不同超声检查方式在子宫腺肌病患者诊断中的应用

目的：：观察单纯经腹超声、阴道超声检查与联合经腹超声及阴道超声检查在子宫腺肌病患者诊断中的效果。方法：将251例疑似子宫腺肌病患者作为观察对象，所有患者均接受经腹超声及经阴道超声检查，以病理学检查为确诊标准，分析3种检查方式对子宫腺肌病的诊断准确率。结果：联合经腹超声及阴道超声检查的灵敏度及特异性明显高于经腹超声及经阴道超声检查(P<0.05)。结论：联合经腹超声及阴道超声检查在子宫腺肌病诊断中的应用效果优于单纯经腹超声及经阴道超声检查。

孟鲁司特钠联合布地奈德治疗儿童哮喘急性发作的临床观察

目的：：观察孟鲁司特钠联合布地奈德治疗患儿哮喘的临床效果。方法：将80例患儿根据治疗方案的不同分为对照组和观察组，每组各40例。对照组患儿给予布地奈德治疗，观察组患儿在对照组的基础上给予孟鲁司特钠治疗；比较两组患儿的治疗效果及用药安全性。结果：两组患儿治疗后总有效率比较，观察组患儿明显高于对照组，差异显著(P<0.05)；两组患儿的不良反应差异不明显。结论：孟鲁司特钠联合布地奈德治疗儿童哮喘急性发作的临床效果优于单纯布地奈德治疗效果。

米氮平和氟西汀治疗伴抑郁的心血管神经症患者的疗效观察

目的：：观察米氮平和氟西汀治疗伴抑郁的心血管神经症患者的疗效。方法：将74例心血管神经症伴抑郁患者分为对照组和观察组，每组各37例。对照组患者用氟西汀治疗，观察组患者给予米氮平治疗，比较两组疗效。结果：两组患者的HAMD评分以及心血管神经症积分有差异(P<0.05)。结论：米氮平治疗伴抑郁的心血管神经症患者的疗效优于氟西汀。

重复经颅磁刺激辅助治疗对躯体形式障碍患者焦虑抑郁的疗效观察

目的：：观察躯体形式障碍患者进行重复经颅磁刺激辅助治疗对其焦虑抑郁的临床效果。方法：选择躯体形式障碍患者90例分为对照组和研究组，每组各45例。对照组患者给予常规抗抑郁药物治疗，研究组患者在常规抗抑郁药物治疗的基础上重复经颅磁刺激( rT-MS)辅助治疗。两组患者治疗前及治疗后1周、2周、4周的HAMA及HAMD评分情况、临床疗效及患者不良反应发生率进行对比。结果：两组患者治疗后的HAMD及HAMA评分均显著低于治疗前，研究组患者治疗2周和4周后HAMD及HAMA评分均显著低于对照组(P<0.05)；研究组患者临床治疗总有效率显著高于对照组；研究组患者不良反应发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论：躯体形式障碍患者在常规抗抑郁药物治疗基础上重复经颅磁刺激辅助治疗，其疗效优于单纯常规抗抑郁药物治疗疗效。

不同眼压下原发性闭角型青光眼患者手术疗效观察

目的：：观察原发性闭角型青光眼患者在不同眼压下的手术疗效。方法：选取原发性闭角型青光眼行小梁切除术的患者100例,根据患者不同眼压状况分为对照组和观察组,每组各50例。对照组患者用药物维持眼压小于40 mmHg；观察组患者持续3 d治疗,眼压状况大于或等于40 mmHg。比较两组患者手术前、后不同时期的视力及术后并发症。结果：观察组患者的视力与对照组无区别,P>0.05。两组患者术后1个月,观察组患者并发症明显高于对照组(P<0.05)。结论：原发性闭角型青光眼患者眼压高低与手术后视力无明显的关系,但高眼压患者术后并发症的发生率高于低眼压患者。

类风湿关节炎患者骨质疏松症的危险因素分析

目的：：探讨类风湿关节炎( RA)患者骨质疏松( OP)的相关危险因素。方法：以50例类风湿关节炎患者作为观察组，同时选取50例健康人员作为对照组，分别检测两组患者的骨密度值(BMD)，并分析类风湿关节炎的危险因素。结果：①观察组患者股骨颈、Ward's区、大转子区、L2、L3、L4的BMD均明显低于对照组(P<0.05)；②经多元Logistic回归分析，患者的年龄、性别、绝经为类风湿关节炎患者发生骨质疏松的危险因素；③BMD是类风湿关节炎患者发生骨质疏松的保护因素。结论：年龄、性别和绝经是类风湿关节炎患者发生骨质疏松的主要危险因素。

文拉法辛缓释片与匹维溴铵联用治疗腹泻型肠易激综合征患者的疗效分析

目的：：探究腹泻型肠易激综合征患者运用文拉法辛缓释片联合匹维溴铵治疗的临床效果。方法：应用随机数字表法将172例腹泻型肠易激综合征患者分为对照组和观察组,每组各86例。对照组患者给予口服匹维溴铵进行治疗,观察组患者在此基础上给予文拉法辛缓释片治疗,比较两组患者的临床治疗效果和不良反应的发应率。结果：观察组患者的临床治疗效果明显优于对照组(95.35%vs86.05%, P<0.05)。观察组患者与对照组比较,差异无统计学意义(9.30%vs16.28%,P>0.05)。结论：对于消化性功能不良患者运用文拉法辛缓释片联合匹维溴铵进行治疗的临床效果较为显著,优于单用匹维溴铵治疗者,具有安全高效和不良反应少等特点,值得在临床上大力推广使用。

彩色多普勒超声对妇科急腹症患者的诊断价值

目的：：探讨彩色多普勒超声对妇科急腹症患者的诊断价值。方法：选择住院和门诊确诊的156例妇科急腹症患者作为研究对象，以病理诊断作为确诊依据，回顾性分析急腹症类型、分布及超声检查急腹症的诊断符合率和误诊率。结果：超声诊断156例妇科急腹症患者的总符合率为94.9%，误诊率为5.1%。结论：彩色多普勒超声可作为妇科急腹症患者诊断的首选方法。

综合治疗原发性肝癌患者的临床评价

目的：：评价综合治疗原发性肝癌患者的临床效果。方法：选取56例原发性肝癌患者为研究对象,随机分为观察组与对照组,每组各28例。对照组患者仅给予解剖性肝切除术治疗,观察组患者在对照组基础上联合化疗,比较两组患者的治疗效果。结果：治疗后观察组患者AFP下降率显著高于对照组,Kamofsky评分(卡氏评分)高于对照组,且3年生存率高于对照组(P<0.05)。结论：解剖性肝切除术联合化疗这一综合疗法治疗原发性肝癌患者的临床效果显著,可有效延长患者的生存时间,值得在临床上推广。

希罗达联合唑来膦酸治疗乳腺癌合并多发骨转移患者的疗效观察

目的：：观察希罗达联合唑来膦酸治疗乳腺癌合并多发骨转移患者的临床效果及不良反应。方法：选取60例乳腺癌合并多发骨转移患者为研究对象,按照治疗方式的不同,分为对照组与观察组,每组各30例。对照组患者给予希罗达治疗,观察组患者给予希罗达联合唑来膦酸治疗,观察两组患者的临床疗效及不良反应。结果：两组患者治疗总有效率、疼痛缓解率和不良反应比较,观察组患者均优于对照组,P>0.05。结论：希罗达联合唑来膦酸治疗乳腺癌合并多发骨转移患者的疗效效果优于单纯希罗达治疗效果。

不同治疗方法对输卵管妊娠后患者的生育结局及卵巢功能的影响

目的：：探究与分析不同治疗方法对输卵管妊娠后患者的生育结局及卵巢功能的影响。方法：选取输卵管妊娠患者90例,采取随机数字表法分为A组、B组及C组,每组各30例。 A组患者给予甲氨蝶呤治疗,B组患者给予输卵管切除术治疗,C组患者给予保留患侧输卵管治疗；对比3组患者术后生殖激素水平及妊娠结局。结果：A组、C组患者在治疗后第1个月、第3个月、第6个月的卵泡刺激素、黄体生成素及雌二醇水平与B组患者相比明显降低,P<0.05；但A组、C组患者治疗激素水平相比无明显差异,P>0.05。A组患者的异位妊娠率明显高于B组、C组患者；C组患者的宫内妊娠率明显高于A组、B组；B组患者的不孕率明显高于A组、C组患者(P<0.05)。结论：行输卵管切除术,可影响患者卵巢的储备功能,有生育要求的患者,则需采用保守方法进行治疗,保留输卵管手术患者的妊娠率较高。

多奈哌齐联合尼莫地平治疗阿尔茨海默病患者的疗效观察

目的：：观察多奈哌齐联合尼莫地平治疗阿尔茨海默病( AD)患者的效果。方法：将AD患者96例随机分为对照组和研究组,每组各48例。对照组患者应用多奈哌齐治疗,研究组患者在对照组基础上加用尼莫地平,比较两组患者治疗后AD评定量表-认知部分(ADAS-Cos)、MMSE及疗效。结果：研究组患者治疗后ADAS-Cos评分显著低于对照组,MMSE评分显著高于对照组(P<0.01)。研究组患者的总有效率高于对照组(P<0.05)。结论：多奈哌齐联合尼莫地平治疗阿尔茨海默病患者的效果优于单纯多奈哌齐治疗效果。

子宫动脉栓塞治疗产后大出血患者的效果研究

目的：：分析研究子宫动脉栓塞治疗产后大出血患者的临床效果。方法：选取20例产后大出血患者，根据治疗方法的不同随机分为对照组和治疗组，每组各10例。对照组患者采用对传统治疗方法，治疗组患者采用子宫动脉栓塞治疗方法，对两组患者的临床效果进行对照研究。结果：治疗组患者的手术时间、止血时间以及卵巢功能恢复时间均显著短于对照组，手术情况以及子宫切除情况显著优于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：子宫动脉栓塞治疗产后大出血，具有手术时间短、止血迅速等优点，同时能够大程度保留患者卵巢与子宫的正常功能，对治疗产后大出血有着重要的临床应用价值。

产科弥散性血管内凝血患者的临床探析

目的：：探讨产科弥散性血管内凝血患者的临床特点及治疗方法。方法：对62例产科弥散性血管内凝血患者的临床资料进行回顾性分析，内容包括凝血诱发原因、治疗方法、临床疗效等，记录其治疗效果并给予统计学分析。结果：62例产科弥散性血管内凝血患者中因胎盘早剥所致比例高(41.94%)(P<0.05)；经临床对症治疗后有效率98.39%，无效率1.61%(P<0.05)；新生儿存活率93.55%，死亡率6.45%(P<0.05)。结论：临床医生应准确掌握产科弥散性血管内凝血患者的临床特征，对高危病例积极给予各项干预措施降低弥散性血管内凝血发生率，疑似病例应提供各项检查措施及时确诊病情，根据患者实际情况提供正确治疗方案。

NAH个体化方案治疗高血压患者的临床推广价值分析

目的：：分析硝苯地平( N)+阿替洛尔( A)+氢氯噻嗪( H)的NAH个体化方案治疗高血压患者的临床推广价值。方法：随机选取高血压患者96例，依据治疗方法将这些患者分为研究组和对照组，每组各48例。对照组患者给予常规方案治疗，研究组患者给予NAH个体化治疗方案治疗。结果：研究组患者治疗后1周、2周的SBP、DBP、HR、尿素氮、肌酐、尿酸、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、血糖水平均显著低于治疗前(P<0.05)，高密度脂蛋白水平均显著高于治疗前(P<0.05)；研究组患者每人每月和每年的药费均显著低于对照组(P<0.05)。结论：NAH个体化方案治疗高血压患者具有较高的临床推广价值。

丙戊酸镁缓释片与丙戊酸镁片治疗癫痫患者的对照研究

目的：：比较丙戊酸镁缓释片与丙戊酸镁片治疗癫痫的疗效及安全性。方法：58例癫痫患儿随机分为丙戊酸镁缓释片组和丙戊酸镁片组，各29例，疗程6个月。在治疗6个月后，对两组患儿癫痫发作次数减少的百分比和临床疗效进行评定。结果：丙戊酸镁缓释片组29例患儿与丙戊酸镁片组28例患儿完成了6个月的治疗。6个月末，丙戊酸镁缓释片组患儿的显效率和有效率分别为78.6%、89.5%；丙戊酸镁片组患儿分别为66.8%、78.5%，两组患儿差异有统计学意义(P<0.05)。结论：丙戊酸镁缓释片是治疗儿童癫痫较理想的药物。

慢性肾功能不全与房性心律失常的关系探讨

目的：：探讨慢性肾功能不全( CRI)与房性心律失常的关系。方法：60例慢性肾功能不全( CRI)患者为研究组，选取同期门诊60例健康受检者为对照组，对两组研究对象房性心律失常发生率及合并症对房性心律失常发生率的影响进行比较。结果：研究组患者房性心律失常发生率明显高于对照组，合并症患者的房性心律失常发生率明显高于无合并症患者(P<0.01)。结论：慢性肾功能不全与房性心律失常的发生存在相关性，尤以合并有糖尿病、冠心病及高血压等疾病的慢性肾功能不全患者关系更为密切。

声触诊组织量化技术在肝纤维化患者诊断的应用

目的：：观察声触诊组织量化技术( VTQ)在不同分期的肝纤维化患者诊断中的应用效果。方法：选择249例慢性乙型肝炎患者,运用声触诊组织量化技术进行肝硬度测量,并记录出每组患者的数据,分析各种肝瞬时弹性成像VTQ值。结果：249例经病理诊断为S1~S4期的肝纤维化分别为20例、45例、79例及105例；VTQ平均值分别为(1.48±0.26) m/s,(1.59±0.29) m/s、(1.65±0.45) m/s和(1.87±0.55)；诊断S1期、S2期、S3期和S4期肝纤维化的特异度分别为85.5%、92.6%、93.1%、94.2%；准确率分别为75.6%、85.4%、76.9%和86.5%。结论：声触诊组织量化技术(VTQ)对慢性肝纤维化患者分期的诊断评价有指导意义,值得推广。

急性牙髓炎患者一次性根管治疗效果观察

目的：：观察急性牙髓炎患者一次性根管治疗术的疗效。方法：选取急性牙髓炎患者62例，将其随机分为对照组和研究组，每组各31例。对照组患者采取常规根管治疗，研究组患者一次性根管治疗，比较两组患者临床疗效。结果：研究组患者总有效率明显高于对照组(P<0.05)。结论：急性牙髓炎患者一次性根管治疗效果优于常规根管治疗效果。

两种术式治疗开角型青光眼合并白内障患者的疗效比较

目的：：对比两种不同术式对开角型青光眼合并白内障患者的疗效。方法：将105例原发性开角型青光眼患者依据手术方案差异分为A组和B组。 A组患者52例，行青光眼白内障联合手术治疗；B组患者53例，先行小梁切除术后再行白内障手术治疗；对比两组患者的疗效与术后并发症。结果：术后两组患者佳矫正视力、眼压以及功能性与非功能性滤过泡差异均无显著差异(P>0.05)；两组患者均未见1例严重术后并发症症状。结论：采用青光眼白内障联合手术或先行小梁切除术后再行白内障手术，其手术疗效无明显差异。

喹硫平与利培酮治疗老年精神分裂症患者的疗效比较

目的：：比较奎硫平与利培酮治疗老年精神分裂症的疗效。方法：取60例老年精神分裂症病例，分为对照组与观察组，每组各30例，对照组患者采用利培酮治疗，观察组患者采用喹硫平治疗，比较两组患者的治疗效果、PANSS评分及不良反应情况。结果：与治疗前相比，治疗后两组患者在1月、3月、6月时的PANSS评分均有明显改善(P<0.05)；与对照组相比，观察组患者治疗总有效率更高(P<0.05)，静坐不能、肌张力增高、震颤、兴奋或激越等不良反应发生率更低(P<0.05)。结论：喹硫平治疗老年精神分裂症患者的疗效优于利培酮治疗疗效。

育龄妇女泌尿系统大肠埃希菌感染及耐药性分析

目的：：调查育龄妇女泌尿系统大肠埃希菌的感染现状及对抗生素的耐药性，为临床合理应用抗生素提供参考。方法：对住院育龄妇女泌尿系统标本培养出大肠埃希菌及对抗生素耐药性进行回顾性分析。结果：共分离出大肠埃希菌133株，其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株占42.9%。大肠埃希菌对亚胺培南100.0%敏感，对阿米卡星、呋喃妥因及哌拉西林/他唑巴坦的耐药率较低，对其他抗生素的耐药率均高于50.0%，产ESBLs阳性大肠埃希菌对抗生素的耐药率明显高于不产ESBLs菌株。结论：育龄妇女泌尿系统感染大肠埃希菌对常用抗生素耐药现象不容乐观，临床应根据药敏结果合理选用抗生素。

高压氧联合地塞米松治疗突发性耳聋患者疗效分析

目的：：探究突发性耳聋患者运用地塞米松联合高压氧治疗的临床效果。方法：选择172例突发性耳聋患者为观察对象,应用随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组各86例。对照组患者给予高压氧进行治疗,观察组患者在此基础上给予地塞米松治疗,比较两组患者的临床治疗效果与不良反应发生率。结果：观察组患者治疗总有效率明显优于对照组(86.05% vs 95.35%,P<0.05)。过敏性皮疹、过敏性休克、寒颤、呼吸急促和胃肠不适等不良反应发生率,观察组患者为9.30%,对照组16.28%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：地塞米松联合高压氧治疗突发性耳聋,效果较为显著,优于单用地塞米松治疗,不良反应少,值得推广使用。

脓毒血症合并急性肾损伤患者的 CRRT早期治疗

目的：：观察基于RIFLE标准重症加强护理病房( Intensive Care Unit,ICU)脓毒血症合并急性肾损伤患者连续性肾脏替代治疗( continuous renal replacement therapy,CRRT)早期治疗方法和效果。方法：收集72例脓毒症合并急性肾损伤患者作为研究对象,按照急性肾损伤的诊断和分级(RIFLE)标准分为Ⅰ期组(25例)、Ⅱ期组(23例)、Ⅲ期组(24例),对所有患者均实施经CRRT早期治疗,观察各组患者的死亡率及肾功能恢复率。结果：AKIⅠ期组患者死亡率为12.0%,AKIⅡ期组患者死亡率为26.09%,AKIⅢ期组患者死亡率为50.0%,AKI分级与死亡率呈正相关关系(P<0.05)；AKIⅠ期组患者肾功能恢复率为80.0%,AKIⅡ期组患者肾功能恢复率为60.87%,AKIⅢ期组患者肾功能恢复率为37.5%,AKI分级与肾功能恢复率呈负相关关系(P<0.05)。结论：结合RIFLE标准可准确判定患者的病情程度并合理选择治疗时机和方法,达到降低患者的死亡率,提高患者的肾功能恢复率目的。

100例胎膜早破患者的胎盘病理改变及其妊娠结局

目的：：探讨胎膜早破患者的胎盘病理改变与其妊娠结局的关系。方法：选取胎膜早破患者100例为观察组，选取同时期的进行身体检查的正常孕妇100例为对照组，分别对两组患者的胎盘切片进行HE染色，进行形态学观察，对比在胎盘发生病理变化后对患者妊娠结局的影响。结果：观察组患者中各种病理变化的发生率明显高于对照组；观察组患者发生胎儿窘迫、新生儿感染的情况明显高于对照组(P<0.05)。结论：胎膜早破等患者胎盘病理性变化能造成胎儿窘迫和新生儿感染的几率，妊娠期对胎盘进行病理检测有助于预防和治疗不良妊娠结局，值得在孕妇临产期检查中推广应用。

新生儿窒息血清总胆红素动态监测及与脑损伤的相关性

目的：：探讨新生儿窒息血清总胆红素动态监测与脑损伤的相关性。方法：选取足月窒息新生儿60例为窒息组(轻度窒息42例和重度窒息18例)；同期健康足月新生儿60例作为对照。均于新生儿娩出后24 h、72 h和7 d取股静脉血检测血清总胆红素含量，脑损伤程度通过CT扫描评价。结果：窒息组新生儿与对照组比较，重度窒息和轻度窒息新生儿在娩出后24 h的血清总胆红素含量均显著高于对照组；72h和7d的血清总胆红素含量均显著低于对照组；其中重度窒息新生儿娩出后24h、72h和7d的血清总胆红素含量均显著低于轻度窒息者；各组新生儿间数据经统计学比较具有显著差异(P<0.01)。脑损伤新生儿娩出后24 h、72 h和7 d的血清总胆红素水平均显著低于非脑损伤组(P<0.01)。结论：血清总胆红素水平与新生儿窒息的程度和脑损伤程度存在相关性，为避免脑损伤，应避免立即实施降低胆红素水平治疗。

追踪方法学在精神科高风险攻击行为患者防范中的应用

目的：：观察追踪方法学在精神科高风险攻击行为患者防范中的应用效果。方法：运用《高风险患者入院评估表》、《攻击行为评估表》，按照追踪方法学的基本步骤，对攻击行为护理防范流程进行失效风险评估及根本原因分析，并制定安全管理持续改进措施。结果：运用追踪方法学对高风险攻击行为患者进行护理质量改进后，使患者的攻击行为发生率下降到历年低(30.7%)，减少了患者和医务人员受伤频率及严重度。结论：追踪方法学在精神科攻击行为防范中具有积极作用。

硬膜外持续泵入利多卡因在老年人股骨头置换术中的应用研究

目的：：观察硬膜外持续泵入利多卡因在老年人股骨头置换术中的麻醉效果。方法：选择股骨头置换术老年患者40例,随机分成持续泵注组和分次推注组,每组各20例。持续泵注组患者用微量注射泵持续向硬膜外腔泵注局麻药,分次推注组患者则采用传统分次给药方式；分别测定麻醉前及硬膜外给药后5 min、10 min、20 min、30 min、1 h各时点的血压和HR、SpO2,同时评定镇痛起效时间、麻醉平面、麻醉效果、肌松质量、用药总量。结果：持续泵注组患者的血压( BP)、心率( HR)波动显著降低,用药总量下降,与分次推注组比较差异有统计学意义(P<0.05),两组患者间麻醉阻滞平面、镇痛效果、SpO2比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：硬膜外微泵持续泵入给药方法用于老年人股骨头置换术可以达到间断分次给药法同样的麻醉效果,血压、心率平稳,用药量少,是一种安全的适合老年人生理特点的给药方法。

全方位护理对纤维支气管镜肺泡灌洗治疗顽固性肺部感染患者的护理效果观察

目的：：观察全方位护理用于纤维支气管镜肺泡灌洗治疗顽固性肺部感染患者的效果。方法：选择68例顽固性肺部感染患者，随机均分为观察组和对照组，每组各34例。观察组患者实施全方位护理，对照组患者实施常规基础护理等，比较两组患者手术过程中的各项检测指标变化、治疗过程中并发症发生情况及治疗效果。结果：观察组患者各项检测指标明显优于对照组(P<0.05)；并发症明显低于对照组(P<0.05)；治疗效果明显优于对照组(P<0.05)。结论：全方位护理用于纤维支气管镜肺泡灌洗治疗顽固性肺部感染患者的效果优于常规基础护理效果。

妊娠高血压综合征合并宫缩乏力性产后出血产妇的综合护理

目的：：观察妊娠高血压综合征合并宫缩乏力性产后出血产妇的综合护理效果。方法：随机选取50例妊娠高血压综合征合并宫缩乏力性产后出血产妇为研究对象，分为对照组和观察组，每组各25例。对照组产妇进行常规护理，观察组产妇在常规护理基础上进行综合护理，比较两组产妇护理有效率和护理满意度。结果：观察组产妇护理有效率和护理满意度均明显高于对照组(P<0.05)。结论：对妊娠高血压综合征合并宫缩乏力性产后出血产妇实施综合护理的效果优于常规护理效果。

循证护理在病毒性肝炎患者中的应用

目的：：观察病毒性肝炎患者应用循证护理的护理效果。方法：选择病毒性肝炎的患者100例,根据入院顺序随机分成对照组和观察组,每组各50例；对照组患者给予常规护理,观察组患者给予循证护理。经护理后,比较两组患者的生活质量、心理状态以及相关并发症。结果：观察组患者的焦虑自评量表( SAS)、抑郁自评量表( SDS)评分显著低于对照组,Bahrtel指数高于对照组,并发症发生率明显低于对照组差异均有显著性(P<0.05)。结论：病毒性肝炎患者采用循证护理的护理效果优于常规护理效果。

急性心肌梗死后早期心绞痛患者的临床护理分析

目的：：对比分析急性心肌梗死后早期心绞痛患者的临床护理效果。方法：将42例急性心肌梗死后早期心绞痛患者分为治疗组和对照组，每组各21例。分析两组患者的临床资料，对比护理效果。结果：治疗组患者治疗护理总有效率为95.24%，对护理质量总满意度为100.00%，与对照组的66.67%和71.43%相比，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：护理干预措施可显著改善急性心肌梗死后早期心绞痛患者临床症状，降低死亡率。

综合护理对腰椎间盘突出症患者的效果评价

目的：：探讨腰椎间盘突出症患者的临床护理与康复指导方法。方法：将120例腰椎间盘突出症患者随机分为对照组和观察组，每组60例。对照组患者采用常规护理；观察组患者采用针对性护理康复。比较两组患者治疗效果。结果：观察组患者治疗有效率为95.00%，明显高于对照组的63.33%，差异具有意义(P<0.05)。观察组患者有58例对护理工作满意率为96.67%，高于对照组的76.67%，组间差异有统计学意义(P<0.05)。在健康知识掌握度上，观察组患者有56例掌握率为93.33%，高于对照组的75%，组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论：采用有针对性的护理与康复指导方案，有助于提高腰椎间盘突出症患者的治疗效果，值得临床推广。

100例子宫肌瘤并发高血压患者围手术期护理的安全性

目的：：探讨子宫肌瘤并发高血压患者围手术期护理方法及安全性。方法：选取子宫肌瘤并发高血压患者100例,分为对照组和观察组,每组各50例。对照组患者使用常规方式护理,观察组患者给予针对性护理,观察两组患者血压变化情况和生命质量各维度的得分,比较两组患者护理后患者治疗的总有效率。结果：护理后观察组患者血压降低的程度明显好于对照组,生命质量各维度得分明显高于对照组。护理后患者治疗的总有效率,观察组患者明显高于对照组,P<0.05,差异具有统计学意义。结论：子宫肌瘤并发高血压患者实施围手术期护理能够有效控制血压,保证患者处于良好心态,能够提高患者治疗的总有效率,具有临床推广应用价值。

干预性护理对预防产妇卡前列素氨丁三醇注射液不良反应的作用

目的：：探讨干预性护理对预防产妇卡前列素氨丁三醇注射液治疗产后出血所致不良反应的作用。方法：以85例产后出血产妇作为研究对象，观察组产妇43例，进行干预性护理，对照组产妇42例常规注射，观察两组产妇产生的不良反应及临床疗效。结果：观察组6例产妇出现恶心呕吐，发生率为13.95%，寒战发生率为6.97%，头痛发热发生率为11.63%。对照组产妇恶心呕吐率为50.00%，寒战26.19%，头痛发热率33.33%，两组产妇不良发应发生率比较有明显差异(P<0.05)。观察组产妇总有效率95.35%，对照组78.57%，两组产妇疗效比较有统计学意义(P<0.05)。结论：干预性护理能够有效降低产妇卡前列素氨丁三醇在治疗产后出血时引发的不良反应发生率，疗效明显，药物安全性高，值得推广。

浅谈小儿静脉留置针的应用

目的：：讨论静脉留置针在儿科临床护理中的应用。方法：选择378例患儿的临床资料,根据年龄、病程等分析患儿采用静脉留置针护理过程中出现的问题及措施。结果：378例患儿,在静脉中留置针的留置时间为3~7 d,有23例患儿出现静脉炎,发生率为6.08%；18例患儿发生渗液,发生率为4.76%；32例患儿堵塞管,发生率为8.47%。结论：使用静脉留置针,留针时间较长,减少了患儿反复穿刺的痛苦,可降低患儿感染几率,提高护理工作的质量和效率,值得临床推广。

人感染 H7N9禽流感研究进展

人感染H7N9禽流感是由H7N9禽流感病毒引起的急性呼吸道感染性疾病，自2013年3月首次报告以来，其高死亡率引起发公众关注，现就其研究进展予以综述。

腹膜透析患者家庭访视进展

综述了腹膜透析家庭访视的相关内容，主要包括：国内外家庭访视护理现状，家庭访视的重要性，访视制度，访视质量评价标准，访视程序以及访视内容。国内腹膜透析家庭访视护理研究成果丰硕，发现了一些问题，提出了相应的对策，能够有效地指导临床实践。

研究健康教育在骨科临床护理中的作用

目的：：探讨健康教育在骨科临床护理中的应用效果。方法：选取骨科收治的患者116例,将其分为对照组和观察组,每组各58例。对照组患者采取常规护理,观察组患者在对照组基础上进行阶段性的健康教育护理。比较两组患者的护理效果和对护理的满意度。结果：观察组患者的并发症发生率显著低于对照组,观察组患者对护理服务态度和护理质量的满意度显著高于对照组,P<0.05,具有统计学意义。结论：健康教育可以有效预防术后并发症的发生,缩短患者的住院时间,提高患者对护理的满意度,有利于良好护患关系的建立,值得在临床护理中广泛应用。

星级护理评选在民营医院优质护理服务中的应用

目的：：探讨星级护理评选即优秀护士长及星级护士评选活动在优质护理服务活动中的成效。方法：成立星级护理考评小组，根据《星级护理考评实施方案》及《优秀护士长评选标准》、《星级护士考评标准》进行月考评，季度总评，公示表彰。结果：实施优秀护士长及星级护士评选后，护理服务满意度明显提高，差异显著(P<0.01)。结论：优秀护士长及星级护士评选活动能充分调动护士积极性，激发工作热情，提高护理质量及患者满意度，降低护士辞职率，稳定民营医院护理队伍，提升护理队伍的整体素质，实现了优质护理服务的目标。

“习惯性”流产妇女心理状态问卷评分状况调查

目的：：调查习惯性流产( RSA)妇女心理应激源及状态-特质焦虑问卷评分状况。方法：选择妇产科就诊的107例RSA育龄期妇女设为RSA组,并按年龄相同与同期正常怀孕妇女107例作为对照组,两组妇女分别接受了“生活事件调查问卷( LES)”和“状态-特质焦虑量表(STAI量表)”调查。结果：LES评分指标比较中,RSA组妇女负性LE、家庭LE和LE总分均显著高于对照组(P均<0.05~0.01)。 STAI量表评分指标比较中,RSA组妇女的状态焦虑评分及特质焦虑评分均显著高于对照组(P均<0.01)。结论：遭遇负性生活事件对RSA妇女影响较大,状态焦虑及特质焦虑表现显著。

降低病房噪音发生率的方法初探

目的：：调查病房噪音的来源，探讨降低病房噪音发生率的方法。方法：病房应用对讲机，布置温馨儿童房间，病房粘贴温馨提示，改善病房工作流程。结果：病房噪音发生率由原来的40.4%降至22.8%。结论：应用上述方法能有效降低病房噪音发生率，提高患者满意度及护士工作效率。

住院官兵心理障碍与人格特征的相关研究

目的：：探讨军队医院住院官兵的心理状态以及心理障碍形成的人格基础。方法：抽取某战区所辖8所部队医院526名住院军人，采用90项症状清单(SCL-90)和艾森克个性测验(EPQ)测查心理状态和人格特征。结果：军队医院住院官兵的艾森克人格问卷中神经质维度得分明显高于国内常模，内外向和精神质两维度得分低于国内常模(P<0.05或0.01)；症状自评量表中总分、躯体化、抑郁、焦虑、敌对、恐惧、精神病性因子分均高于国内常模(P<0.05)；住院官兵EPQ神经质维度与SCL-90各因子得分呈显著正相关(P<0.05或0.01)；内外向维度与SCL-90的躯体化、人际敏感、抑郁和焦虑因子分呈负相关(P<0.05)；精神质维度与SCL-90敌对、偏执和精神病性因子呈正相关(P<0.05)。结论：军队医院住院军人存在不同程度的心理障碍，情绪不稳定、内倾的人格特点可能为其人格基础。

大连市甘井子区2014年麻疹流行病学特征分析

目的：：了解大连市甘井子区2014年麻疹流行病学特征。方法：通过中国疾病预防控制信息系统，采用描述流行病学研究方法，对该区2014年麻疹病例进行流行病学分析。结果：大连市甘井子区2014年共报告确诊麻疹病例55例，麻疹发病率5.1282/10万。病例发生主要集中在3-7月份，共51例，占全年发病数92.73%；发病年龄以0~1岁(小于8月龄10例)为主，共31例，占全年发病总数的56.36%，其次是成人组(22~42岁)15例，占全年发病总数的27.27%，职业分布以散居儿童病例多，共38例，占发病总数的69.09%。所有病例中无免疫史者38例，占全年发病总数69.09%，免疫史不详者15例，有2剂麻疹免疫史者2例。结论：大连市甘井子区2014年麻疹高发与易感人群积累及一部分人未接种疫苗有关。

头孢呋辛钠联合清开灵注射液治疗肺气肿合并感染患者的疗效观察

目的：：观察肺气肿合并感染患者应用头孢呋辛钠联合清开灵注射液治疗的效果。方法：选取肺气肿合并感染患者100例，按治疗方法不同将其分为研究组和对照组，每组各50例。对照组患者采用头孢呋辛钠治疗；研究组患者采用头孢呋辛钠+清开灵治疗，比较两组患者的治疗有效率、住院时间、肺功能指标、生活质量的差异性。结果：研究组患者的有效率高于对照组(P<0.05)；住院治疗时间低于对照组(P<0.05)；研究组患者肺活量(VC)、第1秒用力呼气量(FEV1)、第1秒用力呼气量占用力肺活量比率(FEV1/FVC)、呼气峰值流速(PEF)肺功能指标、6min步行距离(6MWT)、SF-36评分等均明显高于对照组(P<0.05)。结论：采用清开灵联合头孢呋辛钠治疗肺气肿合并感染患者的疗效优于单纯头孢呋辛钠治疗疗效。

中西医结合治疗甲亢患者的疗效分析

目的：：探讨中西医结合治疗甲亢患者的临床疗效。方法：选取甲亢患者30例，根据治疗方式的不同分为研究组和对照组，每组各15例。研究组患者采用中西医结合进行治疗，对照组患者采用西医进行治疗。将两组患者血清游离三碘甲状腺原氨酸和血清游离甲状腺素含量值等临床指标进行分析。结果：治疗后，研究组患者的总有效率为93.33%，对照组总有效率60.00%，两组患者的差异明显，有统计学意义P<0.05。结论：甲亢患者给予中西医结合治疗的疗效较好，值得临床推广。

联合中西医治疗2型糖尿病合并高脂血症患者的临床分析

目的：：分析研究加味二阴煎配合二甲双胍及瑞舒伐他汀治疗2型糖尿病合并高脂血症患者的临床效果。方法：盲选取98例2型糖尿病合并高脂血症患者,随机分为对照组(48例)和观察组(50例)。对照组患者采用二甲双胍及瑞舒伐他汀用药治疗,观察组患者在对照组在基础上,增加加味二阴煎用药治疗,比较两组患者的血糖、血脂以及治疗效果。结果：治疗后观察组患者的治疗有效率、空腹血糖、餐后2 h血糖水平、血红蛋白水平以及TG、TC水平、差异有统计学意义,P<0.05。结论：2型糖尿病合并高脂血症患者临床治疗中采用加味二阴煎配合二甲双胍及瑞舒伐他汀治疗,改善患者的血糖、血脂水平效果显著,可显著提高患者生命质量,临床应用价值深远。

人参总皂苷调控中风后巢内细胞对神经干细胞的作用

目的：：中风是一种严重危害人类健康的疾病,神经干细胞能够促进中枢神经系统功能的修复。神经干细胞的增殖、分化、迁移需要干细胞niche的调控,前期实验发现人参总皂苷可以显著增加中风后神经干细胞的数量。体外模拟神经干细胞niche内星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞对神经干细胞的影响,以研究人参总皂苷是否能作用于星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞而促进中风后神经干细胞的分化,修复脑损伤？将脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞和神经干细胞共培养,观察模拟神经干细胞niche内复杂微环境条件下,人参总皂苷能否使脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞分泌的VEGF增多,从而促进中风损伤的神经干细胞分化。方法：取1-3 d的新生SD大鼠,分离培养星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞。取孕16 d SD大鼠,分离培养神经干细胞。利用Transwell装置,将神经干细胞、星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞共培养。制备神经干细胞缺氧6h的脑中风模型。用含1μg/ml的人参总皂苷培养基作用1d,设置空白对照组。MAP-2标记成熟神经元,GFAP标记星形胶质细胞。用细胞免疫荧光化学染色检测缺氧6h神经干细胞分化后的MAP-2和GFAP阳性细胞比例,ELISA检测人参总皂苷对星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞共培养上清中VEGF含量的影响。结果：与脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞共培养条件下,与空白对照组比较,人参总皂苷可显著增加MAP-2阳性细胞比例( P<0.01)；人参总皂苷作用于星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞48 h可显著上调VEGF表达( P<0.01)。结论：人参总皂苷作用于脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞可增加中风后神经干细胞向神经元定向分化并促进其成熟,可能与人参总皂苷调控脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞VEGF分泌,改善神经干细胞niche微环境有关。

针刺对在体神经干细胞的作用及其机制

神经干细胞( neural stem cell,NSC)是来源于神经组织及神经组织发源地、具有干细胞特征,终生保持自我更新能力并能分化为各种神经组织细胞(包括神经元、神经胶质细胞、少突胶质细胞等)的一类细胞。神经干细胞具有以下特征：①有增殖能力；②在整个生命过程中能自我维持或自我更新；③能通过扩增祖细胞而产生大量的后代；④具有向神经组织多细胞系分化的能力；⑤损伤或疾病能刺激神经干细胞的分化。近十年的研究表明,神经干细胞不仅存在于成年哺乳动物的脑组织内,而且还被证实这些神经干细胞在细胞因子、激素或环境因素的调控下能在体外分裂,并可进一步分化神经元或胶质细胞。当成年脑组织或脊髓中的神经元或胶质细胞受损后,这些神经干细胞增殖、迁移、分化为新的神经元能够替代受损组织,参与修复脊髓和脑的功能。

白藜芦醇通过抑制小鼠肥大细胞增殖、脱颗粒,减轻动脉粥样硬化的发生

目的：：观察小鼠肥大细胞炎症反应在白藜芦醇灌胃减轻ApoE-/-小鼠进展期动脉粥样硬化过程中的作用。方法：30只ApoE-/-小鼠从6周开始,取其中的20只,进行连续24周的高脂饲料喂养,造成进展期动脉粥样硬化模型。于高脂喂养12周后,在20只小鼠中随机分出10只进行白藜芦醇灌胃干预(50 mg/kg)。取心脏主动脉流出道进行石蜡包埋切片,H. E.染色显示大体病变改变,Movat染色显示动脉粥样硬化病变,甲苯胺蓝染色显示结缔组织肥大细胞分布、数量和脱颗粒状态。免疫组织化学显示IL-6、TNF-α表达。结果：经过高脂喂养后,H. E.和Movat染色显示心脏流出道管壁附着粥样硬化斑块面积明显增加,白藜芦醇灌胃12周可以减轻粥样硬化斑块内胆固醇结晶的面积(14.7% vs 10.6%),增加胶原纤维比例(31.9% vs 42.5%),并表现出具有较厚纤维帽的稳定型斑块特征。甲苯胺蓝染色显示在病变组的血管周围结缔组织中,出现成簇的、三五成群的肥大细胞,部分肥大细胞呈现脱颗粒状态。白藜芦醇干预可以减少肥大细胞浸润数量(11.4个/只 vs 6.5个/只),抑制脱颗粒反应细胞比例(28.6% vs 11.1%),减少肥大细胞浸润区域IL-6、TNF-α表达。结论：白藜芦醇可能通过小鼠较少血管周围结缔组织中肥大细胞的数量及脱颗粒反应,减轻局部炎症,延缓动脉粥样硬化的发生。

通心络胶囊治疗2型糖尿病并发急性脑梗死患者的疗效观察

目的：：观察通心络胶囊治疗2型糖尿病并发急性脑梗死患者的临床效果。方法：选取2型糖尿病合并急性脑梗死患者116例，通过随机数表法随机分为观察组和对照组。观察组患者64例，采用常规治疗+通心络胶囊的方法进行治疗；对照组患者52例，采用常规治疗；对比两组患者的治疗总有效率及血脂水平等方面存在的差异。结果：观察组患者的治疗总有效率高于对照组；观察组患者的血脂水平优于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：采用常规治疗加通心络胶囊的方法治疗2型糖尿病合并急性脑梗死患者的疗效优于单纯常规治疗疗效。

丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏 IRS-1的调节作用

目的：：观察彩色蚕茧水提物-丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体底物-1( IRS-1)的调节作用。方法：48只雄性SD大鼠随机分为4组：正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗高剂量组和丝胶治疗低剂量组,每组12只大鼠。采用高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射的方法制作2型糖尿病大鼠模型,以空腹血糖≥11.1mmol/L作为成模标准。待模型成功建立后,丝胶治疗高(2.4g/kg/d)、低(1.8g/kg/d)剂量组大鼠分别给予不同剂量丝胶灌胃35天,正常对照组、模型组大鼠给予同等剂量生理盐水灌胃35天。釆用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的血糖,采用Real Time PCR法检测各组大鼠肝脏IRS-1 mRNA的表达。结果：模型组大鼠的血糖为(29.45±4.82)mmol/L,明显高于正常对照组大鼠的血糖(10.83±2.03) mmol/L(P<0.05)；丝胶治疗高、低剂量组大鼠的血糖分别为(13.20±4.09)mmol/L、(13.18±2.30)mmol/L,均明显低于模型组(P<0.05)。模型组大鼠肝脏IRS-1 mRNA的表达水平为(0.0099±0.0040)拷贝数/μl,明显低于正常对照组大鼠(0.0251±0.0041)拷贝数/μl(P<0.05)；丝胶治疗高、低剂量组大鼠肝脏的IRS-1 mRNA的表达水平分别为(0.0108±0.0039)拷贝数/μl、(0.0131±0.0036)拷贝数/微升,均明显高于模型组( P<0.05)。结论：IRS-1是胰岛素PI3 K/Akt信号通路的关键因子,本研究提示丝胶可能通过提高PI3 K/Akt信号通路IRS-1的表达发挥降低血糖的作用。

采用中医方案治疗慢性胃炎患者的效果观察

目的：：探讨慢性胃炎患者中医治疗方案的临床效果。方法：将68例慢性胃炎患者随机分为对照组和观察组,每组各34例。对照组患者采用枸橼酸铋钾颗粒治疗,观察组患者采用安胃饮汤进行治疗；对比两组患者的治疗效果、并发症和复发的情况。结果：观察组患者治疗的总有效率、复发率均明显优于对照组,数据对比差异具有统计学意义,P<0.05。结论：中医方案治疗慢性胃炎患者的效果显著,不易复发,值得在临床上推广使用。

何首乌饮对衰老大鼠胰岛素信号通路的影响

目的：：探讨何首乌饮对衰老大鼠胰岛素信号通路的影响。选用30只雄性大鼠随机分为3组：青年组(12月龄)；衰老组(18月龄)；何首乌饮组(何首乌饮4.8g/100g,灌胃60d,18月龄),每组各10只。采用β-半乳糖苷酶染色观察何首乌饮延缓睾丸衰老的情况,基因芯片技术筛选衰老大鼠受何首乌饮调控的差异表达基因群体,并采用qRT-PCR进行验证。从中筛选出受何首乌饮调控与胰岛素信号通路相关的关键基因IR、IRS1、IRS2、IGF1、IGFBP3,进行qRT-PCR、免疫荧光和Western blot 观察其在睾丸组织中的表达变化。结果：衰老组大鼠睾丸组织衰老细胞明显高于青年组(P<0.01),何首乌饮用药后衰老细胞明显减少( P<0.01)。基因芯片筛选出受何首乌饮直接调控的基因有912个,其中与胰岛素信号通路相关的基因有10个,从中选取的关键基因,衰老组IGFBP3的表达高于青年组(P<0.01),IR、IRS1、IRS2、IGF1表达低于青年组(P<0.01),用药后IGFBP3的表达下调,IR、IRS1、IRS2、IGF1表达上调(P<0.01)。结论：何首乌饮通过调节胰岛素信号通路关键基因的表达延缓大鼠睾丸衰老。

白藜芦醇通过上调 miR-34 c表达抑制结直肠癌细胞的增殖和侵袭

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,化疗仍是临床治疗不可缺少的方法。据报告白藜芦醇具有抑制肿瘤的发生、增殖和转移等抗肿瘤作用,但其抑制结直肠癌的相关分子机制尚不完全清楚。 miR-34 c作为抑癌基因,在结直肠癌组织表达较正常肠黏膜组织明显下调,故本研究主要关注白藜芦醇抑制结直肠细胞增殖与miR-34c相关机制。通过培养结直肠癌细胞系(HCT-116和HT-29)、建立裸鼠荷瘤模型,CCK8检测发现白藜芦醇明显抑制结直肠癌细胞的活性,具有时间和剂量依赖性。 RTCA-DP实时无标记细胞功能分析结果亦可见白藜芦醇明显抑制结直肠癌细胞的迁移和侵袭能力。软琼脂集落形成实验显示白藜芦醇处理组形成克隆集落的数目明显少于对照组(HCT-116和HT-29细胞分别减少45.9%和57.4%,P<0.05)。流式细胞术发现白藜芦醇处理组细胞呈现明显的细胞周期阻滞, G0/G1期的HCT-116细胞百分比较对照组增加54.4%(P<0.05),G2/M期的HT-29细胞百分比较对照组增加37.1%(P<0.05),且凋亡细胞百分率也明显增高39.1%(HCT-116,P<0.05)和36.4%(HT-29,P<0.05)。另外,白藜芦醇明显提高结直肠癌细胞miR-34c的表达(HCT-116为3.5倍；HT-29为19.2倍),其靶基因KITLG(SCF)mRNA和蛋白水平均明显降低(P<0.05)。特异性敲降内源性miR-34c表达后,KITLG的表达明显增加,结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力也得以恢复。将HCT-116细胞接种于裸鼠腋下皮下结缔组织成瘤1周后,静脉给予白藜芦醇(100 mg/kg)或DMSO,可见白藜芦醇治疗组肿瘤体积明显小于DMSO组,且肿瘤组织内Ki67阳性细胞数明显少于DMSO组( P<0.05), TUNEL 染色显示白藜芦醇组肿瘤组织凋亡细胞百分数高于DMSO 组( P<0.05),Caspase-3表达增高。另外,我们发现白藜芦醇组肿瘤组织miR-34c表达较DMSO组增加1.8倍(P<0.05),而血浆中miR-34 c的水平无明显差异。综上,本实验结果表明白藜芦醇具有促进结直肠癌细胞miR-34 c的表达,发挥抑制其靶基因KITLG表达和结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的重要作用。

淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方对阿尔茨海默病转基因小鼠大脑皮质神经元 DMT1、FPN1的影响

目的：：观察淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方对阿尔茨海默病APPswe/PS1△E9双转基因小鼠模型大脑皮质神经元DMT1、FPN1表达情况的影响,探讨淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方对阿尔茨海默病小鼠大脑皮质的保护作用及其机制。方法：6月龄雄性APPswe/PS1△E9双转基小鼠60只,随机分为6组,模型组、淫羊藿组、黄芪组、葛根组、复方组、DFO组,每组各10只。6月龄雄性C57 BL/6 J小鼠10只作为正常对照组。淫羊藿组小鼠灌胃给予淫羊藿苷水溶液,黄芪组灌胃给予黄芪甲苷水溶液,葛根组灌胃给予葛根素水溶液,复方组灌胃给予淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方,DFO组肌肉注射DFO,模型组和阴性对照组小鼠灌胃给予等量生理盐水。连续给药3个月,取各组小鼠脑组织,分别采用免疫组织化学、Real time PCR和Western方法检测各组小鼠大脑皮质DMT1和FPN1的表达情况。结果：免疫组织化学结果显示：阴性对照组均未见DMT1及FPN1阳性细胞。与正常对照组相比,模型组DMT1的表达增高,模型组FPN1的表达降低；与模型组相比,复方组和DFO组DMT1的表达降低,模型组和DFO组FPN1的表达增高；与DFO组相比,复方组DMT1和FPN1的表达无明显差异。 Real time PCR结果、Western结果与免疫组化结果相一致。结论：应用淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方可以下调AD小鼠大脑皮质DMT1的表达,上调AD小鼠大脑皮质FPN1的表达,从而抑制AD小鼠脑铁超载,缓解铁超载带来的中枢神经系统功能衰退。

自噬在电针对大鼠失神经性肌肉萎缩的肌细胞形态计量学影响中的作用

周围神经损伤会带来肌肉失神经性萎缩，我们通过前期研究已证实低频电针能有效促进失神经支配的萎缩肌肉形态和功能恢复。由于失神经性肌肉萎缩过程中必然发生自噬来保证肌细胞在营养不足的情况下存活，故我们认为，探索自噬在电针治疗神经损伤和肌肉萎缩中的具体作用及其可能机制，具有重要的研究价值。因此，前期基础上，我们将100只无菌级Wistar 雄性大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、电针联合自噬抑制剂3-MA 组，每组各25只通过手术造成大鼠实验性坐骨神经钳夹伤模型，采用电针治疗、自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(3-MA)干预等措施，术后第1、2、7、28天取材进行大鼠腓肠肌组织学观察和腓肠肌肌细胞截面积的测算。

蒲地蓝消炎口服液联合小柴胡颗粒（冲服）治疗上呼吸道感染患者的临床效果观察

目的：：观察蒲地蓝消炎口服液联合小柴胡颗粒(冲服)治疗上呼吸道感染患者的临床疗效。方法：选取上呼吸道感染患者79例，随机分为对照组和观察组。对照组患者39例，给予小柴胡颗粒(冲服)治疗，观察组患者40例，采用蒲地蓝消炎口服液，一周后比较两组患者的疗效。结果：观察组患者的治疗效果明显高于对照组(P<0.05)；发热、鼻塞等症状消失时间明显短于对照组(P<0.05)。结论：采用小柴胡颗粒(冲服)联合蒲地蓝消炎口服液治疗上呼吸道感染患者的疗效优于单纯小柴胡颗粒(冲服)。

大黄多糖对糖尿病大鼠皮肤创面愈合的影响

糖尿病状态下皮肤愈合困难,皮肤溃疡及创面迁延不愈严重影响患者生活质量。本研究链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,糖尿病大鼠成模2周后手术制作背部创面模型。糖尿病大鼠创面给予生理盐水即糖尿病组,糖尿病大鼠创面敷药大黄多糖组即大黄多糖组,糖尿病大鼠创面敷大黄多糖及SB431542(转化生长因子受体抑制剂)即大黄多糖-SB431542组,另取正常大鼠制作背部创面模型给予生理盐水为对照组。2周后检测创面面积,计算创面愈合率,试剂盒检测大鼠创面中羟脯氨酸( OHP)的含量,HE染色观测创面的肉芽组织生长情况,免疫组化染色结合Image J 软件检测TGFβ1表达。结果表明,与对照组相比,糖尿病组及大黄多糖-SB431542组创面愈合率降低较为明显,羟脯氨酸含量减少( P<0.01),大黄多糖组差异不显著(P>0.05)。对照组与大黄多糖组真皮层较厚,皮下胶原纤维含量丰富,而糖尿病组与大黄多糖-SB431542组真皮层较薄,胶原纤维含量亦较少。糖尿病组转化生长因子( TGFβ1)表达较对照组减少,大黄多糖组和大黄多糖-SB431542组的TGFβ1表达上调。结果表明,大黄多糖能诱导TGFβ1表达,这可能是大黄多糖促进糖尿病大鼠皮肤创面愈合的重要机制之一。

黄芪甲苷、麦冬皂苷作用于大鼠星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞对中风后神经干细胞增殖和分化的影响

大脑缺血缺氧的损伤，导致体内神经干细胞巢微环境结构和功能的紊乱，实验室前期研究表明三七总皂苷、人参总皂苷能够促进中风后神经干细胞增殖、迁移和分化，促进脑缺血后缺氧后VEGF 的表达。黄芪甲苷、麦冬皂苷是否能够通过作用于神经干细胞巢内的星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞，通过调控VEGF的表达促进神经干细胞的增殖和分化尚不清楚。目的：分别将胎大鼠星形胶质细胞、脑微血管内皮细胞与神经干细胞共培养，模拟体内复杂的神经干细胞巢微环境，研究黄芪甲苷、麦冬皂苷是否能够通过作用于神经干细胞巢内的星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞，通过调控VEGF的表达促进神经干细胞的增殖和分化，启动脑损伤结构和功能的修复。材料：取孕15 d SD大鼠，用以分离培养神经干细胞、星形胶质细胞、和微血管内皮细胞。方法：利用Transwell装置，分别将大鼠星形胶质细胞、微血管内皮细胞和神经干细胞共培养。设立空白对照组、模型组和中药有效成分组，于氧糖剥夺模型4小时后2h、4h和6h3个时间点分别收集处理细胞和培养液，做ELISA和免疫荧光双标染色。结果：大鼠星形胶质细胞、脑微血管内皮细胞分别与神经干细胞共培养条件下，与空白对照组比较，黄芪甲苷、麦冬皂苷可显著增加Brdu、Tuj-1和Vimentin阳性细胞数(P<0.05)，显著上调VEGF的表达(P<0.05)。结论：黄芪甲苷、麦冬皂苷通过作用于大鼠星形胶质细胞和微血管内皮细胞，促进神经干细胞的增殖和分化，可能与黄芪甲苷、麦冬皂苷通过促进VEGF的分泌调控神经发生有关。

小檗碱对脑缺血损伤2型糖尿病大鼠脑组织AQP1表达的影响

目的：：探讨小檗碱对缺血性脑损伤2型糖尿病大鼠脑组织AQP1表达的影响。方法：高脂高糖饲养健康SPF级Sprague-Dawley雄性大鼠8周后,腹腔单次注射链脲佐菌素( streptozotocin,STZ)(30mg/kg),3d后测大鼠血糖浓度大于16.7mmol/L即为糖尿病模型；采用Zea Longa等的改良线栓法制备大鼠局灶性脑栓塞模型。实验分4组进行：(1)假手术组；(2)模型组(糖尿病+脑缺血模型)；(3) BBR组(模型+小檗碱)；(4)甘露醇对照(模型+甘露醇)组,处理期间继续按原方法喂养。分别于缺血后12、16、20、24h经股静脉穿刺给药,小檗碱剂量为0.05g/kg体重,甘露醇剂量为0.5g/kg体重,给药时间为5min~10min,实验结束采血取材。用神经功能缺损评分( NIHSS)对大鼠一般状态进行评估；用脑组织含水量检测评估脑水肿程度；H·E染色光镜观察脑组织的病理改变和脑水肿程度；免疫组织化学和免疫印迹法检测脑组织中AQP1的表达情况。结果：小檗碱处理组2型糖尿病大鼠一般状况好于模型组,脑水肿减轻；H·E染色显示,小檗碱处理组脑组织的神经元胞体水肿不明显,模型组水肿明显；免疫组织化学和免疫印迹法检测小檗碱处理组脑组织的AQP1表达明显降低。结论：小檗碱可减轻2型糖尿病大鼠脑缺血损伤的病理变化；小檗碱处理组2型糖尿病大鼠脑组织AQP1表达降低。

Parthenolide对结肠癌细胞增殖、迁移、凋亡和 VEGF-C表达的影响

目的：：小白菊内酯( Parthenolide)可通过不同的途径影响肿瘤的进展，但有关其对结肠癌细胞的生物学行为的影响报道较少。本研究的目的就是探讨Parthenolide干预在结肠癌细胞生长、迁移和凋亡中的生物学作用，以及其对结肠癌细胞分泌VEGF- C的影响。应用QRT-PCR、Wstern Blot、免疫组织化学、细胞增殖、迁移及凋亡实验检测Parthenolide干预后结肠癌细胞生物学行为的变化。结果：parthenolide干预后48 h开始抑制细胞活性( P<0.05)；单独应用parthenolide不能影响结肠癌细胞的迁移和凋亡；parthenolide处理后可抑制结肠癌细胞分泌VEGF-C。尾静脉注射Parthenolide可抑制移植瘤生长、淋巴管生成。结论：这些研究表明parthenolide能有效抑制结肠癌细胞及移植瘤的生长，其可能成为潜在的抗癌药物。

丹参酮ⅡA可激活 Nrf2/ARE通路对帕金森病 MPTP模型小鼠多巴胺能神经元起保护作用

目的：：研究Nrf2/ARE通路在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine, MPTP)所致帕金森病(PD)动物模型发病机制中可能的作用,探讨导致多巴胺(DA)能神经元变性坏死的可能机制,以及丹参酮ⅡA对Nrf2/ARE通路的影响和对多巴胺能神经元的保护作用。方法：将60只C57 BL/6 N小鼠随机分为对照组、PD模型组和丹参酮ⅡA组,每组20只。 PD模型组和丹参酮ⅡA组小鼠采用MPTP制备PD小鼠模型,丹参酮ⅡA组制备PD模型后腹腔注射丹参酮ⅡA。观察各组小鼠行为学表现,采用免疫组织化学、免疫蛋白印迹和免疫荧光双标法检测各组小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)、核转录因子(Nrf2)、醌氧化还原酶(NQO1)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数和蛋白表达水平。结果：与对照组比较,PD模型组小鼠出现典型的PD样症状。在MPTP后一次注射后48小时,黑质区TH阳性神经元数量和蛋白表达水平明显下降,Nrf2、NQO1和GFAP阳性细胞数量和蛋白表达水平明显增加( P<0.01),在MPTP后一次注射后7天,黑质区TH 阳性神经元数量和蛋白表达水平较对照组减少约45%和50%( P<0.01)。与PD模型组比较,丹参酮ⅡA组小鼠PD样症状减轻,在MPTP后一次注射后48小时,中脑黑质区Nrf2、NQO1和GFAP阳性细胞数量和蛋白表达水平进一步升高( P<0.01),在MPTP后一次注射后7天,黑质区TH阳性神经元数量和蛋白表达水平明显升高( P<0.01)。结论：Nrf2/ARE通路在急性PD模型DA能神经元内可能被激活,其可能通过上调NQO1的表达对黑质DA能神经元起到保护作用,丹参酮ⅡA可能通过激活Nrf2/ARE通路对小鼠多巴胺能神经元起到一定保护作用。

Acute lung injury ( ALI) is induced by direct and indirect injury,and It causes the damage of alveolar epithelial cells and capillary endothelial cells. Acute lung injury is characterized by Acute lung injury is characterized by the development of hypoxemia,damage to the alveolar capillary membrane barrier,pulmonary ede-ma, and the resultant respiratory failure Acute lung injury ( ALI) and acute respiratory distress syndrome ( ARDS) in their most severe forms are still major challenges in modern intensive care medicine that significantly contribute to morbidity and mortality of critically ill patients. there is no particularly effective treatment , so far. it is still a Thorny Medical Problem all of the world. Bone marrow mesenchymal stem cells ( BMMSC) is the another type of stem cell other than the bone marrow hematopoietic stem cells . BMMSC is understudied deeply with the indepth study of cell biology. It provides a new way for the treatment of ALI as the characteristics that can survive damage lung tissue in mice and differentiated into alveolar epithelial cells, repair damaged lung tissue. This paper reviews the potential therapeutic effect of BMMSC to ALI and its mechanism.

伴有和不伴有抑郁症状的海洛因依赖患者的生活质量对比分析

目的：：分析伴有和不伴有抑郁症状的海洛因依赖患者的生活质量差异。方法：135例美沙酮维持治疗的海洛因依赖患者，用抑郁自评量表和世界卫生组织生活质量量表对患者进行评定。结果：伴有抑郁症状的海洛因依赖患者的生理和心理生活质量评分显著差于不伴有抑郁的患者(P<0.001)。结论：抑郁症状是海洛因依赖患者生活质量恶化的重要原因。

规范化饮水指导对住院精神病患者便秘的影响

目的：：探讨规范化饮水指导对住院精神病患者便秘的影响。方法：选择389例患者，采用随机法分为观察组194例和对照组195例。对照组患者接受精神科常规健康指导，观察组患者在此基础上接受规范化饮水指导，比较两组患者的便秘情况。结果：两组患者在入院2周便秘发生数比较差异无显著意义(P>0.05)；入院1月和入院2个月便秘发生数比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者在入院2周饮水依从性比较差异无显著意义(P>0.05)，入院1月和入院2个月饮水依从性比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论：每日每人饮水在1500 ml以上，且少量多次饮用，可以降低住院精神病患者的便秘发生率，规范化指导能促进患者饮水的依从性。

CRT与 PCT联合检测在重症细菌感染患者诊断中的应用效果

目的：：观察C反应蛋白( CRP)与降钙素原( PCT)联合检测在重症细菌感染患者诊断中的应用效果。方法：选取重症细菌感染患者110例为观察组，选取同时期非细菌感染患者110例为对照组，对比两组患者治疗前CRP与PCT水平，以及观察组患者治疗前后CRP、PCT水平。结果：治疗前，观察组患者的CRP与PCT水平均明显高于对照组(P<0.05)；观察组患者治疗后CRP与PCT水平明显低于治疗前(P<0.05)；CRP与PCT敏感性两者差异无统计学意义(P>0.05)；PCT特异性明显高于CRP(P<0.05)。结论：CRP与PCT联合检测可作为重症细菌感染患者早期诊断的重要依据，并可用于观察治疗效果。

诱导型一氧化氮合酶抑制剂在大鼠脑缺血再灌注损伤模型中作用的实验研究

目的：：在大鼠脑缺血再灌注中引起损伤的因素很多,本实验旨在观察诱导型一氧化氮合酶( iNOS)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤( MCAO)神经细胞凋亡的影响,并探讨iNOS影响大鼠脑缺血再灌注损伤中神经元凋亡的可能机制。方法：成年雄性SD大鼠72只,体重280-320 g。线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,同时激光多普勒血流仪(LDF)检测脑血流变化情况。造模成功后,于血流再灌的0h、12h、24h、36 h、48 h、60 h分别采用腹腔注射的方式,以30 mg/kg的剂量给药,同时于各时间点观察各组大鼠神经行为学改变并运用改良的Garcia评分法进行神经功能缺失评分。2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察梗死灶变化。检测各组缺血侧脑组织以及血清中一氧化氮含量及iNOS、总NOS酶活性。脑组织切片行Nissl染色,观察神经元的形态改变；原位缺口末端标记法( TUNEL)染色,观察缺血半暗带内神经细胞的凋亡情况,并统计凋亡率；免疫组织化学染色,观察caspase-3以及p-AKT的表达。取缺血半暗带脑组织,行P-AKT、caspase-3的western blot检测,并定量分析。结果：在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后抑制诱导型一氧化氮的表达,应用SMT可显著降低死亡率、减少脑梗面积、改善神经功能评分,同时P-AKT的表达显著增多伴随着caspase-3表达的显著下降,以及凋亡细胞数目的减少。 Nissl染色可见MCAO+SMT组缺血半暗带内的皮质神经元结构较清晰,胞体肿胀、核固缩、核溶解程度较MCAO组及MCAO+NS组明显减轻,淡染区域也显著减小。结论：在大鼠脑缺血再灌注损伤模型中iNOS的表达,能减少缺血半暗带内神经元的凋亡,这可能与应用iNOS抑制剂后P-AKT蛋白活性的恢复有关。

健康成人头后小直肌 MRI影像解剖及测量

研究探索健康成人头后小直肌的MRI影像解剖及测量方法,得出头后小直肌的长度及面积参考值,为慢性颈源性头痛与头后小直肌的关联性研究提供影像学资料。本文通过对10例头颈部标本进行大体解剖,测出20侧头后小直肌的解剖数据,参照大体解剖结果,采用磁共振成像技术对109例健康成人的左侧头后小直肌分别行0°、25°、30°、35°、40°、45°、50°角的T2加权像扫描,确定佳的扫描角度,并测量出该角度健康成人头后小直肌的长度及面积参考值。终得出30°角为显示头后小直肌的佳扫描角度；健康成人男性左侧头后小直肌的长度为(21.2±2.6)mm,面积为(91.9±27.2)mm2；女性左侧头后小直肌的长度为(19.3±2.4)mm,面积为(73.3±22)mm2；头后小直肌的长度和面积均具有明显的性别差异(P<0.05)。有报道称慢性颈源性头痛可能与头后小直肌的病变密切相关,但是迄今为止,还没有文献报道正常成人头后小直肌的测量参考值,在临床上也就不能客观地从形态学角度判断头后小直肌是否发生了形态学改变,从而难以确定头后小直肌病变与慢性头痛的关联性。因此得出健康成人头后小直肌的测量参考值至关重要。

Objective:Blood-brain barrier is the key barrier of brain in the innate immune. It can prevent the harmful substances from the blood into the brain. In order to keep the brain in a relatively stable environment and maintain the normal function of the nervous system, it can also pump harmful substances or excess substances outside the brain selectively. Among them, brain microvascular endothelial cell tissue is a key part in the blood-brain barrier's function. The number of the patients with central nervous system ( CNS) diseases increased year by year. The therapeutic drug is usually inhibited by the blood-brain barrier and is difficult to work. Therefore, how to modify the drug and to make it easier to cross the blood brain barrier is the key point to cure CNS. At present, more than 95% research focus only on how nano drugs can enter the cell, the way and efficiency to enter the cell and the research of effect of nano drug etc. For the process of drug carrier in endocytosis, intracellular transport and release and regulation of research are rarely reported. Clathrin and P-glycoprotein are related protein in endo-cytosis and exocytosis with nano drug. Clathrin is located on the plasma membrane. It participates in endocytosis of some nutrients, and maybe the entry into the cell of some drugs. P-glycoprotein is located in the membrane of cer-ebral capillary endothelial cells. It can efflux drugs relying on ATP. Although there is a certain understanding of the cell in the inner swallow and efflux. But the process of the liposome drug is not clear. To solve the above prob-lems, using colloidal gold liposome nano materials to trace liposome's transport and regulation mechanism in brain microvascular endothelial cells, and study endocytosis, release, distribution and regulation mechanism of nano lipo-somes in brain microvascular. The solution of this problem can guide to construct reasonable drug carrier, and look forward to clarifing the molecular basis and mechanism of nano drug carriers across the BBB. This work has impor-tant theoretical and practical significance for the development and application of liposomes in the future. Results:For untreated cerebral microvascular endothelial cells, the cells incubated with colloidal gold liposomes can uptake of liposome colloidal gold, and with the extension of time, there are gold colloids in the plasma membrane, endo-plasmic reticulum, Golgi apparatus and lysosomes in order, and finally colloidal gold liposome exports out of the cell. For cerebral microvascular endothelial cells treated by sodium azide, compared with untreated cells, the cells incubated with colloidal gold liposomes, cannot be observed liposome colloidal gold in them. For cerebral microvas-cular endothelial cells treated by reserpine, the cells incubated with colloidal gold liposomes, compared with un-treated cells, colloidal gold liposome cannot export out of the cell. Conclusions:The uptake of liposomes in brain microvascular endothelial cells require clathrin's participation. The excretion of liposomes from brain microvascular endothelial cells require P-glycoprotein's participation. After colloidal gold liposome entering brain microvascular endothelial cells, it moves into the endoplasmic reticulum, Golgi apparatus and lysosomes in order. Finally colloi-dal gold liposome exports out of the cell.

安多霖对电磁辐射致大鼠海马区域损伤的防治作用

目的：：电磁辐射污染近年来越来越受到人们的关注。它对人体的多个系统都能造成损害。人体如果长期暴露在不安全范围的辐射剂量下,就会出现头晕头痛、烦躁、食欲不振、学习记忆能力下降等症状。海马是与学习记忆功能密切相关的重要脑区,但同时也是易受电磁辐射攻击的靶部。安多霖胶囊是一种纯中药胶囊剂,为已上市的复方中草药,由一种强抗辐射植物的提取物,配以黄芪、鸡血藤等中药制成,是一种新型的抗电离辐射药物,无毒性不良反应。动物实验表明,它能明显增强机体免疫功能,提高机体的抗应激能力,与现有的肿瘤放、化疗合用能增强放、化疗的治疗效果,减轻放、化疗的毒副反应,提高机体免疫功能。方法：本实验以SD大鼠为实验对象,选择安多霖胶囊混悬液给大鼠灌胃的方式对大功率电磁辐射进行药物防护。观察安多霖对高功率电磁辐射中大鼠海马区血脑屏障保护前后的对比以及检测神经细胞粘附分子( NCAM)和三种蛋白Bcl-2、Bcl-2、c-fos,的表达,来检测辐射后细胞凋亡状况。结果：以Bcl-2为抑凋亡因子,Bax为促凋亡因子, Bcl-2/Bax 的比值变化能调节细胞增殖和凋亡的平衡。 Bc1-2/Bax 比值高,细胞存活率高；比值低,细胞凋亡率高。讨论和结论：通过高功率、大剂量、长时间连续照射,如果镧颗粒突破了血脑屏障,则说明此电磁辐射发射的功率能使大鼠血脑屏障的结构遭到破坏,通透性升高,证实海马区域受损。目前关于电磁辐射的危害已被全社会认知,对神经系统海马区域的损伤机制的研究虽然还处于探索阶段。但科研人员已经逐渐的把取得的成果应用于临床。可喜的是中医中药也加入到对电磁辐射污染的研究当中。本课题正是基于对电磁辐射损伤海马区域机制的研究需要和推广中药抗辐射预防的重要意义。通过切实可行的试验方法对辐射与抗辐射进行深入全面的研究,为海马区域的损伤机制总结精确的基础数据。为临床一线提供具有高效低毒的优质防辐射类中药,造福被电磁辐射污染困扰的人群。

Objective:In order to obtain the data for diet and physical exercise, we analyzed the rules and characteristics of somatotype distribution of college students in Cangzhou by Heath-carter method. Methods:332 college students (172 males and 160 females) of Han nationality aged 19 to 24 were somatotyped by Health-carter anthropometry. Every index was measured 3 times and average values were adopted, and compared to that of other regions. Results:①The mean somatotype for female was 4. 3-3. 6-2. 9. The values of HWR, SAM, BMI and the rate of body fat were 42. 9, 2. 0, 20. 6 and 19. 7%, respectively. The mean somatotype for male was 3. 8-4. 3-3. 3. The values of HWR, SAM, BMI and the rate of body fat were 43. 5, 2. 4, 21. 5 and 17. 7%, respectively. The significant sexual difference was found in somatotype of Han nationality college students (P<0. 01). ②The weight, height, perimeter of the upper arm, calf girth, biepicondylar breadth of the humerus and biepicondylar breadth of the femur of male samples were greater than the female samples, the skinfold of the male samples were thinner than the male samples ( P<0 . 05 ) . ③The somatotypes of Han nationality in Changzhou were closer to the Han nationali-ty in Shandong province, but the gap was larger with Manchu and Mongolian nationality. ④Compared with foreign female college students, except Czechoslovakia and Canada, the somatotypes of Han nationality in Changzhou were similar to other countries. Conclusions:①The characteristics of male showed less body fat, stronger skeletal mus-cles, while that of female showed more body fat. ②Compared with other groups, it showed that somatotypes may be related to innate genetic, geographical climate, lifestyle, eating habits and other factors.

粒细胞集落刺激因子对大鼠脑出血后脑组织NF-κB和 IL-1β表达变化的影响

目的：：观察脑出血( ICH)后粒细胞集落刺激因子( G-CSF)对炎症因子NF-κB和IL-1β表达的影响,探讨G-CSF对ICH后脑组织继发性炎症损伤的保护机制。方法：将健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和G-CSF治疗组(治疗组),每组10只。采用注入自体血方法复制脑出血模型。 Garcia等方法进行神经功能障碍评分；干湿重法检测脑组织含水量；免疫组织化学SP法检测NF-κB和IL-1β蛋白的表达；免疫印迹检测NF-κB和IL-1β蛋白的表达水平。结果：与假手术组比较,大鼠脑出血后神经功能障碍评分降低,NF-κB和IL-1β阳性表达和脑含水量明显增多(P<0.05)；G-CSF干预后NF-κB和IL-1β阳性表达和脑含水量显著下调(P<0.05),与脑神经功能障碍评分上调相一致。结论：粒细胞集落刺激因子可能通过抑制炎症因子NF-κB和IL-1β的表达,减轻脑出血血肿周围组织的炎性反应,改善神经功能损伤,起到神经保护作用。

创伤性骨关节炎的物理康复治疗

骨关节炎( Osteoarthritis,OA)是世界范围内常见的关节疾病,是以关节软骨的变性、及骨质增生为特征的慢性关节病。我们前期的工作已证实关节机械加载可以抑制OA小鼠的MMP-13等相关分子的表达,但是关节加载对OA软骨作用尚不清楚。本实验用C57 BL/6雌性小鼠30只,随机分为假手术组、创伤性模型组、机械加载治疗组。验证关节机械加载可以减轻关节软骨损伤,并促进病变软骨的修复。通过切断前交叉韧带、内侧副韧带及切除内侧半月板,制备右膝关节创伤性骨关节炎的小鼠模型。右侧膝关节机械加载(1N,5Hz,5min/d)2周,取右侧膝关节经脱水、包埋、切片后,特异性组织学染色进行组织形态学观察与分析。采用OARSI评分评估关节软骨的病理过程,以及加载治疗的疗效。番红O染色结果显示：与假手术组相比,创伤性模型组的关节软骨不连续甚至剥落,OARSI评分显著增高(P<0.001),表明创伤性骨关节炎模型构建成功。而关节加载明显减轻软骨的退行性病变程度,显著降低OARSI评分( P<0.001)。 H&E染色结果显示：与创伤性模型组相比,机械加载治疗组钙化软骨与软骨全层比值显著减小(P<0.001),软骨下骨板的厚度显著增加(P<0.001)。番红O染色结果显示：与创伤性模型组相比,经加载治疗后的小鼠关节软骨下骨的骨小梁体积分数显著增加(P<0.001)。另外,TRAP染色结果显示：关节加载能够显著减少OA小鼠中关节软骨下骨中的阳性破骨细胞的数目。本研究表明关节机械加载可以有效减缓骨关节炎病理学进程,促进软骨修复。关节机械加载可以作为创伤性骨关节炎的有效物理康复治疗手段。

大鼠肺缺血再灌注损伤前乳化异氟醚预处理

目的：：探讨乳化异氟醚( emulsified isoflurane, EI)预处理对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法：雄性Wistar大鼠160,体重250-300克,随机分为5组,每组32只,对照组( A组)、假手术组( B组)缺血再灌注模型组(C组)、脂肪乳组(D组),乳化异氟醚预处理组(E组)。对照组不作任何处理；假手术组仅开胸游离左肺门后,不进行阻断左肺门,用0.9%生理盐水(5ml/kg/h)输注30min；缺血再灌注组( I/R组)：开胸游离左肺门后,用0.9%生理盐水(5ml/kg/h)输注30min后,阻断左肺门45min,后松开血管夹形成再灌注；脂肪乳组用30%浓度的脂肪乳(5ml/kg/h)输注30min后,阻断左肺门45min,后松开血管夹形成再灌注；乳化异氟醚组用6.9%乳化异氟醚(5ml/kg/h)静脉注射30min后,阻断左肺门45min,后松开血管夹形成再灌注。观察各组大鼠肺组织病理学,测定肺组织匀浆MPO、TNF-α水平。结果：肺缺血再灌注可导致严重的肺组织的损伤,表现为肺组织有明显的水肿、渗出和炎性细胞浸润。与A、B组相比,C组肺组织各时间点MPO和TNF-α活性增强( P<0.05、P<0.05)。与C组相比,乳化异氟醚预处理组( E组)肺组织的病理表现及损伤程度明显减轻,肺组织各时间点MPO和TNF-α水平降低( P<0.05、P<0.05)。结论：(1)肺缺血再灌注可引起严重的肺损伤；(2)乳化异氟醚预处理对大鼠肺缺血再灌注损伤的具有保护作用。

正常成年大鼠窦房结的解剖学定位、组织学和超微结构观察

目的：：窦房结( SAN)是心脏传导系统的重要组成部分，是哺乳动物心脏正常节律的起搏点、心脏自律活动的发源地，正常的SAN功能是心脏泵功能得以实现的前提条件。不同种属动物的SAN尽管在功能方面非常相似，但在位置、形态、组织结构、细胞数目等方面存在诸多的差异。大鼠是常用的实验动物之一，其SAN体积微小，仅凭肉眼观察难以发现，实验中SAN组织取材存在一定困难。该研究目的是保证SAN光镜和电镜组织取材的准确性，客观观察其组织结构和超微结构。方法：(1)大鼠SAN定位及组织结构观察：采用二级Wistar成年大鼠20只，对右心房及与之相连的近段上腔静脉做水平连续切片，对切片行HE、Masson染色，光镜下观察连续切片，定位SAN并观察组织结构。(2)大鼠SAN超微结构观察：采用二级雄性Wistar成年大鼠10只，依据SAN位置、组织结构特点分两步取材，经树脂定向包埋，半薄切片甲苯胺蓝预染，光镜下定位后，再行超薄切片，透射电镜观察SAN超微结构。结果：(1)正常成年大鼠SAN位置和组织学特点：正常成年大鼠SAN位于上腔静脉与右心耳交界区及其以上的上腔静脉壁内，呈马蹄形/C形；大鼠SAN组织结构疏松，主要含有P细胞、T细胞和少量心房肌细胞，间质胶原纤维含量丰富。(2)正常成年大鼠SAN超微结构特点：甲苯胺蓝预染半薄切片的方法简便迅速，着色效果好，可有效缩短定位时间。电镜观察显示，大鼠SAN内主要含有两种细胞。①P细胞：胞体小，胞浆丰富，细胞器和肌原纤维含量少，几乎不含肌节；②T细胞：胞体较P细胞大，细胞器含量较多，肌原纤维可见明显肌节。结论：成年大鼠SAN取材时一定要保留上腔静脉近心段；大鼠SAN电镜标本要注意取材的位置和包埋的方向，两步法前固定取材有助于大鼠SAN电镜标本的制作；大鼠SAN内细胞的超微结构特点与人及其它哺乳类动物比较一致。

单色光对鸡下丘脑钟基因 Clock表达的影响

生物节律是几乎所有生物体都具有的生命活动,其分子机制受控于主钟内的昼夜节律生物钟。禽类的下丘脑是控制生命活动关键的枢纽,其包含了禽类主钟之一--视交叉上核,同时也承担了控制摄食行为及调节神经-内分泌系统等重要生理活动。而作为生物钟授时因子之一,光照信息对生物钟的调控起着非常重要的作用。目前研究主要集中于光照周期对生物钟活动的影响,而有关光色影响生物节律行为的报道甚少。本研究采购刚出壳的AA肉鸡分别饲养于白光(400-760nm)、红光(660nm)、绿光(540nm)和蓝光(480nm)下,光照制度为LD 12：12,光照强度为15lx,至14天分别于6个时间点 ZT0、ZT4、 ZT8、ZT12、ZT16、ZT20取下丘脑进行钟基因Clock表达的检测。采用RT-PCR,对Clock mRNA水平进行检测结果发现：1)四个光色下Clock mRNA表达趋势较为一致,即表达量白天升高、夜晚下降,且峰值均出现在昼夜交替处。2)不同单色光照射下,于ZT12绿光组Clock基因表达量显著高于白19.93%、红39.72%、蓝15.47%( P=0.000-0.001),红光组表达显著低于其他光组11.15%-25.91%( P=0.000-0.011),白光与蓝光之间差异不显著( P=0.228)。3)用MATLAB软件对不同单色光下6个时间点Clock mRNA的数据进行节律性可见,四种光色下Clock均呈现24h为周期的节律性表达；且绿光下,Clock表达振幅大,略高于白光2.44%,比红光、蓝光各高出41.37%和30.41%；而与白光相比,红、绿、蓝光的峰相位均有提前了,其中蓝光提前了1.4h,峰值较其他光色早出现。此外,利用WB的方法,对CLOCK蛋白水平表达进行检测我们发现：1)与mRNA 表达水平类似,4个光色下CLOCK蛋白表达均呈现昼高夜低的走势。2)不同单色光照射下,于ZT12绿光组表达与白、红、蓝光的表达差异显著,分别高出16.27%-38.95%( P=0.000-0.005),红、蓝光之间的表达差异不显著(P=0.12)。以上结果显示,单色绿光可以显著提高14日龄肉鸡下丘脑中钟基因Clock基因水平和蛋白水平的表达,而单色红光会显著降低Clock mRNA的水平；就节律性而言,单色光处理后Clock基因水平仍保持节律性表达,且绿光下振荡幅度大。

Objective:To analysis through the mouth atlanto-axial vertebral anterior plate fixation in finite element for the development of the segmental anterior fixation surgery and to provide the reference of inner plant im-provement. Methods:One case, male, 36 years old, 64 kg weight was randomly selected from January 2014 to our hospital to check no-skull - atlanto-axial vertebral disease . It was scanned by 0. 625 mm thin layer, Image data were rebuilted in the Mimics 16. 01 software, Pro/ENGINEER 4. 0 software was used to rebuilt atlanto-axial vertebral anterior plate, After reconstruction of steel screw 3 d model according to the classic through the mouth , the model was imported into Mimics 16. 01 and the model surface was meshed and material was assigned, The mod-el was forced 80 N vertical loading, the surface was applied 15 nm torque, to simulat three motion state example, forward bends, stretch, side-bending, The stress and deformation of screw and rod were measured. Results: At-lanto-axial vertebral three-dimensional reconstruction model were divided into 14 514 individual grid, 7 257 nodes, the model was loaded, The stress of upper screw root in bend was biggest (62. 34 ±5. 52) Mpa (F=73. 23, P<0. 05, the difference was statistically significant). A screw of the root and the top, lateral stress was the largest, respectively were (78. 42 ± 5. 5. 14) Mpa (F=112. 32, P<0. 05);(95. 48 ± 7. 12 Mpa (F=62. 32, P<0. 05), the difference was statistical significance; Under three different motion state and a screw root stress, Upper screw root stress in bending forward was greater than the lower (forward bends, stretch and lateral bending state , t value were 12. 2, 9. 23, 22. 98, P<0. 05, differences were statistically significant), and in the lateral current screw root stress was greater than the upper; In the same movement state, the top was greater than the root, the differences were statistically significant (forward bends, stretch and lateral bending state after t value were 23. 14, 22. 01, 8. 13, P<0. 05). Conclusions: Through the mouth atlanto-axial vertebra fixed system stress distribution wad more reasonable, could withstand normal atlanto-axial after vertebral motion bearing stress, but the postoperative patients should reduce the proneness and lateral movement, and to the risk of fatigue fracture fixation system.

骨关节炎治疗中疗效观察指标的相关性分析

骨关节炎( OA)是严重危害人们健康的关节常见病。本课题组的前期研究表明,脉冲式关节机械加载可以抑制MMP-13等因子的表达从而减轻OA的炎症反应,但其对OA的疗效和保护机制尚不清楚。因此,我们提出脉冲式关节机械加载能否通过抑制异常的骨吸收,纠正异常骨重建、促进软骨的修复,从而治疗OA。本实验用C57 BL/6雌性小鼠30只,随机分为3组,假手术组、创伤性OA组、机械加载治疗组( n=10)。手术构建创伤性骨关节炎小鼠模型,以1N,5Hz的条件进行脉冲性关节机械加载,每天加载5min,共治疗2周。利用番红O、H&E及TRAP等染色分析骨的结构参数,评估OARSI评分与这些参数的相关性。结果显示：与假手术组相比,OA组OARSI评分显著增高(P<0.001),关节加载治疗组OARSI评分显著降低。经关节加载治疗后,OA小鼠钙化软骨与全层软骨比值显著减小,软骨下骨板的厚度显著增加,关节软骨下骨的骨小梁体积分数显著增加和阳性破骨细胞数目显著减少(均P<0.001)。相关性分析表明：软骨下骨板的厚度与OARSI评分成负相关(r=-0.818,P<0.001),软骨下骨的骨小梁体积分数与OARSI评分成负相关(r=-0.871,P<0.001),软骨下骨的破骨细胞活性与OARSI评分成正相关(r=0.901,P<0.001),软骨下骨的破骨细胞活性与骨小梁体积分数成负相关(r=-0.868,P<0.001)。本实验提示OA中病变部位破骨细胞异常活跃、骨吸收显著增强。而关节机械加载一方面可以抑制破骨细胞活性,减少骨吸收,纠正异常骨重建；另一方面促进病变关节软骨的修复来实现对骨关节炎的疗效。另外,在众多骨结构参数中,骨吸收与OA病变程度的关系为密切。本研究对骨关节炎治疗疗效观察的判断有重要的临床价值。

脉冲式机械加载通过调节骨髓干细胞分化和降低炎性反应治疗颈椎病

颈椎病一种以退行性病理改变为基础的疾病。表现为颈椎椎间盘组织退行性改变及其继发病理,改变累及周围组织结构(神经根、脊髓、椎动脉、交感神经及脊髓前中央动脉等),并出现相应的影像学改变。在世界卫生组织( WHO)公布的《全球十大顽症》中,颈椎病排序第二,仅次于心脑血管疾病。在全球60多亿人口中,颈椎的患病人群高达9亿。目前我国报道该病的发病率为17.3%,全国有2亿多患者,其中80%颈椎病为轻型,虽有反复发作之苦,但愈后良好。15%留有后遗症,5%左右形成终身瘫痪,少数患者可猝死。脊髓型颈椎病是退行性颈椎病中较为常见的一种,其治疗可分为非手术治疗和手术治疗。非手术治疗包括休息制动、针灸推拿、牵引和药物(中药、西药)治疗等,仅仅起到缓解症状和改善功能的作用。手术治疗主要包括颈前路减压手术、颈后路减压手术及人工颈椎间盘置换术,但手术的难度大,危险性高,远期疗效也不能令人满意。所以临床迫切需要有更好的脊髓型颈椎病疗法。机械应力在骨的生长重建过程中起着重要的作用。骨组织在外力作用下产生的应力,可通过多种信号途径调节成骨细胞和破骨细胞的分化,实现骨组织的代谢平衡。文献报道机械加载可以通过调节骨代谢,促进骨重建,治疗相关疾病。但运用机械加载纠正异常颈椎骨重建治疗脊髓型颈椎病,国内外尚无相应研究。我们原创性的脉冲式机械刺激是以一定刺激频率进行的机械刺激,可以加速骨损伤愈合,促进骨生长,减轻骨关节炎的炎性反应。因此,我们拟使用脉冲性机械加载仪对颈椎病模型动物进行治疗,采用组织学观察颈椎修复情况,验证机械加载能否通过调节骨髓来源的干细胞,促进成骨细胞的分化并抑制破骨细胞发育,纠正异常颈椎骨重建,减缓炎症反应来治疗脊髓型颈椎病,并探究治疗过程中的骨重建分子机制。

高频电磁辐射对大鼠血脑屏障的影响及参力胶囊防护作用

目的：：由于高频辐射技术的大量应用,从业人员逐渐增多,高频辐射对人体健康的影响正成为一个刻不容缓亟待解决的问题。据大量文献报道,高频辐射可使生物体多个系统及器官受损,海马组织更是非常敏感。参力胶囊有提高机体免疫力的功效。它对高频辐射导致睾丸等其他组织器官的损伤具有明显的防治作用。参力胶囊,主要成份为黄芪%人参%灵芝孢子粉,有增强免疫力,抗辐射的功用,是一种无毒副作用的纯中药制剂。有研究表明,参力胶囊对辐射损伤造成的造血功能障碍有修复作用,并对辐照中的胸腺和脾脏有一定的保护作用。血脑屏障是介于血液和脑组织之间,对物质通过有选择性阻挡作用的动态界面。其发挥功能的结构基础是脑毛细血管内皮细胞及其间的紧密连接。方法：选用成年,雄性SD大鼠40只,随机分为对照组、非防护辐照组、高剂量药物防护组、低剂量药物防护组,每组10只。选用高功率、大剂量、长时间连续的辐照源对实验动物进行定位辐照。采用以硝酸镧为通透性示踪剂,在透视电镜下观察海马区血脑屏障通透性及超微结构。结果：镧颗粒平均直径为0.4 x10-9 m,通常情况下,它不能通过细胞间的紧密连接,无法通过细胞膜上平均直径仅1.8x10-11m的小孔。仅滞留于毛细血管腔内,不能透过血脑屏障。但本课题采用的是高功率、大剂量、长时间连续照射,如果镧颗粒突破了血脑屏障,则说明此电磁辐射发射的功率能使大鼠血脑屏障的结构遭到破坏,通透性升高,从而证实海马区域受损,导致大鼠行为学发生改变。结论：通过探索高频辐射对生物体的损伤效应及防护方法,来总结高频辐射对人体的损伤及如何预防,摸索总结出一套适合我国高频辐射工作场所防护的有效方案,完善我国在该领域的研究,真正解决高频辐射工作场所工作人员为关心的问题,减少高频辐射对他们身体的伤害,提高他们的工作实力及效率。

硫酸锌对大鼠腹主动脉瘤的影响

目的：：建立大鼠腹主动脉瘤模型，用硫酸锌治疗，通过观察管径、管壁、弹力板的变化情况探讨硫酸锌对腹主动脉瘤的影响。方法：取15只成年雄性健康Wistar大鼠，分为对照组、手术组、治疗组，每组各5只。对手术组和治疗组的10只大鼠用灌注猪胰蛋白酶的方法建立大鼠腹主动脉瘤模型，造模完成一天后对治疗组注射硫酸锌。分别对3组的大鼠在手术4周后切取腹主动脉。进行HE染色观察腹主动脉管径的变化、地衣红染色观察弹力板的形态变化、免疫组织化学染色观察白细胞、巨噬细胞、B细胞的表达情况。结果：(一) HE染色后，手术组与对照组大鼠相比较，腹主动脉管径增大、形状变得不规则、管壁变薄，注射硫酸锌的治疗组腹主动脉外观有所恢复，与对照组相似。(二)地衣红染色后，可以观察到手术组中腹主动脉中弹力蛋白和胶原纤维变性，出现断裂，经过硫酸锌的治疗后，弹力板恢复正常状态。(三)免疫组织化学染色后，可以看到手术组大鼠炎症细胞浸润明显，治疗组炎症细胞浸润减少。结论：成功制备了Wistar大鼠腹主动脉瘤模型；Wistar大鼠腹主动脉壁扩张、炎性细胞浸润、弹力板减少；硫酸锌具有逆转大鼠腹主动脉瘤的作用和对血管壁的保护作用。

机械加载在骨质疏松小鼠治疗中的应用研究

骨质疏松是绝经后妇女的一种严重疾病,并容易导致骨折。前期工作表明,脉冲性机械加载可以促进小鼠骨生长和骨损伤愈合。然而,我们的原创性脉冲性脊柱机械加载对小鼠骨质疏松的改善作用尚需探索。使用绝经后骨质疏松动物模型卵巢切除( OVX)小鼠,我们验证假设：脊柱机械加载通过促进成骨细胞的分化和抑制破骨细胞的发育治疗骨质疏松。 C57BL/6雌性小鼠(14周龄)随机分为3组：假手术组,OVX对照组和脊柱机械加载组(n=10)。小鼠施行卵巢切除去势手术,术后1周进行腰椎机械加载(1N,10Hz,5min/d,5d/week)2周。实验前后分别测量全身骨密度。应用HE和TRAP染色进行股骨的组织形态学分析。收集实验动物的骨髓来源细胞观测破骨细胞发育和成骨细胞分化。结果显示,与假手术组相比,OVX组小鼠体重增加,子宫重量减少,骨密度显著下降,骨小梁体积分数(BV/TV)显著减少(均P<0.001)。与OVX小鼠相比,脊柱机械加载显著改善骨密度的降低( BMD P<0.05；BMC P<0.01),增加骨容量( BV/TV；P<0.001)。 TRAP组织学染色显示OVX组多核破骨细胞形成明显增加,加载后明显抑制活跃的破骨细胞数目。骨髓来源细胞培养显示,加载显著促进间充质干细胞向成骨细胞分化(P<0.001)。此外,脊柱加载显著降低破骨细胞形成、并抑制其迁移和粘附(均P<0.001)。本研究表明,脊柱加载通过促进成骨细胞的分化,同时抑制破骨细胞的发育,改善OVX导致的骨丢失。 BMD、BMC和BV/TV的降低证实卵巢去势导致小鼠骨量减少；TRAP组织学染色显示OVX卵巢去势通过激活破骨细胞导致骨吸收增强。机械加载通过抑制破骨细胞的发育纠正骨质疏松小鼠的骨量丢失,同时刺激成骨细胞的分化促进骨重建。脊柱机械加载为绝经后妇女骨质疏松提供了新的治疗手段。

急性 Aβ处理诱导原代培养大鼠海马颗粒神经元NMDA受体亚单位的选择性改变

可溶性Aβ寡聚体被认为是引起AD早期阶段突触功能失常的主要因素。不同的NMDA受体亚单位均与Aβ诱导的突触毒性有密切关系。在目前的研究中,我们发现Aβ选择性的诱导了NR2 B亚单位蛋白水平的下降,但是NR1,NR2A及SAP102的蛋白表达并没有显著改变。这些结果提示NR2B在Aβ急性处理后导致的早期突触毒性作用中变化更引人关注。而且,我们还惊奇的发现, Aβ诱导了突触内NR2 A和SAP102的puncta密度明显减少,这进一步提示Aβ急性处理后突触内外NMDA受体亚单位发生了复杂的改变。我们的研究结果表明在AD早期阶段,Aβ对于不同的NMDA受体亚单位及突触相关蛋白的产生了极其复杂的效应。这也在某种程度上解释了为什么临床上难于寻找适合的与AD早期NMDA受体功能异常相关的阻止突触功能失常和突触缺失的药物。

人三叉神经穿颅底段的应用解剖学研究

目的：：揭示人三叉神经穿颅段及其周围结构的放射解剖学,为临床诊断和治疗三叉神经痛提供形态学及影像学依据。方法：26具完整成人尸头(10具女性,16具男性,年龄45-81岁,平均63.8岁),分别行显微解剖(8具)、微计算机断层扫描( micro-computed tomography,Micro-CT)(2具)和薄层塑化(16具),观察到的结果与临床无三叉神经疾患人群骨窗位CT图像(32例)、B-FFE序列MRI图像(3例)进行对比研究。结果：研究发现：1.三叉神经眼支与Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ对脑神经及眼上静脉被硬脑膜及蛛网膜包绕共同穿越眶上裂,在此形成一个生理性狭窄。 CT及MRI结合应用,可以满足该部位的诊断需求。2.圆孔是一个内侧壁中部带有骨嵴的弯曲管道,其突出的骨嵴造成管腔的狭窄,容易压迫到三叉神经上颌支。 CT在该部位的应用较MRI有优势。3.三叉神经下颌支穿出卵圆孔处,有大量的静脉丛伴行,容易造成血管性压迫,MRI在该部位的应用较CT有优势。结论：三叉神经的3个分支在穿颅底段时,都存在机械性的压迫可能,这可能是三叉神经痛发生的原因之一。 CT和MRI在上述三处部位的联合应用,可以满足临床上诊断的需求。

Objective:To observe the regulatory effects of TROY on neural myelination in central nervous system ( CNS ) and remyelination in response to spinal cord injury ( SCI ) by oligodendrocyte precursor cell ( OPC) . Results:TROY expression was detected by RT-PCR and Western blotting in OPCs as well as in differen-tiated premature and mature oligodendrocytes of postnatal mice. Pharmacological inhibition or RNAi-induced knockdown of TROY promotes OPC differentiation, whereas overexpression of TROY dampens oligodendrocyte mat-uration. Furthermore, treatment of co-cultures of DRG neurons and OPCs with TROY inhibitors promotes myelina-tion and myelin sheath-like structures. Mechanically, protein kinase C ( PKC) signaling is involved in the regula-tion of the inhibitory effects of TROY. Moreover, in situ transplantation of OPCs with TROY knockdown leads to notably enhanced remyelination as well as augmented recovery of motor function and nervous conduction in rats with SCI. Conclusions:Our results indicate that TROY negatively modulates remyelination in the CNS, and thus may be a suitable target for improving the therapeutic efficacy of cell transplantation for CNS injury.

星形胶质细胞对 caspase介导 Aβ早期突触毒性作用的影响

目的：：近年的研究证实阿尔茨海默病( AD)患者早期,突触功能的衰退是认知功能损害的主要原因。目前认为毒性形式的Aβ的积聚是AD神经细胞活性改变主要因素。 Aβ的神经突触毒性作用具有caspase依赖性,但其中确切机制尚不明确。星形胶质细胞具有参与突触的可塑性调控、为神经元提供营养物质等多种作用。本课题组前期工作结果表明,星形胶质细胞参与调控Aβ诱导的海马神经元凋亡,本研究进一步阐明AS是否对caspase通路介导的Aβ早期神经突触毒性有影响及其可能的机制。方法：(1)以原代培养大鼠海马NE-S(纯神经元培养体系)及MIX-S(混合培养体系)为研究对象,各体系分为6组：对照组、caspase-8抑制剂组、caspase-9抑制剂组、Aβ处理组、caspase-8抑制剂预处理加Aβ组和caspase-9抑制剂预处理加Aβ组。用免疫荧光和Western blot检测各组大鼠海马PSD95和caspase-8表达量的变化。(2)以原代培养大鼠海马Co-culture-S (共培养体系)为研究对象,分为对照组、caspase-8抑制剂组、caspase-9抑制剂组、Aβ处理组、caspase-8抑制剂预处理加Aβ组和caspase-9抑制剂预处理加Aβ组。用免疫荧光方法检测各组PSD95的表达量变化。(3)以原代培养大鼠海马NE-S、MIX-S以及AS-S(纯星形胶质细胞体系)为研究对象,各体系分为两组：对照组和Aβ处理组。用蛋白芯片检测收集的培养液中相关因子分泌的含量。结果：(1)在NE-S与MIX-S中,与对照组相比,caspase-8抑制剂组、caspase-9抑制剂组PSD95的表达量均无显著差异,Aβ处理组PSD95的表达量均显著降低。(2)在NE-S中,与Aβ处理组相比,caspase-9抑制剂预处理加Aβ组PSD95的表达量显著回升至对照组水平,caspase-8抑制剂预处理加Aβ组则无显著改变；而在MIX-S与共培养中caspase-8/9抑制剂的作用则相反,与Aβ处理组相比,caspase-9抑制剂预处理加Aβ组PSD95和caspase的表达量无显著改变,caspase-8抑制剂预处理加Aβ组PSD95则显著回升至对照组水平,且caspase-8显著降至对照组水平。(3)MIX-S与NE-S两培养系统间的实验组相比较,各自对照组间以及Aβ处理组间PSD95的表达量均无显著差异,而caspase-8抑制剂预处理加Aβ组间以及caspase-9抑制剂预处理加Aβ组组间PSD95的表达量有显著差异。(4) Co-culture-S与MIX-S结果一致(5) TNF-α和IL-6的表达水平,MIX-S较AS-S和NE-S均有显著升高；IL-1β和FasL的表达水平,NE-S组较MIX-S和AS-S组有显著升高。结论：星形胶质细胞对caspase介导的Aβ引起的早期突触毒性作用有一定影响,星形胶质细胞-神经元之间的信号转导参与了其中主要的作用。 Aβ毒性诱导下,单纯的神经元可分泌炎性因子FasL和IL-1β,星形胶质细胞可以阻止其分泌,并可能参与分泌IL-6和TNF-α。

Aβ诱导大鼠海马磷酸化 NMDA受体亚单位突触内表达的改变

Aβ的突触毒性具有NMDA受体依赖性， NMDA受体的转录后磷酸化修饰是一个可逆的调节蛋白活性、定位及蛋白与蛋白间的相互作用过程。基于以前的研究结果，我们进一步探讨了Aβ诱导的大鼠海马磷酸化NMDA受体亚单位在突触内表达的改变。本研究发现在Aβ作用早期阶段，可以诱导大鼠海马pTyr1472-NR2 B及Fyn表达的减少，但是pTyr1325-NR2 A及Src的蛋白表达没有明显改变。这些结果提示大鼠海马pTyr1472-NR2 B在Aβ毒性作用早期变化更显著。而且，我们进一步还发现， Aβ可引起大鼠海马突触内pTyr1472-NR2 B和突触外pTyr1325-NR2 A的puncta密度减少，提示在Aβ毒性作用早期，突触内外位点发生了复杂的改变。本研究探索了阿尔茨海默病( AD)大鼠发生的早期突触变化的细胞和分子机制，将有助于临床AD大鼠的预防和早期治疗。

Objective:To observe the morphological index related to the tabular and fibular in adults and to provide anatomy references to the fracture fixation and autologous bone graft. Methods: The tibia and fibula of 52 adults (52 left sides and 48 right side) were measured morphologically. Results: The length of the tibia was (35. 7±1. 77)cm, the distance from the nutrient foremen to the point of interiorankle was (23. 8±1. 46)cm, the length width and depth of fibula notch were (2. 6±0. 59)cm, (2. 7±0. 63)cm and (0. 6±0. 22)cm respectively, the area of interior ankle articular surface in trbia was (2. 5±1. 56)cm2 and the area of lower articular surface was (8. 6±1. 02)cm2. The length of the fibula was (35. 2±1. 72) cm, the distance from the nutrient foremen to exteri-or ankle point was(19. 3±2. 04)cm, the length width and depth of lateral malleolus sulcus were (2. 6±0. 59)cm, (2. 7±0. 63)cm and (0. 6±0. 22)cm respectively, the area of head of fibula articular surface was(1. 4±0. 51)cm2 and the area of ankle articular surface was (3. 7±0. 41)cm2. The difference in height between medial malleolus and lateral malleolus was(1. 88±0. 42)cm. Conclusions:Morphology of the trbia and fibula should be taken into consideration when selecting fixation method and set, grafting autologous bone and rebuilding the bone and joint.

Objective:To investigate somatotype feature of soldier in mobile troops and to store up data in figure databank of China armed forces. Methods:The somatotype of 418 men soldier in mobile troops was evalua-ted with Heath-Carter method. Results:①The somatotype mean of soldier in mobile troops was 2. 4(0. 7)-4. 9 (2. 9) -2. 5(0. 9),SAM was 1. 6(0. 6). The somatotype type was balanced middle embryonic type, and 81. 3﹪was middle embryonic type in somatotype type. ②Compared to somatotype mean of students in common institution of higher learning, somatotype type [3. 8(1. 6) - 4. 3(1. 9) - 3. 5(2. 2)], factor Ⅱ was higher, and factor Ⅰand factorⅢwere lower. Compared to control group, somatotype type of soldier in mobile troops was higher for 45. 3﹪. ③Compared to soldier Belgian and Turkey, distance of somatotype point was near, and compared to soldier of Western--style dessert military academy in American and Royal military affairs college in England factorⅢwere lower. Conclusions:The somatotype characteristic of men soldier in mobile troops is skeletal muscle to become de-veloped, body to become muscular, somatotype type to concentrate main middle embryonic type.

Objective: To explore the relationship between the arch type and physical form, physical fit-ness, body fat and somatotype. Methods:Measure and type the arch of 382 male soldier in a certain army by foot-print ratio method; Routinely detect the results of height and weight, body fat, 100 and 5 000 meters running, standing jump;According to the international heath-carter method, ten indexes were measured and the somatotype were evaluated. Results:①382 samples, flatfoot 91, accounted for 23. 6%, the foot arch index 0. 60 + 0. 21;non-flatfoot 291 , 76 . 2%, arch index 1 . 14 +0 . 22 , t=22 . 83 , P=0 . 001;②Comparing the mean of the results of height, weight, BMI, body fat percentage,100 and 5 000 meters running, standing jump of the two groups( flatfoot and non-flatfoot) samples, t-text, P>0. 05; ③Assessed by the method of heath-carter shape, flatfoot group so-matotype mean is 2. 7 (0. 7) -4. 8 (1. 3) -2. 7 (0. 9), sam is 1. 5 (0. 9);non flatfoot group somatotype mean is 2. 3 (0. 7) -5. 0 (3. 1) -2. 4 (0. 9), sam is 1. 6 (1. 0);The distance of two groups`points in 3D space mean somatotypes is 0. 54; t-test of the two groups`somatotype mean, P>0. 05. Conclusions: Compared the flatfoot group with the control group, there is no significant difference in physical form, physical fitness, body fat and so-matotype. The increasingly high rate of flatfoot in healthy people is physical, but not flatfoot disease, and no need for surgery.

侧脑室微量注射 GnIH对大鼠下丘脑 NPY表达的影响

目的：：探讨侧脑室注射促性腺激素抑制激素( gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)对大鼠下丘脑神经肽Y( neuropeptide Y,NPY)表达的影响。方法：建立摘除卵巢并注射雌激素( OEP)的大鼠模型。大鼠随机分为GnIH组和生理盐水对照组,于侧脑室注射后2 h取脑组织。免疫组织化学检测下丘脑NPY的核团位置及NPY阳性细胞在核团中含量的变化。 Western blot检测大鼠下丘脑NPY蛋白表达的变化。结果：与侧脑室注射生理盐水组相比,GnIH组大鼠下丘脑组织中NPY的表达水平显著增加。结论：GnIH对大鼠下丘脑NPY神经元发挥正向调节作用。

Objective:The aim of this study was to develop the dynamic aids to help students to combine human morphology and function during study, and to understand and memorize important and difficult contents u-sing physiological function of analog organs and system. Methods:The design of the aids was based on our innova-tion. The linear movement is derived from the number of lines, the thickness of a line, distance and angle between lines. Therefore, according to the effect of line stripes, the stripes were divided into two types: ( 1 ) the parallel straight lines which meet the following criteria - 12 stripes per cm, the equal thickness of the stripes, the equal distance between adjacent stripes and printable on a transparent film;(2)the straight line and curved stripes which meet the following criteria -an equal or unequal linear fringe space between the stripes, the curve stripes being drawn by a mathematical equation, and being digitalized and stored in a computer. Results:(1) Demonstrating a dynamic effect:The parallel straight stripes with a 12 percentimeter space between the stripes were printed on a transparent film. The film was termed"the moving film" as its effect was displayed while moving the film. Another static film was made. The static film shown different directions. After the moving film was overlaid on the static film, slowly moving the film produced a wave-like spread. (2)Producing a dynamic film:The quality of a dynamic film was determined by the quality of the "static film". The first was to design and draw the drawings, and leave space for generating dynamic sense to prepare the paste, with the detection of dynamic effects until satisfaction. It appeared impossible to draw the difficult curvilinear motion in fringes by hands. We input mathematical equations into the computer and connected the automatic plotter to draw. A variety of drawn"static diagram fringe pattern as the library was stored in a computer to access at any time. Conclusions:Making anatomical dynamic film using the principle of linear motion is an innovative technology and provides the dynamic aid for anat omy teaching.

Objective:To study Zn influence on NO synthase in rats’ sea-horse after different-time rest after sleep deprivation. Methods:Build SD model of rat by mini-platform-water-environment, indicate the exist-ence of positive structure of NOS by NADH-d, and count all the positive neurons. Results: Compared with CC group, R0h group, R4h group rise significantly(P<0. 01),R12h group decreases significantly(P<0. 01), the rest don’t differ significantly. R0h+Zn group and R4h+Zn group decrease significantly compared with R0h group and R4h group respectively(P<0. 01), R8h+Zn group doesn’t differ from R8h group, R12h+Zn group rises signifi-cantly compared with R12h group(P<0. 01). Conclusions: Zn resists change of activities of NOS after SD, pro-motes recovery of memory.

慢性头痛和头后小直肌之间的关系

肌硬模桥在1995年被提出之后，一直受到了广泛的关注。这是一个位于头后小直肌和硬脊膜之间的致密结缔组织，这种形成认为可以防止硬脊膜的随意运动。随着研究的不断深入，已有研究认为肌硬模桥和慢性颈源性头痛有关。当头后小直肌发生病理变化，会产生一种反常的力，这种力通过肌硬模桥传递到对疼痛敏感的硬脊膜，从而导致颈源性头痛。还有一些研究者认为，肌硬模桥会改变蛛网膜下腔的压力，影响脑脊140
　　液的循环，进而产生头痛。有相关病例报告指出，当对一位长期忍受慢性颈源性头痛患者的肌硬模桥进行阻断之后，头痛得到明显缓解。除此之外，通过MRI检查发现，患者的头后小直肌出现明显肥大。本实验通过MRI的收集和Mimics软件的测量来观察正常组和头痛组之间30°的头后小直肌是否出现形态学改变进行的研究讨论。通过对147例正常组和慢性头痛组的测量数据进行分析之后发现，头痛患者的头后小直肌明显肥大( P value=0.000)。并且在同组不同性别及数值取值范围都有明显差异性。在本研究中，提出了头后小直肌和慢性头痛之间关系的新解释。我们相信，肥大的肌肉能导致慢性头痛。如果假设成立，我们可以对慢性头痛的发病机制提出一个新的观点。此外，有必要建立一个正常的头后小直肌测量值范围，以此来了解健康人群头后小直肌的特性，鉴别头痛的高风险因素，并对未来临床治疗提供合理的建议。

Mg-Mn-Zn合金介导成骨作用研究

目的：：建立Mg-Mn-Zn合金介导的成骨作用模型，为进一步研究体内成骨机制奠定基础。方法：一月龄雄性SD大鼠12只，麻醉后股骨干穿通性钻孔造成骨创伤，植入Mg-Mn-Zn合金介导棒，同时注入庆大霉素预防感染，每周皮下注射钙黄绿素。术后5、9、18、26周分别随机处死3只大鼠，取出植入有介导金属棒的股骨，各组材料经体视显微镜、光镜、扫描电镜、倒置荧光显微镜观察并行能量色散谱元素分析，岛津EPMA1610电子探针显微分析仪测试样品内镁、钙、磷元素分布。结果：体视镜及光镜观察见5、9、18、26周髓腔中金属移植物周围包裹有新生骨，倒置荧光显微镜观察见移植物周围有新骨生成。能量色散谱元素分析表明含有碳、氧元素的基底膜层在金属移植物周围形成。电子探针显微分析表明介导金属棒周围与成骨作用有关的钙、磷元素丰富。结论：成功的制作了Mg-Mn-Zn合金介导的体内成骨作用模型。结论：Mg-Mn-Zn合金能够很好的介导体内成骨。

沧州社区汉族成人 Heath-Carter法体型研究

目的：：探讨沧州社区汉族成人的体型特征。方法：采用Heath-Carter人体测量法对沧州社区汉族成人20-91岁总计867人(男516人,女351人)进行了体型评定。结果：沧州社区汉族成人男性的平均体型值为4.70-5.55-2.41,属于偏内胚层的中胚层型,各年龄组中以偏内胚层型的中胚层型为主。沧州社区汉族成人男性20-岁,30-岁和40-岁的内因子值逐渐上升,而50-岁组以后的内因子值下降；中因子值20-,30-组逐渐上升,40-岁以后下降；外因子值20-,30-和40-岁组变化不大,50-组外因子值升高。社区女性平均体型值为6.32-5.43-1.63,属偏中胚层的内胚层型,以偏中胚层型的内胚层型、内胚层-中胚层均衡型及偏外胚层的内胚层型为主。女性20-,30-和40-岁组的内因子值逐渐上升,50-岁以后下降；女性中因子值和外因子值各年龄组变化不明显。结论：沧州社区汉族成人男女间体型比较有显著性差异。随着年龄的增长,男、女性中因子值上升,外因子值下降。与国内其他族群比较,沧州社区汉族成人体型,山东城市汉族体型、山西城市汉族、内蒙古汉族、大连市汉族比较接近,具有我国北方族群体型的共同特征。

大鼠初级感觉神经元内 Nogo-A在炎症痛的痛觉敏化过程中对于 TRPV1通道功能的调控研究

目的：众所周知背根神经节DRG中辣椒素受体TRPV1在炎症痛中的表达快速而显著地升高,并介导了炎症痛的痛觉敏化过程。然而对于此过程中的TRPV1受体功能是如何调控的知之甚少。方法：采用免疫组织化学染色和Western Blot的实验方法证实,正常大鼠的DRG神经元中高浓度表达有Nogo-A蛋白。该蛋白在CFA诱导的大鼠炎症痛模型中与TRPV1受体同时期显著增加。结果：行为学的实验表明,大鼠蛛网膜下腔注射Nogo-A的拮抗剂NEP1-40,可以明显缓解大鼠CFA同侧的缩足潜伏期,缓解痛觉敏化。Western blot 的实验结果显示大鼠蛛网膜下腔注射NEP1-40可以显著下调TRPV1的表达水平。另外,对于急性分离培养的DRG神经元进行钙成像的实验研究发现,给予NEP1-40处理后减弱Nogo-A的作用可以造成DRG神经元对于辣椒素的反应性显著性下降。结论：Nogo-A蛋白的作用对于TRPV1在痛觉敏化过程中的作用是不可或缺的。 Nogo-A蛋白在炎症痛的过程中,通过调控TRPV1的蛋白上调过程以及其通道功能参与了痛觉敏化的过程,其具体机制尚需要进一步研究。

Objective:To measure C3-C5 anterior fixed parametersment for the segmental anterior fixation surgery. Methods:The examination of the cervical spine in patients with CT imaging data were randomly selected from January 2009 - December 2012 , C4 - C6 cervical no lesions in 35 cases of imaging data were selected (20 males and 5 females , 25 to 50 years old, average 41. 2 years) ,The image data were rebuilded and measured di-ameter by Mimics 16. 01 software, vertebral body height, vertebrae transverse process hole diameter and diameter around, the left and right sides of the horizontal distance between the flange hole inside, left and right sides of the axis of the pedicle and sagittal axis and the horizontal axis angle and length were measured. Results and conclu-sion:the vertebral body diameter of C4-C6, (26. 67±0. 25) mm gradually increased to (32. 89±0. 12) mm, an-terior and posterior diameter of C4 -C6 ,(6. 89±0. 12) mm gradually increased to (8. 85±0. 44) mm, comparing differences between different segments were statistical significance;Vertebral body midline sagittal anterior, middle and posterior height from C4 [anterior was (7. 99 ±0. 51) mm, middle was(7. 09±0. 42) mm, posterior was (7. 76±0. 49) mm]. To C6 [anterior was (9. 89±0. 45 mm, middle was (8. 42±0. 75) mm, posterior was (8. 84±0. 26) mm], vertebral bodies were significant difference (P<0. 05); the vertebrae transverse process hole diameter and diameter around anterior and posterior were gradually increased with the increase of the sequence; on both sides of C4~C6 were by transverse process hole inside edge distance ( 25 . 10 ± 0 . 45 ) mm gradually increased to (28. 89±0. 56) mm, comparing differences between different segments were statistical significance;Pedicle axis , the sagittal axis and horizontal axis angle and length were gradually increasing with the increase of the cervical spine ordinal, difference is statistically significant.

过表达线粒体铁蛋白对鱼藤酮致果蝇帕金森模型的保护作用

目的：：帕金森病( Parkinson's disease,PD)是一种多发生于中年以上患者黑质纹状体通路的神经退行性疾病,以黑质多巴胺能神经元变性缺失和路易小体形成为病理特征,一些神经毒剂如鱼藤酮( Rote-none)和6-羟多巴胺(6-OHDA)等可以在一些实验模型中模拟这一病理过程。大量资料显示,PD患者脑组织铁含量显著增高。线粒体铁蛋白( mitochondrial ferritin,FtMt)是一种定位于线粒体的蛋白质,具有亚铁氧化酶活性,可将有毒性的二价铁氧化而降低氧化损伤,此外FtMt还可以储存过量的铁。已有研究结果表明,过表达FtMt在6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的细胞PD模型中具有保护作用。而本实验的目的在于探究Ft-Mt对鱼藤酮诱导的果蝇帕金森模型是否具有保护作用。方法：将过表达线粒体铁蛋白果蝇( Fer3 HCH Over Expression,Fer3HCH OE)和野生型(W1118)果蝇成虫进行自身对照和两两对照。挑取羽化12 h以内的雄性和雌性成虫,随机分组,分别饲养于普通玉米培养基和添加了500 mMol/L鱼藤酮的培养基中,连续饲养30 d,每天统计死亡率；每3 d进行一次抗重力攀爬实验( Climbing assey)测定。结果：培养在500mMol/L鱼藤酮培养基中的两种果蝇攀爬能力都有所下降,且均在第6天开始出现明显下降。而线粒体铁蛋白过表达果蝇,攀爬能力受到鱼藤酮影响不能在18 s内爬上6 cm的果蝇所占的百分比小于野生型果蝇,且具有较低的死亡率。取连续饲喂鱼藤酮第14 d 的果蝇,提取头部蛋白,进行 Western blot 检测酪氨酸羟化酶( tyrosine hydroxylase,TH)水平,可以看出,不论是雄性还是雌性,线粒体铁蛋白过表达的果蝇TH的含量都高于野生型果蝇,即表明其体内多巴胺能神经元活性受到鱼藤酮损伤较小。结论：过表达的线粒体铁蛋白有可能对鱼藤酮致黑腹果蝇的PD模型具有一定的保护作用。其机制可能是通过调节细胞内铁的平衡,抑制 Fenton反应,从而减少活性氧的生成,抑制凋亡信号通路上促凋亡蛋白的表达,从而起到对细胞的保护作用。

肌硬膜桥是哺乳动物中普遍存在的正常解剖结构

枕下区是人体解剖结构复杂的区域之一。近年来的研究发现枕下区深层肌肉及韧带和硬脊膜之间存在纤维连接，此纤维连接被称为肌硬膜桥。但以上发现均基于人体研究，肌硬膜桥是人类特有的解剖结构，还是哺乳动物普遍存在的解剖结构，目前尚未见报道。本研究采用鲸目的江豚，食肉目的狗，灵长目的猕猴和山魈，这3种哺乳纲不同目的动物作为研究对象，分别进行大体解剖和头颈部P45塑化断层切片的制作。观察结果显示3种纲目哺乳动物项部浅、深层肌肉有差别。江豚项部浅层存在原颈括约肌。狗项部浅层，斜方肌前存在臂头肌。狗，猕猴和山魈斜方肌下存在头菱形肌。尽管它们的项部浅、深层肌肉存在差别，但却都具有一个共同的结构。即项部深层肌肉和硬脊膜的纤维连接。此结构与人类肌硬膜桥结构类似。我们推测肌硬膜桥应该是普遍存在于哺乳动物的正常解剖结构。其存在应具有一定的生理功能，对于其功能的研究还需进一步展开。本研究从形态学上明确了肌硬膜桥在哺乳动物中的普遍存在，揭示了肌硬膜桥在哺乳纲三个目动物中的异同点，为进一步的肌硬膜桥的功能研究奠定了坚实的形态学基础，并为脊椎动物演化的规律提供了新的比较解剖学证据。

暹罗鳄的枕后肌和硬脊膜间的连接

1995年Hack 等人首次提出肌硬膜桥的概念，此结构是位于枕下区深层肌和硬脊膜之间相连接的结缔组织桥。目前关于肌硬膜桥的形态学和功能学研究已成为热点，并有研究提出肌硬膜桥与慢性颈源性头痛有关，表明肌硬膜桥可能具有重要临床意义。作为重要结构，肌硬膜桥是否具有高度保守性，尚未见报道。本文以暹罗鳄为代表，对爬行类动物的枕下区解剖结构进行了观察，发现暹罗鳄的前寰椎浅面覆盖3块肌，内侧近中线位置为头背小直肌，其外侧为头背大直肌，外侧为头半棘肌。这3块肌深面有致密的结缔组织与其深面的结构(前寰椎、寰椎以及二者之间的膜性结构)相连，即暹罗鳄的枕后肌直接或间接的连接至前寰椎、寰椎及其间膜上。在前寰椎、寰椎及其间膜的腹侧(椎管侧)存在小梁样结构与硬脊膜背侧连结。小梁分布均匀且密集，呈头侧宽尾侧窄的“倒三角形”，并向尾侧直至C2椎弓板的前缘。在枢椎尾侧，椎管后壁与硬脊膜间存在“Y”字形的潜在性腔隙，潜在性腔隙沿“倒三角形”小梁区域的两侧延续并到达寰椎和枕骨之间的间隙。本研究结果表明，在暹罗鳄的枕下区，枕后肌可以通过前寰椎和寰椎以及其下的小梁结构与硬脊膜形成联系。这一联系可能发挥肌硬膜桥类似的功能。

聚己内酯/明胶复合纳米材料的细胞相容性

足底软组织创伤在临床上比较常见，尽管创伤外科修复重建足底软组织缺损的术式比较成熟，但是对术后功能的恢复仍不满意，出现局部软组织稳定性差，使得患者康复后出现站立不稳等问题。恢复足底软组织特有的功能，尤其是稳定性，是临床难以解决的问题。组织工程改变了传统"以创伤修复创伤"的治疗模式，为终实现无损伤修复创伤开辟了新途径。由于纳米纤维不仅具有表面积大、孔径小、孔隙率高、较好的均一性、直径与细胞外基质中胶原纤维相近，大程度地模仿细胞外基质天然结构。因此，实验用聚己内酯(PCL)和明胶(gelatin)为原料，应用静电纺丝法制作PCL/gelatin复合纳米纤维(图1)。这样不仅避免了单用PCL导致降解慢，生物相容性差，还避免了单用明胶导致降解太快的问题。通过调节PCL与gelatin不同的混合比例，从而得到需要的降解率和生物相容性。实验分为材料组和对照组两组，将真皮成纤维细胞分别接种在材料组和对照组上，在48 h、72 h、96 h后用MTT法检测细胞的增殖情况。结果显示，真皮成纤维细胞在PCL/gelatin复合纳米材料表面贴附牢固，生长形态良好。 MTT检测结果统计表明此材料能够促进真皮成纤维细胞在其表面增殖(图2)。认为PCL/gelatin复合纳米材料具有较好的生物相容性，有望作为修复足底软组织创伤的支架材料。

转录因子 HOXA5在乳腺癌细胞中的下游信号通路研究

目的：：探究转录因子HOXA5在乳腺癌进展中的作用。方法：构建过表达HOXA5的稳定转染BT549和SUM159细胞系,在稳转BT549细胞系中利用Transwell检测细胞的转移能力；Western blotting检测上皮-间质转化( EMT )相关蛋白表达水平的变化；平板克隆实验检测细胞的增殖能力；转录组测序技术(RNA-seq)进一步分析HOXA5的调控基因,利用软件Cluster 3.0,treeview和DAVID生物信息数据库(DA-VID Bioinformatics Resources)以及Enrichr分析KEGG信号通路,绘制热图( heatmap)。结果：BT549细胞系中,稳定转染HOXA5后的实验组细胞迁移能力显著降低( P<0.001),且上皮标志物E-cadherin蛋白表达水平显著上调,间质标志物 N-cadherin, Twist1,Slug蛋白表达水平显著下调；平板克隆结果表明,实验组形成的克隆数目明显减少( P<0.05),克隆大小明显降低。结论：HOXA5通过促进细胞由间质向上皮转化,抑制乳腺癌细胞迁移,并且抑制细胞增殖；HOXA5通过调节糖脂代谢途径调节癌细胞增殖,并且还通过调节细胞运动和粘附相关的基因抑制肿瘤细胞的迁移,通过肿瘤坏死因子( TNF)信号通路发挥抗肿瘤作用。总之,转录因子HOXA5对乳腺癌的发展和恶化起着显著的抑制作用。

二氮嗪预处理对 H2 O2损伤 L6骨骼肌成肌细胞的作用及机制研究

目的：：研究二氮嗪( diazoxide, DZ)预处理对H2 O2损伤L6骨骼肌成肌细胞( skeletal myoblast, SKM)的保护作用,并探讨其与磷脂酰肌醇3激酶( phosphatidylinositol-3 kinase, PI3K)/Akt信号通路的关系。方法：体外培养的L6 SkMs随机分为4组：对照组、H2O2损伤组(H2O2 group；0.40mmo1/L H2O2作用24 h),DZ预处理组(DZ group；200μmol/L DZ预处理30 min后,0.40mmo1/L H2O2作用24 h),LY294002抑制剂组(LY group；200μmol/L DZ和50μmol/L LY294002共同孵育30 min后,0.40mmo1/L H2O2作用24 h)。采用MTT比色法检测各组细胞存活率；Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Western blot-ting法检测各组细胞P-Akt、Caspase-3、Caspase-9的表达水平。结果：与对照组相比,H2 O2损伤可诱导细胞凋亡,显著降低细胞存活率,降低P-Akt蛋白表达而增加Caspase-3,9蛋白表达。与H2 O2组比较,DZ组的细胞存活率显著上升,凋亡率显著下降, P-Akt蛋白表达明显增加而Caspase-3,9表达明显降低。而PI3 K抑制剂LY294002能够显著抑制DZ预处理对细胞的保护和抗凋亡作用,同时使P-Akt蛋白表达显著降低, Caspase-3,9蛋白表达显著增加。结论：DZ预处理可激活PI3 K/Akt信号通路,下调凋亡蛋白caspase-3,9,从而抑制H2 O2引起的L6 SKMs的凋亡。

人肝癌 HepG2细胞小鼠荷瘤模型的建立及免疫耐受的探讨

目的：：肝癌已成为威胁人类健康的重大疾病之一,居癌症死亡人数第三位。在肝癌的致病机制和治疗研究中,动物模型是不可或缺的研究手段。常用的动物模型是人类肿瘤细胞移植裸鼠模型,但是裸鼠免疫系统缺陷,无法应用于肿瘤的免疫治疗研究；而免疫正常背景小鼠同种荷瘤模型又难以充分模拟与其种属差异较大的人类肿瘤特性；因此,由于缺乏合适的疾病动物模型,限制了肝癌免疫治疗研究的发展。我们的研究希望能够建立具有完全免疫背景的人肝癌荷瘤小鼠模型,为抗肿瘤免疫治疗研究提供新的实验平台。方法：采用GFP标记人肝癌细胞系HepG2,将GFP- HepG2细胞注射入孕16.5 d的胎鼠腹腔内,观察新生小鼠腹腔内荷瘤情况；进一步通过Elisa法检测荷瘤小鼠血清人甲胎蛋白含量；小鼠成年后进行皮下成瘤试验及流式检测小鼠脾脏T细胞亚群变化。结果：经胎鼠腹腔注射的人GFP- HepG2细胞在新生鼠体内种植并生长于肝脏,分泌人甲胎蛋白；皮下荷瘤实验观察到经胎体注射GFP- HepG2细胞诱导免疫耐受后,部分小鼠成年后仍可支持皮下HepG2细胞荷瘤,流式免疫细胞分析表明诱导耐受后的小鼠免疫系统仍对人肝癌细胞保留有较弱的攻击。结论：通过胎鼠腹腔注射人GFP- HepG2细胞可以建立人肝癌细胞小鼠荷瘤模型,部分荷瘤后的小鼠具有免疫耐受的能力,这为人类肿瘤疾病的免疫研究提供了可靠的动物模型。

肥大细胞活化在高脂饲养大鼠胰岛纤维化形成中的作用

目的：：探讨胰腺肥大细胞( MC)活化在高脂饲养大鼠胰岛纤维化发生中的作用。方法：8周龄雄性SD大鼠40只随机分为2组,正常饲养组(NC, n=20)、高脂饲养组(HF, n=20),每组各20只。每组大鼠饲养20周后检测空腹血糖、血胰岛素( Ins)、胰高糖素( Glc)、游离脂肪酸( FFA)；正常血糖高胰岛素钳夹评价外周胰岛素抵抗程度；胰岛细胞表面灌注评价β及α细胞分泌功能；检测外周血炎症指标：TNF-α、IL-6,取胰腺组织制片,甲苯胺蓝染色显示肥大细胞并计数定量,免疫组织化学标记胰岛IL-6、TNF-α、苦味酸-天狼星红胶染色鉴别胰岛内沉积的胶原纤维类型。结果：(1)HF组大鼠葡萄糖输注率(GIR)明显低于NC组,血Ins、Glc、FFA水平显著高于NC组；(2)HF组大鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能明显下降( P<0.01)；HF组大鼠基础Glc的分泌是NC组的3倍( P<0.01),16.7 mmol/L葡萄糖灌注后Glc分泌未受抑制；(3) HF组大鼠胰岛纤维化,肥大细胞数量明显增多,部分细胞呈脱颗粒状。肥大细胞IL-6呈阳性表达。苦味酸-天狼星红胶染色结果：根据胰岛内纤维化的范围,将胰岛纤维化程度分为轻、中、重三度：轻度纤维化范围<30%；中度纤维化范围在>30%<60%之间；重度纤维化范围>60%胰岛纤维化,偏振光显微镜观察胰岛内沉积的纤维,主要为I型及III型胶原纤维,炎细胞浸润。结论：长期高脂饲养脂毒性使肥大细胞增生、活化脱颗粒释放致炎因子IL-6、TNF-α从而促进了胰岛内胶原纤维沉积。

肝细胞癌变过程中 IGF-Ⅱ及 HBV表达及相关性研究

目的：：肝癌发生发展过程中,许多生长因子参与细胞癌变,分子机制和表达变化规律比较复杂。本文对近几年有关肝细胞癌相关的生长因子的报导进行归纳,胰岛素样生长因子-Ⅱ( IGF-Ⅱ)和乙型肝炎病毒( HBV)在原发性癌中的表达及其与肝癌转移的关系。结果：以免疫组织化学法、DNA-RNA原位杂交方法等检测HCC中IGF-Ⅱ的表达,得出IGF-Ⅱ在HCC中的表达关系。利用血清学指标检测、采用实时定量PCR法检测HBV中相关的表达,总结规律。结论：肝细胞癌变为多基因参与的多阶段的发病过程,IGF-Ⅱ呈上调表达,其机制可能是促进肝细胞癌变的发生和发展,HBV感染可能导致HCC的发生及发展。

股骨头坏死大鼠模型组织学指标观察及指标间相关性分析

股骨头坏死是骨科常见病,缺乏有效的治疗方法。本研究采用大鼠股骨头缺血性坏死作为动物模型,观察造模后股骨头组织学相关指标及进行指标间的相关性分析。12只雄性SD大鼠随机分为2组：假手术组、股骨头坏死模型组。本研究采用创伤性股骨头坏死模型,手术采用切断股骨头圆韧带及结扎股骨颈的方法造成股骨头缺血性坏死。动物造模5周后进行取材和相关指标的检测。骨密度和组织学评估骨损伤的程度,墨汁灌注评估血管灌注情况。结果显示模型组大鼠股骨头表面缺损塌陷,骨密度和骨小梁体积分数显著减少(均P<0.001),血管灌注显示血管密度和血管面积显著降低(均P<0.001)。指标间的相关性分析结果显示,血管密度与骨矿密度、骨矿含量和骨小梁体积分数均呈明显的正相关(均P<0.01,相关系数分别为：r=0.891,0.898和0.920)；血管面积与骨矿密度、骨矿含量和骨小梁体积分数也呈明显的正相关(均P<0.01,相关系数分别为：r=0.901,0.918和0.924)。本研究通过手术创伤的方法成功建立了股骨头缺血性坏死的大鼠模型,造模后股骨头组织的骨密度、骨容积以及血管灌注指标均明显下降,说明缺血性股骨头坏死造模成功。同时血管灌注与骨组织学指标间有显著的正相关性。说明股骨头缺血性坏死的根本病因是血管灌注障碍引起的骨损伤。本研究得出的组织学相关指标及指标间的相关性分析进一步明确了缺血性股骨头坏死的发病机制,也为寻求股骨头坏死的新治疗提供线索。

复发性膀胱尿路上皮癌中 IMP3和 CD44蛋白表达

目的：：评价IMP3和CD44蛋白在复发性膀胱癌中表达及二者的相关性。方法：收集2002年1月至2012年12月经尿道膀胱肿瘤电切术诊断为尿路上皮癌( UC)的病例,其中筛选出6个月内短期复发组25例和3年以上较长期首次复发组29例。应用半定量免疫组织化学法检测短期复发组和较长期首次复发组UC病例中IMP3和CD44蛋白表达情况。结果：6个月内UC复发为25例,6例表达IMP3,且均为高级别UC。3年以上较长期首次UC复发为29例,仅有1例低级别UC表达IMP3。在短期复发组中IMP3阳性率为24%(6/25),表达强度为弱阳性16%(4/25)和强阳性8%(2/25),明显高于较长期首次复发组中的阳性率3.45%(1/29)以及表达强度中的弱阳性3.45%(1/29)和强阳性0(0/29)。 CD44蛋白表达在两组之间差异无统计学意义。 IMP3表达与UC复发患者的肿瘤分期、分级呈正相关,而CD44表达与肿瘤的分级呈负相关。 IMP3表达与CD44表达之间无明显相关性。结论：IMP3在UC短期复发组中的表达明显高于较长期首次复发组。 IMP3可作为新的指标,并联合肿瘤病理分期、分级等因素对膀胱UC患者经尿道肿瘤电切术后短期复发的高危性进行预测。

肠道5-HT与血管活性肠肽在断奶仔小鼠应激腹泻中的相关性分析

目的：：为了探讨断奶仔小鼠应激腹泻发生中5-HT和VIP之间的互作机制。方法：将21 d断奶ICR小鼠分为正常对照组,应激腹泻组(番泻叶0.4 kg/L按体重15mL/kg灌胃同时后肢束缚应激),CH药物对照组(氢溴酸西酞普兰,是一种高选择性5-HT再摄取抑制剂,抑制5-HT再摄取灭活过程,使5-HT含量增加。10 mg/kg体重溶解于0.1 mL生理盐水,腹腔注射),CH+应激腹泻组(CH药物处理4h后进行应激腹泻处理),PCPA对照组(对氯苯丙氨酸,是一种5-HT合成抑制剂,抑制5-HT合成,300 mg/kg溶解于0.1 mL生理盐水,腹腔注射),PCPA+应激腹泻组。常规饲养。处理5d后小鼠脱颈椎死,取十二指肠、空肠、回肠、结肠组织保存于-80℃用作放射免疫检测。放射免疫测定十二指肠,空肠,回肠和结肠中VIP的表达量。结果：十二指肠中,与对照组相比,应激腹泻组小鼠VIP 的表达量升高了38.78%,差异显著( P=0.000)；PCPA组小鼠VIP的表达量降低了16.91%,差异显著( P=0.034)；CH组小鼠VIP的表达量升高了65.60%,差异显著(P=0.000)。与应激腹泻组相比,PCPA+应激腹泻组小鼠VIP的表达量升高了8.61%,差异不显著(P=0.122)；CH+应激腹泻组 VIP 的表达量升高到(5.99±0.08)pg/mgpro,差异显著(P=0.000)。空肠中,与对照组(0.51±0.02)pg/mgpro相比,应激腹泻组小鼠VIP的表达量升高了15.68%,差异不显著(P=0.308)；PCPA组VIP的表达量降低到了(0.39±0.02)pg/mgpro,差异不显著(P=0.155)；CH组小鼠VIP的表达量升高了25.49%,差异不显著( P=0.109)。与应激腹泻组( 0.59 ± 0.11) pg/mgpro相比, PCPA+应激腹泻组小鼠VIP的表达量降低,但差异不显著( P=0.428)；CH+应激腹泻组VIP的表达量升高了40.68%,差异显著(P=0.009)。回肠中,与对照组(0.50±0.06)pg/mgpro相比,应激腹泻组小鼠VIP的表达量升高,差异不显著( P=0.582)；PCPA组小鼠VIP的表达量降低了22.00%,差异显著( P=0.030)；CH组VIP的表达量升高了32.00%,差异显著(P=0.003)。与应激腹泻组相比,PCPA+应激腹泻组表达量升高了25%,差异显著( P=0.012)；CH+应激腹泻组VIP的表达量升高了42.31%,差异显著( P=0.001)。结肠中,与对照组相比,应激腹泻组小鼠VIP的表达量升高了5.88%,差异不显著( P=0.607)；PCPA组表达量降低了26.47%,差异显著(P=0.044)；CH组的表达量无变化。与应激腹泻组相比,PCPA+应激腹泻组小鼠VIP 的表达量升高了37.50%,差异显著( P=0.005)；CH+应激腹泻组小鼠VIP的表达量升高了6.94%,差异不显著( P=0.572)。结论：总之,断奶仔小鼠应激腹泻导致肠道VIP的表达量升高；PCPA诱导5-HT降低后, VIP的表达量出现显著降低,而CH诱导5-HT升高后VIP的表达量亦出现显著升高。因此,5-HT和VIP在断奶仔小鼠应激腹泻发生中呈现高度相关性。

Salubrinal抑制小鼠破骨细胞发育和骨细胞凋亡

骨质疏松是一种以骨量减少和骨微结构破环为特征而导致骨折危险性增加的疾病。 Salubrinal是真核翻译起始因子2α( eIF2α)的选择性抑制剂,保护细胞免于内质网应激。前期工作表明salubrinal可促进骨损伤愈合,但是对骨丢失的作用尚需探索。本实验使用骨量减少的动物模型--鼠尾悬吊小鼠,验证以下假设：salubrinal通过抑制小鼠破骨细胞发育和骨细胞凋亡治疗骨质疏松。 C57 BL/6雌性小鼠(14周龄)随机分为3组：年龄对照组、鼠尾悬吊对照组和治疗组(n=20)。悬吊治疗组每天皮下注射salubrinal (1mg/kg),持续2周,鼠尾悬吊对照组小鼠注射同等体积的溶剂。实验前后分别进行骨密度测量。给药2周后处死小鼠,取左侧股骨固定,石蜡包埋。应用HE和TRAP染色进行股骨的组织形态学分析。收集右侧股骨和胫骨骨髓来源细胞以观测破骨细胞的发育状态。采用TUNEL染色检测骨细胞的凋亡情况。结果显示,与年龄对照组相比,鼠尾悬吊组小鼠骨密度显著下降(P<0.001),骨小梁体积分数(BV/TV)显著减少(P<0.001),表明骨量丢失动物模型建立成功；salubrinal显著改善骨密度的降低( P<0.05),增加骨容量( P<0.001)。 TRAP染色显示悬吊组小鼠多核破骨细胞形成明显增加(P<0.001),给药后明显抑制活跃的破骨细胞(P<0.001)。原代骨髓细胞培养发现鼠尾悬吊后破骨细胞活跃,而salubrinal能抑制破骨细胞的形成、迁移和粘附。鼠尾悬吊后,骨细胞凋亡增加,局部给药可显著减少骨细胞凋亡数目(P<0.05),改善失重性骨丢失。本研究表明,鼠尾悬吊通过激活破骨细胞的发育和促进骨细胞的凋亡导致骨质疏松,是一种成功的骨质疏松和骨量减少动物模型。 Salubrinal给药通过抑制破骨细胞发育减少鼠尾悬吊小鼠的骨量丢失,同时,给药后显著抑制了骨细胞凋亡,并使骨丢失趋势下降。然而,salubrinal抑制失重性骨质疏松的分子机制还有待进一步探讨。我们的研究为salubrinal治疗骨质疏松提供了有力理论依据。

Objective:To explore the relationship of peripheral nerve ultrastructure and its associated pro-tein expression in experimental autoimmune neuritis ( EAN) . Methods:EAN was established in Lewis rats using an emulsified mixture of P0 peptide 180-199,Mycobacterium tuberculosis,and incomplete Freund's adjuvant. Rats given saline solution were used as a control group. Sciatic nerve ultrastructure and immunofluorescence histopathol-ogy were measured at the neuromuscular severity peak on day 18 post-induction. Cell-specific protein markers were used for immunofluorescence histopathology staining to characterize sciatic nerve cells:CD3 ( T cell) , Iba-1 ( mi-croglia), S100(myelin), and neurofilament 200(axon). Results:The results showed that swelling of the myelin lamellae, vesicular disorganization,separation of the myelin lamellae, and an attenuation or disappearance of the axon were observed by transmission electron microscopy in the EAN group. CD3 and Iba-1 increased significantly in the structures characterized by separation or swelling of the myelin lamellae,and increased slightly in the struc-tures characterized by vesicular of the myelin lamellae, S100 decreased in the structures characterized by vesicular disorganization or separation of the myelin lamellae. And neurofilament 200 decreased in the structures character-ized by separation of the myelin lamellae. Moreover,we found that Iba1 were positive in the myelin sheath, and o-verlapped with S100 , which significantly indicated that Schwann cells may play as macrophage-like cells during the disease progression of ENA. Our findings may be a significant supplement for the knowledge of EAN model, and may offer a novel sight on the treatment of GBS.

甲状腺肿瘤干细胞与甲状腺肿瘤治疗

目的：：对甲状腺肿瘤干细胞的发现、鉴定识别、与肿瘤的关系进行探讨，为甲状腺肿瘤的诊断与治疗提供一些新的思路。结果：甲状腺癌组织中存在甲状腺肿瘤干细胞，目前可以通过一定的方法鉴别并分离甲状腺肿瘤干细胞。甲状腺肿瘤干细胞在甲状腺肿瘤的启动、复发、转移以及肿瘤的抗放化疗中均有作用，促进肿瘤的发生发展，是肿瘤耐药的原因之一。甲状腺肿瘤干细胞的研究，为甲状腺肿瘤的治疗与诊断提供了一些新的思路，如阻断肿瘤干细胞增殖转移的信号通路，诱导肿瘤干细胞向甲状腺样细胞分化及再生。结论：肿瘤干细胞目前已成为肿瘤病因研究的热点。甲状腺肿瘤干细胞与甲状腺肿瘤的发生、转移以及肿瘤的治疗息息相关，但是否可以通过抑制或根除肿瘤干细胞来治疗甲状腺肿瘤需要深入研究。这些新的视野将有望为难治性和侵袭性的甲状腺肿瘤治疗带来新突破。

大鼠肝脏 X受体在低雌激素状态下对肝脏脂肪代谢的作用

目的：：肝脏X受体是核受体超家族成员之一，可以调控机体的新陈代谢、发育增殖以及炎症反应，在肝脏的脂肪代谢中起重要作用。旨在观察卵巢被切除的情况下大鼠肝脏内脂质含量以及肝脏X受体在肝脏的表达情况，并调查更年期肥胖的可能机制。方法：用28只大鼠，随机分为4组：SHAM组、OVX组、OVX+E2组、OVX+iCR组，每组7只。卵巢切除术后，给予大鼠相应药物4周。通过油红O染色、免疫组织化学染色以及Western Blot的方法，观察大鼠肝脏组织切片以及相关蛋白表达。结果：OVX脂滴数量增加，在OVX+E2组和OVX+ICR组表达有所下降；大鼠肝脏X受体在OVX组表达降低，并在OVX+E2组和OVX+iCR组表达有所增加，但仍低于SHAM组。肝脏X受体可能是更年期肥胖的重要机制之一。

Objective:The epithelial-mesenchymal transition ( EMT) is an important factor in the invasion and metastasis of gastric cancer, and increasing evidences have demonstrated that Sp1 play critical roles in EMT of some cancer. However, few studies indicated whether Sp1 is involved in the EMT of gastric cancer, whether abnor-mal expression of Sp1 in gastric cancer EMT is regulated in apost-transcriptional manner, and whether miRNAs are key players in this regulation. The purpose of this study is to identify miRNAs targeting Sp1 and determine theirex-pression and function in gastric cancer. Methods and Results:we examined the expression of Sp1 in gastric canc-ers, their liver metastases and para-carcinoma tissues to determine the relationship between Sp1 expression and metastasis. Quantification of Sp1 mRNA and protein levels revealed that abnormal Sp1 expression in gastric cancer and metastatic tissues is attributed toalterations in post-transcriptional regulation. We next investigated the mecha-nism by which miRNA regulates Sp1 . Using bioinformatics we identified a putative miRNA-223 target site in the 3'-UTR of the SP1 gene. This target site was validated using aluciferase reporter system and miRNA-223 expression was found to negatively correlate with Sp1 protein levels. A TGF-beta1 -dependent model of EMT was established for gastric cancer cell lines and used in conjunction with miRNA-223 and Sp1 over expression studies to determine the role of miRNA-223 in gastric cancer cell proliferation, apoptosis and invasion. The expression of EMT-associ-ated proteins was analyzed in parallel to investigate at the molecular level the role of miRNA-223/Sp1/EMT in the regulation of gastric cancer invasion. Conclusions: We demonstrate that miRNA-223, through suppression of Sp1 expression, inhibits the proliferation and invasion of tumor cells and promotes apoptosis, and thereby suppresses the EMT-associated metastasis of cancer cells.

Salubrinal通过调节骨髓干细胞向破骨细胞分化治疗大鼠股骨头坏死

本研究采用大鼠股骨头缺血性坏死作为动物模型,观察Salubrinal是否能通过调节骨髓干细胞中破骨细胞的分化治疗大鼠股骨头坏死,以及股骨头的组织学修复情况。18只雄性SD大鼠随机分为假手术组、股骨头坏死模型组和Salubrinal药物治疗组。手术采用切断大鼠股骨头圆韧带及结扎股骨颈的方法造成股骨头缺血性坏死,使用Salubrinal(0.1mg/kg,1次/d)皮下注射,共治疗5周。采用HE染色方法评估组织学修复情况,TRAP染色评估骨组织内破骨细胞的活跃程度,骨髓细胞培养分析骨髓干细胞向破骨细胞分化情况。与假手术组相比,模型组大鼠的股骨头表面出现不同程度的缺损和塌陷；股骨头内骨小梁体积分数( BV/TV)显著降低(P<0.001)；TRAP染色提示股骨头内骨小梁表面破骨细胞数目增加(P<0.01)；骨髓来源细胞培养显示破骨细胞形成、迁移、粘附和骨片吸收能力均增强(均P<0.01)。与模型组比较,Salubrinal治疗组大鼠股骨头内的骨小梁体积分数明显升高(P<0.001)；股骨头内骨小梁表面破骨细胞数目基本恢复到正常水平(P<0.05)；骨髓来源的破骨细胞形成、迁移、粘附和骨片吸收能力基本恢复到正常水平(均P<0.01)。股骨头的缺血性坏死可以导致骨髓来源的破骨细胞发育异常活跃,股骨头组织内的骨吸收显著增强。 Salu-brinal通过抑制骨髓来源的破骨细胞分化和功能,减少股骨头的骨吸收,增强骨修复能力。本研究可以为寻求股骨头坏死治疗提供理论依据。

脂肪酸对牛骨骼肌卫星细胞分化的影响

目的：近年来,脂肪酸对细胞分化的影响作用一直受到广泛关注。研究发现,脂肪酸可以通过调节过氧化物酶体增殖激活受体( PPAR)或其他转录因子而调控组织分化。单不饱和脂肪酸亚油酸( LA)和油酸( OA)在促进骨胳肌细胞的增殖和分化过程中具有重要作用。多不饱和脂肪酸如花生四烯酸( AA)和二十二碳六烯酸( DHA)还可以通过改变细胞膜的脂质分布,从而促进大鼠成肌细胞的分化。然而,脂肪酸是否能够影响牛骨骼肌细胞的发育,以及脂肪酸的摄取与骨骼肌卫星细胞分化的关系,仍不清楚。方法：本研究通过向牛骨骼肌卫星细胞( muscle-derived satellite cells,MDSCs)培养体系中添加三种不同的脂肪酸(棕榈酸PA、油酸OA和二十二碳六烯酸DHA ),以探讨不同脂肪酸对牛骨骼肌卫星细胞分化的影响。结果：PA、OA和DHA作用浓度均为50 umol/L,以2%马血清为对照,诱导分化牛骨骼肌卫星细胞。分化96h后分别收集细胞,采用免疫荧光染色,实时定量PCR和Western blot技术检测细胞分化过程中相关的标志性基因MyoG( Myogenin)和MyHC( Myosin Heavy Chian)的表达变化进而探讨脂肪酸对体外培养的牛骨骼肌卫星细胞分化程度的影响；此外,通过荧光定量RT-PCR法检测脂肪酸代谢途径中关键基因CPT2( Carnitine palmi-toyltransferase 2,肉碱棕榈酰转移酶Ⅱ)、DGAT2( Diacylglycerol acyltransferase 2,二酰甘油酰基转移酶Ⅱ)和ELOVL3(Fatty acid elongase 3,脂肪酸链延长酶III)的表达变化,进而探讨脂肪酸摄取对骨骼肌卫星细胞脂肪酸代谢的影响。实验结果显示,PA、OA和DHA处理的牛骨胳肌卫星细胞能够促进肌卫星细胞的分化。3种脂肪酸处理的细胞中脂肪酸代谢中的关键基因CPT2、DGAT2和ELOVL3的表达量显著增加。结论：脂肪酸( PA、OA、DHA)能够促进牛骨骼肌卫星细胞的分化,从而为探明肌肉发育和分化的分子机制提供帮助。

鸡脾转移因子对鸡肠道细胞因子的影响

肠道既是消化吸收器官,也是体内大且功能复杂的免疫器官,肠道免疫系统能够抵抗病原体入侵有机体,并且能够限制肠道微生物菌群的水平,与家禽的生长发育密切相关。鸡脾转移因子( Transfer Factor,TF)是具有免疫活性的T淋巴细胞在抗原或丝裂原的刺激下释放的一类可透析的小分子多肽,有研究表明鸡脾转移因子( TF)能显著提高雏鸡体液免疫和细胞免疫,改善胃肠菌群平衡,调节肠道黏膜屏障,有效阻挡病原微生物的入侵,提高生产性能,但其作用机制方面依然存在很多盲点。肠道通过分泌IL-10、TNF-α、IL-2等多种细胞因子维持黏膜屏障完整性,发挥重要免疫功能。本试验采用鸡脾转移因子(1mg/mL)灌服SPF鸡,自5日龄开始从饮水中加入鸡脾转移因子,分为正常对照组,4个剂量组(分别为0.05 mL/只、0.10 ml/只、0.25ml/只、1.00ml/只),饲喂1周,12日龄时取材,取十二指肠、空肠、回肠、直肠,ELISA方法检测肠组织中抗炎因子IL-10,促炎因子TNF-α的含量,以探究鸡脾转移因子对SPF鸡肠道细胞因子的影响。结果：在连续使用鸡脾转移因子一周后,各肠段的抗炎因子IL-10的浓度较对照组有所升高,十二指肠中剂量组0.10 mL/只的IL-10的浓度高,比对照组升高了14.72%( P=0.011)差异显著。空肠中的IL-10含量0.25 mL/只、1.00 mL/只剂量组的IL-10浓度高于对照组,分别升高了8.08%( P=0.082),12.74%( P=0.000)。回肠中1.00mL/只剂量组,IL-10含量高,比对照组显著升高了18.72%(P=0.000)。直肠中可见IL-10的含量随着鸡脾转移因子使用剂量的升高而升高,1.00 mL/只剂量组IL-10浓度高。各肠段的促炎因子TNF-α的浓度较对照组降低,十二指肠中0.25 mL/只剂量组TNF-α较对照组显著降低了18.96%( P=0.033),其他剂量组均比对照组低。空肠中0.05mL/只、0.10mL/只剂量组显著低于对照组,且差异显著。回肠中的TNF-α浓度在使用鸡脾转移因子后显著降低,但是4个剂量组间差异不显著。直肠中1.00 mL/只剂量组较对照组降低了11.73%( P=0.006)。结论：5日龄SPF雏鸡连续灌服鸡脾转移因子一周后可有效升高肠道内抗炎因子IL-10的含量,降低促炎因子TNF-α含量。

叶酸对胚胎大鼠心脏细胞凋亡及 Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的：：观察叶酸对妊娠大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响,在细胞水平探讨叶酸预防先天性心脏畸形的作用及机制,为临床应用叶酸预防出生缺陷性疾病提供理论和实验依据。方法：成年雌性SD大鼠40只,随机分为对照组、大、中、小剂量叶酸组。叶酸组受孕后灌胃给予2、1、0.5 mg/kg/d等不同剂量叶酸,自受孕日开始持续10天。 ED13.5天处死大鼠并取胎鼠心脏,常规制备组织切片,免疫组化检测Bax、Bcl-2的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡率。结果：与对照组比较,叶酸干预组的细胞凋亡率、Bax表达均明显降低(P<0.01),Bcl-2的表达显著增高(P<0.05)；叶酸不同剂量组间比较,Bax和Bcl-2蛋白表达、细胞凋亡率在大、中剂量组与小剂量组差异显著(P<0.05),大剂量组与中剂量组比较差异无统计学意义( P>0.05)。结论：叶酸干预可降低胎鼠心肌细胞的凋亡率和Bax的表达,提高Bcl-2的表达。一定范围内,叶酸对Bax、Bcl-2表达及细胞凋亡率的影响与剂量有关联。叶酸抑制心脏细胞凋亡的作用可能与预防畸形的作用机制有关。

干细胞治疗甲状腺癌的探索

目的：：对肿瘤细胞的起源、甲状腺肿瘤细胞表面标记物的表达及与肿瘤恶性程度的关系进行研究，探索干细胞在治疗甲状腺癌的临床应用。结果：甲状腺癌的发生是一个多基因、多因素、多阶段的复杂病理过程。甲状腺癌组织中存在肿瘤干细胞，对肿瘤的产生、发展、复发、转移都发挥着关键的作用。鉴定和识别对肿瘤细胞的发生发展起关键作用的标记物对探索干细胞治疗甲状腺癌至关重要。结论：甲状腺肿瘤的形成是多重基因、多种致瘤通路作用的结果，随着发病率的增加和病情的复杂多样化，传统的治疗方法一直没有突破性的进展。甲状腺癌的发生、转移、以及抗放化疗和具有干细胞特性的细胞的调控密不可分。干细胞已成为治疗甲状腺癌新方法的主要技术手段之一。能否可以通过干预其中具有干细胞特性的细胞来治疗甲状腺肿瘤仍需深入的研究。

Objective: To investigate the expression levels of total and phosphorylation p38 , JNK and ERK1/2 protein during diethylnitrosamine ( DEN)-induced rat hepatocellular carcinoma occurrence and develop-ment. Methods: To induce hepatocellular carcinoma, we performed intermittently administrated DEN to rats. Using light microscopy and electron microscopy technique to discover that liver tissue morphological changes in the process. And then the expression of p38, JNK, ERK1/2 mRNA and protein was performed by RT-PCR and west-ern blot analysis, in order to furthermore explore the association of them. Results:In rat hepatoma model develop-ment, protein of p-p38、p-ERKl/2、p-JNK and its mRNA expression were significantly increased with increasing treatment time, but,no significant changes of p38, ERK, of JNK protein and its mRNA expression. Conclusions:During DEN-induced rat hepatocellular carcinoma, p-p38 and p-ERK proteins expressed lower and p-JNK pro-tein expressed high, and its expression was positively correlated with the development of hepatocellular carcinoma.

5-HT对断奶仔小鼠应激腹泻肠隐窝干细胞标记基因的影响

目的：：为了探讨5-HT损伤断奶仔小鼠应激腹泻肠黏膜屏障的机制,检测了5-HT对断奶仔小鼠肠隐窝干细胞标记基因(Olfm4,Lgr5)的影响。方法：将40只雄性21 d断奶ICR小鼠随机分为4组,分别为正常对照组,应激腹泻组(番泻叶0.4 kg/L按体重15mL/kg灌胃同时后肢束缚应激),CH药物对照组(氢溴酸西酞普兰,是一种高选择性5-HT再摄取抑制剂,抑制5-HT再摄取灭活过程,使5-HT含量增加。10 mg/kg体重溶解于0.1 mL生理盐水,腹腔注射),CH+应激腹泻组(CH药物处理4h后进行应激腹泻处理),常规饲养。处理5 d后小鼠脱颈椎死,取十二指肠、空肠、回肠、结肠组织保存于-80℃用作PCR检测。结果：Olfm4是肠上皮隐窝干细胞的标记基因,其表达量高低可能间接反应肠上皮干细胞的增殖状况。应激腹泻组小鼠小肠干细胞表达量均显著升高,十二指肠13.07%(P=0.000),空肠32.96%(P=0.000),回肠15.54%(P=0.000),结肠47.75%(P=0.000)。 CH 对照组与正常对照组相比十二指肠14.38%(P=0.000),空肠23.94%(P=0.000),回肠12.29%(P=0.011),结肠48.88%(P=0.000)均显著升高。 CH+应激腹泻组与应激腹泻组相比,十二指肠29.07%(P=0.000),空肠6.36%(P=0.000),回肠16.80%(P=0.000),结肠47.03%( P=0.000)均显著升高。 CH+应激腹泻组与CH对照组相比十二指肠60.63%,空肠25.55%( P=0.000),回肠23.16%( P=0.000)和结肠48.03%( P=0.000)。 Lgr5干细胞标记基因表达量显著低于Olfm4,但是各处理组之间差异显著增加。与正常对照组相比应激腹泻组十二指肠,空肠,回肠Lgr5干细胞标记基因表达量均显著升高,分别为十二指肠71.95%( P=0.015),空肠47.11%( P=0.010),回肠1.52倍(P=0.012),CH对照组与正常对照组相比,十二指肠升高3.48倍(P=0.000),空肠1.15倍(P=0.001),回肠1.65倍(P=0.001)。 CH+应激腹泻组与应激腹泻组相比,十二指肠、空肠、回肠分别显著升高了2.88倍(P=0.003),1.88倍(P=0.014),3.59倍(P=0.000)。而CH+应激腹泻组与CH对照组相比也呈现显著增加的趋势,Lgr5干细胞标记基因表达量表现为十二指肠升高48.59%(P=0.029),空肠96.54%( P=0.024),回肠3.36倍( P=0.000)。但是在结肠四组之间Lgr5干细胞标记基因表达量呈现逐渐下降的趋势,为应激腹泻组、CH对照组,CH+应激性腹泻组均显著低于正常对照组51.70%(P=0.000),75.56%( P=0.000),84.36%( P=0.000)。 CH+应激腹泻组Lgr5干细胞标记基因表达量低,比应激腹泻组和CH对照组显著降低67.63%( P=0.000)和36.02%( P=0.142)。结论：断奶应激腹泻与CH诱导的肠道5-HT含量升高均使小鼠小肠肠隐窝干细胞标记基因表达量代偿性升高,破坏维持肠隐窝上皮细胞自我更新的稳态。

巨噬细胞对乳腺癌细胞 MCF-7体外杀伤作用的研究

目的：：观察巨噬细胞体外扩增特性及其对乳腺癌细胞MCF-7的抗肿瘤作用。方法：将巨噬细胞与乳腺癌细胞MCF-7共培养，获取初期细胞，光镜观察。以MTT法检测巨噬细胞对乳腺癌细胞MCF-7的抑制率。结果：共培养初期细胞膜完整、细胞折光性强；37℃、5%CO2、不换液、不传代培养后，细胞内颗粒增多、折光性变弱，同时死亡、破碎细胞数量增加；继续培养，细胞几乎全部死亡、破碎，培养至18天左右，体积变大、折光性变强等具有活化特征的细胞出现；采用适当方式换液后，这些折光性较强的细胞的体积迅速增大，进入分裂增殖状态；培养50天左右，细胞的分裂、增殖减缓，细胞吞噬加强，巨大细胞的数量逐渐增多。以MTT法检测巨噬细胞对乳腺癌细胞MCF-7的抑制率，在效靶比为5：1、10：1、20：1、40：1时，抑制率随着效靶比的增加而增加，成正相关。而当效靶比为100：1时，反而促进肿瘤细胞的增殖。结论：采用死亡肿瘤细胞悬液可诱导PBMC获得巨噬细胞，巨噬细胞在一定浓度的范围内可抑制肿瘤细胞的生长，而当浓度过高时反而促进肿瘤细胞的生长。

Polycomb repression complex 2 ( PRC2 ) component EZH2 tri-methylates H3 K27 and exerts ep-igenetic repression on target gene expression. EZH2-mediated epigenetic control of RNA polymerase II(Pol II) transcribed coding gene transcription has been well established. However, little is known about EZH2-mediated epigenetic regulation of RNA polymerase III( Pol III) transcription. Here we present a paradigm that EZH2 is in-volved in the repression of Pol III transcription via interaction with transcriptional factor complex IIIC ( TFIIIC ) . EZH2 and H3K27 me3 cooccupy the promoter of tRNATyr, 5S rRNA and 7SL RNA genes. Depletion of EZH2 or inhibition of EZH2 methyl transferase activity led to upregulation of Pol III target gene transcription. EZH2-media-ted repression of Pol III transcribed gene expression requires presence of SUZ12 . SUZ12 was able to interact with TFIIIC complex and knockdown of SUZ12 decreased occupancy of EZH2 and H3 K27 me3 at the promoter of Pol III target genes. Our findings pointed out a previously unidentified role of PRC2 complex in suppressing transcription of Pol III transcribed non-translated RNA genes, putting Pol III on a new layer of epigenetic regulation.

糖皮质激素对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的影响

糖尿病所致糖皮质激素增加对视网膜神经节细胞( RGC )的影响及机制尚不完全清楚。本实验利用链脲佐菌素腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型,再向眼球玻璃体内注射腺病毒( DM组)、腺病毒包装的糖皮质激素受体反义寡核苷酸( siGR组)或阴性核苷酸序列( ncRNA组),正常大鼠玻璃体腔注射腺病毒为对照组(CON组)。12周后,HE染色显示,DM组及ncRNA组大鼠视网膜RGC 密度下降,较CON组减少(P<0.01),siGR组大鼠RGC密度均匀,排列有序,较 CON 组无明显变化(P>0.05)；与 CON 组相比,DM 组及scRNA组大鼠视网膜鼻侧及颞侧4个象限的视网膜厚度均明显变薄( P<0.01),而siGR组无明显变化( P>0.05)。免疫组织化学染色可见DM组及ncRNA组大鼠ROCK阳性的RGC数量较多且深染,而siGR组及CON组大鼠视网膜ROCK阳性RGC数量较少,着色较浅。 Western-blot检测结果表明,与CON组相比,DM组及scRNA组大鼠视网膜ROCK表达上调(P<0.01),siGR组无明显变化(P>0.05)。本研究提示,拮抗糖皮质激素受体能下调ROCK在糖尿病大鼠视网膜RGC内的表达,恢复RGC密度及视网膜厚度。

脑损伤后神经元自噬水平对突触蛋白表达的影响

目的：：神经网络的破坏是创伤性脑损伤( TBI, traumatic brain injury)后造成神经病理损伤的一个主要因素,为了弥补神经功能损伤,神经网络重建其拓扑结构,新的细胞间连接形成,将受损脑区的功能重新分配到完整脑区。有报道表明,辛伐他汀可以改善创伤性脑损伤后的神经突出芽,介导该现象的可能通路是磷脂酰肌醇3-激酶/Akt/雷帕霉素靶蛋白(PI-3K/Akt/mTOR)通路以及糖原合成酶激酶-3β/腺瘤性结肠息肉病( GSK-3β/APC)通路,上述通路激活后都可以加速自噬。我们设计实验的目的在于在脑损伤后,通过药物加强自噬的表达,是否可以改善神经网络的重建,是否可以改善神经功能的恢复。实验选取大鼠作为实验动物,通过外力打击,造成弥漫性脑损伤模型,通过给予自噬的激动剂辛伐他汀和抑制剂氯喹,调节损伤后神经细胞内的自噬水平,对于损伤后神经系统的修复,通过突触相关蛋白的表达和行为学参数进行评估。结果：在脑损伤后,给予辛伐他汀治疗可以改良大鼠神经功能的恢复,突触相关蛋白突触后致密蛋白95( PSD-95,postsynaptic density-95 protein)和突触素(synaptophysin)有较高的表达,在整个实验进程中,自噬都有较高的表达。给予氯喹,会使大鼠神经功能的回复变差。结论：辛伐他汀有可能是通过激活自噬相关的通路来加强脑损伤后大鼠神经网络的可塑性,进而改善神经功能的恢复。

BMSCs移植对矽肺大鼠肺泡巨噬细胞自噬活化的影响

目的：：观察骨髓间充质干细胞( bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对矽肺大鼠肺泡巨噬细胞自噬活化的影响,探讨骨髓间充质干细胞对矽肺的疗效及其机制。方法：体外分离、培养雄性3-5周龄SD大鼠,获取BMSCs原代,培养至3代。将60只雌性SD大鼠随机分为3组( n=20)：对照组,矽肺模型组,BMSCs治疗组。采用非暴露气管灌注法建立大鼠矽肺病模型,于造模成功后12 h给予BMSCs干预治疗(3x106/ml)。分别于1 d、7 d、14 d及28 d处死各组大鼠,应用原位支气管肺泡灌洗技术,获取大鼠肺泡巨噬细胞( Alveolar macrophages, AM)。使用细胞流式仪鉴定BMSCs；HE染色观察AM形态学改变；免疫细胞化学法与Western blotting 法检测LC-3、Beclin-1分布、定位和定量。结果：模型组与对照组相比AM 体积较大,胞质丰富,部分细胞内可见矽尘吞噬颗粒；模型组大鼠肺组织LC-3、Beclin-1在各时间点的表达较对照组均增多(P<0.05),1 d 即开始增多,至14 d 时达高峰,28d 时回落,但仍高于对照组的表达水平；BMSCs 治疗组大鼠肺组织较模型组病理改变有明显的缓解,各时间点LC-3、Beclin-1蛋白的表达显著下调(P<0.05)。结论：在矽肺大鼠AM 中存在自噬的激活,BMSCs 可有效抑制自噬的激活,进而缓解矽肺的病理进程。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂减轻阿霉素引起的大鼠心肌损伤

目的：：探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA对阿霉素( Adriamycin,ADR)引起的心肌损伤的保护作用。方法：健康雄性SD大鼠随机分为4组：生理盐水对照组( CON)、ADR处理组( ADR)、TSA处理组(TSA)、TSA和ADR共处理组(TSA+ADR)。 ADR组腹腔一次性注射ADR(20mg/kg)；TSA组一次性腹腔注射TSA(0.1 mg/kg)；TSA+ADR组在注射ADR的前一天一次性腹腔注射TSA,一天后腹腔一次性注射ADR；CON组同期腹腔注射同等体积的生理盐水。处理后继续饲养15天。大鼠麻醉后在体测量左心室功能参数,然后取心脏行HE染色,tunel染色观察心肌的形态学变化。结果：ADR可明显降低大鼠左室收缩峰压LVSP、左室发展压LVDP、收缩期左室压力上升大速率+DP/dt和舒张期左室压力下降大速率DP/dt；提高大鼠左室舒张末期压LVEDP；不改变基础血压和心率；阿霉素( ADR)可造成明显心肌形态学损伤,从用药第5天开始心肌凋亡细胞明显增多。第十四天大量心肌细胞凋亡,光镜可见心肌细胞核固缩和碎裂, tunel染色凋亡率增加,达30%以上。预先给予组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA,可以抑制ADR引起的心肌形态学损伤,减少凋亡细胞。 TSA预处理可以明显阻断阿霉素的上述效应。结论：本研究证实ADR处理可导致大鼠心功能明显下降,心肌出现形态学改变；组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA预处理可以改善由ADR引起的心功能及形态学损伤。本研究结果为有效消除ADR等化疗药物的心脏毒性提供了实验依据。

Objective:MicroRNAs ( miRNAs) function as key regulator of gene expression and their dereg-ulation play critical roles in tumorigenesis and metastasis of various cancers. The purpose of this study is to identify miRNAs targeting DAB2IP and to determine their expression and function in bladder cancer (BC). Methods and Results:We first predicted candidate miRNAs targeting Disabled homolog 2- interaction protein ( DAB2IP) and then determine their expression and biological function in BC. We showed that miRNA-556-3p directly regulated DAB2 IP expression by binding to DAB2 IP 3 '-UTR and endogenous miRNA-556-3 p expression was significantly up-regulated in clinical samples of BC patients and BC cell lines in comparison to the controls. Conversely, simul-taneous DAB2IP expression in BC tissues and BC cell lines was remarkably down-regulated. Gain or loss function showed that enhanced miRNA-556-3p expression by Lv-miRNA-556-3p transfection promoted proliferation,in-vasion, migration, and colony formation of BC cells, whereas repressed miRNA-556-3p expression by Lv-sh-miRNA-556-3p transfection resulted inan opposite results. Importantly,restored DAB2IP expression by "rescue"assay could attenuate the promotion effect induced by miRNA-556-3p. Further investigation verified that overex-pressed miRNA-556-3p in BC cells not only decreased DAB2IP expression, but also dramatically increased Ras-and pERK1/2 protein expression. In conclusion, our results suggested that DAB2IP was a direct target of miRNA-556-3p, and endogenous miRNA-556-3p expression was reversely correlated with simultaneous DAB2IP expres-sion in BC tissues and cells. Conclusions: MiRNA-556-3p, as a tumor promoter, functioned in tumorigenesis and metastasis of BC via targeting DAB2IP. Moreover, miRNA-556-3p mediated DAB2IP suppression played an oncogenic role by activation of Ras-ERK pathway partially.

Enhancer of zeste homolog 2 ( EZH2 ) is a key epigenetic regulator that catalyzes the trimethyla-tion of H3K27 and is modulated by post-translational modifications (PTMs). However, the precise regulation of EZH2 PTMs remains elusive. We, herein, report that EZH2 is acetylated by acetyltransferase P300/CBP-associat-ed factor (PCAF) and is deacetylated by deacetylase SIRT1. We identified that PCAF interacts with and acetylates EZH2 mainly at lysine 348 (K348). Mechanistically, K348 acetylation decreases EZH2 phosphorylation at T345 and T487 and increases EZH2 stability without disrupting the formation of polycomb repressive complex 2 ( PRC2 ) . Functionally, EZH2 K348 acetylation enhances its capacity in suppression of the target genes and promotes lung cancer cell migration and invasion. Further, elevated EZH2 K348 acetylation in lung adenocarcinoma patients pre-dicts a poor prognosis. Our findings define a new mechanism underlying EZH2 modulation by linking EZH2 acety-lation to its phosphorylation that stabilizes EZH2 and promotes lung adenocarcinoma progression.

Mutations of integrin-interacting protein Kindlin-1 cause Kindler Syndrome and deregulation of Kindlin-1 is implicated in human cancers. The Kindlin-1-related diseases are confined in limited tissue types. However , Kindlin-1 tissue distribution and the dogma that governs Kindlin-1 expression in normal human body are elusive. This study examined Kindlin-1 expression in normal human adult organs, human and mouse embryonic or-gans by immunohistochemical analyses. We identified a general principle that the level of Kindlin-1 expression in tissues is tightly correlated with the corresponding germ layers from which these tissues are originated. We com-pared the expression of Kindlin-1 with Kindlin-2 and found that Kindlin-1 is highly expressed in epithelial tissues derived from ectoderm and endoderm, whereas Kindlin-2 is mainly expressed in mesoderm-derived tissues. Like-wise, Kindlin-1 was also found highly expressed in endoderm/ectoderm-derived tissues in human and mouse em-bryos. Our findings indicate that Kindlin-1 may play an importance role in the development of endoderm/ectoderm related tissues.

Objective:To re-examine the detailed anatomy of the muscular system at the bladder neck and proximal urethra in the male and to explore its function in urinary continence and micturition further. Methods:The pelvic organs, including bladder, prostate, and rectum, were obtained from 20 formalin-fixed adult male ca-davers and were removed from the pelvic cavity and embedded in celloidin in their entirety. The embedded block was cut into successive slices with an immersing-alcohol microtome. Results:Circular muscle fibers of the detrusor at the bladder outlet consist of the anterior downward projected circular muscle fibers of the bladder outlet ( AD-PC) , the bilateral accumulated circular fibers, and the posterior circular fibers of the bladder outlet. Together, these fibers concentrically surround the internal urethral orifice and trigone muscle. The lower part of the ADPC surrounds the ventral surface of the proximal urethra. Longitudinal muscle fibers are radially inserted into the circu-lar muscle around the internal urethral orifice. Numerous fibers from the ventral longitudinal muscle are inserted in-to the lower part of the ADPC. The upper part of the trigone muscle exists in bladder cavity;the lower part extends into the proximal urethra to surround the posterior and posterolateral surface of the urethra. Conclusions:The AD-PC and the upward extension of the rhabdosphincter comprise the anterior fibromuscular stroma. The circular mus-cle of the bladder outlet may be responsible for closure; the longitudinal muscle of the bladder outlet may be re-sponsible for opening of the internal urethral orifice and proximal urethra.

抗辐灵对微波辐射致大鼠睾丸损伤的治疗作用及机制研究

目的：：探讨抗辐灵对微波辐射致大鼠睾丸组织损伤的治疗作用及其机制。方法：二级Wistar雄性大鼠120只,随机分为正常对照组,辐射对照组,阳性对照组,小、中和大剂量药物组,每组20只。各组大鼠于辐射后当天开始灌胃给药,每天1次,连续14d,给药浓度分别为3、1.5和0.75g/kg/d；A组给予1.5 g/kg/d安多霖；N组和R组均给予等比体积的蒸馏水。各组大鼠分别于30 mW/cm2微波辐射后7 d、停药后6h(辐射后14d)和停药后7d(辐射后21d),用1%戊巴比妥钠经腹腔注射麻醉处死大鼠,HE染色观察精子畸形率,光镜和电镜观察大鼠睾丸组织形态学和超微结构改变；SCA精子图像分析系统检测大鼠精子活力和运动参数,酶标仪检测睾丸组织中过氧化指标活ROS、MDA、抗氧化酶活性指标SOD。结果：30 mW/cm2微波辐射后睾丸组织生精小管生精上皮疏松,生精细胞变性、坏死、脱落,精子明显减少；低剂量药物组与辐射对照组睾丸组织结构损伤特点、规律相似,程度较轻。中剂量药物组仅见部分生精小管生精上皮疏松；高剂量药物组和阳性药对照组同中剂量药物组病变特点,规律相似。微波辐射后大鼠睾丸组织生精细胞染色质凝集边移,线粒体肿胀空化,中剂量组结构基本正常。辐射后7-14d,精子畸形率升高,中剂量、高剂量和阳性药对照组精子畸形率均下降。微波辐射后14d,精子AR 和A+B 级精子减少,D 级精子增加；精子运动参数下降；与辐射对照组相比,阳性药组,中、大剂量组A+B 级精子明显增加,C 级精子减少,中剂量组D 级精子减少,精子运动参数随着精子AR 的增加不同程度的增加。微波辐射后睾丸组织中ROS、MDA 含量升高,SOD 活性下降；与辐射对照组相比,中、大剂量组于给药后ROS、MDA 含量下降,SOD 活性升高。结论：30 mW/ cm2微波辐射可引起大鼠睾丸结构和功能损伤,氧化应激加强；给予低剂量抗辐灵对上述损伤有一定治疗作用,中和高剂量抗辐灵具有较明显治疗作用；抗辐灵可通过提高大鼠睾丸组织抗氧化酶SOD 活性,清除睾丸组织内过多的自由基及MDA 含量,抑制脂质过氧化反应,从而拮抗微波辐射导致的大鼠睾丸组织损伤,并且促进损伤的恢复。

c-kit信号在人结直肠黏液性腺癌发生发展中的作用机制研究

结直肠癌是目前危害人类健康较为常见的恶性肿瘤之一；其发病率和致死率分别位居所有恶性肿瘤的第三位和第四位。结直肠黏液性腺癌( colorectal mucinous adenocarcinoma, CRMAC )约占结直肠腺癌的20%；其肿瘤组织内含有大量的细胞外黏液,肿瘤恶性程度高,侵袭及转移能力强,因此,该类型肿瘤患者预后较差。有关CRMAC的发病机制仍未明了。近年来的报道表明受体酪氨酸激酶( RTKs)家族与多种类型的黏液性腺癌的发生发展密切相关。 c-kit属于该家族成员,在与其配体SCF结合后可激活下游的信号通路,进而调节细胞的生物活性。研究证实,高表达c-kit蛋白的结直肠肿瘤增殖和浸润能力均较强,且患者预后很差。据此,我们推测c-kit信号很可能在CRMAC发生发展过程中也起到一定的作用。本研究利用野生型C57 BL小鼠和c-kit功能缺失突变小鼠( Wads-/-),通过腹腔注射AOM及喂食DSS的方法成功建立了CRMAC动物模型,同时利用人结直肠癌细胞系HCT-116,探讨了c-kit信号在CRMAC发生发展过程中的可能调控机制。 AOM+DSS诱导37周后,HE染色、Alcian blue染色和MUC2免疫荧光染色证实所有野生型(15只)和Wads-/-(5只)小鼠均发生了结直肠腺癌,其中约50%的野生型小鼠为CRMAC,而无一例Wads-/-小鼠为CRMAC,且 CRMAC 肿瘤细胞恶性程度更高、穿透基膜浸润至黏膜下层。在野生型小鼠的CRMAC中,c-kit活性及其下游的促黏液分泌因子Math1的表达均较非CRMAC和正常小鼠黏膜上皮显著增高,提示c-kit可能通过上调Math1的表达促进CRMAC的发生。在体、离体实验均表明过表达c-kit还可抑制p53、同时增加cyclin D1的表达进而促进CRMAC细胞的增殖,并且可通过上调ETV4的表达来增强肿瘤细胞的迁移和侵袭能力；反之,运用Imatinib抑制c-kit活性后,肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力均受到明显的抑制。综上,本研究初步证明了c-kit可以促进CRMAC的发生、增殖和侵袭,为该疾病的临床诊疗提供了新的理论依据和治疗靶点。

7-12岁儿童颈椎间盘的影像学三维形态测量研究

目的：：本实验通过将影像学扫描数据进行多平面重建并测量颈椎间盘及其相关结构,探索7-12岁儿童颈椎间盘、髓核及相关结构发育情况和增龄规律。收集自2012年9月起行多层螺旋CT( MSCT)扫描,包含完整颈椎结构的健康儿童影像资料共103例,将原始数据经Mimics软件行多平面重建,在正中矢状面调节优对比度后行颈椎椎间盘各指标测量包括：(1)椎间盘高度(前、中、后),椎间盘正中矢径,椎体中高、正中矢径,髓核高、髓核矢径及髓核中心至椎间盘前缘、后缘距离；(2)计算比值：髓核矢径/椎间盘正中矢径,髓核高/椎间盘中高,椎间盘正中矢径/椎体正中矢径,椎间盘中高/椎体中高,髓核中心至椎间盘前缘距离/后缘距离。按年龄、节段分组后行统计学分析。结论：1.各测量指标总体随着年龄的增长呈递增趋势,同一椎间盘内前高、后高差异明显,7-12岁时期颈椎间盘前厚后薄的形态已经形成。2.椎间盘正中矢径、椎体中高及椎体正中矢径同时随年龄、椎序增加而数值增大,以下颈椎为著,符合力学要求,可增加颈椎稳定性。3.椎间盘正中矢径/椎体正中矢径,椎间盘中高/椎体中高两者比值随着年龄增加出现先降低后升高趋势；提示椎间盘与椎体在矢状长度与高度两方面的生长节奏并不完全同步。4.髓核中心至椎间盘前缘、后缘距离之比可提示髓核在椎间盘内的位置关系,且与7-12岁儿童颈椎曲度有着密切联系。

基于 CT和 MRI数据建立人脊柱腰段三维有限元模型

目的：：本研究旨在利用CT及MRI图像DICOM数据对正常人脊柱腰段主要结构进行三维重建，然后对模型进行网格划分和材料属性设定使其成为有限元模型并验证模型的有效性。方法：选取一健康成年男性志愿者进行CT和MRI扫描采集数据，以DICOM格式存储入可读写光盘。利用Mimics14.0软件依据CT数据重建L1~L5椎骨及骶骨上部的三维模型，依据MRI数据重建L1~L5椎间盘髓核的三维模型。将所建模型导入Geomagic12.0软件中对位组装，并生成椎间盘模型和韧带模型。将所有模型导回Mim-ics14.0中组装并自动划分面网格和体网格。将模型导入Ansys13.0中设定材料属性，重划网格，设置接触关系，对第五腰椎椎体和下关节突关节面进行约束。在Ansys13.0中对模型的L4~L5节段分级加力验证模型有效性。结果：建立了人脊柱腰段的三维模型及有限元模型，包含L1~L5的椎骨、5个椎间盘、骶骨上端、前纵韧带、后纵韧带等重要结构。该模型与脊柱标本相比具有较高相似性且可以进行有限元力学分析。结论：基于CT、MRI图像DICOM数据通过Mimics14.0、Geomagic12.0和Ansys13.0软件可以重建出人体脊柱腰段的椎骨、椎间盘等结构的三维模型和有限元模型。三维模型解剖结构相符度高，有限元模型准确有效，可以用于有限元分析。

BDNF通路介导经颅磁刺激影响老龄小鼠脑海马神经元突触可塑性

目的：：海马突触可塑性降低与脑老化引起的认知功能降低密切相关。已知突触结构功能可塑性是认知的生物学基础,突触蛋白的变化可反映突触结构变化,而突触蛋白上游的调控因子及作用通路不明。经颅磁刺激( TMS)作为无痛、非侵入性的理疗手段,临床可改善神经系统与精神疾病的认知障碍,而基础研究初步证实其与神经重塑相关,但作用机制不明。方法：以15月龄雄性Swiss小鼠为研究对象,实施低频(1Hz)TMS,观察老龄动物空间学习认知行为(Morris水迷宫)、海马突触形态(突触超微结构)、突触蛋白(SYN、GAP43)及上游信号通路(BDNF通路)表达情况。结果：本研究行为学结果表明,TMS可改善老龄小鼠空间学习与记忆能力的损伤；透射电镜( TEM)结果显示TMS可改善老龄小鼠脑海马神经元的生存状态,并影响突触超微结构(增加海马突触密度和PSD平均厚度)；分子生物学结果显示, TMS可上调突触蛋白SYN、GAP43免疫阳性产物表达与转录,并激活BDNF-TrkB通路；相关性统计学分析证实BDNF表达转录与认知呈正相关。结论：上述结果提示TMS可能通过BDNF信号通路调节小鼠海马神经元突触蛋白表达、影响突触超微结构、改善认知行为。本研究从海马突触重塑角度揭示TMS改善老龄脑认知能力的作用,从突触形态、突触神经递质传递能效及突触信号转导通路的变化等多层次阐明磁刺激影响可塑性的机制,明确TMS对神经网络重建和再生的作用。

内质网应激反应与人卵巢癌细胞顺铂耐药性关系的实验研究

目的：：探讨顺铂敏感的人卵巢癌SKOV3细胞与顺铂耐药的卵巢癌SKOV3/DDP细胞之间内质网应激的差异及其与顺铂敏感性的关系。方法：采用人卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞,给予顺铂进行体外实验。 Hochest33342染色,激光共聚焦显微镜观察细胞核形态。免疫荧光结合免疫印迹技术检测内质网应激标志蛋白Grp78和PDI的表达。用钙离子敏感的荧光探针Flour-4/AM和Rhod-2/AM分别检测人卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞浆和线粒体钙离子含量变化。结果：MTT法检测人卵巢癌SKOV3和SK-OV3/DDP细胞生存率,两种细胞对顺铂的敏感性存在明显差异, SKOV3细胞对顺铂敏感性显著高于SK-OV3/DDP细胞；Hochest33342染色结果显示顺铂(6μg/ml)作用24h,可以引起SKOV3细胞发生明显的凋亡,而SKOV3/DDP细胞无明显变化；顺铂作用SKOV3细胞,导致Grp78和PDI的表达明显增加,内质网应激介导的凋亡信号分子CHOP、Caspase-4表达增加,线粒体Cyt C的释放以及Caspase-3的活化增加,而SK-OV3/DDP细胞无明显变化；顺铂作用于SKOV3细胞,引起胞浆和线粒体钙离子含量的显著增加,而SKOV3/DDP细胞无显著变化。结论：顺铂敏感性不同的人卵巢癌细胞,其在顺铂作用下的内质网应激反应存在显著差异,顺铂敏感的细胞其内质网应激强度高,并且其在顺铂作用后的胞浆和线粒体钙离子明显升高,内质网应激途径和线粒体途径凋亡被激活,这些结果表明卵巢癌顺铂耐药可能与内质网应激耐受有关。

MiR-128对肺癌发生发展及血管和淋巴管生成的影响及机制研究

目的：：探讨miR-128对非小细胞肺癌发生发展及血管和淋巴管生成的影响及相关机制。方法：RT-PCR检测肿瘤组织及细胞miR-128的表达；应用慢病毒表达载体建立稳定表达miR-128的非小细胞肺癌细胞株；裸鼠移植瘤治疗实验证实ERK,AKT 和p38信号通路的磷酸化活性降低,进而阻断了上述信号通路。结果：miR-128在肺癌细胞株和非小细胞肺癌组织中表达下调,并且与非小细胞肺癌的分化程度、病理分期和淋巴结转移相关。异常的miR-128高表达可明显抑制肺癌细胞株的体外增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力,并且诱使细胞发生G1期细胞阻滞和凋亡发生。更重要的是,荧光素酶系统证实了miR-128与VEGF-C的靶向关系,miR-128的高表达促使了肿瘤细胞VEGF-C的表达下调和VEGF-C 3'UTR荧光素酶活性降低,导致了调控肿瘤血管和淋巴管生成的VEGF家族因子VEGF-A, VEGFR-2和VEGFR-3的表达下调,使得ERK,AKT 和p38信号通路的磷酸化活性降低,进而阻断了上述信号通路。而且裸鼠移植瘤治疗实验证实,体内恢复miR-128的高表达,可抑制肿瘤的体内生长及血管和淋巴管的生成。结论：miR-128在非小细胞肺癌的发生中起着重要作用,至少可以通过靶向调控VEGF-C表达来同时控制肿瘤的血管和淋巴管生成及相关信号通路,体内恢复miR-128的高表达有望成为非小细胞肺癌治疗的新策略。

Objective:The second heart field ( SHF) , foregut endoderm and sonic hedgehog ( SHH) signa-ling pathway are associate with normal morphogenesis and septation of outflow tract ( OFT) . However, the morpho-logical relationships of the development of foregut endoderm and expression of SHH signaling pathway members with the development of surrounding SHF and OFT are seldom described. In this study, serial sections of mouse embryos from ED9 to ED13 ( midgestation) were stained with a series of marker antibodies for specifically highlighting SHF ( Isl-1 ) , endoderm ( Foxa2 ) , basement membrane ( Laminin ) , myocardium ( MHC ) and smooth muscle (α-SMA) respectively, or SHH receptors antibodies including patched1 (Ptc1), patched2 (Ptc2) and smoothened, to observe the spatiotemporal relationship between them and their contributions to OFT morphogenesis. Results: Our results demonstrated that the development of an Isl-1 positive field in the splanchnic mesoderm ventral to foregut, a subset of SHF, was closely coupled with pulmonary endoderm or tracheal groove, the Isl-1 positive cells sur-rounding pulmonary endoderm were distributed in a special cone-shaped pattern and contributed to the formation of the lateral walls of the intrapericardial aorta and pulmonary trunk and the transient aortic-pulmonary septum, and Ptc1 and Ptc2 were exclusively expressed in pulmonary endoderm during this Isl-l positive field development, suggesting special roles played in inducing the Isl-l positive field formation by pulmonary endoderm. Conclusions: Pulmonary endoderm plays a role in the development and specification of SHF in midgestation, and that pulmonary endoderm-associated Isl-l positive field is involved in patterning the morphogenesis and septation of the intrapericardial arterial trunks.

大鼠蛛网膜下腔出血后 SCH79797对血脑屏障的保护作用

目的：：蛛网膜下腔出血( subarachnoid hemorrhage, SAH)后,血浆凝血酶含量明显增加。但是,凝血酶受体(protease-activated receptor-1,PAR-1)对血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的影响还不清楚。本文欲探讨PAR-1抑制剂SCH79797是否对大鼠SAH后BBB具有保护作用。方法：应用SD大鼠建立SAH模型,SCH79797腹腔注射。 SAH后24h,对大鼠脑水含量、神经功能等进行评估。应用Western blot和免疫印迹等方法探讨SCH79797的作用机制。结果：经SCH79797治疗的SAH大鼠脑水含量明显下降,神经功能有所恢复。 PAR-1水平下降,VE-Caderin表达增加。在SAH后,PAR-1下游蛋白c-Src和PAK-1使VE-Caderin磷酸化增加,与β-arrestin-2结合增多而被内噬,而SCH79797可以减轻上述病理过程。结论：在SAH后,SCH79797可以通过抑制PAR-1活性对BBB发挥保护作用。

脉冲性关节机械加载通过促进大鼠骨髓间充质干细胞偶联血管形成和骨形成

我们研发的脉冲性关节机械刺激是以一定加载频率对大鼠滑膜关节如肘、膝和踝进行的机械刺激,可以引起骨的相关合成代谢反应。前期研究证实,关节机械加载通过Wnt3 a/Lrp5、OPG等信号通路,诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化,调控血管内皮细胞并促使血管生成；同时抑制破骨细胞骨吸收,促进成骨细胞骨形成,使骨重建和血管重建偶联作用,治疗骨科相关疾病。例如,肘关节机械刺激能促进大鼠上肢尺骨和肱骨的纵向延长；膝关节机械刺激能够通过Wnt3 a/Lrp5等信号通路促进下肢骨生长和调整肢体长度,加速骨损伤的愈合,还能促进股骨颈的骨折愈合。并且,关节机械刺激还降低关节炎的炎性反应、修复关节损伤。因此,关节机械刺激是一种提高骨形成和软骨保护的有效手段。近期研究发现在股骨头缺血性坏死大鼠模型大鼠中,膝关节机械加载使股骨的骨密度和股骨头的骨小梁体积分数明显升高,骨髓来源的成骨细胞和成纤维细胞分化能力明显增强；同时,股骨头内血管面积和血管密度明显增加。另外,相关性分析发现,股骨头缺血性坏死模型中血管面积与骨矿密度、骨矿含量和骨小梁体积分数呈明显的正相关(相关系数分别为：r=0.901,0.918和0.924)；血管密度与骨矿密度、骨矿含量和骨小梁体积分数也呈明显的正相关(相关系数分别为：r=0.891,0.898和0.920)。本课题证实大鼠股骨头缺血性坏死是由于局部缺血引起微循环障碍,破骨细胞活跃,骨吸收增强,进而导致股骨头坏死。膝关节机械加载通过促进股骨头缺血性坏死大鼠的骨髓间充质干细胞分化,引起血管重建,增加坏死部位的血流供应及血管再生,进而抑制破骨细胞的骨吸收,增强成骨细胞分化的骨形成,使坏死的股骨头得到明显修复。总之,股骨头缺血性坏死大鼠模型验证脉冲性关节机械加载的治疗机制是通过促进骨髓间充质干细胞同时作用于血管重建和骨重建,表明血管生成和骨形成密切相关。本项目为相关骨科疾病的治疗开辟了新思路。

Objective:To study the protection of acanthopanax senticosus injection to sciatic nerve injury in rats. Methods:SD rats were randomly divided into normal group, model group, treatment group 1 (20mg/kg. d), treatment group 2 (40mg/kg. d). The left sciatic nerves of rats were performed with chucking method to estab-lish sciatic nerve injury model, injection continued for 6 weeks from then on. Observe the temperature of left foot skin, the rat sciatic nerve function index ( SFI) , the sciatic nerve conduction velocity ( SNCV) and the morpholog-ical changes of nerve tissue, immunohistochemical staining and Western Blot were used to observe the expression of nerve growth factor. Results:Acanthopanax senticosus injection (20mg/kg. d, 0mg/kg. d) can raise the rat skin temperature, promote the function recovery of sciatic nerve, accelerate the conduction velocity of sciatic nerve, make the morphological changes of nerve tissue better, increased the expression of nerve growth factor, and there was a significant difference between this two treatment groups. Conclusions:Protective effect of acanthopanax sen-ticosus injection on peripheral nerve injury in rats may be associated with promoting the expression of nerve growth factor.

NgR对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的影响

视网膜神经节细胞( RGC)轴突形成了视神经,RGC凋亡是糖尿病视网膜病变( DR)的主要病理表现之一。 Nogo蛋白受体( NgR)能抑制神经再生,NgR表达上调是多种致盲性疾病RGC凋亡的主要机制。本研究利用链脲佐菌素诱导了糖尿病大鼠模型,构建了抑制NgR表达的siNgR腺病毒。结果发现,在视网膜NgR仅存在于RGC细胞内,糖尿病大鼠视网膜变薄, RGC数量减少,凋亡增加,突触数量降低, NgR的下游分子ROCK蛋白及NR2 B随着NgR的表达增加而上调。糖尿病大鼠玻璃体内注射重组腺病毒抑制NgR表达之后,能恢复糖尿病大鼠视网膜的病理变化。进一步的离体研究发现, NgR/ROCK信号通路激活能导致RGC胞体缩小,突起萎缩；NgR/NR2 B信号通路激活,能导致RGC细胞活力下降甚至凋亡。因此我们认为,糖尿病状态下,NgR表达上调通过ROCK信号通路影响了视网膜RGC细胞形态,通过NR2B信号通路导致了RGC细胞凋亡,RGC数量和形态的变化影响了视网膜突触数量,这可能是DR视力受损的重要机制之一。

GHRP-6对心衰模型大鼠心肌细胞 PI3 K/Akt/Caspase-9信号通路调节作用

目的：：观察GHRP-6对心力衰竭模型大鼠心脏功能的调节作用和其对PI3 K/Akt/ Caspase-9信号转导通路的影响。方法：建立GHRP-6对心力衰竭模型大鼠心肌细胞的保护模型,比较PI3 K p110α、Akt p-Thr308和Akt p-Ser473在正常对照组、假手术组和模型组大鼠心肌细胞左心室后壁和室间隔心肌细胞内的表达。流式细胞术( FCM)检测模型组与正常对照组和假手术组大鼠心肌细胞的凋亡率。结果：在大鼠心肌细胞左心室后壁和室间隔心肌细胞内,模型组大鼠心肌细胞的PI3 K p110α、Akt p-Thr308和Akt p-Ser473阳性表达量较正常对照组和假手术组显著降低( P<0.05)；与正常对照组、假手术组和模型组大鼠心肌细胞的分别比较,GHRP-6治疗组大鼠心肌细胞的阳性表达量显著升高(P<0.05)。模型组大鼠心肌细胞的Caspase-9和Caspase-3阳性表达量较正常对照组和假手术组显著增高( P<0.05)；与正常对照组、假手术组和模型组分别比较,GHRP-6治疗组阳性表达量显著降低(P<0.05)。 FCM结果显示,模型组大鼠心肌细胞与正常对照组和假手术组比较,凋亡率显著升高( P<0.05)；GHRP-6治疗组与模型组比较,凋亡率明显降低( P<0.05)。相关程度分析显示, PI3 K p110α与Akt p-Thr308、p-Ser473蛋白阳性表达量均呈中度正相关；Akt p-Thr308、p-Ser473与Caspase-9蛋白阳性表达量均呈中度负相关；Caspase-9与Caspase-3蛋白阳性表达量呈高度正相关。结论：GHRP-6通过调控PI3 K/Akt/Caspase-9/Caspase-3信号转导通路,抑制心力衰竭模型大鼠心肌细胞凋亡,是其实现心肌细胞保护作用机制之一。

小鼠生后不同发育阶段海马和丘脑组织中TFF3的表达

目的：：了解小鼠生后不同时相海马组织中TFF3的表达规律。方法：本研究以生后P0、P1、P3、P5、P7、P9、P11、P13、P15、P17、P19、P21天昆明种小鼠为实验对象,参照王平宇的脑读片图片取大脑4-6段,进行石蜡包埋、切片厚6μm、HE染色和TFF3免疫组织化学染色,小鼠海马组织结构及该段核团进行定位及该段脑组织中TFF3的分布及变化。另取不同时相小鼠海马组织液氮冻存,提取组织总RNA,反转录,RT-PCR检测TFF3 mRNA的转录水平。结果：1. TFF3在海马CA1、CA2、CA3、CA4及齿状回神经细胞的细胞质与细胞核中均有表达,随时间推移,细胞质阳性信号增强,P15开始细胞核呈阴性表达,且CA1~CA4区阳性神经元减少；第三脑室和侧脑室脉络丛上皮、丘脑内侧背核、外侧背核、缰内侧核、外侧膝状体背核、丘脑后核、丘脑腹后内侧核、外侧核、中央内侧核等也呈TFF3免疫反应阳性,且表达趋势和海马相似；内囊有大量TFF3阳性纤维存在。2.随着个体的发育,P15后海马组织中TFF3mRNA的表达量逐渐减少,与P1~P13相比P<0.01。结论：TFF3参与小鼠海马和丘脑各核团的发育,表达模式随出生时间推移TFF3表达逐渐减少。

Objective:Iron is an essential element in all living organisms and is required as a cofactor for oxygen-binding proteins. Iron metabolism, oxygen homeostasis and erythropoiesis are consequently strongly inter-connected. In mammalian cells, exposure to a low-oxygen environment triggers a hypoxic response pathway cen-tered on the regulated expression of the hypoxia-inducible transcription factor ( HIF) . Hypoxia has been shown to increase the expression of a variety of proteins involved in iron homeostasis. However, little is known about brain iron metabolism after intermittent hypobaric hypoxia ( IHH) treatment. In this study, adult Sprague dawley ( SD) rats were treated with IHH for 28 days, 8h per day and then we detected iron homeostasis in different brain areas of SD rats. Results:The protein level of hippocampus transferrin receptor 1 ( TfR1 ) , divalent metal transporter 1 (DMT1) with IRE, DMT1 (-IRE), ferritin-H, iron regulatory protein (IRP) 2 and ceruloplasmin (CP) is ele-vated significantly while ferritin-L decreased. We have also found the down regulation of IRP1. We observe the same results in the cerebral cortex in the brain. Conclusions:We first discover that IHH has an influence on the brain iron homeostasis and the decreased ferritin-L corresponds to the down regulation of IRP1 indicating hypoxia can affect the expression of ferritin-L through IRE/IRP system. Although there is a marked increase in TfR1 ex-pression that would lead to the raised level of LIP in cells. It can finally result in the higher ROS which can damage the cells. The concerned mechanisms involved in it remain to be deliberated.

脉冲式关节机械加载治疗股骨头坏死研究进展

股骨头坏死是骨科领域常见的疾病。它是由于创伤或非创伤因素,导致股骨头塌陷,骨组织结构改变的一种难治性疾病,临床以髋关节疼痛、功能障碍为主要表现。全世界现有股骨头坏死患者2000多万例。其中,我国有500万-700万；而西方国家,尤其是欧洲地区,股骨头坏死已占骨科疾病的近30%,日本每年也有2500-3000例新发病例。股骨头坏死多发于中青年人,且有年轻化的趋势,迫切需要有效的治疗方法。股骨头坏死的病程进展很快,前期研究表明,没有经过系统治疗的股骨头坏死患者,4年内发生股骨头塌陷的患者至少占80%。股骨头坏死的治疗可以分为手术治疗和非手术治疗。手术治疗包括减轻股骨头的力学载荷压力,如旋转截骨,或增加坏死区的修复能力,如髓芯减压。晚期治疗方法主要为人工髋关节置换,但是人工关节寿命有限。非手术治疗主要包括药物治疗,脉冲电流治疗,中药治疗和体外磁场治疗等,但疗效较差,疗程较长,主要适用于早期股骨头坏死的患者。目前,对于股骨头坏死的研究很多,但是远期效果并不明显。临床急需既适用于早期防治,又有效于晚期控制的保守治疗方法。近有文献报道,机械加载通过调节骨代谢,促进骨重建,从而治疗骨科疾病。我们研发的脉冲式机械刺激是以一定刺激频率对滑膜关节如肘、膝和踝进行的机械刺激,可以引起骨的相关合成代谢反应。肘关节机械刺激能促进上肢尺骨和肱骨的纵向延长；膝关节机械刺激除了能够促进下肢骨生长和调整肢体长度,还可以加速骨损伤的愈合,特别是膝关节的刺激能促进股骨颈的骨折愈合。因此,关节机械刺激是一种提高骨形成并修复骨损伤的有效手段。我们的近期研究发现,机械加载还能刺激骨髓干细胞向成骨细胞的分化,促进骨重建,并抑制破骨细胞发育和骨吸收。但运用关节机械加载如何通过调控干细胞分化治疗股骨头坏死,国内外尚缺乏相应的研究。因此,我们下一步的工作将阐明关节机械加载治疗股骨头坏死的机制。

甲状腺肿瘤的流行现状及危险因素研究

目的：：探讨甲状腺肿瘤流行现状，分析相关危险因素。结果：甲状腺肿瘤的发病率近年来呈快速上升趋势，其发病与多种因素有关。甲状腺良性疾病、甲状腺肿瘤家族史、碘摄入过量、辐射暴露、超重或肥胖患者是甲状腺肿瘤的危险因素。其它甲状腺肿瘤发生的影响因素，尚缺乏有力的证据证明相关性，需要展开广泛深入的研究。结论：甲状腺肿瘤发病率的升高是多因素共同作用的结果，目前，尚缺乏大规模的甲状腺肿瘤流行病学调查和病因学研究。面对逐年升高的甲状腺肿瘤发病趋势，应该加强甲状腺疾病流行病学的调研工作，积极寻找患病的危险因素，分析危险因素的流行情况以及预测肿瘤的发展趋势，为甲状腺肿瘤的防止提供科学依据。加强预防和针对高危人群进行定期体检，是甲状腺肿瘤防治的重要途径。

紧密连接蛋白 Claudins在乳腺癌肝转移中研究进展

肝是众多恶性肿瘤血道转移的常见靶器官,肝转移又和脑转移、骨转移以及肺转移等关系密切,目前认为,它是脑转移之外的生存率低的转移癌。近来研究表明,紧密连接蛋白claudins是转移癌发生过程中的主要调控分子,也是调控肿瘤生物学行为的重要靶点。乳腺癌肝转移过程中起重要作用的是claudin-2、claudin-4和claudin-12,其分别在增强乳腺癌细胞与肝细胞的黏附能力、血管生成拟态及IL-18的相互调节中发挥重要作用。

靶向破骨细胞的骨质疏松治疗药物研究进展

骨质疏松是由多种因素造成的以骨量减少、骨小梁显微结构退化导致骨强度降低为特征的全身性骨骼退行变化，患者常有腰背部或者全身无特征性疼痛，脆性骨折及呼吸系统受影响等症状。骨质疏松是全球性的慢性病。2014年美国休斯敦美国骨矿盐研究会年会报道，美国将会有1/2的老年女性以及1/3的老年男性将会发生骨质疏松性骨折。据调查，巴西绝经后骨质疏松患病率为15%-33%，我国人群40岁以上骨质疏松患病率约20%。骨质疏松患病率高，骨折率高，严重影响了中老年人的生活质量。目前骨质疏松的治疗主要有抗骨吸收与促骨形成治疗。抗骨吸收药物主要有双膦酸盐，雷洛昔芬，奥达卡替，狄诺塞麦等。其中双膦酸盐类药物是现在常用的药物，干扰破骨前体细胞附着；同时诱导破骨细胞凋亡，从而抑制骨吸收。但其长期使用有颚骨坏死，非典型性股骨坏死，损伤心血管系统，肾衰等风险。雷洛昔芬是选择性雌激素受体调节剂，可与不同雌激素受体结合，可以促使破骨细胞凋亡，抑制RANKL诱导的破骨分化，从而抑制骨吸收，但存在潮热与静脉血栓等副作用。狄诺塞麦是RANKL单克隆抗体，特异性阻断RANKL/RANK通路，促进破骨细胞凋亡，减少破骨细胞分化，抑制骨吸收。但是狄诺塞麦的长期疗效仍需进一步探究。奥达卡提是组织蛋白酶K抑制剂，可抑制破骨细胞功能，从而抑制骨吸收；其特异性高，可逃避溶酶体，体内半寿期较长，使用前景乐观。但仍需进一步实验数据评估其是否其对人体的不良效果。促骨形成的药物主要有甲状旁腺素类药物，其虽可重建骨微环境、增加骨密度，但价格昂贵且有肿瘤风险。随着对骨分子生物学的深入认识，靶定治疗骨质疏松的药物正在逐渐增多。不同药物具有不同的适应症，单一抑制骨吸收或促进骨形成都有其局限性。 Salubrinal是一种小分子量合成药物，可通过抑制真核翻译起始因子 eIF2α的去磷酸化，同时抑制破骨细胞发育。研究证明，此药是内质网应激的抑制剂，且对神经细胞、软骨细胞、肝细胞等均有积极作用。因此该药对骨质疏松的治疗前景十分乐观。至今，我们已证实Salubrinal对卵巢去势动物所致的骨质疏松具有增加骨密度和提高骨容积的疗效。但Salubrinal对骨质疏松治疗具体的分子机制至今未明。因此，下一步我们将继续研究Salubrinal治疗中的分子机制。

亚低温治疗神经损伤疾病的研究进展及前景

目的：：综合分析亚低温治疗方法在临床治疗神经损伤与疾病的应用及相关的临床及基础研究以及发展中存在的问题。方法：应用计算机检索 PubMed 及CNKI数据库2005年1月至2015年5月与亚低温治治疗神经损伤和疾病有关的文章，英文检索词为"The low temperature treatment of nerve injury and dis-ease"；中文检索词为"亚低温治疗神经损伤与疾病"，并限定文章语言种类为中文。共收集到320篇相关文献，排除内容陈旧或重复的文献，选用其中的38篇作为参考文献。结果与结论：亚低温，即(33+0.5)℃。近年来，利用亚低温方法治疗各种临床疾病的研究收到广泛的关注，尤其是在神经损伤领域，临床上出现了不少运用亚低温治疗神经损伤的临床病例，并且取得了良好的疗效。研究表明，亚低温可以改善受损组织的细胞微环境，减少创伤对组织造成的二次伤害；同时，亚低温也可以加速神经干细胞的增殖和分化。目前，已有许多有关亚低温治疗的研究，其实验结果均显示，与正常体温下的治疗效果相比，亚低温能够显著提升治疗效果。然而，有关亚低温提升治疗效果的机制，目前仍未清楚。与传统的治疗神经损伤的方法相比，亚低温治疗的实施过程更加简便易行，并且副作用较小，具有极大的临床应用优势，将来极有可能被临床广泛采用，成为治疗神经损伤的常规手段之一。

颈椎椎间盘有限元研究进展

随着现代社会人均寿命越来越长,我国逐渐步入老龄化社会,以椎间盘组织退变为基础的颈椎病的患病率也越来越高。已有研究显示,颈椎退行性疾病在60岁以上人群中,发病率超过50%,70岁以后几乎达到100%,中青年群体中由于不良工作和生活习惯发病率已超过10%,以上数据还在逐年攀升。因此,颈椎间盘退变已经成为一个值得医务工作者及科研人员深入研究的问题。随着计算机技术和有限元软件的快速发展,建立具有仿真性、可重复性等优势的椎间盘有限元模型成为研究颈椎领域受推崇的方法,藉此可以模拟颈椎间盘损伤、退变,优化手术方案,预测手术效果,以及进行人工椎间盘的开发。颈椎椎间盘的有限元研究在基础理论预测和临床应用方面都具有重要的应用价值。

脂肪来源干细胞-组织工程学的新亮点

脂肪来源干细胞( Adipose derived stem cells,ADSCs)是来源于脂肪组织,具有多向分化潜能的干细胞群。它贴壁生长,显微镜下呈长梭形。没有特定的表面标记物,除了CD45以外,与骨髓间充质细胞具有相同的表面抗原。经特定条件诱导,ADSCs有分化为脂肪、骨、软骨、神经、血管内皮等多种器官或组织的细胞的潜能,经免疫组化、RT-PCR技术、镜下观察及染色等方法可鉴定ADSCs具有该种器官或组织细胞的结构和功能。因此,常用作组织工程的种子细胞进行人工器官的再造或用作细胞治疗,来解决软骨组织工程、神经与皮肤的创伤和脂肪移植等临床方面的问题,并参与促进各种损伤的人体组织修复和再生。近年来,ADSCs已逐渐成为国内外新的干细胞移植的种子细胞来源。本文结合近年来的相关研究,就ADSCs的生物学特性、分化潜能与鉴定方法,国内外的研究进展、本实验室的工作积累及研究意义和所存在的问题等方面进行了综述。

DC-CIK细胞免疫治疗应用

目的：：研究DC-CIK在肿瘤中的应用,为DC-CIK的制备及临床细胞治疗技术探索便捷、高效和经济可行的方案。结果：树突状细胞( dendritic cells, DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞( Cytokine-in-duced killer cells, CIK)联合过继性免疫治疗因其具有高效的杀瘤活性,被认为是目前有前途的肿瘤免疫治疗手段之一。 DC与CIK共培养,构成了一个体外活化免疫体系,回输后能够有效地抵抗癌细胞对免疫细胞的抑制作用,发挥更持久的杀瘤活性,是主动特异性免疫治疗和过继免疫治疗相结合的典范。然而作为一个新的治疗手段,DC-CIK过继免疫治疗的方案和标准尚待进一步规范和统一。不良反应、应用时机、给药途径和方法等问题亦需要深入探讨。结论：DC-CIK已应用于多种恶性肿瘤的细胞免疫治疗中,众多研究表明在应用DC-CIK细胞免疫治疗后明显的延长了患者生存期、提高生存质量、并减少了肿瘤的复发和转移。随着DC-CIK过继性免疫治疗技术的不断改进和完善,DC-CIK必将成为新一代过继细胞免疫治疗的佳方法之一。

三阴性乳腺癌肝肺转移治疗的研究进展

乳腺癌是常见的严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一。每年全世界约有130万人被诊断为乳腺癌,而有约40万人死于该病。近年来,乳腺癌发病率在我国呈明显上升趋势,在城市妇女中,约30人中就有1人患乳腺癌,且以每年3%至4%的增长率上升。三阴性乳腺癌( TNBC)为雌激素受体( ER),孕激素受体( PR)和人表皮生长因子受体2( HER-2)均为阴性的乳腺癌,占乳腺癌的10%~15%,具有恶性程度高、易复发、生存率低的特点。三阴性乳腺癌远处转移率高,早期易发生内脏转移,以肺和肝转移多见,高转移率也是死亡率较高的主要原因。患肺转移后,中位生存期为12个月；而患肝转移后的中位生存期仅为1个月。目前,三阴性乳腺癌的治疗方案主要有：含铂类如TC方案(紫杉醇联合卡铂)；非铂类方案如单药紫杉醇或联合卡培他滨或蒽环类药物,FLN(氟尿嘧啶+甲酰四氢叶酸+长春瑞滨)方案,但均有明显副作用,且患者总生存率无明显改变,因此急需研究有效且副作用小的治疗药物和方法。内质网应激( ERS)可以激活未折叠蛋白反应( UPR ),以保护内质网应激引起的细胞损伤,早期内质网应激可促使细胞存活,但长时间或严重的内质网应激可诱导细胞产生凋亡等效应,这使得基于内质网应激的抗肿瘤药物研发成为了一种可能。 Salubrinal是一种化学合成药物,可选择性的抑制真核翻译起始因子2α( eIF2α)的去磷酸化,对抗内质网应激诱导的细胞凋亡,而起到细胞保护作用,通过内质网应激起到抗肿瘤作用成为一种可能。近研究表明,Salubrinal对三阴性乳腺癌表型的4 T1细胞系和MDA-MB-231细胞系有一定的抑制生长作用,但其对三阴性乳腺癌肝肺转移的作用还未见报道。因此,我们旨在通过建立乳腺癌的小鼠模型,探讨Salubrinal在乳腺癌肝肺转移过程中的作用及可能的机制,为寻找新的三阴性乳腺癌研究靶点、增强患者生存率提供新的思路。

脱细胞神经基质材料在周围神经修复中的研究进展

脱细胞神经基质是天然的神经支架结构，即采用适当方法去除同种异体(或异种)神经中的细胞及髓鞘成分，保留各层神经膜性结构支架。脱细胞基质构建的人工神经具有以下特性：可接纳神经轴突长入，对轴突再生起机械引导作用，残留部分生物活性因子。各种物理方法尽管取得一定的效果，但均无法清除细胞和髓鞘崩解产物，也即无法根本上降低移植物的抗原性，从而制约了这些方法的应用。应用三硝基甲苯X -100和脱氧胆酸钠溶液脱细胞较为彻底。既往研究表明，脱细胞神经进行宿主再细胞化后进行异体神经移植修复大鼠周围神经较短缺损，效果与不进行宿主再细胞化的脱细胞神经无显著性差异。在修复较短缺损(<3 cm)时，可能再细胞化意义不大，修复较长缺损(>3 cm)时，再细胞化可能会弥补宿主细胞迁移能力的不足。建立标准化、可普遍接受的动物实验研究模式非常必要。选择大动物为实验对象，力求尽可能接近人体生理功能；建立对损伤和修复效果的评估标准，获得大量有效、可靠的实验数据，将使实验研究成果更具实际意义和临床应用价值。

乳腺癌骨转移治疗的药物研究进展

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一。全球范围内每9-10个女性中就会有1个罹患乳腺癌,每年约有120万女性诊断为乳腺癌,约有50万人死于晚期乳腺癌,发达国家发病率明显高于发展中国家。中国自1990年开始乳腺癌发病率以每年3%的速度增长,已成为我国女性发病率和死亡率高的恶性肿瘤,且城市发病率高于农村,并呈年轻化趋势。乳腺癌转移发病率很高,约有70%以上的乳腺癌患者伴有骨转移,转移多发于下肢骨,远超过次常见的肝、肺等部位转移。乳腺癌骨转移患者常见的表现为骨痛、病理性骨折、脊髓压迫、高血钙症等骨相关事件,严重影响了其生活质量。罹患骨转移后,中位生存期只有2年,5年生存率只有20%。乳腺癌骨转移应尽早发现尽早治疗,以控制疾病的发生以及骨转移时间。目前治疗乳腺癌骨转移的主要药物为双磷酸盐和RANKL特异性抗体狄诺塞麦等,可减少骨转移患者骨相关事件、骨折以及骨痛的情况。然而,这些药物并没有减弱骨转移的发生,不能刺激新骨的形成,还会引起药物性下颌坏死等副作用,患者的生存率没有明显改变,因此研究新的治疗乳腺癌骨转移的药物具有重要意义。 Salubrinal 为化学合成药物,是一种真核翻译起始因子eIF2α的特异性磷酸酶抑制剂,可以抑制内质网应激介导的细胞凋亡。我们研究发现Salubrinal通过抑制eIF2α去磷酸化,促进成骨细胞形成,抑制破骨细胞发育,刺激新骨形成,增强骨损伤愈合。另有研究表明,Salubrinal对乳腺癌细胞系凋亡有促进作用,抑制肿瘤细胞生长。但是,在体内Salubrinal对乳腺癌的作用国内外尚无报道。因此,我们下一步的工作将阐明Salubrinal治疗乳腺癌和乳腺癌骨转移的作用及其相关机制。

诱导多能干细胞的研究进展

目的：：综合分析诱导多能干细胞的获取方法、临床科研应用及发展瓶颈。方法：应用计算机检索 PubMed 及CNKI数据库2005年1月至2015年2月与诱导多能干细胞有关的文章,英文检索词为"in-duced pluripotent stem cells"；中文检索词为"诱导多能干细胞",并限定文章语言种类为中文。共收集到540篇相关文献,排除内容陈旧或重复的文献,选用其中的45篇作为参考文献。结果与结论：文章从整合型和非整合型诱导重编程、提高诱导多能干细胞的转化率、诱导多能干细胞在临床治疗和科研的应用、存在的发展瓶颈等方面进行了阐述。研究发现通过逆转录病毒、慢病毒载体、重组蛋白诱导、小分子化合物诱导等方式可以获得诱导多能干细胞。其中,使用可降解的基因工程重组蛋白可以避免基因插入整合对细胞遗传物质的改变；使用一些小分子化合物替代部分重编程因子如原癌基因c-Myc,通过对TGFp、Notch等信号通路的调控可以在一定程度上提高重编程的效率,降低重编程致瘤的风险。同时,随着对重编程机制的深入研究和载体的不断进步,诱导重编程技术由原来的四基因( Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc,OSKM)诱导逐步发展为二基因诱导( Oct4、Klf4)、单基因( Oct4)诱导。诱导多能干细胞在自体移植、细胞和疾病模型建立有广阔的应用前景。在诱导多能干细胞的研究和应用中还需要解决以下的问题：采用基因水平和非基因水平的诱导方式来提高重编程效率,开发安全高效的标准化诱导方式；使用较少的转录因子组合实现干细胞的直接诱导重编程,减少多能干细胞系中的染色体亚组异常,降低致瘤风险；提高体外疾病模型与实际人体内疾病的拟合度,减短培育周期,降低成本,使其更好得适应临床治疗和药物开发需求。

肿瘤微环境在肿瘤治疗中的作用及研究进展

肿瘤微环境是由肿瘤细胞及其所赖以生存的场所组成，包括肿瘤相关巨噬细胞、肿瘤相关纤维细胞、髓源性抑制细胞、肥大细胞以及血管生成因子、细胞因子等，参与肿瘤的发生、进展、侵袭和转移等多个步骤，因此除了传统的治疗方式，研究肿瘤微环境是肿瘤治疗的一种新的探索方式。由于细胞外基质水平与化疗临床反应率呈负相关，表明肿瘤微环境作为肿瘤的“土壤”，与肿瘤进展和转移之间有重要关系，靶向188肿瘤微环境的治疗正在逐步成为研究热点，包括以新生血管为靶标的肿瘤治疗，肿瘤免疫疗法和逆转耐药的肿瘤增敏治疗。 Arjan W等近日经研究发现半乳凝素-1、半乳凝素-3、半乳凝素-8、半乳凝素-9均参与肿瘤新生血管内皮细胞的形成和相互连接，使得半乳凝素成为治疗肿瘤治疗的潜在靶点；Ralph M. Steinman于2011年因“发现树突状细胞及其在获得性免疫中的作用”获得了诺贝尔生理学或医学奖，使其成治疗恶性肿瘤的新的突破，目前树突状细胞免疫治疗已经用于200多项关于各项肿瘤的研究之中，此外，还可以通过给患者体内导入肿瘤抗原来激发患者的特异性抗肿瘤免疫反应，由于疫苗治疗具有特异性，在体内免疫效应维持时间长等优点，因此也成为研究热点；细胞外酸化的肿瘤微环境对肿瘤化疗产生关键影响，主要体现在对化学治疗药物的耐受，质子泵可以有效改善细胞外酸化进行逆转耐药的肿瘤增敏治疗，给肿瘤患者带来了一线曙光。

试题分析在组织学与胚胎学教学中的应用

本文的目的是通过试题分析评估试卷质量和试题质量,指导今后考试出题和教学实践。本次试题分析采用的软件是《南琼题库试卷分析》,分析的试卷是2013级临床医学专业学生《组织学与胚胎学》期末考试试卷,共计177份。试题分析的内容包括试卷质量和试题质量。分析结果显示试卷的整体难易度为0.74,区分度为0.41；难度区分度试题分布显示3道题的难易度>0.9且区分度<0.1。按题型分析的结果显示学生在英译汉的得分率低,为0.44,名词解释和填空题的得分率均低于平均得分率。试卷分析结果表明试卷整体难度适中,且能够较好地区分考生的实际水平。对于难易度较高而区分度较低的题目进行具体分析,发现确为应知应会的知识点,可继续作为考点进行考察。而不同题型的得分差异可以体现学生对相应知识的掌握程度。英译汉得分率低,可能是因为专业词汇较多,学生复习不充分,且未掌握有效的记忆方法,名词解释和填空题考察的知识点相对精细,学生得分率低可能是知识掌握模棱两可,不够准确。因此,在今后的考试出题时,教师要考虑题型的变化,对于应知应会易得分的知识点可采用填空、名词解释等方式进行细致的考察,对于难度较大的知识点可通过单项选择题的形式对学生进行一定的提示。在今后的授课中,教师应注重英文词汇的运用,并适当介绍英文词汇的记忆技巧,对于知识点的讲解要细致准确,把容易混淆的知识点采用比较、举例等方法进行强调,便于学生深刻记忆。

信息化学科资源的整合拓宽生殖医学教学素材视野

生殖医学教学改革包括教学目标高度、内容深度和广度和教学模式多元化,本文依托国家精品课程、电子书包、医药生命科学、科技工作者学术团体四大专业化网络信息平台以及网络期刊、报纸、新闻等,整合和挖掘基础、临床和科研知识点；其次搭建整合后素材网络平台,使之成为共分享、供下载的由教材向素材过渡的拓宽资源。通过整合网络平台学科资源,挖掘教学素材,拓宽教学视野,盘活生殖医学课堂教学,提升信息化资源价值,具备"教授"理论基础,“学习”提出、分析和解决问题的能力,“强化”自主学习意识,“坚守”教学效果评价,1+1大于2的效果,也为构建生殖领域多元广角化智库提供基础。

Human anatomy showroom is an important place for students to contact the theory with prac-tice, at the same time is also a window to exchange with other schools. How to make the high quality anatomy teaching resources to service the public? How to provide a place for medical practitioners' to continue learning? It is a subject that many anatomical workers have been studied all the way. This study is based on the human anatomy laboratory, and developing from basic construction, space layout to the design of Showcase and exhibition booth, sample production, writing materials and other aspects. Every link has been carefully argument and arranged. It puts science, knowledge, interest and artistry together. So we can build up the human's secret science museum to allow people to cognize human`s inner construction and open to primary and middle school students and the public. It has finally obtained good social and economic benefits.

As a complementary teaching way, ultrasonography is considered an important teaching tools and methods to improving medical students’ skills and understanding the real time human anatomy . We success-fully integrated ultrasound into anatomy teaching by using portable ultrasound and interactive panel discussion ses-sions. The integrated curriculum not only allows medical students to see the complexity real-time three-dimension-al human anatomy, but also can improve medical students’ interest in anatomy teaching. Integrated ultrasound into anatomy teaching established close ties between basic medical science and its clinical application, and overcome the phase difficulties of anatomical knowledge application from preclinical to clinical.

执行实验教学的标准化以保证解剖学实验教学效果

在目前高校重科研轻教学的实际情况下，为保证教学效果，我们进行了实验教学标准化方面的建设与实践，保证并提高了解剖实验教学的效果。1.对实验室进行标准化配置。包括更新和改造实验台、升级电子教学设备、增加和提升标本与模型的数量和质量、建立了现代化的陈列馆等方面，从硬件上夯实教学基础。2.教学内容的标准化。结合科研与临床实际，统一教学内容，对每次课的实验内容加以标准化，落实到了具体名词、结构及掌握程度，从而增加了学习内容的可控性，确保了实习效果。3.教学过程的标准化，教学过程采取(明确实验内容--学生自主实习--教师答疑讲授--课后反思领悟)四个阶段，既遵从了学习规律性，又增加了教学过程的可控性。4.师资的标准化。全体教学人员集体备课，新教师经培训、试讲、考核后上岗。5.教学主体的标准化。对教师的教学水平和教学工作量实施标准化，依实际情况明确和分配教学任务，体现公开与透明，避免了对教学的消极和应付。6.教学效果评估的标准化。科学的评价体系是教学效果的制度保证，我们建立教师相互听课评估制度、优秀教学方法的经验交流与示教制度、老教师不定期听课制度、学生互换实验室制度、学生对教学意见的反馈制度、实验效果考核制度、以及教研室专家组的检查监督制度，以保证教学效果的实施。总之，实行实验教学的标准化，使教学有章可依，目标清晰、过程明确，减小了教学的盲目性，确保了实际的教学效果。同时并未增加教学负荷，还减少了教师的教学思想负担，使教师更好的计划各自的科研时间。

肝门静脉教学新法的探索

目的：：探索医学本科人体解剖学肝门静脉教学新的方法,以取得佳教学效果。方法和结果：我们采用新的教学方法对延边大学14级临床医学、口腔医学、麻醉学、预防医学和中医学等五个专业290名学生讲解了肝门静脉解剖学内容。首先让学生利用业余时间自学肝门静脉基本理论内容,并查阅有关的文献资料；教师到延边大学附属医院消化内科收集相关的临床资料,从典型的肝硬化病例中凝炼出阳性结果,制作成PPT课件。然后师生回到课堂,分三步走：第一步分小组讨论,夯实肝门静脉的基本理论知识；第二步在教师详实介绍病例的前提下,学生分组用已经掌握的解剖学知识分析门脉高压与腹水机制,归纳总结,得出结论,写出报告,并画出一幅肝门静脉图；第三步由各小组学生代表总结发言,教师做出总结。我们利用问卷式调查发现,98%的学生掌握了80%以上的肝门静脉知识；学生首次接触病例感觉很新鲜,由好奇心提升为学习的主动性和积极性；92%的学生认为,这种理论与实际相互联系与传统教学法相比不仅激发了学习兴趣同时学习收获更明显；76%的学生深刻认识到课前预习的重要性；在讨论过程中,31%的学生发现了自己在学习中与别的同学间差距；有66%的学生希望隔一段时间搞一次这样的教学活动。但也有11%的学生提出,这样的教学占用学生课外时间较长,容易影响其它科目的学习；在预习过程中,常常抓不住重点难点。结论：肝门静脉教学新法可提高教学效率,具有可行性,很受学生的欢迎,并可以推广应用到其它章节的学习。

人体解剖学标准化的实验室建设和实习课教学

人体解剖学实验教学是每所医学院校医学形态学综合实验教学的一个重要组成部分，主要包括系统解剖学和局部解剖学实习等，其中系统解剖学实习又分为运动系统等8个模块，局部解剖学实习又分为胸前壁等7个模块，根据不同的专业设定学习内容和学时数。人体解剖学学习期间还穿插有形态学综合实验、PBL和临床模拟手术解剖。甲醛污染一直困扰着解剖学实习室的顽疾，对师生的健康带来极大的危害。北京大学生物医学实验中心在2004年至2015年的7年间，通过建设冷藏式解剖标本库、解剖学陈列馆的改建、解剖学实验室的通风改造、形态学综合实验室的改建、解剖学实验室的数码互动建设、遗体捐献站和遗体告别厅、临床模拟解剖手术室等一系列的教学改建工程，实现了集解剖标本、多媒体数码互动、健康无污染、恒温恒湿、有着浓重人文化色彩的形态学综合实验室的建设目标，旨为国内解剖实习室的无甲醛改造提供范例。通过添加动物手术台、石蜡切片机、生物包埋仪、显微镜等设备，使开展实验形态学实验成为了可能。解剖实习室的多用途、多功能化建设，为广大师生营造了一个舒适、无污染的形态学教学环境。

环节受力分析与骨骼肌命名原则研究

环节的运动是依靠肌肉的收缩克服阻力来完成的。肌肉收缩是内力，环节重力是外力。环节在运动时重力的方向和运动方向是已知的。当运动方向与重力方向不一致时骨骼肌缩短完成运动。当运动方向与重力方向相同时(运动所度小于重力加速度)，是骨骼肌紧张性拉长完成的。如肱二头肌可以使肘关节弯曲，但当手上拿着几斤鸡蛋慢慢放到桌子上，肘关节是伸的运动，是肱二头肌紧张性拉长来完成的。

外源性 Nkx2.5、GATA4促进大鼠骨髓间充质干细胞的心肌分化

目的：：心脏早期转录因子Nkx2.5、GATA4转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),探讨Nkx2.5、GATA4对大鼠BMSCs向心肌细胞分化的作用和影响。方法：全骨髓法分离、纯化、扩增培养SD大鼠BM-SCs,流式细胞术联合检测第三代细胞表面分子,CD90+/CD29+/CD45-细胞达95%以上。采用阳离子转染试剂LipofectamineTM2000将pEGFP-N1-Nkx2.5、pVP22-GATA4/myc-His质粒转染BMSCs。结果：转染4周后,Western blotting、免疫细胞化学结果表明,与空质粒组、空白对照组相比,Nkx2.5、GATA4显著提高转染组大鼠心肌细胞肌钙蛋白T(cardiac troponin T, cTnT)、连接蛋白43(connexin43, Cx43)的表达。免疫细胞化学结果显示Nkx2.5转染组、GATA4转染组中部分细胞呈cTnT、Cx43阳性,cTnT阳性细胞的胞质中可见棕黄色丝网状及颗粒样结构,Cx43阳性细胞的细胞质中可见棕褐色颗粒。透射电镜观察各组细胞超微结构变化,转染组大鼠心肌细胞的细胞质内出现大量平行排列的肌丝样结构,细胞侧面或细胞末端可见较多缝隙连接。结论：外源性Nkx2.5、GATA4能够促进BMSCs向心肌细胞分化。

Podocan在牛骨骼肌卫星细胞中的作用及调控

目的：：细胞外基质( ECM)在细胞发育,组织修复,调控细胞增殖、分化、粘附和迁移方面具有十分重要的作用。小的富含亮氨酸的重复蛋白( SLRP )家族属于细胞外基质中的一类重要的非胶原蛋白。Podocan,是一个大约由600个氨基酸组成的分泌蛋白,属于SLRP家族中的第五亚类蛋白。 Podocan在肾脏、心脏、肝脏、胰腺和血管的平滑肌细胞中均有表达,其对平滑肌细胞的迁移和增殖具有负调控作用,可以调节内膜的增生。本实验室在前期研究工作中通过对牛骨胳肌卫星细胞增殖分化过程的高通量测序结果表明, Podocan在牛骨胳肌卫星细胞中具有一定的表达,随着卫星细胞的分化,其表达量呈显著增加,推测其能够参与牛骨胳肌卫星细胞的分化,与牛肌肉的发育和成熟具有密切关系。方法：本研究以体外培养的牛骨胳肌卫星细胞为实验材料,以2%马血清分别诱导细胞分化2 d、3 d、4 d和5 d。收集细胞,采用荧光定量RT-PCR和Western Blot的方法分别检测不同分化程度的牛骨胳肌卫星细胞中Podocan mRNA和蛋白的表达水平。通过免疫荧光染色的方法检测Podocan在细胞中的表达定位。此外,本研究构建Podocan的过表达载体以及shRNA干扰和CRISPR干扰载体,以脂质体2000的方法转染骨骼肌卫星细胞,分别实现Podocan的过表达和抑制,以荧光定量RT-PCR和Western Blot的方法检测Podocan的过表达和抑制效果,同时检测骨骼肌卫星细胞分化的标志基因MyoG ( Myogenin )和MyHC ( Myosin Heavy Chian )的mRNA和蛋白表达水平变化。结果：随着牛骨骼肌卫星细胞分化的进行,Podocan的mRNA和蛋白表达量显著增加,免疫荧光定位结果显示其主要分布在成熟的在肌管的细胞中,而未分化的细胞其表达量较低。 Podocan的过表达和抑制载体能够显著增加或抑制其在牛骨骼肌卫星细胞中的表达量,且MyoG和MyHC mRNA和蛋白表达水平的检测结果显示,Podocan的表达增加和抑制能够促进或减少骨骼肌卫星细胞分化的程度。结论：Podocan在牛骨骼肌卫星细胞的分化过程中具有重要的调控作用,其促进肌肉分化的分子机制深入探索能够为肌肉生长发育机理的研究及提高肌肉产量的肉牛生产提供帮助。

Objective:Iron plays essential roles in the human body. Studies have shown that iron is dis-tributed differently in male and female Rats in liver, spleen, bone marrow, kidney, heart. However, the effects of sex on iron distribution in central nervous system are not well established. Methods:To explore the effects of the above mentioned, in this study, female and male Sprague Dawley rats were used at 4 months of age. The synthesis of ferritin light chain (FTL), transferrin receptor1 (TfR1), ferroportin 1 (FPN1), divalent metal transporter 1 ( DMT1) in the cortex, hippocampus, striatum, cerebellum, and olfactory bulb was determined by Western blot a-nalysis. Results:The results showed that the levels of FTL protein in the cortex, hippocampus, striatum, cerebel-lum, and olfactory bulb were higher in female rats than in male rats, but the levels of TfR1 protein were lower in female rats than in male rats. There was no significant change in FPN1 and DMT1 expression in brain. Conclu-sions:These data suggest that sex have effects on brain iron status. Iron is distributed differently in central nervous system in male and female rats. However, the precise mechanisms need further study.

mTOR通路通过 CD44促进神经元再生机制的研究

目的：：神经损伤类疾病的治疗一直是困扰医学界的难题,主要由于神经元损伤后难以再生,因此,阐明神经元内再生的机制是治疗神经损伤类疾病的关键。研究表明mTOR信号通路是提高神经元内在再生能力的重要因素,激活mTOR可有效促进神经纤维的再生,但其作用机制尚不清楚,我们利用生物信息技术检索到mTOR通路与神经再生相关的蛋白质阵列,发现细胞粘附分子CD44与轴突再生密切相关。本研究观察mTOR通路激活后,相关CD44分子表达是否上调及其与神经元突起生长的内部联系,探讨mTOR通路是否通过CD44分子促进神经元突起生长,进而提高神经元的再生能力。方法：(1)体外培养SH-SY5Y细胞,10μMol/L全反式维甲酸诱导SH-SY5 Y细胞分化,使其具有成熟神经元的特征。(2) RNAi技术对诱导分化的SH-SY5 Y细胞PTEN基因干扰。结果：24 h后RT-PCR结果显示PTEN基因的转录水平与对照组相比明显下调。36 h后Western blot结果显示干扰组细胞的mTOR与Ps6 K蛋白的表达水平与阴性对照组和空白对照组相比明显上调,说明PTEN 抑制激活了mTOR通路。干扰PTEN基因24h之后,RT-PCR结果发现实验组CD44转录水平上调,与阴性对照组和单纯诱导组相比差异显著。(3) image proplus 6.0分别对各实验组细胞进行轴突长度测量,并将各组数据分别进行统计学分析结果表明PTEN干扰组细胞的突起长度明显长于单纯诱导组和阴性对照组。 PTEN RNAi与CD44 RNAi共同干扰后,PTEN单纯干扰组细胞轴突长度明显长于共同干扰组和单纯诱导组细胞的轴突长度,差异显著。结论：mTOR通路激活后通过CD44分子表达上调促进神经细胞轴突生长。

BMP-2和 PFT-α对骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的影响

目的：：探索骨形态发生蛋白2( BMP-2)、P53抑制剂( PFT-α)以及二者联合诱导对大鼠骨髓间充质干细胞( BMSCs)向心肌细胞分化的影响。方法：分离4周龄SD大鼠的骨髓间充质干细胞并进行体外培养，对第二代BMSCs定向诱导，依次为BMP-2组、PFT-α组、BMP-2+PFT-α组以及空白对照组，相差显微镜观察细胞的形态学变化。免疫细胞化学法检测诱导4周后心肌特异性标记物(α-actin、C-TnT、desmin、P38-Mark)的表达，并进行统计学分析；透射电镜观察细胞的内部结构。结果：诱导4周后，诱导组大鼠BM-SCs的细胞形态变长，呈杆状，紧密平行排列，方向一致；空白对照组大鼠BMSCs细胞呈星形或三角形。免疫细胞化学检测显示：各诱导组BMSCs均可见α-actin、C-TnT、desmin、P38-Mark阳性的细胞，其中联合诱导组的阳性表达率高于BMP-2或PFT-α单独诱导组，诱导各组与对照组的以上各标记物的阳性率具有统计学差异( P﹤0.05)。透射电镜结果显示：诱导组大鼠BMSCs细胞呈分支杆状，核卵圆形，且位于细胞中央，细胞质中有肌丝平行排列，可见线粒体、大量粗面内质网、核糖体等。结论：BMP-2、PFT-α均可诱导BMSCs向心肌样细胞分化，且两者联合应用效果强于单一应用的效果。

孵化期单色光照射影响肉鸡骨骼肌生长和卫星细胞发育

目的：家禽具有优越的视觉机能,能感受不同颜色的光,且光照是影响家禽生长发育的重要因素之一。本实验室前期研究发现单色光能影响出壳后肉鸡骨骼肌的生长,本研究将光照时间提前,探讨光色是否会影响鸡胚骨骼肌的发育。方法：本试验将AA 肉鸡鸡胚置于白、红、绿、蓝光和黑暗条件下,出壳后将其转入白光下饲养,研究孵化期给予单色光照射是否影响鸡胚和出壳后雏鸡骨骼肌生长,并对其作用机制进行探讨。结果：①光色能够影响鸡胚骨骼肌发育,相较于白、红、蓝光和黑暗条件,绿光能显著提高鸡胚骨骼肌质量,进而提高鸡胚及出壳后雏鸡体重,在形态学上表现为肌纤维面积增大,肌纤维密度降低,且绿光组显著提高了胸大肌中较大肌纤维所占比例；而红光则抑制鸡胚骨骼肌的生长。②骨骼肌的生长发育与卫星细胞的增殖有关,绿光显著提高了肉鸡胸大肌和腓肠肌卫星细胞的总数、相对数量和增殖活性,以及骨骼肌 PCNA 的表达,这与绿光促进骨骼肌IGF-1R、Pax7、HGF 表达、抑制MSTN,促进血浆IGF-1分泌有关；③鸡胚发育对环境光刺激敏感,并能影响机体的抗氧化功能,本试验中绿光提高了骨骼肌GSH-Px 和SOD 的含量,进而使T-AOC 升高,降低了MDA；而红光则降低了GSH-Px 和SOD,提高了MDA 的含量。结论：鸡胚孵化期给予单色光照射,绿光能显著促进胚胎后期及出壳雏鸡骨骼肌生长和肌纤维发育,并有效促进骨骼肌卫星细胞的增殖活性,其作用机制主要是通过改变IGF-1的分泌水平及骨骼肌IGF-1R 表达,进而改变骨骼肌生长发育相关因子Pax7、HGF 和MSTN 的表达和骨骼肌的抗氧化水平。

Objective:To study effects of the exogenous bone mesenchymalstem cells ( BMSCs) transplanta-tion on silicosis fibrosisin rats, and to explore dose-effect relationship. Methods:BMSCs were isolated and cul-tured from male 5-week-old SD rats in vitro. Fifty healthy female SD rats were randomly divided into five groups:model control group, silicosis model group, BMSCs treatment A group (1x106/ ml), BMSCs treatment B group (3 x106/ ml) , BMSCs treatment C group (5x106/ ml)(n=10). The silicosis model were made by One-time infu-sion of silica dust suspension, using the non-exposed tracheal intubation, and given different doses of BMSCs as intervention therapy. All the rats were sacrificed on the 21st day after model estalishment. The morphological chan-ges of lung tissue were observed by HE staining and Masson staining; the localization and distribution of TNF-αand TGF-β were detected by immunohistochemistry; the expression quantity of TNF-α, TGF-β, collagen I and collagen III protein were detected by Western blotting;the sex-determining gene SRY was searched by immunoflu-orescence to confirme BMSCs home to damage lung tissue. Results: Compared with the model control group, the silicosis model group had significantly alveolitis changes, silicon nodule formation, collagen deposition and other pathological changes. Compared with silicosis model group, the pathological changes above in BMSCs treatment A group were improved;the condition of BMSCs treatment B group was improved significantly;the pathological chan-ges of BMSCs treatment C group were increased obviously. the expression of TNF-α, TGF-β, collagen I and col-lagen III protein in lung tissue:BMSCs treatment C group>silicosis model group>BMSCs treatment A group>BM-SCs treatment B group>model control group. The difference of BMSCs treatment C group and silicosis model group had no statistically significant ( P>0 . 05 ) , and the difference between the other groups had statistically significant 158 (P<0. 05). The SRY-positive cells were observed in BMSCs treatment B group by laser scanning confocal microscope, but no significant expression in the heart, liver, spleen and kidney tissues. Conclusions: The Exogenous BMSCs transplantation antagonize rat silicosis fibrosis, which has dose-effect relationship. Our data suggested that the best transplantation dose for silicosis fibrosis is 3x106 / ml.

Smad 4在去势大鼠下丘脑、垂体中的表达和意义

目的：：研究Smad 4 mRNA在去卵巢大鼠下丘脑、垂体中的表达水平和意义。方法：SD大鼠分为3组(每组10只)：对照组(月龄<24周雌性大鼠)、去势组(手术切除双侧卵巢大鼠)、治疗组(去势后雌激素治疗雌性大鼠30天),动物处死后迅速取材,提取各组大鼠下丘脑、垂体组织RNA,反转录成cDNA,下丘脑,采用实时定量PCR方法( Real-time quantitative reverse transcriPtion Polymerase chain reaction；qRT-PCR),检测各组大鼠Smad4 mRNA在下丘脑及垂体中的表达。结果：去势组大鼠下丘脑Smad4 mRNA水平是正常组0.4±0.22倍(P<0.05),雌激素治疗组大鼠下丘脑Smad4 mRNA水平是正常组2.5±0.79倍(P<0.05)；去势组大鼠垂体Smad4 mRNA水平是正常组0.2±0.12倍(P<0.05),垂体中Smad4 mRNA水平是正常组8.8±0.16倍(P<0.05)。结论：去卵巢大鼠下丘脑、垂体表达Smad 4基因,并与雌激素水平变化相关。

间质干细胞植入对脑血管痉挛大鼠神经功能的作用

目的：：枕大池二次注血法制作脑出血后血管痉挛模型,观察干细胞植入后能否改善血管痉挛大鼠的感觉、运动及学习记忆功能。方法：实验动物随机数字表法分为对照组、蛛网膜下腔出血组、干细胞培养液组和干细胞移植组,蛛网膜下腔出血模型利用SD大鼠自体尾动脉取血注血造模,第二次注血后2天,传代后的大鼠间质干细胞侧脑室植入。蛛网膜下腔出血组( Subarachnoid hemorrhage,SAH组)不植入干细胞,培养液组仅注入干细胞培养液(Dulbecco's modified eagle medium, DMEM组),骨髓间质干细胞移植组( Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells, BMSCs组)注入30μL干细胞悬液。利用水迷宫实验和动物神经功能评分测量各组动物的神经功能评分及学习记忆功能。结果：干细胞植入后7天( day, d)时对照组、SAH组、DMEM组和干细胞组神经功能评分为：3.95±2.51分、7.20±1.03分、7.23±1.79分和5.81±1.11分,与前2组相比,干细胞组神经生物功能评分明显减低( P=0.017)。干细胞移植后14 d时对照组、SAH组、DMEM组和干细胞组平均跨越平台次数为：7.38±1.73；4.52 ± 0.90；5.11±1.93和7.32±2.16,其中与 SAH 组和DMEM组相比,干细胞移植组和对照组表现有明显统计学差异( P=0.009),而在对照组和干细胞移植组相比,无显著性统计学差异(P=0.14)。结论：大鼠脑血管痉挛后间质干细胞植入对感觉、运动功能及学习记忆功能都有一定的改善。

大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养与多向分化鉴定

目的：：建立体外分离、培养及纯化大鼠骨髓间充质干细胞( mesenchymal stem cells, MSCs)的方法,并对细胞进行形态学观察、表面标志物鉴定及分化潜能检测,为大鼠MSCs 进行细胞移植治疗脑损伤的研究奠定基础。方法：用全骨髓贴壁培养法分离、培养、纯化大鼠MSCs,倒置相差显微镜进行形态学观察,流式细胞仪检测细胞表面标记物,定向诱导向成脂、成骨方向分化。结果：72小时首次全量换液7天后观察可见呈放射状排列的细胞集落,以梭形细胞为主,细胞规则、生长旺盛,可连续传代10代以上；取3代MSCs流式细胞仪检测,CD90呈阳性表达,CD34、CD45均呈阴性表达；细胞传代后加入成脂、成骨诱导剂定向诱导分化,油红O染色及茜素红染色均呈阳性。结论：全骨髓贴壁筛选培养法可大量分离、纯化、扩增大鼠MSCs。经诱导鉴定MSCs 具有多项分化潜能。

Objective:The brain of 100 normal persons were performed MRI scan and image analysis. 12 adult female brain specimens fixed by formalin, were made into the thickness of 0. 5mm by celloidin embedding technique. We analyzed the anatomical position of the relationship about the anterior limb of internal capsule and the anterior commissure in eollodion-embedded plans, and then compared with the brain MRI of normal people. We also further compared the statistical differences of the internal capsule’ s volume. This research aimed to pro-vide a reliable sectional anatomic basis for the study of the central nervous system and deep brain stimulation to treat the mental neurological diseases. Results:1. Continous observation of celloid in brain slices horizontal section:Approximately 130 slices of each specimen, from the parietal lobe,the internal capsule was the typical structure"><" on the level of about 35 mm . On the level of about 41mm, the anterior commissure was"arc" through the bot-tom head of the caudate nucleus connecting the bilateral anterior limb, which located between the caudate nucleus and the lentiform nucleus. The posterior limb of internal capsule situated between the dorsal thalamus and the lenti-form nucleus on the level of about 46 mm. Coronal section:about 150 slices of per specimen, from the former lat-eral ventricle horn back,on the level of about 16 mm the anterior commissure was "arch" connecting the anterior limb. About 28 mm dimension, the interior capsule fore limb located between the caudate nucleus and the puta-men, the posterior limb of internal capsule located between the globus pallidus and the dorsal thalamus, extending down to the cerebral peduncle. Sagittal section:about 180 slices of per specimen, from the outside to the inside at the beginning of the temporal lobe, the corona radia taextends between the putamen and dorsal thalamus, and then formsthe posterior limb of the internal capsule at the level of about 21 mm. About 25 mm level, fore limb located between the caudate nucleus and the putamen; Genu of the internal capsule located between the caudate nucleus and dorsal thalamus;the posterior limb of internal capsule located between the putamen and the dorsal thalamus, and then extends to the brain stem. 2. The observation of brain MRI images horizontal position: Above the typical level of the internal capsule, internal capsule showed high signal, and the boundaries could be still recognized. Be-low the typical levels of the internal capsule, the globus pallidus and the anterior limb of the internal capsule showed low signal intensity, and both ill-defined, but we could still identify the boundaries of the internal capsule fore limbs. Coronal position: Before the globus pallidus appeared, the tomography of collodion brain slices and brain MRI images were basically the same form. MRI images could be observed clearly that the anterior commissure connected the bilateral the anterior limbs. Sagittal position:The corona radiata was not observed in the MRI ima-ges, and thento switch toward the internal capsule. The emergence of dorsal thalamus and globus pallidus bounda-ries were not observed clearly. 3. Three dimensional reconstruction and analysis of the measurement results The an-atomical structural features of the internal capsule and adjacent structures could be continuously, multi-directional-ly and then dynamically observedon the horizontal, coronal and sagittal plane by three dimensional reconstruction. The anatomical localization of the posterior limb of the internal capsule can be clearly observed in the sagittal plane. The volume data of the left and right internal capsule was statistically significant. Conclusions:1. The experiment described anatomical localization and the three-dimensional model of the internal capsule and anterior commissure in detail, and to provide a reliable basis for the functional anatomy relations between the two follow-up studies. 2. Comparing continuous thin brain slices with the corresponding section of the brain MRI images study, the brain slices collodion show much more clearly than the MRI image about the positional relationship between the internal 180 capsule and adjacent structures. 3. Measurements of the internal capsule and its various divisions on the left and right were statistically significant to provide data support for the asymmetry of brain morphology study.

动脉粥样硬化模型小鼠心脏中 Movat染色技术的应用

目的：：ApoE基因敲除小鼠为目前研究动脉粥样硬化的常用模型之一，其在高脂饲养下可加速形成主动脉粥样硬化斑块。动脉粥样硬化的病灶成分有平滑肌细胞、泡沫细胞、胆固醇结晶、胶原纤维、弹力纤维和蛋白聚糖。 Movat染色技术可以在一张切片上直观显示出这几种成分的病理变化，规范和细化的实验操作步骤可以保证染色结果的一致性，为动脉粥样硬化的深入研究提供清晰可靠的实验依据，从而更客观的评估实验结果。方法：ApoE基因敲除小鼠，雄性70只随机分为8组：ApoE空白组，阳性对照药组，治疗药物A高、中、低剂量组，治疗药物B高、中、低剂量组，以及6只C57小鼠对照组。高脂饲养26周后，采血后处死。取心脏，石蜡包埋后进行定位切片。分批进行染色，染色过程中摸索和细化了染液配置、染色温度、染色时间等条件，规范实验操作。成片后进行组织病理学观察，并对胶原纤维、弹力纤维、蛋白聚糖、泡沫细胞等进行定性和定量分析。结果：通过试验建立了细化、规范化的Movat染色操作流程。光镜下观察染色结果可见各结构成分着色分明：胶原纤维和弹力纤维分别为黄色和黑色，蛋白聚糖呈绿色，泡沫细胞呈淡紫色，心肌平滑肌呈红色。主动脉粥样硬化斑块病灶部位结构清晰，病理表现为血管平滑肌增生，胶原纤维、平滑肌细胞和蛋白聚糖形成纤维帽，纤维帽下泡沫细胞形成并向下延伸，脂质大量沉积，弹力纤维断裂。与空白组和阳性对照组相比，治疗药物A和B均对病症的严重程度和病程进展有一定的治疗效果。结论：在本实验中对Movat染色的染液配置、染色时间、染色温度等进行细化和调整，为实验操作流程的规范化提供依据。在保证了实验统一性的基础上，可客观评估药物对动脉粥样硬化的治疗效果，同时因粥样斑块各结构成分颜色分明，利于镜下成像鉴别，可对各成分进行定量统计分析，为实验结果提供了可靠的实验数据。

Sihler's 染色法初步观察人表情肌的肌内神经分布

本研究借助sihler's 染色技术观察人表情肌的肌内神经分支分布，为临床开展整形美容术提供解剖学基础。首先通过改良的sihler's 染色技术对2例人的表情肌进行整肌染色，分别经过除色素、脱钙、染色、脱色、中和和透明，使表情肌的肌内神经呈现，借助X线阅片厢观察并摄片。通过观察我们发现，面部表情肌均由面神经支配。颞支分出2-3支，向前分别进入额肌和眼裂以上的眼轮匝肌。神经纤维几呈直角进入眼轮匝肌，分支4-5支，其末梢部与来自动眼神经的上支共同支配上睑提肌。眼裂下部的眼轮匝肌则由面神经的颧支支配，纤维亦呈直角向上进入该肌，分支约有3-4支。颊支与颧支的位置接近，彼此有分支交织在一起，且分支数目较多，这可能与口周围肌数目多，比较发达有关。特别是口轮匝肌的神经分支丰富。口裂以上的轮匝肌主要由颊支支配，分支呈直角进入该肌，每侧约有数十支细小的纤维，颊支的纤维亦进入提上唇肌。口裂以下的轮匝肌则由下颌缘支的深部颏神经支配，每侧的分支约有数十支，呈直角进入。降口角肌主要由下颌缘支的浅支支配，亦有分支进入降下唇肌和轮匝肌。藉此，对主要的表情肌的肌内神经分支分布进行了初步观察，发现表情肌的肌内神经配布与其功能相关，越是发达的表情肌其肌内神经配置也越复杂。

猪卵母细胞 OPS玻璃化冷冻保存的研究

猪卵母细胞由于脂肪含量高，对低温敏感，相较其他动物卵母细胞的冷冻保存更加困难，因此在种质的保护保存、胚胎工程研究产生极大的阻碍。本试验研究了猪卵母细胞的OPS玻璃化冷冻保存方法，研究乙二醇、甘油和聚乙烯吡咯烷酮( PVP)作为冷冻保护剂，对比不同的浓度梯度和两种冷冻保护剂联合使用对冷冻效果的影响。研究未经体外成熟培养和不同时间体外成熟培养的猪卵母细胞的冷冻保存效果。对比改良优化的OPS玻璃化冷冻方法和传统的程序化冷冻方法的保存效果。实验表明，体外成熟12 h ( GV期)的猪卵母细胞用乙二醇添加聚乙烯吡咯烷酮( PVP)进行玻璃化冷冻，解冻后体外成熟率、细胞的形态正常率与未经体外成熟的的卵母细胞相比差异显著，与成熟48 h ( MII期)卵母细胞相比差异不显著。但卵裂率和桑椹胚囊胚率体外成熟12h(GV期)的猪卵母细胞用乙二醇添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为冷的保护剂组要好于其他组。

脱细胞神经基质的制备及成分分析

目的：：制备脱细胞神经基质,通过测定细胞核和DNA残留评价脱细胞程度,并对所制备的脱细胞神经基质进行成分分析,为开发新型神经修复生物材料提供研究基础。方法：①依次采用0.5%胰蛋白酶-3%曲拉通X-100-0.1%SDS-PBS溶液-水振荡漂洗的方法对异种动物的外周神经进行脱细胞处理。②冰冻切片并经苏木素-伊红染色观察细胞核残留。③微量样品DNA提取试剂盒提取脱细胞神经基质的DNA,超微量蛋白核酸分析仪检测其残留DNA含量。④免疫组织化学法分析脱细胞神经基质成分。结果：经脱细胞处理制备的神经基质呈乳白色；脱细胞神经基质经冰冻切片和苏木素-伊红染色后观察,未见有完整细胞核残留；脱细胞神经基质的DNA残留为6.6 ng/mg；经免疫组织化学染色分析,脱细胞神经基质的主要成分为Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和层粘连蛋白。结论：采用本法制备的脱细胞神经基质,有效去除了神经组织中的细胞成分,保留了神经组织细胞外基质的主要成分,可以作为神经修复的新型生物材料。

牛脱细胞肌腱基质的制备方法研究

目的：：探究牛肌腱组织脱细胞的方法,为组织工程法修复肌腱所需生物材料的制备提供理论和实验基础。方法：牛的肌腱作实验材料,被组织粉碎机粉碎后,依次放入不同浓度的胰蛋白酶溶液、Triton X-100溶液、SDS溶液浸泡处理后,所得基质用过氧乙酸-乙醇溶液中灭菌消毒处理,然后依次用蒸馏水和PBS缓冲液洗涤、过滤。后冷冻、干燥、保存。冰冻切片进行苏木素-伊红染色,观察细胞核残留情况。微量DNA提取试剂盒提取脱细胞后跟腱基质DNA,检测DNA的残留量。结果：大体观察可见,各实验组跟腱组织经脱细胞处理后,均呈乳白色匀浆状。苏木素-伊红染色结果显示,跟腱组织脱细胞处理后细胞核均大量减少,细胞核残留极少,每高倍视野中细胞核残留不大于5。 DNA含量结果显示,当牛跟腱组织依次经过0.5%胰蛋白酶溶液处理2 h、1%的Triton X-100溶液处理2 h、0.5%的SDS溶液处理1 h后,得到的肌腱脱细胞基质DNA含量少,为0.03μg/mg。结论：依次用胰蛋白酶溶液、Triton X-100溶液、SDS溶液浓度分别为0.5%、1%、0.5%、处理时间分别为2h、2h、1h时,对牛肌腱组织的脱细胞效果佳。

脱细胞血管基质的制备方法研究

目的：：通过不同脱细胞方法制备脱细胞血管基质材料,比较筛选出较为理想的血管脱细胞方法,为临床血管修复提供良好的组织工程生物材料。方法：①采用不同浓度的胰蛋白酶、Triton X-100、SDS组合,对牛血管进行脱细胞处理,制备脱细胞牛血管基质。②苏木素-伊红染色,观察细胞核残留情况,以比较脱细胞效果。③利用微量样品基因组DNA提取试剂盒提取脱细胞血管基质的DNA,超微量蛋白核酸分析仪检测DNA含量。结果：大体观察：各组血管经过不同脱细胞方法处理后,所得脱细胞血管基质呈乳白色。苏木素-伊红染色观察：光镜下观察,可见各组均有不同程度的细胞核残留,其中1%胰蛋白酶+3%Tri-tonX-100+1%SDS组和0.1%胰蛋白酶TritonX-100+0.5%SDS所制备的脱细胞血管基质细胞核残余少,每高倍视野中细胞核残留不大于3。 DNA提取检测：所提取DNA的含量显示,0.1%胰蛋白酶+3%TritonX-100+1%SDS和0.1%胰蛋白酶+3%Triton X-100+0.5%SDS的脱细胞效果较好, DNA残留量分别为0.22μg/mg和0.231μg/mg。结论：应用0.1%胰蛋白酶+3%Triton X-100+1%SDS 和0.1%胰蛋白酶+3%Triton X-100+0.5%SDS的方法来制备脱细胞基质的效果较好。

改良 Golgi-Cox染色法在显示小鼠海马区神经元树突棘的应用

目的：：通过改变传统的Golgi-Cox染色方法，探究一种在海马区神经元形态与结构的研究中更加稳定和有效的Golgi-Cox染色法。方法：本实验将昆明小鼠随机分为两组，一组采用传统的Golgi-Cox染色法，另一组采用本研究中改良的Golgi-Cox染色法。改良方法在传统方法的基础上，改变了以下几个关键环节，包括固定、切片、脱水和显色等，然后对两种方法的结果进行差异比较；为减少资料分析上的偏差，由资料分析人员对实验结果进行统计学分析。结果：改良法比较传统法，通过在离心管内悬空固定组织，切片时用琼脂包埋，延长低浓度乙醇脱水及二甲苯透明时间，并缩短高浓度乙醇脱水时间，改善显色环境的方法，可以在更好地保持组织切片的完整性，减少脱片的情况下，有效减少背景染色，增强显色效果。稳定地显示出更多的胞体(增加50%)、树突分支(增加79%)和树突棘(增加42%)。结论：改良的Golgi-Cox染色方法比传统的Golgi-Cox染色方法更加稳定和敏感，在海马区神经元树突和树突棘形态与结构研究中是一种可靠的技术方法。

单色光对鸡视顶盖生物钟基因昼夜节律表达的影响

生物体的行为活动与生理现象呈周期性波动,并与光照密切相关。本实验室前期研究发现光色能影响肉鸡和蛋鸡的生产性能,且禽类具有优越的视觉机能,视顶盖是禽类视觉信息加工和整合的部位,其结构复杂,那么在视觉传导通路中作为重要视觉中枢的视顶盖昼夜节律变化如何,为此我们将刚出壳的AA肉鸡分别饲养于白、红、绿和蓝光下,采用RT-PCR和Western blot等技术,研究鸡视顶盖是否存在生物钟基因的昼夜节律性表达,以及不同波长单色光对其昼夜节律表达的影响。研究发现,①除Per 2基因外,生物钟基因Clock、Bmal1、Bmal2、Per3、Cry1和Cry2的mRNA 在鸡视顶盖中表达呈昼夜节律性。②相较于白光,红光和蓝光刺激使除Per 3外的其它钟基因Clock、Bmal 1、Bmal 2、Cry 1和Cry2昼夜节律性表达相位延迟,而绿光组钟基因相位与白光组相比无显著差异；单色光照射后,对钟基因产生的振幅改变不具有同向性,与白光相比,绿光刺激使Per3、Cry1和Cry2昼夜节律性表达振幅增强,红光组使Bmal1、Cry1和Cry2振幅减弱,而蓝光刺激后使Bmal2和Cry1振幅增加。③鸡视顶盖中BMAL1蛋白的昼夜节律性表达趋势与Bmal1基因mRNA表达相似。单色光照射后,其昼夜节律性不发生改变,但红光组比白、蓝光组相位发生了延迟,振幅降低,蓝光组的振幅较白、绿光组的提高。以上结果表明,除了Per2基因外,其余钟基因Clock、Bmal1、Bmal2、Per3、Cry1和Cry2在鸡视顶盖中表达均呈现昼夜节律性。不同单色光对生物钟基因和生物钟蛋白BMAL 1的昼夜节律性表达无影响,但在一定程度上影响其表达量、峰值以及相位。

2-DG通过内质网应激增强人卵巢癌 SKOV3细胞顺铂敏感性的研究

目的：：顺铂作为传统的化疗药物被广泛应用于临床,但其较强的副作用限制了顺铂的临床应用。为了提高肿瘤细胞对顺铂的敏感,我们选择2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)进行细胞实验。方法：利用免疫荧光结合免疫印迹技术检测2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)体外抗卵巢癌SKOV3细胞的抗肿瘤作用。结果：2-DG可增强顺铂对卵巢癌SKOV3细胞的抗肿瘤作用,包括抑制SKOV3细胞的增殖、诱导凋亡小体的形成和促进细胞的凋亡。免疫荧光结合免疫印迹技术检测显示,2-DG增强了顺铂诱导的SKOV3细胞内质网应激相关蛋白--葡萄糖调节蛋白78( GRP78)的表达；2-DG还上调顺铂诱导的SKOV3细胞内质网应激相关蛋白--凋亡蛋白153/C/EBP同源蛋白( CHOP)的表达。结论：2-DG通过增强顺铂诱导的内质网应激增加SK-OV3细胞对顺铂的敏感性。

生命不同阶段的适度运动对 SAMP8小鼠睾丸组织氧化应激的影响

目的：：探讨生命不同阶段的适度运动对SAMP8小鼠睾丸组织氧化应激的影响。方法：本研究以2月龄平均体重在25 g的SAMP860只雄性小鼠作为实验对象，每天进行15分钟适度游泳锻练，随机分为：终身锻练组、早期锻练组、晚期锻练组、静止对照组，每组各15只。待终身锻练组锻练结束后，以上4组小鼠同时取材。 RIA 法测定血清睾酮水平，生化学检测睾丸组织氧化程度及抗氧化酶活性变化。结果：较静止组小鼠相比，血清睾酮和睾丸内睾酮水平在锻炼组明显增加(P<0.05)，而且终身锻练组和早期锻练组较晚期锻练组和静止组效果更好( P<0.05)。 MDA和蛋白羰基均为锻练组明显降低，而且终身锻练组和早期锻练组较晚期和静止组降低更明显( P<0.05)。锻炼组抗氧化酶SOD、GPX活性明显高于静止组( P<0.05)。较晚期和静止组相比，终身锻练组和早期锻练组SOD1、SOD2和GPX mRNA水平明显增高( P<0.05)。结论：睾酮下降之前的生命早期阶段的锻炼能较早激活细胞内的抗氧化系统对抗氧化损伤。

Aneuploid embryo generally leads to infertility, spontaneous abortion and birth defects, mainly resulting from abnormal chromosome segregation during maternal oocytes meiosis. Chromosome division is conducted by bipolar spindle which formed through an acentrosomal way, dependent on a unique microtubule organizing center ( MTOC) in mammalian oocytes, however, the molecular composition and functional regulation of MTOC is still not fully ex-plored. LIM kinases 1 (LIMK1) is a conserved serine/threonine kinase, a major regulator of actin and microtubule dynamics, involved in microtubule stability and spindle positioning during mitosis. So far little is known about LIMK1 protein expression and its roles in oocytes during meiosis. We reported here the protein expression and sub-cellular distribution of LIMK1 in mouse oocytes during meiosis. Western blot procedure detected high and stable expression of LIMK1 in mouse oocytes from germinal vesicle ( GV) stage to metaphase II ( MII) . In contrast, acti-vated LIMK1 ( phosphorylated at Thr508 , pLIMK1 Thr508 ) was only observed after germinal vesicle breakdown ( GVBD) , and gradually increased with peak levels at metaphase I ( MI) and MII. Immunofluorescence analysis showed that LIMK1 was co-localized with microtubules on the whole spindle structure, while pLIMK1Thr508 was con-
centrated with key components of MTOC,pericentrin and -Tubulin, on spindle poles in mouse oocytes. Inhibition of LIMK1 activity by BMS3, a specific ATPase competitive inhibitor, distroyed the formation of bipolar spindle structure, disturbed MTOC integrity and MTOC proteins recruitment to spindle poles. Moreover, LIMK1 inhibition caused chromosome misalignment and meiotic progression arrest at MI stage. Therefore, LIMK1 activity is required for formation and maintenance of bipolar spindle in mouse oocytes,importantly, pLIMK1T508 is MTOC-associated protein,involved in establishment and positioning of MTOC.

添加 n-3 PUFAs的饲料喂养孕期及哺乳期小鼠,对子代成年期小鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的：：观察给予母孕期及哺乳期小鼠添加不同含量n-3多不饱和脂肪酸( PUFAs )饲料喂养,对成年期仔小鼠脑神经细胞凋亡的影响。方法：使用6-8周龄清洁级C57 BL/6 J雌性小鼠,随机分为5组,每组10只,分别给予小鼠缺乏n-3 PUFAs的饲料、n-6/n-3 PUFAs比值为15：1、5：1、1：1的饲料和高含量鱼油的n-3 PUFAs饲料( n-6/n-3 PUFAs比值为1：5)喂养。小鼠12-14周龄时进行雌雄合笼交配繁殖,仔小鼠断乳后继续行母小鼠相同饲料喂养,选取生后3m成年仔小鼠用于实验。取小鼠脑进行组织固定,采用免疫组织化学技术对脑组织海马区神经细胞凋亡情况进行分析。结果：与缺乏n-3 PUFAs组小鼠相比,n-3 PUFAs饲料喂养组,尤其是n-6/n-3 PUFAs比值(5：1)和(1：1)组小鼠海马CA3区神经细胞抗凋亡蛋白Bcl2表达明显增加,而致凋亡蛋白Bax表达则显著降低。但高含量鱼油的n-3 PUFAs喂养组小鼠(即n-6/n-3 PUFAs 1：5组)与缺乏n-3 PUFAs组小鼠相比,未表现出显著性差异。结论：孕期及哺乳期小鼠饲料中添加n-3 PUFAs,尤其是n-6/n-3 PUFAs比值在5~1：1时有助于减少成年仔小鼠脑组织神经细胞凋亡的发生,而过高含量n-3 PUFAs摄入则未对小鼠脑凋亡发生起到促进作用。

β2-AR-ERK信号通路在制动应激致着床期孕小鼠子宫内膜重建中的作用

本试验以交感肾上腺系统为切入点,探究制动应激影响胚胎着床的作用机制。选用8周龄雌性CD1小鼠,妊娠E1时开始应激,并连续制动应激直至E7(4h/d),取妊娠母小鼠血浆、子宫组织等进行检查。结果发现,①E1母小鼠制动应激之后,血浆皮质酮和去甲肾上腺素含量、血糖水平提高,并诱导孕小鼠胚胎着床位点降低,以及性器官指数降低。②制动应激致E3-E7孕小鼠子宫内膜面积、子宫腺面积比例降低,诱导作为调节子宫内膜重建及血管发育的MMP-9蛋白以及VEGF和CD34阳性细胞降低,利用PCNA和TUNEL方法分别检测子宫内膜细胞的增殖与凋亡状态,发现制动应激诱导E3-E7孕小鼠子宫组织的MODPCNA/MODTUNEL比值下降,Caspase-3蛋白增加。③孕小鼠子宫内膜uNK细胞密度下降,肌层肥大细胞增加；T淋巴细胞的增殖活性及IL-2/ IL-4比值降低。④孕小鼠子宫组织中GSH-PX、 T-SOD 和T-AOC含量降低,而MDA 含量增加,且外源性H2 O2作用于体外培养的孕小鼠子宫内膜基质细胞,细胞增殖活性降低并呈剂量依赖性。⑤孕小鼠子宫组织中pERK1/2和pNF-κBp65蛋白表达增加,并激活了β2-AR mRNA的表达,且β2-AR阳性细胞分布于子宫肌层、腺上皮细胞、腔上皮细胞和蜕膜细胞中,以及体外分离的子宫内膜基质细胞中。⑥体外分离E5孕小鼠子宫内膜基质细胞,添加外源性β-AR激动剂异丙肾上腺素( ISO)使细胞增殖活性降低,同时Caspase-3的含量增加；添加腺苷环化酶激动剂FSK对ISO的刺激产生协同作用；而添加外源性β2-AR阻断剂(Butoxamine)和PKA抑制剂H-89,能显著逆转ISO对细胞的抑增殖与促凋亡作用；添加外源性MEK 抑制剂PD98059和NF-κB 抑制剂PDTC 使细胞增殖活性增加,而Caspase-3的含量显著降低；同时在不同药物添加组中pERK1/2表达的变化趋势与Caspase-3表达趋势一致。以上结果表明,制动应激激活孕小鼠交感肾上腺髓质系统,刺激皮质酮和去甲肾上腺素分泌,经β2-AR介导激活胞内cAMP以及下游PKA信号,直接激活或者间接通过诱导孕小鼠子宫局部的氧化应激产生ROS激活ERK1/2磷酸化,一方面直接激活NF-κB进入细胞核与靶基因结合,产生炎性细胞因子IL-2,使孕小鼠子宫局部Th1/Th2平衡偏向于Th1炎性状态,诱导着床期孕小鼠子宫的局部免疫平衡紊乱；另一方面增加孕小鼠子宫组织Caspase-3的蛋白表达,诱导子宫内膜细胞凋亡,阻滞子宫内膜的妊娠适应性重建,导致子宫内膜容受性的降低,从而不利于孕小鼠胚胎的着床和发育。

单色光对鸡视网膜钟基因和钟蛋白昼夜节律表达的影响

禽类具有优越的视觉机能,不仅具有明暗觉,还具有色觉。本实验室前期研究发现,单色光可影响家禽的生长发育、免疫机能和生产性能。视网膜作为禽类生物钟3大中枢振荡器之一,可以感受光照,自发产生分子昼夜节律震荡,与下丘脑和松果体共同调节机体的生物节律。因此,本试验采用红、绿、蓝和白光饲养AA肉鸡,研究单色光对视网膜钟基因昼夜节律表达的影响。结果发现,①不同光色下,鸡视网膜钟基因除Clock外,Bmal1、Bmal2、Cry1、Cry2、Per2和Per3均呈昼夜变化,其中Bmal1、Cry1、Per2和Per3呈昼夜节律性表达,而Bmal2、Clock和Cry2不具有节律性。在表达水平上,与白光相比,绿光使正调控基因Bmal1、Bmal2和Clock表达水平升高；而红光使负调控基因Cry1、Cry2、Per2和Per3表达水平升高。在昼夜节律性表达上,与白光相比,绿光使Bmal1中值升高,振幅增大,相位提前；红光则使Bmal1中值降低,振幅减小,相位提前；同时,红光使Cry1和Per3中值升高,相位延迟；蓝光使Cry1、Per2和Per3中值降低,振幅减小。②不同光色下,鸡视网膜钟蛋白BMAL1、CLOCK均呈现昼夜变化,其中BMAL1呈现昼夜节律性表达,CLOCK的表达不具有节律性。在表达水平上,与白光相比,绿光使BMAL1和CLOCK表达水平升高。在昼夜节律性表达上,与白光相比,绿光使BMAL1中值升高,振幅增大,相位提前,红光则使BMAL1中值降低,振幅减小,相位提前。以上结果表明,单色绿光促进鸡视网膜正调控钟基因Bmal1、Bmal2、Clock的表达,使正调控钟蛋白BMAL1和CLOCK水平升高；红光则促进负调控钟基因Cry1、Cry2、Per2、Per3的表达。

Objective: To observe the effect of DMSO on mouse oocyte meiotic maturation. Results: In DMSO-treated oocytes, we observed abnormal MII oocytes that contained large polar bodies, including 2-cell-like MII oocytes, during in vitro maturation. Oocyte polarization did not occur, due to the absence of actin cap forma-tion and spindle migration. These features are among the primary causes of abnormal symmetric division;however, analysis of the mRNA expression levels of genes related to asymmetric division revealed no significant difference in the expression of these factors between the 3% DMSO-treated group and the control group. After each "blasto-mere" of the 2-cell-like MII stage oocytes was injected by one sperm head respectively, the oocytes still possessed the ability to extrude the second polar body from each "blastomere" and to begin cleavage. However, MII oocytes with large polar bodies developed to the blastocyst stage after intracytoplasmic sperm injection ( ICSI ) . Further-more, other permeable cryoprotectants, such as ethylene glycol and glycerol, also caused asymmetric division fail-ure. Conclusions:Permeable cryoprotectants, such as DMSO, ethylene glycol, and glycerol, affect asymmetric di-vision. DMSO disrupts cytokinesis completion by inhibiting cortical reorganization and polarization. Oocytes that undergo symmetric division maintain the ability to begin cleavage after ICSI.