首页 > 文献资料
-
金雀异黄素抑制人胃癌细胞增殖作用的研究——抑制细胞DNA合成与cyclin D1表达的研究
采用细胞增殖、DNA合成实验观察了金雀异黄素(Gen)对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用,并观察了Gen对人胃癌细胞细胞周期素D1 (cyclin D1)蛋白的表达情况.结果显示,Gen对胃癌细胞生长及其DNA合成有抑制作用,并降低cyclin D1蛋白的表达,且呈剂量-效应关系.结果证实,Gen抑制胃癌细胞增殖作用的机制之一可能是通过抑制DNA合成及抑制cyclin D1的表达.
-
磷脂酰肌醇3'-激酶通路活化对化疗药物诱导的胃癌细胞凋亡的影响
磷脂酰肌醇3'-激酶(PI3'K)信息传导通路的激活已被认为是肿瘤细胞抗凋亡的主要机制之一,我们前阶段对胃癌化疗药物对蛋白激酶B(PKB)及其下游分子的影响进行了研究[1-3],但是PI3'K作为其上游信号分子在其中所起的作用尚不得而知.我们通过观察阿霉素、足叶乙甙对人胃癌细胞系SGC7901的作用,探讨PI3'K信号通路活化对体外胃癌细胞化疗效果的影响并探讨其可能的机制.
-
顺铂对 MKN45胃癌细胞系Δ133p53、PTEN 表达的影响
目的:观察顺铂对人胃癌细胞系p53异构体Δ133p53、PTEN表达的影响。方法不同浓度顺铂作用于MKN45胃癌细胞系,采用MTT法检测细胞的抑制率;巢式逆转录多聚酶链反应( nRT-PCR)法检测p53异构体Δ133p53、PTEN mRNA水平的表达的变化。结果 MTT法检测结果示:MKN45胃癌细胞生长受到抑制,且抑制率随浓度、时间的增加而增加,与药物浓度为0μg/ml的对照组比较,顺铂能显著抑制MKN45胃癌细胞生长,且各组间差异均有统计学意义( P<0.01)。 nRT-PCR法检测结果显示:随着药物浓度增加,Δ133 p53 mRNA表达呈减少趋势,PTEN mRNA表达显著增加。结论在顺铂诱导的人胃癌细胞系MKN45生长抑制实验中,PTEN表达增强可能是细胞生长抑制的重要机制之一,Δ133p53异构体表达减弱可能是PTEN表达增强的重要因素。
-
肿瘤细胞表面血小板免疫相关抗原的表达及其意义
血小板与肿瘤细胞通过各自膜表面表达的糖蛋白受体及其配基的连接作用相互激活以影响肿瘤细胞的转移过程,但在这方面的研究较少.我们曾用CD41、CD61、CD42a、CD42b、CD62、CD63、CD31、CD9、TSP、CD36等血小板单克隆抗体检测11种人癌细胞系,发现它们共同表达CD9、CD42a、TSP、CD63,人胃癌细胞系MGC803还同时表达CD36[1].我们拟对上述肿瘤细胞表面表达的血小板免疫相关抗原的意义进行讨论.
-
新加良附方对移植性人胃癌抑制效应研究
目的 观察新加良附方对移植性人胃癌抑制效应.方法 人源胃癌细胞系(BGC-823)经传代培养后,通过BALB/C-nu裸鼠移植制造肿瘤模型,以5-氟尿嘧啶和不同剂量的新加良附方浸膏进行干预性治疗,用抑瘤率评价新加良附方对BGC-823移植瘤生长的抑制作用.结果 5-氟尿嘧啶组及新加良附方大、中、小剂量组的肿瘤抑制率分别为54.2%、54.3%、36.8%和23.3%;5-氟尿嘧啶组及新加良附方大剂量组与模型组瘤重比较,有统计学意义(P<0.05).结论 新加良附方大剂量组对BGC-823有明显抑制作用.
-
青蒿琥酯对体外人癌细胞HeLa、SACC-83细胞增殖的影响
青蒿琥酯是青蒿素的衍生物,为二氢青蒿素的12-α-琥珀酸酯钠。青蒿琥及其衍生物具有抗疟疾、抗焦虫、抗血吸虫及抗肿瘤等药理活性以及临床的疗效。其抗疟机制被认为是该药化学结构含有过氧桥,在代谢过程中产生自由基的构效特点,使红细胞O2和H2O2活性氧浓度升高[1]。鉴于该化学结构中含有过氧桥,在组织有可能释放氧的机制。我们研究了青蒿琥酯对体外培养的人癌细胞系HeLa、SACC-83细胞增殖的影响。1 材料1.1 药物及试剂:青蒿琥酯,广西桂林制药二厂提供,白色粉剂,用前溶于2 mL 5%NaHCO3溶液中,经过滤除菌,用RPMI-1640培养液稀释。MISO,放射增敏剂,中科院生物物理研究所沈洵教授惠赠,用前溶于RPMI-1640,过滤除菌后,终浓度为1×10-3 mol/L。MTT, Gibco 公司产品,临用前现配制。DMSO(二甲基亚砜),Gibco公司产品。1.2 仪器:德国贺利氏CO2培养箱,日本Olympus倒置显微镜,芬兰Labsystem MS MK3 ELISA检测仪。1.3 细胞系及培养条件:人肝癌细胞系BEL-7402,北京市肿瘤医院研究所提供。人乳癌细胞系BCH,人胃癌细胞系MGC-803,北京市肿瘤医院研究所提供。人涎腺样囊性癌细胞系SACC-83,北京医科大学口腔医学院提供。人舌鳞癌细胞系TC-83,天津医科大学肿瘤医院提供。人宫颈癌细胞系HeLa,本生物技术室提供。2 实验方法2.1 细胞敏感筛选实验:各细胞系传代至指数增殖期,经扩增培养,胰酶-EDTA消化后,计数后配成5×104 cfu/mL。接种于96孔板,培养液为15% FCS RPMI-1640, 5% CO2,37 ℃下培养,试验组分别加入青蒿琥酯(终浓度为6.25,12.5,25,50,100 μg/mL),对照组细胞加入RPMI-1640,继续培养48 h,在终止前4 h,换成无血清PRIM-1640液,加入MTT 2 mg/mL,培养4 h,移液,加入DMSO,振荡,Labsystem MS MK3 ELISA仪570 nm测各细胞系的吸光度(A)。2.2 细胞增殖MTT分析实验:指数增殖期细胞接种,细胞数2×105 cfu/mL,5% CO2,37 ℃,孵育4 h,待贴壁,HeLa细胞系青蒿琥酯12.5~100 μg/mL浓度范围,SACC-83细胞系青蒿琥酯25~100 μg/mL浓度范围,不同浓度药物分别与培养20,44,68 h的细胞接触,于不同时期(20,44,68 h)按Mosman法[2],采用Labsystem MS MK3 ELISA仪570 nm测两种细胞系的A值。2.3 统计学处理:按t检测比较实验和对照各组的A值(细胞生存),采用线性回归计算IC50。
-
鲨鱼软骨制剂对人不同细胞生长抑制作用及其机制的探讨
目的研究鲨鱼软骨制剂(SCP)对人胃癌细胞(MGC80-3)、红白血病细胞(K562)、人结肠高分化腺癌细胞(THC-8908)、人乳腺癌细胞(MCF-7)和人脐静脉血管内皮细胞(VEC340)的生长抑制作用,探讨其作用机制.方法采用盐酸胍抽提,丙酮分级沉淀,烘干,微孔滤膜过滤等步骤从鲨鱼软骨粉中提取鲨鱼软骨制剂(SCP);MTY法检测不同浓度的SCP对体外培养的MGC80-3细胞系、K562细胞系、THC-8908细胞系、MCF-7细胞系和VEC340细胞系的生长抑制作用;Hoechst33342/PI荧光双染法检测细胞凋亡.结果SCP明显抑制MGC80-3、K562、THC-8908、MCF-7和VEC340五种细胞系的生长,其IC50值分别为0.5 mg/ml、0.7 mg/ml、1 mg/ml、1.5 mg/ml和2 mg/ml.凋亡细胞比例在用药后48 h分别达79.9%、44.6%、78.9%、63.3%和44.8%.结论SCP能直接抑制不同肿瘤细胞生长,又能抑制血管内皮细胞的生长,其作用机制与细胞凋亡有关.
-
抗癌活性肽对胃癌细胞HSP70表达的调控
1 实验材料1.1 细胞株人胃癌细胞系BGC-823细胞由郑州大学肿瘤研究所惠赠.1.2 抗癌生物活肽的提取、制备动物经多次诱导后,在相对无菌条件下处死,迅速取出脾脏,冷冻条件下粉碎组织、以离心,超滤、膜分离技术等分离制备抗癌生物活性肽(ACBP).ACBP分离提取液冻干后再溶于生理盐水,浓度7mg/ml,过滤除菌,临用时用高压灭菌的PBS稀释成所需浓度.
-
蒙药巴特尔-7丸对两种癌细胞系的抑制效应
本实验选用蒙药巴特尔-7作用于体外培养的胃癌MGC80-3和结肠癌LOVO细胞,观察该药对这二种细胞生长的影响.1 材料与方法1.1 实验材料 培养基DMEM和RPM1640为Gibco公司产品,胎牛血清为中国医学科学院血液学研究所生产,Hochest 33342、碘化丙啶(PI)、塞唑蓝(MTT)和二甲基亚砜(DMSO)均为Sigama公司产品.蒙药巴特尔-7由国家蒙药制剂中心内蒙古中蒙医医院提供,生产批号030714,蒙成药巴特尔-7由草乌叶、诃子、黑云香等七味药组成.精制法是:麝香另研细末,其余六味粉碎为细粉后加入麝香末混匀,水调为丸,银朱包衣、打光、干燥、消毒即得.用PBS酿成50mg/mL贮液,pH=5.6,0.2 mm滤膜过滤除菌4℃保存,实验时用培养液稀释到所需浓度.
-
奥美拉唑对人胃癌细胞系SGC-7901的促凋亡作用及其机制探讨
质子泵抑制剂(PPI)的问世开创了酸相关性疾病治疗的新纪元.奥美拉唑是目前应用较广泛的PPI,据报道其在体内可通过多个途径、多种机制介入上皮细胞凋亡,在不同病理生理情况下,其对凋亡的影响亦不一致[1,2].本研究通过探讨奥美拉唑对人胃癌细胞系SGC-7901的促凋亡作用及其机制,为临床合理用药提供依据.
-
电穿孔法介导环氧合酶-2基因沉默抑制裸鼠移植瘤的研究
大量研究表明,抑制环氧合酶(COX)-2高表达肿瘤中COX-2的表达可抑制新生血管形成,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖[1].因此,人们希望通过抑制COX-2表达来预防和治疗相关肿瘤.为进一步验证COX-2是否可作为相关肿瘤治疗的靶点,我们采用RNA干扰(RNAi)方法,构建靶向COX-2的短发夹状双链RNA(shRNA)真核表达质粒,在体电穿孔法转染人胃癌细胞系SGC-7901,抑制细胞中COX-2表达,观察裸鼠皮下接种SGC-7901细胞的生长情况.
-
CD44反义寡核苷酸抑制胃癌细胞粘附侵袭的研究
我们将CD44特异反义寡核苷酸转染高转移人胃癌细胞系SGC7901,观察其对CD44基因表达及癌细胞粘附侵袭能力的影响.
-
人胃癌细胞系SGC-7901放射敏感性及异质性的研究
目的 研究人胃癌细胞系SGC-7901及其克隆亚系的放射敏感性.方法 SGC-7901细胞株及其两个克隆亚系(大集落、小集落)的细胞用8 MeV直线加速器电子束以不同剂量照射,分别经48小时、72小时培养及集落培养后,计数并得出各组存活曲线.结果 1. 两个克隆亚系之间的D0值有显著差异(P<0.05);2. 大集落亚系与SGC母系之间在集落形成实验中,其D0值有差异(P<0.05),结论 SGC-7901细胞系及其克隆亚系对放射的敏感性存在着异质性.
-
P27KIP1基因的过表达对人胃癌细胞增殖的影响
我们将P27KIP1基因转染到人胃癌细胞系SGC7901中,观察P27KIP1基因的过表达对人胃癌细胞增殖的影响,现报道如下.
-
人环氧合酶-2(hCOX-2)编码基因的克隆及其反义核酸转染胃癌细胞的初步研究
目的 环氧合酶-2与肿瘤发生的关系已成为肿瘤研究的新热点之 一. 本研究旨在获得hCOX-2 编码基因序列,构建其正、反义真核表达载体,并用反义重组载体转染COX-2高表达的胃癌 细胞,以进一步研究其生物学作用及其在肿瘤发生中的作用机制. 方法 按文献报道的hCOX-2 核苷酸序列设计合成PCR引物,利用总RNA抽取试剂盒从COX-2高表达的培养的人胃癌细胞系 SGC 7901中提取细胞总RNA,反转录合成cDNA,再用PCR方法扩增目的基因序列. PCR产物经DNA序 列测定证实后,利用引物5端引入的EcoRⅠ, XbaⅠ酶切位点,通过粘端连接,将 所获目的 基因分别按正、反两个方向定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1中. 对两种重组质粒分别进 行相应的酶切鉴定. 采用脂质体介导的方法用COX-2反义核酸转染SGC7901细胞,经G418筛 选 后,随机挑选细胞克隆. 通过RT-PCR检测COX-2 mRNA水平的变化. 结果 应用RT-PCR反应扩 增获得大小约1.9 kb的特异性片段. 经DNA序列分析,证实与文献报道的hCOX-2编码区序列 一致. 重组正义表达载体pcDNA3.1/hCOX2(+)用EcoRⅠ,XbaⅠ双酶切后,产生大 小约5.4 kb,1.9 kb的片段;重组反义表达载体pcDNA3.1/hCOX2(-)通过PstⅠ酶切, 产 生大小约4.5 kb, 1.5 kb与1.3 kb的片段,与预期结果相符. 转染细胞经筛选后,随机挑选 、扩增了3个细 胞克隆,其中1个细胞克隆稳定表达COX-2反义核酸,RT-PCR提示其COX-2 mRNA水平显著 下 降. 结论 成功克降了hCOX-2编码基因序列,并构建了其正、反义真核表 达载体. 反转录PC R是克隆基因的简便、有效方法. 为扩增高GC含量的cDNA模板,可在PCR引物中加入限制性内 切酶位点,可以方便地实现基因的定向克隆. COX-2反义核酸在胃癌细胞系SGC7901中得到 稳定转染,转染细胞COX-2 mRNA表达显著受抑制.