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5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法诱导HL-60细胞线粒体介导的凋亡
本研究探讨5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法(ALA-PDT)作用于白血病细胞株HL-60后线粒体膜电位改变及凋亡相关基因Bcl-2表达的变化.以白血病细胞株HL-60为实验模型,实验分为4组:对照组、单纯ALA组、单纯光照组及ALA+ PDT组.采用阳离子脂质荧光探针JC-1检测线粒体跨膜电位,RT-PCR及实时定量PCR方法检测PDT前后Bcl-2基因表达变化.结果表明,ALA-PDT后线粒体膜电位出现快速下降,0h时线粒体跨膜电位崩塌的细胞比例升高至(58.28±0.92)%,与对照组相比有显著差异(P<0.05).随着时间延长,这种细胞比例逐步增多,而单纯ALA组和单纯光照组则无明显变化;ALA-PDT后2 hBcl-2基因表达显著下降,4h进一步下降达到谷底,24 h时仍呈低表达,并通过实时定量PCR进一步得到了证实.结论:ALA-PDT诱导的HL-60细胞凋亡过程与其影响线粒体跨膜电位有关,即通过影响线粒体功能促进细胞凋亡;ALA介导的光动力作用部分是通过在基因转录水平下调抗凋亡基因Bcl-2而促进凋亡的.
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经支气管镜光动力学治疗腔内肺癌的护理
光动力学治疗的原理是指全身给予光敏剂,该类药物具有亲肿瘤特性而在瘤体内聚集,一定时间后用特定波长的光激发,被激发的光敏剂将能量传递给氧原子而产生具有氧化作用的单线氧,后者将肿瘤杀死.我科2003年应用纤维支气管镜下光动力学治疗了4例腔内肺癌患者,疗效显著,现将护理体会汇报如下.
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线粒体在血卟啉单甲醚-PDT诱导HeLa细胞凋亡中的作用
目的探讨线粒体在血卟啉单甲醚( HMME)- PDT诱导 HeLa细胞凋亡中的作用. 方法膜联蛋白 (annexin)V- PI双染法检测 HMME- PDT处理后 6 h HeLa细胞的凋亡率和坏死率. Rh123染色法检测 PDT后 2 h内 HeLa细胞的线粒体膜电位(△Ψ m)变化. Western 杂交法检测 PDT后 6 h内细胞质内细胞色素 C( Cyt C)的含量变化. 结果 HMME- PDT后 6 h HeLa细胞的凋亡率和坏死率分别为 11.48%± 3.42%和 17.68%± 1.05%. PDT后 2 h内△Ψ m无显著改变. PDT后即刻( 0 h)细胞质内未检测到 Cyt C,而在 PDT后 2、4和 6 h均可检测到 Cyt C,且含量有增高的趋势. 结论线粒体内的 Cyt C转位于细胞质,是 HMME- PDT导致 HeLa细胞凋亡的机制之一.
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光动力学疗法治疗眼底病中视网膜温度分布的数学模拟
目的 了解光动力学疗法(PDT)治疗眼底疾病时视网膜的温度变化.方法 利用经典的Pennes生物传输方程,根据PDT治疗老年黄斑变性的治疗参数,以家兔视网膜为研究对象,建立了PDT治疗中视网膜温度的数学模型.采用有限元法进行求解,由Matlab软件实现.结果 模拟了白兔、灰兔视网膜在波长为690nm、功率密度为600 mW/cm2、照射时间为100 s、光斑直径为1~3mm的激光照射下,视网膜温度随时间变化的情况.结论 数学模拟可以较为直观地反映PDT治疗中视网膜温度的情况.建模时必须考虑血液灌注对热效应的影响;照光剂量决定治疗中视网膜温度变化;眼底色素含量、光斑直径等因素对视网膜温度也有重要影响.
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不同活性氧成分在血卟啉单甲醚-PDT诱导HeLa细胞死亡中的作用
目的探讨不同活性氧成分在血卟啉单甲醚 (HMME)-PDT诱导 HeLa细胞死亡中的作用. 方法将接种人宫颈癌 HeLa细胞的培养皿随机分成单纯 HMME-PDT组、 HMME-PDT加叠氮钠 (单线态氧淬灭剂 )与 HMME-PDT加甘露醇 (羟自由基淬灭剂 )组.以功率密度为 15 mW/cm2,能量密度为 5.4 J/cm2、波长为 510.6 mm的激光照射.用膜联蛋白 (annexin)V-碘化丙啶 (PI)双染法检测激光照射后第 6和 24 h三组中 HeLa细胞的凋亡率和坏死率. 结果 PDT后第 6小时,单纯 HMME-PDT组和 HMME-PDT加入叠氮钠组的坏死率 17.68%± 1.05%和 4.15%± 2.19%( P=0.0006),单纯 HMME-PDT组和 HMME-PDT加 D 甘露醇组的 HeLa细胞凋亡率分别为 11.48%± 3.42%和 3.19%± 1.01%( P=0.0158). PDT后第 24小时,单纯 HMME-PDT组的 HeLa细胞凋亡率和坏死率分别为 48.51%± 2.85%和 19.26%± 1.57%,加入叠氮钠组为 40.45%± 3.56%和 13.12%± 2.75%,加入 D 甘露醇组为 39.43%± 4.37%和 21.00%± 4.31%. 结论 HMME-PDT产生的单线态氧以导致 HeLa细胞坏死为主,而羟自由基则以导致细胞凋亡为主.
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单纯激光和光动力学疗法对鸡冠血管的作用
目的进一步阐明毛细血管瘤的光动力学疗法治疗的机制.方法莱亨鸡48只,随机分成6组:A组空白对照组;B、C组单纯激光组,激光能量密度B组为10J/cm2,C组为15J/cm2;D组光敏剂组静脉注射HMME10mg/kg;E、F组为PDT组,静脉注射HMME10mg/kg,10min后照光,能量密度E组为10J/cm2,F组为15J/cm2.实验后即刻,7、14和21 d,观察鸡冠的病理变化,毛细血管减少率.结果鸡冠内血管经不同能量密度的激光单纯治疗及经不同激光能量密度的光动力学疗法处理后,光动力处理组鸡冠血管数目明显减少[B组减少(48.6±5.1)%,C组减少(57.6±8.2)%],剩余血管管腔减小,光动力学治疗组疗效优于单纯激光治疗组[E组减少(61.3±16.9)%,F组减少(8.6±10.5)%].治疗后3周术区纤维组织形成,未见明显血管增生.结论光动力学疗法处理鸡冠毛细血管的效果确切,光动力学疗法效果优于单纯激光治疗.
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忍冬藤提取物光敏化作用的初步研究
目的 在中药里探索新的光敏剂.方法 以高压氙灯光照系统为激发光源,以小鼠移植性肿瘤为动物模型,通过对艾氏腹水癌(EAC)细胞的体外实验和对S180实体瘤的体内光动力研究,观察忍冬藤的2个提取物(编号85221A60、85221A95)的光敏化作用.结果 2个提取物对艾氏腹水癌(EAC)细胞都有明显的光动力灭活作用;85221A95-PDT对荷S180实体瘤昆明小鼠的瘤重抑制率达63.6%(P<0.05).85221A60在468 nm处有明显的激发峰.结论 忍冬藤中含具有应用前景的光敏剂.
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治疗视网膜脉络膜新生血管的竹红菌乙素光动力学疗法实验系统的建立
目的建立一种治疗视网膜脉络膜新生血管的竹红菌乙素光动力学疗法实验系统.方法 1.在裂隙灯显微镜下开创激光窗口,光纤连接激光器和裂隙灯显微镜,使激光和裂隙灯照明同光路到达眼底,作为照射系统; 2.通过四甲偶氮唑盐(MTT)法检测光敏剂竹红菌乙素(HB)体外光敏性,和苯并卟啉衍生物单酸A环(BPD-MA)相比,初步判断其光敏性;3.以光敏剂HB为例,青紫蓝兔为实验对象,进行PDT治疗,通过眼底观察,荧光眼底造影、光学显微镜和电子显微镜检查照光部位的生物学效应,检测建立的实验系统的实用性,可靠性.结果照射系统输出稳定,由激光器发出的功率和裂隙灯显微镜的激光窗口末端的输出的功率的耦合率为60%.国产HB体外光敏性和BPD-MA 相似,HB-PDT仅对脉络膜毛细血管造成损伤而对周围正常组织损伤小,达到选择性治疗目的,有进一步研究价值.结论新建立的照射系统和光敏剂光敏性体外评价系统,以及体内观察生物学效应的方法,可作为初步判定光敏剂是否适合治疗视网膜或脉络膜新生血管的方法.
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光动力学疗法治疗老年性黄斑变性合并黄斑下脉络膜新生血管的疗效观察
背景与目的老年性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)是引起北美50岁以上人口视力丧失的主要原因,它明显降低了这些人的生活质量.在未来的25年50岁以上人口将是目前的两倍.预防和治疗老年性黄斑变性是我们急需研究的课题.老年性黄斑变性引起视力丧失是脉络膜新生血管形成的结果.过去使用光凝治疗脉络膜新生血管,但光凝会损害正常组织.黄斑下的脉络膜新生血管不能使用光凝治疗.近光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)应用于黄斑下脉络膜新生血管的治疗,本研究目的是评价利用维替泊芬光动力学治疗老年性黄斑变性合并黄斑下脉络膜新生血管的疗效.
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光动力学治疗诱发正常大鼠脑血管新生成
背景与目的血管内皮生长因子(VEGF)与其受体:FIk和FIt是内皮细胞介导血管生成的强启动子,血管生成对肿瘤生长至关重要.光动力学疗法(PDT)已经应用于神经胶质瘤治疗.用PDT治疗固体恶性肿瘤涉及到系统给药后,光敏剂富集在肿瘤部位后受光激发,光敏剂在肿瘤组织内的定位和光照产生活性氧物种(ROS)使之能杀伤肿瘤部位,而对正常组织损伤较小.临床对PDT治疗恶性胶质瘤的研究表明能引起胶质瘤坏死延长患者生存期,然而PDT治疗中枢神经系统(CNS)肿瘤没有很好的确定结果.
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光动力学疗法在中国
光动力学疗法在中国的历史可以追溯至上世纪70年代末,国内多家研究机构开始研制光敏剂和适用于PDT治疗的激光器.1981年7月,北京同仁医院治疗1例左下睑基底细胞癌患者获得成功,开创了国内PDT应用的先例.接下来的10年是肿瘤的光动力学治疗快速发展的时期,国内很多医院相继开展了此项技术,积累了丰富的临床经验.1990年解放军总医院激光医学科开始探索应用光动力学疗法治疗鲜红斑痣,并于1991年1月应用于临床并取得成功,开创了PDT治疗良性疾病的先河.
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美国激光医学学会第20届年会简介
2000年4月5~9日,美国激光医学学会在内华达州的芮呐(Reno)召开了第十九次年会.参加会议的有来自美国、德国、中国、英国、比利时、瑞士、巴西、加拿大、法国、荷兰、挪威、北爱尔兰和沙特阿拉伯等20多个国家的代表300多人.会议录用了265篇论文,其中美国179篇、德国16篇、中国、英国和比利时各5篇、瑞士和巴西各3篇、加拿大、法国、荷兰、挪威、北爱尔兰和沙特阿拉伯各2篇,其余国家各1篇.我国刘承宜教授和赖金平副教授参加了此次大会,并在会上分别宣读了<低强度激光对细胞生物刺激作用的膜机理研究>、<经纤维喉镜Nd:YAG激光微创治疗早期喉癌及其对机体细胞免疫功能的影响>和<光动力学治疗对鼻咽癌细胞促凋亡相关基因表达的影响>等三篇论文.Lasers in Surgery and Medicine杂志2000年的增刊12刊登了这次会议的论文摘要集.
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光动力学治疗在泌尿外科中的应用
光动力学治疗(photodynamic therapy,PDT)是近年来兴起的一种治疗手段,它在氧元素存在的情况下,利用特定波长的光激活光敏剂造成细胞破坏,引起组织坏死.PDT 早用于治疗浅表皮肤的病变,如结核皮损、皮肤癌和老年斑.随着设备的改进,出现了可将激光引入实质器官的光纤,其逐渐被用于治疗头颈部、胰腺等实质脏器的肿瘤[1-2] .近年来,有学者将PDT 引入泌尿外科,本文对此做一综述.
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胰腺癌的光动力学治疗
胰腺癌的发病率有逐年增高的趋势,但目前对胰腺癌的处理疗效欠理想.光动力学治疗(Photodynamictherapy,PDT)有望成为胰腺癌综合治疗中可选择的手段之一,研究发现光敏剂可在胰腺癌组织内有选择性滞留,PDT后可引起胰腺癌组织坏死,延长患者的生存期.PDT胰腺癌主要并发症为穿刺部位的疼痛、出血和术后胆道梗阻.
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光敏化姜黄素对人胃腺癌MGC-803细胞的影响及其在细胞内的分布
目的:探讨光敏化姜黄素对人胃腺癌MGC-803细胞的影响及其细胞内的分布情况.方法:用MTT法检测细胞株的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,荧光显微镜观察细胞核形态;激光共聚焦显微镜观察姜黄素在细胞内的分布.结果:光敏化姜黄素作用于MGC-803细胞12、24、48 h后,MTT法检测细胞的抑制率分别为35.53%±3.52%、40.17%±2.01%、44.93%±3.61%;凋亡率分别为20.32%±3.07%、22.46%±1.51%、26.58%±2.67%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).光敏化姜黄素作用48 h后能见明显的凋亡小体.激光共聚焦显微镜下观察光敏化姜黄素发出的黄色荧光主要在细胞质膜、核膜呈聚集性分布,散在分布于其他亚细胞结构,细胞核分布较少.结论:光敏化姜黄素能抑制胃癌细胞的生长及凋亡,具有显著的光动力学效应,随作用时间的延长而逐渐增加.光敏剂主要分布于细胞质膜和核膜,散在分布于其他亚细胞结构,细胞核分布较少.
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胆管癌的姑息治疗进展
胆管癌治愈的唯一选择依然是治愈性手术切除,但是大约80%的胆管癌由于转移或进展期只能行姑息治疗.姑息治疗的目的是提供胆汁引流,改善瘙痒、胆管炎、疼痛和黄疸.经内窥镜放置自行扩张的金属支架、经皮肝穿刺胆汁引流、胆肠吻合术均可提供胆汁引流.这些措施已取得令人鼓舞的效果,但是有一定的发病率和病死率的局限性.其他的治疗模式比如放射治疗、化疗治疗和光动力学治疗等正在进一步研究中.
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光动力学原理及其在胆管癌治疗的应用
光动力学治疗(photodynamic therapy,PDT)是利用光敏剂在肿瘤组织中的选择性摄取和聚集,并在激发光源的作用下发生光动力学效应产生活性氧簇,进而通过直接氧化杀伤肿瘤细胞;破坏肿瘤微血管,导致血栓形成、肿瘤坏死;激发免疫反应以及诱导肿瘤细胞凋亡等方式杀伤肿瘤组织的治疗方法.PDT作为胆管癌治疗的一种新方法,已经在临床研究及应用过程中得到了肯定.对于不可手术切除的肿瘤患者,无论是PDT单独应用还是与支架置入联合应用,都可以显著延长患者的生存期,有效地改善局部胆道梗阻症状,提高患者生存质量.
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5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学治疗人脑胶质瘤
颅内胶质瘤是临床上常见病、多发病.目前多采用手术、放疗、化疗等综合治疗,但治疗效果仍不甚满意[1].目前在临床上广泛使用的血卟啉制剂所介导的肿瘤光动力治疗(photodynamic therapy,PDT)虽然在肿瘤的临床诊断和治疗中都取得了肯定的疗效,但仍有很多不足之处[2,3].
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光动力学治疗对瘢痕成纤维细胞增殖及其细胞周期的影响
目的 探讨血卟啉单甲醚-光动力学疗法对体外培养瘢痕成纤维细胞的作用.方法 原代培养瘢痕组织来源的成纤维细胞后,建立细胞系,实验采用第4~6代细胞.银染细胞后镜下观察,并计算核仁组成区的相对面积(I.S%);采用流式细胞技术,分析光动力学治疗后各细胞周期中细胞分布比例,并计算增殖指数.结果 ①光动力学治疗后瘢痕成纤维细胞内I.S%显著降低;②流式细胞仪检测结果表明光动力学治疗组S期峰低于对照组,S期细胞比例显著降低,为(11.2±2.3)%;③计算对照组和光动力学治疗组的增殖指数,分别为(35.0±3.4)%和(27.2±3.1)%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 血卟啉单甲醚-光动力学疗法能够抑制瘢痕成纤维细胞的过度增殖,改变其细胞周期分布.
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血卟啉单甲醚用于卵巢上皮性癌光动力学治疗的实验研究
卵巢上皮性癌(卵巢癌)位居女性生殖系统恶性肿瘤死亡率首位,传统的治疗手段如手术、化疗及放疗等均不能显著改善患者的预后.光动力学治疗(photodynamic therapy,PDT)作为一种新的高选择性肿瘤治疗方法,有望成为卵巢癌新的辅助治疗手段.血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)是国产第二代光敏剂,具有光敏化力强,肿瘤特异摄入率高,毒副作用轻微等优点.国内应用于鲜红斑痣的治疗,取得了很好的效果[1].将其用于卵巢癌的PDT,目前尚未见报道.本研究通过体外、体内实验验证HMME-PDT对卵巢癌的疗效,同时明确HMME诱导细胞死亡的机制,为卵巢癌的辅助治疗寻找新的途径,并为临床应用提供依据.