国际检验医学杂志
International Journal of Laboratory Medicine 국제검험의학잡지
- 主管单位: 重庆市卫生局
- 主办单位: 重庆市卫生信息中心
- 影响因子: 1.01
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1673-4130
- 国内刊号: 50-1176/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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电化学发光免疫分析仪检测甲胎蛋白的性能验证
目的 验证电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测甲胎蛋白(AFP)的基本分析性能,同时探讨适用于ECLIA检测系统分析性能的验证模式.方法 参照相关的文件,分别用ECLIA检测AFP的精密度、准确度、临床可报告范围和参考区间.结果 测定均值为11.90 IU/mL的样本,验证后批内精密度为0.28 IU/mL,总精密度为0.45 IU/mL;测定均值为237.23 IU/mL的样本,验证后批内精密度为2.85 IU/mL,总精密度为3.50 IU/mL,均与厂家声明一致;高、低浓度定植质控品检测结果与靶值的相对偏差均小于5%,5份室间质控品检测结果与靶值的相对偏倚为-0.41%~6.61%;分析测量范围为0.514~992.7 IU/mL(厂家线性范围0.5~1 000 IU/mL),临床可报告范围0.514~158 832 IU/mL;参考区间与厂家声明(0.0~5.8 IU/mL)一致.结论 罗氏2010电化学发光免疫分析仪测定AFP的主要分析性能均与厂家声明一致;厂家提供的参考区间可以接收;验证方案和实验方法简便、可行.
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电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析测量范围和临床可报告范围研究
目的 对Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的分析测量范围(AMR)进行验证性研究,并建立临床可报告范围(CRR).方法 参考美国临床与实验室标准化协会(CLSI)EP6-A文件,选用超出厂商声明的分析测量范围下限和上限浓度的样本,按比例精确配成等间距的不同浓度样本,每个浓度样本重复测定2次,用多项式回归评价并验证厂商声明的AMR;选用NT-proBNP浓度在分析测量范围内的高值样本5份,用稀释液作不同倍数稀释后测定,计算稀释回收率,确定大允许稀释度,并结合功能灵敏度建立CRR.结果 NT-proBNP的分析测量范围:5~35 126 pg/mL,大允许稀释度1∶2.根据其功能灵敏度,临床可报告范围:8.82~70 252 pg/mL.结论 Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP在厂商声明的分析测量范围内线性良好,所建立的临床可报告范围可以满足临床需要.
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复合转座子ISEcp1B与IS903介导CTX-M ESBLs新基因亚型传播机制的研究
目的 研究肺炎克雷伯菌Kp49,CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)新亚型的基因环境,并分析其传播的分子机制.方法 用K-B药敏法分析肺炎克雷伯菌Kp49的耐药性;用多重聚合酶链反应(PCR)技术扩增CTX-M-G1、TEM、SHV、DHA、ACT、IMP-1、VIM-1、ISEcp1B、IS903及Ⅰ类整合子,PCR扩增ISEcp1B下游的 CTX-M型ESBLs全序列并测序.结果 肺炎克雷伯菌Kp49只对亚胺培南敏感,对其余21种抗菌剂均耐药.检出TEM、SHV、CTX-M-G1及DHA基因Ⅰ类整合子.检出1种新的CTX-M ESBLs基因亚型,全长876 bp,与blaTX-M-14相比有1个核苷酸不同(GenBank登陆号:EF446126).blaCTX-M-like的上游是ISEcp1B的遗传元件,下游是插入序列IS903的保守序列组成复合转座子.可能是ISEcp1B序列通过转座子机制俘获β-内酰胺酶,并提供-35及-10位点2个启动子,对下游CTX-M型ESBLs的高水平表达起重要的调控作用.结论 插入序列ISEcp1B与IS903组成的复合转座子可能介导了新的CTX-M ESBLs基因亚型的水平传播,并驱使其高度表达,使Kp49对多种抗菌剂耐药.
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酶免疫组化技术检测MAGE-A3抗原在肺癌组织中的表达
目的 检测黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)在原发性肺癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义.方法 应用间接酶免疫组化技术检测MAGE-A3抗原在48例肺癌组织中的表达情况,并分析其与肺癌分型和淋巴结转移的关系.结果 48例肺癌患者中有29例(60.4%)为MAGE-A3抗原表达阳性,19例(39.6%)为MAGE-A3抗原表达阴性;肺腺癌、肺鳞癌、肺腺鳞癌和小细胞肺癌的阳性率分别为80.0%、31.3%、75.0%和33.3%;肺腺癌组的阳性率显著高于肺鳞癌组(χ2=9.744,P<0.05),淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性率差异无统计学意义(χ2=0.001,P>0.05).结论 MAGE-A3抗原在肺癌组织中有较高的表达率,肺腺癌组MAGE-A3的表达阳性率显著高于肺鳞癌组,肺癌淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性率差异无统计学意义.
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NcX-ELISA法检测抗ds-DNA在系统性红斑狼疮中的诊断价值
目的 探讨双链DNA抗体(抗ds-DNA)的检测方法,寻找1种高特异性、高敏感性的检测方法,为临床诊断及治疗系统性红斑狼疮(SLE)提供可靠的实验依据.方法 分别采用间接荧光免疫法(IIFA)、普通ELISA 法、放射免疫法(RIA)及NcX-ELISA法,测定50例SLE患者、60例非SLE风湿病患者及30例健康对照者血清中抗ds-DNA.结果 采用IIFA法、普通ELISA 法、RIA法及NcX-ELISA法测定抗ds-DNA,诊断特异性分别为96.7%、93.3%、95.0%、98.3%,其中以NcX-ELISA法特异性高,普通ELISA法低;诊断率分别为71.8%、73.6%、76.4%、86.4%,其中以NcX- ELISA法诊断效率高,IIFA 法低;检测的敏感性分别为42.0%、50.0%、54.0%、72.0%,以NcX- ELISA法检测敏感性高,与RIA法相比差异无统计学意义(P>0.05),与普通ELISA法比较差异有统计学意义(P<0.05),与IIFA法比较差异有统计学意义(P<0.005).结论 普通ELISA 法特异性低,IIFA法敏感性低,RIA法虽然敏感性、特异性较高,但是容易污染环境;NcX-ELISA法具有高特异性、高敏感性、高诊断率及可批量检测的优点,是检测抗ds-DNA的理想方法.
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49例肿瘤患者外周血树突状细胞亚群与细胞免疫功能的研究
目的 检测晚期肿瘤患者外周血树突状细胞数量和T细胞亚群的表达,评价肿瘤患者的免疫功能.方法 应用流式细胞术检测49例晚期肿瘤患者外周血树突状细胞亚群的数量,免疫表型分别为:髓样树突状细胞,CD85K+CD33+CD(16+14)-;浆细胞树突状细胞,CD85K+CD123+CD(16+14)-;以及T淋巴细胞亚群的表达;以11例同年龄段健康人群作为对照组.结果 肿瘤患者外周血中的髓样树突状细胞和浆细胞样树突状细胞的含量显著低于对照组(P<0.05,P<0.01);CD3+的表达低于对照组,但差异无统计学意义;CD3+/CD4+的表达高于对照组(P<0.05),CD3+/CD8+的表达低于对照组(P<0.05).结论 中、晚期肿瘤患者外周血中树突状细胞数量的减少和T淋巴细胞亚群的变化,可能是中、晚期肿瘤患者机体免疫功能低下的原因之一,本实验研究为临床肿瘤生物治疗提供了一定的实验依据.
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3种方法检测结核分枝杆菌的评价
目的 评价荧光定量基因扩增法(FQ-PCR法)、胶体金法、痰涂片萋-纳氏抗酸染色法检测结核分枝杆菌情况,寻求结核分枝杆菌的快速、准确和特异性检测手段.方法 选择经临床确诊96例肺结核患者痰液,采用3种方法进行检测.以临床确诊结核组为"真阳性",以对照组为"真阴性",分别计算3种方法的灵敏度、特异度、符合率、正确诊断指数、阴性及阳性预测值.结果 3种方法检测结核分枝杆菌的阳性率分别为:FQ-PCR法 42.7%,胶体金法48.9%,痰涂片萋-纳氏抗酸染色法12.5%,FQ-PCR法联合胶体金法66.7%.经χ2检验,FQ-PCR法、胶体金法对结核分枝杆菌的检出率优于痰涂片萋-纳氏抗酸染色法;FQ-PCR法联合胶体金法对结核分枝杆菌的检出率优于单独采用FQ-PCR法、胶体金法的检出率;FQ-PCR法具有高度灵敏性和特异性,结果的可信度优于其他两种方法,联合胶体金法诊断可在保持高灵敏性、高特异性的同时,进一步提高结核分枝杆菌检出率.结论 对早期诊断可获得较好治疗效果的肺结核患者应该选择灵敏度高的诊断方法,FQ-PCR法联合胶体金法检测有一定优势.
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过敏原检测的光化学灭活病毒液态质控物的制备及稳定性观察
目的 制备过敏原检测光化学灭活病毒液体质控物.方法 收集外观清晰、无溶血的标本每次测试完后剩余的新鲜血清,用复合保护剂及光化学灭活病毒法制备过敏原检测的液体质控物并观察其稳定性.结果 用复合保护剂及光化学灭活病毒法制备过敏原检测的液体质控物与人血清的性状相近,不需复溶,储存时间长,在4~8 ℃及-20 ℃的条件下至少可达85周.结论 该液体质控物不需复溶,且稳定时间长.
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乙型肝炎病毒外膜大蛋白与HBV DNA、ALT的关系及其临床意义
目的 检测不同模式乙肝患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)、HBV DNA以及转氨酶情况,比较HBV-LP的检出与HBV DNA及转氨酶的关系.方法 采用酶联免疫吸附法检测199例HBV患者血清HBV-LP,荧光定量PCR法检测患者HBV DNA,全自动生化分析仪检测转氨酶.结果 相同乙肝模式患者血清HBV-LP与HBV DNA检出率差异无统计学意义.HBeAg阳性患者血清中,HBV-LP与HBV DNA阳性率均明显高于HBeAg阴性患者(92.45%与42.04%,P<0.05;90.57%与38.85%,P<0.05).HBV-LP阳性患者的转氨酶水平明显高于HBV-LP阴性患者.结论 HBV-LP与HBV DNA有较高的符合率,是反映乙肝患者体内病毒复制情况的可靠指标.而且,HBV-LP阳性患者转氨酶较阴性患者高,表明HBV-LP同时也反映了乙肝病情的活动情况.
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不同方法治疗急性心肌梗死患者血清CK、CK-MB水平及疗效比较
目的 探讨急性心肌梗死溶栓治疗与普通治疗后血清心肌酶学指标的变化情况.方法 检测并分析接受溶栓治疗(实验组)或普通治疗(对照组)急性心肌梗死患者血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)水平.结果 实验组与对照组治疗前血清CK、CK-MB检测结果差异无统计学意义(P>0.05),治疗12 h后检测结果差异有统计学意义(P<0.05).实验组和对照组治疗12 h后冠状动脉再通率、心力衰竭发病率、心律失常发病率及住院期间病死率差异有统计学意义(P<0.05).结论 尿激酶溶栓治疗有利于急性心肌梗死患者实现冠状动脉再通,能够更有效地预防急性心肌梗死病情恶化,其疗效优于一般治疗,值得在临床推广.
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比色法与电泳法血清蛋白/球蛋白比值结果的差异分析
目的 探讨比色法和电泳法测定血清蛋白/球蛋白(A/G)比值的差异情况.方法 分别用双缩脲法、溴甲酚绿法、琼脂糖电泳法对384例血清标本进行总蛋白、清蛋白测定及血清蛋白电泳,计算出两种方法的A/G比值,并对数据进行统计学处理.结果 比色法A/G比值(1.44±0.34),与电泳法A/G比值(1.53±0.38)相比,差异有统计学意义(P<0.01),r=0.844 7.结论 比色法与电泳法A/G比值差异显著,应该建立各自方法的正常参考值.
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肌酐和胱抑素C肾小球滤过率估算方程的应用及评价
目的 探讨血清肌酐(Scr)估算的肾小球滤过率(eGFR)和血清胱抑素C(Cys C)取对数后,进行相关分析推导出的GFR估算方程的相关性及一致性.方法 选择47例临床确诊的慢性肾功能衰竭(CRF)病例组与39例健康对照组,分别用Scr和Cys C估算方程计算eGFR,并对eGFR进行一致性评价和特点分析.结果 (1)健康对照组相关系数比较,差异无统计学意义,Y=0.057X-69.94(r=0.208 9),两种估算方程间存在较大的恒定误差,Scr估算方程结果(S-GFR)明显高于Cys C估算方程(C-GFR),差异无统计学意义(P>0.05).病例组两估算方程结果相关密切,Y=0.394 5X+35.59(r=0.850 1),有一定的比例偏差,但恒定误差仍较明显,即取值越低两者偏差越大.S-GFR估算结果明显低于C-GFR,差异有统计学意义(P<0.01).总体组兼顾健康对照组与病例组的偏差倾向,低值端S-GFR明显低于C-GFR,高值部分S-GFR明显高于C-GFR,差异有统计学意义(P<0.01),但平均偏差不明显.(2)Bland-Altman一致性分析结果与相关分析结果基本一致,C-GFR与S-GFR相比,存在高值部分偏低、低值部分偏高的趋势.结论 相关分析和Bland-Altman一致性分析结果基本一致,两估算方程间存在明显偏差,不能相互替代使用.
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外周血Th17及CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞失衡与不明原因反复自然流产的相关性研究
目的 观察不明原因反复自然流产(URSA)孕妇外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞比例的变化,探讨Th17/T细胞比例失衡在URSA孕妇发病机制中的作用.方法 选择36例URSA孕妇为实验组,健康早孕妇女40例为对照组,应用流式细胞仪检测Th17与CD4+CD25+FoxP3+T细胞的比例,应用ELISA法检测IL-6、TGF-β和IL-17的水平.结果 URSA孕妇外周血中,CD3+CD8-IL-17+T细胞占CD3+T淋巴细胞的百分比高于对照组,P<0.05;CD4+CD25+FoxP3+T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比明显低于对照组,P<0.05.相关细胞因子测定结果显示,IL-6、IL-17水平在URSA孕妇血清中均明显升高,TGF-β水平在2组间比较,差异无统计学意义.结论 外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的比例及相关细胞因子数量的异常可能下调母胎免疫耐受功能,参与URSA的发生.
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下呼吸道肺炎克雷伯菌感染诊断与痰液半定量培养细菌数量的相关研究
目的 探讨自然咳出痰标本半定量培养12级法筛检肺炎克雷伯菌的指标.方法 每份痰标本均同时涂片和接种.涂片观察标本质量,以白细胞吞噬菌或白细胞浓集区域优势菌为拟分离菌;培养采用半定量12级法.查阅2005年6月1日至2010年5月31日住院患者痰内筛检出肺炎克雷伯菌者病历,统计分析首次培养的细菌数量、标本质量与出院诊断的关系.结果 白细胞吞噬菌的确存在,但阳性率不高;肺炎克雷伯菌131株,其首次培养的相对数量为 0.1、≥0.2的阳性率分别为52.78%、66.31%;两者确诊率比较,χ2=5.24,0.05
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ELISA法检测抗-HIV结果影响因素的研究
目的 探讨标本中溶血、脂血、血液保存液对抗-HIV ELISA法检测结果的影响.方法 采用模拟对照实验,用溶血、脂血、血液保存液和小牛血清分别对抗-HIV阳性质控血清进行系列梯度稀释,用ELISA法检测,观察溶血、脂血、血液保存液对检测结果的影响.结果 含有血液保存液的抗-HIV阳性质控血清的检测结果均明显低于小牛血清对照组(P<0.01),且在60%稀释度内,随血液保存液浓度逐步增加,降幅有加大趋势;而溶血、脂血对抗-HIV阳性质控血清的检测结果影响差异无统计学意义(P>0.05).结论 血液保存液对ELISA法检测抗-HIV结果影响明显;而溶血、脂血对抗-HIV ELISA法检测结果无影响.
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rSj26-Sj32-Immunogold-IgG-Dipstick法用于急性日本血吸虫病患者的诊断价值
目的 探讨rSj26-Sj32-Immunogold-IgG-Dipstick法用于急性日本血吸虫病患者的诊断价值.方法 利用纯化的rSj26-Sj32融合蛋白和日本血吸虫成虫抗原(SjAWA)建立Immunogold-IgG-Dipstick法,检测急性日本血吸虫病患者血清,并以华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、棘球蚴病、乙型肝炎、肺结核患者和健康人血清作对照.结果 rSj26-Sj32检测急性日本血吸虫病患者血清的敏感性为96.00%,特异性为97.67%;SjAWA与华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病和泡型棘球蚴病患者血清存在不同程度的交叉反应,而rSj26-Sj32则未见交叉反应.结论 纯化的rSj26-Sj32融合蛋白是1种较好的免疫诊断抗原.
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某地区HPV不同亚型感染与宫颈病变的相关研究
目的 探讨该地区人群不同亚型人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈病变的关系.方法 采用PCR DNA反向斑点杂交技术,对1 039例门诊首诊人群的宫颈脱落细胞标本进行HPV基因诊断和分型,所得数据用SPSS 17.0统计软件进行统计分析.结果 1039例标本中HPV整体感染率为32.1%,其中单重感染占阳性标本的75.4%,双重感染和多重感染分别占阳性标本的17.7%、6.9%.HPV感染在小于30岁年龄段感染率高,随着年龄的增加,感染率降低.HPV感染率随着宫颈病变级别的增加逐渐上升(P<0.001),HPV16亚型随宫颈病变级别的增加感染率逐渐上升(P<0.001).不同年龄段HPV多重感染率差异有统计学意义(P<0.05).结论 DNA杂交技术能一次性检测23种HPV型别,敏感性高、特异性强、操作简便、结果易于判读,适合临床应用.HPV分型检测对筛选宫颈高度病变有重要意义.
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化学发光免疫法检测血清PSA水平在乳腺癌诊断和预后评估中的应用
目的 探讨血清前列腺特异性抗原(PSA)在乳腺癌诊断和预后评估中的价值.方法 采用化学发光免疫法测定97例乳腺癌患者、74例乳腺增生患者和50例健康对照者的血清PSA水平,评价其在乳腺诊断和预后评估中的价值.结果 在所有女性血清中均有一定的PSA水平表达,且随着疾病恶性程度的升高其水平可明显增高.而在乳腺癌患者中,PSA水平与临床分期呈明显负相关.结论 PSA水平在女性乳腺癌诊断和预后评估中具有重要的临床应用价值.
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高效毛细管电泳的临床应用
瑞典Uppsala大学物理化学系Svedberg教授提出,荷电的胶体颗粒在电场中移动的现象为电泳.高效毛细管电泳(HPCE)是在传统电泳基础上,继现代高效液相色谱技术之后发展起来的1种新型高效分离技术,它综合了经典电泳技术和现代微柱分离技术的优点,因而具有高效、快速、简便和自动化程度高的特点[1-2].由于它突出的高效性和快速性,受到越来越多青睐,被广泛应用于生物化学、分析生物学和微生物学等领域[3-5].
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血栓弹力图仪的研究进展
出凝血功能异常是临床上常见的症状.目前临床上较为常用的一些检测项目,如DIC全套、凝血因子含量测定、凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物(TAT)、血浆纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PAP)等在一定程度上存在敏感性、特异性不足的问题.血栓弹力图仪(TEG)是1种从血小板聚集、凝血、纤溶等整个动态过程来监测凝血过程的分析仪,其原理是基于凝血过程的终结果为形成血凝块,而血凝块的物理特性(血凝块强度和稳定性)决定其是否具有正常凝血功能[1].与常规检测方法相比,TEG更加快捷、精确,是整体评价凝血功能的1个敏感实验[2].近年来,TEG在监测术中输血、抗血小板药物治疗、预防血栓及溶栓等方面的应用都有很大发展[3].
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珠蛋白生成障碍性贫血基因检测技术的研究进展
珠蛋白生成障碍性贫血是1组溶血性贫血病,呈现常染色体隐性遗传.可分为α和β珠蛋白生成障碍性贫血两类,分别因位于16号染色体短臂末端的α珠蛋白基因或位于11号染色体短臂上的β珠蛋白基因缺失、突变等缺陷引起相应珠蛋白链合成受到抑制或功能丧失导致溶血性贫血.其多见于东南亚各国,包括中国南方各省,广东、广西为珠蛋白生成障碍性贫血高发区,统计显示,广东省中山市β珠蛋白生成障碍性贫血基因携带率3.07%[1];广西省桂林市β珠蛋白生成障碍性贫血基因携带率为7.22%[2].
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结合珠蛋白清除血红蛋白作用及机制
结合珠蛋白(Hp)又称触珠蛋白,是1种极丰富的急性时相血浆糖蛋白,结构上是α2球蛋白的一部分,1938年由Polonovski和Jayle[1]报道.在血管内溶血期间,游离血红蛋白(Hb)可释放入血循环,Hp与这部分Hb结合,Hp-Hb复合体通过与巨噬细胞表面的清道夫受体CD163结合,经内吞作用促进Hb清除,预防Hb相关的毒理效应.不同结构类型Hp与结合珠蛋白相关蛋白(Hpr)共同存在,这些Hpr也可结合Hb.Hp的生物学功能高度依赖于其与Hb结合后与受体之间的亲和力.
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microRNA与肺癌相关性研究的新进展
肺癌是当今世界上对人类健康与生命危害大的恶性肿瘤之一,肺癌的发生、发展是1个多基因参与、多步骤、多阶段的复杂过程,其相关分子致病机制的研究具有重要临床意义[1].microRNA(miRNA)是一类由18~23个核苷酸构成的单链非编码RNA分子,miRNA通过调控基因表达广泛参与肿瘤的发生、浸润和转移等一系列过程.本文就其与肺癌相关性研究的新进展作一综述.
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红细胞系造血调控的研究进展
红细胞是血液的重要组成部分,具有运输氧气到机体各种组织和细胞的重要生理功能.在胚胎与胎儿期,造血依次由卵黄囊、肝、脾和骨髓完成,出生后,骨髓成为主要的造血场所.红细胞生成经历了骨髓多能干细胞向红系分化以及红系祖细胞的继续分化和发育成熟等过程.多能干细胞分化为多能髓系祖细胞后,在定向分红因子作用下进一步分化为红系祖细胞,历经红系爆式集落形成单位(BFU-E)和红系祖细胞集落形成单位(CFU-E)阶段后,逐渐增殖、分化为原幼、早幼、中幼、晚幼和网织红细胞,终形成失去细胞核的成熟红细胞[1].
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炎性细胞因子在支气管哮喘发病机制中的作用
支气管哮喘(BA)简称哮喘,是由嗜酸性粒细胞(EOS)、肥大细胞(MC)、T淋巴细胞等多种炎性细胞及其细胞因子参与的,以可逆性气道阻塞、气道高反应性和气道重塑等为主要特征的慢性气道炎性反应.而这些炎性细胞的增殖、生长、分化、移行、聚集、浸润、活化与其自身分泌的细胞因子(CK)息息相关,细胞-细胞、细胞-因子、因子-因子相互促进和制约,构成了1个庞大、错综复杂且效应广泛的细胞因子网络.近,不少研究认为炎性细胞因子网络失衡在哮喘的发病机制中起重要作用[1].本文就此进展综述如下.
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降钙素原生化特点和临床应用现状
许多学者已经报道过降钙素原(PCT)水平是早期诊断新生儿脓毒败血症的1个重要标志物[1],诊断的灵敏度和特异性可高达90%.PCT水平在感染较轻时不受影响,但在系统性细菌感染和败血症后水平开始升高.目前PCT水平被作为1个有早期诊断价值的,可反映全身感染程度,评价疗效及判断预后的指标.
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硫化氢对人体生理系统调节机制的研究进展
随着生命科学的飞速发展,气体小分子在生命活动中的意义越来越受到高度关注.20世纪80年代中期,国外科学家发现了"明星分子"一氧化氮,20世纪90年代中期又发现在机体中存在第2种气体信号分子一氧化碳,近人们提出硫化氢是心血管功能调节的新型气体信号分子.事实说明气体小分子物质在生命活动中起着特殊的作用,有研究表明这些硫化氢气体小分子以其特有的持续产生、迅速传播和快速弥散等特点,在心血管、神经、消化和免疫等多个系统中均发挥重要的病理生理调节作用.
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组蛋白乙酰化与肿瘤的相关研究
癌症可以源于表观遗传和遗传的异常导致的基因表达和功能的失调,表观遗传学机制所致的基因沉默现在已经成为肿瘤发生的1个重要的因素[1].通过表观遗传学机制导致的基因异常转录的沉默,例如DNA甲基化,组蛋白转录后修饰,已经成为癌细胞的1种标志.和突变与缺失引起的遗传异常不同的是,表观改变并没有涉及任何目的基因结构的改变.组蛋白的乙酰化是组蛋白转录后修饰的1种重要形式,肿瘤发生发展过程中,组蛋白的修饰出现异常是1个正在受到密切关注的方向,尤其是组蛋白乙酰化和去乙酰化异常的研究多.
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儿童肝衰竭的研究进展
儿童肝衰竭因其病情进展快、病情重、病死率高成为儿科医师具挑战性的疾病之一.目前在世界范围内对儿童肝衰竭的研究仍然有限,无统一的命名、分类及诊断标准;强调内科综合治疗,大大提高肝衰竭儿童生存率;预后因病情、干预措施等因素而异.因此,儿童肝衰竭的研究进展对该病的认识及控制有重要意义.
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端粒、端粒保护蛋白与动脉粥样硬化的研究进展
端粒是真核细胞染色体末端的1段特殊DNA-蛋白质复合体结构,它在维持细胞稳定,稳定染色体功能,防止染色体DNA降解、末端融合,保护染色体结构基因,调节正常细胞生长中具有重要作用[1].近年来的研究表明,端粒与一些年龄相关疾病(如动脉粥样硬化)的形成及冠心病有关[2-4].端粒保护蛋白(POT1)是结合于富含G的端粒单链重复序列,广泛存在于各种真核生物细胞中的1种蛋白家族.目前的研究均表明,POT1蛋白在细胞分裂、端粒长度调控、末端保护、端粒功能维持以及染色体的稳定方面有着非常重要的作用,并且表达水平的变化与动脉粥样硬化的发生、发展有密切关系[5-7].
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采集不合格血液标本的原因分析及对策
在现代疾病诊断中,临床检验起着极其重要的作用.检验结果的正确与否直接影响着临床医师对疾病的正确判断及治疗.有文献报道,检验科80%的检验结果误差与质量差错发生在检验标本的采集与运送阶段[1].据统计,不合格检验标本发生的原因65%与护士采集标本相关[2].为采集合格血液标本,现就本院护士采集不合格血液标本的原因进行分析,并制定对策,报道如下.
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某地区贫血患儿分类情况的探讨
本文通过平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV)等红细胞参数进行红细胞形态分类,综合判定贫血患儿类型,及时对症治疗,缓解贫血[1].1 资料与方法1.1 一般资料本院门诊2010年9~12月的6个月至12岁就诊的贫血患儿625例.
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血小板输注在白血病化疗中的应用
白血病属于造血系统的恶性肿瘤,是一类造血干细胞的克隆性恶性疾病,此类白血病细胞在骨髓和其他造血组织中大量增生和积累,并广泛浸润其他器官和组织.正常的造血功能受到抑制,引起红细胞和血小板减少[1].而化疗是肿瘤治疗的重要手段,其引起的常见且严重不良反应是骨髓抑制.随着化疗剂量强度的提高,严重的骨髓抑制引起血小板减少的发生率日益增多,严重的血小板减少可导致出血死亡.但是根据患者的年龄和化疗情况,选用适当的药物和适当的联合化疗方案,可避免化疗诱发血小板减少而导致的严重出血.
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1149例妇科白带常规组合法检测结果分析
白带常规检查是女性健康检查中普遍,也是应用广的1项检查,可以用于女性阴道炎症、妇科感染以及宫颈疾病的诊断.因此,妇产科白带常规检查就显得尤其重要.而目前广泛应用的盐水涂片法由于取材及涂片的因素易造成对病原体的漏检,而且标本不易保存,容易受白细胞、上皮细胞、黏液丝等有形成分的干扰,病原体检出率低[1].近1年来,本科室将湿片、干片、pH值、细菌性阴道病-10(BV-10)检查结合起来,建立1种新的白带常规组合法,用于临床研究,现报道如下.
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广电系统职工高尿酸血症患病率的调查分析
目的 通过此项调查分析,提高对高尿酸血症的认识,养成健康的生活方式.方法 对广电职工高尿酸血症患病情况进行调查.结果 将2002、2010年的调查结果进行了对比,并对其相关因素进行分析,发现2002、2010年广电系统职工高尿酸血症的患病率逐年提高.结论 需要定期检测血尿酸水平,做到早发现、早诊断和早治疗,才能提高员工健康水平.
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某院微生物室室间质评的调查分析
目的 了解该院微生物实验室历年参加室间质评的调查结果,验证评估整体业务水平.方法 对2000~2009年参加微生物室室间质评的调查结果进行总结、分析.结果 143株室间质评菌株中,回报结果正确率94.4%.大肠杆菌97.9%,葡萄球菌91.7%,非发酵菌81.8%,弧菌科85.7%,念珠菌94.4%,其他81.8%.药敏实验正确率90.9%.结论 该室历年的临床微生物室室间质评调查结果显示,在弧菌科、分枝杆菌、念珠菌、非发酵菌分离鉴定中存在一定不足.肠杆菌科、葡萄球菌、肠球菌是临床常见菌,分离鉴定符合率较高,药敏实验符合率欠佳.通过参加微生物室室间质评的调查对该室起到了标准化、规范化的作用,并提高了微生物室工作人员对细菌的识别、鉴定及药敏实验的检测能力.
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微柱凝胶法配血不合的原因分析与处理
目的 分析交叉配血不合的原因并找到处理方法,使患者能及时、有效、安全地输血.方法 采用微柱凝胶法(MGT)进行血型复检、不完全抗体筛查及交叉配血实验.对交叉配血不合者,用凝聚胺法(MPT)作为交叉配血对照实验,并进行直接抗人球蛋白实验(DAT)及自身对照实验.结果 19例交叉配血不合患者中,5例不完全抗体筛查阳性,5例DAT及自身对照均阳性,1例ABO血型错误,1例献血员不完全抗体筛查阳性,1例不完全抗体DAT及自身对照均阳性,6例因标本中含有纤维蛋白引起假阳性.结论 发现交叉配血不合时,要分析标本、病史并严格按照标准操作规程进行相关实验,查找原因并根据患者实际情况作出相应的处理.
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肺炎支原体IgM抗体检测的常用方法比较
目的 比较肺炎支原体IgM检测的5种方法的敏感度、特异度和准确度,供不同条件的实验室根据实际组合应用.方法 采用酶联免疫吸附实验、金标斑点法、冷凝集实验、间接血凝实验和明胶颗粒凝集法进行检测.结果 冷凝集实验与其他4种方法比较,差异有统计学意义.结论 酶联免疫吸附实验敏感度好,金标斑点法特异度好,间接血凝实验和明胶颗粒凝集法较实用,冷凝集实验诊断意义不大.
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胶乳增强免疫比浊法在甲胎蛋白测定的方法学评价
目的 对胶乳增强免疫比浊法(LEIA法)测定甲胎蛋白(AFP)水平,并进行方法学评价.方法 用LEIA法测定178例血清的AFP水平,同时采用化学发光免疫分析仪法(CLIA法)对AFP水平进行测定.结果 LEIA法测定AFP的灵敏度为0.65 ng/mL,低、中、高水平的批内CV分别为0.98%、0.92%、0.89%;批间CV分别为1.63%、1.53%、1.45%.回收率96.3%~102.9%.结论 LEIA法是测定AFP较好的方法,适合普及推广.
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加强微生物检验医师与临床医师的有效沟通
随着新发病原体的不断涌现,感染性疾病在世界各国致死性病因中地位的不断攀升,以及多重耐药细菌和医院感染暴发流行事件的不断出现,临床微生物检验在临床医疗工作中的作用日益重要[1-2].不仅要准确、快速地检测或发现病原微生物,进行药敏实验和耐药性监测,而且要满足临床对鉴定和药敏结果进行分析和解释的需求.但是,由于长期以来存在微生物检测时限长、体内和体外药敏结果不一致、对检验结果认知不对等现象,使临床医师与检验医师之间产生隔阂与抱怨.因此,加强微生物检验医师与临床医师的有效沟通极为重要,现将作者的相关体会报道如下.
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顺应医改发展趋势提升检验服务品质
2009年4月6日<中共中央国务院关于深化医药卫生体制改革的意见>正式发布,随着国家医药卫生事业改革的不断深入开展,2010年新医改工作已全面进入深水区,2月11日经国务院同意印发了<关于公立医院改革试点的指导意见>,指出要"加强公立医院管理,确保医疗安全,提高医疗服务质量,改善医院服务",随之,中国人民大学医改研究中心主任王虎峰在两会期间也提出:"医改的关键是提高医疗服务质量".
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临床微生物实验室信息管理平台的架构
临床微生物检验过程复杂,操作繁琐,检测周期长,产生的信息量大,信息结构与内容复杂,传统手工信息管理模式存在信息记录混乱及保存、查询和质量监控困难等缺陷,已不能适应临床微生物检验信息的规范化管理[1-4].目前,多数微生物实验室应用的信息管理软件功能尚不完善,很难满足实验室信息一体化管理需求.因此,要采用科学、先进的实验室管理理念,构建新型临床微生物实验室信息管理平台,实现以实验室信息为核心的全方位规范化管理,提升微生物实验室信息化水平.
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CELL-DYN3700血细胞分析仪部分镜检复审规则的设立与分析
随着现代科学技术的迅猛发展,血细胞分析仪不断推陈出新,五分类血细胞分析仪于20世纪90年代已得到了广泛的应用.由于现有的血细胞分析仪能为实验工作者提供足够多的形态学参数,人们对分析仪的依赖也逐渐加重.有研究显示,在众多实验室中,工作人员对镜检复审的概率波动幅度很大.近年来,血细胞分析仪镜检复审问题已得到了广泛关注,然而至今没有1个权威的、适合于本室本仪器的、进行过科学验证的规则指导血细胞分析工作[1-8].
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高专医学检验专业青年教师队伍建设的实践与探索
"百年大计,教育为本;教育大计,教师为本".青年教师因思想活跃、创新意识和能力较强而成为推动高校教育改革发展的生力军,也是教师队伍建设的关键[1].适应高职高专医学检验专业为基层培养高等技术应用型检验人才的要求,有计划地建设一支高素质的医学检验青年教师队伍,使之较快地成为学校师资的骨干力量是值得深入探讨,并组织认真实施的重要课题[2].本系从实际出发,立足当前,面向未来,不断探索青年教师培养的新思路和新举措,取得明显效果,现报道如下.
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肿瘤中心实验室促进科研发展的策略研究
实验室是进行科学研究、取得科研成果、培养科研人才的场所.如何使实验室健康、高效地运转是1个系统的工程,也是1个值得科研工作者关注和探讨的问题[1].本院是1家集医疗、教学、科研于一体的大型综合性医院,为了提高科研水平,为科研人员提供较好的科研条件,创造优越的科研环境,从而进一步促进医、教、研相结合,推动医院整体水平的提高,作为重要临床医学研究机构的科研实验室正日益受到各级领导的重视.如何抓好肿瘤中心实验室的建设和管理,大限度地发挥实验室的作用,促进教学与科研水平的提高,是1个值得研究和探讨的问题.为此,作者借鉴了有关单位的经验,并结合本院肿瘤中心的自身特点提出一些设想和方法,以供商讨.
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军事检验医学特点及教学分析
伴随科学技术迅猛发展,在全球范围内兴起了一场军事革命--新军事变革,其必将带领军事医学发生质的改变[1].本系作为全军惟一检验系,自1986年成立以来,一直为全军培养着高水平检验专业人员.随着新军事变革的不断深入,将如何去适应,已成为1项重要的课题.在多年论证、调研基础上,临床检验学教研室2009年新开设了"军事检验医学"这门课程,也成为检验专业国防本科生的必修课.
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模拟演训软件在军事检验医学一体化教学中的尝试
军事检验医学学科的形成是伴随着医学检验技术的发展及部队在野外条件下对医学检验的特殊需要而产生的.军事检验医学既是军事医学的组成部分,又是检验学的重要研究和应用领域,是军事医学和检验医学相互交叉融合产生的一门新兴军事医学应用科学[1].军事检验医学是军队医学院校检验专业重要的专业课之一,由于其在特殊环境、特殊作业下进行检验工作,故传统的教学模式,即 "理论-实验-实习",容易造成理论与实践的脱节,使学生很难适应临床工作,尤其是野外条件下的检验工作.
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XT-1800i检测72份相关参数不全的血小板结果和直方图分析
目的 分析血小板相关参数不全的血小板直方图变化,判断血小板计数的准确性,追寻原因,探求解决方法.方法 对72份XT-1800i检测无血小板相关参数结果的标本进行显微镜计数,将两种方法的血小板计数结果进行统计学处理,并针对不同原因纠正.结果 根据血小板直方图的变化及原因可将72份标本分为4组,每组标本的血小板计数结果两种方法之间的差异有统计学意义(P<0.000 5).抽血不当组和EDTA-K2依赖组的标本经不同方法纠正后,其血小板计数及相关参数、直方图恢复正常.结论 引起血小板相关参数不全及直方图异常的原因有采血不当、EDTA-K2依赖、大血小板和小红细胞,其导致血小板计数结果偏低或偏高,应根据不同的原因采用不同的方法进行纠正.
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心肌酶与APACHE Ⅱ评分在ICU非心肌梗死患者预后中的价值
目的 探讨心肌酶与APACHE Ⅱ评分在ICU非心肌梗死(AMI)患者预后中的价值及其相关性.方法 从2007年11月至2010年10月入住本院ICU的非AMI患者中随机选取199例,其中存活132例(存活组),死亡67例(死亡组),均于入院时进行APACHE Ⅱ评分,24 h内常规检测各项心肌酶指标.比较2组患者心肌酶测定结果、APACHE Ⅱ评分,以及心肌酶各项指标与APACHE Ⅱ评分的相关性.结果 死亡组心肌酶各项指标明显高于存活组,2组间比较差异有统计学意义(P<0.01);存活组APACHE Ⅱ(12.70±7.85)分,低于死亡组的(24.80±7.46)分,2组间比较差异有统计学意义(P<0.01);心肌酶各项指标与APACHE Ⅱ评分均呈高度正相关.结论 心肌酶和APACHE Ⅱ评分反映出ICU非AMI患者疾病的严重程度和转归,均可作为评估患者预后的参考指标之一.
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下呼吸道耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性检测及分析
目的 分析和总结该地区患者下呼吸道临床分离出的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性,为临床治疗和控制该类感染提供依据.方法 对该院2008~2010年患者下呼吸道感染痰标本进行分离培养,将鉴定出的金黄色葡萄球菌进行MRSA的耐药性检测,并把MRSA药敏资料进行统计分析.结果 209株金黄色葡萄球菌中,MRSA的比例占83.25%,MRSA呈多重耐药性.结论 下呼吸道感染标本的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离率显著增高,耐药性日趋严重,应引起临床高度重视.
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妊娠合并慢性乙型肝炎患者的相关血液指标变化及临床意义
目的 探讨妊娠合并慢性乙型肝炎患者的相关血液学指标变化及其临床意义.方法 分别采用速率法、比浊法、比色法、酶联免疫吸附实验及聚合酶链反应等方法,对妊娠期合并慢性乙型肝炎患者进行部分肝功能及凝血功能、乙肝两对半、HBV DNA的检测,并进行统计学分析.结果 与对照组及无症状妊娠组比较,慢性乙肝妊娠组患者肝功能损害表现为谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素及直接胆红素水平明显升高(P<0.05);清蛋白及凝血酶原活性降低,P<0.05.患者的病毒学特征表现为:HBeAg阳性和HBV DNA高滴度.结论 妊娠合并慢性乙型肝炎的发生多集中于妊娠的中、晚期;临床类型以中、重度为主;HBeAg阳性和HBV DNA高滴度可作为妊娠期慢性乙型肝炎发生的预测指标.
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377株院内感染的病原体及耐药性分析
目的 了解院内感染的病原学特点及其耐药情况,为临床治疗提供参考.方法 对该校2所附属医院2008年7~12月住院患者发生医院感染的病原体分布及耐药情况进行回顾性分析.结果 共检出病原菌377株,其中革兰阴性(G-)菌313株,占83.02%;革兰阳性(G+)菌62株,占16.45%;真菌2株,占0.53%.G-菌以铜绿假单胞菌(25.20%)、肺炎克雷伯菌(22.55%)、鲍曼不动杆菌(16.18%)和大肠埃希菌(13.00%)等为主;肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产ESBLs多,分别是53.73%和40.54%.G+菌中,耐甲氧西林葡萄球菌占葡萄球菌的54.29%;G-菌中,铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对各种抗菌剂均表现出高耐药性,未发现肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的亚胺培南耐药菌株;葡萄球菌对利奈唑烷、复方新诺明、呋喃坦啶及万古霉素的敏感性高(0.00%~4.44%).结论 院内感染的病原菌中,ESBLs菌株和耐甲氧西林葡萄球菌检出率高,耐药性严重且为多重耐药,应引起临床重视.
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雅培CD-1800全自动三分类血细胞计数仪常见故障及解决办法
目的 探讨日常工作中仪器的保养和维护的重要性.方法 对该科雅培CD-1800全自动血细胞分析仪在使用过程中进行维护及非常规故障进行排除和维修.结果 按仪器使用要求进行清洁、维护,保证仪器正常工作及检验结果的准确性、稳定性.结论 对仪器细心观察、积极钻研、积极维护和保养是保证临床检验结果准确的重要环节.
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全自动尿沉渣分析仪检测结果的比较分析
目的 比较UF-100全自动尿沉渣分析仪(下称UF-100)与AVE-763全自动尿沉渣分析仪(下称AVE-763)检测结果,判断其符合程度.方法 随机留取539份该市某三甲医院门诊患者的新鲜尿液,同时用两种仪器及人工镜检进行检测.结果 AVE-763、UF-100仪检测红细胞结果的符合率为89.8%,kappa=0.75>0.7.红细胞的假阳性率AVE-763为4.08%,UF-100为6.12%;两种方法检测白细胞结果的符合率为91.8%,kappa=0.78>0.7.白细胞的假阳性率AVE-763为4.08%,UF-100为4.08%.结论 UF-100和AVE-763仪与人工镜检检测尿液中红细胞和白细胞结果符合程度相当,红细胞的假阳性率UF-100>AVE-763,白细胞的假阳性率UF-100=AVE-763.
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生化分析仪精密度、准确性以及线性范围性能验证
目的 对雅培Aeroset全自动生化仪的分析项目从精密度、线性范围、正确度三个方面进行性能验证,保证其检测结果的准确可靠.方法 根据CLSI推荐的EP5-A2文件进行精密度验证;根据EP6-A文件进行线性范围验证;根据EP9-A2文件对Aeroset全自动生化仪与DADE Xpand生化仪进行方法学比对,验证正确度.结果 Aeroset全自动生化仪的分析项目批内精密度分别为0.13~4.18,总精密度分别为0.14~4.38,均小于厂家声称的精密度;ALT、AST、ALP、UA、UN、CR以及GLU在测定范围内都表现出良好的线性关系,r2>0.995;两仪器比对结果相关性较好,r2>0.995,且偏倚值均小于1/2CLIA′88允许误差范围.结论 Aeroset全自动生化仪及配套系统,其分析性能满足临床检测要求.建议所有的临床实验室对所使用的检测系统的分析性能进行评价,保证其检测结果的准确可靠,从而满足临床需求.
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大肠埃希菌对氟喹诺酮类的质粒介导耐药机制研究
目的 了解近年来发现的质粒介导耐药机制在临床分离大肠埃希菌中对氟喹诺酮类耐药所起的作用.方法 用MIC琼脂稀释法筛选耐左氧氟沙星大肠埃希菌;采用聚合酶链反应对qnrA、qnrS、qnrB、aac(6′)-Ib基因进行扩增,并进行PCR扩增产物直接双向测序.用接合实验了解是否存在水平传播的氟喹诺酮耐药性传播机制.结果 90株耐氟喹诺酮类大肠埃希菌中7株检出aac(6′)-Ib-cr基因,未检出qnrA、qnrS、qnrB基因.78株符合供体菌标准的大肠埃希菌中有2株接合成功,接合率2.6%.结论 该地区存在质粒介导的氟喹诺酮类耐药性的水平传播.
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血浆B型尿钠肽水平在临床诊疗中的运用
目的 探讨血浆B型尿钠肽(BNP)水平在临床心力衰竭及呼吸困难诊疗中的意义.方法 采用深圳瑞莱SSJ-2型多功能免疫检测仪,测定65例老年心力衰竭患者 (NYHA Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)、50例同期住院治疗非心力衰竭患者及抗心力衰竭治疗后部分患者的血浆BNP的水平;另分别检测8例心源性呼吸困难和3例肺源性呼吸困难患者的血浆BNP水平.比较各组血浆 BNP水平,以及治疗前、后血浆BNP水平的变化情况.结果 心力衰竭患者血浆 BNP水平显著高于对照组(P<0.01);治疗后心力衰竭患者BNP水平明显下降 (P<0.01);心源性、肺源性呼吸困难患者血浆 BNP水平比较,差异有统计学意义.结论 血浆BNP水平检测可用于心力衰竭患者 NYHA 诊断及辅助分级,作为心力衰竭患者疗效观察的指标,同时,可对急性呼吸困难进行鉴别.
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小分子抗原免疫途径和结合数量对抗体效价的影响
目的 应用不同结合数量的半抗原载体复合物在不同免疫途径下免疫兔,从而对小分子半抗原的抗体进行探索.方法 应用牛血清清蛋白(BSA)和二硝基苯磺酸(DNP)制备不同交联率的免疫原,同时制备酶交联物,通过脊索皮下、肌肉和脚掌皮内3种不同免疫途径免疫48只新西兰大白兔.应用酶联免疫法分析半抗原抗体滴度.结果 DNP16BSA免疫原脊索皮下、DNP8BSA和DNP16BSA脚掌皮内免疫的抗血清效价高(1∶6 400),DNP8BSA免疫原脊索皮下和DNP35BSA免疫的抗血清效价次之(1∶3 200),肌肉免疫途径差.结论 半抗原交联率在8~16时通过原脊索皮下和脚掌皮内免疫抗体滴度高.其中以原脊索皮下免疫途径更方便.
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3种粪便隐血试剂检测性能的比较
目的 对3种粪便隐血测定试剂的检测性能进行比对.方法 通过对临床粪便标本以及加入动物血、蔬菜汁、维生素C等物质的标本进行测定,检测3种试剂的灵敏度、特异性、抗干扰能力、反应时间和均一性.结果 两种胶体金法试剂的灵敏度、特异性、抗干扰能力均高于匹拉米洞法;但其在反应时间和均一性方面也存在一定差异性.结论 胶体金法具有敏感度、特异性高,渗透速度快,微孔膜均一性好等特点,适合有条件的医院使用.
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沙眼衣原体诊断试剂盒临床实验评价
目的 对该公司开发的沙眼衣原体诊断试剂盒(免疫荧光法)进行临床实验,评价其检测效果.方法 采用Trinity 试剂盒(免疫荧光法)和沙眼衣原体诊断试剂盒(免疫荧光法)对1 100例样本进行检测.采用拟验证试剂与对比试剂进行平行检测,并以Trinity 试剂盒检测结果为对照,计算两种试剂盒检测结果的总符合率及阴、阳性符合率.结果 检测临床实验样本1 100例的结果显示,对比两种试剂盒的总符合率97.18%,阳性符合率92.72%,阴性符合率97.89%.结论 迈科龙试剂盒检测快速、简便、经济、准确,可用于沙眼衣原体的快速诊断.
年 | 期数 |
2019 | 01 05 06 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 02 |