光动力疗法对人卵巢癌细胞系Skov3凋亡的影响

目的 通过对经光动力疗法(PDT)处理后卵巢癌细胞系Skov3发生凋亡情况的研究,探讨光动力学疗法对体外培养的人卵巢癌细胞的影响. 方法 采用不同能激光对不同浓度光敏剂(5-ALA)处理过的卵巢癌细胞系(Skov3)进行照射,48 h后应用光镜、电镜进行形态学观察,同时利用流式细胞仪检测细胞凋亡情况. 结果 倒置显微镜下经光动力学处理后Skov3细胞体积缩小,细胞变形、皱缩,细胞核浓缩、深染,染色质密集成斑块状,细胞间失去彼此连接,透射电镜下可见致密的染色质沿核膜下聚集,有凋亡小体形成.流式细胞仪定量分析大细胞凋亡率为60.5%. 结论 PDT通过诱导捅亡对体外培养的Skov3细胞产生杀伤作用.

荧光谱客观分析在膀胱癌光动力学诊断中的应用

目的 探讨紫外激光激发膀胱癌组织细胞荧光谱分析对改进膀胱癌光动力学诊断的意义.方法 以不含细胞培养液和血卟啉单甲醚混合液为对照,分别取浓度为0、10、100、200 mg/L的血卟啉单甲醚作为光敏剂,孵育膀胱癌组织细胞株T24 1～3 h,再以全固态紫外激光作为激发光源(波长355 nm)激发,检测膀胱癌组织细胞特征荧光光谱并分析药物峰位置.结果 在可见光区域390～780 nm,不含细胞的培养液和血卟啉单甲醚混合液未出现特征峰;无血卟啉单甲醚光敏剂的膀胱癌组织细胞的自体峰在445～490 nm处;不同时间不同浓度血卟啉单甲醚光敏剂孵育的膀胱癌组织细胞除在445～490 nm处有自体峰外,在628.65 nm处均出现药物峰,200 mg/L血卟啉单甲醚孵育2 h时膀胱癌组织细胞药物峰及自体峰荧光强度达到高,且药物峰的荧光强度超过了自体峰.结论 紫外激光激发的膀胱癌组织细胞荧光谱性质稳定、强度佳,对改进膀胱癌光动力学诊断具有确切价值.

双光子激发竹红菌素光动力学治疗研究

LDL受体在光动力学治疗肿瘤过程中对靶细胞吸收光敏剂的影响

众多肿瘤治疗方法的局限性在于抗肿瘤药物对肿瘤组织的选择性较低.以往的研究设计了包括单克隆抗体、脂质体、生长因子、低密度脂蛋白(LDL)等多种药物输送系统作为载体增强抗癌药物的选择性.众所周知,脂溶性药物易于和LDL结合,其复合体被细胞膜上的LDL受体识别,通过受体介导的内吞作用将此复合体吞噬入细胞.肿瘤细胞的细胞膜上LDL受体数目比正常细胞增多.

光动力学-图像法鼻咽癌早期诊断与定位的临床前研究构想

目的:通过激光诱导荧光法诊断癌肿技术的研究,实现早期诊断鼻咽癌. 方法:(1)通过离体实验研究鼻咽癌组织和正常组织的药物荧光光谱差异;(2)实验研究用于诊断鼻咽癌的激光光源对鼻咽癌组织和正常组织的光学特性的影响;(3)实验研究用于鼻咽癌诊断的新型光敏剂血啉甲醚(HMME)和苯并卟啉衍生物(BpD-MA)的光谱特性;(4)研制开发适合临床医师操作的鼻咽部组织实时交替显示白光图像和荧光图像的荧光图像系统;(5)建立癌与非癌的诊断判据;(6)获取激光光动力学-图像法无创诊断和定位的动物实验数据;( 7)选择临床病例,进行鼻咽癌诊断实验研究. 结果:获得光动力学-图像法诊断和定位鼻咽癌临床前研究的基础数据;开发出一种高灵敏、实用化的无创鼻咽癌早期诊断和定位系统,并将该系统投入临床应用.

大连理工大学"生物医学工程"研究的主要进展

1 激光医学研究激光医学研究是一项激光光谱学与医学、生命科学相结合的学科交叉性应用基础研究,通过光谱技术获得的大量光谱信息,深入了解疾病的产生和发展过程,对疾病的诊断和防治将产生深远的影响.我校丁建华教授及其课题组在该领域已有近20年的研究积累,主要进展如下:①激光光谱技术用于肝纤维化病变诊断;②激光光动力学诊治癌症;③激光诱导组织和血清荧光及喇曼光谱癌症诊断.

光动力学疗法治疗外阴白斑的护理

为探讨光动力学疗法治疗外阴白斑的护理方法。对血叶啉衍生物(HPD)无过敏反应的患者，按5mg/kg体重静脉输注，给药48h后，用波长为 6300A°常规光源医疗机分区照射白斑部位，每个光斑区照射15min～30min。护理措施：心理护理贯穿整个治疗过程。对初入院患者，用放幻灯的方式讲解治疗方法及注意事项。病房窗户用浅色布窗帘遮光，室内照明改用8W台灯。治疗期间勤观察，多询问，发现问题对症处理。患者用药后严禁直接接触阳光，避免暴露皮肤，接触热源。效果：本组50例，痒感消失达90%，皮肤恢复及部分恢复正常达82%。

光敏剂PpIX亚细胞分布方式对食管癌细胞光动力学效应的影响

目的: 探讨不同来源的光敏剂PpIX在食管癌细胞中的亚细胞分布与光动力学效应的关系.方法: KYSE-450、KYSE-70和Het-1A细胞分别用ALA和外源性PpIX以及MitoTrackerGreen处理, 相差荧光显微镜观察不同来源的PpIX在细胞内的定位. 利用JC-1-流式细胞方法检测ALA-PDT和PpIX-PDT后细胞线粒体膜电位(ΔΨm)的改变. 利用电镜观察ALAPDT和PpIX-PDT后细胞线粒体的超微结构,观察PpIX的不同细胞分布形式对线粒体损伤的形态学改变. MTS法测定PDT处理后的细胞存活率.结果: 由ALA产生的内源性光敏剂PpIX荧光主要分布在线粒体, 与MitoTracker Green显示的线粒体荧光分布在相同的区域, 而外源性PpIX荧光信号则弥漫性分布于整个细胞质.KYSE-450、KYSE-70和Het-1A细胞经ALAPDT12 h后, 膜电位受损细胞分别达到22%、52%和33%, 而外源性PpIX-PDT别12 h后线粒体受损细胞率仅分别为15%、14%和18%. 电镜观察结果显示, ALA-PDT后仅1 h一些线粒体即已出现受损状态, 可见线粒体内嵴不明显, 出现空泡和膨胀. 但外源性PpIX-PDT后1h细胞内大部分线粒体仍保持完整结构. ALAPDT的细胞杀伤效果明显好于外源性PpIXPDT.结论: 光敏剂的不同亚细胞定位影响了食管癌细胞PDT的功效, PDT造成的线粒体的损伤在肿瘤细胞杀伤过程中起非常重要的作用, 提示以线粒体为靶点的光敏剂是未来光敏剂研制的重点.

激光和电热消融术在治疗气道狭窄中的应用

器质性气道狭窄是由气道外压和气道内新生物的阻塞造成,其病因主要是各种良恶性肿瘤、气管、支气管内膜结核、气道外伤、气管插管后的瘢痕狭窄等.这些病变可造成严重的呼吸困难.既往手术治疗是惟一选择.近10年,随着内窥镜介入治疗技术日臻成熟和在我国的广泛应用,为气道狭窄的治疗提供了新的方法.气道外压性狭窄可以通过气道内支架置入并结合相应的特异治疗来处理,而气道内新生物造成的阻塞则可以通过气道消融技术来治疗.气道消融技术包括激光、电热、冷冻、光动力学、微波等[1].在我国,以气道内激光和电热消融术应用较多,而且两者的机制和操作方法相近,适应证和并发症基本相同,在此,我们仅对此两项技术给予阐述.

光动力学疗法与膀胱内灌注化疗治疗膀胱癌远期疗效对比分析

目的：探究有关光动力学疗法与膀胱内灌注化疗治疗膀胱癌远期疗效对比情况。方法选取2013年1月～2015年1月我院收治的膀胱癌患者50例作为研究对象，将其随机分为观察组和对照组，各25例。观察组采用经尿道膀胱手术切除术与光动力学治疗，对照组采用经尿道膀胱手术切除术与膀胱内灌注化疗方法，观察两组患者的疗效。结果观察组患者疗效明显好于对照组，观察组生活质量为92.0%显著优于对照组的73.9%，观察组患者的复发率为12.0%，显著低于对照组的36.0%。差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论与经尿道膀胱手术切除术与光动力学治疗方法相比，经尿道膀胱手术切除术、光动力学治疗与膀胱内灌注化疗治疗膀胱癌远期疗效显著，在治疗的过程中无任何不良反应，治疗环境安全、可靠，操作方法简单方便，值得推广。

人卵巢癌细胞光动力学细胞裂解物负载树突状细胞对体外免疫应答的影响

目的:研究人卵巢癌细胞光动力学细胞裂解物对体外免疫应答反应的影响.方法:体外诱导培养人脐血树突状细胞(DC).人卵巢癌细胞SKOV3分别用光动力学方法(激光照射)及冻融的方法制备细胞裂解物,与DC共培养48 h,RPMI1640与DC培养作为阴性对照,采用流式细胞仪检测DC免疫表型CD1a、CD80、CD86、HLA-DR的改变,用ELISA方法检测培养上清IL-12含量的改变.体外培养T细胞,用负载裂解物的DC诱导生成细胞毒性T细胞(CTL),MTT法检测CTL对人卵巢癌细胞的杀伤效应.结果:在体外,人卵巢癌细胞光动力学裂解物较冻融裂解物更能促进DC的成熟,表现为DC细胞表型中共刺激分子CDS0、CD86上调,分泌更多的IL-12,能诱导CTL产生更强的特异性肿瘤细胞杀伤效应.结论:人卵巢癌细胞的光动力学细胞裂解物较冻融细胞裂解物在体外更能促进IX:成熟,并引发CTL的特异性肿瘤杀伤效应,因此,具有更强的肿瘤疫苗样作用.

颜面部皮肤恶性肿瘤切除术26例的护理体会

在颜面部皮肤恶性肿瘤中，基底细胞癌（ BCC ）和鳞状细胞癌（ SCC）是主要的类型，恶性黑色素瘤及隆突性皮肤纤维肉瘤等其它类型则甚为少见。其发病率各地报道不一，其治疗虽有手术、放疗、化疗、冷冻、激光或光动力学等多种方式。全厚皮移植与皮瓣转移手术是切除面部皮肤恶性肿瘤彻底切除病灶、解决组织缺损、矫正畸形和尽量保证容貌完整的常用方法。我科自2009年1月～2012年1月，对26例面部皮肤癌患者行肿瘤切除皮瓣转移术，效果良好，现将护理体会报告如下。

叶绿素光敏剂-光动力学诱导PC3细胞凋亡的形态学研究

目的观察新型光敏剂-叶绿素衍生物(chlorophyll derivative,CPD4)结合650 nm激光照射的光动力学疗法体外对雄激素非依赖性细胞PC3的作用.方法PC3细胞培养后,分成空白对照、激光照射、光敏剂和治疗组(光敏剂加激光照射组)4组,光敏剂浓度0.1g/L,采用650 nm半导体激光照射、剂量为6 J/cm2,通过光镜、透射电镜和激光共聚焦显微镜观察.结果治疗组光镜下见PC3细胞体积变小、皱缩、变圆,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞质内有深褐色的光敏剂颗粒沉积.透射电镜下见细胞核内染色质高度凝聚在核膜下、边缘化,核膜出现破裂,细胞质中内质网肿胀,线粒体出现空泡化.激光共聚焦显微镜细胞质内有较强的红色荧光.正常对照组、激光照射组和光敏剂组均无上述特征变化.结论叶绿素光敏剂结合650 nm半导体激光照射能诱导激素非依赖性前列腺癌细胞PC3出现凋亡改变,线粒体是光动力学的原始靶位,叶绿素-光动力学疗法通过线粒体途经激活细胞凋亡.

RNA包膜病毒的光诱导灭活

目的以亚甲蓝(MB)为光敏剂,研究RNA包膜病毒光诱导灭活的影响因素.方法以登革热病毒为指示病毒,以单波长点阵式发光二极管为光源,将指示病毒与不同浓度的MB工作液混合后,收集不同光照时间和距离的MB/病毒混合液,空班法测定病毒滴度.结果MB＜10 mg/ml时,病毒灭活效果并不理想;MB≥1.0 mg/ml时,在5min的光照时间内即可完全灭活2.5 m光照距离内的病毒,当光照距离≥3.0 m时,较高浓度的MB(2.0 mg/ml)可在较短时间内(20 min)完全杀灭病毒,而较低浓度的MB(1.0 mg/ml)则需要更长的光照时间(25 min)才可完全杀灭指示病毒.结论MB工作浓度和光源光强度、光照时间和距离是影响RNA包膜病毒光诱导灭活效果的4个关键因素,前三者与病毒灭活效果正相关,后者则负相关.

亚甲蓝/光化学法体外灭活RNA包膜病毒的实验研究

目的研究亚甲蓝(MB)/光化学法灭活RNA包膜病毒的动力力参数条件. 方法以日本脑炎病毒为指示病毒,以与MB大吸收波长相匹配的单波长点阵式发光二极管为光源,将指示病毒与不同浓度的MB工作液混合后,收集不同光照时间和距离的MB/病毒混合液,将其接种于Vero单层细胞后,空班法测定病毒滴度. 结果当光源光照度一定时,MB工作浓度、光源光照时间和距离是影响MB/光化学法灭活病毒的主要动力学参数,1.0 μg/ml的MB工作浓度可在理想的时间内(≤5 min)完全杀灭一定光照距离范围内(≤2.5 m)的病毒,同时,适当地延长光照时间(≥25 min),可完全杀灭更远光照距离的病毒(≤3.0 m). 结论 MB/光化学法可在体外安全高效地杀灭RNA包膜病毒;在光源光照度一定的条件下,MB工作浓度、光源光照时间和距离均可影响MB/光化学法灭活病毒的作用效果.

叶绿酸f光动力体外杀伤膀胱癌疗效及机制研究

目的 光动力治疗是近年来新兴起的一种肿瘤治疗方式,光敏剂是光动力治疗的关键.本研究旨在明确叶绿酸f光动力学体外杀伤膀胱癌细胞的效果及其可能机制. 方法 体外培养膀胱癌5637和T24细胞,CCK-8法检测叶绿酸f结合650 nm激光对膀胱癌细胞的生长抑制作用.叶绿酸f和特异性线粒体荧光探针同细胞共孵育4 h后,激光共聚焦显微镜观察其亚细胞分布;DAPI染色PDT后12 h的癌细胞,荧光显微镜下观察细胞形态学改变;采用流式细胞仪分析凋亡率. 结果 4 J/cm2激光照射后,1、2和4 μg/mL的叶绿酸f对5637细胞生长抑制率分别为 33.92%、57.38%和 84.88%,在 2 J/cm2激光照射后分别为25.4%、51.21%和 70.09%;对T24 细胞,2.5、5和10 μg/mL浓度药物4 J/cm2生长抑制率分别为 34.03%、60.11%和86.51%,2 J/cm2 分别为31.79%、53.83%和 72.89%.激光共聚焦显微镜观察到叶绿酸f的红色荧光与线粒体探针的绿色荧光分布范围一致,都在细胞质中,细胞核中无分布.DAPI染色后荧光显微镜下可见处理组细胞均出现胞核边缘不规则,核固缩,核溶解、碎裂,核小体碎片增加等现象,空白对照组细胞则未见到此类凋亡表现.流式细胞术检测结果显示,4 μg/mL浓度结合4 J/cm2激光处理组5637细胞凋亡率为(50.61±1.66)%,对照组凋亡率为(4.05±0.12)%,差异有统计学意义,U=6.21,P=0.042;10 μg/mL浓度结合4 J/cm2组T24细胞凋亡率为(54.3±1.32)%,对照组凋亡率为(11.31±0.71)%.差异有显著性意义,U=7.35, P=0.030.结论 叶绿酸f结合650 nm激光,能够高效杀灭膀胱癌细胞,该杀灭效应随药物剂量及激光能量的增加明显升高.杀灭机制可能是药物进入癌细胞后定位于线粒体,诱导肿瘤细胞凋亡.

激光动力学治疗支气管肺癌的临床分析

目的探讨激光动力学治疗(PDT)支气管肺癌的临床疗效.方法应用德国产光敏剂photosan-3,2 mg/kg静注后48 h在内镜下用德国产CERALAS PDT 630 Laser 200 J/cm照射病变部位,必要时72～96 h内再重复1至2次.结果 23例患者近期疗效良好.CR 11例,肿瘤消失,管腔通畅;SR 9例,6例仅见有少许肿物残留,3例肿瘤缩小一半以上;MR 2例,因肿瘤堵塞管腔无法插入光纤所致;1例隆突转移癌PDT治疗后第3天因肿瘤坏死脱落致大出血而死亡.结论 PDT治疗支气管肺癌具有疗效确切、副作用小、可重复治疗的特点,尤其对不能手术的气管、支气管腔内生长为主的中央型肺癌、支气管肺癌术后残端复发及有放、化疗禁忌证的患者具有较好的临床应用价值.

基于光动力学姜黄素水凝胶治疗痤疮的疗效评价

目的 证明姜黄素水凝胶结合光动力学治疗痤疮的效果.方法 采用过200目筛、超声/高压均质技术使姜黄素微粉化.以泊洛沙姆407为基质,制备姜黄素水凝胶并对所制备的水凝胶进行流变学及流体学表征.采用打孔法考察姜黄素水凝胶在657 nm激光照射下的体外抑菌效果.建立兔耳痤疮模型后将15只新西兰白兔随机分为5组,分别为模型组、维A酸乳膏组、单独光照组、姜黄素水凝胶组、姜黄素水凝胶/光照组,治疗2周后肉眼观察兔耳外观并进行组织病理学检测.结果超声/高压均质法制备的微粉化姜黄素粒径更小、更均一,粒径范围为5~20 μm;过筛法制备的微粉化姜黄素粒径较大,分布不均,粒径范围为10~45 μm.所制备的水凝胶具备凝胶的特性,较稳定,为假塑性流体.姜黄素水凝胶/光照组的体外抑菌效果优于姜黄素水凝胶组,姜黄素水凝胶组、姜黄素水凝胶/光照组的抑菌圈直径大小分别为(9.4±0.92)和(12.57±1.12)mm.在兔耳痤疮模型上验证了姜黄素水凝胶/光照对兔耳痤疮的治疗效果优于单独光照组和姜黄素水凝胶组.结论 姜黄素水凝胶结合光动力学对兔耳痤疮有一定治疗效果,为痤疮治疗提供了一种新选择.

石墨烯类材料在生物医学领域应用的研究进展

石墨烯是二维的平面多环芳香烃原子晶体,在各个领域都备受关注,是目前的研究热点之一.本文综述了近年来石墨烯类材料在生物医学研究领域的新进展,包括其在生物体外和体内的毒性、载药和靶向控释、光动力学治疗等方面的研究,证实石墨烯类材料拥有良好的生物医学应用前景.

葡萄酒色斑光热治疗和光动力学治疗的研究进展

葡萄酒色斑(PWS)是常见的先天毛细血管畸形之一.目前脉冲染料激光器(PDL)是治疗PWS的金标准,但大部分患者却难以根治.除了PDL,还有多种激光器应用于临床,各自有其优缺点.得益于对病灶的敏感性高以及对周围组织的损伤少,光动力学疗法(PDT)也被用于治疗PWS,其安全性和疗效均得到了验证.但由于PDT光敏剂和光源的特点,限制了其在临床的应用.PDL联合PDT为PWS的治疗提供了新的思路.