:将卵巢移植于腹腔子宫角系膜处.⑤下肢根部肌肉组织移植组:移植前4 d分别在小鼠左右下肢根部作一切口,用小弯钳在肌层内进行钝性分离制备一创面后,缝合切口.4d后进行自体卵巢移植时,将卵巢组织移进肌层预制的创面内,缝合切口.主要观察指标:于移植后48,168 h取移植卵巢进行组织学和血供重建分析.结果:移植48 h后,肾被膜下移植组卵巢与移植部位重建血供,而下肢根部肌肉移植组无血供建立;移植168 h,腹腔移植组的卵泡计数低,与对照组相比有显著性差异(P<0.05);下肢根部肌肉移植组卵泡结构正常,但数日较肾被膜移植组及颈部移植组少,但差异无显著性(P>0.05).肾被膜下移植组和颈部皮下移植组存活的卵巢器官内均可见不同发育阶段的卵泡,形态正常,与对照组相近.结论:卵巢组织的肾被膜下及颈部皮下移植较腹腔及下肢肌肉移植更易重建血供并利于卵泡的发育.
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裸鼠人异位移植胃癌肝转移和腹膜转移模型的实验研究
目的：建立稳定的人裸鼠异位移植胃癌肝转移和腹膜转移模型。方法采用异位移植技术，将MKN-45和TMK-1胃癌细胞接种于裸鼠脾脏被膜和腹腔内，建立肝转移模型及腹膜转移模型。制模3周或6周分别观察异位移植转移模型的成瘤率、侵袭与转移程度、组织形态学特征。结果 MKN-45和TMK-1胃癌细胞建立的异位移植模型成瘤率皆为100％（40/40）。异位移植胃癌肝转移模型中，发现区域淋巴结肿大或转移（2/20；10％），血性腹水（3/20；15％）；异位移植胃癌腹膜转移模型中，发现血性腹水（4/20；20％），肺转移（5/20；25％）；MKN-45和TMK-1胃癌细胞经脾肝转移制模3周组肝转移评分明显低于制模6周组，差异有显著性意义（均为P＜0．01）；MKN-45和TMK-1胃癌细胞注入腹腔制模3周组腹膜转移结节数明显少于制模6周组（均为P＜0．01）；两组模型的不同种类胃癌细胞株之间的局部和远处转移率无明显相关性（r＝0．251，P＞0．05）。组织病理学观察结果证实转移癌细胞形态特征与原发胃癌细胞相似。结论裸鼠胃癌异位移植模型为研究胃癌肝转移和腹膜转移的生物学机制和抗转移治疗提供了理想的实验动物模型。
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ICAM-1在大鼠气管异位移植模型早期表达的意义
目的 研究细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)在大鼠气管异位移植模型早期表达的情况.方法 将SD大鼠和Wistar 大鼠随机分为同种同基因组和同种异基因移植组.将气管异位移植于腹腔并用大网膜包裹,分别于移植后1、2、4、6、8天获取移植器官标本,进行常规病理和免疫组化染色,评价ICAM-1的表达情况.结果 ICAM-1在正常气管组织中呈微弱表达.在排斥反应早期,ICAM-1的表达显著升高,并且其表达水平与单核细胞浸润程度呈正相关.结论 气管移植物中ICAM-1表达的检测对急性排斥反应的诊断具有参考价值.
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SD大鼠构建慢性末端回肠炎的实验研究
慢性末端回肠炎在临床上不少见,病因和发病机制不明,有认为本病可能是由于结肠-回肠反流,细菌异位移植,刺激肠道淋巴组织发生免疫反应继而引起慢性炎症[1,2].我们应用SD大鼠去除回盲瓣的作用,造成结肠-回肠反流,旨在探讨去回盲瓣后回肠末端黏膜的病理变化.
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改良Cuff技术建立豚鼠至大鼠异位心脏移植模型
豚鼠至大鼠异位心脏移植是常用的研究非协调性异种心脏移植排斥机制的实验动物模型[1].本研究采用Cuff技术[2]及改良Cuff技术分别建立豚鼠至大鼠颈部异位心脏移植模型并进行比较,寻求更理想的小动物心脏移植模型.现将手术方法、改进及体会介绍如下.
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改良Cuff技术建立小鼠颈部异位心脏移植模型
目的 改进Cuff技术制作小鼠颈部异位心脏移植模型,以简化手术操作,提高手术成功率.方法 使用自制套管将供心肺动脉套接于受体右颈外静脉,将供心升主动脉套接于受体右颈总动脉.结果 正式实验40例,手术成功率92.5%.手术时间约60 min,供心冷缺血时间小于30 min.结论 改良Cuff技术建立小鼠颈部异位心脏移植模型,无需显微外科操作,是一种经济实用、稳定可靠、易于复制的动物模型.
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改进法建立大鼠颈部异位心脏移植模型
目的:探讨大鼠颈部异位心脏移植模型的改进.方法:120只Lewis鼠随机分为2组,实验组40对,行改进法颈部异位心脏移植,大鼠供心无名动脉和肺动脉分别与受者颈总动脉和颈外静脉行端侧吻合;对照组20对,行Chen氏法(陈忠华所创之术式)心脏移植.结果:实验组总缺血时间和术中出血量分别为(45.74±1.67)min与(0.97±0.23)ml,移植心存活时间超过6周.对照组分别为(56.06±3.07)min与(2.18±0.27)ml,移植心存活时间超过6周.结论:改进术式可减少术中失血、提高手术速度、明显缩短供心总缺血时间,为安全、简便和可行的方法,值得推广.
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大鼠颈部异位心脏移植术的改进
大鼠异位心脏移植术常采用腹部移植法(即改良Ono术式[1]),近年又发展到颈部移植法(Chen术式[2]),这两种方法均有移植方法简便、效果直观、易于重复的优点,已成为研究移植排斥与抗排斥机制常用的模型.但腹部异位移植创伤较大,失血多,且易引起内环境紊乱,死亡率偏高[3,4].本文在Chen术式的基础上加以改进,效果较好,现报道如下.
