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青少年读物不能缺失正确价值观
中国少年儿童新闻出版总社低幼读物出版中心曾在2011年2月至3月间,发起一项针对中国城乡儿童阅读现状的问卷调查.调查结果显示,中国的家长已经开始普遍关注孩子的阅读问题,不过,有将近一半的家长不知道如何为孩子选择合适的图书,并且普遍缺乏亲子阅读意识.另一方面,随着新媒体的快速发展,资讯传播力的加强,青少年接触成人文化的渠道和可能性大大增加,"思想早熟"、"行为早熟"等现象成为社会普遍热议的话题.而针对青少年群体的图书期刊市场也呈现出比较复杂的生长状态,诸如暴力、恐怖、灵异甚至色情等不适宜的内容明显增多,对青少年的人生观、价值观、世界观的养成带来了负面的影响.
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夏枯草内在品质及生长特性对铅、铜、镉胁迫的响应
目的:研究不同浓度处理水平的铅(Pb)、铜(Cu)、镉(Cd)3种重金属单一胁迫对夏枯草内在品质及生长特性的影响.方法:以<中药材生产质量管理规范,GAP(试行)>和土壤环境质量标准为主要指导原则,设定不同浓度水平处理夏枯草植株,测定相关指标,结合统计方法进行分析比较.结果:接近土壤环境质量二级标准上限值时,夏枯草生长正常,减产幅度在正常范围内,果穗重金属含量也在<药用植物及制剂外经贸绿色行业标准>限值内,同时能一定程度上增加熊果酸的积累;栽培夏枯草土壤中的重金属Pb,Cu,Cd临界值分别可以确定为400,100,1.0 mg·kg~(-1).结论:低浓度胁迫对夏枯草毒害作用较低,同时能一定程度上增加熊果酸的积累,高浓度水平对夏枯草的毒害作用明显,3种重金属胁迫使植株各部位相应重金属含量增加的趋势大致相同.
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蛋白激酶C在培养神经元突起生长中的作用
为探讨蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在神经再生中的作用,本研究在对培养神经元生长规律与PKC活性作相关分析的基础上,观察PKC活性改变对原代培养的脊髓前角神经元突起生长状态的影响.以5-氟尿嘧啶(5-Fu)抑制有丝分裂代替免疫淘汰法提高神经元的纯度进行胎鼠脊髓前角神经元的原代培养.
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人鼻型NK/T细胞淋巴瘤的裸鼠移植与传代
鼻型NK/T细胞淋巴瘤是常见的淋巴结外非B细胞淋巴瘤[1],在东南亚国家和地区发病率较高,具有特殊临床表现、免疫表型和生物学行为,肿瘤组织均存在不同程度的凝同性坏死和黏膜溃疡形成[2,3].实际工作中,局部活检组织多较小,除做常规病理诊断和免疫表型检测外所剩无几,致使对该肿瘤的研究工作难以深层次进行.为此,建立该肿瘤实验动物模型,模拟其体内生长状态是值得尝试和探讨的途径之一,但由于实验材料匮乏,工作非常困难,经检索尚未见成功报道.我们将人鼻型NK/T细胞淋巴瘤的实体瘤组织种植于BALB/c裸小鼠皮下,形成移植瘤,并成功传代.
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结核分枝杆菌潜伏性感染相关抗原的研究进展
结核病(Tuberculosis, TB)是由结核分枝杆菌(Mycobac-terium tuberculosis, Mtb)感染引起的传染性疾病。全世界范围内约1/3的人为结核分枝杆菌潜伏性感染( latent TB infec-tion, LTBI),其中10%的LTBI感染者终会发展为活动性结核[1]。 LTBI感染者体内的Mtb通常以休眠菌的形式存在巨噬细胞内,通过改变自身特征和代谢途径适应宿主体内环境长期存活于人体内。休眠的Mtb在宿主免疫力下降时被激活、增殖、播散,终发展为活动性结核[2]。潜伏感染不是简单的细菌暂停生长状态,而是与宿主免疫系统的动态平衡。至少有3个系统参与其中:休眠调节系统、Mtb再激活系统、毒素-抗毒素系统( toxin-antitoxin system, TAS)[3]。潜伏感染相关抗原的发现为潜伏感染诊疗提供了坚实的理论依据及广阔的应用潜力。现将 Mtb潜伏感染相关抗原的研究进展综述如下。
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不规范抗Hp治疗对唾液测试板及14 C-呼气试验检测方法的影响
幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)的致病性已逐渐得到人们的认可,抗Hp治疗已被列入相关疾病的诊治指南,但临床实践中抗Hp的治疗仍很不规范,许多患者在正式就诊之前已自行服药一段时间,而服用的这些药物均可不同程度的影响Hp的生长状态,这给我们进一步检查Hp带来困难,本研究观察了不规范抗Hp治疗后对唾液测试板法(HPU)及14C-呼气试验法(14C-UBT)2种检查方法的影响,报道如下。
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正常人结肠上皮细胞体外培养和鉴定
目的:探讨正常人肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IEC)的分离、体外培养方法,为研究IEC以及与IEC相关疾病建立合适的细胞模型.方法:正常结肠黏膜取自外科手术的大肠恶性肿瘤患者距肿瘤10 cm的结肠组织,联合运用Ⅰ型胶原酶和嗜热菌蛋白酶消化分离IEC,接种于含多种促IEC生长的营养成分的DMEM培养液内,根据IEC和成纤维细胞贴壁时间的差异并运用胶原酶来纯化IEC,通过观察IEC生长状态、形态特征、超微结构及检测上皮细胞膜抗原对IEC进行鉴定.结果:联合运用Ⅰ型胶原酶和嗜热菌蛋白酶消化1 h可分离出健全绒毛隐窝单位,2 wk左右细胞可铺满整个玻片.免疫细胞化学检测该细胞为阳性细胞,纯度高.结论:联合运用Ⅰ型胶原酶和嗜热菌蛋白酶,可分离培养出高纯度未凋亡的ICE.
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共聚焦定量分析WAF1-S基因表达对人食管癌细胞系EC109生长的作用
目的:探讨抑癌基因WAF1-S基因在食管癌细胞中的表达以及对食管癌细胞生长的抑制作用,为食管癌发病机制的研究提供一种新的思路,为食管癌基因治疗提供理论基础.方法:采用亚克隆技术,将野生型WAF1-S基因全长,通过双粘端克隆入真核表达载体pcDNA3中,用lipofectamine2000介导的方法转染EC109细胞(人食管癌细胞系).通过打点杂交观察WAF1-S基因mRNA在细胞中的表达,用Western blot及激光共聚焦方法定量分析WAF1-S基因的蛋白表达产物,MTF及流式细胞仪检测EC109的生长状态,分析WAF1基因对食管癌细胞株生长的影响.结果:用内切酶酶切分析证实外源野生型WAF1-S基因克隆入真核表达载体中,经打点杂交证实外源野生型WAF1-S基因可以在EC109细胞中表达,通过激光共聚焦分析证实,转染后的食管癌细胞EC109中WAF1-S的蛋白的表达明显高于对照组(32±15vs11±7,P<0.05),对细胞进行周期分析表明,处于F0~G1期细胞为0.47~0.65.结论:通过转染外源野生型WAF1基因可提高WAF1基因表达,增加食管癌细胞中P21蛋白的表达量,从而提高WAF1基因表达,抑制细胞的生长.
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氧化的低密度脂蛋白对培养的内皮细胞生长状态的影响及其致凋亡作用
目的研究氧化的低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein OX-LDL)对培养的内皮细胞生长状态的影响及其致凋亡作用.方法用Cu2+引发脂质过氧化过程,制备不同氧化程度LDL,应用不同氧化程度和不同浓度的OX-LDL,分别作用于对数生长期的内皮细胞,用四唑盐比色试验(MTT)检测法检测细胞活性,碘化丙啶(PI)染色法及酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞凋亡.结果MTT细胞活性检测显示,轻度氧化的低密度脂蛋白(mm-LDL)对细胞生长有促进作用,mm-LDL进一步氧化,其促生长作用转换为抑制作用,与对照组比较差异显著(P<0.05).OX-LDL对细胞生长呈浓度依赖性抑制作用.ELISA法、PI染色法检测凋亡显示,OX-LDL可诱导内皮细胞发生凋亡(与对照组比较P<0.05).结论氧化修饰的低密度脂蛋白对内皮细胞的细胞毒性作用与其氧化程度、作用剂量有关,一定浓度的OX-LDL可以导致培养内皮细胞的生长抑制乃至凋亡.
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阿托伐他汀对血管平滑肌细胞PKB信号转导途径的影响
1材料与方法主要材料:阿托伐他汀(辉瑞制药有限公司),羟甲戊酸(Mevalonate,MVA,Sigma公司),鼠抗兔PKB/AKT多克隆抗体(Sant Cruz公司),蛋白A-琼脂糖(Amersham公司),γ 32PATP(北京亚辉公司),组蛋白H2B(Histon H2B,BM公司).细胞培养与计数:采用贴块法培养兔主动脉平滑肌细胞.取生长状态良好的第5~6代血管平滑肌细胞(VSMC)制成细胞悬液(4×104/m1),接种于24孔细胞培养板中,每孔L0.5ml,孵育24h,换无血清培养液继续培养24h后,加10%胎牛血清,同时分组加入阿托伐他汀(1umol/L)、阿托伐他汀(1umol/L)+MVA(250 umol/L),培养3 d后计数.
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胆碱能系统与实验性近视
由于近视眼动物模型的建立,人们认识到近视眼是在神经递质作用下眼球生长重塑的结果.在近视形成过程中眼内神经递质直接调节巩膜的生长状态和脉络膜厚度的变化.大量研究证明,乙酰胆碱及其受体拮抗剂与实验性近视眼的形成关系密切.因此,本文着重对胆碱能系统在实验性近视形成过程中的作用作一综述.
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单细胞凝胶电泳技术及其在辐射生物学中的应用
单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE),又称彗星分析(Comet assay),是利用断裂的DNA碎片在裂解液的作用下,从DNA的超螺旋结构中释放出来,在电泳时移向阳极的彗星样影像而对损伤的DNA进行检测的一种方法,是检测各种哺乳动物细胞DNA断裂的新技术[1].这种技术可以测定单个细胞DNA链的断裂,与传统方法相比,由于其简便、快速、敏感、所需样品量少,无需细胞处于生长状态和使用放射性同位素,故有很强的实用价值.SCGE已广泛用于环境生物监测、辐射生物学、遗传毒理学、药物筛选、毒物致癌机理、肿瘤发病机理、诊疗、衰老和细胞凋亡机理的研究.现就SCGE技术的原理和方法及其在辐射生物学领域的应用作一简要介绍.
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不同氧浓度对裸鼹鼠原代鼠星形胶质细胞增殖及生长状态的影响
目的 建立裸鼹鼠星形胶质细胞体外培养方法,观察不同氧浓度对裸鼹鼠星形胶质细胞增殖及生长状态的影响,寻找适宜体外裸鼹鼠细胞增殖和生长的氧浓度.方法 利用机械法辅以化学法分离新生裸鼹鼠脑内胶质细胞,利用差速贴壁法进行星形胶质细胞纯化,通过设置3%、5%、10%以及20%等不同氧浓度环境,利用CCK8染色法分析不同氧浓度下裸鼹鼠星形胶质细胞增殖速率,利用免疫细胞化学染色法观察不同氧浓度下裸鼹鼠细胞胞体伸长突起的状况从而进一步判断不同氧浓度下裸鼹鼠星形胶质细胞生长状态.结果 利用机械及化学法分离裸鼹鼠胶质细胞并结合差速贴壁法能够成功建立体外裸鼹鼠星形胶质细胞模型.不同氧浓度环境下裸鼹鼠生长速率不同,随着氧浓度的升高,裸鼹鼠进入快速生长期所用的时间越短.氧浓度为20%时,裸鼹鼠星形胶质细胞较小,突起少,状态不佳,但是10%以下的氧浓度环境中,裸鼹鼠能保持较多的细胞突起,状态较好.结论 机械及化学法相结合,合并差速贴壁法能够成功建立裸鼹鼠星形胶质细胞体外培养模型,10%氧浓度下既可以保证裸鼹鼠星形胶质细胞适宜的生长速率又能保证其处于良好的生长状态.
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纤维连接蛋白黏附共培养对伊马替尼诱导K562细胞凋亡影响的研究
多药耐药仍是目前治疗白血病的巨大障碍和亟待解决的难题.传统的多药耐药研究多采用单细胞培养模型,不能很好地模拟肿瘤的生长状态及肿瘤微环境.因此,有必要从微环境介导耐药的角度进一步深入研究白血病细胞多药耐药的生物学背景.
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RPMI-1640和DMEM培养基中肝癌细胞系BEL-7402与HepG-2的生长状态比较
背景:DMEM和RPMI-1640是两种常用的商品化培养基,二者对肝癌细胞生长的影响尚未见直接的对比研究.目的:比较两种常用培养基对人肝癌BEL-7402与HepG-2细胞系体外生长和增殖效果的影响,从中选择更适合的培养基.方法:分别应用高糖DMEM与RPMI-1640完全培养液培养BEL-7402和HepG-2细胞,于培养的0,24,48,72,96,120 h用酸性磷酸酶检测法测定细胞生长和增殖速率,并于倒置显微镜下观察细胞的形态.结果与结论:结果发现BEL-7402和HepG-2细胞在RPMI-1640培养基中的生长增殖速率均明显高于DMEM培养基 (P < 0.01).镜下观察证实细胞在RPMI-1640培养基中的黏附和伸展状态更好.因此,建议首选RPMI-1640培养基进行肿瘤细胞体外培养.
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兔骨髓基质细胞在去抗原牛松质骨载体上生长状态的观察
目的牛松质骨具有天然的多孔结构,微孔规则,相互贯通,是骨组织工程载体的选择之一.本研究观察了体外状态下表面不加修饰的去抗原牛松质骨载体的生物相容性,为骨组织工程研究寻找新的载体提供实验依据.方法将牛四肢骨干骺端松质骨锯成0.6~0.8cm3的松质骨块,经过反复水洗(40~50℃)、脱脂、超声振荡、离心、脱蛋白过程,清除牛松质骨内的细胞成份、油脂、骨髓组织及残留血液.选择孔隙直径约为300~700μm,孔隙均匀的骨块,风干后再经砂轮仔细打磨精修,制成约0.5cm3的去抗原牛松质骨骨块.用兔骨髓基质细胞与载体复合,体外培养7、14d行扫描电镜观察了解细胞的生长情况.结果 1.去抗原牛松质骨载体表面干涩不平,洞沟遍布;2.培养第一周的载体壁上,细胞较少,形态不规则,大小不一,散在于孔壁上,细胞分布不均,无突起伸展贴壁,并可见有细胞死亡后崩解的碎片散在于细胞之间.培养第二周载体孔壁上细胞数量更少,提示有细胞死亡并脱落.结论体外状态下表面不加修饰的去抗原牛松质骨载体不适于MSC贴壁生长.
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贴壁生长与悬浮生长树突细胞的免疫学功能比较
目的 探索树突细胞(DCs)的可能生长状态,比较分析不同生长状态DCs的免疫学功能.方法 从正常人外周血分离获得单个核细胞,用不同培养介质常规培养2 h,取贴壁细胞,用含细胞因子的培养液进行培养,在培养过程中光镜下对其进行形态鉴别,然后检测两种DCs促淋巴细胞增殖和诱导免疫反应的功能.结果 7 d后,培养瓶中DCs基本处于悬浮状态,而培养板中DCs基本处于贴壁状态;培养瓶中DCs与培养板中DCs形态与理论相符,但培养板中DCs分化形态优于培养瓶中DCs.而在体外促进淋巴细胞增殖及体外诱导免疫反应方面,培养瓶中DCs的能力优于培养板中DCs.结论 在DCs体外培养至发育成熟的过程中,DCs先贴壁后悬浮的生长性质可能对其免疫学功能有着重要意义.
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胶原蛋白对人皮肤成纤维细胞生长状态的影响
目的:通过细胞实验,从细胞机理上探索胶原蛋白对人皮肤成纤维细胞生长状态的影响,挖掘其潜在功效.方法:用一定浓度胶原蛋白的细胞培养液培养人皮肤成纤维细胞,观察不同来源胶原蛋白对细胞生长曲线的影响,考察样品对体外人皮肤成纤维细胞生长是否有促进作用.羟脯氨酸是人皮肤细胞保水重要成分因子,测定各样品培养细胞后的培养液的羟脯氨酸的含量,以观察其对细胞保水能力的影响.测定各样品培养细胞后的培养液的SOD、MDA的含量,观察其对细胞抗氧化能力的影响.结果:鱼皮胶原蛋白对人成纤维细胞有促进生长的作用,明显增加羟脯氨酸的含量,能够显著降低细胞培养液中MDA的含量.结论:经过细胞实验,鱼皮胶原蛋白能够较好的改善人皮肤成纤维细胞的生长状态.
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人骨肉瘤细胞凋亡及p53、p170的表达研究
我们应用Tunel法和SABC法对39例骨肉瘤细胞凋亡及p53、p170蛋白表达情况检测,以求全面了解骨肉瘤细胞的生长状态,并初步探讨其临床及生物学意义.
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哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在中枢神经系统再生中的作用
成年哺乳动物中枢神经系统(central nervous system, CNS)损伤后再生困难的主要原因是抑制性微环境的存在和其内在的生长能力低下[1].目前关于损伤微环境的大量研究显示,单纯阻断环境抑制信号而不激活神经元内在生长状态(intrinsic growth state),其再生是有限的[2].