中华实验外科杂志
Chinese Journal of Experimental Surgery 중화실험외과잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 0.75
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-9030
- 国内刊号： 42-1213/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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葡萄球菌肠毒素A对肝癌肿瘤浸润淋巴细胞抗瘤活性的作用
目的探讨葡萄球菌肠毒素A(SEA)对肝癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)抗瘤活性的诱导作用.方法取5例手术切除肝癌标本,分离TIL,在SEA作用下进行培养.定时记数,了解其增殖情况.流式细胞仪检测其CD3、CD4、CD8表达情况,噻唑蓝(MTT)比色法测定其对HepG-2肝癌细胞株的细胞毒活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和γ-干扰素(IFN-γ)浓度.结果在SEA刺激下,2周TIL扩增100倍.1周后CD3+细胞占95%以上,CD8+细胞较CD4+细胞增殖更迅速.TIL细胞毒活性随培养逐渐增强.在培养的前10 d内,TIL产生大量的TNF-α峰值达(453.70±9.26) ng/L和IFN-γ,其峰值达(2 013.22±20.41) ng/L.结论 SEA可高效、迅速诱导肝癌TIL的抗瘤活性.
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B7-H3基因与三氧化二砷联合治疗肿瘤的协同效应
目的探讨联合三氧化二砷(As2O3)与B7-H3基因治疗肿瘤的协同效应.方法分别建立小鼠肝癌的大肿瘤和多发肿瘤模型,序贯法瘤内注射真核表达质粒pcDNA3.1-Flag-B7-H3和As2O3,监测大肿瘤及多发性肿瘤的生长情况;免疫组织化学和免疫印记(Western blot)检测B7-H3基因的表达;CD31免疫组织化学染色评估抗肿瘤血管化的效果;TUNEL检测肿瘤细胞的凋亡情况.结果单用B7-H3基因或As2O3治疗大肿瘤只能使肿瘤暂时缩小而不能消退;联合治疗不但可以治愈大肿瘤,而且可以根除多发性肿瘤.免疫组织化学及Western blot检测结果表明B7-H3基因在肿瘤细胞内表达.联合治疗使肿瘤组织的微血管密度显著减少(P<0.01),肿瘤细胞的凋亡显著增加(P<0.01).结论联合治疗可以有效地根治大肿瘤和多发性肿瘤.
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西罗莫司对移植动脉粥样硬化的预防作用
目的研究新型免疫抑制剂西罗莫司(Sirolimus)对大鼠移植动脉粥样硬化的预防作用.方法建立大鼠颈动脉移植模型,将受体鼠随机分为3组,即空白对照组、环孢素组及Sirolimus组,6周后对移植动脉行病理组织学检测观察移植动脉再狭窄程度、免疫组织化学检测转化生长因子(TGF)-β1和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果 Sirolimus组血管内膜增厚程度显著低于对照组和环孢素组,其移植动脉再狭窄程度为(15.00±1.21)%,而对照组和环孢素组分别为(40.00±5.91)%、(34.00±6.55)%,差异均有统计学意义(P＜0.01);PCNA在Sirolimus组表达明显低于空白对照组和环孢素组,分别为(1.10±0.30)%、(14.20±2.56)%及(4.10±0.62)%,差异有统计学意义;TGF-β1在Sirolimus组表达低于对照组和环孢素组,分别为(5.00±1.39)%、(18.00±1.52)%及(16.00±2.35)%(P＜0.01).结论 Sirolimus可预防大鼠移植动脉粥样硬化,TGF-β1和PCNA基因表达的下调可能是Sirolimus 预防移植动脉粥样硬化机制中重要环节.
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猪辅助性带胰头及十二指肠肝肠联合移植的研究
目的介绍猪辅助性带胰头及十二指肠的肝肠联合移植(LSBT)模型技术及其免疫抑制治疗.方法 40头杂交长白猪分为两组,每组20头,组内进行辅助性带胰头及十二指肠的LSBT 10次.其中A组未用免疫抑制剂治疗,B组采用环孢素A和甲基强的松龙治疗.结果 A组动物术后成活时间为(10.33±1.93) d(7～25 d),B组全部动物成活超过30 d.在没有应用体外转流的情况下,可以耐受血液动力学的波动,血液动力学指标(B组)可以在血流再通后2 h恢复正常.B组猪术后血液、尿液和腹腔引流液中的淀粉酶一过性升高,但在1周后回落到术前水平,活检没有发现严重胰腺炎.结论猪辅助性带胰头和十二指肠的LSBT是一种可行的、安全的移植模型,这一模型可以简化传统肝肠移植的技术,应用环孢素A和甲强龙可以有效的抑制猪肝肠移植后急性排斥反应.
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白细胞介素-18与一氧化氮在非小细胞肺癌的生长与转移中的意义
目的探讨白细胞介素(IL)-18和一氧化氮(NO)在非小细胞肺癌(NSCLC)的生长与转移方面的影响作用.方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)及Griess反应分别检测82例NSCLC肿瘤组与20例正常对照组血清IL-18和亚硝酸盐+硝酸盐浓度.结果肿瘤组血清IL-18浓度为(334.2±31.0) ng/L,对照组为(151.3±22.0) ng/L,肿瘤组亚硝酸盐+硝酸盐浓度为(237.1±21.0) μmol/L,对照组为(44.2±15.0) μmol/L,肿瘤组明显高于对照组.肿瘤组外周血血清IL-18和亚硝酸盐+硝酸盐浓度与患者的性别、年龄、病理类型无关.IL-18血清浓度与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移及远处转移有关但与淋巴结转移的数量和部位及远处转移的脏器类别差异无统计学意义.而亚硝酸盐+硝酸盐浓度则与之无关.IL-18与亚硝酸盐+硝酸盐浓度之间无关联.结论研究提示血清中IL-18和亚硝酸盐+硝酸盐浓度在NSCLC患者对疾病的评估具有临床检测意义.
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瘦素及其受体在胃癌中的表达
目的研究瘦素(Leptin)和瘦素受体(ob-R)在胃癌组织中的表达并探讨其在胃癌发生、发展过程中的作用.方法采用免疫组织化学染色方法检测54例胃癌组织中瘦素和瘦素蛋白的表达,并就其表达与临床病理组织学参数之间的关系进行了相关性分析.结果 54例胃癌组织中瘦素和瘦素受体的的表达率为72.22%(39/54)和74.07%(40/54),肠型胃癌瘦素表达率明显高于弥漫性胃癌.瘦素的表达率与肿瘤组织分化、癌肿大小、转移、TNM分期有关.结论瘦素和瘦素受体以双重表达方式存在于胃癌组织中,参与胃癌的早期发生过程并在其发展中起一定作用.
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5-氟尿嘧啶聚乳酸载药纳米微粒对人胃癌和结肠癌细胞株的体外杀伤效应
目的探讨5-氟尿嘧啶聚乳酸载药纳米微粒(5-Fu-PLA-NP)对人胃癌和结肠癌细胞株的体外杀伤效应.方法超声乳化法制备5-Fu-PLA-NP载药纳米微粒;用噻唑蓝(MTT)比色法从1～10 d连续检测1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/L浓度5-Fu-PLA-NP和5-Fu对人胃癌细胞株MGC803和结肠癌细胞株SW620的体外杀伤效应,并计算出2种药物的半数抑制率浓度IC50和对肿瘤细胞的生长抑制率.结果 5-Fu-PLA-NP的体外累积药物释放率在7 d时为75.7%,10 d时达94.3%;5-Fu的杀伤效应在1～7 d时呈时间依赖关系,7 d后进入平台期;5-Fu-PLA-NP则在1～10 d均呈时间依赖关系;7 d时两者在不同剂量的杀伤效应均呈剂量依赖关系,并且两者间差异无统计学意义.结论 5-Fu-PLA-NP具有药物缓释效应,可延长药物对人胃癌与结肠癌细胞的有效作用时间;并且载药纳米微粒没有降低5-Fu成分的生物学活性.
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两种支架材料与颌下腺细胞体外复合培养的比较研究
目的将颌下腺细胞分别与颌下腺脱细胞基质(SGAM)生物衍生材料及胶原海绵体外复合培养,比较两种不同支架材料的生物相容性.方法用传代培养第2代的颌下腺细胞分别与SGAM生物衍生材料及胶原海绵体外复合培养,在一定时间通过扫描电镜观察细胞在不同支架材料上的生长情况.结果颌下腺细胞在SGAM生物衍生支架材料上,多数附着在支架材料的孔隙内或其边缘,数量较多,大小不等,形态各异,表面凸凹不平,突起丰富;表面结构似"银耳"状.而细胞在胶原海绵支架材料上大多附着在材料表面,数量较少,突起较少.结论颌下腺脱细胞基质支架材料与胶原海绵支架材料相比具有良好的生物相容性,是一种较为理想的颌下腺组织工程用支架材料.
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大肠腺癌中辅助蛋白同源的磷脂酶基因和缺氧诱导因子-1α的表达及与血管内皮生长因子的关系
目的研究大肠腺瘤和腺癌组织中与张力蛋白和辅助蛋白同源的磷脂酶mRNA(PTEN mRNA)、缺氧诱导因子-1α mRNA(HIF-1α mRNA)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达及其临床意义.方法 PTEN mRNA、HIF-1α mRNA检测采用原位杂交技术,应用免疫组织化学方法检测VEGF蛋白的表达.结果 HIF-1α mRNA阳性表达为棕黄色杂交颗粒,主要定位于肿瘤组织坏死边缘区域的肿瘤细胞胞浆中.62例大肠腺癌标本中,PTEN mRNA、HIF-1 mRNA、VEGF蛋白阳性表达率分别为51.6%、67.7%、59.7%.18例大肠腺瘤标本中,PTEN mRNA、HIF-1 mRNA、VEGF蛋白阳性表达率分别为77.8%、44.4%、33.3%.大肠腺癌VEGF蛋白阳性表达率显著高于大肠腺瘤(P＜0.05),而PTEN mRNA则相反.有局部复发、淋巴结转移、肝转移、Dukes分期高的大肠腺癌组织中HIF-1 mRNA阳性表达率显著增高,而PTEN mRNA表达则相反.HIF-1α与VEGF呈显著正相关(χ2=4.751,P<0.05);HIF-1α mRNA表达与PTEN mRNA呈显著负相关(χ2=21.84,P<0.01);HIF-1α mRNA与VEGF无相关性(χ2=2.597,P>0.05).结论抑癌基因PTEN的低表达或突变缺失诱导HIF-1α及其靶基因VEGF的过度表达在大肠腺瘤-腺癌发展过程中起重要作用.
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蛋白激酶C-α在调节人膀胱癌T24细胞多药耐药中的作用
目的探讨蛋白激酶C-α(PKCα) 对人膀胱癌T24细胞多药耐药的调节作用.方法将载有PKCα基因的表达质粒GFP-PKCα导入人膀胱癌细胞系T24.应用噻唑蓝(MTT)比色法,检测T24/PKCα及亲本细胞对阿霉素的敏感性,以及在激活(10 nmol/L PMA 2 h)和抑制(10 nmol/L Calphostin C 2 h)PKCα的情况下,T24/PKCα细胞对阿霉素敏感性的变化.同时用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测多药耐药基因-1(MDR-1)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药相关蛋白(LRP)基因的表达.结果转染了PKCα基因后,T24细胞对阿霉素的耐药性增强(耐药指数7.52,P<0.05).PKCα的激活显著提高了T24细胞的耐药性(耐药指数153.78,P<0.01),而抑制PKCα活性则使耐药指数降至1.20(P>0.05).T24/PKCα的MDR-1表达水平是亲本细胞的2.28倍(P<0.01).激活PKCα可使MDR-1基因表达水平较亲本细胞升高12.80倍(P<0.01),抑制PKCα则MDR-1表达下降(P>0.05),而MRP和LRP基因表达水平并无明显变化(P>0.05).结论 PKCα可能通过上调MDR-1表达,在人膀胱癌的化疗耐药中起到了重要的作用.
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他克莫司对肝癌细胞增殖、凋亡及其对5-氟尿嘧啶敏感性的影响
目的探讨他克莫司(FK506)对肝癌细胞增殖、凋亡及其对5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响及其机制.方法体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测FK506对细胞增殖的影响;应用流式细胞术分析FK506、5-Fu及联合FK506和5-Fu对SMMC-7721细胞周期和凋亡的影响.结果 FK506(10、100、1 000 μg/L)对肝癌SMMC-7721细胞的增殖有抑制作用(P<0.05),但作用24 h后各组凋亡率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);5-Fu(50、75、100、200 mg/L)作用24 h后,其诱导细胞凋亡率呈浓度依赖关系,分别为13.2%、15.3%、21.7%和35.9%,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.001);随着5-Fu用药浓度的增加,S期细胞比例和细胞增殖指数也增加;FK506预处理增强了5-Fu诱导SMMC-7721细胞凋亡的作用,24 h细胞凋亡率分别为27.6%、32.0%和39.0%.结论 FK506能够显著抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,并能增强该细胞系对5-Fu的敏感性,这一作用可能与FK506和5-Fu协同诱导凋亡和G0/G1期停滞有关.
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大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤脊髓突触体素的变化
目的探讨坐骨神经慢性压迫性损伤大鼠脊髓突触体素(p38)变化及氯胺酮干预的影响.方法将24只SD雌性大鼠随机分为4组,I组:制备坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型;Ⅱ组:假手术对照组;Ⅲ组:CCI手术后第4天开始每天腹腔注射氯胺酮5 mg/kg体重2次,持续10 d;Ⅳ组:方法同Ⅲ组,但氯胺酮剂量为10 mg/kg体重.定期观察大鼠手术侧辐射热痛阈和机械痛阈的变化.用免疫组织化学技术和计算机图像分析系统检测手术侧脊髓背角浅层突触体素表达的变化.结果与对照组相比,其他3组均在第4天痛阈明显降低(P<0.05),此后I组、Ⅲ组痛阈一直稳定在较低水平即痛敏状态,而Ⅳ组在第14天热痛阈值和机械痛阈值与I组相比有明显升高(P<0.05).I组手术侧脊髓突触体素免疫阳性产物平均吸光度值与Ⅱ组相比增加了58%(P<0.01),Ⅳ组与I组相比降低了25%(P<0.05).结论神经病理痛发生后突触体素在脊髓背角浅层的表达明显升高,氯胺酮对其有抑制作用.
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siRNA抑制肝癌细胞甲硫氨酸腺苷转移酶2A基因表达
目的构建siRNA体内表达载体pSilence-2.1-U6-siRNA,筛选出抑制甲硫氨酸腺苷转移酶(MAT)2A表达的有效靶序列,为MAT2A的功能研究奠定了基础.方法以MAT2A为目的基因,以产生siRNA质粒载体pSilence-2.1-U6为表达模板,细胞内转录合成4条siRNA,并构建携带荧光素酶报告基因的重组质粒载体plucF-MAT2A.脂质体转染法将重组质粒载体plucF-MAT2A与产生siRNA的质粒pSilence-2.1-U6共转染293T细胞,定量测量荧光素酶活性,初步筛选出抑制荧光素酶表达的有效siRNA,然后将有效的siRNA转染Bel-7402肝癌细胞,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MAT2A mRNA表达,并检测转染后肝癌细胞MAT的活性及细胞凋亡情况,进一步证实siRNA对MAT2A表达的抑制效果.结果所合成的4条小干扰RNA中有2条抑制荧光素酶表达,抑制效率分别为81%和89%,并特异性抑制肝癌细胞MAT2A mRNA表达,降低了肝癌细胞中MAT活性,诱导肝癌细胞凋亡.结论 siRNA抑制肝癌细胞MAT2A基因表达.
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应用AdEasy腺病毒载体系统构建人骨形成蛋白2基因重组腺病毒
目的利用AdEasy腺病毒载体系统构建人骨形成蛋白2(BMP2)基因重组腺病毒并在293E细胞中扩增制备重组病毒.方法自人骨形成蛋白2真核表达载体pcDNA3-hBMP2中酶切出hBMP2基因,插入pAdtrackCMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdtrackCMV-hBMP2,经酶切线性化后,采用电穿孔转化到事先电转化腺病毒骨架质粒pAdEasy的BJ5183大肠杆菌电感受态细菌中,挑选同源重组质粒,酶切线性化重组质粒并转染293E细胞包装成重组病毒颗粒,荧光显微镜观察绿色荧光表达.重组病毒上清感染293细胞,荧光显微镜观察绿色荧光表达.结果经限制性内切酶检测和GFP表达证实成功地构建了携带hBMP2基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒.结论成功地构建了携带hBMP2基因的重组腺病毒载体,为进一步研究rBMP2基因治疗奠定了基础.
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三氧化二砷抑制肾癌细胞系786-0增殖及诱导凋亡的研究
目的探讨三氧化二砷(As2O3)对人肾癌细胞系786-0的增殖抑制和诱导凋亡的作用及可能机制.方法采用细胞增殖检测、形态学观察、琼脂糖凝胶电泳和肿瘤克隆形成等方法观察As2O3对786-0细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用,以免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术等探讨As2O3的作用机制.结果 2 μmol/L以上浓度As2O3可显著抑制786-0细胞的增殖、降低细胞核分裂指数并出现凋亡的形态学改变和DNA片段化,经2.0 μmol/L As2O3处理72 h后,其抑制786-0细胞增殖率为69.13%(P<0.01),使其核分裂指数由6.00降低至1.80(P<0.01),肿瘤细胞克隆形成抑制率达到100.00%.As2O3使786-0细胞内bcl-2、PCNA和Ki-67基因表达降低(P<0.01),其作用随药物浓度升高和时间延长而增加.结论 As2O3对786-0细胞具有显著的增殖抑制作用,并具有浓度和时间依赖性特点,可能通过下调其PCNA和Ki-67基因表达抑制增殖,抑制bcl-2基因的表达诱导细胞凋亡.
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5-氟尿嘧啶和柳氮磺胺吡啶对胰腺癌细胞株BxPC-3的抗增殖作用
目的探讨5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)对细胞株BxPC-3抗增殖作用.方法噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪、相差显微镜分别检测不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0) mg/L 5-Fu联合0.5 mmol/L sulfasalazine作用细胞株BxPC-3生长抑制率、细胞周期、凋亡率及细胞形态变化.结果不同浓度5-Fu联合0.5 mmol/L sulfasalazine作用细胞株BxPC-3生长抑制率呈时间、剂量依赖性;100 mg/L 5-Fu联合0.5 mmol/L sulfasalazine作用细胞株BxPC-3凋亡率从63%(12 h)增加到93%(48 h),与对照组比较[t＝48.87(12 h),263.15(48 h),P<0.01];G0/G1期细胞从80%(12 h)到97%(48 h),与对照组比较[t＝5.97(12 h),10.39(48 h),P<0.01];相差显微镜观察两者联合作用12 h大量细胞固缩变圆,随时间延长胞体萎缩裂解.结论两者联合作用细胞株BxPC-3有协同抑制作用,与细胞周期、凋亡率及形态变化相关.
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人arresten基因的克隆表达及其对内皮细胞增殖的影响
目的克隆表达血管生成抑制因子arresten基因,并探讨其生物学活性.方法利用基因重组技术,从含有人arresten基因的克隆载体pGEMArr上切下目的基因片段,亚克隆至含T7启动子的原核表达载体pRSET中,构建表达载体pRSETAN.将重组质粒pRSETAN转化入宿主菌E.coli BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导表达.菌体经超声波破碎,镍柱亲和层析纯化并复性.采用噻唑蓝(MTT)比色法测定表达蛋白抑制血管内皮细胞的活性.结果酶切鉴定和测序验证,表达载体构建正确.在表达宿主菌中,arresten基因获得了高效表达,表达量占菌体总蛋白质的27%;表达产物经亲和层析纯化后,蛋白质纯度达96%.经复性,重组蛋白可显著抑制血管内皮细胞生长因子促脐静脉内皮细胞的增殖作用.结论人arresten基因能在pRSET表达系统中得到高效表达;复性后表达蛋白能有效抑制血管内皮细胞的增殖.
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血管内皮生长因子-C在大肠癌中的表达及其与淋巴结转移的关系
目的研究血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在大肠癌中的表达,探讨其与淋巴结转移的关系.方法应用免疫组织化学染色法检测94例大肠癌组织标本中VEGF-C的表达,同时应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其mRNA在4株大肠癌细胞株中的表达.结果 VEGF-C在53.2%的大肠癌患者中呈阳性表达;VEGF-C在淋巴结转移阳性组中的表达,与阴性组比较差异有统计学意义(P<0.01);VEGF-C的表达与淋巴管浸润和Dukes分期密切相关(P<0.01),但与年龄、性别、肿瘤的位置、浸润深度和血管浸润均无明显相关.VEGF-C mRNA表达于大肠癌LoVo 及LoVo-5-Fu耐药细胞株.结论 VEGF-C的表达可能参与肿瘤淋巴管生成,与大肠癌淋巴结转移密切相关.
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膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞中Survivin mRNA的表达
目的研究Survivin mRNA在膀胱移行细胞癌(TCC)患者尿脱落细胞中的表达,及其与TCC的发生发展、病理分级、临床分期的相关性.方法用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对30例TCC患者、18例健康志愿者的新鲜中段晨尿Survivin的mRNA进行检测.结果病例组和正常对照组尿脱落细胞中Survivin mRNA的阳性率分别为100.00%和22.22%.病例组和对照组Survivin mRNA表达阳性率差异有统计学意义(P＜0.01).在病例组中,按TCC病理分级(I级、Ⅱ级、Ⅲ级)分组的标本灰度比值分别为1.00±0.18,1.28±0.14,1.70±0.23,各组间差异有统计学意义(P＜0.01).按TCC的临床分期(未突破基底膜、侵及浅肌层、侵及深肌层)分组的标本灰度比值分别为1.01±0.17,1.26±0.14,1.70±0.23,各组间差异有统计学意义(P＜0.01).结论检测尿脱落细胞中Survivin mRNA的表达可用于TCC患者的诊断及恶性程度和预后的判断.
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深低温停循环经右锁骨下动脉持续脑灌注与经上腔静脉逆行脑灌注的比较
目的比较深低温停循环(DHCA)时经右锁骨下动脉持续脑灌注(RSA)和经上腔静脉逆行脑灌注(SVC)对脑组织的保护效果.方法将36只杂种猫随机分为6组(n=6)建立体外循环(CPB).1组 DHCA 45 min,无脑灌注;2组 DHCA 45 min,经上腔静脉逆行脑灌注;3组 DHCA 45 min,经右锁骨下动脉持续脑灌注;4组 DHCA 90 min,无脑灌注;5组 DHCA 90 min,经上腔静脉逆行脑灌注;6组 DHCA 90 min,经右锁骨下动脉持续脑灌注.检测各组脑组织超微结构、颈静脉血乳酸含量、脑组织ATP含量和一氧化氮合成酶(NOS)活性.结果 DHCA时间相同时,SVC组和RSA组脑组织光镜及电镜下缺血、缺氧改变明显轻于无脑灌注组,颈静脉血乳酸含量和脑组织NOS活性均显著低于无脑灌注组(P<0.05),脑组织ATP含量显著高于无脑灌注组(P<0.05).DHCA 45 min后,SVC组和RSA组比较各指标差异无统计学意义.DHCA 90 min后,RSA组脑组织超微结构缺血、缺氧改变轻于SVC组.且RSA组脑组织ATP含量[(2.02±0.19) μmol/g]显著高于SVC组[(1.72±0.21) μmol/g,P<0.05].结论长时间深低温停循环时经右锁骨下动脉持续脑灌注比经上腔静脉逆行脑灌注更有利于保护脑组织的氧供需平衡.
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癌细胞表面表达人绒毛膜促性腺激素的免疫荧光检测
目的筛选可供体外和动物体内肿瘤抑制试验的候选癌细胞株.方法通过间接免疫荧光法,用兔抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)多克隆免疫球蛋白(IgG)和小鼠抗hCG单克隆免疫球蛋白(IgG),对人结(直)肠癌细胞(HCT15、HCT116、KM12、WiDr、LoVo、LS-174)、前列腺癌细胞(PC3)、小细胞肺癌细胞(A549)的细胞表达hCG情况进行检测.结果被检的8个癌细胞株均对兔抗hCG多克隆免疫球蛋白(IgG)呈阳性反应.其中4株结(直)肠癌细胞(HCT115、HCT116、LoVo、LS-174)和小细胞肺癌(A549)能被小鼠抗hCG单克隆免疫球蛋白染色.结论这5株能与小鼠抗hCG单克隆免疫球蛋白结合的细胞株都适用于以后的肿瘤杀伤试验.
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转移与无转移肝细胞癌患者血清蛋白质指纹图谱的比较
目的比较转移与无转移肝细胞癌(HCC)患者的血清蛋白质指纹图谱,筛选与肝癌转移相关的蛋白质.方法术前收集84例HCC患者(有转移45例,无转移39例)和30例健康成人的血清,采用弱阳离子交换蛋白质芯片为检测介质,经表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)测定,得到蛋白质指纹图谱并运BioMarker Wizard软件分析比较.结果在质荷比(m/z)1 500～30 000范围内,比较有转移HCC与健康成人的血清,检测出的146个蛋白质峰中,69个蛋白质峰差异有统计学意义(P<0.05),比较无转移HCC与健康成人的血清,60个蛋白质峰差异有统计学意义(P<0.05),差异蛋白质峰中57个为有转移与无转移HCC的共有蛋白峰;单独比较有转移与无转移HCC血清,检测出的146个蛋白质峰中仅有11个蛋白质峰差异有统计学意义(P<0.05).结论有转移与无转移HCC患者血清蛋白质之间有差异,但远较其与健康成人血清之间差异小;血清蛋白质指纹图谱中的差异蛋白质可能与肿瘤的发生和转移有关.
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Ki-67基因siRNA表达质粒的构建、鉴定及功能研究
目的构建肿瘤增殖基因Ki-67小干扰RNA(siRNA)表达质粒,研究其对人肾癌细胞Ki-67基因表达的阻抑作用,探索肾癌基因治疗新的途径.方法设计有小发夹机构的2条Ki-67 siRNA对应模板DNA序列,煺火处理后克隆至pSliencer 3.1质粒,构建重组质粒pSliencer-Ki-67.将pSliencer-Ki-67转染人肾癌786-0细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测Ki-67表达.结果酶切及测序证实质粒pSliencer-Ki-67构建成功.其可显著抑制786-0细胞Ki-67 mRNA、 Ki-67蛋白表达.结论成功构建的Ki-67 siRNA表达质粒pSliencer-Ki-67能抑制人肾癌786-0细胞Ki-67基因表达.
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自体原位移植肾缺血再灌注损伤模型的建立与环孢素A对移植肾的保护作用
目的建立一种新的移植肾缺血再灌注损伤(IRI)动物实验模型并寻找一种新的移植肾保护方法.方法 40只兔随机分为A组(生理盐水对照组)、B组(单纯灌注液组)、C组[环孢素A(CsA)+灌注液组,CsA浓度为0.01‰,W/V]、D组(CsA+灌注液组,CsA浓度为0.03‰,W/V).用套管针穿刺左肾动、静脉,灌注肾脏.原位低温保存2 h后,切除右肾并开放左肾血流使左肾复灌.于术后6、24 h分别取血标本,24 h后取左肾标本,测定血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr),TUNEL法检测分析左肾小管上皮细胞凋亡率,免疫组织化学法测定左肾组织HSP70的表达.结果 D组6、24 h BUN为(8.60±0.25) mmol/L、(7.99±0.14) mmol/L;Cr为(79.90±1.37) μmol/L、(78.98±1.66) μmol/L,细胞凋亡指数为0.075±0.035,明显低于其他各组;HSP70表达为(0.211±0.025) μm2,明显高于其他各组.结论本模型能客观反映移植肾缺血再灌注损伤状态,0.03‰CsA复合肾灌注液能明显降低移植肾缺血再灌注损伤.
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人骨形态发生蛋白-2基因转染人脂肪源性基质细胞的异位成骨作用
目的探讨腺病毒介导的人骨形态发生蛋白-2(Adv-hBMP-2)基因转染人脂肪源性基质细胞(ADSCs)的可行性及其成骨作用.方法从人脂肪组织中提取间充质细胞,分别转染β-半乳糖苷酶(β-gal)基因和hBMP-2基因,通过X-gal染色明确转染效率,免疫沉淀+Western blot法和ELISA 法检测BMP-2表达,确定BMP-2表达量、表达时间及其相互关系,流式细胞仪观察基因转染对细胞凋亡的影响,并将转基因细胞注入裸鼠股部肌内行X线及组织学检查.结果 X-gal染色显示转染效率达91%.免疫沉淀+Western blot法和ELISA法显示转染hBMP-2的ADSC具有较高且稳定的BMP-2的表达,20 d内表达量无明显减退.流式细胞表明腺病毒转染后细胞凋亡率上升,但上升幅度不大.裸鼠肌内注射转基因细胞后2周即显示有异位骨形成,4周明显增多,对照组无骨组织形成.结论 ADSC是较好的基因治疗载体细胞,转染hBMP-2后可以诱导裸鼠体内骨形成.
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新型纤维素导管桥接周围神经缺损的研究
目的运用一种新型纤维素材料导管桥接周围神经缺损.方法将原代培养、纯化的Schwann细胞种植入新型复合纤维素导管作为移植物,于大鼠模型上桥接1.0 cm坐骨神经缺损.术后1周,扫描电镜观察Schwann细胞在导管内壁的生长情况;术后12周,取桥接物中段,行半薄切片光镜观察及超薄切片电镜观察神经纤维再生状况.结果桥接物植入后1周,Schwann细胞贴附于导管内壁良好生长.植入后12周,管内有大量排列整齐、结构成熟的再生神经纤维.结论新型纤维素组织工程化神经可有效桥接周围神经缺损,该导管材料在医疗中具有广阔的应用前景.
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端粒酶在大鼠胚胎神经干细胞的表达及其生物学特性
目的观察Wistar大鼠胚胎神经干细胞及其分化细胞的端粒酶活性,探讨神经干细胞维持其生物学特性的分子生物学基础及神经干细胞分化调控的内在机制.方法显微镜下分离大鼠胚胎室管膜下区细胞,在含生长因子的神经干细胞完全培养液中培养形成神经干细胞,然后在不含生长因子而含10%血清培养液中分化14～16 d,应用改良的端粒重复序列扩增法(TRAP)研究神经干细胞及其分化细胞的端粒酶活性.结果 Wistar大鼠胚胎神经干细胞表达较强的端粒酶活性,而分化后的细胞则不再表达端粒酶活性.结论端粒酶活性的改变可能是胚胎神经干细胞诱导分化的机制.随着端粒酶活性的逐渐下降,胚胎神经干细胞随之分化为具有一定生物学特性的细胞.
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异种膀胱无细胞基质替代尿道的研究
目的探讨异种膀胱无细胞基质(ACM)管状替代尿道的可行性.方法 19只成年雄性新西兰白兔分成3组:A组3只,为假手术对照组;B组10只,切除一段1.0 cm尿道;C组6只,切除一段3.5～4.0 cm尿道,之后应用已经事先制备好的异种膀胱ACM制成相当长度的管状替代被切除的尿道.术后1、2、4、8、16周动态观察替代尿道的尿道上皮、平滑肌和血管的再生情况.结果所有实验动物在术后7 d拔除尿管后都恢复了自主排尿,没有排斥、尿瘘、感染等并发症发生.组织学检查显示实验组术后2周尿道上皮再生良好,4周完全覆盖尿道内腔,术后8周平滑肌见于近吻合口处,平滑肌生长缓慢,观察期内未能覆盖全长尿道.尿道造影未见明显尿道狭窄和憩室.结论异种膀胱ACM是一种良好的尿道修复和替代的材料.
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空、结肠黏膜细胞增殖过程中主要细胞周期蛋白表达规律的研究
目的研究正常空、结肠黏膜细胞增殖过程中的人类主要细胞周期蛋白Cyclins表达特征和变化规律.方法应用细胞免疫组织化学流式细胞术检测30例正常空、结肠黏膜不同层面、不同增殖阶段细胞主要细胞周期蛋白CyclinD1、E、A、B1及Ki-67的表达,以共聚焦显微镜观察证实检测结果.结果不同增殖阶段肠黏膜细胞Cyclins表达阳性率及相对表达水平不同,从底部→中间层→表层肠黏膜细胞增殖活性(以Ki-67为增殖指标)呈下降趋势,Cyclins(CyclinE、B1为主)表达阳性率及水平呈高→低→无的变化,差异有统计学意义(P＜0.01);Cyclins表达与肠黏膜细胞增殖活性呈正相关(P＜0.05);CyclinD1、A仅表达于底层增殖细胞,表层完全分化细胞不表达Cyclins.结论正常空、结肠黏膜细胞增殖分化过程中Cyclins(以CyclinE、B1为主)呈高→低→无的规律性变化,参与细胞增殖的调控,其表达呈衰减变化与肠黏膜细胞有限增殖和定向分化有关.
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冷冻保存对软骨细胞存活率及代谢活性的影响
目的了解各种冷冻保存方法对软骨细胞的存活率和代谢活性的影响,寻找满意的软骨组织冻存方法.方法采用梯度慢速降温法和连续慢速降温法对兔关节软骨进行低温冷冻保存处理,通过荧光染色及35SO4摄入率了解冻存后软骨细胞的存活率和代谢活性.结果采用梯度降温法的软骨细胞存活率为61%,显著高于连续降温法;冷冻保存对软骨细胞的代谢活性有一定的影响,但与对照组的差异并无统计学意义.结论梯度降温法较传统保存方法能显著提高冷冻保存后软骨细胞的存活率,并能维持软骨细胞的代谢活性,是理想的关节软骨冷冻保存方法.
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雌二醇对大鼠血管平滑肌细胞细胞周期和周期相关蛋白的影响
目的研究17β雌二醇(E2)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)生长的影响.方法应用流式细胞仪检测不同浓度E2在有或无血清刺激下对传代VSMC细胞周期及其相关蛋白CyclinD1和CDK4表达的影响.结果在有血清的条件下,E2(1、10、100 nmol/L)促进VSMC从G1期向S过渡,其S期细胞比率分别为(31.89±9.14)%、(35.90±4.59)%、(30.77±1.20)%,显著高于对照细胞(21.63±1.80)%(P<0.05),并伴随CyclinD1和CDK4蛋白表达量的显著增高;而在无血清的环境中,高浓度(10、100 nmol/L) E2则抑制VSMC增殖,其S期细胞比率分别为(9.93±1.43)%、(8.76±1.80)%,显著低于对照细胞(16.58±3.04)%(P<0.05),且伴随CyclinD1和CDK4蛋白表达量降低.结论 E2在有或无血清条件下分别对VSMC增殖起促进或阻滞作用,其机制可能是通过影响CyclinD1和CDK4蛋白的表达而作用于VSMC G1期.
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维生素E琥珀酸酯联合化疗药物抑制大肠癌细胞增殖
本研究旨在检测维生素E琥珀酸酯(VES)联合化疗药物对大肠癌细胞的凋亡诱导作用,为临床联合用药提供依据.
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激光免疫疗法对小鼠肝癌的抗瘤及免疫效应
我们以小鼠肝细胞癌(H22)为实验对象,以波长630 nm激光为光源,以血卟啉(HPD)为光敏剂,以糖基化聚氨基葡糖(GC)为免疫佐剂的激光免疫疗法的抑瘤作用和免疫效应,并探讨其作用机制.
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基因-病毒治疗系统CNHK200-hA对肿瘤的治疗作用
肿瘤是目前人类死亡的主要原因之一,但传统的治疗手段对肿瘤尤其是中、晚期肿瘤效果不理想,同时存在较大的毒副作用.近年来不断涌现新的治疗策略,如基因治疗、病毒治疗、血管抑素蛋白治疗等,但单独使用均存在缺陷.因此,我们设想构建了一个能携带angiostatin k1-5基因又能靶向肿瘤细胞、在肿瘤细胞中特异增殖、复制的基因-病毒治疗系统观察其在体内对肺癌的治疗作用.
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跟骨后关节面骨折后接触特征改变
我们模拟跟骨后关节面骨折,研究骨折移位对距下关节接触特征的影响,为建立手术治疗跟骨骨折的量化手术指征提供依据.
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靶向低氧诱导因子-1α mRNA核酶基因表达载体的构建及在真核细胞中的表达
我们通过本实验构建转录因子低氧诱导因子-1α(HIF-1α)真核表达载体,研究其在真核细胞内的表达及切割活性.
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Sma和Mad 4型同源体在前列腺增生中的表达及对前列腺细胞增殖和凋亡的影响
为探讨Sma和Mad 4型同源体(Smad4)在前列腺增生中的表达及其作用,我们采用分子生物学方法对前列腺组织中Smad4蛋白和mRNA的表达进行研究,并采用流式细胞术对前列腺细胞DNA含量和细胞凋亡情况进行定量对比分析,以研究Smad4对细胞增殖与凋亡的影响.
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先天性尿道下裂动物模型的建立
我们采用氟丁酰胺能有效干扰孕鼠体内雄激素正常生理作用机制的原理,建立了先天性尿道下裂小鼠模型.
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苦参碱对人胆管癌细胞QBC939增殖和凋亡的影响
苦参碱作用广泛,具有抗病毒、抗感染、平喘、增强机体免疫力、升高白细胞、保肝等作用[1].近年来,其抑制肿瘤细胞生长的作用已经用于抗白血病的治疗,但在实体瘤的研究很少.本研究旨在探讨苦参碱对胆管癌细胞的作用及其机制.
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Survivin和血管内皮生长因子在肝细胞癌中的表达及其与肿瘤血管生成的关系
我们采用免疫组织化学方法检测Survivin、血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)在肝细胞癌(HCC)、癌旁组织以及正常肝组织中的表达,探讨Survivin、VEGF的表达与HCC的临床病理特征、新生血管形成的关系.
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大肠癌中TMS1/ASC基因甲基化及意义
我们采用巢式甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)对19例大肠癌标本中TMS1/ASC基因甲基化状态进行了检测.
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经尿道Ⅰ期治疗前列腺增生合并输尿管膀胱结石
1991年5月至2005年2月我院收治前列腺增生合并膀胱输尿管结石患者63例,32例采取分次手术和31例采取Ⅰ期经尿道前列腺切除及输尿管镜膀胱输尿管取石术,并对两组疗效及手术情况进行比较报道如下.
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乳腺癌基因治疗的研究现状及展望
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年增高,有超过宫颈癌而居女性恶性肿瘤的首位的趋势.目前乳腺癌的常用治疗手段主要是以传统的手术治疗为主,术后辅以局部或全身的放疗、化疗及内分泌治疗.这些手段虽然可以使患者获得较高的生存率甚至治愈,但术后复发及远处转移的问题仍然是困扰我们医生的一大难题.随着分子生物学技术及免疫学技术的迅猛发展和人类对乳腺癌发病机制认识的不断深入,基因治疗逐渐成为肿瘤生物学治疗中的重要组成部分,在乳腺癌的治疗中显示出良好的应用价值,并且取得了一定的效果,将日渐成为一项有前景的治疗选择.
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肝移植治疗原发性肝癌的现状
原发性肝癌(PLC)是常见的恶性肿瘤之一,每年新增病例在100万人以上[1].中国是乙型肝炎、肝硬化及原发性肝癌的高发区.肝癌是肝硬化患者的主要死因之一.随着新的医疗技术的发展,治疗肝癌的方法逐渐改变,肝移植的出现改变了传统治疗肝癌的方法[2].因为各种因素,肝癌手术切除的效果受到限制.肝癌手术切除术后5年生存率平均40%,但肝癌人群5年生存率仅为5%,这是因肿瘤的所在位置、范围和肝功能不良等因素,只有少数肝癌是可切除的,而80%以上肝癌是属于不能手术切除的[3].目前已公认,肝移植是治疗肝脏良性终末期疾病的有效手段,但在治疗肝癌这一问题上尚存在争论,其焦点主要集中在术后存活时间及肿瘤复发上.本文将就这一问题和肝癌肝移植适应证及如何提高疗效等问题进行初步探讨.
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液相芯片技术研究应用进展
人类基因组计划(HGP)的完成和蛋白质组计划(HPP)的启动,获得了数量巨大的基因和蛋白质信息,而要对如此庞大的信息进行全面的处理和研究,必须设计和利用更为高效的硬件和软件技术,建立新型、高效、快速的检测分析方法.生物芯片正是在这种背景下应运而生,其不仅在高通量基因测序、基因表达研究、蛋白质相互作用等方面发挥重要作用,亦将在临床诊断中占据重要地位[1].液相芯片(liquichip)是美国纳斯达克上市的Luminex公司研制出的新一代生物芯片技术,它既能为后基因组时代科学研究提供强大的技术支持,又能提供高通量的新一代分子诊断技术平台.现就液相芯片的基本技术原理、制备方法、与传统固相芯片比较的优越性及其初步临床应用进行综述.
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门静脉回流、胰液肠内引流术式猪全胰十二指肠移植模型的建立
目的建立稳定的、符合生理的门静脉回流、空肠内引流术式猪全胰十二指肠移植模型.方法 40头四川本地杂种猪分为供、受体两组(n=20).采用UW液低温灌注的方法,整块切取供体全胰十二指肠,保留腹主动脉Carrel片和门静脉.UW液保存、修整后的胰腺十二指肠移植物用髂血管延长的动脉与供体腹主动脉段端-侧吻合;门静脉与供体肠系膜上静脉端-侧吻合;十二指肠与供体空肠侧-侧吻合.结果共完成猪全胰十二指肠移植手术20例.胰腺移植术后1例因麻醉过深,呼吸抑制而术后未能复苏;1例移植胰腺血栓形成、血管栓塞;另1例死于肠瘘导致的腹腔感染.17例术后第2天检测外周血血糖正常.结论猪全胰十二指肠移植门静脉回流、空肠内引流术式大动物模型稳定、可靠.
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乳腺外科实验研究的发展方向
全世界每年约有120万妇女发生乳腺癌,50万妇女因乳腺癌死亡,因此,乳腺病研究的焦点及主要方向主要针对乳腺癌.研究的目的不仅仅是为了阐明其病因及发病机制,终目的是用于指导临床预防、检测和治疗.围绕乳腺外科进行的实验研究主要有以下几个方向.
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1,25二羟维生素D3与5-氟尿嘧啶对乳腺癌细胞生长及凋亡的影响
目的研究1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]与5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人乳腺癌细胞株MCF-7生长及凋亡的影响.方法采用噻唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制作用,流式细胞术测定细胞周期和凋亡率,免疫组织化学法检测bcl-2蛋白表达.结果 1,25(OH)2D3与5-Fu均可抑制MCF-7细胞生长、1,25(OH)2D3阻滞细胞周期于G0/G1期,5-Fu阻滞细胞周期于S期,并可诱导细胞凋亡;当两药联合应用时,上述作用得到显著加强,凋亡率明显上升.两药均可下调bcl-2蛋白表达,当两药联合应用时,bcl-2蛋白几乎不表达.结论 1,25(OH)2D3与5-Fu联合应用对乳腺癌细胞具有协同抑制生长和诱导凋亡作用.
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乳腺癌患者高频BRCA1等位基因研究
目的观察乳腺癌患者BRCA1基因变异.方法测序分析35例乳腺癌患者和10名正常女性BRCA1基因的全长第11外显子共3 427 bp,然后与Gene Bank记录的BRCA1正常序列比较.结果 35名患者中11名(31.4%)存在2处同义突变:2201C>T、2430T>C,和3处误义突变:2731C>T、3232A>G、3667A>G(EMBL/Gene Bank/DDBJ基因记录号AY304547),分别造成第871、1038和1183位氨基酸发生替换(蛋白质记录号AAP70031);10例患者和6名正常个体的基因序列与正常BRCA1基因完全相同;另14名患者以及4名健康个体为上述突变基因与正常基因的杂合体:2201、2430和2731位为碱基C/T杂合,3232和3667位A/G杂合.结论乳腺癌患者突变等位基因纯合体的比率明显高于正常人,提示该等位基因纯合体可能与中国人乳腺癌发病存在关联.
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基质金属蛋白酶-2和纤维粘连蛋白在乳腺癌细胞系的定量表达
目的分析乳腺癌细胞系的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和纤维粘连蛋白(FN) mRNA表达及蛋白表达与乳腺癌转移的关系,阐明MMP-2和FN在乳腺癌转移中的作用.方法采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测乳腺癌细胞系的MMP-2和FN mRNA表达量;采用Western blot方法检测细胞系的MMP-2和FN蛋白表达量.结果 MMP-2和FN的mRNA表达量在乳腺癌高转移细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-435中表达下调,而在低转移细胞系MDA-453、T47D、SK-BR-3和不转移细胞系MCF-7、ZR-75-30表达上调.MMP-2和FN蛋白表达在高转移细胞系上调,而在低转移细胞系和不转移细胞系中下调.结论 MMP-2和FN mRNA表达和蛋白表达与乳腺癌转移相关,MMP-2和FN mRNA水平和蛋白水平的表达存在负反馈调节.
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肼苯哒嗪与三苯氧胺协同抗雌激素受体α阴性乳腺癌的研究
目的观察肼苯哒嗪对雌激素受体(ER)α阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MDA-MB-435ERα基因诱导表达作用;肼苯哒嗪联合三苯氧胺(TAM)对ERα阴性乳腺癌细胞的体外抑制作用.方法肼苯哒嗪处理ERα阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MDA-MB-435,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ERα mRNA表达;肼苯哒嗪、TAM分别或联合作用于MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞,噻唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制作用,流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率,透射电镜观察细胞超微结构.结果肼苯哒嗪能诱导MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞表达ERα mRNA.当肼苯哒嗪浓度≥10 μmol/L可抑制MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞生长、阻滞细胞周期于G0/G1期,诱导这两种细胞凋亡,凋亡率分别为11.20%和8.71%;TAM对MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞生长、细胞周期无影响;联合用药组显著抑制细胞生长,诱导这两种细胞凋亡,凋亡率分别为48.8%和53.1%.对照组和TAM组细胞形态较好;肼苯哒嗪作用组细胞变性改变多见;联合用药组主要表现为细胞坏死,但未发现有凋亡小体的存在.结论肼苯哒嗪能诱导ERα阴性乳腺癌表达ERα mRNA,恢复ERα阴性乳腺癌细胞对TAM的敏感性,联合TAM能协同抑制ERα阴性乳腺癌细胞生长,诱导细胞凋亡,从而为ERα阴性乳腺癌开辟新的内分泌治疗途径提供实验依据.
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三氧化二砷对乳腺癌细胞血管内皮生长因子表达的影响
目的研究低氧条件下人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S血管内皮生长因子(VEGF)的表达及三氧化二砷(As2O3)对其表达的影响.方法建立MD-MBA-435S细胞体外低氧培养模型.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学染色和Wester blot分别检测0.5、2.0、5.0 μmol/L As2O3对缺氧12 h后乳腺癌细胞VEGF基因及蛋白的表达变化;噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度As2O3对乳腺癌细胞生存的影响.结果高浓度As2O3可以抑制乳腺癌细胞的生存,而低浓度则对此影响较小.缺氧12 h后VEGF mRNA和蛋白皆明显增加;3种浓度As2O3对常氧下乳腺癌细胞VEGF mRNA和蛋白无明显影响,而对缺氧12 h后细胞VEGF mRNA和蛋白的表达明显抑制,且呈剂量递增效应.结论缺氧可以显著增加乳腺癌细胞VEGF的表达;常氧下As2O3对乳腺癌细胞VEGF的表达无明显抑制,而在低氧下可以明显抑制,其机制可能是通过调控VEGF的上游基因实现的.
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乳腺癌血行转移与血管生成相关因子相关性研究
目的探讨血管生成相关因子:癌基因HER2、缺氧诱导因子(HIF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在乳腺癌组织中的表达及其与血行转移的相关性.方法应用免疫组织化学技术(SP法)检测51例乳腺浸润性导管癌组织中HER2、HIF-1α、VEGF蛋白的表达并随访其术后5年内远处血行转移的情况.结果 51例乳腺浸润性导管癌组织中HER2、HIF-1a和VEGF表达均彼此相关.单因素分析显示44例乳腺浸润性导管癌中HER2、VEGF、淋巴结转移和临床肿瘤分期与癌的远处血行转移相关,HIF-1α表达与远处血行转移不相关(P＞0.05).23例淋巴结阴性乳腺癌中,仅VEGF表达与其远处血行转移密切相关(P＜0.05).结论乳腺浸润性导管癌组织中HER2可能通过HIF-1α途径调节VEGF蛋白的表达,参与乳腺癌血管的生成.VEGF表达可作为术后预测血行转移的指标之一,HER2过度表达和HIF-1α表达不能预测远处血行转移.
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比较医学与循证医学的有机结合在新世纪外科发展中的意义
比较医学(comparative medicine)和循证医学(evidence-based medicine)分别是20世纪80年代和90年代新兴的两门边缘学科.比较医学是以实验动物为主要研究对象的实验医学,循证医学是以患者为主要研究对象的临床医学.两者虽各有特点,但却是密不可分的.开展比较医学的终目的是将动物实验的结果推论及人体,为了实现这一理想,人类历史上曾有许多科学家不惜冒着生命危险以自身或自己的亲属做试验,如我国古代尝百草的神农、研制狂犬疫苗的巴斯德、发明牛痘疫苗的琴纳等.但也有极少数人别有用心地用活人做试验,虽然他们也获得了极有价值的资料,但这种行径属于违法行为,根本不是科学研究.应该强调,将动物实验的结果运用到人体绝不是简单的推论或移植,此过程需要经过反复的比较对照和逻辑推理,更不可缺少以患者为中心的临床试验.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 |
