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激光光动力学治疗疣状胃炎临床应用研究
目的探讨疣状胃炎治疗的新途径.方法药物治疗效果差的38例疣状胃炎病人用激光光动力学进行疣状隆起部位局部照射.结果 38例经激光光动力学治疗的病人其疣状隆起完全消失,症状缓解,3个月临床治愈率100%.结论激光光动力学可用于治疗疣状胃炎,疗效肯定,无严重副作用,是疣状胃炎很好的治疗方法.
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超声激活血卟啉对腹水型艾氏腹水瘤超微结构的影响
目的观察声动力学疗法(SDT)对肿瘤细胞超微结构的影响,探讨超声激活血卟啉杀伤肿瘤细胞的机制.方法采用频率为2.0 MHz,声强为1.5 W/cm2的超声,结合血卟啉(HpD)对离体培养的小鼠艾氏腹水瘤(EAT)细胞处理3 min,利用透射电镜观察不同时间段取材的细胞超微结构的变化.结果超声激活血卟啉对EAT细胞超微结构的破坏程度随取材时间的延长而加剧,损伤位点主要集中在细胞膜、线粒体、内质网及细胞核上,同时还观察到一些细胞表现出明显的凋亡特征.结论超声激活血卟啉主要通过破坏细胞超微结构杀伤肿瘤细胞,部分通过诱导凋亡杀伤.
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聚焦超声结合血卟啉对S180肿瘤细胞的杀伤作用
初步研究聚焦超声激活血卟啉对S180肿瘤细胞的杀伤作用,并探讨其作用的生物学机制.通过台盼蓝拒染法检测频率为2.2MHz的聚焦超声激活血卟啉作用于S180肿瘤细胞的存活率,筛选出佳的超声处理参数,采用自由基清除剂检测超声激活血卟啉产生的起主要作用的活性氧成分,通过丙二醛含量测定法检测细胞内脂质过氧化含量变化.单纯血卟啉组表现出无明显的细胞毒作用;同等条件下,超声结合血卟啉组对细胞的损伤显著高于单纯超声组,且这种协同杀伤作用可以被组氨酸和甘露醇所抑制,而不被SOD抑制;同时,超声激活血卟啉后细胞内的脂质过氧化含量显著增加.超声结合血卟啉对S180肿瘤细胞有协同杀伤作用,可能由于声动力学处理过程中产生的活性氧自由基作用于细胞膜,增加膜脂质过氧化水平,终导致细胞死亡.
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复频聚焦超声激活血卟啉杀伤离体肿瘤细胞的实验研究
在优选的超声辐照参数下,利用复频聚焦超声激活血卟啉(Hp)杀伤肿瘤细胞K562,SW-480并用MTT法检测分析了杀伤细胞的效率其初步结果为:单频超声杀伤结果时低频优于高频;复频和单频比较,复频优于单频.而且杀伤效率不是单频的代数和,而是二者和的2-3倍;由超声辐照后的孵育时间可以看出:孵育16h超声+Hp的杀伤效率高于4h.
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载血卟啉脂质微泡的制备及一般特性的实验研究
目的 制备一种载声动力药物的脂质超声微泡并测定其包封率、粒径大小、观察其体内超声显像效果.方法 采用机械振荡的方法制备载血卟啉的脂质超声微泡,用荧光分光光度仪测定其包封率,用倒置显微镜及马尔文激光粒径测量仪测量粒径大小、分布和Zeta电位;观察60Co射线灭菌前后造影剂外观、形态、浓度和平均粒径的改变,并观察其在兔肝内的显像效果.结果 载药脂质微泡的浓度为(3.24±0.79)×109/ml,粒径范围为1.5～5.3μm,平均粒径为(2.84±0.4)μm;脂质载血卟啉(1mg)微泡的包封率为(30.25±4.45)%;Zeta电位为-(15.4±2.4)mV.经60℃射线灭菌后观察微泡形态、粒径及包封率无明显变化,其平均粒径大小及包封率分别为(2.24±0.3)μm,(27.39±2.91)%.静脉注射此载药微泡后,小鼠肝脏可见良好、持续的增强显像效果.结论 采用机械振荡法制备的载血卟啉脂质微泡,包封率较高,粒径分布均一,体内显像效果好,有望实现实时监控下的体内定点靶向给药.
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超声激活血卟啉对活体心肌的消融作用
目的 研究超声和血卟啉协同对心肌的作用,为应用声动力疗法(sonodynamic therapy,SDT)进行心肌消融提供实验基础.方法 用1 MHz,2.5 W/cm2超声辐照注射5 mg/ml浓度血卟啉0.1 ml的活体兔心肌,用组织学和超微结构分析等技术观察二者单独以及协同作用对心肌生物学效应.结果 5 mg/ml的血卟啉直接注射和2.5 W/cm2单纯超声辐照均可产生轻微的心肌损伤,两者合用可导致肉眼可见、边界清楚的较深心肌消融灶.结论 血卟啉联合超声对心肌损伤具有显著的协同作用,适当的SDT可能用于心肌消融治疗.
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超声激活血卟啉对活体兔心肌细胞凋亡和心功能影响的实验研究
目的 研究聚焦度超声激活血卟啉作用于活体兔心肌后,细胞凋亡,Bax、Bcl-2表达和血流动力学改变,为声动力用于心肌消融提供实验基础.方法 24只新西兰大白兔随机分为:假手术组(Sham),血卟啉(Hematoporphyrin,Hp)组,超声(Ultrasound,U)组,超声+血卟啉组(sonodynamic therapy,SDT).术前2 h,Hp和SDT组静脉给予2.5 mg/kg血卟啉.4组均行开胸手术,U组和SDT组于左室游离壁超声辐照1 min.术后第4 d,测量血流动力学参数,组织切片观察心肌细胞结构,原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,免疫组化标记Bcl-2、Bax表达.结果 与U组比较,SDT组细胞坏死更明显,凋亡指数增加了34.7%(P<0.01).与对照组比较,U组和SDT组Bax 表达明显上调,而Bcl-2则下调(P<0.01).术后各组血流动力学参数无显著差异(P>0.05).结论 SDT有明显致心肌细胞坏死和凋亡效应,其凋亡机制与Bax表达上调 、Bcl-2表达下调相关.适当的SDT对心功能无明显影响,可能成为一种新型安全消融心肌的方法.
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超声激活血卟啉对肝癌细胞抗失巢凋亡的影响
目的 探讨超声激活声敏剂血卟啉对肝癌细胞株HepG2抗失巢凋亡的影响.方法 将HepG2细胞悬液随机分为4组:血卟啉组,培养液中加入血卟啉40μl孵育30 s;超声辐照组,以1.0 MHz、1.5 W/cm2超声辐照30 s;血卟啉与超声辐照组,同样方法予以血卟啉与超声联合处理;及空白对照组.各组处理后细胞一部分在软琼脂培养2周后观察其失巢生长能力,另一部分在铺有多聚羟乙基甲基丙烯酸树脂(polyhydroxy-ethylmethacrylate,poly-HEMA)的孔板中悬浮培养12 h后以Annexin V-FITC/PI双染法及24 h后以琼脂糖凝胶电泳检测其失巢凋亡情况.结果 血卟啉与超声辐照组HepG2细胞在软琼脂中不能形成集落,琼脂糖凝胶电泳显示出细胞凋亡特征性DNA ladder,其凋亡率为(14.89±2.82)%,与其余3组相比,差异均具有显著性.结论 血卟啉经超声激活后能抑制肝癌细胞株HepG2的抗失巢凋亡.
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光动力治癌药物的历史、现状、进展、问题和前景
一、历史的回顾 光动力疗法(photodynamic therapy, PDT)问世二十余年来，以其独特的优点在肿瘤防治科 学中显示出很强的生命力。80年代初我国组织了全国有关单位的系统合作研究，成功地发展 了一系列PDT光源和光敏化剂，并在实践中积累了丰富的临床经验，使我国在较短时间内赶 上了这一研究领域的国际水平。但是，从Dougherty 等首次PDT临床研究获得成功至今还只 有二十多年。近年来，尽管美国、加拿大、日本、荷兰等国已先后有限制地批准PDT用于临 床肿瘤治疗，但仍远未达到成熟和完善的程度。因此，所有从事肿瘤PDT基础和临床研究的 科学工作者及临床医生，在接受这一新技术和看到其发展前景的同时，应不断地在实践中探 索并逐步充实和完善这一癌症防治新技术，使之终成为成熟的肿瘤常规疗法。以下拟就光 动力治癌药物的现状、研究进展、问题和前瞻作一综述。 光动力治癌药物的发展大致经历了以下几个阶段： 本世纪初到20年代，发现了某些染料和粗品血卟啉的光动力损伤作用［1-3］。 20～40年代，发现了粗品血卟啉在新生组织中的动态浓集和在一定波长光作用下产生桔红色 特征发射荧光［4,5］。
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光动力学疗法中激光器的应用进展
光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)是一种依赖于氧,并通过光敏剂和光相作用产生治疗效果的方法.自20世纪初开始应用并发展.针对不同的适应证和组织,人们一直试图改进光敏剂和光源.卟啉类药物如血卟啉是第一代光敏剂,主要用于治疗肿瘤.早使用的光源是宽谱、非相干光,如石英灯、氙灯、钨灯或卤素灯,其缺点是有不良反应.使用的波长取决于卟啉的吸收波谱:使用蓝光是因为其大吸收峰在400 nm,使用红光是因为其穿透深度较深,但血卟啉在650 nm处吸收较少.近年来,局部光敏剂如5-氨基酮戊酸(ALA)的使用,以及多种激光器的出现大大拓展了PDT在皮肤领域的使用.上世纪90年代,宽谱蓝光和红光得到了广泛的研究,红光激光器因穿透深度大而应用于PDT治疗;1997年,美国食品与药物管理局(FDA)批准联合局部使用ALA和蓝光治疗光化性角化病(actinic keratoses,AK).但是,这些激光器和光源引起的不良反应较明显,如不适、红斑、结痂、水泡和色素沉着,以及全身用药使光敏时间延长.近来,在局部使用ALA后运用长脉冲泵浦染料激光器(LP-PDL,595 nm)治疗,大大减少了不良作用,且治疗效果不减.此种激光器已被证实,能够有效地治疗光化性角化病、光化性唇炎、皮脂腺增生、硬化性苔癣,尤其是寻常痤疮.近,强脉冲光源已被引入PDT领域,用于治疗光损伤和痤疮,并显示出其在波长和适应证方面具有多样性的优点.
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超声定位辐照载血卟啉微泡治疗兔肝VX2肿瘤的实验研究
目的 探讨超声定位辐照载血卟啉微泡介导药物靶向释放技术治疗兔VX2肝移植瘤的效果.方法 利用35只新西兰大白兔建立肝VX2移植瘤模型,并随机均分为超声定位辐照载血卟啉微泡组(US+LMLH组)、超声定位辐照血卟啉组(US+ HP组)、超声定位辐照空白脂质微泡组(US+MB组)、单纯载血卟啉微泡组(LMLH组)、单纯血卟啉组(HP组)、单纯超声辐照组(US组)和生理盐水对照组(C组).治疗前后用二维超声、CDFI及CEUS观察肿瘤大小、回声及血流灌注情况,计算肿瘤体积大小及生长抑制率；同时观察不同处理组肝内转移及远处转移情况；并用透射电镜观察肿瘤细胞的超微结构.结果 US+ LMLH组肿瘤内部呈混合回声,CDFI及超声造影显示肿瘤的滋养血管明显减少,生长抑制率高于其他各组；在肝内及远处转移方面,US+ LMLH组较少转移,明显优于其他各组；超微结构显示US+ LMLH组细胞膜破坏,线粒体明显肿胀.结论 超声定位辐照载血卟啉微泡能有效激活血卟啉,具有较强的体内抑瘤效果.
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益脑通络胶囊对微血管内血栓形成预防作用的实验研究
益脑通络胶囊是以益气活血、解毒通络为治法的复方制剂,主要由黄芪、丹参等中药组成,用于治疗缺血性中风,为了进一步探讨益脑通络胶囊的治疗作用,我们从大鼠的静脉内注射血卟啉光敏剂后,用落射荧光显微镜的自带汞灯为光源,经紫外滤光片照射,以诱导肠系膜微血管内血栓形成,并对益脑通络胶囊抗血栓形成进行药效研究.
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载血卟啉PLGA微泡用于声动力治疗小鼠H22肝癌移植瘤
目的 研究超声联合载血卟啉PLGA造影剂对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的声动力治疗作用. 方法 自制载血卟啉高分子材料PLGA造影剂并检测其基本特性.选择30只荷H22肝癌皮下移植瘤小鼠,随机平均分为5组进行治疗,绘制治疗后15天内肿瘤体积生长曲线,比较其质量抑瘤率,并采用TUNEL和PCNA检测各组小鼠肿瘤细胞凋亡情况及增殖活性. 结果 自制的载血卟啉PLGA微泡造影剂平均粒径为602.3 nm,分布均匀,包封率63.50%,载药量2.15%.治疗后,与其他各组比较,超声加载药微泡治疗组肿瘤生长曲线平缓,质量抑瘤率及凋亡指数均显著高于其他4组(P＜0.05),而增殖指数明显低于其他各组(P＜0.05). 结论 超声联合载血卟啉高分子纳米造影剂能够抑制小鼠H22肝癌移植瘤生长,促进其凋亡.
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5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学治疗人脑胶质瘤
颅内胶质瘤是临床上常见病、多发病.目前多采用手术、放疗、化疗等综合治疗,但治疗效果仍不甚满意[1].目前在临床上广泛使用的血卟啉制剂所介导的肿瘤光动力治疗(photodynamic therapy,PDT)虽然在肿瘤的临床诊断和治疗中都取得了肯定的疗效,但仍有很多不足之处[2,3].
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喜泊分
[通用名称] hematoporphyrin,血卟啉[商品名] 喜泊分[化学名称] 1,3,5,8,-四甲基-2,4-二(α-羟乙基)-卟吩-6,7-二丙酸,相对分子质量598.7,分子式C34H38N4O6.
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晚期食管癌、贲门癌致进食梗阻的激光治疗临床体会(附30例近期疗效分析)
本文总结泗阳县中医院与宝应县中医院自2000年8月至2002年8月2年期间用血卟啉激光治疗晚期食管癌和贲门癌梗阻30 例.其中完全排除梗阻17例(占56.7%)部分排除梗阻10例(占53.4%).取得良好近期临床效果,并提出该治疗方法若干注意事项和体会.
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超声血卟啉治疗肝癌的护理
光敏剂血卟啉(HPD)具有选择性潴留于肿瘤组织中的特性,国外有人报道血卟啉在肿瘤组织中的含量较正常组织至少高出十几倍[1].我们应用超声作为新的动力源,对2例患者进行治疗,观察超声激活血卟啉治疗肝癌的效果,现报告如下:
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激光和血卟啉对肿瘤细胞的杀伤作用研究
[目的]研究激光和血卟啉对肿瘤细胞的杀伤特点.[方法]体外应用K562和MCF7细胞观察不同浓度血卟啉和不同激光强度对细胞的杀伤特点及其激光束杀伤细胞的分布特性；体外培养S180肉瘤细胞接种健康小鼠建立荷瘤小鼠模型,观察静脉注射血卟啉0.5和12h后激光照射对肿瘤的杀伤作用.[结果]在固定的血卟啉浓度或激光强度下,随着激光强度或血卟啉浓度的增加,对肿瘤细胞的杀伤作用成线性作用增强(R2=0.9967,R2=0.9994),其中杀伤作用=血卟啉浓度(μg/ml)×激光能量(J)；激光束对细胞的杀伤作用存在明显的不均匀性；荷瘤小鼠在给药后0.5 h给与激光治疗效果好于给药后12h.[结论]血卟啉浓度和激光剂量对肿瘤的杀伤作用存在线性量效关系且激光束对细胞杀伤作用存在明显的不均匀性,该结果为制定佳的临床治疗方案提供了依据.
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国产血卟啉注射液的高效液相色谱质量检测
[目的]研究国产血卟啉注射液的质量控制方法.[方法]采用高效液相色谱法,色谱柱PolarisC 18-A柱(5μm,4.6×250 mm),检测波长390 nm,流动相为:甲醇:水:乙腈:四氢呋喃(160:220:105:190),每1000ml流动相加入磷酸0.5 ml调节pH值,流速为1.5 ml/min.[结果]血卟啉在12.5～100 μg/ml范围内呈线性系统,R2=0.9957,低检出限为3.125 μg/ml.[结论]该方法快速、准确、重显性好,适用于该注射液的含量测定.
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血卟啉光动力疗法治疗宫颈癌的护理
目的:探讨对宫颈癌患者采用血卟啉光动力治疗的护理方法.方法:分析12例宫颈癌患者光动力治疗期间的护理、心理护理及健康教育,正确掌握血卟啉光敏剂的应用,注意观察光敏反应,为病人创造有效的避光环境.结果:12例患者在治疗中,均未出现明显的全身和局部不适,疗效满意.
