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共聚焦定量分析WAF1-S基因表达对人食管癌细胞系EC109生长的作用
目的:探讨抑癌基因WAF1-S基因在食管癌细胞中的表达以及对食管癌细胞生长的抑制作用,为食管癌发病机制的研究提供一种新的思路,为食管癌基因治疗提供理论基础.方法:采用亚克隆技术,将野生型WAF1-S基因全长,通过双粘端克隆入真核表达载体pcDNA3中,用lipofectamine2000介导的方法转染EC109细胞(人食管癌细胞系).通过打点杂交观察WAF1-S基因mRNA在细胞中的表达,用Western blot及激光共聚焦方法定量分析WAF1-S基因的蛋白表达产物,MTF及流式细胞仪检测EC109的生长状态,分析WAF1基因对食管癌细胞株生长的影响.结果:用内切酶酶切分析证实外源野生型WAF1-S基因克隆入真核表达载体中,经打点杂交证实外源野生型WAF1-S基因可以在EC109细胞中表达,通过激光共聚焦分析证实,转染后的食管癌细胞EC109中WAF1-S的蛋白的表达明显高于对照组(32±15vs11±7,P<0.05),对细胞进行周期分析表明,处于F0~G1期细胞为0.47~0.65.结论:通过转染外源野生型WAF1基因可提高WAF1基因表达,增加食管癌细胞中P21蛋白的表达量,从而提高WAF1基因表达,抑制细胞的生长.
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奥曲肽抑制体外培养人肝癌细胞生长的实验研究
我们通过观察奥曲肽对体外培养的7402人肝癌细胞株生长的影响,探讨生长抑素抑制肝癌细胞生长的机理.
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水飞蓟宾对荷人肝癌BALB/c鼠NK细胞的免疫活性的调节作用
水飞薊宾是菊类植物水飞薊的提取物.近来,体外研究发现水飞薊宾可以直接抑制肝癌细胞株生长[1].我们观察水飞薊宾对荷人肝癌BALB/c鼠自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)的Fas配体(Fas ligand,FasL)表达及NK细胞活性的影响,探讨水飞薊宾对于肝细胞癌宿主细胞免疫的影响.
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丝裂霉素C联合抗Fas单抗、C2神经酰胺对人膀胱癌T24细胞的抑制作用
化学治疗是膀胱癌术后治疗的重要方法,但药物的毒副作用和肿瘤的耐药现象常使治疗归于失败.合理的联合用药可以获得协同作用,减少用药剂量,降低毒副反应,延缓耐药性产生.本研究于2004年9月至11月于2004年9月至11月应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测丝裂霉素C(MMC)、抗Fas单抗和C2神经酰胺(C2-Cer)对人膀胱癌T24细胞株生长的抑制作用,并应用Chou-Talalay联合指数法[1]判定药物之间联合应用的效果.
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环孢素A抑制胃癌细胞株生长及其机制探讨
孢素A(CsA)目前广泛用于治疗器官移植后的排斥反应及自身免疫性疾病.近对白血病的研究显示,CsA是P糖蛋白竞争性拮抗剂,在传统化疗方案中加用CsA可明显降低白血病细胞的抗药性,延长化疗缓解时间及患者生存期[1].另外,CsA还通过非竞争性抑制蛋白酶活性实现对核因子(NF)-κB的抑制作用[2].我们以往研究显示,胃癌存在不同程度的NF-κB组成性激活,且胃癌NF-κB激活组预后明显差于非激活组[3].现进一步探讨不同胃癌细胞株NFκB含量及活性差异以及CsA对胃癌细胞增殖活性与细胞凋亡的影响.
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营养素联合化疗药物对胃癌细胞株生长的影响
恶性肿瘤病人化疗期间如何合理地营养支持是临床探索的课题之一.本研究应用噻唑兰(MTT)法,体外测定复方氨基酸溶液和脂肪乳剂对胃癌细胞增殖的抑制作用,为化疗期间合理营养支持提供依据.
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聚桂醇在体外对肝癌细胞的杀伤作用
聚桂醇是一种新型硬化剂,本研究旨在观察聚桂醇对肝癌细胞的杀伤作用,现报道如下.一、材料与方法1.材料:人肝癌细胞株HepG2;聚桂醇注射液(陕西天宇制药有限公司);四氮唑盐(Sigma-aldrich);680酶标仪( Bio-rad).2.实验方法:(1)细胞株生长杀伤实验[噻唑蓝(MTT)比色法]:取对数生长期HepG2细胞,制成细胞混悬液,接种于96孔板,每孔100μl(含3000个细胞).