中华实验外科杂志
Chinese Journal of Experimental Surgery 중화실험외과잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.75
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-9030
- 国内刊号： 42-1213/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
缺血缺氧损伤对肠上皮细胞内钙超载和膜脂流动性的影响
目的 建立子鼠肠上皮细胞(IEC)添加人工基底膜体外原代培养,模拟缺血缺氧损伤后胞内钙含量、膜脂流动性、IEC凋亡及采用钙通道阻断剂的影响.方法 建立子鼠IEC分离与原代培养和缺血缺氧模拟环境,设立对照组(A组),缺氧组(B组),缺血组(C组),缺血缺氧组(D组)及加维拉珀米2 mg/L的相应对照组.利用流式细胞仪(FCM)计算凋亡细胞率,激光共聚焦显微镜检测胞内钙含量;自旋标记-顺磁共振技术(ESR)检测膜脂流动性.结果 B、C、D组IEC凋亡较A组明显增加(P＜0.05);加用钙离子阻断剂后B1、C1、D1组较相应对照组减少(P＜0.05).缺血缺氧损伤导致胞内钙超载,尤以D组显著,其次为B组,C组;加用钙通道阻断剂后细胞内钙含量下降,以D1组明显(P＜0.01),依次为B1组,C1组.损伤组膜蛋白构像改变、运动速度减慢,表现为强固定化与弱固定化组分谱线高度比值(hs/hw)明显增大及膜蛋白旋转相关时间(τc)显著延长,D组为明显(P＜0.01),其次为B组,C组;加用钙通道阻断剂后hs/hw和τc有不同程度的恢复,与损伤组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 缺血缺氧损伤后,膜脂流动性发生变化及胞内钙超载和IEC凋亡一致;钙通道阻断剂可降低胞内钙含量,减轻膜蛋白的构像改变,减少细胞凋亡.
-
应用羟基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺脂探讨新型免疫抑制剂J2作用机制
目的 探讨基于CD4立体构型设计的新型免疫抑制剂(J2)在小鼠体内的免疫抑制作用以及其作用机制.方法 将羧基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的C57BL/6(H-2b)小鼠的淋巴细胞4×106～6×106经尾静脉注入经60钴照射(900拉德)后的DBA/2(H-2d)小鼠体内构建模型.将DBA/2小鼠随机分为5组,每组5只,模型建立后即刻腹腔注射J2,每天1次.对照组注射生理盐水、CsA组注射环孢素A(10 mg/kg体重);实验组J2A组(1 mg/kg体重)、J2B组(4mg/kg体重)、J2C组(8 mg/kg体重).给药3 d后分组处死DBA/2小鼠取脾制备淋巴细胞,用CD3、CD4、CD8单抗分别标记受检T细胞,FACS流式细胞仪检测CD4+T细胞和CD8+T细胞在小鼠体内分裂增殖的情况,并检测CD4+T细胞的凋亡情况.结果 CFSE标记C57BL/6小鼠的脾淋巴细胞着染率大于99%.对照组分裂的CD4+T细胞(75.34±1.58)%、分裂的CD8+T细胞(83.48±1.25)%明显多于CsA组和实验组(P＜0.01).J2B组和J2C组分裂的细胞数分别与CsA组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但J2A组多于CsA组(P＜0.05).对照组CD4+T细胞早期凋亡的比例(41.1±3.4)%明显高于其他各组(P＜0.01).J2A组(35.6±4.1)%、J2B组(24.0±3.7)%和J2C组(13.6±2.3)%CD4+T细胞早期凋亡的比例显著高于CsA组(7.4±1.9)%(P＜0.05).结论 J2可能抑制T细胞亚群CD4+T细胞的活化,从而进一步抑制CD8+T细胞的分裂增殖而具有免疫抑制作用.
-
乳腺癌淋巴管生成与血管内皮生长因子-C、环氧化酶-2表达的关系
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)-C、环氧化酶(COX)-2在乳腺癌组织中的相互表达关系及与淋巴管生成和预后的关系.方法 应用免疫组织化学法检测70例乳腺癌组织COX-2与VEGF-C蛋白的表达,并用淋巴管内皮细胞特异性抗体D2-40标记淋巴管,计数肿瘤淋巴管密度(LVD),结合临床病理特征和随访资料进行分析.结果 (1)乳腺癌组织COX-2、VEGF-C高表达率分别为65.7%(46/70)和42.8%(30/70).COX-2与VEGF-C蛋白表达之间存在显著相关(r=0.529,P＜0.01).(2)COX-2蛋白的高表达与淋巴结转移、LVD和淋巴管浸润呈正相关(P＜0.05),与雌激素受体状态、无病生存率和总生存率呈负相关(P＜0.05).VEGF-C蛋白的高表达与淋巴结转移、LVD、淋巴管浸润呈正相关(P＜0.05),与组织学分化、无病生存率和总生存率呈负相关(P＜0.05).结论 COX-2可能通过上调VEGF-C表达来促进乳腺癌淋巴管生成,从而导致淋巴结转移的发生.COX-2和VEGF-C的高表达提示乳腺癌患者容易出现淋巴结转移和预后不良.
-
神经干细胞移植于慢性癫痫鼠海马CA3区对其认知功能的影响
目的 探讨神经干细胞(NSCs)移植到慢性海人酸(KA)致癫痫鼠海马CA3区后对其认知功能的影响.方法 采用KA脑室注射法制作慢性癫痫鼠模型,将原代培养的增强绿色荧光蛋白(EGFP)标记的NSCs移植到慢性癫痫鼠的海马CA3区,所有大鼠在移植组移植后12周行Morris水迷宫试验,然后移植组大鼠取脑冰冻切片,在倒置荧光显微镜下直接观察移植细胞的存活和迁移,采用免疫荧光染色法观察移植细胞分化情况.结果 癫痫鼠组大鼠在目标区域逗留时间明显短于正常大鼠组,而逃避潜伏期明显长于正常大鼠组(P＜0.01);移植组大鼠的逃避潜伏期比癫痫组和假手术组大鼠明显缩短,在目标区域逗留时间显著延长(P＜0.01).且移植后12周,NSCs大量存活(65045.00±881.72),迁移到齿状回和海马各区并分化为神经元和神经胶质细胞.结论 癫痫能够损害大鼠的认知功能.将NSCs移植于KA致慢性癫痫鼠海马CA3区后,NSCs不仅能够长期存活、迁移到齿状回和海马各区并分化成神经元和神经胶质细胞,而且能够明显改善癫痫鼠的认知能力.
-
235例乳腺病变粗针吸微创性活检及免疫组织化学检测意义
目的 评价乳腺病变粗针吸活检(CNB)方法,探讨CNB组织免疫组织化学检测的临床意义.方法 对CNB后接受手术治疗的235例乳腺病变病理资料进行分析对比,对其中CNB诊断为浸润性癌后行术前化疗的87例进行p53、c-erbB-2、ER和PR免疫组织化学(SP法)检测,并与观测化疗后癌组织形态学变化结合分析.结果 235例中CNB诊为乳腺癌者204例,与手术后病理良恶性符合率为100%;CNB诊为非浸润性癌中60%病例术后病理发现浸润性癌成分;CNB诊为不典型增生者中50%术后病理证实为癌;CNB组织与术后常规组织免疫组织化学表达阳性率一致,差异无统计学意义(P＞0.05);有、无化疗反应的病例p53、c-erbB-2表达差异有统计学意义(P＜0.05);p53和c-erBb-2阳性病例多无明显化疗后形态学改变.结论 CNB对乳腺病变是一种有效且创伤轻微的诊断方法,但它仍有一定局限性,用CNB组织做免疫组织化学检测有较为重要的临床意义.
-
树突状细胞MyD88介导热休克蛋白60的信号转导
目的 观察热休克蛋白60(HSP60)刺激对树突状细胞(DC)活性的影响,探讨髓性分化因子88(MyD88)在介导HSP60信号转导中的作用.方法 培养小鼠骨髓源性DC,分为对照组、HSP60组及RNA干扰组,对照组在正常条件下继续培养2 d,HSP60组加入终质量浓度为10mg/L的HSP60,RNA干扰组于加入MyD88 siRNA4h后给予10 mg/L HSP60刺激,均继续培养2 d.流式细胞术检测DC细胞表面CD11c、CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子的变化,ELISA法检测DC分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-12(IL-12)的浓度,免疫细胞化学检测DC MyD88、核因子-κB(NF-κB)的表达,Western blot检测DC MyD88的变化,混合淋巴细胞培养检测T细胞增殖能力.结果 3组CD11c阳性率差异无统计学意义(P＞0.05),分别为78.65%、82.40%及85.72%,HSP60组CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子的阳性率分别为70.28%、76.49%及38.24%,较对照组(阳性率分别为28.42%、34.56%及16.28%)及RNA干扰组(阳性率分别为32.16%、40.47%及20.76%)显著增高(P＜0.05);HSP60组TNF-α、IFN-γ及IL-12浓度显著高于对照组及RNA干扰组(P＜0.05);HSP60组可见MyD88高表达及NF-κB核移位;HSP60组SI显著高于对照组及RNA干扰组(P＜0.01).结论 HSP60通过MyD88依赖的途径活化DC,MyD88是HSP60信号转导中的重要调节分子.
-
RNAi表达载体对膀胱癌细胞Livin基因表达的抑制作用
目的 观察RNA干扰(RNAi)表达载体对膀胱癌BIU-87细胞Livin基因的抑制作用.方法 构建针对Livin基因的RNAi质粒表达载体,脂质体法转染膀胱癌BIU-87细胞株,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测其对Livin mRNA及蛋白表达的影响.结果 构建的表达质粒在膀胱癌BIU-87细胞株中均抑制了Livin mRNA及蛋白表达.与空白载体组细胞作对照,前者产生的小干扰RNA(siRNA)在对Livin mRNA的抑制率24、48 h分别为(81.28±9.21)%、(55.88±6.27)%,蛋白抑制率24 h为(64.75±7.55)%.结论 RNAi表达载体可以有效地抑制膀胱癌细胞Livin基因的表达.
-
应用高密度寡核苷酸(Oligo)基因芯片筛选胶质瘤相关基因
目的 应用高密度寡核苷酸(Oligo)基因芯片技术筛选胶质瘤相关基因.方法 抽提5例胶质瘤和10例正常脑组织的总RNA并逆转录为cDNA,其中Cy5、Cy3的dNTP分别掺入胶质瘤和正常脑组织的cDNA,混合后杂交含22 000个人类基因人类高密度Oligo基因芯片,经过洗片和扫描,获得荧光信号图像并用计算机分析,随机抽取3种差异表达基因用PCR验证它们胶质瘤和正常脑组织中的差异表达.结果 从22 000条基因中筛选出差异表达基因242条,其中123条表达上调,119条表达下调,包括细胞周期蛋白、细胞凋亡、细胞骨架和运动蛋白等相关基因.结论 基因芯片技术的胶质瘤基因表达谱分析能够高通量筛选胶质瘤相关基因,并高效对基因功能进行研究,有助于认识肿瘤发病机制.
-
靶向RNA干扰Survivin对结肠癌细胞HT-29增殖凋亡的影响
目的 探讨肿瘤增殖型腺病毒(Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP)介导的以人Survivin为靶标的RNA干扰对结肠癌细胞株HT-29中Survivin mRNA和蛋白表达及对HT-29增殖凋亡的影响.方法 用Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP转染结肠癌细胞株HT-29(以携带相同shRNA的增殖缺陷型腺病毒和脂质体载体为对照),用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测转染后的HT-29细胞中Survivin mRNA和蛋白表达的变化,用噻唑蓝(MTT)法、吖啶橙/溴乙锭荧光染色法、Annexin V-PE/7-AAD联合染色法检测细胞死亡率及凋亡率.结果 与复制缺陷型腺病毒载体和脂质体载体比较,转染Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP后,HT-29细胞中Survivin mRNA拷贝数及蛋白表达显著降低,其细胞死亡率和凋亡率显著提高(P＜0.05).结论 Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP介导的RNA干扰较之增殖缺陷型腺病毒载体和脂质体载体具有更高的干扰效率,且能高效地诱导结肠癌细胞凋亡并抑制其增殖.
-
3TSR体内外诱导内皮细胞凋亡的研究
目的 观察血管形成抑制剂3TSR体内外对内皮细胞的影响,并探讨与细胞凋亡蛋白酶-3(Caspase-3)的关系.方法 在体外培养条件下比较对照组、不同剂量3TSR(1～3 μmol/L)作用48 h对人脐静脉血管内皮细胞增殖及凋亡的影响,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组Caspase-3 mRNA转录水平.建立裸鼠原位胰腺癌模型,进行随机干预实验,比较对照组(每日0.2 ml生理盐水腹腔注射)、3TSR1组(每日1 mg/kg体重腹腔注射)、3TSR2组(每日2mg/kg体重腹腔注射)及3TSR3组(每日3 mg/kg体重腹腔注射),每组6只,3周后检测胰腺癌原位肿瘤血管内皮细胞凋亡率.结果 体外培养时3TSR对人脐静脉内皮细胞有显著增殖抑制及凋亡诱导作用,作用48 h后其凋亡率分别为(10.3±3.2)%,(12.4±4.1)%和(20.1±5.4)%,均显著高于对照组(P＜0.05).3TSR1组、3TSR2组和3TSR3组Caspase-3 mRNA转录水平相对强度分别(0.76±0.11),(0.79±0.21)和(0.89±0.19),均显著高于对照组(P＜0.05),且随浓度增加而增强.体内实验时3TSR能显著诱导胰腺癌血管内皮细胞凋亡,3TSR1组、3TSR2组及3TSR3组凋亡率分别为(7.8±3.0)%,(14.6±4.9)%和(15.9±3.2)%,均显著高于对照组(P＜0.05).结论 3TSR体内外均能诱导内皮细胞的凋亡,且呈一定的浓度依赖性,其作用机制可能与促进Caspase-3基因转录有关.
-
主动脉机械瓣膜置换术后低强度抗凝研究
目的 探讨人工机械主动脉瓣膜置换术后行低强度抗凝的可行性及安全强度.方法 85例主动脉机械瓣膜置换的患者,按国际标准化比值(INR)分为A、B两组,定时分别检测其INR、D-二聚体浓度与抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ:C),并定时监测术后出血及血栓形成的发生率.结果 两组术后AT-Ⅲ:C分别与对照组差异均无统计学意义(P＞0.05).D-二聚体与对照组比较B组增高,A组无明显变化,A、B两组间差异有统计学意义(P＜0.05).两组均出现临床轻微出血现象(牙龈出血、眼睑或皮下紫瘢),其中A组4人次(4/50),B组3人次(3/35).A组无一例出现栓塞,B组中3例患者出现单侧肢体轻微栓塞现象.结论 我国南方地区主动脉瓣人工机械瓣膜置换术后行较低强度抗凝治疗是可行的,INR值控制在1.5～1.8范围较安全.
-
CCL5及其受体在乳腺癌组织中的表达及其意义
目的 检测趋化因子CCL5及其受体在浸润性乳腺癌组织中的表达并探讨其临床意义.方法 应用SYBR Green Ⅰ real time-PCR定量检测33例浸润性乳腺癌患者癌组织及其癌旁组织的CCL5及其受体CCR1、CCR3、CCR5 mRNA的表达.结果 各期癌组织CCR1及CCR3 mRNA的相对表达量与癌旁正常组织差异无统计学意义(P＞0.05),CCR5及CCL5 mRNA的相对表达量均高于癌旁正常组织(P＜0.05),Ⅰ期和Ⅱ期乳腺癌组织CCL5 mRNA的表达量差异无统计学意义(P＞0.05),Ⅲ期乳腺癌组织CCL5 mRNA的相对表达量为2.477,Ⅳ期乳腺癌组织CCL5 mRNA的相对表达量高(3.710).CCR5及CCL5 mRNA的表达高度相关(Pearson相关系数为0.971).结论 趋化因子CCL5及其受体CCR5 mRNA在Ⅳ期乳腺癌组织中的表达水平高,CCL5可能以自分泌方式与受体CCR5结合促进乳腺癌生长和转移.
-
肝脏纤维化中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的表达
目的 探讨肝脏纤维化中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)的表达.方法 应用超液化碘油、二氧化硅(SiO2)晶体及其混合物作用于C57BL/6J小鼠肝右叶3个月后建立局部肝纤维化模型.测量病变组织变性坏死、纤维细胞增生及巨噬细胞和纤维细胞结节的面积大小变化,同时比较病变部位中纤维组织Caspase-3表达的阳性率.结果 三组小鼠变性坏死面积不同,其中混合液组局部变性坏死面积大(P＜0.01);混和液组与碘油组比较变性坏死面积差异无统计学意义(P＞0.05),碘油组与混和液组均引起肝纤维组织增生,而混和液组致肝纤维化较碘油组更明显(P＜0.01),混和液组中出现巨噬细胞和纤维细胞性结节,个别结节有玻璃样变.免疫组织化学显示,对照组门汇管区与SiO2组纤维化病灶内纤维细胞Caspase-3表达的阳性率分别为(20.0±5.7)%和(35.0±11.2)%(P＜0.01).结论 SiO2与超液化碘油的联合应用可以选择性地引起肝组织纤维化,其机制可能与Caspase-3的表达作用有关.
-
转染NK4基因对膀胱癌移行上皮细胞HGF基因表达的影响
目的 观察转染NK4基因对膀胱癌上皮细胞HGF基因表达的影响.方法 利用脂质体Lipofectin-2000将质粒pcDNA3(+)/NK4导入BIU-87膀胱癌细胞,用pcDNA3(+)作为阴性对照.G418稳定筛选阳性细胞克隆后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞和对照组细胞NK4基因mRNA水平表达,Western blot检测转染后细胞培养上清液NK4和细胞胞质HGF蛋白的表达含量.结果 转染阳性细胞NK4 mRNA恒定表达,RT-PCR和Western blot分别显示在mRNA转录水平和蛋白表达水平,稳定转染的膀胱癌细胞NK4含量明显高于对照组.转染了NK4基因的肿瘤细胞HGF蛋白表达水平明显降低,而转染空载体则无作用.结论 脂质体将外源NK4基因导入肿瘤细胞后能稳定表达NK4蛋白,而且可以有效降低肿瘤细胞HGF表达的水平.
-
急性坏死性胰腺炎大鼠肠道黏膜屏障功能的损害及肠道细菌移位
目的 观察急性坏死性胰腺炎(ANP)时肠道黏膜屏障的变化和肠道细菌移位.方法 选择SD大鼠,逆行胰胆管穿刺法诱导制备大鼠ANP模型并分为两组,分别为假手术组(SO)和坏死组(ANP).术后24 h,观察大鼠ANP模型的回肠黏膜通透性、回肠绒毛高度和黏膜厚度的变化,测定血浆D-乳酸浓度和血浆内毒素水平,并行脏器细菌培养.结果 ANP组血浆内毒素水平较SO组升高(P＜0.01),细菌培养SO组均无阳性,ANP组细菌培养总阳性率为55.6%,其中以腹水细菌培养阳性率高,为75.0%,菌种鉴定主要为肠球菌和变形杆菌.ANP组24 h后血浆D-乳酸浓度高于SO组,差异有统计学意义(P＜0.01).ANP组24 h回肠黏膜发生病理形态学的改变,从绒毛高度和黏膜厚度测量值上观察发现ANP组肠壁明显变薄.结论 本组实验中,大鼠ANP时的回肠黏膜病理形态学的变化提示ANP大鼠肠道的机械屏障明显受损;血浆D-乳酸浓度的显著上升,证明它可从功能上反映ANP大鼠肠道屏障功能的损害.大鼠ANP时的内毒素水平和脏器细菌培养阳性率的升高,证明内毒素血症和肠道细菌移位是由于早期肠道通透性升高和肠道屏障受损所致.
-
散发性结直肠癌1号染色体等位基因杂合缺失精细定位研究
目的 抑癌基因的杂合缺失(LOH)被认为是结直肠癌形成的通路之一.本实验通过对1号染色体1p36.33～36.31、1q31.1～32.1区域进行杂合缺失精细定位分析,以发现更精确的高频杂合缺失区域.方法 在1p36.33～36.31、1q31.1～32.1区域分别选择7个、6个荧光标记微卫星引物与83例结直肠癌的肿瘤和正常组织进行聚合酶链反应(PCR)反应.产物在电泳后进行LOH分析.LOH结果与临床病理参数之间的关系比较采用x2检验.结果 1p36.33～36.31区域平均杂合缺失率是31.47%,以D1S243位点高,为47.22%(34/72),低是D1S1347,为7.35%(5/68).存在两个高频杂合缺失区域:D1S243位点(1p36.33)以及D1S468-D1S2660区域(1p36.32～36.31).1q31.1～32.1区域平均杂合缺失率是22.98%,以D1S2622位点高,为36.73%(18/49),低是D1S412,为16.42%(11/67).更精确的缺失范围定位在D1S413和D1S2622之间(1q31.3～32.1),大约2 cm的遗传距离范围内.1p36.33～36.31、1q31.1～32.1区域各位点的杂合缺失率与性别、年龄、肿瘤大小、生长方式以及Dukes分期无显著相关.提示该区域上的杂合缺失现象普遍存在于各种类型的散发性结直肠癌中.结论 1号染色体上存在3个高频杂合缺失区域,D1S243位点(1 cm)、D1S468和D1S2660位点之间(3 cm)以及D1S413和D1S2622之间(2 cm),提示在这些区域存在与结直肠癌相关的抑癌基因.
-
乳酸对肌腱细胞转化生长因子-β表达的调节作用
目的 探讨乳酸对兔屈趾肌腱腱鞘、腱外膜和腱内膜细胞转化生长因子(TGF)-β及其受体产生的影响.方法 从兔屈趾肌腱分离腱鞘、腱外膜和腱内膜细胞并分别进行培养,在使用25 mmol/L的乳酸培养后,酶联免疫吸附试验定量检测TGF-β及其受体的表达,同时应用原位杂交和免疫组织化学技术测量TGF-β1的表达.结果 乳酸能显著增加3种细胞所有TGF-β及其受体的表达(P＜0.05),其中腱鞘细胞的TGF-β1和TGF-β2增加值大,腱外膜细胞的TGF-β1和TGF-β2的受体增加值大,腱内膜细胞则为TGF-β3增加值大;乳酸还显著增加3种细胞的TGF-β1表达.结论 乳酸能显著增加肌腱细胞的TGF-β、TGF-β受体和TGF-β1 mRNA的表达,因此为肌腱愈合过程中调节TGF-β水平提供新的途径.
-
射频消融联合醋酸及高渗氯化钠对消融体积的影响
目的 探讨射频消融(RFA)联合醋酸及高渗氯化钠对消融体积的影响.方法 RFA联合50%醋酸及5%NaCl对离体牛肝进行消融.实验分5组,Ⅰ组:单纯RFA组,Ⅱ组:RFA联合纯醋酸组,Ⅲ组:RFA联合蒸馏水组,Ⅳ组:RFA联合10%氯化钠组,Ⅴ组:RFA联合50%醋酸及5%氯化钠组.结果 在固定消融条件的情况下,所形成的平均消融体积长径Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别为3.08、3.18、3.08、4.32和4.46 cm;短径分别为2.99、2.98、2.77、4.29和4.44 cm.Ⅳ组和Ⅴ组所形成的平均消融体积明显大于其他各组,消融时间较其他各组明显延长,Ⅱ组和Ⅴ组对血管旁组织有一定的消融作用.结论 RFA消融联合50%醋酸及5%NaCl可显著扩大消融体积,醋酸溶液可沿组织间隙渗透,对血管旁组织进行消融.
-
银杏叶提取物对门静脉高压大鼠肺血管核转录因子-κB和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响
目的 观察银杏叶提取物(GBE)对门静脉高压症大鼠肺血管核转录因子-Κb(NF-Κb)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 应用免疫组织化学染色方法检测普通雄性Wistar大鼠100只(将实验动物随机分为4组:(1)PHT组(门静脉高压症组);(2)GBE+PHT组(腹腔注射GBE);(3)对照组即生理盐水NS+PHT组(腹腔注射生理盐水);(4)假手术组.)中NF-κBp65、α-SMA的表达.结果 假手术组中两者几乎无阳性表达,分别为0.129±0.001(0.229±0.101).其余3组以PHT组和NS+PHT组表达强,分别为0.329±0.004(0.349±0.089)、0.324±0.004(0.334±0.084),组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).GBE+PHT组阳性表达较弱为0.198±0.003(0.288±0.103),与PHT组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 门静脉高压可以引致全身多器官血管病变,NF-Κb、α-SMA可能在其发病机制中起到重要的作用.
-
血流力学对组织工程心脏瓣膜种子细胞形态及功能的影响
目的 观察血流力学对组织工程心脏瓣膜种子细胞形态及功能的影响.方法 从犬骨髓中分离得到骨髓间充质细胞(MSCs),经DiI标记后接种于去细胞猪主动脉瓣膜支架,培养7d后将所得瓣叶种植于犬腹主动脉内,术后4、8、12周取材,进行HE染色、天狼猩红染色、免疫组织化学染色及超微电镜检查等,观察细胞生长、形态及功能变化.设体外培养组为对照组.结果 接种骨髓间充质细胞的去细胞猪主动脉瓣膜支架,移植于犬腹主动脉内后,仍可检测到所种植细胞,细胞生长良好.与对照组比较,细胞形态有所伸长,整体上沿流体方向改变形态,同时,瓣叶组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显增加,并充满中性和酸性黏多糖.结论 构建组织工程心脏瓣膜时,血流力学对种子细胞维持形态、保持功能起着重要作用.
-
高迁移率族蛋白B1对小鼠调节性T细胞抑制性相关分子表达的影响
目的 观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对调节性T细胞(Treg)T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)及叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)表达的影响,并对其机制进行初步探讨.方法 免疫磁珠法分离正常BALB/C小鼠脾脏CD4+CD25+Treg.采用固相包被抗CD3及可溶性CD28辅助活化,观察HMGB1刺激与CTLA-4及Foxp3表达的时间-效应关系及剂量-效应关系.结果 HMGB1刺激Treg时,CTLA-4表达在24～72 h均有所下调(P＜0.05或P＜0.01),其中以作用48、72 h表达下调尤为明显(P＜0.01);而不同剂量HMGB1(10、100、1000 μg/L)刺激均可诱导CTLA-4表达下调(P＜0.05或P＜0.01),其中HMGB1浓度在1000μg/L时其表达下调明显.Foxp3表达与CTLA-4呈现出相同的趋势.结论 HMGB1能诱导Treg CTLA-4表达减弱.HMGB1可能通过下调Foxp3表达进而影响Treg免疫调节活性.
-
人脑胶质瘤中全长新基因PPIL3的获得及染色体定位和表达谱分析
目的 运用基因芯片技术获取正常成人脑组织与人脑胶质瘤中差异表达的基因,并对其中一条基因进行研究.方法 抽提正常成人脑组织与人脑胶质瘤组织中的mRNA来制备探针,经杂交、洗涤后,通过计算机观察两者表达谱的差异情况,对681F05克隆子进行Northern blot,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),染色体定位和生物信息学分析.结果 通过4次基因芯片筛选,获得15条与胶质瘤相关的新基因,经Northern blot证实681F05基因在人正常脑组织中低表达,而在人脑胶质瘤中高表达.PPIL3基因位于染色体2 q33区段的STS marker stSG2762和SHGC-3074之间.BLASTn和BLASTx分析显示,它们编码蛋白与线虫Cyp-10蛋白同源性分别为52%和72%.cDNA序列分析发现这两上克隆是同一个基因[命名为cyclophilin-like gene(PPIL3)]的两个不同的剪切体(PPIL3a和PPIL3b).结论 基因芯片筛选正常脑组织与人脑胶质瘤差异表达的基因具有样品用量少,高质量,高速度,高敏感等特性.681F05基因可能是与人脑胶质瘤形成有关的一条全长新基因.
-
炎症细胞凋亡在高容量血液滤过防治多器官功能障碍中的变化及意义
目的 探讨高容量血液滤过(HVHF)防治家猪多器官功能障碍(MODS)对主要炎症细胞:中性粒细胞及淋巴细胞凋亡的影响.方法 19头猪采用失血性休克+复苏灌注+内毒素血症复制MODS模型,随机分为HVHF组(n=10)和MODS组(n=9).采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-10浓度;采用流式细胞仪检测中性粒细胞(PMN)及淋巴细胞的凋亡.结果 HVHF组治疗后IL-1β浓度明显下降;治疗开始后IL-10明显下降,6 h达到低点,此后维持在稳定状态.HVHF组治疗后,中性粒细胞凋亡率增加,而淋巴细胞凋亡率下降.HVHF组各主要器官功能均明显改善,动物死亡率和MODS发生率显著低于MODS组.结论 高容量血液滤过能有效降低血浆细胞因子水平,进而加速了中性粒细胞的凋亡,抑制了淋巴细胞凋亡,在一定程度上恢复了机体的免疫平衡,从而对MODS起到防治作用.
-
丝列霉素处理的外周血单核细胞对大鼠同种异体移植心脏的影响
目的 观察MMC处理的外周血单核细胞(PBMCs)对大鼠同种异体心脏移植的影响.方法 BN大鼠作为供体,Lewis大鼠作为受体,体重在200～300 g.PBMCs于含有MMC的细胞培养液中培养30min后于移植前1周静脉注射入受体,然后接受心脏移植,观察移植心脏的存活情况;并利用FACS检测MMC对PBMCs存活率的影响.结果 MMC处理过的PBMCs诱导了细胞的凋亡;接受MMC处理过的PBMC的大鼠,移植心脏的存活时间明显得以延长.结论 MMC处理的PBMCs可以延长大鼠移植心脏的存活时间,对移植心脏的延长作用可能是由于MMC诱导了细胞的凋亡引起的.
-
乳腺癌组织黏着斑激酶、血管内皮生长因子-C表达与淋巴转移的关系
目的 研究黏着斑激酶(FAK)和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在乳腺癌组织中的表达,探讨其与肿瘤淋巴转移的关系及两者的相关性.方法 应用免疫组织化学SP法检测92例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中FAK、VEGF-C的表达情况.结果 92例乳腺癌组织中FAK和VEGF-C的阳性表达率分别为69.6%和46.7%,与良性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);FAK的阳性表达与乳腺癌肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、临床分期呈正相关(P＜0.01),VEGF-C的表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移、临床分期呈正相关(P＜0.05);乳腺癌组织FAK和VEGF-C的表达呈正相关(P＜0.01,列联系数C=0.3952).结论 FAK和VEGF-C蛋白的表达与乳腺癌淋巴转移密切相关,FAK可能通过上调VEGF-C的表达,增强其淋巴管生成作用,进而促使乳腺癌细胞的淋巴转移.
-
凝血酶敏感蛋-1、血管内皮生长因子及微血管密度对骨肉瘤复发转移的判断价值
目的 探讨凝血酶敏感蛋-1(TSP-1)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)在判断骨肉瘤患者复发转移中的价值.方法 采用免疫组织化学法检测65例骨肉瘤手术切除标本的VEGF、TSP-1蛋白的表达情况并计数MVD,对上述指标与术后复发转移率之间的关系进行回顾性分析.结果 全组病例TSP-1、VEGF蛋白表达阳性率分别为30.77%(20/65)和61.54%(40/65);MVD平均值为(23.68±9.42)/200倍视野;VEGF阳性组的术后复发转移率高于VEGF阴性组(P＜0.05);TSP-1阳性组的术后复发转移率低于TSP-1阴性组(P＜0.05);多因素分析表明,MVD和淋巴结状况为判断骨肉瘤术后复发转移的独立因素(P＜0.05).结论 MVD是判断骨肉瘤术后复发转移的独立因素,具有判断术后复发转移的风险及预后的价值.
-
P-糖蛋白和p38在人肝癌组织中的表达及其意义
目的 观察P-糖蛋白和p38蛋白在人肝癌组织中的表达.方法 应用免疫组织化学方法检测62例人中晚期肝癌及其癌旁正常黏膜中P-糖蛋白和有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族成员p38的表达.结果 P-糖蛋白和p38在中晚期肝癌中的表达高于早期癌和正常黏膜,差异有统计学意义(66.67%比33.33%;83.87%比16.13%,P＜0.05).结论 中晚期肝癌中P-糖蛋白和p38处于过度表达状态,参与肝癌的发生、发展和转移.
-
反义MDM2联合紫杉醇对胶质瘤细胞U251的作用及其机制
目的 探讨MDM2反义寡核苷酸联合紫杉醇对U251人胶质瘤细胞株的作用.方法 以Lipofectamine介导的MDM2反义寡核苷酸转染U251人胶质瘤细胞株,免疫组织化学法检测胶质瘤细胞株MDM2蛋白的改变,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测凋亡,Western blot检测野型生p53(wild type p53,wtp53)的表达,构建荷胶质瘤裸鼠模型,采用瘤内注射和腹腔给药方式,以MDM2反义寡核苷酸联合紫杉醇治疗,研究其联合抗肿瘤作用.结果 脂质体介导反义MDM2 ODN转染U251人胶质瘤细胞株后,MDM2表达减少,与紫杉醇联合使用可增加细胞的凋亡率,野型生p53的表达量增加,裸鼠动物试验联合治疗组瘤重显著小于单独用药组及对照组.结论 MDM2反义寡核苷酸可显著降低MDM2在U251中的表达,引起细胞凋亡,MDM2反义寡核苷酸与紫杉醇联合作用U251人胶质瘤细胞株具有协同作用.
-
兔桡骨骨不连体外震波治疗的观察
有研究认为体外震波治疗(ESWT)对骨不连有较好效果,近年来研究表明:尚没有证据证明体外震波(ESW)对骨不连有明显疗效,震波对于骨缺损的作用机制仍不清楚[1].缺少统一标准的骨不连动物模型可能是研究结果矛盾的原因之一,为此我们设计了这一组实验.
-
局部用前列腺素E1对兔颈动脉损伤后内膜过度增生的影响
我们用医用蛋白胶携载前列腺素E1(PGE1)喷涂于损伤血管外膜,使PGE1持续作用于损伤血管,通过观察对血管内膜增生和平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,为血管成形术后再狭窄方面的研究提供依据.
-
高表达Omi/HtrA2对PED/PEA-15表达缺陷前列腺癌细胞凋亡的影响
我们通过载体构建、转染和筛选,建立PED/PEA-15表达缺陷的前列腺癌亚克隆细胞系,探讨Omi/HtrA2与PED/PEA-15间的作用对前列腺癌细胞凋亡的影响,以阐明前列腺癌细胞凋亡机制.
-
Src羧基端激酶结合蛋白在非小细胞肺癌中的表达
我们对48例非小细胞肺癌(NSCLC)标本进行Src羧基端激酶结合蛋白(CBP)mRNA和蛋白表达的检测,探讨CBP与肺癌发生、发展的相关性.
-
Survivin-siRNA对骨肉瘤MG-63细胞株增殖抑制的影响
们应用化学合成的特异性Survivin-siRNA在脂质体的介导下转染骨肉瘤MG-63细胞,观察其对骨肉瘤细胞增殖抑制的影响.
-
32例肺错构瘤的诊断与外科治疗
肺错构瘤是肺内常见的良性肺瘤之一,易与肺癌及肺结核球混淆.1990年至2006年12月我们共收治32例肺错构瘤的患者,均经手术和病理证实,现报道如下.
-
茅莓总皂苷抗肿瘤作用及诱导肿瘤细胞凋亡的研究
本研究旨在观察茅莓总皂苷的体内外抗肿瘤活性及对黑色素瘤和S180肉瘤细胞凋亡的影响报道如下.
-
尼美舒利对胰腺癌细胞PANC-1增殖和凋亡的影响
我们通过噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,观察体外尼美舒利对人胰腺癌细胞株PANC-1的作用,并探讨其可能的作用机制,为临床开辟新的抗癌途径提供依据[1].
-
一种内毒素诱发的大鼠急性肝衰竭模型
内毒素血症是扩大肝切除术后出现急性肝衰竭的主要原因之一[1,2].我们建立了一种大鼠70%肝切除术后24 h外源性内毒素诱发的急性肝衰竭模型,现报道如下.
-
褪黑素对烧伤脓毒症大鼠肝脏核因子-κB表达的影响
本实验旨在观察褪黑素对烧伤脓毒症大鼠肝脏核因子(NF)-κB表达的影响,为临床防治烧伤脓毒症肝损伤提供依据.
-
凋亡抑制基因x-相关细胞凋亡抑制蛋白基因在肝癌细胞中的表达及临床意义
目的 探讨x-相关细胞凋亡抑制蛋白基因(XIAP)mRNA及蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的表达情况,及其与肝癌发生的关系.方法 肝癌患者手术切除标本10例,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测肝癌组织和癌旁组织细胞XIAPmRNA基因的相对表达量,并通过免疫组织化学SP法检测10例肝癌组织和癌旁组织标本XIAP蛋白的表达情况.结果 (1)半定量RT-PCR显示:XIAP基因在肝癌组织中均呈高表达,相对表达量为3.211±2.43,而在对应的癌旁组织中呈低表达或无表达,相对表达量为1.947±1.890,两组之间差异有统计学意义(P＜0.05).(2)免疫组织化学及图像分析结果显示:在肝癌组织和癌旁组织中XIAP蛋白平均灰度扫描值分别为161.800±29.470和144.240±26.290,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 XIAP在肝癌中的表达明显增高,可能在肝癌的发生、发展过程中发挥重要作用.
-
大肠癌患者外周血调节性T细胞的检测及临床意义
目的 观察大肠癌患者外周血CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞数量的变化,探讨其与肿瘤临床病理特征的关系.方法 应用流式细胞仪分析大肠癌患者和健康对照组外周血单个核细胞的Treg细胞数目,比较Treg细胞百分比变化与大肠癌临床病理特征的相关性.结果 结直肠癌患者Treg细胞占CD4+T细胞百分比(15±8)%,与健康对照组(6.0±3.5)比较,差异有统计学意义(P＜0.01);CEA正常的结直肠癌患者Treg细胞占CD4+T细胞百分比(13±4)%,与CEA升高的结直肠癌患者Treg细胞(17±10)%比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Duke's C和D期的结直肠癌患者Treg细胞占CD4+T细胞百分比(19±6)%,与A期和B期Treg细胞百分比(12±5)%比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结直肠癌患者外周血TGF-β1含量(1.2±0.4)ng/L,与Treg细胞数目呈正相关(r=0.253,P＜0.05).结论 Treg细胞在大肠癌患者中比例升高,可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,Treg细胞增加可作为大肠癌患者肿瘤进展的重要标志.
-
新型感染性腹膜炎与急性肺损伤动物模型的建立
目的 建立一种稳定的上消化道穿孔后由化学性腹膜炎到感染性腹膜炎的动物模型,探讨其在急性肺损伤中的作用.方法 48只大鼠分2组,假手术组(A组),实验组(B组)横断十二指肠球部1/2,并将胃窦部下拉悬吊于中腹部.术后6、12 h分批处死,统计各组的造模成功率;随机取A组各时间点8只,B组各时间点造模成功大鼠8只,进行血WBC,血、腹水内毒素测定,呼吸频率计数,动脉血气分析,肺湿/干比,肺组织病理损害评分和电镜观察.结果 A组造模成功率为0,B组造模成功率为91.7%(22/24).B组各时间点血内毒素、腹水内毒素、血WBC、呼吸频率、肺湿/干比、肺组织损害评分、PaCO2均显著高于A组(P＜0.01),PaO2低于A组(P＜0.01);B组6 h血内毒素、腹水内毒素及血WBC、呼吸频率、肺组织损害评分、湿/干比均显著低于12 h(P＜0.01).结论 该动物模型接近临床,可以模拟上消化道穿孔后由化学性腹膜炎到感染性腹膜炎的过程,并可导致急性肺损伤.
-
一种改进的大鼠肾移植模型
目的 建立一种改进的大鼠异体肾移植模型.方法 应用120只Wistar大鼠分别作为供体和受体,采用原位灌注、将供肾的血管与受体的同名血管作端-端吻合以及输尿管直接植入膀胱的方法建立大鼠原位肾移植模型.结果 建立并改进了大鼠同种异体肾移植模型,成功率达到90%.热缺血时间小于3 s,冷缺血(低温灌洗、供肾修整和冷保存)时间(40±5)min,血管吻合时间约35min,总手术时间为(160±10)min.结论 该模型稳定性强,重复性好,适合于移植免疫的基础研究.
-
胃肠外科实验研究的进展
近年来,随着基础研究、现代影像医学技术、内镜技术和靶向药物的不断进步和广泛临床应用,研究者胃肠外科的发展已推进至全新的阶段.胃肠外科对疾病的病因、进展和治疗等方面也有了崭新的飞跃.
-
小RNA干扰技术沉默Smoothened(Smo)基因表达对胃癌MGC803细胞增殖及凋亡的影响
目的 观察Smo基因在胃癌MGC803细胞中的表达,及其对胃癌MGC803细胞增殖与凋亡的作用.方法 半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测胃癌MGC803细胞中Smo基因的表达;化学合成3条针对Smo mRNA的小干扰RNA(siRNA),阳性脂质体介导转染胃癌MGC803细胞,半定量RT-PCR筛选出降解胃癌MGC803细胞Smo mRNA有效的siRNA;噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测胃癌MGC803细胞Smo mRNA被降解后,对细胞增殖和凋亡率的影响.结果 胃癌MGC803细胞内有Smo蛋白及Smo mRNA的强表达,siRNA-1、siRNA-2对胃癌MGC803细胞Smo基因表达均有降解作用,siRNA-1降解作用明显,达61.7%,与隐性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).siRNA-1转染胃癌MGC803细胞24 h后,细胞增殖水平较隐性对照组明显下降(P＜0.05);转染48 h后,细胞凋亡率较隐性对照组明显上升(P＜0.05).结论 胃癌MGC803细胞内存在Smo基因的高表达,降低Smo基因表达可抑制胃癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,Smo基因具有调控胃癌细胞增殖和凋亡的作用.
-
小干扰RNA对胃癌细胞葡萄糖调节蛋白94表达的抑制作用
目的 构建Grp94靶向RNA干扰质粒载体,观察其对人类胃癌细胞株SGC-7901 Grp94基因表达的抑制作用.方法 从GenBank中选取人类Grp94基因序列,采用siRNA Target Designer-Version 1.51设计软件设计1对Grp94基因发卡寡核苷酸,序列符合siRNA表达载体siSTRIKETM U6的要求并与psiSTRIKETM质粒载体连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体.采用LipofectamneTM 2000转染试剂进行转染,将重组质粒导入人类胃癌细胞株SGC-7901内,分别在转染前、转染后24、48和72 h通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot及免疫荧光技术检测Grp94 mRNA及蛋白水平的表达情况.结果 成功构建RNA干扰质粒载体,靶向Grp94干扰质粒载体命名为psiSTRIKETM/Grp94,将上述质粒转染到人类胃癌细胞株后,观察到psiSTRIKETM/Grp94能够明显下调Grp94 mRNA及蛋白水平的表达,并随着时间推移稳定存在.结论 构建的RNA干扰真核表达载体psiSTRIKETM/Grp94能明显抑制Grp94 mRNA及蛋白的表达,提示通过降低胃癌细胞中Grp94的表达,可能抑制或辅助抑制胃癌细胞的生长的作用.
-
趋化因子巨噬细胞炎症蛋白-1α动员的树突状细胞经基因修饰后抗胃癌效应
目的 观察趋化因子巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)体外动员的树突状细胞(DC)经基因修饰后在荷瘤小鼠体内的抗胃癌效应.方法 615小鼠通过尾静脉注射MIP-1α,流式细胞仪分选出B220-CD11c+细胞,加人鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(mGM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和鼠肿瘤坏死因子-α(mTNF-α)贯续培养进行诱导分化.通过细胞表型和混合淋巴细胞反应,检测细胞因子培养前后B220-CD11c+细胞的异同.收集培养后的B220-CD11c+细胞,加入编码黑色素瘤抗原基因-3(MAGE-3)的重组腺病毒进行转染,制备表达肿瘤抗原的DC疫苗.制备小鼠前胃癌(MFC)实体瘤模型,DC疫苗于MFC细胞接种后经皮下注射,观察小鼠瘤体生长和存活情况,研究DC疫苗的免疫治疗作用.结果 MIP-1α注射8 h后外周血中B220-CD11c+细胞数量即升高,48 h达到高峰,占外周血单个核细胞(MNCs)(13.68±0.95)%.新鲜分离的B220-CD11c+细胞不具有成熟DC的特征,而经体外细胞因子诱导分化后则具有典型的DC表型,并具有极强的刺激T细胞增殖的能力.小鼠皮下接种MFC细胞后注射基因修饰的DC疫苗,小鼠瘤体生长缓慢,存活时间明显延长,与对照组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 注射趋化因子MIP-1α可快速动员B220-CD11c+细胞进入小鼠外周血,并经细胞因子可诱导分化为成熟DC.MIP-1α动员的DC经基因转染制备的DC疫苗,在体内对荷瘤小鼠有明显的免疫治疗作用,且较荷载全肿瘤细胞抗原的DC疫苗作用明显增强.
-
缺氧诱导因子-1α和P糖蛋白、多药耐药相关蛋白1、肺耐药相关蛋白在胃癌中的表达及意义
目的 探讨缺氧诱导因子(HIF)-1α与耐药蛋白P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)在胃癌中的表达及HIF-1α在胃癌耐药中的作用.方法 通过免疫组织化学方法研究含有168例的胃癌病例和27例正常胃组织的组织芯片中HIF-1α和耐药蛋白P-g、MRP1、LRP的表达及其关系.结果 HIF-1α和耐药蛋白P-gp、MRP1、LRP在胃癌中的阳性表达率分别为51.8%、51.8%、45.8%、55.4%,均明显高于在正常胃组织中的表达(P＜0.05).HIF-1α与肿瘤大小、分化程度、浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移显著相关.HIF-1α和P-gp,MRP1之间显著正相关(P＜0.05).Kaplan-Meier分析显示HIF-1α和P-gp、MRP1阳性组的预后较阴性组差(P＜0.05),COX回归多因素分析显示浸润深度,淋巴结转移和远处转移是独立预后因素.结论 缺氧可能通过HIF-1α上调耐药蛋白P-gp、MRP1的表达参与胃癌化疗耐药形成.HIF-1α、P-gp和MRP1可能成为评价胃癌预后和耐药的有价值指标.
-
胸苷酸合成酶、二氢嘧啶脱氢酶和胸苷磷酸化酶mRNA在胃癌中的表达及其意义
目的 探讨胸苷酸合成酶(TS)、二氢嘧啶脱氢酶(DPD)和胸苷磷酸化酶(TP)在胃癌中的mRNA表达,及与临床病理特征和5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗敏感性的关系.方法 应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-RCR)检测了TS、DPD和TPmRNA在4株胃癌细胞、52例胃癌肿瘤和正常组织中的表达,比较了酶表达水平和临床病理特征之间的关系;噻唑蓝(MTT)法检测4株胃癌细胞的5-Fu半数抑制浓度(IC50),及30例标本的5-Fu体外药物敏感性,探讨其与氟尿嘧啶代谢酶mRNA水平的关系.结果 4株胃癌细胞均阳性表达TS、DPD和TP mRNA,DPD mRNA水平与5-Fu IC50之间显著相关(r=0.999,P＜0.01),TS mRNA或TP mRNA与5-Fu IC50之间无显著相关性(P＞0.05).肿瘤组织的TS和TP mRNA水平均显著高于邻近正常组织(1.32±0.70 vs 0.93±0.48,P＜0.01;0.65±0.37 vs 0.51±0.33,P＜0.01),DPD mRNA水平在肿瘤与正常组织间的差异无统计学意义(0.89±0.39 vs 0.93±0.47,P＞0.05).TS表达与浸润深度(P＜0.05)、远处转移(P＜0.01)和TNM分期(P＜0.01)相关,DPD在肠型胃癌中的表达显著高于弥漫型(P＜0.01),且倾向高表达于肿瘤面积＜5 cm者(P＜0.01),TP mRNA表达与浸润深度(P＜0.05)和远处转移(P＜0.05)有关.TS mRNA(r=-0.540,P＜0.01)及DPD mRNA水平(r=-0.672,P＜0.01)与5-Fu敏感性负相关,TP水平与5-Fu敏感性无显著相关(r=-0.317,P＞0.05).结论 胃癌肿瘤内TS和TP mRNA表达显著高于正常组织,且与胃癌分期关系密切,DPD mRNA与Laurén分型和肿瘤面积有关,细胞试验和原代培养均提示DPD mRNA低水平表达可能是5-Fu高敏感性的预测指标.
-
Ezrin在胃癌细胞的表达及与胃癌细胞侵袭能力的关系
目的 检测胃癌细胞株中Ezrin的表达情况与胃癌细胞株的侵袭能力,探讨Ezrin的表达与胃癌细胞侵袭能力的关系.方法 分别采用Western blot和Real-Time PCR的方法,检测Ezrin在胃癌细胞株的表达情况,运用以胶原为基础的细胞侵袭试验检测胃癌细胞株的侵袭能力.结果 Ezrin在胃癌细胞株中的表表达存在差异,其中MKN-45表达水平高,N-87表达水平低;侵袭试验显示MKN-45的侵袭能力强,N-87侵袭能力弱.结论 Ezrin在胃癌细胞中的表达存在差异,Ezrin的表达水平与胃癌细胞的侵袭能力成正相关.
-
六氧化四砷对小鼠胃癌生长和转移的抑制作用
目的 观察六氧化四砷(As4O6)对小鼠胃癌生长和转移的抑制作用.方法 完整组织块SCID鼠胃壁原位种植,建立胃癌转移模型.将裸鼠40只随机分为4组,每组10只.移植后第7天开始,分别给予生理盐水(对照组)、5-氟尿嘧啶(5-Fu组)、As4O6组、5-Fu和As4O6联合应用(5-Fu+As4O6组),每日1次,共6周.种植后第8周末处死动物,原位肿瘤切除称重,计算抑瘤率、测定肿瘤微血管密度(MVD)和细胞凋亡指数(AI),并检查转移情况,计算转移抑制率.结果 与对照组比较,5-Fu组、As4O6组和5-Fu+As4O6组的抑瘤率分别为46.3%、52.2%和67.9%(均P＜0.05),MVD分别为(12.2±5.2)、(7.1±3.5)(P＜0.05)和(5.6±3.3)(P＜0.05),AI分别为(6.82±4.27)、(10.51±6.19)(P＜0.05)和(14.66±7.54)(P＜0.05),肝转移抑制率分别为25%、55%(P＜0.05)和70%(P＜0.05),腹膜转移抑制率分别为22.9%、61.4%(P＜0.05)和87.1%(P＜0.05).As4O6组和5-Fu+As4O6组胃癌生长和转移受到明显抑制,以5-Fu和As4O6联用组效果明显.结论 As4O6通过抑制血管生成对胃癌生长和转移有明显抑制作用,与5-Fu联用可起协同抑制作用.
-
5-氮胞苷对EB病毒阳性胃癌细胞的影响
目的 体外建立EB病毒阳性胃癌细胞系并探讨去甲基化试剂5-氮胞苷对EB病毒阳性胃癌的辅助治疗作用.方法 用cell to cell感染法建立EB病毒阳性胃癌细胞系.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和PCR-southern检测不同剂量5-azacytidine处理前后EB病毒启动子的活性,并用Western blot检测EB病毒相关基因的表达.结果 体外感染后筛选的细胞克隆为EB病毒阳性,EBNA免疫荧光染色为阳性.EB病毒相关蛋白的免疫印记显示核蛋白除EBNA1阳性外EBNA2 EBNA3s均为阴性.膜蛋白LMP1也为阴性.5-azacytidine处理后EB病毒阳性胃癌细胞系中被甲基化失活的C启动子重新活化,并表达潜伏性膜蛋白1(LMP1).且呈剂量依赖性.结论 体外通过cell to cell感染方式,可成功建立EB病毒阳性胃癌细胞系.建立的EB病毒阳性胃癌细胞系AGS/EB病毒和NUGC3/EB病毒体外培养呈Ⅰ型潜伏感染.5-azacytidine可能对EB病毒阳性胃癌的特异性治疗有帮助.
-
胚胎干细胞:从基础到临床有多远
尽管随着医学技术的快速发展,越来越多的疾病被彻底征服,然而,组织、器官的不可逆损伤或功能衰竭仍是困扰人类健康的世界性医学难题.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 |
