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  • 血浆病毒灭活研究进展

    作者:聂咏梅;吴伟康

    随着医学科学的进步,血液的安全性愈来愈受到关注.为了提高血液的安全性,在血液检测项目逐渐增加的同时,血液检测技术也在不断改进.然而,由于病毒感染血液后"窗口期"的存在,血液输注仍无法达到"零风险".在临床输血中,血浆的输注占有较大的比例;而血浆中也是病毒含量较多的血液成分之一.近年来发展起来的血浆病毒灭活技术在提高血浆安全性方面具有一定的潜力.血浆病毒灭活的技术很多,目前比较成熟的技术有两种:溶剂/去污剂方法和亚甲基蓝联合可见光照射方法;此外,以病毒核酸为靶点的光化学技术倍受瞩目.

  • 亚甲蓝光化学法灭活血浆前后质量变化效果分析

    作者:朱荣华

    目的 探讨对亚甲蓝光化学法灭活血浆前后的质量变化效果.方法 随机抽取新鲜血浆216袋,分别在使用亚甲蓝光化学灭活前后取1mL标本,比较血浆灭活病毒前后血浆中凝血因子的活性和总蛋白含量以及血浆纤维蛋白原含量变化.结果 使用亚甲蓝光化学法进行血浆灭活前后的血浆中凝血因子(Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ)活性和总蛋白含量以及血浆纤维蛋白原含量差异无统计学意义P>0.05.结论 使用亚甲蓝光化学法对血浆进行病毒灭活,不会影响血浆的质量,临床效果良好,值得临床推广.

  • 一种病毒抗体制剂灭活病毒效果与毒理学研究

    作者:赖发伟;童文彬;杨宁;王晓;曾文明;刘科亮

    目的 观察一种手足口病病毒抗体制剂对病毒的灭活效果及其毒性.方法 采用病毒悬液定量灭活试验和动物试验方法,对一种病毒抗体液体制剂灭活肠道71型病毒的效果及其毒性进行实验室观察.结果 该病毒抗体通过病毒接种蛋鸡产蛋卵黄提取制备而成,总效价为1:32.以3种病毒抗体原液作用10 min,对肠道71型病毒和柯萨奇A16型病毒的灭活对数值均为3.50;对柯萨奇A10型病毒灭活对数值为1.25.病毒抗体原液对家兔完整皮肤多次刺激试验结果为无刺激性;对家兔眼黏膜刺激试验结果为无刺激性.结论 肠道71型病毒和柯萨奇A16型病毒所产生的抗体对其病毒具有较好的灭活效果,且对皮肤黏膜无刺激性.

  • 常用消毒剂对新发现腺病毒55型灭活效果研究

    作者:李杰;魏秋华;饶林;帖金凤;张文福

    目的 观察常用消毒剂对我国新发现的腺病毒55型的灭活效果.方法 依照2002年版《消毒技术规范》进行病毒灭活试验.结果 用含有效氯400 mg/L的次氯酸钠消毒剂作用20 min,600 mg/L的过氧乙酸消毒剂作用20min,含有效碘1 000 mg/L的碘伏溶液作用40 min,对腺病毒55型的灭活对数值均可达到4.00以上;而2 000 mg/L醋酸氯己定和2 000 mg/L苯扎氯铵,作用15 min,灭活对数值分别为2.02与1.65.用含有效氯600 mg/L的次氯酸钠作用20 min,800 mg/L过氧乙酸作用20 min,有效碘浓度为1 500 mg/L碘伏作用60 min条件下,可以完全灭活测试浓度的腺病毒.结论 次氯酸钠、过氧乙酸和碘伏等高中效消毒剂可有效灭活腺病毒55型,而醋酸氯己定和苯扎氯铵等低效消毒剂不能完全灭话该病毒.

  • 胶原蛋白海绵生产中的病毒灭活工艺效果观察

    作者:马平;周锡鹏;梅芳;闫舫;张艳宇;吕丽萍;许金波

    目的 研究胶原蛋白海绵生产中病毒灭活工艺及其灭活病毒的效果.方法 采用细胞培养法,对酸性酶解溶液和60Co-γ射线辐照法灭活病毒的效果进行了检测.结果 酸性酶解溶液处理2 h,对接种在胶原蛋白海绵中的水疱性口炎病毒、伪狂犬病毒、脊髓灰质炎病毒和猪细小病毒灭活对数值分别为5.54、5.71、6.30和5.13.用照射剂量为25 kGy的60Co-γ射线对胶原蛋白冻干品中的水疱性口炎病毒、伪狂犬病毒、脊髓灰质炎病毒和猪细小病毒灭活对数值分别为6.00、5.75、6.00和5.00.灭活后的样品经细胞感染盲传3代均未见细胞病变.结论 胶原蛋白海绵生产中采用酸性酶解溶液处理72 h或25kGy60Co-γ射线辐照灭菌工艺均可有效灭活所试验的4种指示病毒.

  • 过氧乙酸-乙醇对同种骨植入材料中病毒的灭活效果研究

    作者:刘明;张旗;王蕊;梁欣;褚芝凤;章金刚

    目的 研究过氧乙酸-乙醇对同种骨植入材料中病毒的灭活效果.方法 采用细胞感染法,对过氧乙酸-乙醇灭活同种骨植入材料中病毒的效果进行了检测.结果 用含10 g/L过氧乙酸与体积分数24%乙醇组成的过氧乙酸-乙醇消毒液,在常温下对同种骨植入材料浸泡4 h,可使骨植入材料中污染的伪狂犬病毒、牛腹泻病毒和猪细小病毒滴度下降4个对数值以上,实际上已经检测不到存活病毒.在3种指示病毒中,以猪细小病毒埘过氧乙酸-乙醇抗力强.结论 过氧乙酸-乙醇对同种骨植入材料污染的3种指示病毒具有良好的灭活效果.

  • 静脉注射人免疫球蛋白酸性孵放法灭活艾滋病病毒的效果研究

    作者:刘思扬;庄道民;董如华;白丽;李敬云

    目的:研究静脉注射人免疫球蛋白在生产过程中酸性孵放法灭活艾滋病病毒的效果.方法:采用细胞培养法,对含有艾滋病病毒的静脉注射人免疫球蛋酸性孵化法灭活效果进行了实验室检测.结果:将含有艾滋病病毒的静脉注射人免疫球蛋白酸度调整为pH4,于21~25℃条件下放置4 d,其中艾滋病病毒的滴度(TCID50)由9.50 log下降至2.00 log以下,下降值达到7.00 log以上.相同的样品在pH值7.0条件下放置14 d,其中艾滋病病毒滴度仍在3.3 log以上;经放置21 d,所有样品中艾滋病病毒滴度均在2.0 log以下.经过对3批样品重复测定,均未出现细胞病变;经过将样品盲传三代仍未出现细胞病变.结论:采用酸性孵放法常温下放置21 d,可使静脉注射人免疫球蛋白中艾滋病病毒完全失去活性.

  • 短波紫外线与交联淀粉碘对血浆中辛德比斯病毒灭活的研究

    作者:熊鸿燕;刘育京;涂瀛

    对UVC与CSI分别对血浆中病毒灭活的效果和对血浆中FⅧ凝血活性的影响进行了观察.CSI按100 mg/ml加入血浆,作用30 min与60 min,能使SV分别下降2.55与3 61个对数级,但血浆FⅧ凝血活性亦分别降至57.33%和0;继续延长作用时间至120 min,灭活病毒的效果增加不明显.用剂量为7 170~57 360 J/m2的UVC照射血浆,可使SV下降4.26~6.71个对数级.照射剂量为7 170 J/m2时,病毒灭活速度较快,FⅧ凝血活性也无损害,但超过此剂量后的病毒下降速度减缓,而对FⅧ凝血活性的损害明显加重.

  • 油酸钠与紫外线联用灭活血浆中病毒的研究

    作者:刘蓉;沈德林;张文福;袁庆霞;钟儒波

    采用细胞感染法,对油酸钠与短波紫外线(UVC)联用灭活血浆中病毒进行了研究.结果,3 200μW/cm2UVC与3.0 mg/ml油酸钠联合作用30 min或3 200μW/cm2UVC与2.0 mg/ml油酸钠联合作用40 min,可使血浆中水泡性口炎病毒(VSV)滴度下降6.33~6.44 lg TCID50°,辛德比斯病毒滴度下降6 09~6 34 lg TCID50°且两者联用协同系数(T/E)远大于1,有明显增效作用.但该方法使M1 3噬菌体和f2噬菌体滴度下降≤3 lg PFU.用RT-PCR扩增VSV编码N蛋白的一段核酸,研究此消毒方法对VSV核酸的影响.结果,经UVC照射的含VSV血浆目的片段扩增阴性,油酸钠处理的含VSV血浆扩增阳性.表明UVC照射作用于VSV核酸,使之断裂,从而灭活病毒,而油酸钠对VSV的这段核酸无破坏作用.

  • 糖类蛋白保护剂对热力灭活冻干IgG制品中病毒的影响

    作者:许金波;刘育京;李成文;张文福;周锡鹏

    采用80℃和100℃干热灭活冻干蛋白制品中的病毒时,冻干品中的糖含量(作为蛋白保护剂)≤10%,对病毒灭活效果影响较小;糖含量≥20%,热处理后的冻干蛋白剂型变化明显.

  • 氯灭活甲型肝炎病毒与其核酸变化关系的研究

    作者:辛忠涛;李君文;王新为;初广运;郑金来

    为了解氯灭活HAV与HAV核酸变化的关系,采用大片段逐步步移RT-PCR技术对HAV核酸全序列进行扫描.结果,在25℃以10 mg/L有效氯作用30 min,可完全灭活HAV,而5 mg/L有效氯作用60 min则不能.在HAV核酸全序列中,各部分对氯的抗力不一,以5'NTR为敏感,用10mg/L有效氯作用30 min,检测其为阴性;其次为3'NTR,当10 mg/L有效氯作用60 min时,亦为阴性;结构区的某些片段对氯的抗力较强.以10 mg/L有效氯作用30 min,进一步缩小氯对HAV核酸作用敏感区间(即近5'NTR)的检测发现,病毒初的1~671 bp检测呈阴性,而669~1023 bp仍呈阳性.结果表明,氯灭活HAV与其核酸5'NTR的损伤一致,在充分了解氯对HAV作用机理的基础上,PCR可用于消毒效果的评价.

  • 油酸钠与紫外线及维生素C灭活水泡性口炎病毒的试验观察

    作者:刘蓉;沈德林;张文福;袁庆霞;钟儒渡

    采用细胞感染法,对油酸钠、短波紫外线(UVC)、维生素C(Vit C)灭活水泡性口炎病毒(VSV)的作用进行了试验观察.结果,当油酸钠含量为2.0~3.0 mg/L,作用温度为4~37℃时,随着油酸钠含量和温度的提高,VSV滴度下降值由1.17 1gTCID50增至4.50 1g TCID50;而作用时间在0.5~2 h之间变化,对病毒灭活效果无明显影响.UVC照射剂量为25 500~204 000 J/m2,可使VSV下降2.39~5.00个对数滴度,剂量-效应关系为指数函数关系.Vit C对VSV无明显灭活作用.

  • 亚甲蓝光敏法消毒血浆的影响因素研究

    作者:张文福;袁庆霞;钟儒波;刘蓉;刘育京

    试验观察了对亚甲蓝光敏法灭活人血浆中病毒的影响因素.结果,血浆中亚甲蓝浓度、光照强度、血浆pH值、血浆容量和作用时间的影响较明显,温度的影响较小.

  • 氯和二氧化氯灭活甲型肝炎病毒机理的研究

    作者:李君文;辛忠涛;王新为;宋农;郑金来

    为探讨氯和二氧化氯灭活HAV机理及用PCR评价消毒效果的可行性,采用细胞培养、ELISA及大片段逐步步移RT-PCR方法对消毒前后HAV感染性、HAAg抗原性及HAV核酸全序列进行检测.结果,以含有效氯10 mg/L消毒液作用30 min,或含二氧化氯7.5 mg/L的消毒液作用10 min,对HAV感染性的灭活率均为100%,均可破坏HAV核酸5′非编码区;但检测两者HAAg抗原性P/N值分别为3.21(阳性)与2.02(阴性).结果表明,HAV感染性的灭活与HAV核酸5′非编码区破坏是一致的,可用PCR技术检测HAV核酸5′编码区以判定HAV灭活与否.

  • 消毒剂灭活猫杯状病毒中和剂鉴定试验方法

    作者:薄玉霞;Syed A.Sattar

    目的 研究猫杯状病毒作为指标,评价化学消毒剂灭活病毒的中和剂试验方法.方法 采用细胞感染法培养病毒,以噬斑计数法测定含氯消毒剂对猫杯状病毒的杀灭效果.结果 采用本研究设计的中和剂试验方法所选出的巾和剂能完全中和有效氯含量为1000 mg/L的该消毒剂,但其中和产物对培养细胞有毒.用EBSS溶液作2.5倍稀释后,可消除中和产物对试验细胞的毒性,使其可以用于病毒灭活试验的中和剂.以含有效氯1000 mg/L的次氯酸钠消毒液对猫杯状病毒作用1 min,平均灭活率为99.16%;作用5 min,平均灭活率为99.99%.结论 以细胞感染法的噬斑计数测定消毒剂灭活猫杯状病毒的中和剂试验方法,达到操作简单、效果可靠的目的 ,可作为消毒试验参考.

  • 远红外线微波消毒套装餐具效果监测

    作者:廖瑛;高新汉;林毓宁;邓洁卿;项恩鸿

    南宁市餐具消毒中心使用远红外线和微波进行餐具集中式消毒,其消毒操作是:回收的餐具经过机械清洗后,筷子在微波机内进行消毒,其他餐具用远红外线干热进行消毒.远红外线加热器内腔高0.25m,宽1.2m,长2.92m,保热长度2.5 m,加热功率40.5 kW,运行速度4 m/min,加热温度220℃.经广西壮族自治区疾病预防控制中心现场对该种消毒方法灭活脊髓灰质炎病毒进行了试验观察,结果对该病毒灭活对数值≥6.0,每次都达到消毒合格.

  • 亚甲蓝光敏法对人血浆的消毒研究

    作者:张文福

    亚甲蓝 (Methylene blue,下简称MB)是一种吩噻嗪类染料,化学名称为氯化3,7-双(二甲氨基)吩噻嗪-5- 三水合物,结构式为C16Hi8ClN3S@3H2O.在可见光照射下,该化合物可被激发,并在661±2 nm波长处有大吸收峰[1].早在1933年即有报道,MB与可见光结合具有杀灭病毒的作用,但未见应用.直到90年代初,才由Lambrecht首次应用于人血浆的消毒处理[2].近年,各国学者对MB光敏法在人血浆消毒方面的作用功效、病毒灭活机理、药物毒性、对血浆成分的影响等都有一定的研究.现就其主要进展综述如下.

  • 病毒灭活检测技术的研究进展

    作者:帖金凤;张文福

    病毒的种类很多,大约有4000多种,其中与人类疾病相关的约有400种,在人类传染病中70%以上是由病毒引起的,即病毒性传染病[1].病毒性传染病的爆发即使是比较轻微的也会给卫生机构、饮食业和金融市场带来严重的经济负担.目前,天花、黄热病、小儿麻痹等严重病毒性传染病已先后被有效的疫苗所根除或控制,麻疹、甲乙型肝炎、肾综合征出血热等已得到有效遏制,然而,新的更加严重的病毒传染病,如爱滋病和疯牛病以及由疯牛传染给人的新型克雅病就像以前的天花和小儿麻痹一样对人类造成灾难性的威胁,2003年春夏SARS和2004年春禽流感的暴发流行,引起人类新的恐慌;病毒病将是人类步入新世纪所面临的重大而迫切的公共卫生问题.

    关键词: 病毒灭活 研究方法
  • 血液制品病毒灭活的研究进展

    作者:陈柯君;李健

    生物制品是指以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为起始原材料,用生物学技术制成,用于预防、治疗和诊断人类疾病的制剂,如疫苗、血液制品、生物技术药物、微生态制剂、免疫调节剂和诊断制品等.血液制品是指源自人类血液或血浆的治疗产品,如人血白蛋白、人免疫球蛋白和人凝血因子等[1].

  • 病毒灭活效果验证相关指示病毒研究进展

    作者:刘贺;费春楠

    在消毒和防护效果评价实验研究中,常需验证和指示某消毒处理措施对微生物的效果. 此过程需要一种既对人安全无害,又能代表微生物对常用消毒处理的抗力,并且易于实验操作和观察的指标性微生物. 目前消毒与灭菌效果评价体系所使用的指标微生物主要包括:细菌(主要为细菌繁殖体)、芽胞、分枝杆菌、真菌类、病毒类等几大类. 其中病毒相关试验要求较高,往往需要以细胞或细菌作为其宿主. 试验用病毒的培养与检测工作比较复杂,因而探寻新型病毒替代指标微生物具有重要的意义.

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