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烟酰胺通过促进RUNX3基因表达抑制人膀胱肿瘤移植瘤及致癌原诱导的鼠膀胱肿瘤的生长
目的:染色质交互蛋白乙酰化对基因表达调控十分重要.异常的基因表观遗传修饰可引起多种肿瘤抑制基因失活.人们试图通过调节染色质结构使失活的抑癌基因重新激活来促进抗癌药物的发展.研究表明组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以作为抗癌药物,并且已经有数种组蛋白去乙酰化酶抑制剂进入临床试验.我们发现人膀胱癌中RUNX3抑癌基因的失活是通过启动子甲基化实现的.本研究旨在调查动物模型中RUNX3抑癌基因的活化是否可以抑制膀胱癌的进展.
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二氟甲基鸟氨酸对人膀胱癌EJ细胞生长及凋亡的影响
鸟氨酸脱羧酶(ODC)是多胺生物合成途径的关键酶.ODC异常高表达及细胞内多胺高水平与肿瘤发生发展密切相关[1].我们采用体外实验方法对ODC 抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)阻断人膀胱癌EJ细胞多胺生物合成途径对细胞生长及凋亡的影响进行观察.
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改良型TAT-VP3基因表达对人膀胱癌细胞凋亡的诱导作用
VP3来源于鸡贫血病毒(CAV),又被称为凋亡素[1].TAT能够跨膜导入细胞内部.我们利用分子克隆方法构建了重组质粒PcDNA3-TAT-VP3,观察改良型TAT-VP3基因在人膀胱癌BIU-87细胞中的表达及诱导凋亡的效应.
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金属卟啉化合物光动力学作用对人膀胱癌细胞株增殖与凋亡的影响
光动力学疗法(PDT)由于其良好的肿瘤特异性、较小的副作用而可用于膀胱癌的治疗.我们设计合成了金属卟啉化合物5,10,15,20-四(N-甲基-4-吡啶基)锰卟啉四碘盐(简称锰卟啉),探讨光动力学作用对人膀胱癌细胞增殖和Bcl-2、Bax表达的影响,现报告如下.
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三氧化二砷对膀胱癌细胞株BIU-87影响的研究
三氧化二砷(As2O3) 用于白血病的治疗疗效确定,目前亦有诱导实体肿瘤细胞凋亡的报道[1].我们采用免疫组化和流式细胞术观察As2O3对人膀胱癌细胞系BIU-87的诱导凋亡作用.现报告如下.
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RNA干扰对转染Livin基因的膀胱癌细胞凋亡诱导的影响
我们采用RNA干扰(RNAi)技术阻抑Livin基因表达[1],观察其对丝裂霉素(MMC)诱导细胞凋亡的影响.材料与方法选用人膀胱癌T24细胞株;siRNA由上海吉玛公司合成,正义链:5′-GGGACCACGUGGAUGGGC-AdTdT-3′,反义链:5′-UGCCCAUCCACGUGGUCCCdAdG-3′.
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siRNA介导的血管内皮生长因子基因沉默对膀胱癌T24细胞增殖的影响
我们应用RNA干扰技术,以血管内皮生长因子(VEGF)为靶点,对人膀胱癌T24细胞进行研究,初步探讨VEGF特异性小干扰RNA(siRNA)作为膀胱癌基因治疗手段的可能.现报告如下.
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在人膀胱癌中有功能的p53突变作为紫杉醇和gemcitabine敏感性的分子决定因素
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丝裂霉素C联合抗Fas单抗、C2神经酰胺对人膀胱癌T24细胞的抑制作用
化学治疗是膀胱癌术后治疗的重要方法,但药物的毒副作用和肿瘤的耐药现象常使治疗归于失败.合理的联合用药可以获得协同作用,减少用药剂量,降低毒副反应,延缓耐药性产生.本研究于2004年9月至11月于2004年9月至11月应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测丝裂霉素C(MMC)、抗Fas单抗和C2神经酰胺(C2-Cer)对人膀胱癌T24细胞株生长的抑制作用,并应用Chou-Talalay联合指数法[1]判定药物之间联合应用的效果.
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多胺生物合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸对人膀胱癌细胞的抑制及促凋亡作用研究
目的 探讨多胺生物合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对人膀胱癌EJ细胞的抑制作用.方法 应用细胞培养、活细胞摄影技术、伊红染色细胞计数和原位DNA片段末端标记,观察DFMO抑制人膀胱癌EJ细胞的增生及诱导其凋亡.结果 活细胞摄像结果显示:与空白对照组相比4,6,8 mmol/L DFMO给药第5天,细胞生长明显抑制,随DFMO剂量增大,上述变化逐渐明显.伊红染色结果显示:4,6,8 mmol/L的DFMO均可抑制EJ细胞生长,并随剂量的增加,抑制作用逐渐增强.原位DNA片段末端标记结果显示:4,6,8 mmol/L DFMO均可诱导EJ细胞凋亡;6 mmol/L为较适宜剂量;3种检测方法均显示同时加入外源性腐胺(Pu)后,EJ细胞的凋亡与对照组无明显差别.结论 DFMO可以抑制膀胱癌EJ细胞的增生并诱导其凋亡.
关键词: 多胺生物合成抑制剂DFMO 人膀胱癌 细胞抑制 凋亡 -
用免疫磁性微球从骨髓中分离癌细胞
用物理吸附结合化学键共价结合的方法,将抗人膀胱癌单克隆抗体连接到预先制备的聚苯乙烯磁性微球表面,构建了能特异地与靶细胞结合并赋予其以磁响应性的免疫磁性微球(immunomagnetic microspheres, IMMS).间接免疫荧光检测和IMMS与细胞的结合实验证明,所构建的IMMS可有效地和靶细胞结合.研究了聚苯乙烯磁性微球和抗体反应的质量比、IMMS与靶细胞比例对IMMS与细胞结合效果的影响.用IMMS从动物骨髓中分离癌细胞的初步实验表明,IMMS可有效清除癌细胞,而骨髓细胞仅有很少量的损失.
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β-榄香烯对人膀胱癌BIU-87细胞磷脂代谢转换率及细胞脂膜流动性的影响
磷脂是细胞膜的重要组分,肌醇磷脂在细胞的功能调控中发挥重要的作用,并与细胞增殖及肿瘤形成关系密切[1,2].β-榄香烯是中药温莪术的有效抗癌成分,临床应用对许多恶性肿瘤的疗效确切,我们已经证明其可诱导人膀胱癌BIU-87细胞凋亡[3];本研究旨在进一步研究其对BIU-87细胞肌醇磷脂代谢转换及脂膜流动性的影响,探索凋亡的分子机制,结果报道如下.
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"人脐静脉内皮细胞系"ECV304实际上是人膀胱癌细胞系T24
细胞系间的交叉污染是全世界生物医学研究领域面临的重大难题之一.多项研究显示18%~36%的人肿瘤细胞系为假细胞系或身份不正确[1].
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β-榄香烯对人膀胱癌BIU-87细胞磷脂膜功能及Bcl-2表达的影响
目的 探讨β-榄香烯对人膀胱癌BIU-87细胞磷脂膜功能及Bcl-2表达的影响.方法 [32P]Pi同位素参入,提取细胞磷脂进行HPTLC分析细胞磷脂(PC及PE)代谢,考马斯亮蓝法测定细胞膜蛋白水平,分析细胞脂膜流动性及流式细胞仪测定Bcl-2表达的变化.结果 随着β-榄香烯浓度的增加,[32P]Pi参入细胞PC、PE量明显降低,膜蛋白水平及Bcl-2表达明显降低,其大抑制率分别为:41.1%、43.3%、43%、50%,呈明显的量效关系(P<0.05);β-榄香烯明显降低BIU-87细胞膜脂流动性.结论 β-榄香烯可以明显抑制BIU-87细胞磷脂代谢、Bcl-2表达及脂膜流动性,提示磷脂(PC及PE)及Bcl-2与膀胱癌BIU-87细胞凋亡有密切关系.
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血管内皮生长因子C和Smad4的表达与膀胱癌淋巴管生成之间的关系
目的 观察血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和Smad4在膀胱癌的表达,分析VEGF-C和Smad4的表达与膀胱癌淋巴管生成及膀胱癌进展之间的关系.方法 取膀胱癌病例56例,其中浅表性膀胱癌(Tis,Ta,T1) 32例,浸润性膀胱癌(T2以上)24例.应用免疫组化法和Western blot技术观察VEGF-C和Smad4在膀胱癌组织内的表达.以D2-40作为淋巴管内皮特异性标记物,检测膀胱癌组织内的淋巴管密度(LVD).结果 VEGF-C表达于肿瘤细胞的胞浆内,Smad4表达于肿瘤细胞的胞浆和胞核内.VEGF-C的表达水平与膀胱癌淋巴管密度呈正相关(P<0.05),Smad4的表达水平与膀胱癌淋巴管密度呈负相关(P<0.05).VEGF-C和Smad4的表达呈负相关,VEGF-C的高表达和Smad4的低表达与膀胱癌淋巴管生成之间呈显著的相关性.Western blot检测结果表明,VEGF-C在浸润性膀胱癌组织内的表达量与其在浅表性膀胱癌组织内的表达量未见显著差异(P>0.05),而Smad4在浅表性膀胱癌组织内的表达量明显高于其在浸润性膀胱癌组织内的表达量(P<0.05).结论 VEGF-C和Smad4在膀胱癌组织内表达水平呈负相关,Smad4可能通过调节VEGF-C蛋白的表达而抑制膀胱癌淋巴管生成.
关键词: 血管内皮生长因子-C Smad4 人膀胱癌 -
~(125)I-脱氧尿嘧啶核苷DNA靶向治疗膀胱癌实验研究
~(125)I-脱氧尿嘧啶核苷(deoxyuridine,UdR)是脱氧胸腺嘧啶核苷(deoxythymidine,TdR)的类似物,可实现~(125)I的DNA靶向放射治疗,这为恶性肿瘤分子水平治疗提供了一种新方法.笔者在前期体外实验~([1])的基础上,建立了荷人膀胱癌裸鼠移植瘤模型,进行了瘤内注射~(125)I-UdR后药物有效性、放射性分布和安全性研究,现报道如下.
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131I-抗KDR McAb在荷人膀胱癌SCID小鼠体内分布实验
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反义硫代寡核苷酸对人膀胱癌细胞端粒酶活性的影响
目的探讨端粒酶抑制剂对膀胱癌BIU-87细胞端粒酶活性的影响.方法用TRAP-ELASA法检测端粒酶抑制剂反义硫代寡核苷酸(asONS)对膀胱癌BIU-87细胞及其细胞裂解物端粒酶活性的影响.结果 asONS能够部分抑制人膀胱癌BIU-87细胞端粒酶的活性,呈现一定的浓度依赖性和时间依赖性;asONS与细胞裂解物直接作用组同作用细胞组相比,端粒酶活性下降的更为明显.结论 asONS如何有效通过细胞膜将是保证疗效的关键.
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鼠膀胱癌原位模型建立的研究进展
膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤.在世界范围内,膀胱癌发病率居恶性肿瘤第九位[1].膀胱癌动物模型能够较好地再现人膀胱癌疾病,是研究人类膀胱肿瘤的病因、病理、进展及筛选药物、评价治疗效果等的有效手段,具有非常重要的意义.理想的原位膀胱癌动物模型应具有以下特点[2]:①肿瘤局限在膀胱内生长;②上皮细胞起源的肿瘤,并且为浅表性;③用于实验的动物具有正常的免疫功能;④建立动物模型的方法易于操作,并且具有很好的再塑性.鼠膀胱癌原位模型是目前应用较广的一类膀胱癌动物模型,其制备方法较多,各有特点,本文就鼠膀胱癌原位模型建立的进展做一综述.
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hTERT启动子调控腺病毒介导的HSV-tk/GCV基因系统治疗人膀胱癌
我们在体外实验已证实,hTERT启动子调控腺病毒介导的HSV-tk/GCV基因对膀胱癌细胞有选择性的杀伤作用,而对正常细胞不产生明显影响[1].我们采用BALB/C裸鼠建立荷人膀胱癌动物模型,给予重组腺病毒静脉内注射治疗,观察其在体内的治疗效果及安全性.