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露蜂房提取物对H22肝癌小鼠防治作用及其机制的实验研究
目的 观察露蜂房提取物对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对腹水瘤小鼠生存期的影响,并探讨其抗肿瘤作用机制.方法 将80只小鼠随机分为2批次,每批次40只,分别于右腋下及腹腔接种H22肝癌细胞制作实体瘤和腹水瘤模型.各批次随机分为四组,盐水对照组、5-FU组、露蜂房提取物高剂量组(简称露峰房高剂量组)、露蜂房提取物低剂量组(简称露峰房低剂量组),每组10只.实体瘤模型组连续用药14 d,次日处死取瘤称重,计算抑瘤率,免疫组化技术检测Histone H1、Cyclin B1的表达.腹水瘤模型组连续用药14d,记录各组小鼠生存天数,计算生命延长率.结果 露蜂房高剂量组对小鼠肝癌细胞的生长抑制率为38.06％,Histone H1表达增加,而Cyclin B1表达降低,与盐水对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).并可明显延长腹水瘤小鼠生存期.结论 露蜂房提取物对肝癌细胞有抑制作用,其抑瘤作用机制可能与Histone H1、Cyclin B1调控有关.
关键词： 露蜂房提取物 肝癌 小鼠 Histone H1 Cyclin B1 -
土槿乙酸诱导前列腺癌DU-145细胞周期阻滞的机制研究
目的:探讨土槿乙酸(pseudolaric acid B,PLAB)对人前列腺癌细胞株DU-145细胞增殖和细胞周期的影响.方法:MTT法检测PLAB对细胞生长抑制作用；Hoechst 33342荧光染色分析细胞死亡特征；流式细胞术检测细胞周期；Real-time PCR和Western blot检测周期相关基因cyclin B1,CDK1和cyclin D1的表达变化.结果:PLAB明显抑制DU-145细胞生长,且抑制作用呈浓度-作用时间依赖性(P＜0.05),其24,48,72 h的IC50分别为4.53,2.39,2.08 μmol·L-1.5μmol·L-1PLAB处理细胞24 h,细胞出现核染色质凝集、凋亡小体等典型凋亡特征,随着PLAB浓度升高,G2/M期细胞比例明显增大并表现出时间依赖性(P＜0.05),同时伴有cyclin B1和CDK1呈高表达状态(P＜0.05),cyclin D1呈低表达状态(P＜0.05).结论:PLAB可抑制DU-145细胞生长,引起细胞G2/M期阻滞,伴随cyclin B1和CDK1呈高表达状态,可能与其调控周期相关蛋白降解有关.
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Cyclin B1、CDK1在食管鳞癌组织中的表达及临床意义
目的: 探讨食管鳞癌组织中细胞周期蛋白Cyclin B1和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK1表达及其临床病理学意义.方法: 应用免疫组织化学SP法对52例食管鳞癌(组织学Ⅰ级8例, Ⅱ级20例, Ⅲ级24例;有淋巴结转移20例, 无淋巴结转移32例;原位癌16例, 侵袭性癌36例包括浸润至黏膜下层、肌层、全层)及其配对的癌旁正常组织进行Cyclin B1、CDK1的检测, 分析其阳性表达与食管鳞癌患者临床病理因素的关系.结果: 食管鳞癌组织中Cyclin B1、CDK1的阳性表达高于癌旁正常食管黏膜组织, 2组差异都有统计学意义(71.2% vs 2.0%, 65.4%vs 3.9%, 均P <0.05). 食管鳞癌组织中CyclinB1、CDK1的表达都与性别、年龄无关;与组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关(均P <0.05). Cyclin B1阳性表达强度与CDK1的阳性表达强度之间呈正相关(r = 0.697, P <0.05) .结论: Cyclin B1、CDK1的高表达会促进食管鳞癌的发生与发展. 而且食管鳞癌中CyclinB1与CDK1的表达密切相关, 可作为食管鳞癌生物学行为预测的参考指标.
关键词： 食管鳞癌 Cyclin B1 细胞周期蛋白依赖性激酶 免疫组织化学 -
苦参碱对大鼠原发性肝癌防治作用及其机制的研究
目的:研究苦参碱对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导的大鼠原发性肝癌的防治作用及其可能的机制.方法:SD大鼠46只,模型组:21只,DEN35 mg/kg灌胃,2次/周,共16周;苦参碱组:15只,DEN灌胃的同时给予苦参碱3 mg/(kg·d)灌胃,共20周;空白对照组:10只,每日等体积生理盐水灌胃.大鼠肝脏HE染色观察病理改变,免疫组化SP法观察凋亡抑制蛋白Survivin、细胞周期蛋白Cyclin B1在肝脏的表达.结果:苦参碱组较模型组死亡率降低(40.0%VS 76.2%),P＜0.05;病理检查示,苦参碱组较模型组成癌率低(53.3%讲90.5%),P＜0.05;免疫组化检测示,Survivin和Cyclin B1两种蛋白在模型组表达多,空白组表达少,苦参碱组表达较空白组多而较模型组少,苦参碱组与模型组比较差异有统计学意义,P＜0.05.结论:苦参碱对DEN诱导大鼠原发性肝癌有防治作用,其机制可能与降低Survivin及Cyclin B1表达有关.
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辐射对恶性脑胶质瘤细胞放射敏感性的影响及其机制
目的 观察辐射对人脑恶性胶质瘤细胞株SHG-44辐射敏感性的影响,并探讨辐射抗性产生的机制.方法 使用胶质瘤细胞株SHG-44及经单次照射10 Gy后连续培养15代的辐射后细胞株SHG-4410 Gy,采用集落形成实验评估辐射对两种细胞株辐射敏感性的影响,流式细胞仪检测两种细胞株的辐射前后细胞周期时相分布及凋亡率,并用RT-PCR法检测cyclin B1 mRNA和miR-21的表达水平,Western blot法检测信号转导子和转录激活子3(Stat3)蛋白表达水平.结果 比较D0、SF2,SHG-44细胞(D0 =2.35、SF2=0.62),低于SHG-4410 Gy细胞(D0=3.22,SF2=0.74).与SHG-44细胞相比,SHG-4410 Gy细胞G2/M期比例减少,S期比例增多(F =22.21,P＜0.05).照射前后SHG-4410 Gy cyclinB1 mRNA相对量大于SHG-44细胞株(t=3.1、4.1,P＜0.05).照射前后的早期凋亡率分别为SHG-44 (17.60±0.26)％和(28.00±0.36)％,SHG-4410 Gy(4.20±0.30)％和(5.17±0.65)％,SHG-4410 Gy细胞与SHG-44细胞相比,早期凋亡率明显下降(t=58.0,P＜0.01).qRT-PCR及Western blot法检测SHG-4410 Gy细胞的miR-21表达及Stat3蛋白表达均较SHG-44升高.结论 照射后SHG-44细胞辐射抗性增加,可能与辐射上调细胞周期信号传导通路中的靶基因cyclinB1导致的G2/M期细胞比例减少有关；同时,辐射导致细胞miR-21表达增高,降低细胞的凋亡.
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宝藿苷-Ⅰ对人食管癌细胞Eca-109增殖及细胞周期的影响
目的 研究香加皮中宝藿苷-Ⅰ对人食管癌细胞Eca-109细胞周期的影响及其作用机制.方法 采用MTT法分析不同质量浓度宝藿苷-Ⅰ(12.5、25、50 μg/mL)分别作用24、48、72 h后,对Eca-109细胞增殖的影响;流式细胞术分析宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞周期的影响;RT-PCR技术检测宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞Cyclin B1mRNA表达的影响;Western blotting方法检测宝藿苷-Ⅰ对Eca-109细胞Cyclin B1蛋白表达的影响.结果 25、50μg/mL宝藿苷-Ⅰ均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(P<0.05),作用48 h的IC50为24.8μg/mL.25、50μg/mL宝藿苷-Ⅰ作用48 h后,随宝藿苷-Ⅰ质量浓度的增加,Eca-109细胞的G0/G1期细胞比例明显下降,G2/M期细胞比例明显提高,细胞的Cyclin B1蛋白及mRNA表达水平降低,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01).结论 香加皮宝藿苷-Ⅰ可抑制Eca-109细胞增殖,使细胞周期阻滞,该作用町能与下调细胞Cyclin B1表达有关.
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姜黄素对人食管癌细胞Eca-109增殖及细胞周期的影响
目的 研究姜黄素对人食管癌细胞Eca-109细胞周期的影响及其作用机制.方法 采用MTT法分析不同浓度姜黄素对Eca-109细胞增殖的影响,采用流式细胞术分析姜黄素对Eca-109细胞周期的影响,采用RT-PCR技术检测姜黄素对Eca-109细胞Cyclin B1 mRNA表达的影响,采用Western-blotting方法检测姜黄素对Eca-109细胞Cyclin B1蛋白表达的影响.结果 20,40,60μmol/L姜黄素均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(P均＜0.05),特别是姜黄素作用24h后,随姜黄素浓度增加,Eca-109细胞的G0/G1期细胞比例明显下降而G2/M期细胞比例明显提高,Cyclin B1蛋白与mRNA表达水平均降低,与对照组比较均有显著性差异(P均＜0.01).结论 姜黄素可抑制Eca-109细胞增殖,使细胞周期阻滞,该作用可能与下调细胞Cyclin B1表达有关.
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人脑胶质瘤中cyclin B1的表达及其与细胞增殖活性的关系
目的 研究人脑胶质细胞瘤中细胞周期素B1(cyclin B1)的表达水平,及其胶质瘤细胞增殖活性的关系.方法 采用SABC免疫组化方法检测62例人脑胶质瘤和14例正常脑组织标本中cyclin B1和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平,观察并对比各病理等级中表达水平.结果 cyclin B1在正常脑组织中表达率为7.1%(1/14),其阳性率和平均标记指数随着胶质瘤病理分级的增高而明显升高(P<0.05).双元相关性分析发现cyclin B1与PCNA的表达呈显著正相关(Pearson相关系数r=0.576,P<0.01).结论 人脑胶质瘤中cyclin B1的表达与病理学分级和肿瘤细胞增殖活性关系密切,可能是肿瘤恶性增殖的促进因素.
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细胞周期蛋白在食管癌中的表达及意义
目的 探讨食管癌组织中细胞周期蛋白(CyclinD1、CyclinA、CyclinB1、CyclinE)的表达规律,其与食管癌临床病理参数的关系.方法 采用免疫组化技术检测CyclinD1、CyclinA、CyclinB1、CyclinE在58例食管癌组织和45例正常食管黏膜组织中的表达情况.结果 CyclinD1、CyclinA、CyclinB1、CyclinE在正常食管黏膜组织中低表达.随着食管癌分化程度的降低,CyclinD1、CyclinA、CyclinB1、CyclinE表达的阳性率明显升高,高分化组、中分化组与低分化组间有显著差异(P＜0.05).结论 可通过免疫组织化学法分析细胞周期的数据,这有利于肿瘤分级,并与预后相关.
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Cyclin B1和p21在妊娠期高血压产妇胎盘组织中的表达及其临床意义
目的:观察CyclinB1和p21在妊娠期高血压产妇胎盘组织中的表达并探讨其临床意义.方法:采用免疫组化MaxVision法检测正常胎盘组织(20例)、妊娠期高血压胎盘组织(30例)、轻度子痫前期胎盘组织(30例)和重度子痫前期(30例)产妇胎盘组织中的cyclin B1和p21蛋白表达,并分析其与妊娠期高血压病情严重程度的相关性.结果:妊娠期高血压、轻度子痈前期、重度子痈前期胎盘组织中cyclinB1蛋白的表达均显著低于正常胎盘组织,差异均有统计学意义(P＜0.05),妊娠期高血压、轻度子痈前期、重度子痈前期胎盘组织中p21蛋白表达均显著高于正常胎盘组织,差异有统计学意义(P＜0.05).妊娠期高血压患者病情的严重程度与其胎盘组织中cyclinB1的蛋白表达呈显著负相关(r=0.641,P=0.000)；而与其胎盘组织中p21蛋白的表达呈显著正相关(r=0.635,P=0.000).结论:Cyclin B1蛋白的表达下调和p21蛋白的表达上调可能参与了妊娠期高血压的发生发展,且二者在胎盘组织中的表达水平与妊娠期高血压病情的严重程度显著相关.
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紫花牡荆素体外抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖的研究
背景与目的:紫花牡荆素(Casticin)是一种从蔓荆子中提取的具有广泛药理活性的多甲基黄酮化合物.有研究表明Casticin能诱导多种肿瘤细胞凋亡,但其对人宫颈癌细胞的作用尚缺乏文献资料.本研究旨在探讨Casticin抑制体外培养人宫颈癌HeLa细胞增殖作用及其机制.方法:MTT法检测Casticin对人宫颈癌HeLa细胞活性的抑制作用;平皿集落形成法检测Casticin对HeLa细胞集落形成率的影响;流式细胞术(FCM)检测Casticin对HeLa细胞周期的影响;采用Western blot分析蛋白表达的变化.结果:Casticin对人宫颈癌HeLa细胞增殖活性有较强的抑制作用,呈剂量和时间依赖性,作用48 h的IC50值为2.82 μ g/mL;与对照组比较,细胞集落形成率明显下降(P＜0.05);Casticin作用48 h,以浓度依赖方式阻滞HeLa细胞于G2/M期,同时降低Cyclin B1蛋白表达,增高P21蛋白表达.结论:Casticin抑制HeLa细胞的增殖作用可能与其降低Cyclin B1蛋白表达、活化P21蛋白有关.
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乳腺癌中组织14-3-3σ和cyclin B1的表达及其临床意义
目的:探讨14-3-3σ和cyclin B1蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征之间的关系.方法:选择2006年11月至2009年11月在辽宁医学院附属第一医院手术治疗的乳腺癌患者95例乳腺癌和30例癌旁组织(距癌边缘5 cm)的标本,患者年龄为31-85岁,中位年龄58岁.免疫组织化学PV法和Western blotting检测14-3-3σ和cyclin B1蛋白在乳腺癌和癌旁组织中的表达,分析两者与乳腺癌临床病理特征之间的关系以及两者的相关性.结果:Western blotting与免疫组化实验结果显示,14-3-3σ蛋白在乳腺癌中表达率为22.1%(21/95),显著低于癌旁组织的93.3%(28/30)(P<0.01);14-3-3σ蛋白的表达与乳腺癌组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05).Cyclin B1蛋白在乳腺癌中的表达率为69.5%(66/95),显著高于癌旁组织的40%(12/30)(P<0.05);CyclinB1蛋白的表达与乳腺癌淋巴结转移相关(P<0.05).乳腺癌组织中14-3-3σ和cyclin B1蛋白的表达呈负相关(r=-0.333,P=0.001).结论:14-3-3σ和cyclin B1蛋白与乳腺癌的发生、转移相关,两者联合检测可为乳腺癌诊断和治疗提供参考.
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p34cdc2和cyclin B1在宫颈癌中的表达及临床意义
目的:研究细胞周期蛋白p34cdc2和cyclin B1在官颈癌组织中的表达水平,并探讨它们的表达与宫颈癌患者临床病理资料之间的相关性.方法:采用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)法和Western印迹法,对62例原发性宫颈癌和15例对照宫颈组织进行检测,定量分析p34cdc2和cyclin B1的mRNA和蛋白质的表达水平.结果:在宫颈癌组织中p34cdc2和cyelin B1的mRNA和蛋白质表达水平明显高于对照宫颈组织(P=0.004,P=0.013和P=0.016,P=0.029),而且主要表现为过表达.p34cdc2和cyclin B1之间存在显著性正相关,mRNA和蛋白质表达的相关系数分别为0.527(P=0.001)和0.432(P=0.022).p34cdc2和cyclin B1的mRNA表达与官颈癌淋巴结转移之间存在密切关系(P=0.02,P=0.001),但与患者的年龄、临床分期、病理类型和分化程度无关(P＞0.05).结论:p34cdc2和cyelin B1是宫颈癌中的重要调控分子,可促发癌细胞克服细胞周期G2/M期控节制点进入M期,促进肿瘤的发生与发展.p34cdc2和cyclin B1的高表达可能成为研究宫颈癌发生机制和淋巴转移的新的分子标志.
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杏仁核注射Aβ 25-35后大鼠脑内细胞周期蛋白、tau蛋白和Bax蛋白的异常表达
近年来研究发现, 阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease, AD)病人脑内神经元细胞周期相关蛋白的异常表达与AD相关病理改变存在关联.为探讨β-淀粉样蛋白(β-amyloid, Aβ)的毒性作用能否导致成年脑神经元表达细胞周期相关蛋白, 以及细胞周期相关蛋白表达与神经损伤之间的关系, 我们运用免疫组化、积分光密度分析等方法对Aβ 25-35多肽片段单侧杏仁核注射的大鼠脑进行了研究.结果显示, Aβ 25-35注射的大鼠脑内除了有与神经纤维缠结相关的磷酸化tau 蛋白和凋亡相关蛋白Bax蛋白水平增加外, 术后7 d细胞周期相关蛋白cyclin A和cyclin B1蛋白在神经元内异常表达, 但术后21 d时cyclin A的表达有所降低, 而cyclin B1在脑内神经元中已检测不到; 免疫荧光双标结果显示Aβ 25-35注射后7 d的大鼠脑内有较多的cyclin B1和Bax、 cyclin B1和磷酸化tau蛋白共存的神经元, 而Bax与磷酸化tau蛋白阳性信号很少共存在同一细胞上.以上结果提示, Aβ可导致成年脑神经元表达细胞周期相关蛋白, 这些神经元可能会通过与Bax相关的凋亡途径死亡, 或首先导致与AD神经纤维缠结相关的tau蛋白磷酸化.
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兔精子发生过程中cyclin B1基因表达和蛋白定位的发育阶段依赖性
利用原位杂交和免疫组化等方法, 研究兔精子发生过程中生精细胞cyclin B1 mRNA的表达和蛋白定位特点.结果显示: 兔生精上皮中cyclin B1 mRNA主要分布在初级精母细胞中, 直至圆形精子细胞仍然存在, 于精子细胞的变态过程中逐渐消失. 在伸长的精子细胞和精子中未检测出cyclin B1 mRNA.Cyclin B1蛋白在进入分裂期的精原细胞和精母细胞中表达; 在圆形精子细胞和伸长的精子细胞中呈现大量的cyclin B1蛋白.上述结果表明: 在兔精子发生过程中, cyclin B1 mRNA表达和蛋白定位具有发育阶段依赖性的特征.
关键词： Cyclin B1 兔 精子发生 生精细胞发育阶段依赖性 -
干扰PTEN基因表达对人宫颈癌细胞系HeLa细胞周期的影响及相关机制研究
目的:研究干扰PTEN表达对HeLa细胞细胞周期分布的影响并探索其相关机制.方法:以人宫颈癌细胞系HeLa为实验对象,利用慢病毒转染技术导入PTEN-特异性短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰PTEN表达,采用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测转染前后PTEN及细胞周期蛋白Cyclin B1 mRNA和蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期分布变化,蛋白酶体抑制剂MG-132处理细胞后利用Western blot检测Cyclin B1蛋白稳定性变化.结果:PTEN shRNA作用HeLa细胞后,PTEN mRNA及蛋白表达水平较对照组显著降低;下调PTEN表达后,细胞周期中G2/M期细胞比例与对照组相比明显增加,Cyclin B1蛋白表达水平下降,但Cyclin B1 mRNA水平与对照组相比无明显差异.MG-132处理细胞后,PTEN干扰组中Cyclin B1蛋白表达与未处理组相比明显增加.结论:在HeLa细胞中干扰PTEN表达会导致细胞周期阻滞于G2/M期,这可能与细胞周期相关蛋白Cyclin B1表达水平降低有关.
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子宫颈癌中Plk1和Cyclin B1、p21 WAF1的表达及其临床意义
目的：探讨Plk1(polo-like kinase1)和Cyclin B1、p21WAF1在子宫颈癌中的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法利用组织芯片技术,结合免疫组化EliVision 法对102例子宫颈癌、20例子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)、20例正常子宫颈组织中Plk1和Cyclin B1、p21WAF1的表达进行检测,并分析相关数据。结果 Plk1在子宫颈癌、CIN 中的阳性率分别为70．5%、55．0%,明显高于正常子宫颈组织(10%),差异有统计学意义(P <0．01)。Cyclin B1在子宫颈癌、 CIN 中的阳性率分别为52．9%,30．0%,明显高于正常子宫颈组织(10．0%),差异有统计学意义(P <0．01)。p21WAF1在子宫颈癌、CIN 中的阳性率分别为23．5%、10．0%,明显高于正常子宫颈组织(0),差异有统计学意义(P <0．05)。Plk1、Cyclin B1和 p21WAF1在子宫颈癌、CIN 中的表达差异均无统计学意义(P >0．05)。Plk1表达与子宫颈癌间质浸润深度相关(P <0．05)。Cyclin B1表达与子宫颈癌间质浸润深度及淋巴结转移相关(P <0．05)。p21WAF1在子宫颈癌中的表达与组织学分级相关(P <0．01)。组织学分级低的子宫颈癌中p21WAF1阳性率高。Plk1和Cyclin B1在子宫颈癌中的表达呈正相关(rs =0．297,P =0．002)。Plk1和p21WAF1在子宫颈癌中的表达呈负相关(rs =-0．403,P <0．001)。结论 Plk1、Cyclin B1和p21WAF1的表达与子宫颈癌的发生、发展相关,且前两者与子宫颈癌预后相关,三者联合检测有可能成为子宫颈癌临床治疗的新靶点。
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MPF及细胞周期调控因子p18、p21、E2F-1在食管上皮癌变过程中的表达及意义
目的 探讨食管癌变过程中有丝分裂促进因子(Mphase promoting factor,MPF)(Cyclin B1/CDK1复合物)及其相关细胞周期调控因子p18、p21、E2F-1的变化与相互关系.方法 选取35例食管鳞癌组织(同一病例包括食管鳞癌、上皮内瘤变及正常食管黏膜组织),采用组织芯片及免疫组化EnVision两步法分别观察各组中Cyclin B1、CDK1、p18、p21及E2F-1的蛋白表达变化及其相互关系.结果 Cyclin B1及CDK1蛋白阳性率在食管上皮癌变过程中逐渐升高,MPF(Cyclin B1/CDK1复合物)在食管鳞癌组织中呈高表达,阳性率为68.6％.p18、p21及E2F-1蛋白表达在正常食管上皮→低级别上皮内瘤变→高级别上皮内瘤变→癌组织中逐渐升高,在食管鳞癌中均呈高表达.在食管鳞癌中,Cyclin B1表达与CDK1、p18、p21及E2F-1表达均呈显著正相关,CDK1与p21表达分别与p18表达呈正相关.结论 在食管癌变的过程中,G2/M期转换阶段重要的分子有丝分裂促进因子MPF(Cyclin B1/CDK1复合物)呈高表达.MPF与p18、p21、E2F-1具有协同作用,共同促进食管鳞癌的发生、发展.p21蛋白过表达应在食管上皮内瘤变早期阶段引起重视.联合检测Cyclin B1、CDK1、p18、p21及E2F-1蛋白表达有助于食管癌早期诊断及病变发生发展的评估.
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橘红素上调Cyclin B1和抑制ERK磷酸化诱导人胃癌AGS细胞周期阻滞
目的 探讨橘红素对人胃癌AGS细胞增殖和周期的作用及其机制.方法 采用MTT法观察橘红素对人AGS胃癌细胞增殖的作用;流式细胞仪检测橘红素对细胞周期的影响;Western blot检测橘红素对Cyclin B1、Cyclin D1、Cyclin E1和ERK、p-ERK蛋白表达的影响.结果 橘红素可明显抑制AGS胃癌细胞的增殖(P<0.01),呈时间和剂量依赖性.橘红素作用于AGS细胞24 h,S期细胞百分比明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);作用48和72 h,S期阻滞消失,G2/M期细胞百分比增高(P<0.05,P<0.01).作用48 h,橘红素可上调Cyclin B1蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),对Cyclin D1和Cyclin E1蛋白表达无明显影响;对ERK蛋白表达无影响,可降低p-ERK蛋白的表达(P<0.01),且呈剂量依赖性.结论 橘红素可明显抑制人AGS胃癌细胞的增殖,使细胞阻滞于S期和G2/M期,主要机制可能是通过抑制ERK磷酸化和上调CyclinB1蛋白表达.
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土槿乙酸抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导G2/M期阻滞
目的 探讨土槿乙酸(pseudolaric acid B,PLAB)对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和细胞周期的影响.方法 MTT法检测PLAB对细胞生长抑制作用；Hoechst 33342荧光染色分析细胞死亡特征；流式细胞术检测细胞周期；Real time-PCR 和Western blot检测周期相关基因Cyclin B1、CDK1和Cyclin D1的表达变化.结果 PLAB明显抑制SKOV3细胞生长,且抑制作用呈浓度-作用时间依赖性(P＜0.05),其24、48和72 h的IC50值分别为2.44、1.60、2.94 μmol·L-1.5μmol·L-1 PLAB处理细胞24 h,细胞出现核染色质凝集、凋亡小体等典型凋亡特征,随着PLAB浓度升高,G2/M期细胞比例明显增大并表现出时间依赖性(P＜0.05),同时伴有Cyclin B1和CDK1呈高表达状态(P＜0.05),Cychn D1呈低表达状态(P＜0.05).结论 PLAB可抑制SKOV3细胞生长,引起细胞G2/M期阻滞,伴随Cyclin B1和CDK1呈高表达状态,可能与其调控周期相关蛋白降解有关.
