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金雀异黄素抑制人胃癌细胞增殖作用的研究——抑制细胞DNA合成与cyclin D1表达的研究
采用细胞增殖、DNA合成实验观察了金雀异黄素(Gen)对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用,并观察了Gen对人胃癌细胞细胞周期素D1 (cyclin D1)蛋白的表达情况.结果显示,Gen对胃癌细胞生长及其DNA合成有抑制作用,并降低cyclin D1蛋白的表达,且呈剂量-效应关系.结果证实,Gen抑制胃癌细胞增殖作用的机制之一可能是通过抑制DNA合成及抑制cyclin D1的表达.
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芹菜素抑制肿瘤细胞增殖机制研究进展
本文通过参考近年来对芹菜素抑制肿瘤细胞增殖作用的研究的相关文献,于芹菜素对肿瘤细胞的增殖抑制作用机制做了归纳和探讨.研究发现,芹菜素对多种癌细胞都有抑制其生长和促使其凋亡的作用,其对各种癌细胞作用的机理研究已经深入到细胞和分子水平,包括对细胞凋亡和周期相关基因的调控,对细胞周期G0/G1,S及G2/M期的阻滞,对与凋亡相关的线粒体途径和非线粒体途径的各种酶和蛋白表达的影响,抑制肿瘤细胞血管生成以及增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性等.芹菜素抑制肿瘤细胞增殖机理值得我们深入探索,其作为一种自然界广泛存在的抗癌症化合物具有广阔的应用前景.
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氧化苦参碱对结肠癌LoVo细胞c-myc,PSMD9,CDK4mRNA表达的影响
目的:探讨氧化苦参碱( oxymatrine,OM)抑制人结肠癌LoVo细胞增殖和诱导凋亡的分子作用机制.方法:采用流式细胞仪检测LoVo细胞凋亡率以及细胞周期分布；采用荧光定量PCR法检测0.25,0.5 g·L-1 OM对LoVo细胞增殖相关基因c -myc,蛋白酶调解因子9(PSMD9),CDK4的基因表达的影响.结果:0.5 g·L-1以下浓度的OM作用结肠癌LoVo细胞48 h,对细胞凋亡无明显影响.0.25 g·L-1 OM作用48 h时可明显抑制人结肠癌LoVo细胞c-myc基因表达(P＜0.05).0.5g·L-1 OM作用48 h时可明显抑制LoVo细胞c-myc,CDK4的基因表达(P ＜0.01,P＜0.01,).药物作用时间为96 h时,0.5g·L-1 OM可明显抑制c-myc,PSM D9,CDK4基因表达(P＜0.05,或P＜0.01).结论:较低剂量OM显著抑制人结肠癌LoVo细胞增殖的作用机制,可能与下调LoVo细胞c-myc,PSM D9,CDK4表达有关.
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雷公藤甲素通过抗ER磷酸化抑制小鼠4T1乳腺癌增殖作用研究
雷公藤甲素(triptolide,TP)具有显著的抑制肿瘤作用.本研究采用MTT法和结晶紫染色法检测TP对小鼠乳腺癌细胞4T1增殖的影响;流式细胞仪检测TP诱导的4T1细胞凋亡率;Western blot检测4T1中相关蛋白雌激素受体α(estrogenreporter α,ERα),磷酸化ERα(p-ERα),ERβ即,p-ERβ,细胞外信号调节的蛋白激酶(ERK),p-ERK,p38,p-p38,c-Jun氨基末端激酶(SAPK/JNK),p-SAPK/JNK的表达.给药30 d后,活体荧光示踪技术观察TP对4T1-Luc细胞接种的BALB/c雌性小鼠乳腺癌的荧光强度,同时检测肿瘤体积和质量,计算抑瘤率.肿瘤组织苏木素-伊红(HE)染色后观察病理变化;免疫组织化学法(IHC)分析肿瘤组织ERα及ERβ的表达情况.发现TP体外浓度为100,10,1,0.1μmol·L-1时可显著抑制4T1乳腺癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡.TP剂量为200 μg·kg-1时能抑制小鼠乳腺癌的增殖,TP的抗乳腺癌增殖作用与降低ERα,ERβ的磷酸化密切相关,但与MAPK通路的活化无明显相关性.
关键词： 雷公藤甲素 小鼠4T1乳腺癌细胞 抑制增殖 雌激素受体 活体荧光示踪 -
中药复方PC-SPES Ⅱ抑制人前列腺癌细胞LNCaP增殖及其对AR,PSA表达的影响
基于雄激素受体(AR)信号通路探讨中药复方PC-SPESⅡ抑制人前列腺癌细胞LNCaP增殖的作用.采用MTT法检测PC-SPESⅡ对LNCaP细胞增殖的影响,显示PC-SPESⅡ质量浓度为180～1 440 mg·L-1时能显著抑制LNCaP细胞增殖,PC-SPESⅡ作用24,48 h的IC50分别为311.48,199.01 mg.L-1;流式细胞仪检测细胞周期分布的变化发现240 mg·L-1 PC-SPESⅡ能阻滞细胞于G2/M期,在G0/G1峰前出现明显的凋亡峰,随作用时间的增加而升高;同时采用Hoechst 33258染色观察凋亡细胞形态和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测凋亡细胞比例,PC-SPESⅡ质量浓度为480 mg·L-1时凋亡细胞比率增加,作用效果均呈一定剂量依赖性;通过ELISA法检测LNCaP细胞分泌PSA的水平,以25mg.L-1Bic作为阳性对照药,发现480 mg· L-1PC-SPESⅡ能显著降低细胞分泌PSA;采用qRT-PCR和Western blot方法检测AR,PSA mRNA和蛋白表达的变化,结果显示以人工合成雄激素25 μg· L-1R1881诱导LNCaP细胞后,240～480 mg· L-1 PC-SPESⅡ能显著下调AR,PSAmRNA和蛋白表达,抑制AR由细胞质转移入细胞核.以上结果表明,PC-SPESⅡ对LNCaP细胞体外增殖有抑制作用,阻滞细胞周期于G2/M期并诱导细胞凋亡,其机制可能与下调AR,PSA的表达,抑制AR核转位有关.
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黄连素抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导凋亡
黄连素(berberine)对多种肿瘤有抑制增殖和诱导凋亡的作用[1-2],但在卵巢癌中的作用尚未见报道.本研究以人卵巢癌SKOV3细胞为研究对象,观察黄连素对SKOV3细胞增殖抑制作用及凋亡诱导效应.
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维生素D缺乏与危重病患者死亡率的关系研究现状
近年来有关维生素D的研究已经大大改变了人们对维生素D的传统认识.除了其经典的调节钙磷代谢、维护骨骼健康的功能外,维生素D系统在抑制增殖、诱导凋亡、调节免疫、调控胰岛素分泌等多能性作用也已经被越来越多地证实[1].维生素D早已从一种营养素一跃成为一种激素,参与着体内各个系统重要的生理过程.然而,维生素D缺乏的现象却普遍存在[2-4],并且与普通人群和危重病患者的短期和远期的死亡率密切相关[5-7].本文将对维生素D的生化代谢、缺乏现状以及与远期和短期死亡率的关系作一个综述.
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Genistein对人鼻咽癌细胞系CNE抑制增殖和促进凋亡的研究
鼻咽癌是头颈肿瘤中具有鲜明流行病学、组织病理学、临床和治疗学特征的一种肿瘤.研究表明癌细胞的增殖活性是影响鼻咽癌生长进展的主导因素,肿瘤细胞的增殖活性与肿瘤的生物学行为与预后密切相关.
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苦参碱对人视网膜母细胞瘤细胞体外生长增殖的影响
目的 探讨苦参(matrine,Ma)对体外培养的人视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)细胞株增生的抑制作用及对该细胞凋亡的影响.方法 将0.4mmol/L浓度的苦参碱作用于体外培养的人视网膜母细胞瘤细胞株12 h、24 h、48 h,对照组以等量含10%类标准胎牛血清的RPMI-1640培养液替代苦参碱.观察苦参碱对视网膜母细胞瘤细胞生长增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 实验组12h后可观察到细胞开始凋亡,48h内呈时间依赖性.实验组与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05).苦参碱作用Rb细胞12 h、24 h、48 h后早期凋亡细胞分别占凋亡细胞的89.20%、78.97%和76.12%.结论 Ma对Rb细胞的增殖有抑制和凋亡诱导作用,其促进凋亡的能力存在时间依赖性.
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华蟾素注射液多肽成分体外抗肿瘤活性研究
华蟾素是从中华大蟾蜍Bufo bufo gargarizans Cantor的干燥皮提取精制而成的水溶性制剂,已列为国家中药保护品种.其注射液是应用较早的剂型之一,目前广泛应用于多种中晚期肿瘤,如原发性肝癌、胃癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌等[1-3].
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丹参酮ⅡA抑制血管平滑肌细胞增殖的作用机制探讨
目的 研究分析丹参酮ⅡA抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用机制.方法 120只SD大鼠,分为对照组、A组和B组,各40只.取腹主动脉VSMC的培养液进行分组干预,A组使用浓度为30％的25μl胎牛血清(FBS)培养液与剂量为10 ml/L的25μl丹参酮ⅡA,B组使用浓度为30％的25μl FBS培养液与剂量为20 ml/L的25μl丹参酮ⅡA,对照组则是直接在VSMC中加入浓度为30％的50μl FSB培养液.比较三组间平滑肌细胞抑制情况及细胞凋亡情况、p21 mRNA相对表达量.结果 平滑肌细胞抑制情况:A、B组的吸光度值(0.639±0.018)、(0.298±0.015)均低于对照组(1.432±0.121),差异均具有统计学意义(P<0.05);A组吸光度值高于B组,差异具有统计学意义(P<0.05).对照组的细胞凋亡率、p21 mRNA相对表达量均低于A、B组,B组的细胞凋亡率、p21 mRNA相对表达量均高于A组,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 丹参酮ⅡA对VSMC增殖的抑制作用明显,值得推广使用.
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金丝桃素介导的光动力疗法在抑制白血病细胞株增殖中的机制研究
目的 研究光活化后金丝桃素对白血病细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制.方法 荧光显微镜确定金丝桃素的入胞时间,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)技术检测金丝桃素对多种白血病细胞的增殖抑制作用,并计算其半抑制浓度(IC50);采用Annexin V-FITC/PI双标记法检测金丝桃素作用后白血病细胞的凋亡情况,Western blot方法检测Bax,Bcl-2以及caspase-3,8,9蛋白的含量变化.结果 本实验探索了光活化后金丝桃素的佳入胞时间为16 h.光活化后金丝桃素对多种白血病细胞的增殖具有抑制作用,且这种抑制作用具有明显的量效关系(r =0.990 5,P＜O.01).经金丝桃素作用后,白血病细胞发生了明显凋亡,Bax/Bcl-2蛋白比率明显升高,凋亡蛋白caspase-3,8,9被切割活化.结论 金丝桃素通过caspase途径诱导细胞凋亡,从而有效抑制了多种白血病细胞株的增殖.
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白花蛇舌草对膀胱癌EJ细胞株的增殖抑制作用及其机制
目的 探讨分析白花蛇舌草的提取物在膀胱癌EJ细胞株增殖抑制中发挥的作用及其机制.方法 将2016年5月—2017年5月培养的的膀胱癌EJ细胞株按照随机数字法分为对照组和研究组,对照组不加任何物质,研究组的细胞株加入白花蛇舌草的提取物,利用MTT法测定细胞的增殖抑制作用,并利用流式细胞仪检测膀胱癌EJ细胞株的端粒酶含量,观察对比两组细胞株的生长抑制率以及端粒酶的含量.结果 研究组的EJ细胞株加入白花蛇舌草提取物12、24、48、72 h的生长抑制率分别为(7.38±0.49)、(11.94±0.78)、(18.46±0.24)、(28.76±0.57),均明显高于对照组的(5.14±0.38)、(7.96±0.98)、(12.64±0.37)、(15.79±0.76)(P<0.05);而研究组细胞株12、24、48、72 h的端粒酶含量分别为(33.13±1.84)、(25.46±2.79)、(15.34±2.13)、(9.54±1.79),均明显低于对照组的(37.16±2.31)、(31.91±2.78)、(18.49±1.4)、(12.48±2.07)(P<0.05).结论 白花蛇舌草中的提取物应用于膀胱癌EJ细胞中能够有效抑制细胞的增殖作用,作用机制与端粒酶的含量有关,是一种抗肿瘤的新型药物,在临床上值得进一步推广应用,有巨大的参考价值.
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左旋棉酚对HT1080细胞和HSF细胞的抑制增殖作用
目的:探讨左旋棉酚对人纤维肉瘤细胞HT1080和人皮肤成纤维细胞HSF的抑制增殖作用.方法:采用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制率,在倒置显微镜下观察细胞的形态学变化.结果:左旋棉酚对HT1080细胞和HSF细胞均有抑制增殖作用,呈浓度与时间依赖性.左旋棉酚对HT1080细胞作用24、48、72、96小时的IC50分别为56.6、12.6、9.2、7.0μM,而对HSF细胞作用24、48、72、96小时的IC50分别为192.3、53.6、42.5、19.4μM.随着药物浓度的增加,HT1080细胞数逐渐较少,脱落的细胞逐渐增多.而HSF细胞变化不明显.结论:左旋棉酚对人纤维肉瘤HT1080细胞有明显抑制增殖和选择性杀伤作用.
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金雀异黄素抑制人胃癌细胞增殖与G2/M期阻滞作用的体外研究
目的: 研究金雀异黄素(genistein, Gen)对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用及对细胞周期的影响.方法: 采用3H-TdR掺入液闪计数法观察Gen对人胃癌细胞增殖影响,流式细胞仪分析细胞周期分布,免疫组化和Western Blotting分别检测cyclin B、P21waf1/cip1蛋白表达情况.结果: Gen对胃癌细胞生长有显著抑制作用,使细胞生长停滞于G2/M期,并使细胞cyclinB、P21waf1/cip1蛋白表达增加,且呈剂量-效应关系.结论: Gen在此剂量下抑制胃癌细胞增殖、诱导G2/M期阻滞与其稳定cyclinB蛋白和上调P21waf1/cip1蛋白表达有关.
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曲格列酮对多发性骨髓瘤细胞凋亡和血管内皮生长因子分泌的影响
我们应用过氧化物酶增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator-activated Receptorγ,PPARγ)特异性配体曲格列酮(troglitazone,TGZ)作用于多发性骨髓瘤(MM)细胞系RPMI8226、PCM6和U266B,观察TGZ是否具有抑制增殖,诱导MM细胞凋亡及影响其自分泌血管内皮生长因子(VEGF)的作用,初步探讨TGZ作为MM化疗新候选药物的可能性,为临床寻找抗MM新药提供思路.
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鸦胆子油乳制剂对宫颈癌 Hela 细胞的抑制效果及作用机制研究
目的：探讨鸦胆子油乳制剂对宫颈癌 Hela 细胞的抑制效果及作用机制。方法观察不同浓度（5，10μg／mL）鸦胆子油乳处理 Hela 细胞后的形态改变；检测不同浓度鸦胆子油乳（2．5，5，10，20，40μg／mL）处理后对 Hela 细胞的抑制率，并观察鸦胆子油乳处理浓度分别为10，20μg／mL 时细胞周期的变化情况。结果鸦胆子油乳处理宫颈癌 Hela 细胞后出现凋亡小体，且细胞毒作用随时间延长毒性增强；在处理48 h 后，研究组的抑制率均＞60％，72 h 后抑制率均＞80％；伴随鸦胆子油乳浓度的增加，G0～G1期细胞比率降低，S 期及 G2～M 期细胞比率明显增加。10μg／mL 和20μg／mL 鸦胆子油乳处理48 h 后细胞凋亡率分别为60％与70％。结论鸦胆子油乳能够明显抑制宫颈癌 Hela 细胞的增殖，且呈时间依赖性，能够诱导细胞凋亡，且使 Hela 细胞阻滞于 S 期。
关键词： 宫颈癌 Hela 细胞 鸦胆子油乳 抑制增殖 巴氏染色 细胞凋亡 -
雷公藤内酯醇抗血液系统恶性肿瘤机制研究进展
雷公藤内酯醇(triptolide,TL)是从卫矛科雷公藤植物雷公藤中分离到的二萜内酯化合物,与其他结构相似的雷公藤多甙相比,TL具有抗瘤谱较广、抗癌活性强的特性.TL在体内有明显抗鼠白血病和体外抗人鼻咽癌的作用,并可较好地抑制人早幼粒白血病细胞、T细胞淋巴瘤和人肝细胞癌的生长,对淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、宫颈癌、胆管癌等细胞株或人体肿瘤细胞系具有明显地抑制增殖、促调亡和控制转移的作用,并与其他化疗药物有抗肿瘤的协同作用.
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莪术油与SKOV-3和SKOV-3/DDP增殖的量效时效关系
卵巢癌是女性生殖系统常见的三大恶性肿瘤之一，其致死率居妇科恶性肿瘤之首［1］，已成为严重威胁女性生命健康的疾病。卵巢癌治疗以手术为主，辅以放、化疗。又因卵巢癌早期诊断困难，疾病进展迅速，确诊时多属晚期，故其治多依赖化疗。然而化疗药物毒副作用大，化疗耐药常致卵巢癌高复发率、高病死率。研究显示即使初次治疗有效率可达70％，很多患者仍因耐药导致复发、死亡［2］。美国国立癌症研究所监测流行病学及结果数据库资料显示，近30年卵巢癌5年生存率不足40％［3］。统计显示，美国卵巢癌年新发约2．2万例，死亡约1．4万例［4］；我国卵巢癌年新发约5．5万例，死亡约2．3万例［5］。近年来中药成分抑制肿瘤细胞增殖的研究广受关注。中药成分多元、药理作用广泛，可以在多层次、多靶点发挥抑制增殖的作用，且毒副作用小，同时还具有协同治疗肿瘤的作用。研究证实莪术油能抑制人卵巢癌敏感细胞株（SKOV）-3增殖，发挥抗肿瘤作用［6］。本实验以SKOV-3和SKOV-3/DDP为研究对象，采用四甲基偶唑蓝比色法（MTT），研究莪术油能否抑制SKOV-3/人卵巢癌耐药细胞株（DDP）增殖及药物浓度和作用时间与SKOV-3和SKOV-3/DDP增殖的关系。
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染料木素对前列腺癌细胞恶性增殖的抑制作用
目的 研究染料木素(Gen)对人前列腺癌细胞(PC-3)的影响.方法 将PC-3细胞在DMEF-12培养液(含10%胎牛血清)中采用开放式单层贴壁培养,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法、细胞核分裂指数、集落形成和3H-TdR掺入试验方法进行检测.染料木素剂量设为10,20,40,80μmol/L.以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂对照.结果 不同剂量的染料木素对PC-3细胞的生长增殖有不同的抑制作用.在MTT试验中,不同浓度染料木素对PC-3细胞的7d抑制率分别为27.7%,58.8%,72.3%,84.4%.在核分裂指数试验中,随着染料木素剂量的增高,其核分裂指数明显降低;遮集落形成试验中,随着染料木素剂量的增加,集落形成抑制作用增加;在3H-TdR掺入试验中,可见随着染料木素剂量的增高,3H-TdR掺入到PC-3细胞中明显的减少,与阴性对照组比较差异有统计学意义.结论 染料木素对PC-3细胞的生长增殖有明显抑制作用,可能是染料木素抑制前列腺癌的机制之一.
