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人肿瘤转移抑制基因1转染对人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外生物学行为的影响
目的 研究人肿瘤转移抑制基因1(TMSG-1)转染引起人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外生物学行为的改变及对肿瘤转移表型的影响.方法 构建TMSG-1全长编码序列真核表达载体,稳定转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞系,G418筛选挑取TMSG-1过表达阳性克隆.通过MTT比色实验、软琼脂集落形成实验检测体外细胞生长能力;Matrigel穿膜实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力.TMSG-1瞬时转染24、48 h,分别用Annexin-Ⅴ碘化丙啶(PI)双标流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡情况.结果 从稳定转染TMSG-1的MDA-MB-231细胞中挑取3个TMSG-1-FLAG融合蛋白表达量较高的阳性克隆株用于下游生物学行为实验.MTT比色实验及软琼脂集落形成实验结果显示,TMSG-1正义转染各组(S1、S2、S3)细胞增殖速度及克隆形成数与未转染组及转染空载体组相比均明显减低(P＜0.05);Matrigel穿膜实验显示,正义转染各组的穿膜细胞数[(72.3±8.1)个、(85.0±4.2)个、(73.5±7.8)个]与未转染组[(187.5±2.1)个]和转染空载体组[(162.3±6.8)个]相比均明显减少(P＜0.01).TMSG-1瞬时转染MDA-MB-231细胞,转染24和48 h均可引起细胞凋亡率的增加(P＜0.05).结论 TMSG-1表达上调可使人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外生长速度、锚着不依赖性生长能力及侵袭能力明显降低,细胞凋亡增加.该实验为TMSG-1是一个新发现的肿瘤转移抑制基因提供了证据.
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肿瘤转移抑制基因1抑制前列腺癌细胞的增殖和侵袭能力
目的 研究肿瘤转移抑制基因1(TMSG-1)转染对高转移人前列腺癌细胞体外增殖能力和侵袭能力的影响.方法 将TMSG-1全长真核表达载体稳定转染人前列腺癌细胞高转移亚系PC-3M-1E8,G418筛选,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法选取TMSG-1过表达阳性克隆.通过活细胞计数、二苯基溴化四氮唑蓝(MTF)比色实验、软琼脂集落形成实验检测体外细胞生长能力;Matrigel穿膜实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力.结果 在稳定转染TMSG-1基因的PC-3M-1E8细胞系中,筛选出3株TMSG-1转录活性及蛋白表达水平均明显升高的细胞用于后续生物学行为实验.活细胞计数和MTT比色实验结果显示,从计数第3天起,与空载体对照组和空白对照组相比,3株正义转染组细胞生长速度均明显减慢(P<0.05).软琼脂集落形成实验结果显示,3株正义转染组的细胞软琼脂集落形成数与空载体对照组、空白对照组相比,均明显减少(P<0.05),分别为26.00±3.21、13.33±1.45和32.83±2.18.Matrigel穿膜实验结果显示,正义转染的各组细胞与空载体对照组及空白对照组相比,穿膜细胞数均明显减少(P<0.05),分别为45.33±4.16、54.00±2.83和26.33±3.79.结论 TMSG-1表达上调可使高转移人前列腺癌细胞体外增殖速度、锚着不依赖性生长能力及侵袭能力明显降低,TMSG-1可能通过抑制肿瘤细胞生长和侵袭抑制肿瘤转移潜能.
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TMSG-1基因转染对肿瘤转移表型的影响
目的:研究肿瘤转移抑制基因TMSG-1对肿瘤转移表型的影响.方法:将含TMSG-1全长开放阅读框架的1.5 kb cDNA克隆于pcDNA3,构建正义及反义TMSG-1 cDNA真核表达载体,以脂质体转染人肺巨细胞癌PG的高转移亚系BE1,挑选G418抗性克隆,RT-PCR检测正义或反义TMSG-1 cDNA在转染细胞中的表达,进行转染细胞体外肿瘤生物学行为检测.结果:RT-PCR显示正义TMSG-1 cDNA转染的BE1细胞(BE1-S)中TMSG-1表达明显高于BE1及空载体对照细胞,反义TMSG-1 cDNA转染细胞(BE1-AS)中TMSG-1表达低于空载体对照细胞.与BE1及空载体对照细胞(BE1-V)相比,BE1-AS细胞体外生长较快,软琼脂克隆形成能力明显增强;而BE1-S细胞体外生长能力没有显著改变,但其穿越Matrigel的能力及软琼脂克隆形成能力明显减弱.流式细胞仪分析结果显示BE1-S的G0、G1期的细胞较BE1-V细胞比例增多,并且BE1-S出现了细胞凋亡峰.结论:实验结果表明反义TMSG-1基因转染可增强BE1细胞的体外生长、体外侵袭能力及克隆形成能力.而正义TMSG-1基因转染则使BE1细胞的侵袭能力及软琼脂克隆形成能力减弱,而对细胞体外生长能力无明显影响.结论支持TMSG-1是一个肿瘤转移抑制基因.
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原发及转移前列腺腺癌组织TMSG-1蛋白表达及意义
目的 检测肿瘤转移抑制基因1 (TMSG-1)蛋白在前列腺增生、原发性前列腺腺癌及转移性前列腺腺癌组织的表达,探讨其在肿瘤浸润转移中的作用及其与前列腺癌病人预后的关系.方法 采用免疫组织化学技术检测TMSG-1蛋白在22例前列腺增生、38例原发性前列腺腺癌及18例转移性前列腺腺癌组织中的表达.结果 TMSG-1蛋白在前列腺增生(20/22)、原发性前列腺腺癌(34/38)及转移性前列腺腺癌(10/18)组织中均有表达,原发性前列腺腺癌组织中TMSG-1阳性表达率明显高于转移性前列腺腺癌组织(x2=6.707,P＜0.05);前列腺增生组织中TMSG-1阳性表达率高于转移性前列腺腺癌组织(x2=4.848,P＜0.05);前列腺增生组织中TMSG-1阳性表达率与原发性前列腺腺癌组织无差异(x2 =0.003,P＞0.05).原发性前列腺腺癌组织TMSG-1蛋白的表达与神经侵犯有关(P =0.034 7),而与Gleason评分、邻近组织侵犯及病人年龄均无关(P=0.306 8、0.051 2、0.123 8).Kaplan-Meier生存分析结果表明,TMSG-1蛋白阳性组的生存时间和生存率明显高于TMSC-1蛋白阴性组(x2=5.153,P＜0.05).结论 TMSG-1蛋白在原发性前列腺腺癌组织的表达明显高于转移性前列腺腺癌,TMSG-1蛋白可能与原发性前列腺腺癌的转移过程有关,其表达水平的高低可能作为一个预测前列腺腺癌转移潜能大小的检测指标.
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TMSG-1在人前列腺癌细胞株与前列腺癌组织中的表达及意义
目的：探究TMSG-1在人前列腺癌细胞株与前列腺癌组织中的表达及意义。方法将2013年新乡市中心医院收治的含有前列腺癌细胞株的60例患者作为研究组，并选择同期含有前列腺癌组织的60例患者作为对照组。运用半定量RT-PCR、Western blotting、细胞爬片免疫组化PV-9000法来检测TMSG-1在人前列腺癌细胞株和前列腺癌组织中的表达情况。结果 TMSG-1在研究组中mRNA以及蛋白质的表达量均显著高于在对照组中的表达，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 TMSG-1在前列腺癌细胞株中的表达明显高于在前列腺癌组织中的表达，其可能会成为评判前列腺癌细胞的浸润和转移的重要指标。
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TMSG-1在人前列腺癌细胞株与前列腺癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1,亦称LASS2)在人不同转移潜能前列腺癌细胞株中与前列腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)及细胞爬片免疫荧光组织化学方法,检测TMSG-1在人不同转移潜能前列腺癌细胞株低转移潜能(PC-3M-2134)和高转移潜能(PC-3M-IE8)中的表达.并采用免疫组织化学方法检测TMSG-1在人前列腺增生及前列腺癌组织中的表达,同时探讨其与临床病理特征之间的关系.结果 TMSG-1在PC-3M-284细胞株中的mRNA及蛋白表达(2.70±0.30、75.26±2.68)均明显高于在PC-3M-IE8细胞株中的表达(1.10±0.20、38.08±1.84),差异有统计学意义(P＜0.05).通过免疫组织化学观察表明TMSG-1在前列腺增生及前列腺癌组织中均有表达,但在前列腺增生中的阳性表达率(32/40)明显高于在前列腺癌中的阳性表达率(21/60).两者差异有统计学意义(P＜0.05).并且TMSG-1在前列腺癌组织中的表达与年龄、Gleason分级、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P＜0.05),而与肿瘤的大小无明显相关.结论 TMSG-1在低转移潜能前列腺癌细胞株中的mRNA及蛋白表达明显高于在高转移潜能前列腺癌细胞株中的表达,证明它是一种肿瘤转移抑制基因.TMSG-1在人前列腺增生与前列腺癌组织中的表达之间差异有统计学意义,并且TMSG-1在前列腺癌中的表达与年龄、Gleason分级、淋巴结转移及TNM分期密切相关.
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虫草素对MDA-MB-231细胞增殖及细胞凋亡的影响
目的 研究虫草素对高转移潜能乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及其TMSG-1蛋白表达的影响.方法 采用MTT法观察不同浓度的虫草素(0、1、2、4和8μg/ml)对MDA-MB-231细胞增殖的作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率变化;免疫印迹法检测经不同浓度的虫草素(0、1、2、4和8μg/ml)处理48 h后,MDA-MB-231细胞TMSG-1蛋白的表达.结果 虫草素能够以剂量依赖方式显著地抑制MDA-MB-231细胞增殖(P＜0.01).流式细胞术结果显示,虫草素可显著促进MDA-MB-231细胞凋亡(P＜0.01).虫草素可以呈剂量依赖方式增强MDA-MB-231细胞TMSG-1的表达.与对照组相比,2μg/ml虫草素即可明显上调MDA-MB-231细胞TMSG-1蛋白的表达(P＜0.05).结论 虫草素可以呈剂量依赖方式抑制MDA-MB-231细胞的生长并诱导其凋亡;虫草素可能通过上调MDA-MB-231细胞TMSG-1蛋白的表达,发挥其潜在的抑制肿瘤细胞浸润转移的作用.
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虫草素对MDA-MB-231细胞增殖的影响与TMSG-1表达的研究
目的 研究虫草素对乳腺癌细胞株MDA-MB-231的作用与人肿瘤转移抑制基因TMSG-1mRNA表达的影响,探讨其抗癌作用机制.方法 体外培养乳腺癌细胞株MDA-MB-231,加入虫草素干扰,免疫组化技术检测TMSG-1蛋白表达；半定量RT-PCR检测MDA-MB-231细胞中TMSG-1mRNA表达状况；使用MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用.结果 虫草素可使乳腺癌MDA-MB-231细胞中TMSG-1mRNA与蛋白表达上调,同时对乳腺癌细胞生长有抑制作用.结论 虫草素能抑制乳腺癌细胞的增殖,可以上调TMSG-1 mRNA与蛋白的表达发挥潜在的抗肿瘤细胞转移的作用,为国产新型抗肿瘤药物的临床研发及运用提供实验室依据.
关键词： 虫草素 乳腺癌 MDA-MB-231 TMSG-1 -
乳腺癌TMSG-1蛋白的表达及临床病理意义
目的 评价乳腺癌中TMSG-1蛋白的表达状况及与临床病理指标的可能关系.方法 采用免疫组织化学方法检测100例乳腺浸润性导管癌TMSG-1蛋白的表达,并评价它们与病理分级、临床分期、转移以及预后之间的关系.结果 100例乳腺癌组织TMSG-1表达阳性52例(52.0％),阴性48例(48.0％).TMSG-1的表达阴性与乳腺癌肿瘤大小(P=0.025)、淋巴结转移(P =0.009)、临床分期(P =0.004)以及预后(P=0.005)密切相关;与年龄(P =0.473)和病理分级(P =0.115)无关.结论 TMSG-1的表达在乳腺癌中有统计学意义,其表达随转移和临床分期升高而降低,提示其对乳腺癌的侵袭、转移起着重要作用.TMSG-1可能为一个有用的乳腺癌预后标记.
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TMSG-1和Cyclin D1在食管鳞癌的表达及临床病理意义
目的：探讨肿瘤转移抑制基因－1（TMSG-1）及细胞周期素 D1（Cyclin D1）在食管鳞癌（ESCC）中的表达及其与患者预后的关系。方法：采用SP免疫组化染色法检测136例ESCC及13例正常食管黏膜组织中TMSG-1及Cyclin D1蛋白的表达情况，分析二者与ESCC患者临床病理指标及预后的相关性。结果：（1） TMSG-1与 Cyclin D1在 ESCC 中的阳性率分别为52．2％、65．4％，在正常食管黏膜中的阳性率则分别为100．00％、23．1％，差异具有显著性。（2）TMSG-1及Cyclin D1的异常表达均与ESCC组织学分级、TNM分期及淋巴结转移相关。（3）TMSG-1及Cyclin D1在ESCC的表达呈负相关。（4）TMSG-1、Cyclin D1均是影响ESCC术后生存的独立因素。结论：TMSG-1与Cyclin D1的异常表达在ESCC的发生、发展中可能起协同作用，可作为较为理想的肿瘤标志物辅助判断患者预后并指导临床治疗。
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TMSG-1蛋白在结直肠癌中的表达及意义
目的 探讨TMSG-1蛋白在结直肠癌组织中的表达及其与肿瘤病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学SP法检测98例结直肠癌组织中TMSG-1蛋白的表达,同时选取76例结直肠正常组织作对照.结果 TMSG-1蛋白在结直肠癌和正常结直肠组织中主要表达在细胞质,少量胞核可见着染.76例正常结直肠黏膜组织中TMST-1蛋白均表达阳性,其中11例呈弱阳性,65例强阳性表达.在98例结直肠癌中,32例TMST-1蛋白表达阴性,23例弱阳性表达,43例呈强阳性.两者表达差异有统计学意义(P＜0.05).在结直肠癌患者中TMSG-1蛋白表达与年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小无明显相关(P＞0.05),与肿瘤的浸润深度,分化程度、淋巴结转移及远处转移有明显负相关(P＜0.05).结论 TMSG-1蛋白低表达与结直肠癌恶性程度及肿瘤转移有密切相关,这为结直肠癌治疗提供新的治疗靶点且有可能成为判断结直肠癌细胞浸润及转移的重要预后指标.
