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BrdU单克隆抗体的制备及鉴定
DNA的5-溴,2'-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记法近年来作为一种新的、简便、敏感特异的检测方法,在肿瘤生物学、遗传学、分子生物学特别是细胞增殖动力学等领域得到广泛应用,在一定程度推动了相关学科的发展.为了满足广泛开展BrdU标记DNA检测对BrdU特异性单抗的需要,我们制备了一株产生BrdU单抗的杂交瘤细胞株.本文对此细胞株制备过程及单抗鉴定情况作了简单叙述.
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细胞核标记物5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷的研究及应用进展
细胞移植疗法是现代医学发展为迅速的领域之一,采用干细胞治疗技术修复退变的椎间盘,是治疗早中期椎间盘退变的理想方法[1]。为了解细胞移植后在体内的存活、迁徙、分布和转归等情况,需要依赖合适的示踪技术将细胞加以标记,以进行识别和监测。细胞核标记法是常用的示踪方法之一,5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(5-Ethynyl-2'-deoxyuridine, EdU)是新一代细胞核标记物,近年来广泛应用于检测DNA复制、细胞增殖以及细胞标记。与传统的免疫荧光染色检测方法相比,EdU检测方法更为简单、快速、准确,且对细胞生长分化影响小[2,3],具有良好的应用前景和发展空间。
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垂体瘤SPECT显像的临床应用
单光子发射型计算机断层显像( SPECT)和正电子发射计算机断层扫描( PET)利用不同的药物对肿瘤内部的生化及代谢活动进行显像,常用于脑肿瘤的 SPECT显像剂有 201 铊 (201TLCL)、 99mTc-甲氧基异丁基异腈 (99mTc-MIBI)、 123I-α-甲基-L-酪氨酸( 123I-MT)、 131I-碘代脱氧尿嘧啶核苷 (131I-UdR)等 [1],脑肿瘤摄取同位素的机制不是十分清楚,有资料显示常用脑肿瘤显像剂如 201TL和 99mTc和以下因素有关 [2]:肿瘤的血液供应;血脑屏障的完整性;细胞代谢功能,显像剂进入细胞及线粒体主要靠膜两侧存在的跨膜电位差,肿瘤代谢越旺盛,细胞及线粒体膜维持较高电位差,从而增加了显像剂进入细胞的机会.
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125I-UdR提高内皮抑素基因的抑瘤作用
目的:探讨125I-UdR提高内皮抑素基因对大鼠种植癌模型的抑制效应.方法:制作肿瘤株Walker-256细胞大鼠皮下种植癌的动物模型并分为1-4组(对照组、125I-UdR组、Endostatin组和Endostatin+125I-UdR组),每组20只,通过实体瘤内注射,分别给与相同体积生理盐水125I-UdR、内皮抑素基因及125I-UdR和内皮抑素基因混合物,测量肿瘤治疗前体积(vo)和治疗后不同时间体积(vt),计算10d、20d的肿瘤生长率(f=vt/vo),观察各组肿瘤在光镜下的变化.结果:各组大鼠10d、20d肿瘤生长率为:(11.03±1.08、27.35±1.08),(4.02±0.79、7.58±2.98),(3.88±0.26、7.02±2.75),(2.72± 1.01、2.94± 1.26),2、3、4组的肿瘤生长率明显小于1组(P<0.001);2、3组之间肿瘤生长率差别不明显(P>0.05),4组肿瘤生长率小于2、3组(P<0.01).结论:通过实体瘤内注射的方法给与125I-UdR、内皮抑素基因及两者混合物后,能够明显抑制肿瘤的生长,内皮抑素基因和125I-UdR联合治疗在抑制肿瘤生长方面作用更加显著.
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溴脱氧尿嘧啶核苷免疫荧光法标记海马脑片齿状回新增殖神经元的方法
由于溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)是DNA 成分胸腺嘧啶核苷类似物,故细胞可以摄取 BrdU 来代替胸腺嘧啶核苷,并复制新的 DNA 单链;同时,BrdU 的大分子特征使它具有抗原性.
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~(125)I-脱氧尿嘧啶核苷DNA靶向治疗膀胱癌实验研究
~(125)I-脱氧尿嘧啶核苷(deoxyuridine,UdR)是脱氧胸腺嘧啶核苷(deoxythymidine,TdR)的类似物,可实现~(125)I的DNA靶向放射治疗,这为恶性肿瘤分子水平治疗提供了一种新方法.笔者在前期体外实验~([1])的基础上,建立了荷人膀胱癌裸鼠移植瘤模型,进行了瘤内注射~(125)I-UdR后药物有效性、放射性分布和安全性研究,现报道如下.
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125IUdR对裸鼠原位膀胱癌的治疗作用
目的 观察膀胱内灌注125Ⅰ-脱氧尿嘧啶核苷(125IUdR)对裸鼠原位膀胱癌治疗作用.方法 建立裸鼠原位膀胱癌模型,设立对照组、MMC组、125IUdR组和联合组.对照组不予任何处理,MMC组、125IUdR组和联合组分别予膀胱灌注1 g/L的丝裂霉素(MMC)0.1 ml、18.5 kBq/10 μl的125IUdR 0.1 ml和18.5 kBq/10 μl的125IUdR 0.1 ml联合腹腔注射氨甲喋呤(MTX)(注射量为20mg/kg体重)治疗.通过流式细胞仪(FCM)分析、病理学检查、Caspase-3检测和生存分析比较各组的治疗情况.结果 MMC组、125IUdR组和联合组裸鼠的平均膀胱肿瘤重量均明显小于对照组,抑瘤率分别为33.45%、31.46%和50.27%;125IUdR组和联合组肿瘤细胞的S期百分比低于对照组[分别为(3.9±0.7)%和(0.18±0.03)%,而凋亡指数明显高于对照组[分别为(3.367±1.629)%和(25.767±11.875)%;Caspase-3检测三个治疗组凋亡细胞数(评分分别为4.67、4.67和9分)多于对照组(评分为1.33分);三个治疗组裸鼠的平均生存时间(分别为35.33、36.67、44.67d)较对照组(为29.33 d)延长.结论 膀胱内灌注125IUdR对裸鼠原位膀胱癌的治疗安全有效;125IUdR能选择性的杀伤DNA合成期S期的肿瘤细胞,显著抑制膀胱癌细胞的增殖,干扰膀胱癌细胞的DNA合成,延长实验裸鼠的生存期;氨甲喋呤联合125IUdR具有协同效应,可增强疗效.
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~(125)I脱氧尿嘧啶核苷在大鼠原位膀胱癌模型中的生物学分布
放射性核素~(125)I是俄歇电子(AE)释放体,足以达到使一次DNA双链断裂(DSB)的要求?而细胞膜和胞质内无明显细胞毒性.
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人参皂苷Rg1对脑缺血沙土鼠神经干细胞存活率和学习记忆能力的影响
目的观察人参皂苷Rg1对脑缺血沙土鼠海马区干细胞存活率以及动物学习记忆能力的影响.方法6 min的短暂性全脑缺血之后3~5周之内,依次通过避暗实验和Morris 水迷宫实验观察缺血对动物学习记忆能力的影响;并用组织学和免疫组织化学的方法观察缺血发生后40 d时动物海马区神经元的损伤程度以及齿状回区存活下来的干细胞数目. 结果长期给予人参皂苷Rg1可以显著提高海马区新生功能细胞的存活率,保护CA1区神经元细胞免受缺血性损害;同时明显改善全脑缺血对沙土鼠被动回避记忆能力造成的损伤,并提高动物的空间学习记忆能力.结论人参皂苷Rg1可以有效改善或提高脑缺血沙土鼠的学习记忆能力,其机制可能与促进海马区神经再生功能以及保护CA1区神经元有关.
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痫性发作后的神经再生研究进展
传统观点认为,中枢神经系统缺乏再生能力,创伤和癫痫等病理过程引发的神经元丢失等病理改变无法逆转.一些细胞增殖标记物如5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷(5-bronmo-dexyuridine,BrdU)及逆转录病毒的应用,使得人们发现在啮齿类动物的中枢神经系统内至少有两个区域存在神经再生(neurogenesis)能力:齿状回颗粒细胞下区(Subgranular Zone,SGZ)和侧脑室下区(Subventricular Zone,SVZ).