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茅莓总皂苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及血-脑脊液屏障变化的影响
目的:研究茅莓总皂苷(TSRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及血脑屏障通透性的影响.方法:采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,在大鼠脑缺血2 h再灌注6,24,48,72 h分别测定脑含水量和伊文思蓝含量的变化及茅莓总皂苷各剂量组的影响.结果:与模型组比较茅莓总皂苷各剂量组均能不同程度降低脑含水量和伊文思蓝含量.结论:茅莓总皂苷各剂量组显著降低缺血2h再灌注6,24,48,72 h脑水肿和其对血脑屏障通透性,这可能是其减轻I/R时脑水肿的机制之一.
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茅莓总皂苷对黑色素瘤的抗肿瘤作用研究
目的:评价茅莓总皂苷对黑色素瘤的体内、外抗肿瘤药效作用.方法:A375人恶性黑色素瘤细胞体外常规传代培养,随机分5组,分别加入环磷酰胺,茅莓总皂苷高、中、低(0.01,0.001,0.000 1 mg·mL-1)3个质量浓度,以不加药作阴性对照,MTT法检测茅莓总皂苷的体外抗肿瘤作用;用B16黑色素瘤细胞移植小鼠,随机分阳性药(环磷酰胺)组,茅莓总皂苷高、中、低(100,50,25 mg·kg-1)剂量组及阴性药(生理盐水)组,观察体内抑瘤效果、荷瘤小鼠生存时间和生命延长率;同时采用TUNEL法检测茅莓总皂苷对B16黑色素瘤细胞凋亡的影响.结果:体外抑瘤试验显示,高、中质量浓度茅莓总皂苷组与阴性对照组比较,P＜0.05,有统计学意义;体内抑瘤试验显示,高剂量组平均瘤体积明显低于阴性对照组(P＜0.05),抑瘤率37.02%;荷B16黑色素瘤小鼠用茅莓总皂苷治疗后存活时间增加;茅莓总皂苷高、中、低剂量组黑色素瘤细胞凋亡指数分别为32.5%,20.5%和5.5%,与阴性对照组(3.5%)比较差异有统计学意义.结论:茅莓总皂苷对体内、外黑色素瘤细胞有抑制作用,并呈量效依赖关系,能通过促进黑色素瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤活性.
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茅莓总皂苷对大鼠局灶性脑缺血的保护作用
目的:研究茅莓总皂苷(TGRP)对局灶性脑缺血的保护作用.方法:采用大脑中动脉阻塞(MACO)法制备大鼠局灶性脑缺血模型;脑梗死区重量用TTC染色法测定,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及细胞凋亡均采用测试药盒测定.结果:TGRP 10,20mg·kg-1可改善大鼠异常神经症状,使MACO大鼠的SOD,GSH-Px活力提高,MDA生成减少,减少脑皮层细胞凋亡数.结论:TGRP对脑梗死有保护作用,其作用机制可能与抗自由基、抑制细胞凋亡有关.
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茅莓总皂苷诱导HL-60白血病细胞凋亡机制研究
目的:明确茅莓总皂苷(TSRP)在体外对HL-60细胞抑制增殖和诱导凋亡作用.方法:MTT法检测不同浓度TSRP对HL-60细胞的增殖抑制;使用DAPI和Annexin V-FITC/PI法观察TSRP诱导凋亡作用;RT-PCR法检测TSRP对HL-60细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9和Fas mRNA表达的影响.结果:MTT显示TSRP在浓度200、400、800 mg/L对HL-60细胞生长抑制呈剂量依赖性,浓度800mg/L时吸光度为(0.232±0.030),与空白对照组比较差异显著(P＜0.01).DAPI显示TSRP在一定浓度内干预HL-60细胞后出现明显凋亡现象;Annexin V-FITC/PI凋亡检测显示经不同浓度TSRP处理后,HL-60细胞的早期凋亡率明显增加;RT-PCR检测到在一定浓度范围内,TSRP显著抑制细胞Bcl-2和Fas mRNA表达,同时Bax、Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达明显增加,以上均呈剂量依赖性.结论:在体外TSRP是通过Bcl-2和Fas途径诱导HL-60细胞凋亡,具有较好的临床应用前景.
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茅莓总皂苷体外抗肿瘤作用研究
茅莓(Rubus parviflolius L.),别名天青地白草、红梅消、三月泡,为蔷薇科悬钩子植物,具有活血化瘀,清热解毒等作用.
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茅莓总皂苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠的比较蛋白质组学研究
目的 采用蛋白质组学技术研究茅莓总皂苷对脑缺血/再灌注大鼠脑组织差异蛋白的影响,进一步揭示茅每总皂苷的脑保护作用及抗损伤修复机制.方法 建立脑缺血/再灌注大鼠动物模型,分别提取蛋白质后进行2-DE电泳分离,应用相关软件比较分析,找出差异蛋白,酶切消化后进行肽指纹图谱分析,通过数据检索,初步鉴定差异蛋白质.结果 与模型组比较,茅莓总皂苷组找到29个差异点,其中18个蛋白点表达上调,11个蛋白点表达下调,鉴定了其中7个蛋白.结论 茅莓总皂苷对脑保护作用及抗损伤修复机制的机制是多个蛋白质共同参与的结果.
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茅莓总皂苷对大鼠海马神经元细胞缺氧损伤后胞内钙超载的影响
目的 研究茅莓总皂苷对原代培养大鼠海马神经元缺血损伤后胞内钙超载的影响.方法 大鼠海马神经元培养后,用Fluo-2/AM负载培养的神经细胞,氧糖剥夺30 min,在激光共聚焦显微镜下监测加入茅莓总皂苷后海马神经元的[Ca2+]i的变化.结果 茅莓总皂苷10-5,10-4,10-3 g·L-1和Nim 10-5 mol·L-1组能不同程度地降低大鼠海马神经元细胞内[Ca2+]i.结论 茅莓总皂苷可通过减轻细胞内的钙超载来对缺血神经元进行保护.
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茅莓总皂苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注后神经细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响
目的探讨茅莓总皂苷对缺血性脑损伤的神经保护机制.方法采用大鼠大脑中动脉阻塞造成局灶性脑缺血2 h,再灌注24 h模型,以HE染色,TUNEL标记和免疫组化的方法观察茅莓总皂苷5、10、20 mg*kg-1对凋亡细胞数目及相关蛋白Bcl-2,Bax表达的变化.结果 3个剂量的茅莓总皂苷治疗组显示神经元形态病理改变明显减轻,降低残存细胞中TUNEL阳性细胞的百分率.增加Bcl-2阳性细胞的表达,降低Bax阳性细胞的表达,Bcl-2/Bax的表达比例增加.结论茅莓总皂苷有明显的抗凋亡作用,其机制可能与增加Bcl-2阳性细胞的表达,降低Bax阳性细胞的表达,提高Bcl-2/Bax有关.
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茅莓总皂苷抗肿瘤作用及诱导肿瘤细胞凋亡的研究
本研究旨在观察茅莓总皂苷的体内外抗肿瘤活性及对黑色素瘤和S180肉瘤细胞凋亡的影响报道如下.
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茅莓总皂苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注后凋亡相关基因Bc1-2mRNA,BaxmRNA表达的影响
目的:探讨茅莓总皂苷对缺血性再灌注后凋亡相关基因Bc1-2mRNA,BaxmRNA表达的影响.方法:采用大鼠大脑中动脉阻塞造成局灶性脑缺血再灌注模型,以原位杂交技术观察脑缺血再灌注不同时间点茅毒总皂苷5,10,20 mg·kg-1对凋亡相关基因Bcl-2 mRNA,Bax mRNA的表达.结果:3个剂量的茅莓总皂苷治疗组增加Bcl-2 mRNA阳性细胞的表达,降低Bax mRNA阳性细胞的表达.结论:茅莓总皂苷有明显的抗凋亡作用可能与增加Bcl-2 mRNA阳性细胞的表达,降低BaxmRNA阳性细胞的表达有关.
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茅莓总皂苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠兴奋性氨基酸含量的影响
目的:研究茅莓总皂苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠兴奋性氨基酸(EAA)含量的影响.方法:将大鼠随机分为茅莓总皂苷5,10,20mg·kg-1组及尼莫地平10 mg·kg-1组、模型组和假手术组.灌胃给药3 d,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,相应时间断头取脑.采用高效液相法测定大鼠脑组织中天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)的含量.结果:缺血对照组天冬氨酸、谷氨酸含量明显高于治疗组.结论:茅莓总皂苷对脑缺血再灌注损伤有保护作用.其可能的机制为:干扰脑缺血再灌注损伤中EAA代谢而发挥脑保护作用.
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茅莓总皂苷提取分离工艺考察
目的:研究D101大孔吸附树脂富集、纯化茅莓总皂苷的工艺条件及参数.方法:以茅莓总皂苷的洗脱率和纯度为考察指标,研究大孔吸附树脂富集、纯化茅莓总皂苷的吸附性能和洗脱参数.结果:茅莓提取液上大孔吸附树脂柱,用不同体积分数的乙醇依次洗脱,茅莓总皂苷富集于40%乙醇洗脱液部分.结论:通过大孔吸附树脂富集、纯化后,茅莓总皂苷的洗脱率在75.4%以上,总固物中茅莓总皂苷含量可达64.4%.
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正交试验优选茅莓总皂苷的提取工艺
目的:优选茅莓总皂苷的提取工艺.方法:在单因素考察的基础上,以乙醇浓度、固液比、提取温度和提取时间为考察因素,以茅莓总皂苷提取率为指标,优选茅莓总皂苷的提取工艺.结果:佳提取工艺为乙醇浓度80％,提取时间为3h,固液比为1:20,提取温度为80℃.在此条件下,茅莓总皂苷提取率达到1.994％.结论:该工艺稳定、可行,可为工业化生产提供理论依据.
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茅莓总皂苷的主要药效学研究
目的:研究茅莓总皂苷(TGRP)的主要药效学和急性毒性.方法:观察TGRP对断尾小鼠对出血时间的影响,对肝素化小鼠出血时间和出血量的影响;对小鼠常压耐缺氧生存时间的影响;对断头小鼠喘气时间的影响;结扎双侧总动脉建立小鼠脑缺血模型,观察TGRP对小鼠6h、12h死亡率和存活时间;采用颈动、静脉旁路方法观察TGRP对大鼠实验性血栓形成的影响.结果:TGRP非常显著的延长断尾小鼠出血时间;对肝素化小鼠TGRP使小鼠出血量明显增加;延长小鼠常压缺氧生存时间;延长断头小鼠喘气时间;降低结扎双侧总动脉小鼠死亡率,延长存活时间;同时,对大鼠血栓形成有明显抑制作用.结论:TGRP对脑缺血缺氧有明显的保护作用.
