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角膜内屏障重建术病人的护理
将具有内障变化的异体晶状体后囊植入大泡性角膜病变的基质后层,称为角膜内屏障重建术.由于人类的晶状体后囊是一种生物半透膜,植入角膜层间后可以起到调节房水进入角膜组织的机械性屏障作用,从而使失去内皮屏障功能的病变角膜水肿消失,恢复正常厚度.该手术疗效好,治愈率达93%,是目前治疗大泡性角膜病变的有效方法之一.但手术成功的因素不仅取决于术中操作,还应重视术前及术后的有效护理.我院自1985年-1996年对85例角膜内皮失代偿病人施行了内屏障重建术,现将其护理要点总结如下.
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同种带瓣主动脉去内皮和去细胞处理后生物学特性及免疫原性的变化
背景：目前同种瓣已在临床广泛应用，但移植后远期易发生衰败和钙化。
目的：探究同种带瓣主动脉经去内皮和去细胞处理后，生物学特性和免疫原性的变化，寻找更好的同种瓣去细胞处理方法。
方法：取家兔带瓣主动脉根部，随机分为新鲜组、去内皮组、去全部细胞组。分别采用苏木精-伊红、Masson、VG染色进行组织形态学观察；生物学特性评价组织厚度、抗张强度、断裂拉伸率、热皱缩温度；通过免疫组织化学染色观察及原子火焰吸收法测定移植物钙含量变化进行免疫原性评价。
结果与结论：组织形态学观察发现去内皮和去细胞方案均达到了对应的去细胞目的。与新鲜组相比，去内皮组抗张力性能变化不明显(P>0.05)，去细胞组显著下降(P<0.01)。异体移植实验后苏木精-伊红染色观察发现：新鲜组炎性反应为显著，组织中有大量炎细胞浸润；与新鲜组相比，去内皮组炎性反应明显减轻，炎性细胞数目明显减少，去细胞组炎性反应轻，仅组织边缘有炎性细胞浸润。免疫组织化学发现：去内皮组和去细胞组CD152表达水平明显高于新鲜组(P <0.05)。钙含量分析发现：去内皮组和去细胞组钙盐含量较新鲜组显著下降(P<0.05)。提示去内皮和去细胞同种带瓣主动脉的免疫原性均显著下降，而去内皮处理能更好地保留同种瓣的抗张性能。 -
HGF基因转染促进同种瓣移植后体内再内皮化研究
目的 探讨同种瓣经去内皮和肝细胞生长因子(HGF)转染处理后,不同移植时间点的再内皮化效果及CD137、Gab1表达情况.方法 成年健康近交系中国雄性家兔为供体,近交系成年新西兰雌性大白兔为受体,行同种瓣补片法移植.受体随机分为3组,每组20只,新鲜组不做任何处理,作为对照;去内皮组行去内皮细胞处理;HGF组医用生物蛋白胶携载HGF质粒,对去内皮处理的移植物进行基因转染.分别于术后2、4、8、12周取出移植物,移植物行光镜与电镜观察组织形态变化,免疫组化法测定CD137与移植后2周Gab1的表达.结果 去内皮组与新鲜组分别于移植后4周与8周出现新生内皮细胞,早期伴有不同程度的平滑肌细胞损伤;术后2周,HGF组移植物表面即出现大量内皮细胞覆盖,且无平滑肌细胞钙化坏死.新鲜组与去内皮组4、8、12周3个不同时间点的CD137表达较HGF组显著升高,差异有统计学意义(P ＜0.01);HGF组样本中,移植物各时间点CD137表达情况比较,差异无统计学意义(P＞0.05).3组CD137的表达高峰均出现在第2周.移植2周时,HGF组Gab1表达量(0.198 2 ±0.024 3)明显高于新鲜组(0.1077 ±0.0104)与去内皮组(0.110 2±0.0145),差异有统计学意义(P＜0.01);新鲜组与去内皮组Gab1表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 去内皮及HGF基因转染处理同种瓣能够上调Gab1的表达,在移植早期(2周)实现体内再内皮化,同时抑制早期免疫反应.
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去内皮、冻干辐照后异体小血管的组织结构、物理性能及抗原性变化
目的 研究去内皮、冻干辐照后同种异体小血管的组织结构、物理性能及抗原性的变化,旨在了解处理后的异体血管是否适用于血管移植.方法 将血管随机分为A,B两组;A组为对照组,B组为去内皮冻干辐照处理组.光镜下观察每组血管的组织结构,电镜下观察血管去内皮化情况,测出血管张力在达到15,30,45,60,90,120N及180N时的扩张直径、伸展长度及血管在横向和纵向被拉断时所能承受的大拉力,并计算出血管在该张力下的横向和纵向变化率;采用免疫组化SP法检测处理前后主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ类抗原的表达水平.结果 处理组血管组织结构保持良好,两组血管在不同张力下的横向及纵向变化率差异无统计学意义(P＞0.05).处理组血管在横向上被拉断时所能承受的大张力和在纵向上被拉断时所能承受的大张力显著大于对照组(P＜0.01及P＜0.05).处理组MHC-Ⅱ类抗原水平明显低于对照组(P＜0.01).结论 经去内皮、冻干辐照处理后异体小血管组织结构未发生改变,且在正常生理范围内保留一定的血管物理性能;MHC-Ⅱ类抗原水平下降明显.提示,经处理的血管基本符合血管移植的要求,是小口径同种异体血管移植的理想材料.
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不同处理方法对同种异体血管免疫原性影响的研究进展
随着器官和组织移植的发展,血管移植已经成为一个重要的研究课题.同种异体血管是中小口径(内径＜6mm)血管移植中较理想的血管代用品,避免了自体血管移植的血管来源限制、异种血管存在的严重的免疫排斥反应以及人工血管远期通畅率低的各种缺陷.
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环维黄杨星D对大鼠胸主动脉非内皮依赖性舒血管作用及机制研究
目的:研究环维黄杨星D对大鼠胸主动脉去内皮血管环的舒张作用并探讨其机制.方法:采用氯化钾(KCl)或去氧肾上腺素(PE)预收缩血管,观察环维黄杨星D(10 ～ 600μmol/L)对大鼠胸主动脉去内皮血管的舒张作用;血管与600 μmol/L环维黄杨星D预孵育后,观察其对KCI或PE收缩血管作用的影响;观察环雏黄杨星D对不同钾离子通道阻断剂的血管反应性的影响;观察环维黄杨星D对CaCl2收缩去内皮血管环的作用以及对PE产生的瞬时性收缩和加入CaCl2后的持续性收缩的作用.结果:在给药浓度范围内(10～600 μmol/L),环维黄杨星D能非内皮依赖性舒张由KCl和PE预收缩的大鼠胸主动脉血管环;600μmol/L环维黄杨星D与血管预孵育亦可明显抑制KCl或PE诱导的血管收缩;4-AP、Gly或TEA与血管环预孵育后,对600 μmol/L环维黄杨星D舒张PE预收缩血管环的作用均没有影响;不同浓度(100、300和600 μmol/L)的环维黄杨星D与血管环在无钙K-H液中预处理后,可以剂量依赖地抑制CaCl2的浓度-效应曲线;300 μmol/L环维黄杨星D与血管环在无钙K-H液中预处理后,可以显著抑制PE产生的瞬时性收缩以及加入CaCl2后的持续性收缩.结论:环维黄杨星D对大鼠离体胸主动脉去内皮血管的舒张作用呈剂量依赖性,其对血管的舒张作用机制可能不涉及钾离子通道的活化,抑制血管平滑肌细胞的外钙内流和内钙释放作用可能参与了环维黄杨星D的舒血管机制.
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犬去内皮异体小血管移植的超微结构观察
目的 扫描及透射电镜下观察犬去内皮异体血管移植后不同时期的异体血管表面内膜层的超微结构变化.方法 用去内皮、经冷冻干燥处理的异体血管桥端端吻合于犬股动脉,在植入后1、2、4、8、12、16及20周采集标本,作扫描、透射电镜观察.结果 术后1周异体血管表面形成一层光滑的纤维素膜; 术后2周异体血管吻合口处有梭形细胞出现; 术后12周梭形或椭圆形细胞基本覆盖异体血管表面,内膜层形成; 12～20周内皮下有少量增生平滑肌细胞和胶原纤维,但不明显.结论 异体血管具有良好的组织相容性,内皮细胞可以覆盖异体血管表面,且短期内不会引起明显的内膜增生.
