首页 > 文献资料
-
人胃癌SGC7901/VCR裸鼠移植瘤模型的建立及耐药性检测
目的 建立人胃癌SGC7901/VCR裸鼠移植瘤模型,并检测其多药耐药性,为进行肿瘤多药耐药逆转剂的筛选和体内实验研究奠定基础.方法 采用皮下接种法建立裸鼠移植瘤模型;观察裸鼠生长状况;移植瘤生长情况;进行瘤重及瘤体积比较;移植瘤P-gp耐药蛋白表达;原代培养细胞,检测移植瘤模型多药耐药性.结果 人胃癌SGC7901/VCR裸鼠移植瘤组织病理学检查为低分化腺癌,移植瘤组织原代细胞培养后,P-gp表达强阳性+ + +,具有多药耐药性,模型建立成功.结论 成功建立了人胃癌SGC7901/VCR裸鼠多药耐药移植瘤模型,为胃癌耐药研究提供了较理想的动物模型.
关键词: 胃癌 SGC7901/VCR细胞 多药耐药 裸鼠移植瘤模型 -
逆转录病毒载体介导反义K-ras基因治疗胰腺癌的实验研究
目的:分离及克隆胰腺癌细胞基因组中K-ras基因片段,构建含反义K-ras癌基因逆转录病毒载体并探讨其对胰腺癌细胞增生、凋亡的影响及可能的分子机制.方法:设计2对PCR引物,分别在上下游引物中引进BamHI和EcoRI位点,以胰腺癌细胞株BxPC-3、PC-3基因组DNA为模板扩增K-ras基因外显子1、4及侧翼序列,将目的基因克隆入逆转录病毒载体pLXSN中,构建重组质粒,经PT-67细胞包装后获得重组逆转录病毒.将该重组逆转录病毒转染上述细胞,经G418筛选获得稳定细胞,应用MTT、流式细胞仪和免疫组化法分别研究其增生、凋亡和对胰腺癌p21蛋白表达;建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,观察反义K-ras基因体内治疗效果.结果:成功构建含反义K-ras基因的重组逆转录病毒载体.反义K-ras基因抑制胰腺癌细胞增生,诱导细胞凋亡、下调K-rasmRNA和P21蛋白表达,并抑制裸鼠胰腺癌移植瘤的生长.结论:反义K-ras基因可使胰腺癌细胞增生受到抑制,并可诱导细胞凋亡和下调K-rasmRNA和P21蛋白表达.
-
SLP-2siRNA对裸鼠胃癌移植瘤细胞增殖及凋亡的影响
目的:探讨SLP-2 siRNA对裸鼠胃癌移植瘤细胞增殖及凋亡的影响.方法:设计合成化学修饰的SLP-2 siRNA,将胃癌细胞SGC-7901接种于裸鼠皮下建立裸鼠胃癌移植瘤模型,随机分为转染SLP-2 siRNA组、阴性对照组和空白对照组,于肿瘤局部分别多点多次注射化学修饰SLP-2 siRNA、阴性对照siRNA及生理盐水,检测3组移植瘤细胞增殖及凋亡状况,RT-PCR及免疫组织化学技术检测移植瘤细胞内SLP-2 mRNA及蛋白的表达.结果:与两对照组相比,注射化学修饰的SLP-2 siRNA后,裸鼠胃癌移植瘤细胞生长速度减慢、移植瘤体积减小(P=0.009,P=0.003).抑制瘤率分别为26.74%和30.15%,细胞凋亡无明显变化(P>0.05),肿瘤细胞内SLP-2 mRNA及蛋白的表达量降低.结论:SLP-2 siRNA可抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长,但对细胞凋亡无影响,提示LP-2基因参与促进胃癌细胞增殖.
-
ZD7155对人胰腺癌抑制作用的体内研究
目的近的研究表明,血管紧张素Ⅱ1型受体在胰腺癌组织和细胞中存在高表达,本研究观察血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂对人胰腺癌细胞系裸鼠移植瘤模型的肿瘤抑制作用.
-
实验性胰腺癌动物模型研究进展
从上世纪70年代用化学方法诱导制作出胰腺癌动物模型以来,经过数十年的发展,各国学者又设计出了多种胰腺癌动物模型并对其进行了大量的实验研究.上世纪90年代的裸鼠移植瘤模型,尤其是通过外科原位移植(SOI)组织学完整的瘤组织建立的"种植鼠"模型,和近年的基因工程模型,是更为接近人体肿瘤特征的动物模型.现将有关研究进展介绍如下.
-
系列胆囊癌实验模型生物学特性的比较
为了开展胆囊癌有关的基础研究,我们引进了3个已经建成的胆囊癌细胞系,并自建了一株胆囊癌裸鼠移植瘤模型STSX-01[1].我们对其在形态、生长特性、运动侵袭能力、体内成瘤性以及一些肿瘤相关蛋白的表达等方面进行了对比研究.
-
内皮抑素对荷卵巢上皮性癌细胞系ES-2细胞裸鼠的抗血管生成作用
肿瘤的生长和转移与肿瘤区血管生长有密切关系,分期越晚,分化越差,肿瘤内血管密度(MVD)越高.抑制和破坏肿瘤区新生血管的生长,阻断其血液供应导致肿瘤细胞坏死,并阻断其转移,成为治疗实体肿瘤的一种新途径[1].1997年,O′Reilly等[2]体外实验发现,内皮抑素对牛毛细血管内皮细胞有特异的抑制增殖作用,而对非血管内皮细胞、平滑肌细胞等无抑制作用;体内实验证明,内皮抑素可抑制鸡胚尿囊膜的毛细血管生长.近年来,已有数种作用机理不同的这类药物正在进行临床试验.目前,内皮抑素已应用于多种肿瘤的体内实验[3-5].本研究采用裸鼠移植瘤模型,观察内皮抑素对人卵巢上皮性癌(卵巢癌)移植瘤内肿瘤新生血管生成的抑制作用,现报道如下.
-
99mTc-HL91人肺腺癌乏氧显像的体内外实验研究
99mTc-HL91(99mTc-4,9-二氮-2,3,10,10-四甲基十二烷-2,11-二酮肟),是一种良好的乏氧组织显像剂,具有合成简单,容易标记,标记率高,不具细胞毒性,使用安全,体外稳定的优点.笔者以肿瘤乏氧及照射中乏氧的变化为切入点,观察SPCA-1人肺腺癌细胞及裸鼠移植瘤模型接受不同剂量X线照射后对99mTc-HL91的摄取变化.
-
白细胞介素24和替尼泊苷联合抑制裸鼠人胶质瘤模型肿瘤生长的机制研究
目的观察白细胞介素24(IL-24)与替尼泊苷(VM-26)对裸鼠人胶质瘤模型肿瘤生长的抑制作用是否相互协同增效.方法先建立人胶质瘤动物模型,随机分组,瘤内注射Ad5F35-IL-24,腹腔注射VM-26,观察肿瘤生长情况;再用Western blot分析IL-24蛋白表达情况.接着用免疫组织化学染色检测各组肿瘤组织的血管密度(MVD)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况.结果 Ad5F35-IL-24感染胶质瘤组织后IL-24蛋白高表达,Ad5F35-IL-24+VM-26组的胶质瘤的生长受到抑制明显,Ad5F35-IL-24+VM-26组的微血管生成明显减少(P<0.05),且其VEGF和bFGF表达也明显减少(P<0.05).结论 IL-24和VM-26对裸鼠人胶质瘤模型肿瘤生长的抑制作用相互协同增效,其机制可能与IL-24诱导胶质瘤组织中VEGF和bFGF表达的减少,抑制胶质瘤微血管生成有关.
-
IL-24抑制宫颈癌裸鼠移植瘤生长的初步研究
目的 探讨基因重组质粒pDC316-hIL-24对裸鼠人宫颈癌移植瘤生长和浸润转移的抑制作用,以及其与nm23H1表达变化的关系.方法 将18只造模成功的人宫颈癌Hela细胞裸鼠模型随机分为3组,每组6只:BPS缓冲液时照Ⅰ组,空质粒Ⅱ组,IL-24重组质粒Ⅲ组.观察各组裸鼠饮食、体重等一般状况,记录各组裸鼠移植瘤体积、绘制生长曲线.观察裸鼠肿瘤附近淋巴结转移情况,实验结束后根据瘤体重量计算肿瘤抑制率.应用RJ-PCR法检测移植瘤IL-24的表达,并用免疫组化法nm23H1蛋白表达变化.结果 基因重组质pDC316-hIL-24在裸鼠体内转染成功,且有明显的抑瘤效果,抑瘤率为42.9%,与对照组、空粒组差异有统计学意义(P<0.03).IL-24重组质粒组肿瘤淋巴结转移较其他组少,差异有显著(P<0.05).免疫组化结果显示,IL-24组的转移抑制基因nm23H1蛋白表达明显增多,与其余2组比较差异有统计学意义(P<0.001).结论 重组质粒pDC316-hIL-24能明显抑制宫颈癌裸鼠肿瘤模型的生长,并可能通过上调nm23H1的表达发挥抗肿瘤生长和浸润转移的作用.
-
白细胞介素24对裸鼠人宫颈癌Hela细胞移植瘤抑制作用的探讨
目的:探讨基因重组质粒pDC316-hIL-24对裸鼠人宫颈癌模型的肿瘤生长及凋亡的作用.方法:于5周龄裸鼠腋窝外侧皮下注射1×107个/mL Hela细胞悬液100μL,将15只构建成功的人宫颈癌Hela细胞裸鼠模型随机分为3组,分别于瘤体内注射转染试剂Lipofectamine 2000与基因重组质粒pDC316-hIL-24(A组)、空质粒pDC316(B组)以及磷酸盐缓冲液(C组),比较干预后各组移植瘤的体积及抑瘤率.应用RT-PCR法测定移植瘤中hIL-24的表达,HE染色观察各组肿瘤组织形态学变化,免疫组化方法研究肿瘤细胞凋亡情况.结果:①IL-24基因成功转染入肿瘤细胞并在其中成功表达,至实验结束时,B组和C组移植瘤体积大于A组(F=63.395,P<0.05);A组的平均抑瘤率高于B组(t=130.920,P<0.01).②病理学观察见A组宫颈癌细胞有局灶性坏死,细胞变大,胞质疏松,核深染,可见核固缩、核溶解、核碎裂,染色质成团状.③免疫组化结果显示,A组BCL-2蛋白表达低于其他2组(F=6.164,P<0.05),而其同源蛋白BAX表达高于其他2组(F=58.426,P<0.05).结论:基因重组质粒pDC316-hIL-24对宫颈癌裸鼠模型肿瘤生长具有明显的抑制作用,其可能通过激活细胞凋亡通路而诱导肿瘤细胞凋亡.
-
Ad-PTEN 联合PI3K 抑制剂对人乳腺癌裸鼠移植瘤的治疗研究
目的 本研究的目的 是观察表达PTEN 的重组腺病毒(Ad-PTEN)联合PI3K 抑制剂LY294002 对人乳腺癌细胞株MCF-7 裸鼠移植瘤的抑制作用,并初步探讨其作用机制.方法 建立MCF-7 裸鼠移植瘤动物模型:24 只MCF-7 细胞株移植成功的裸鼠分为四组,即空病毒载体对照组、DMSO 对照组、LY294002 用药组、Ad-PTEN 与LY294002 联合用药组.定期测量裸鼠的体重和肿瘤直径;应用Real-time PCR 检测肿瘤细胞中PTEN、PI3K、AKT、NF-KB、CyclingD1、Bcl-2 的表达水平.结果 相对于对照组和P I3K 抑制剂单独用药组,联合用药组对肿瘤生长的抑制作用显著增强(P <0.05),且联合用药组肿瘤组织中P I3K、A K T、N F -KB、CyclingD1、Bcl-2 的表达下降(P<0.05),而PTEN 的表达升高(P<0.05).结论 Ad-PTEN 与PI3K 抑制剂的联合用药可以增强对人乳腺癌细胞株MCF-7 裸鼠移植瘤的生长抑制作用.
-
人胃癌裸鼠模型的建立及应用
构建人胃癌裸鼠移植瘤模型是目前研究人类胃癌生物学行为和抗肿瘤实验性治疗的主要方法之一.1969年Rygaard[1]等首次成功将人类结肠癌移植于裸鼠,开辟了利用动物研究人类肿瘤的广阔前景.
-
胃泌素对人结肠癌裸鼠移植瘤增殖活性的影响
结肠癌是常见的恶性肿瘤,目前尚缺乏有效的全身治疗方法.近年来发现胃肠激素,特别是胃泌素与部分胃肠肿瘤的发生、发展有关.我们利用人结肠癌SW480裸鼠移植瘤模型,观察在五肽胃泌素(pentagastrm,PG)作用下,移植瘤体积、重量、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、组织核仁区嗜银蛋白(silver-stained nuclear organizerregion protein,AgNORs)的变化,探讨胃泌素对人结肠癌移植瘤增殖活性的影响及临床意义.
-
视网膜母细胞瘤动物模型的研究进展
视网膜母细胞瘤动物模型的建立对研究肿瘤的发生机理,正确评价各种治疗方案等具有重要的意义.本文对视网膜母细胞瘤动物模型从裸鼠移植瘤模型到转基因小鼠模型的发展,其原理、实验方法和特点,以及新的研究动态进行综述.
-
~(125)I-脱氧尿嘧啶核苷DNA靶向治疗膀胱癌实验研究
~(125)I-脱氧尿嘧啶核苷(deoxyuridine,UdR)是脱氧胸腺嘧啶核苷(deoxythymidine,TdR)的类似物,可实现~(125)I的DNA靶向放射治疗,这为恶性肿瘤分子水平治疗提供了一种新方法.笔者在前期体外实验~([1])的基础上,建立了荷人膀胱癌裸鼠移植瘤模型,进行了瘤内注射~(125)I-UdR后药物有效性、放射性分布和安全性研究,现报道如下.
-
多肽HM-3对人非小细胞肺癌裸鼠移植瘤抑制作用研究
目的检测HM-3类不同血管生成抑制剂治疗人非小细胞肺癌裸鼠移植瘤的药效学,考察血管生成抑制剂与肿瘤微环境的相互作用,为临床确定治疗方案提供参考和依据。方法建立人非小细胞肺癌A549的裸鼠移植瘤模型,以多西他赛(10 mg·kg-1)为阳性对照药物,评价了在肿瘤体积≥300 mm3给予有效、过高剂量HM-3和贝伐单抗对肿瘤生长的抑制作用。结果动物实验表明,肿瘤的体积≥300 mm3给药,阳性对照组多西他赛具有很好的抗肿瘤活性。G2多西他赛(10 mg·kg-1)组的瘤重抑瘤率为60.80%。G3 HM-3(3 mg·kg-1)组、G4 HM-3(48 mg·kg-1)组、G5 Avastin(5 mg·kg-1)组抑瘤效果不佳,瘤重抑瘤率分别为43.60%、-34.80%、44.40%。结论由于受肿瘤生长阶段、肿瘤微环境、作用靶点等影响,血管生成抑制剂HM-3有一定抑制肿瘤生长的效果,但效果不佳。HM-3抑瘤效果在(0~6 mg·kg-1)范围内存在剂量依赖关系。而HM-3(48 mg·kg-1)过高剂量对人非小细胞肺癌A549裸鼠移植瘤无抑制作用,表现促进作用。特殊量效关系提示临床使用血管抑制剂时应注意使用剂量。
-
莪术醇与奥沙利铂联合肿瘤内注射对裸鼠胃癌移植瘤生长、瘤细胞增殖的影响及其机制
目的:观察莪术醇与奥沙利铂联合肿瘤内注射对裸鼠胃癌移植瘤生长、瘤细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法20只裸鼠,建立胃癌移植瘤模型,将其随机分为对照组、莪术醇组、奥沙利铂组、联合组各5只,对照组肿瘤内注射生理盐水(0.05 mL/10 g),莪术醇组肿瘤内注射莪术醇(100 mg/kg),奥沙利铂组肿瘤内注射奥沙利铂(30 mg/kg),联合组肿瘤内注射莪术醇(100 mg/kg)与奥沙利铂(30 mg/kg),每4 d 1次,共4次。观察各组肿瘤生长情况,MTT法测算各组肿瘤组织中的瘤细胞存活率,荧光定量PCR检测各组肿瘤组织Bcl-2、Caspase-3 mRNA,免疫组化法检测各组肿瘤组织Bcl-2、Caspase-3蛋白。结果与对照组相比,联合组、莪术醇组、奥沙利铂组肿瘤体积小、重量低、瘤细胞存活率低、Caspase-3表达高、Bcl-2表达低,且联合组变化更明显( P均<0.05)。结论莪术醇联合奥沙利铂肿瘤内注射可抑制裸鼠胃癌移植瘤生长并抑制瘤细胞增殖,这可能与上调Caspase-3、下调Bcl-2表达有关。
-
红毛五加多糖对荷人喉癌裸鼠抗癌作用的研究
目的 采用人喉癌裸鼠移植模型及电镜观察,研究红毛五加多糖的抗肿瘤药理作用和可能机制.方法 建立人喉癌裸鼠移植模型,观测红毛五加多糖(AGP)与对照组的抑癌率;电镜观察AGP引发的癌细胞超微结构改变.结果 AGP对裸鼠移植人喉具有明显的抑制作用,平均抑瘤率为47.21%,对荷癌裸鼠体重增长无明显抑制作用,透射电镜观察发现AGP可诱导大量肿瘤细胞凋亡和少量直接坏死.结论 AGP对人喉癌有明显的抑制作用,诱导癌细胞凋亡是其主要作用机制,对实验动物的生长无明显影响.
-
敲除NET-1基因对肺癌细胞行为和肿瘤生长的影响
NET-1基因是新近报道的肿瘤相关分子基因,与肿瘤细胞增殖、迁移、浸润相关.我们通过靶向性短发卡RNA( shRNA)敲除肺癌A549细胞中NET-1基因的表达,研究其对A549细胞癌生物学行为的影响,进一步制备荷人肺腺癌裸鼠移植瘤模型,观察沉默NET-1基因后对裸鼠体内肿瘤生长的影响,探讨肺癌中NET-1基因表达的意义.一、材料与方法将NET-1基因的shRNA真核表达载体转染A549细胞,实时定量聚合酶链反应( RT-qPCR)、Western blot法分别检测细胞内NET-1 mRNA和蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)法和流式细胞仪分别检测增殖与不同周期细胞百分比;