α1E钙通道在小鼠脑缺血性损伤中的保护作用

细胞内钙超载在脑缺血性损伤的病理变化进程中有十分重要的作用[1],缺血后细胞内钙超载既有细胞外钙内流,又有细胞内贮存钙释放的参与[2].作为外钙内流的重要途径,电压依赖性钙通道在脑缺血性损伤的病理生理变化过程中,必然发挥重要作用.

大黄素对大鼠结肠环行平滑肌细胞[Ca2+]i的影响

目的:观测大黄素对Wistar大鼠结肠环行平滑肌细胞胞质游离钙水平([Ca2+]i)的影响,并探讨机制.方法:酶解法分离结肠环行平滑肌细胞,分别采用图像分析系统和激光扫描共聚焦显微镜观测细胞长度和[Ca2+]i的变化.结果:大黄素可收缩大鼠结肠环行平滑肌细胞,也可浓度依赖性升高[Ca2+]i;大黄素作用后,[Ca2+]i迅速升高达到峰值([Ca2+]iPeak),而后下降至平台期([Ca2+]iSustain,仍高于静息值).Nifedipine对大黄素的钙动员作用没有明显影响,EGTA明显降低[Ca2+]iSustain.Heparine几乎完全抑制[Ca2+]iPeak,Ryanodine明显抑制[Ca2+]iPeak.结论:大黄素通过升高[Ca2+]i收缩结肠环行平滑肌细胞.大黄素升高[Ca2+]i的机制为:活化IP3受体释放细胞内钙,进一步以CICR方式促进RYR受体开放,共同作用升高[Ca2+]i,细胞外钙内流参与平台期[Ca2+]i的升高.

心肌细胞外钙内流对PTEN表达影响

大黄素对大鼠离体回肠平滑肌收缩的影响

目的 观察大黄素(emodin)对大鼠离体回肠平滑肌收缩功能的影响,并探讨其作用机制.方法 离体回肠标本随机分为7组(n=6):对照组,不同浓度大黄素组(1、5、10、20 μmol/L),普萘洛尔(PRO)加大黄素组,格列苯脲(GLI)加大黄素组,NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)加大黄素组,无钙K-H液对照组及无钙K-H液大黄素组.采用颈椎离断法处死大鼠并分离其回肠,将肠段标本与张力换能器相连并置于氧饱和的K-H液中.运用BL-420E+生物信号采集处理系统,记录大鼠回肠平滑肌的收缩张力、幅度和频率.结果 大黄素能使大鼠离体回肠平滑肌的收缩幅度明显下降,且呈浓度依赖性(P＜0.05或P＜0.01);对频率及张力无明显影响.PRO加大黄组(P＜0.01)、GL1加大黄组(P＜0.01)可部分阻断大黄素对回肠平滑肌的抑制作用,但L-NAME对大黄素所引起的回肠平滑肌的抑制作用无影响.氯化钙所引起的回肠平滑肌收缩可被大黄素所抑制(P＜0.05).结论 大黄素能明显减弱大鼠离体回肠平滑肌的收缩幅度,对收缩张力和收缩频率无影响.这种作用可能是通过兴奋β肾上腺素能受体,兴奋ATP敏感钾通道,以及抑制细胞外钙内流实现.

锦灯笼水提物对大鼠胸主动脉的舒张作用及机制

目的 观察锦灯笼水提物对大鼠离体胸主动脉环的舒血管作用并探讨其作用机制.方法 采用大鼠胸主动脉环张力测定法.结果 在内皮完整及去内皮血管上.锦灯笼水提物均浓度(0.5～64 g/L)依赖性地降低苯肾上腺紊(1.0×10-5mol/L)及氯化钾(6.0×10-2mol/L)预收缩血管的张力;一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对锦灯笼水提物的舒血管作用无明显影响(P>0.05);钾通道阻断剂TEA、4-氨基吡啶(4-AP)、格列苯脲对锦竹笼水提物的舒血管作用无明显影响(P>0.05);但在无钙环境下,锦灯笼水提物对苯肾上腺素预收缩血管的舒张作用明显减弱,与有钙液相比,差异显著(P<0.01).此外,锦灯笼水提物对PDBu预收缩的血管有明显的舒张作用(P<0.01).结论 锦灯笼水提物的舒张血管作用表现为非内皮依赖性,其舒张作用可能有与其抑制外钙内流,以及抑制PKC信号传导通路有关.

大黄素对大鼠离体空肠平滑肌收缩的影响

目的:观察大黄素(emodin)对大鼠离体空肠平滑肌收缩功能的影响,并探讨其作用机制.方法:大鼠离体空肠标本随机分为7组(n=6):对照组,大黄素剂量组(1,5,10,20μmol/L),普萘洛尔(PRO)加大黄素组,格列苯脲(GLI)加大黄素组,NG-硝基-L-精氨酸甲酯(l-NAME)加大黄素组,无钙K-H液对照组及无钙K-H液大黄素组.采用颈椎离断法处死大鼠并分离其空肠,将肠段标本与张力换能器相连并置于氧饱和的K-H液中.采用BL-420E+生物信号采集处理系统记录大鼠空肠平滑肌的收缩张力(TE),幅度(AM)和频率(FR)的影响.结果:①大黄素能使大鼠离体空肠平滑肌的收缩张力和幅度明显下降,且呈剂量依赖性(P＜0.05,P＜0.01);对频率无明显影响.②普萘洛尔(P＜0.05)、格列苯脲(P＜0.01)可部分阻断大黄素对空肠平滑肌的抑制作用.③L-NAME对大黄素所引起的空肠平滑肌的抑制作用无影响.④氯化钙所引起的空肠平滑肌收缩可被大黄素所抑制(P＜0.01).结论:大黄素能明显减弱大鼠离体空肠平滑肌的收缩张力和收缩幅度,对收缩频率无影响.这种作用可能是通过兴奋肾上腺素β受体、兴奋ATP敏感钾通道、阻断细胞膜上钙离子通道实现.

脑血管痉挛发病机制相关因素的研究进展

蛛网膜下腔出血(SAH)后30%～70%患者发生脑血管痉挛(CVS)，其中40%患者发生迟发性神经功能缺损，是SAH患者致残和致死的主要原因。近年研究发现CVS病因是多因素的，氧合血红蛋白(OxyHb)、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、降钙素基因相关肽(CGRP)、蛋白激酶C(PKC)、钾通道都参与CVS的发生，现就近年的研究进展综述如下。　　1　内皮素　　ET是1988年首次由Yanagisawa等从猪主动脉内皮细胞培养液中分离提纯的一种生物活性肽，包括3种异构形式ET-1、ET-2、ET-3,研究多的是ET-1，存在于中枢神经系统中，ET合成是先由203个氨基酸的内皮素前体在血管内皮细胞胞内分裂，形成38个氨基酸的大ET，再由内皮素转换酶(ECE)蛋白水解生成21个氨基酸的ET，与血管平滑肌细胞膜上特异性受体结合，激活磷脂酶C，水解成三磷酸肌醇(IP3)和二酰甘油(DAG)，IP3促进细胞外钙内流和细胞内钙动员，细胞内钙升高，血管收缩。是目前发现作用强且持续久的血管收缩剂。

血管内皮细胞钙激活钾通道

自1980年Furchgott和Zawadzki报道兔主动脉内皮依赖性舒张以来[1]，内皮细胞已被认为不仅是一层衬贴于血管壁内面的屏障，而是具有多种生理功能的组织甚至器官。它可分泌释放多种生物活性物质调节血管张力和平滑肌生长，参与凝血及抗血栓形成，影响血管通透性和物质交换[2]。尤其是内皮细胞产生的一氧化氮（NO），其多方面的生理功能引起人们高度重视。因为它“在心血管系统可作为信息分子从而给予生物学信息系统一个崭新的原理”而成为1998年诺贝尔医学和生理学奖的内容[3]。正是由于这些发现，对于内皮细胞功能的研究越来越令人瞩目。内皮细胞众多生物功能的发挥依赖于胞内钙浓度的升高。钙库释放和外钙内流是胞内钙浓度升高的基础。前者引起胞内钙浓度一过性的快速提高，后者将促使外钙缓慢大量内流，形成胞内钙浓度平台，它对于内皮细胞持续产生NO尤其重要[4]。由于促进外钙内流的电化学驱动力和外钙内流通道的关闭和开放都受控于内皮细胞静息膜电位，因而参与静息膜电位形成的钾通道在内皮细胞功能发挥中所处的地位不容忽视。　　近年来已发现具有明确功能和动力学特征的钾通道有十余种，在血管内皮细胞膜上已确认至少存在三种钾通道。A、内向整流钾通道（Kir)，B、钙激活钾通道（Kca），C、ATP敏感钾通道（KATP）[5]。其中Kir和Kca参与维持内皮细胞静息膜电位，调节钙离子内流[6]。尤其是Kca，不仅电导大，且受胞内钙的反馈调节，它的关闭或开放直接影响内皮细胞的功能，因而越来越受到学者们的重视。

右美托咪定抑制离体家兔十二指肠平滑肌自发收缩

目的：观察右美托咪定对离体家兔十二指肠平滑肌自发收缩的影响，并探讨其机制。方法健康家兔，♂♀不拘，击晕并分离十二指肠，将肠段与张力换能器相连并置于氧饱和的Krebs－Henseleit（K－H）液中。采用BL－420F生物信号采集处理系统记录离体家兔十二指肠平滑肌自发收缩的幅度（amplitude，AM）和频率（frequency，FR）。累加给药法观察不同浓度右美托咪定对离体家兔十二指肠平滑肌自发收缩的影响。 K－H液中，预先孵育格列苯脲（glibenclamide，Gli）后再加入右美托咪定，研究其作用机制；无钙K－H中预先加入右美托咪定后再分别加入CaCl2和雷诺丁（Rynodine），进一步研究其作用机制。结果①右美托咪定剂量依赖性地抑制离体家兔十二指肠平滑肌自发收缩的幅度（ P＜0．05，P＜0．01），但对频率无影响（P＞0．05）；②Gli（P＜0．05）可部分阻断右美托咪定对离体家兔十二指肠平滑肌自发收缩的抑制作用；③无钙 K－H 液中，右美托咪定可分别抑制由CaCl2（P＜0．05）外钙增加和Rynodine（P＜0．05）内钙释放所诱发的收缩。结论右美托咪定抑制离体家兔十二指肠平滑肌的自发收缩，其作用可能是通过兴奋ATP敏感性钾通道（KATP）以及同时抑制外钙内流、内钙释放实现的。

大黄素抑制大鼠离体十二指肠平滑肌的收缩

目的 观察大黄素(emodin)对大鼠离体十二指肠平滑肌收缩功能的影响,并探讨其作用机制.方法 离体十二指肠标本随机分为7组(n=6):对照组、大黄素剂量组(1、5、10、20 μmol·L-1),普萘洛尔(propranolol,PRO)加大黄素组、格列苯脲(glibenclamide,GLI)加大黄素组、NG-硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitroarginine methyl ester,L-NAME)加大黄素组、无钙Krebs-Henseleit(K-H)液对照组及无钙K-H液加大黄素组.采用颈椎离断法处死大鼠并分离其十二指肠,将肠段标本与张力换能器相连并置于氧饱和的K-H液中.采用BL-420E+生物信号采集处理系统记录大鼠十二指肠平滑肌的收缩张力(tention,TE)、幅度(amplitude,AM)和频率(frequency,FR)的影响.结果 (1)大黄素能使大鼠离体十二指肠平滑肌的收缩张力和幅度明显下降,且呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01);对频率无明显影响.(2)普萘洛尔(P<0.01)、格列苯脲(P<0.01)可部分阻断大黄素对十二指肠平滑肌的抑制作用.(3)L-NAME对大黄素所引起的十二指肠平滑肌的抑制作用无影响.(4)氯化钙所引起的十二指肠平滑肌收缩可被大黄素所抑制(P<0.01).结论 大黄素能明显减弱大鼠离体十二指肠平滑肌的收缩张力和收缩幅度,对收缩频率无影响.这种作用可能是通过兴奋肾上腺素β受体、开放ATP敏感钾通道、阻断细胞膜上钙离子通道实现.

氯丙咪嗪对家兔离体小肠平滑肌自发收缩活动的影响

目的 观察氯丙咪嗪对家兔离体十二指肠平滑肌自发收缩活动的影响,并探讨其作用机制.方法 制备家兔离体十二指肠肠管,采用经典的离体小肠灌流技术,记录小肠平滑肌收缩曲线,观察氯丙咪嗪对离体肠管平滑肌自发收缩活动的影响,并借助药理学方法探讨其作用机制.结果 氯丙咪嗪剂量依赖性地抑制离体家兔十二指肠平滑肌自发收缩的幅度,但对收缩频率无影响.氯丙咪嗪可部分阻断ACh诱发的离体十二指肠平滑肌收缩增强.在无钙台式液中,氯丙咪嗪可抑制由CaCl2外钙增加所诱发的收缩.在无钙台式液中先后加入ACh和CaCl2,氯丙眯嗪对内钙释放作用不明显,但可剂量依赖性地抑制外钙内流.结论 氯丙咪嗪抑制家兔离体十二指肠平滑肌自发收缩功能,其抑制收缩活动机制可能与抑制M受体发挥抗胆碱作用,进而抑制外钙内流有关.

缓激肽触发C6胶质瘤细胞内Ca~(2+)内流诱发的Ca~(2+)释放及其意义

小剂量缓激肽(8K)选择性开放肿瘤的血脑屏障的具体机制尚不太清楚.为进一步明确BK作用后细胞内钙离子升高模式的差异及其意义,我们对细胞外钙内流与细胞内钙库释放之间的关系进行了深入探讨,并对缓激肽刺激后细胞内实时Nitric Oxide水平变化及其与细胞内钙离子升高之间的联系进行了初步的研究.

硝苯吡啶体外对家兔阴茎海绵体平滑肌的舒张作用

阴茎海绵体平滑肌可表达L型电压依赖性钙通道,钙拮抗剂通过选择性作用于钙通道,阻滞细胞的外钙内流而舒张阴茎海绵体平滑肌,在犬阴茎海绵体内注射维拉帕米能诱发阴茎勃起[1].本实验旨在观察硝苯吡啶(NIF)对高K+诱发的离体家兔阴茎海绵体平滑肌条收缩的影响,并探讨其舒张效应和机制.

环维黄杨星D对大鼠胸主动脉非内皮依赖性舒血管作用及机制研究

目的:研究环维黄杨星D对大鼠胸主动脉去内皮血管环的舒张作用并探讨其机制.方法:采用氯化钾(KCl)或去氧肾上腺素(PE)预收缩血管,观察环维黄杨星D(10 ～ 600μmol/L)对大鼠胸主动脉去内皮血管的舒张作用;血管与600 μmol/L环维黄杨星D预孵育后,观察其对KCI或PE收缩血管作用的影响;观察环雏黄杨星D对不同钾离子通道阻断剂的血管反应性的影响;观察环维黄杨星D对CaCl2收缩去内皮血管环的作用以及对PE产生的瞬时性收缩和加入CaCl2后的持续性收缩的作用.结果:在给药浓度范围内(10～600 μmol/L),环维黄杨星D能非内皮依赖性舒张由KCl和PE预收缩的大鼠胸主动脉血管环;600μmol/L环维黄杨星D与血管预孵育亦可明显抑制KCl或PE诱导的血管收缩;4-AP、Gly或TEA与血管环预孵育后,对600 μmol/L环维黄杨星D舒张PE预收缩血管环的作用均没有影响;不同浓度(100、300和600 μmol/L)的环维黄杨星D与血管环在无钙K-H液中预处理后,可以剂量依赖地抑制CaCl2的浓度-效应曲线;300 μmol/L环维黄杨星D与血管环在无钙K-H液中预处理后,可以显著抑制PE产生的瞬时性收缩以及加入CaCl2后的持续性收缩.结论:环维黄杨星D对大鼠离体胸主动脉去内皮血管的舒张作用呈剂量依赖性,其对血管的舒张作用机制可能不涉及钾离子通道的活化,抑制血管平滑肌细胞的外钙内流和内钙释放作用可能参与了环维黄杨星D的舒血管机制.

心肌细胞收缩期钙瞬变的调节机制的研究进展

心肌细胞收缩是由细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)收缩期增高引起的.[Ca2+]i增高的多少是心肌收缩力量和心输出量的主要调节机制.而胞浆收缩Ca2+主要来自于胞外钙内流和肌浆网(sacroplasmic reticulum,SR)的钙释放.本文介绍心肌细胞收缩胞浆Ca2+浓度升高的机制与部分调节因素的分子研究进展.

普鲁托品对豚鼠离体心房生理特性的影响

目的:观察普鲁托品(protopine,Pro)对豚鼠离体心房生理特性的影响,并探讨其作用机制.方法:利用豚鼠离体心房测定其自动节律、收缩力和功能性不应期,并观察普鲁托品对正阶梯现象和静息后增强的影响.结果:测定右心房自动节律和收缩力作为药前对照,给予普鲁托品(0.1～300μmol.L-1)可浓度依赖性地明显抑制心房的自律性,但较低浓度时Pro对心房收缩力无明显影响,在较高浓度时(大于10μmol.L-1)才明显抑制右心房的收缩力.Pro 300μmol.L-1时对上述两项指标原抑制率为65%±15%和79.56%±9.61%.Pro 50μmol.L-1可使左心房的功能性不应期A(FRP)由药前A(199.50±15.82)ms延长至药后10min的(235.00±20.11)ms(P＜0.01,n=6).实验还发现Pro 50μmol.L-1可在5min内取消Ca2+所致的正性变时作用,1h后心房率降到(119±16)beats.min-1(P＜0.01,n=5).Pro 100、300μmol.L-1能明显抑制正阶梯现象(P＜0.01,n=6),但不能使之翻转.Pro100μmol.L还能明显抑制左心房静息后增强效应.结论:普鲁托品具有降低心房自律性、抑制心房肌收缩力、延长其功能性不应期的作用,其负性变频和负性变力效应可能与该药抑制心肌细胞外钙内流和内钙释放有关.