番茄红素对人前列腺癌细胞(DU145)生长抑制的离体和整体水平研究

目的 研究番茄红素对人前列腺癌细胞DU145的影响。方法 体外培养的人前列腺癌细胞DU145经番茄红素作用后用苔盼蓝染色进行活细胞计数，绘制生长曲线并计算抑制率；应用流式细胞仪分析番茄红素对DU145细胞周期和凋亡的影响。制作裸鼠人前列腺癌模型，观察番茄红素在整体动物上的作用。结果 番茄红素可以明显抑制DU145细胞的生长，且呈剂量-效应和时间-效应关系。10、20、40μmol/L处理细胞7 d后，细胞增长的抑制率分别为10.76％、92.90％、99.11％(P＜0.01)。裸鼠人前列腺癌模型上的研究显示，6％番茄红素油树脂可显著抑制腺瘤的生长，300 mg/kg剂量组腺癌抑制率可达到75.76％(P＜0.05)。用经番茄红素处理过的细胞致瘤力消失。流式细胞仪分析显示番茄红素可影响该细胞周期并引起细胞凋亡，凋亡率高达42.42％。结论 番茄红素可以在离体细胞和整体动物水平明显抑制雄激素非依赖型人前列腺癌DU 145，其抑制机制可能是通过影响人前列腺癌细胞的生长周期和诱导其凋亡而实现。

土槿乙酸诱导前列腺癌DU-145细胞周期阻滞的机制研究

目的:探讨土槿乙酸(pseudolaric acid B,PLAB)对人前列腺癌细胞株DU-145细胞增殖和细胞周期的影响.方法:MTT法检测PLAB对细胞生长抑制作用；Hoechst 33342荧光染色分析细胞死亡特征；流式细胞术检测细胞周期；Real-time PCR和Western blot检测周期相关基因cyclin B1,CDK1和cyclin D1的表达变化.结果:PLAB明显抑制DU-145细胞生长,且抑制作用呈浓度-作用时间依赖性(P＜0.05),其24,48,72 h的IC50分别为4.53,2.39,2.08 μmol·L-1.5μmol·L-1PLAB处理细胞24 h,细胞出现核染色质凝集、凋亡小体等典型凋亡特征,随着PLAB浓度升高,G2/M期细胞比例明显增大并表现出时间依赖性(P＜0.05),同时伴有cyclin B1和CDK1呈高表达状态(P＜0.05),cyclin D1呈低表达状态(P＜0.05).结论:PLAB可抑制DU-145细胞生长,引起细胞G2/M期阻滞,伴随cyclin B1和CDK1呈高表达状态,可能与其调控周期相关蛋白降解有关.

下调人高迁移率族蛋白1对人前列腺癌细胞PC-3的影响

目的 研究小干扰RNA(siRNA)抑制高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因对PC-3侵袭和转移的影响.方法 构建真核表达载体Pgenesil-1/HMGB1 siRNA,转染PC-3细胞系,通过RT-PCR和Westem blot检测HMGB1的mRNA及蛋白;通过细胞划痕、transwell 和明胶酶谱分析检测PC-3体外侵袭能力.结果 成功构建siRNA表达载体Pgene-sil-1/HMGB1 siRNA,可使PC-3细胞HMGB1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),并能有效抑制PC-3体外侵袭和转移活性(P<0.05).结论 应用siRNA技术能有效的抑制基因的表达,同时也能有效抑制PC-3细胞的体外侵袭和转移,为肿瘤的生物学治疗提供了新思路.

缺氧诱发因子1-α和血管内皮生长因子在Wilms'瘤中的联合表达/人前列腺癌细胞缺乏低密度脂蛋白受体及其调节剂SREBR2的反馈调节/聚乙二醇-水蛭素治疗慢性肾衰病人的药效学和药物动力学

雷帕霉素抑制人前列腺癌细胞PC-3生长及转移的实验研究

目的:对人前列腺癌细胞PC-3进行雷帕霉素的药物试验,并观察其对细胞生长及转移的影响.方法:抽取2012年3月至2013年11月本院经体外培养的人前列腺癌细胞P C-3作为研究样本,分别采用0ng/mL、10ng/mL、25ng/mL的雷帕霉素对其进行药物干预,并采用MTT法以及流式细胞仪等检测措施分别观察PC-3细胞的增殖、周期以及凋亡等变化.结果:在0ng/mL的雷帕霉素下,PC-3的生长增殖未受到任何抑制作用.分别在12h、24h以及36h的培养时间下,25ng/mL的雷帕霉素浓度具有更高的细胞生长抑制率,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05),分别在两种不同的浓度下,12h、24h以及36h之间两两比较,差异具有统计学意义(P<0.05).分别在12h、24h以及36h的培养时间下不同浓度的雷帕霉素组间两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05),分别在三种不同浓度下,对不同培养时间的组别进行比较,除了0ng/mL下24h与36h的培养时间下PC-3凋亡作用差异具有统计学意义(P>0.05),其他组间两两相比均具有统计学意义(P<0.05).结论:雷帕霉素对人前列腺癌细胞PC-3具有较好的抑制生长及转移效果,且浓度越高,培养时间越长,效果越明显.

枸杞多糖对人前列腺癌细胞生长影响

目的观察枸杞多糖对体外培养的雄激素非依赖型人前列腺癌PC-3细胞存活率、细胞周期及其凋亡的影响.方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测枸杞多糖对PC-3细胞作用的时间效应和剂量效应,并计算细胞生长抑制率;流式细胞仪观察枸杞多糖处理PC-3细胞后细胞周期以及细胞凋亡的改变.结果枸杞多糖对PC-3细胞的增殖有明显的抑制作用,抑制率可达87.84%,且呈剂量-效应和时间-效应关系;流式细胞仪分析显示,枸杞多糖可影响该细胞周期并引起细胞凋亡,凋亡率高达40%.结论枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞的生长有明显抑制作用,其机制可能是通过诱导人前列腺癌细胞凋亡和影响其生长周期而实现.

染料木素对前列腺癌细胞恶性增殖的抑制作用

目的 研究染料木素(Gen)对人前列腺癌细胞(PC-3)的影响.方法 将PC-3细胞在DMEF-12培养液(含10%胎牛血清)中采用开放式单层贴壁培养,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法、细胞核分裂指数、集落形成和3H-TdR掺入试验方法进行检测.染料木素剂量设为10,20,40,80μmol/L.以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂对照.结果 不同剂量的染料木素对PC-3细胞的生长增殖有不同的抑制作用.在MTT试验中,不同浓度染料木素对PC-3细胞的7d抑制率分别为27.7%,58.8%,72.3%,84.4%.在核分裂指数试验中,随着染料木素剂量的增高,其核分裂指数明显降低;遮集落形成试验中,随着染料木素剂量的增加,集落形成抑制作用增加;在3H-TdR掺入试验中,可见随着染料木素剂量的增高,3H-TdR掺入到PC-3细胞中明显的减少,与阴性对照组比较差异有统计学意义.结论 染料木素对PC-3细胞的生长增殖有明显抑制作用,可能是染料木素抑制前列腺癌的机制之一.

人前列腺癌多药耐药细胞系的建立

目的:建立人前列腺癌多药耐药细胞系.方法:以顺铂为诱导药物,人前列腺癌细胞PC3M为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人前列腺癌多药耐药细胞系PC3M/CDDP;MTT法检测药物敏感性,免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P-gP)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达.结果:经顺铂诱导建立的人前列腺癌细胞系PC3M/CDDP对顺铂、丝裂霉素、阿霉素、5-氟尿嘧啶、长春新碱等药物的50%抑制浓度(IC50)分别为(0.603±0.102)、(0.201±0.056)、(0.267±0.067)、(1.676±0.321)和(0.657±0.227)mg·L-1,与PC3M细胞系比较差异有显著性(P＜0.05);免疫细胞化学染色结果显示,PC3M/CDDP细胞系MRP、P-gP表达强度明显大于PC3M细胞系(P＜0.05);PC3M/CDDP细胞系的细胞倍增时间为40.5 h,与PC3M细胞系(48.6 h)比较差异无显著性(P＞0.05).结论:成功建立稳定的人前列腺癌PC3M/CDDP细胞系,该细胞系具有对多种抗癌药耐药及细胞增殖未受影响的特点,可应用于下游实验.

双炔失碳酯α、β单体体外抗前列腺癌作用比较

目的 比较双炔失碳酯(ANO)的两个差向异构体α、β-ANO体外抗前列腺癌作用的差别.方法 氧化铝柱层析法分离纯化α、β单体,薄层分析法定性检测所分离的产物;在常规培养液中,以4～32 μmol·L~(-1)的α、β-ANO分别作用于人前列腺癌非激素依赖型细胞DU145、PC-3和激素依赖型细胞L1A、LNCaP、RV1,作用时间分别为3 d,5 d,SRB法测细胞生存率;在去除激素培养液中,以不同浓度的α、β-ANO分别作用于激素依赖型细胞,同时加入雄激素拟似剂(R1881),SRB法测细胞生存率;以32μmol·L~(-1)的α、β-ANO分别作用于LNCaP、DU145细胞,相差显微镜观察细胞形态和数量的变化.结果 对于非激素依赖型和激素依赖型细胞,α-ANO作用均强于β-ANO,且二者作用差距具有时间和剂量依赖性;α-ANO对抗雄激素的促细胞生长作用强于β-ANO,具有时间和剂量依赖性;相差显微镜观察结果表明,α-ANO作用后,细胞形态及数量变化较之β-ANO更为显著.结论 α-ANO体外抗前列腺癌作用强于β-ANO.

γ射线诱导下PUMA基因在人前列腺癌细胞中的作用

目的 研究在γ射线诱导下PUMA基因(p53 up-regulated modulator of apoptosis)在人前列腺癌细胞(p53野生型LNCaP细胞、p53变异型PC-3细胞)中的作用效果.方法 采用MTT方法检测在3、5、8 Gy照射剂量的γ射线诱导下人前列腺癌细胞的抑制率;采用RT-PCR的方法检测在3、5、8 Gy照射剂量的γ射线诱导下PUMA基因的表达情况.结果 在γ射线诱导下LNCaP细胞抑制率较PC-3细胞抑制率高(P<0.01);随γ射线照射剂量的增加,LNCaP细胞中PUMA-mRNA的表达越明显(P<0.05).结论 γ射线诱导下PUMA基因可促使人前列腺癌LNCaP细胞凋亡.

二甲双胍对体外PC-3人前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响及机制

目的 探讨二甲双胍对体外PC-3人前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探究其可能作用机制.方法 不同浓度(0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 mg/mL)盐酸二甲双胍作用于PC-3人前列腺癌细胞24 h时,采用MTT法选择佳药物作用剂量.将3.0 mg/mL盐酸二甲双胍作为实验药物剂量(观察组)作用于PC-3人前列腺癌细胞,并设不予进行药物处理的对照组,作用24、48、72 h时,采用MTT法检测各组细胞的增殖能力.另取PC-3人前列腺癌细胞,分别给予含有0、3.0、6.0、9.0 mg/mL盐酸二甲双胍的培养液(设置为CK、MET1、MET2、MET3组),于37℃恒温箱中培养24、48 h后,采用细胞划痕试验及Transwell试验检测各组细胞的迁移、侵袭能力;培养48 h后,采用Western blotting法检测各组细胞迁移、侵袭能力相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及人源葡萄糖转运蛋白1(Glut1)、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP,也称MMP-14)的表达活性.结果 不同浓度盐酸二甲双胍作用于PC-3人前列腺癌细胞24 h时,细胞增殖能力随盐酸二甲双胍浓度增高而递减(P<0.05).与对照组比较,观察组24、48、72 h时细胞OD值均低(P均<0.05).划痕后0 h,CK、MET1、MET2、MET3四组无细胞区域占比比较,P>0.05,划痕后24、48 h,四组无细胞区域占比比较,P<0.05.CK及MET1组于划痕后0、24、48 h时无细胞区域占比比较,P均<0.05.CK组细胞迁移指数于划痕后24 h、48 h时大于MET1、MET2组(P均<0.05);划痕后48 h时,MET2组的迁移指数低于MET1组(P<0.05);MET3组的迁移指数为负数.侵袭细胞数比较,MET1

不同转移潜能人前列腺癌细胞中KAI1基因的表达

目的:探讨人前列腺癌细胞转移潜能与KAI1基因表达的关系.方法:运用Northern印迹杂交检测KAI1基因在不同转移潜能人前列腺癌细胞中的表达,以甲基化分析和聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)研究KAI1低表达的机制.结果:在转移性人前列腺癌细胞系PC3和PC3M中不论其转移潜能强弱,KAI1 mRNA表达均降低.甲基化分析未发现KAI1基因5'-启动子部位CCm5CGGG甲基化.PCR-SSCP分析显示:KAI1基因第7外显子在PC3和PC3M均显示异常带,PC3M较弱.结论:KAI1基因表达降低与人前列腺癌的转移有关,但其转移潜能的强弱可能不取决于KAI1的调控.KAI1基因的低表达与5'-启动子部位CCm5CGGG甲基化无关,可能与该基因的突变失活有关.

TMSG-1在人前列腺癌细胞株与前列腺癌组织中的表达及意义

目的：探究TMSG-1在人前列腺癌细胞株与前列腺癌组织中的表达及意义。方法将2013年新乡市中心医院收治的含有前列腺癌细胞株的60例患者作为研究组，并选择同期含有前列腺癌组织的60例患者作为对照组。运用半定量RT-PCR、Western blotting、细胞爬片免疫组化PV-9000法来检测TMSG-1在人前列腺癌细胞株和前列腺癌组织中的表达情况。结果 TMSG-1在研究组中mRNA以及蛋白质的表达量均显著高于在对照组中的表达，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 TMSG-1在前列腺癌细胞株中的表达明显高于在前列腺癌组织中的表达，其可能会成为评判前列腺癌细胞的浸润和转移的重要指标。

枸杞多糖对人前列腺癌DU-145细胞株体外抗肿瘤作用

目的 研究枸杞多糖(LBP)对人前列腺癌DU-145细胞的抑制作用及其机制.方法 用不同浓度的LBP分别对细胞作用后,在显微镜下观察细胞形态学变化,用MTT法测其生长抑制率,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞生长周期和凋亡率.结果 不同浓度的LBP对人前列腺癌DU-145细胞均有抑制作用,并呈时间和剂量依赖性；细胞阻滞于G0/G1期,随着LBP浓度的增加,凋亡细胞增加,呈现一定的剂量-反应关系.结论 LBP对人前列腺癌DU-145细胞增殖有抑制作用,其机制可能与其阻断细胞生长周期,诱导细胞凋亡有关.

人前列腺癌细胞中1-α-羟化酶活性降低与25-羟维生素D3抑制生长的易感性降低的关系

mda-7/IL-24对人前列腺癌细胞的凋亡诱导效应