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H22实体瘤小鼠生存实验及环磷酰胺对生存期的影响
目的 研究腹水型H22肝癌皮下移植小鼠的生存期及环磷酰胺的影响.方法 将H22肝癌腹水瘤细胞接种于BALB/c小鼠左侧腋窝皮下,5d后按肿瘤体积随机分成环磷酰胺组和对照组.环磷酰胺组腹腔注射环磷酰胺50 mg/kg,每周2次.观察小鼠一般临床表现、成瘤时间、成瘤率、体质量、摄食量、饮水量、肿瘤体积及生存时间.结果 H22皮下移植小鼠成瘤时间约为5d,成瘤率100％.环磷酰胺组体质量、肿瘤体积与对照组比较明显降低(P＜0.05),环磷酰胺组摄食量、饮水量与对照组比较有增加的趋势.H22皮下移植瘤小鼠平均生存时间为87 d,环磷酰胺组小鼠平均生存时间为113 d(生命延长率30.3％,P＜0.01).结论 H22腹水型肝癌皮下移植小鼠是一种较理想的实体瘤模型,具有正常的免疫功能,可用于生物反应调节剂抗肿瘤药物影响荷瘤小鼠的生存期实验.
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人胰腺癌裸鼠异种移植瘤模型的生物发光成像和超声成像比较
目的 利用荧光素酶基因标记的人胰腺癌细胞株Capan-2建立胰腺癌裸鼠移植模型,评价生物发光和小动物超声成像在移植瘤模型建立中的作用.方法 将表达荧光素酶基因的真核表达载体转入人胰腺癌细胞Capan-2,将1×10<'6>人胰腺癌细胞悬液分别接种于裸鼠胰腺和右后肢皮下,使其成瘤.生物发光成像和小动物超声成像系统观察肿瘤的生长情况.结果 肿瘤细胞原位移植成功率为75%,皮下移植成功率为100%.生物发光成像系统在肿瘤细胞原位接种第7天,可以观察到肿瘤发光;小动物超声成像系统在肿瘤细胞皮下接种第7天,可以测量肿瘤的大小,但在肿瘤细胞原位接种的第7天不能测量肿瘤的大小.另外肿瘤细胞在裸鼠皮下生长的速度比原位生长速度快3倍左右.结论 生物发光成像系统更适用于肿瘤早期监测,为深入研究胰腺癌的发生发展、侵袭转移机制提供理想工具.
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人子宫内膜异位症裸鼠皮下模型的构建
目的 建立人子宫内膜异位症裸鼠模型,分析皮下移植两种不同处理后的建模效果.方法 将18只参加实验的裸鼠分成2组,每组9只,将人子宫内膜组织移植在裸鼠皮下,一组移植后皮肤不予缝合,另一组移植后皮肤予缝合.观察两组裸鼠模型的成功率、皮肤创面的炎症反应及死亡比例.结果 不缝合组成活比例9/9,建模成功比例8/9;缝合组成活比例8/9,建模成功比例7/9.两组成活比例与成功比例相仿,切口均无明显红肿等炎症表现.不缝合组手术时间短,每只裸鼠建模时间约45 s.结论 皮下移植法是制作人子宫内膜异位症裸鼠模型的有效方法,移植后皮肤缝合与否对模型建立效果无影响.此建模方式简单,节约时间,更具优势,值得推广.
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胃癌实验动物模型构建研究简况
胃癌动物模型可模拟胃癌在人体的发生与发展,建立合理、有效的动物模型是中医药实验及临床研究的重要前提.可用于构建胃癌模型的动物有非人灵长类动物,犬、兔子、大鼠、小鼠、裸鼠等,考虑到成本、诱发率、饲养等,大鼠、小鼠、裸鼠较为常用.①自发型胃癌很少发生在实验动物体内,获得比较困难,不适合大批量、短期实验.基因工程转染模型造价相对昂贵,多为单个基因突变,与临床多个基因互相作用发生胃癌距离较大,实际应用有一定限制;长期诱发型常用诱导剂有MNNG、Hp等,可单独亦可联合应用.②单因素法操作较为简单,构建喂食途径,成模持续时间较长、诱导癌变率不甚理想,包括给药物浓度、给药方式及时间等对成瘤率也都有很大影响.③多因素法选用多个胃癌相关因素对动物联合攻击复制胃癌模型,较单因素法周期短,且癌发率较高,诱导过程中动物意外死亡率亦高.④原位移植能大程度地模仿人胃癌发生发展,涉及手术开腹并在胃部移植肿瘤,增加造模难度,需操作者注意很多细节,不严格无菌操作、术中技术不熟练及术后感染等易导致实验动物死亡.⑤胃癌腹膜种植播散模型对研究胃癌腹膜播散及转移机制具有重要价值,可用于模拟晚期胃癌癌细胞腹腔内转移.⑥皮下移植操作简单、观察方便,是异位移植胃癌模型中常选择的移植部位,但局部侵犯和远处转移率都较低,腹腔联合皮下移植造模成功率更高.⑦免疫抑制法是一种联合方法造模方法,利用射线或免疫抑制剂先处理实验动物,再接种细胞悬液或肿瘤瘤块到动物皮下或肾包膜下,成瘤率较高.中药药理研究动物模型可用于评价疗效、筛选中药成分、健全中药实验研究体系等;大致分为证候动物模型、疾病动物模型及病证动物模型等.胃癌动物模型建立方法各不相同,各有优缺点,应根据中医药实验目的选用.
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梅花鹿鹿茸干组织裸鼠皮下移植动物模型的建立
目的 建立梅花鹿鹿茸干组织异种移植动物模型,并观察原始鹿茸干组织在异体继续生长和发育情况.方法 将梅花鹿鹿龄为1周岁的初生鹿茸干组织(对照组用前额骨膜)移植到裸鼠头部皮下,观察移植物的生长情况.于移植后60 d切取移植物,同时提取移植物组织的RNA,以cDNA为模板,采用梅花鹿的X型胶原(ColX)的特异性引物进行PCR,检测移植物来源,并进行序列分析. 结果实验组受鼠头部均观察到移植物的生长,移植后60d,移植物平均直径可达8.03 mm,高度可达15.67 mm.PCR产物可见约200 bp的特异条带,测序结果与已报道的梅花鹿的ColX基因的mRNA序列同源性为100%.结论 鹿茸干组织移植到裸鼠头部能够继续生长发育,裸鼠可作为研究鹿茸干组织再生发育规律及其调控机制的动物模型.
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人源性胃癌移植瘤模型的初步建立及其评价
目的 将临床胃癌组织皮下移植于免疫缺陷小鼠,以建立人源性胃癌移植瘤模型,并对建成模型进行初步评价.方法 将98例手术切除的胃癌组织分别皮下移植于SCID小鼠体内,待移植瘤体积长至500～1 000 mm3时,取出肿瘤传代至BALB/c-nu/nu裸小鼠体内,同时进行速冻,石蜡包埋,冻存等样本组织库保藏.对石蜡包埋的组织进行HE染色,观察其病理特征;选取12例生长良好的模型用5-氟尿嘧啶和顺铂进行药效学实验;选取3例模型进行体外药物敏感性实验.结果 25例胃癌模型移植成功并能够稳定传代,成功率为25.52％.各代移植瘤组织形态学特征与患者肿瘤组织一致.体内药效学结果表明,5-氟尿嘧啶(25 mg/kg)对2例模型有一定的抑制作用(TGI＞60％),对10例模型无明显的抑制作用.顺铂(5 mg/kg)对3例模型有明显的抑制作用(TGI＞100％),对4例模型有一定的抑制作用(TGI,60％～90％),对5例模型无明显抑制作用(TGI＜60％).体外药物敏感性实验表明对5-氟尿嘧啶敏感程度依次为GAX001 (IC50:3.187 μm)＞GAX007(IC50:6.886 μmol)＞GAX027(IC50:8.323 μmol),对顺铂敏感程度依次为GAX027(IC50:2.753 μmol)＞GAX001(IC50:3.211 μmol)＞ GAX007(IC50:8.137 μmol).结论 成功建立了25例人源性胃癌小鼠移植瘤模型,移植瘤保留了临床胃癌的病理特征,对其中12例进行的药效学评价表明对相同的化疗药物敏感性不同,能够反映患者的遗传多样性,可用于抗肿瘤药物的筛选和研究.
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人结肠癌移植瘤小鼠模型的建立及初步研究
目的 利用中等分化的人结肠癌细胞建立小鼠皮下和原位移植瘤模型,以研究中国人种结肠癌特有的生物学特性,并为结肠癌的防治研究提供有用的实验工具.方法 人新鲜结肠癌标本接种于BNX小鼠皮下,体内反复传代,待模型稳定后再转入BALB/c-nu/nu裸小鼠体内继续传代,使之生物学性状保持稳定,从而建立人结肠癌小鼠皮下移植瘤模型.比较人结肠癌标本在两种不同免疫缺陷动物体内的生长情况,并绘制生长曲线.采用组织块法建立人结肠癌原位移植瘤动物模型,观察原位成瘤、生长及转移等情况.组织病理学检测皮下移植瘤与人结肠癌标本的组织学差异,免疫组织化学检测皮下移植瘤中ESA、CEA、C-erbB-2、P53的表达情况,流式细胞技术检测移植瘤的细胞周期,并进行DNA倍体分析.结果 通过体内反复传代筛选成功建立了中等分化的人结肠癌皮下移植瘤模型,利用皮下瘤成功建立了人结肠癌原位移植瘤模型,成瘤率达到5/8(62.5％),但肝脏、腹腔、淋巴结等未见明显转移.移植瘤组织切片观察显示肿瘤为腺癌Ⅰ～Ⅱ级,与人结肠癌组织标本相似.免疫组化显示ESA和CEA呈阳性至强阳性表达；C-erbB-2和P53呈阳性表达.流式细胞术检查发现肿瘤细胞处于G0-G1期的比例为67.50％±5.59％,G2-M期为4.47％±2.31％,S期为28.02％±7.13％,分析DNA倍体为1.74±0.02.结论 本实验利用恶性程度较低的中等分化人结肠癌组织成功建立了结肠癌皮下及原位移植瘤模型,该模型生物学特性稳定,保持了人结肠癌标本的生物学特点.
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人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立
目的 建立人结肠癌SW480细胞移植瘤模型,研究其形态学及生物学特性.方法 将处于对数生长期的人结肠癌SW480细胞接种于10只裸鼠右侧背部皮下,待瘤体生长至直径1～2cm时处死裸鼠,取出肿瘤组织,将其磨碎并与培养基混合、过滤,滤液与基质胶混合,再将基质胶细胞悬液接种于30只裸鼠右侧背部皮下,7d后处死裸鼠,观察肿瘤大体特征,光镜及电镜下观察肿瘤病理学特征.结果 接种SW480细胞的裸鼠于接种后4周有3只成瘤.接种基质胶细胞悬液的裸鼠在接种后7d有28只成瘤,瘤体形状规则,肿瘤组织呈现典型癌变特征.结论 本实验成功建立了人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,该模型成瘤率高,瘤体形状规则,病理学改变与临床非常相似,为研究人结肠癌干预措施提供了较为理想的动物模型.
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U87胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型建立
目的 建立U87胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型,观察肿瘤温度变化情况.方法 将U87胶质瘤细胞接种到Balb/c裸鼠右侧背部靠右后肢皮下处,建立10只雌性裸鼠皮下移植瘤胶质瘤模型.测量肿瘤的体积,并绘制肿瘤生长曲线.观察神经胶质瘤的生长,监测肿瘤温度的变化情况.接种第36天处死裸鼠,取出肿瘤组织观察肿瘤标本的病理性特征和GFAP免疫组化的阳性表达情况.结果 胶质瘤裸鼠模型建立成功.病理学检查显示,肿瘤细胞符合胶质瘤细胞的形态学特征,GFAP阳性表达.在成瘤初期,肿瘤温度随时间增加而逐渐增加,到接种第15天,肿瘤温度上升至高,在肿瘤生长后期,肿瘤温度随着时间增加而降低.接种第36天裸鼠肿瘤温度与接种第6天裸鼠肿瘤温度相比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 有效建立U 87胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型,在胶质瘤治疗方面有广泛的用途.
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人原发性胃非霍奇金淋巴瘤小鼠皮下移植瘤的病理学特性
目的:建立人原发性胃非霍奇金淋巴瘤小鼠皮下移植瘤模型,并探讨其组织病理学特性.方法:取新鲜的人原发性胃非霍奇金淋巴瘤组织移植于NOD/SCID小鼠和BALB/c-nu小鼠左、右肩胛部皮下,观察移植瘤的生长过程;待皮下移植瘤增大,将其取下传代,连续传至6代.同时每代移植瘤组织进行常规病理检测及CD20、CD45RB、Ki67的免疫组织化学检测.结果:在免疫缺陷小鼠体内形成了与人原发瘤形态结构一致的移植瘤,组织中见大量异常增生的大B淋巴细胞.免疫组织化学显示:CD20、CD45RB、Ki67阳性.结论:移植瘤较好地保留了人原发性胃非霍奇金淋巴瘤的组织病理学、生物学特性.
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继发性甲状旁腺功能亢进症患者甲状旁腺全切术后甲状旁腺功能的变化
目的 观察继发性甲状旁腺功能亢进症患者甲状旁腺全切加腹壁皮下移植术后的甲状旁腺功能.方法 回顾性分析25例药物保守治疗无效,行甲状旁腺全切加自体旁腺腹壁皮下移植术的继发性甲状旁腺功能亢进症患者,移植物为所切除旁腺中无明显腺体增生的旁腺组织,切成30小块,移植于左侧腹壁皮下.收集术中(甲状旁腺全切术后10 min)、术后24 h、1、5、15、30周血全段甲状旁腺激素(iPTH)数据.结果 每一例接受了手术的患者生活质量都得到明显提高.术前iPTH平均为(1 832±189.4) pg/mL,术中为(120.3±67.7) pg/mL;术后24 h为(17.4±18.7)pg/mL;1周为(17.9±21.7) pg/mL;5周为(36.3±36.4) pg/mL;15周为(76.2±76.9)pg/mL;30周为(102.3±85.5) pg/mL;82.6％患者自体移植物在第5周时即可具备功能.所有患者均没有行移植物清除术.结论 腹壁皮下自体甲状旁腺移植是一种有效、简单、快捷的手术方式,且避免了前臂自体甲状旁腺移植所导致的潜在的并发症.
关键词： 继发性甲状旁腺功能亢进症 甲状旁腺自体移植 皮下移植
