现代肿瘤医学杂志
Journal of Modern Oncology 현대종류의학
- 主管单位: 陕西省科学技术协会
- 主办单位: 中国抗癌协会 陕西省抗癌协会 陕西省肿瘤防治研究所 陕西省医学会
- 影响因子: 0.91
- 审稿时间: 1个月内
- 国际刊号: 1672-4992
- 国内刊号: 61-1415/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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沙利度胺治疗伴髓样化生的骨髓纤维化新进展
伴髓样化生的骨髓纤维化(MMM)系克隆性造血干细胞疾病,对现用姑息性治疗缺乏理想效果.沙利度胺(THAL)具有抗血管新生,抑制肿瘤坏死因子(TNF)-α和粘附分子表达,促进T细胞和自然杀伤细胞和抑制多种细胞因子释放等药理学作用.近已拓展应用于MMM的治疗.迄今国外已有逾200例MMM患者应用THAL的临床报道,显示THAL具有改善贫血,减少或停止输血依赖,增加血小板,缩小脾肿大,改善患者生活质量和体能状态等治疗效果,总反应率28%~75%(中位数59%).小剂量THAL(50mg/d)联用泼尼松(PRED)(0.5mg/kg·d)可增加患者对THAL不良反应的耐受和延续治疗作用.THAL联用泼尼松对MMM的治疗机理尚不十分清楚,但并不直接涉及改善髓内纤维化、血管新生或髓外造血.目前THAL-PRED乃是MMM症状性贫血和血小板减少的第一线治疗.
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胃癌分子病理学预后因子的研究进展
癌症患者死亡大多是远处转移的结果,绝大多数进展期癌患者并不是死于原发灶,而是转移灶引起的并发症.细胞粘附因子、各种生长因子、基质降解酶和运动因子参与肿瘤转移过程,而这些因子中大多都被认为是顶后有关的因素.本文综述了与胃癌预后有关的基因和分子及其临床应用.
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针对表皮生长因子受体Ⅲ型突变体靶向治疗肿瘤的研究进展
表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)在许多类型肿瘤的发生发展中具有重要作用,它仅表达于肿瘤细胞,而正常细胞不表达,因此成为肿瘤治疗的理想靶点.现对EGFRvⅢ在肿瘤研究中的进展作一综述.
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CSMD1基因的研究现状
CSMD1基因(CUB and Sushi multiple domains 1)是2001年新发现的候选抑癌基因,定位于人染色体8p23.2,其编码蛋白质包括14个CUB和28个Sushi结构域,是一种跨膜蛋白.已证实CSMD1基因在多种组织中有表达,并且该基因的表达缺失或功能异常与多种肿瘤的发生有着密切的联系.目前,CSMD1基因与头颈部肿瘤的关系成为人们关注的焦点,有研究表明该基因是头颈部鳞癌的抑制基因,但由于缺乏足够的证据,尚存在着争议.
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雄激素受体的表达与胃癌
胃癌是一种由多种综合因素作用引起的疾病,在我国的发病率与死亡率都很高.其发病机制尚未完全阐明,主要涉及到两方面:一方面是胞外胞内促进细胞增殖的信号过多,另一方面是抑制细胞增殖的信号减少,使细胞的生长失去正常生理信号的调控,从而产生肿瘤的各种生物学和病理学的改变.雄激素受体就是胃癌发病机制中因素之一,本文综述了雄激素受体与胃癌各生物学行为方面的关系.
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共轭亚油酸(CLA)异构体抗肿瘤作用机理研究进展
共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)是一组亚油酸的异构体,是反刍动物食品中的天然成分,其主要作用成分是c9,t11-CLA异构体.研究表明此类脂肪酸对各种恶性肿瘤有较强的抑制作用.关于CLA的抗肿瘤机理目前国内外研究较多,发现其抗肿瘤作用机理是多方面的.本文就CLA对肿瘤细胞转移特性的影响,抑制癌细胞增殖,抑制致癌因子的活性等方面做综述.
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缺氧诱导因子-1α在恶性肿瘤中的研究进展
肿瘤的发生、发展与细胞的过度增殖和凋亡的减少有关,肿瘤细胞无限制的增殖是其主要的特征,而细胞增殖需要大量耗氧,研究证实[1]缺氧是实质性肿瘤物理微环境的基本特征之一.
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X线立体定位下核芯针穿刺活检诊断早期乳腺癌
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤.乳腺X线照相可发现一些乳腺微小病灶,为明确这些病变的性质,往往需行乳腺手术活检.
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胃癌预后影响因素的研究进展
胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,随着人们对胃癌认识的不断加深,对胃癌预后的影响因素已经不仅仅停留在临床、病理等因素上,本文从手术、辅助化疗以及分子生物学等多方面综述胃癌预后的影响因素.
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多层螺旋CT引导下穿刺对孤立性肺结节的诊断价值
目的:探讨MSCT引导下穿刺孤立性肺结节应用价值.方法:经MSCT检查56例孤立性肺结节,穿刺经病理或随访证实,分析MSCT的敏感性、特异性、准确性及并发症.结果:56例中肺癌38例,假阴性4例,肺部良性结节14例无假阳性;对恶性结节敏感性90%、准确性92%、特异性100%,良性结节阴性预测值78%.一次穿刺成功率高,气胸发生率16%.结论:MSCT引导下穿刺孤立性肺结节准确性高而并发症较低,可作为鉴别结节良恶性的首选方法之一,对确定临床诊断及指导治疗具有重要的价值.
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平消胶囊配合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌的临床研究
目的:观察平消胶囊配合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及毒副反应.方法:对118例中晚期非小细胞肺癌随机分组,治疗组用平消胶囊配合金喜素加顺铂(TP)方案化疗,对照组单用TP方案化疗.结果:治疗组有效率为63.49%,对照组为43.63%,两组对比有差异性(P<0.05).治疗组Ⅲ~Ⅳ度白细胞下降率为42.86%,血小板下降率为17.46%;对照组Ⅲ~Ⅳ度白细胞下降率85.45%,血小板下降率为38.18%,两组对比,也有明显差异性(P<0.05).结论:平消胶囊配合化疗既能增加疗效,又具有保护骨髓作用,值得临床应用.
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手术联合拓扑替康、顺铂化疗治疗小细胞肺癌的疗效
目的:回顾性总结及评价金喜素(拓扑替康)、顺铂化疗与手术综合治疗35例小细胞肺癌(SCLC)的疗效.方法:35例SCLC患者,Ⅱ期9例(20.5%),ⅢA期26例(79.5%),术前均用金喜素、顺铂化疗两个疗程后行肺癌根治手术,术后化疗3个疗程以上,对术后满1年半35例和术后满3年18例进行随访,分别观察1年半和3年生存率.结果:35例1年半生存率为94.2%;18例3年生存率为83.3%.结论:金喜素、顺铂化疗和手术外科联合治疗对ⅢA分期以内的SCLC具有良好的治疗效果.
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周剂量紫杉醇治疗晚期高龄非小细胞肺癌的临床研究
目的:探讨周剂量紫杉醇治疗70岁以上晚期高龄非小细胞肺癌的临床疗效和毒副反应.方法:采用紫杉醇60mg/m2/w.连用2w和(或)3w,每3~4周重复,2~4周期化疗后进行评价.结果:全组32例,总有效率37.5%;其中18例初治有效率为44.4%,CR1例,14例复治病例,有效率为35.7%.毒副反应为Ⅰ~Ⅱ度白细胞下降和周围神经毒性及消化道反应.结论:周剂量紫杉醇可作为治疗70岁以上晚期高龄非小细胞肺癌患者的安全有效的化疗方案之一.
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穿刺加三苯氧胺治疗乳腺囊肿的疗效观察(附36例)
目的:比较乳腺可扪及囊肿穿刺抽液后服用三苯氧胺和单纯穿刺抽液两种治疗方法的疗效.方法:将临床可扪及乳腺囊肿根据乳腺B超检查结果入组68例,随机分为穿刺抽液治疗组32例和穿刺抽液后服三苯氧胺治疗组36例,两组患者穿刺抽液后中位随访13个月观察疗效.结果:68例可扪及乳腺单纯囊肿,平均囊肿大小23mm,36例穿刺服三苯氧胺组复发率13.89%(5/36),32例穿刺抽液组复发率37.50%(12/32),两组相比较(P<0.05)有显著性差异.乳腺囊肿病史>1年的患者,穿刺服三苯氧胺组和穿刺组复发率分别是36.36%(4/11)和77.78%(7/9),两组相比较(P<0.05)差异有显著性.对单个囊肿,多发囊肿,囊肿病史<1年患者,两种治疗方法不影响复发率(P>0.05).结论:临床可扪及乳腺单纯囊肿可根据B超检查筛选适合穿刺患者,穿刺抽液加服三苯氧胺治疗可减少复发,囊肿病史>1年者复发率较高.
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保乳术个体化组织切除范围指征的探讨
目的:建立可以在乳癌保乳术中预测术后局部复发可能的Logistic模型.方法:回顾性研究乳癌根治性手术病例515例,以肿瘤存在广泛浸润的相关因素作为自变量,应用统计软件SPSS11.5中Logistic回归法,分别对乳腺癌瘤体周边2cm以外的乳房内部组织和瘤床所在的皮肤、皮下组织两部位,建立预测存在肿瘤广泛浸润的Logistic模型.再以已知的病例资料为测试样本,验证模型的有效性.结果:建立的Logistic模型,预测乳房内部组织肿瘤广泛浸润的特异度为80.43%,灵敏度为73.46%,符合率为78.61%;预测皮肤、皮下组织肿瘤广泛浸润的特异度为84.34%,灵敏度为80.95%,符合率为83.96%.结论:建立的Logistic模型在保乳术病例中预测术后皮肤、皮下组织复发结果理想,有临床应用价值.
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肺母细胞瘤1例报告及文献复习
肺母细胞瘤(pulmonary blastoma,PB)又称为肺胚瘤(pulmonary embryoma),是一种罕见的肺原发恶性肿瘤.在肺部原发性恶性肿瘤中发病率仅占0.25%~0.5%,据统计,截止2005年4月国内共报道53例[1].发病年龄自2个月至80岁,以30岁~60岁居多,约30%的病例发生在儿童时期,男性多于女性,约2.4~3:1.
关键词: 肺母细胞瘤 -
改良乳腺癌根治术保留胸前神经的方法及临床意义
目的:探讨在改良乳腺癌根治术中保留胸前神经的方法和临床意义.方法:将68例拟行改良乳腺癌根治术的患者随机分为两组,保留胸前神经组和不保留胸前神经组各34例.保留胸前神经组手术时分开胸大肌暴露并保留胸内、外侧神经,不保留胸前神经组则不保留胸内、外侧神经.其余手术操作相同.术后12个月用彩超测量胸大肌厚度,并与对侧比较.结果:保留胸前神经组无重度胸大肌萎缩,不保留胸前神经组重度萎缩26例(76.5%).经统计学检验,保留胸前神经组重度胸大肌萎缩情况较不保留胸前神经组明显减少(P<0.01).结论:改良乳腺癌根治术中保留胸前神经能减少术后胸大肌萎缩.
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得力生注射液联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察
目的:观察得力生注射液与化疗联合应用治疗晚期非小细胞肺癌的近期疗效及毒副反应.方法:将62例晚期非小细胞肺癌病人随机分为治疗组和对照组,治疗组用得力生注射液+化疗方案治疗,对照组用单用化疗方案治疗.结果:治疗组有效率为50%,对照组有效率为43.75%,两组对比差异无显著意义(P>0.05);治疗组生活质量增加者占53.13%,对照组增加者37.5%,治疗组较对照组生活质量有明显的提高(P<0.05).消化道反应治疗组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度占50%(16/32),对照组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度占80%(24/30),差异有显著意义(P<0.01).结论:得力生注射液对晚期非小细胞肺癌有效,对改善临床症状、减轻化疗副反应和提高生活质量具有较好作用.
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手术加NP方案化疗治疗非小细胞肺癌伴恶性胸腔积液的临床观察
目的:观察手术加NP方案化疗治疗非小细胞肺癌恶性胸腔积液的疗效和不良反应.方法:回顾性研究33例伴非小细胞肺癌恶性胸腔积液手术加NP方案化疗治疗的临床资料.结果:无围手术期死亡,并发症7例(21.2%);症状改善总有效率90.9%~100%;胸腔积液缓解总有效率93.9%;1年存活率78.8%,2年存活率51.5%.结论:手术加NP方案化疗治疗伴癌性胸水的非小细胞肺癌疗效确切,能明显提高生存质量,延长生存期,有推广应用价值.
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38例无症状肺孤立性微小结节的电视辅助胸腔镜手术诊治
目的:探讨电视辅助胸腔镜手术(VATS)在无症状肺部孤立性微小结节的诊断、鉴别诊断以及治疗中的可行性和意义.方法:对38例无症状肺部孤立性微小结节患者进行了VATS诊治;结节直径均<1.5cm,小者0.3 cm;13例(34%)术前拟诊为肺癌,余25例(66%)拟诊为肺部良性病变;所有患者术前均未能获得明确病理学诊断.结果:所有患者均顺利完成手术,无严重术中、后并发症和围手术期死亡.全组患者均获得明确病理学诊断,确诊率100%.其中恶性病变11例(29%),良性病变27例(71%).5例(38%)术前拟诊为恶性病变的患者终确诊为良性病变;3例(12%)术前拟诊为良性病变的患者终确诊为恶性病变.本组中27例良性病例经VATS手术均获得临床治愈.11例肺癌患者中9例接受了根治性肺叶切除+纵隔淋巴结清扫术;另2例患者仅接受姑息性结节楔形切除术.结论:VATS技术可应用于无症状肺孤立性微小结节的确诊,对良性或恶性病变均可获得满意的疗效,可行性良好,与传统诊疗方法相比具有明显的优势,有助于肺癌的早期诊断与治疗.
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乳腺癌术后及术后放疗引起上肢淋巴水肿的微波治疗
目的:探讨微波治疗乳癌手术及术后放疗引起上肢淋巴水肿的临床疗效.方法:对56例乳癌手术及术后放射治疗引起的上肢淋巴水肿患者采用微波治疗.结果:总缓解率100%;完全缓解率64.3%(36/56);部分缓解率30.4%(17/56),轻度缓解率3.6%(3/56).轻/中度水肿缓解率100%(48/48);重度水肿缓解率62.5%(5/8).单纯手术后水肿缓解率100%(29/29);术后放疗后水肿缓解率88.9%(24/27).统计学分析,轻/中度淋巴水肿和重度淋巴水肿缓解率之间有显著性差异(P<0.01);单纯手术后淋巴水肿和术后加放疗淋巴水肿缓解率之间有显著性差异(P<0.01);术后放射治疗发生重度淋巴水肿患者无完全缓解病例.结论:微波治疗能使乳腺癌手术及术后放疗引起的上肢淋巴水肿减轻、消退,淋巴水肿程度愈轻疗效愈好,术后放疗且重度淋巴水肿患者疗效不佳.
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乳腺癌诊治中肿瘤标志物CA15-3的临床价值
目的:探讨CA15-3在乳腺癌诊治中的临床价值.方法:采用酶联免疫吸附法检测.结果:CA15-3在诊断乳腺良性疾病与乳腺癌时,差异无显著性(P>0.05);对62例乳腺癌进行观察,CA15-3在骨、肺转移及乳腺癌出现转移或复发时,阳性检测率较高,分别为85.71%、50%、100%,并且标志物浓度与转移、复发部位及病灶数目多少、浸润面积大小密切相关.结论:乳腺癌CA15-3浓度较高时,提示转移肿瘤存在且预后较差.
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肠积宁方促进大肠癌细胞株HT-29凋亡及干预相关基因bcl-2及bax表达的实验研究
目的:探讨肠积宁方对人大肠癌细胞株HT-29凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响.方法:采用MTT法测定肠积宁方对人大肠癌细胞株HT-29的增殖抑制作用,运用流式细胞仪测定肠积宁方对大肠癌细胞株HT-29凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响.结果:肠积宁方能促进人大肠癌细胞株HT-29凋亡,并抑制凋亡相关基因bc1-2、bax的表达,尤其对bcl-2的作用更显著.结论:肠积宁方具有抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用机制可能是促进细胞凋亡并抑制凋亡相关基因的表达.
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CCL21/CCR7轴促进人肺癌A549细胞的趋化与侵袭
目的:研究CCL21/CCR7轴对肺癌A549细胞定向趋化与侵袭活性的影响.方法:RT-PCR法从临床肺腺癌标本中扩增出CCR7编码区序列,定向克隆至载体pEGFP-N1中,稳定转染A549细胞,Boyden小室法检测转染前后A549细胞对CCL21的趋化和侵袭活性的改变.结果:CCL21作用下多聚碳酸酯膜背面的转染后A549细胞数明显多于转染前的A549细胞数.结论:CCL21/CCR7轴能够促进A549细胞的趋化与侵袭,其可能参与了肺癌淋巴结转移的过程.进一步研究CCL21/CCR7在肺癌中的作用将有助于阐明肺癌淋巴结转移的机制.
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卵巢癌顺铂耐药细胞系及其亲代细胞的比较基因组杂交研究
目的:探讨人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP及其药物敏感细胞株COC1在基因组DNA水平上可能存在的差异,以及这种差异在肿瘤耐药性产生中的意义.方法:采用比较基因组杂交技术分析COC1和COC1/DDP两组癌细胞间基因组的不平衡,即DNA丢失或扩增.结果:COC1细胞系具有广泛的染色体改变,染色体出现扩增的有1p21-31、2q14-24、3q25-29、8q22-24、12p11-12、19p12q12、20q12-13,出现缺失的染色体有4、13q22-31、18q12-21.COC1/DDP细胞系也有较广泛的染色体改变,出现扩增的有6q21-24、17q21-25、18q21-23,出现缺失的有10q11-22、16q12-22、17p11-12.结论:卵巢癌耐药及亲本细胞中存在着广泛的染色体变异,其中6q、17q、18q、10q、16q、17p中的一些已知或未知基因可能参与COC1/DDP耐药性的产生.
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PNRC在不同发育时期大鼠组织中的表达及其在人乳腺癌和相应癌旁组织中的表达差异
目的:探索核受体辅活化子(coactivator)PNRC(proline-rich Nuclear receptor coregulatory protein)在不同发育时期正常大鼠各种组织中的表达与其生理作用的关系;PNRC在人乳腺癌和相应癌旁组织中的表达与乳腺癌的关系.方法:以β-actin基因为参照,应用半定量RT-PCR和southern印迹技术,检测不同发育时期正常大鼠各种组织中PNRC的表达水平及其在人乳腺癌和癌旁组织中的表达.结果:PNRC在正常大鼠和胎鼠相应组织中广泛表达且无组织差异性(P>0.05);在成年大鼠各种组织中的表达明显高于胎鼠相应组织(P<0.01).PNRC在人乳腺癌中的表达水平明显低于相应癌旁组织(P<0.01).结论:PNRC是一种必需的、广泛表达的转录调节因子,它可能参与了机体多种正常组织的发育过程;在人乳腺癌和癌旁组织中的表达差异与它在乳腺癌发生中的潜在作用密切相关.
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托瑞米芬与表阿霉素联用对A549、H1299细胞生长与凋亡的影响
目的:探讨托瑞米芬(TOR)与表阿霉素(EADM)联用对人肺癌细胞株A549、H1299细胞生长与凋亡的影响及其机制.方法:用MTT比色法检测TOR的化疗增敏作用,用流式细胞仪检测细胞周期的变化及p-gp在两种肺癌细胞中的表达.结果:TOR(≥20μmol/L)能直接抑制两种细胞的生长,低剂量的TOR(5、10μmol/L)与EADM联用后的抑制率均低于单用EADM组(P<0.01),并呈现浓度依赖性.两者联用可引起两种肿瘤细胞凋亡,呈现浓度依赖性.两种细胞周期均发生明显变化.13.1%A549细胞有p-gp的存在,44.9%H1299细胞有p-gp的存在.结论:低浓度的托瑞米芬与表阿霉素联用对两种细胞有明显的协同作用.A549细胞的TOR对EADM的协同作用较H1299细胞强.其化疗增敏效应可能与增加肿瘤细胞凋亡、改变细胞周期分布有关.P53基因可能参与了TOR对两种细胞的化疗增敏及逆转耐药的调节.
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重组突变型IкBαcDNA对CNE1鼻咽癌细胞凋亡的诱导作用
目的:探讨突变型IкBα cDNA对CNE1鼻咽癌细胞凋亡的作用.方法:应用逆转录-聚合酶链式反应技术(RT-PCR)首先从CNE2鼻咽癌细胞中扩增突变型IкBα cDNA并将其克隆到pCLXSN逆转录病毒载体.然后,用脂质体介导的方法将含有该突变型IкBα cDNA的重组逆转录病毒载体转移到CNE1鼻咽癌细胞并用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒和流式细胞术分析转染细胞凋亡情况.结果:通过RT-PCR技术,从CNE2鼻咽癌细胞扩增到IкBα cDNA并成功将其克隆到pCLXSN载体.将该重组逆转录病毒载体转染CNE1细胞约48小时后,Annexin V阳性细胞数为66.67%,而仅转染空白pCLXSN载体的CNE1细胞,Annexin V阳性细胞数为4.1%.结论:突变型IкBα cDNA能够诱导CNE1鼻咽癌细胞凋亡的发生.
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靶向survivin的siRNA联合三苯氧胺对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影向
目的:观察靶向survivin的siRNA联合三苯氧胺对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响.方法:构建靶向survivin的siRNA真核表达载体,采用lipofec-tamineTM2000转染乳腺癌MCF-7细胞,采用MTT法检测靶向survivin的siRNA联合三苯氧胺对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测靶向survivin的siRNA联合三苯氧胺诱导MCF-7细胞凋亡的作用.结果:靶向survivin的siRNA和三苯氧胺均可抑制MCF-7细胞增殖并诱导其一定程度的凋亡;当联合应用靶向survivin的siRNA和三苯氧胺时,上述作用得到显著加强(P<0.05).结论:利用RNA干扰技术阻断survivin基因的表达可以显著增强MCF-7细胞对三苯氧胺的敏感性,靶向survivin的RNA干扰技术在乳腺癌的内分泌治疗中具有重要的潜在价值.
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超抗原诱导T淋巴细胞增殖和无能的体外研究
目的:研究超抗原SEA在诱导T细胞增殖和无能产生中的规律和作用.方法:SEA在体外对小鼠脾淋巴细胞进行单次和多次诱导,测定其增殖能力,CD4、CD8、CD69变化和胞内、外IL-2的表达.并测定无能T细胞对加大SEA剂量和外源性IL-2的应答反应.结果:1×SEA组,SEA显著促进T细胞活化和增殖,胞内胞外IL-2均快速增加.2×SEA组,SEA能诱导T细胞继续增殖,但增殖指数的绝对值和胞内胞外的IL-2明显下降.3×SEA组,细胞无增殖,胞内胞外几乎测不到IL-2.并且加大SEA剂量不能改变细胞的无能状态,外源性IL-2只能部分逆转T细胞无能.结论:SEA对初始CD4+T细胞和CD8+T细胞均能诱导活化和增殖,但受浓度限制;SEA三次刺激T细胞诱导无能细胞形成;T细胞无反应性不受SEA剂量限制,T细胞受抗原刺激不能产生IL-2不是无能状态产生的唯一原因.
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CD147和Annexin Ⅱ在正常人体组织中的表达分布
目的:检测CD147和Annexin Ⅱ在20种正常组织中的表达量,探讨两者分布情况及相关性.方法:Realtime RT-PCR检测CD147和Annexin Ⅱ的mRNA表达水平,并以β-actin为内参进行定量标准化.结果:CD147和Annexin Ⅱ在20种组织中均有表达,尤以肺和胎盘中表达量高,两基因的表达差异有一定相关性.结论:采用Realtime RT-PCR方法成功的获得了CD147和Annexin Ⅱ在正常人体组织中的表达分布.
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TSA对人胃癌细胞SGC-7901基因表达的影响
目的:研究乙酰化转移酶抑制剂(TSA)对人胃癌细胞SGC-7901基因表达的影响,初步探讨TSA对胃癌细胞抑制作用的机理.方法:用含有22575个样点,覆盖21073个人类基因的Agilent Human 1A基因表达谱芯片来研究TSA对胃癌细胞基因表达的影响.分离纯化未作任何处理的胃癌细胞和用TSA处理过的胃癌细胞mRNA,制备荧光标记的cRNA靶物(Cy3或Cy5标记).靶物与基因芯片杂交,用Axon 4000B型扫描仪进行芯片荧光信号扫描.利用计算机分析用TSA处理过的胃癌细胞和未处理的胃癌细胞基因表达的差异.同时利用real time PCR验证部分基因的改变.结果:在21073个基因中,有显著差异的基因共4710个基因,其中TSA处理组相对于未处理组基因上调2倍以上的有905个,下调0.5倍以下的基因3805个.结论:TSA通过多基因共同作用来抑制胃癌细胞的生长.这些基因在胃癌的发病中可能起着非常重要的作用.
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抑癌基因PTEN在人肝癌组织中的表达及其与HCV核心蛋白的关系
目的:研究抑癌基因PTEN在人肝细胞肝癌中的表达及其与HCV核心蛋白间的关系.方法:采用SP法检测人肝细胞肝癌组织中PTEN和HCV核心蛋白的表达.结果:42例肝癌组织中PTEN阳性表达14例(33.3%),而在癌旁肝组织中全部为阳性表达(28例),PTEN蛋白在癌旁组织中的阳性表达率明显高于肝癌组织(P<0.01),PTEN的表达在HCC组织病理分级间亦有显著差别(P<0.01);肝癌组织中HCV核心蛋白阳性表达17例(40.5%),HCV核心蛋白的表达在HCC组织病理分级间无显著差别(P>0.05);spearman相关分析显示,在肝癌组织中HCV核心蛋白与PTEN表达之间呈负相关(r=-0.424,P<0.01),即HCV核心蛋白阳性表达的肝癌组织中PTEN低表达.结论:在人丙型肝炎相关性肝细胞肝癌中存在着PTEN的表达缺失或下降;在HCV导致的肝癌的发生中,丙肝核心蛋白可能通过抑制PTEN的表达终导致癌变的发生.
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GST-P12融合蛋白的抗体制备、鉴定及免疫组化分析
目的:为了进一步研究p12DOC-1基因及其蛋白在口腔癌发生中的作用与调控机制,将已表达纯化好的GST-p12融合蛋白进行多克隆抗体的制备及鉴定.方法:将构建好的融合表达载体pGEX-4T-1-DOC-1转化BL21(DE3)型大肠杆菌,用IPTG诱导表达,得到GST-p12融合蛋白,经亲和层析柱纯化后电泳,再割胶研磨作为抗原直接免疫家兔,经Western blot及ELISA检测抗体效价及特异性并做免疫组化分析.结果:得到较高纯度的GST-p12融合蛋白,获得了兔来源的抗p12DOC-1血清,经蛋白免疫印迹杂交反应及免疫组化分析证实所得的抗体具有较高的特异性和效价.结论:成功制备了兔抗人的p12DOC-1抗血清,为进一步研究p12DOC-1在口腔癌中发生缺失的机理打下基础.
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Rab25 siRNA对人卵巢上皮性癌细胞生长和增殖的作用
目的:通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25基因的siRNA对肿瘤细胞的生长和增殖作用.方法:构建针对Rab25基因的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,通过RT-PCR检测Rab25的表达;MTT法观察细胞增殖,绘制细胞生长曲线;克隆形成实验检测肿瘤细胞的集落形成能力.结果:成功构建Rab25基因的siRNA,稳定转染靶细胞后可显著降低Rab25的表达,细胞生长速度减慢、增殖能力下降.结论:Rab25基因的siRNA对肿瘤细胞的抑制作用,为卵巢癌基因治疗开辟新途径.
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肺癌脑转移细胞的筛选及实验动物模型的建立
目的:通过反复裸鼠体内肺癌细胞接种,筛选出特异性脑转移肺癌细胞株,并建立可稳定产生脑转移的肺癌实验动物模型.方法:应用人肺癌细胞株PC-14尾静脉注射接种裸鼠,5周后处死裸鼠,取出脑转移肿瘤组织,行原代培养后再次接种裸鼠,反复几个循环,观察脑转移形成情况.结果:经过4个循环后,筛选出的PC-14/B肺癌细胞尾静脉接种可在裸鼠产生特异脑转移,可应用于建立稳定转移的肺癌脑转移实验动物模型.结论:应用肺癌细胞株行反复裸鼠体内接种,是建立肺癌脑转移实验动物模型的可行方法.
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BLCAP基因cDNA的克隆及siRNA表达载体的构建
目的:克隆BLCAP基因cDNA并构建和鉴定针对于BLCAP基因的siRNA真核表达载体.方法:从培养的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得BLCAP基因.将该基因克隆到pGEM-T-Easy载体中,酶切及测序鉴定.将合成的siRNA核酸片段退火形成双链后连接到经BamHI和HindⅢ双酶切后的pSilencer4.1真核表达载体,命名为pSilencer4.1-B1以及pSilencer4.1-B2,并进行酶切及测序鉴定.脂质体法转染SOSP-9607细胞系,G418筛选以及RT-PCR验证构建的真核表达载体对目的基因的干涉情况.结果:经酶切及测序鉴定,所获得的目的片段序列BLCAP基因完全相符.重组质粒中含有与理论值相符的插入片段,其测序结果与设计序列一致.经脂质体法转染后pSilencer4.1-B2可明显抑制SOAP-9607细胞的BLCAP表达.结论:成功克隆了BLCAP基因并cDNA构建和验证了其siRNA真核表达载体.
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凋亡抑制蛋白Survivin在前列腺癌细胞系中的表达
目的:研究凋亡抑制蛋白survivin在前列腺癌细胞系PC-3、PC-3M、DU145、LNCaP和22RV1中的表达水平.方法:应用免疫细胞化学技术,免疫印迹技术及RT-PCR技术检测5种前列腺癌细胞系中凋亡抑制蛋白survivin的表达.结果:免疫细胞化学染色结果显示,各前列腺癌细胞系survivin阳性细胞百分率,PC-3为23%,DU145为18%,LNCaP为15%,22RV1、PC-3M分别为11%和12%.免疫细胞化学染色阳性分值,PC-3为49.42+4.71,PC-3M为28.45+6.82,DU145为34.27+6.08,LNCaP为34.09+5.22,22RV1为31.66+7.13.与其他细胞系相比以PC-3细胞系中survivin的表达量高(F=22.84,P<0.01).Westernblot结果显示,PC-3、LNCaP、DU145细胞系中的survivin蛋白总量相对较高,而22RV1、PC-3M中的survivin蛋白总量相对较低,RT-PCR结果显示,PC-3、LNCaP细胞中的survivinmRNA水平相对较高.结论:5种前列腺癌细胞系中均有survivin的表达但表达水平略有差别.研究前列腺癌细胞系中凋亡抑制蛋白survivin的表达对研究前列腺癌的发生、抗药性机制及新药物靶位的筛选具有重要意义.
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5,4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
目的:探讨金雀异黄素(gen)衍生物5,4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮(5,4'-Di-noctoxyl-7-gem-difluoromethylenegenisteinDOdFMG)体外选择性抑制人乳腺癌细胞增殖和诱导凋亡作用.方法:MTT法检测DOdFMG对MCF-7和HBL-100细胞生长的影响;流式细胞术和AO/EB荧光双染法测定DOdFMG诱导MCF-7细胞凋亡作用及对细胞周期的影响.结果:DOdFMG抑制MCF-7细胞生长,呈时间剂量依赖,比gen具有更强选择性和抗肿瘤活性;DOdFMG能诱导MCF-7细胞凋亡,DOdFMG40.0μM组比gen100μM组诱导凋亡的活性更强,DOdFMGMCF-7将MCF-7细胞阻滞于S期和G2期,呈浓度依赖.结论:DOdFMG能抑制人乳腺癌细胞系(MCF-7)细胞生长和诱导凋亡,是一种高效、毒副作用小的新型治疗乳腺癌候选药物.
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环行七肽CGNSNPKSC的受体鉴定及其在胃癌中的表达
目的:探讨血管特异结合短肽CGNSNPKSC在胃癌中的表达及与肿瘤分化程度的关系;初步筛选短肽CGNSNPKSC的受体.方法:采用免疫组化SP法检测CGNSNPKSC在胃癌中的表达及与分化程度的关系;以CGNSNPKSC作为"探针"免疫筛选表达型λZAP噬菌体cDNA文库,筛选CGNSNPKSC可能的受体,并利用生物信息学对阳性克隆进行初步分析.结果:CGNSNPKSC受体在高,中,低度分化胃癌的血管中表达率依次为12/18(67%),17/23(74%),22/24(92%);在低分化胃癌组织中的表达明显高于高分化和中分化胃癌组织(P<0.05).cDNA文库筛选获得43个独立候选克隆,生物信息学显示分属于13种不同的基因.结论:CGNSNPKSC与胃癌的血管特异结合,可作为肿瘤血管抑制治疗的靶向载体.
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CD4+CD25+调节性T细胞在Lewis肺癌移植鼠中的检测及临床意义
目的:研究Lewis肺癌移植鼠胸腺与脾脏CD4+CD25+调节性T细胞数量及其相关基因Foxp3 mRNA的表达特点,探讨CD4+CD25+调节性T细胞在诱导肿瘤免疫耐受中的作用.方法:将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,建立Lewis肺癌模型.观测成瘤率、平均瘤重、肿瘤体积动态变化;采用MTT法检测胸腺及脾脏T淋巴细胞增殖功能;采用流式细胞术检测胸腺及脾脏CD4+CD25+调节性T细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测肺癌小鼠胸腺与脾脏Foxp3 mRNA表达水平.结果:Lewis肺癌的移植成瘤率为100%,平均瘤重(3.34±1.79)g;胸腺T淋巴细胞增殖功能略有降低,但降低不显著(P>0.05),而脾脏T淋巴细胞增殖功能明显降低(P<0.05);胸腺及脾脏Cd4+CD25+调节性T细胞数量均明显升高(P<0.05);Foxp3 mRNA在肺癌模型组的胸腺表达明显增高(P<0.05),在肺癌模型组脾脏Foxp3 mRNA表达中也略有增加,但增高不显著(P>0.05).结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能在肿瘤免疫耐受中发挥重要作用.
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E2F陷阱DNA对人肺癌细胞中stathmin mRNA表达的影响及促进肿瘤细胞凋亡的作用
目的:观察转录因子E2F陷阱DNA对stathmin的表达影响及抑制肿瘤细胞增生情况.方法:采用脂质体LipofectamineTM2000将E2F Decoy ODNs转染入人肺癌A549细胞中,用RT-PCR检测转染细胞中stathmin基因mRNA表达水平变化,通过细胞生长曲线观察转染细胞的增殖能力,Tunel法观察转染细胞凋亡情况.结果:E2F Decoy ODNs被成功转染入肿瘤细胞中,RT-PCR检测结果显示实验组stathmin mRNA表达水平明显低于对照组,而且显著抑制了A549细胞的增殖,空白对照组无明显变化,Tunel凋亡染色可见凋亡细胞.结论:E2F Decoy ODNs能特异性下调stathmin mRNA表达,明显抑制A549细胞的增殖,为肿瘤的基因治疗提供了新的手段.
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TRAIL及其受体在直肠癌中的表达及意义
目的:探讨人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)及其受体DR4、DR5、DcR1、DcR2在直肠癌及癌旁组织中的表达及意义.方法:采用免疫组化EliVision法检测37例直肠癌及其癌旁组织和10例正常直肠粘膜组织中TRAIL及其受体DR4、DR5、DcR1、DcR2表达水平.结果:TRAIL在正常直肠粘膜组织、癌旁及直肠癌组织中的表达呈递减趋势,而DR4、DR5的表达则与之相反(P<0.05);TRAIL在中、低分化癌中的表达与高分化癌中的表达无差异,而DR4、DR5、DcR1、DcR2在中、低分化癌中的表达高于高分化癌中的表达(P<0.05);TRAIL及其受体的表达与肿瘤的病理类型、患者的年龄、性别等因素无明显相关性(P<0.05).结论:TRAIL在直肠癌中表达较正常直肠粘膜组织减弱,DcR1、DcR2在直肠癌中的表达高于DR4、DR5,提示TRAIL及其受体可能与直肠癌的发生、发展密切相关,为临床应用提供了一定的理论依据.
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P-gp、GST-π、Topo-Ⅱ在结直肠癌组织中的表达及其相关性
目的:探讨结直肠癌组织中P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和拓扑异构酶(Topo-Ⅱ)的表达与病理特征的关系及其相关性.方法:用S-P免疫组化法检测59例术前未经放、化疗的结直肠癌组织P-gp、GST-π、Topo-Ⅱ的表达.结果:P-gp、Topo-Ⅱ的过表达与所研究的病理特征无关(P>0.05),GST-π的过表达与淋巴结转移相关(P<0.05),而与其它病理特征无关(P>0.05).P-gp的耐药率与GST-π的耐药率正相关(P<0.01),而与Topo-Ⅱ耐药率负相关(P<0.05).结论:应用免疫组化法联合检测P-gp、GST-π、Topo-Ⅱ对结直肠癌患者选择化疗方案有重要意义.
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胃肠道间质瘤38例诊治分析
目的:总结胃肠道间质瘤的临床表现、诊断及治疗.方法:回顾性分析1998年~2005年经病理确诊的38例胃肠道间质瘤病人的病理、外科治疗及预后资料.结果:免疫组化结果CD117阳性率92%,CD34阳性率74%.按Lewin标准良性11例,潜在恶性17例,恶性10例.38例均行手术治疗,术前诊断无明显特异性.潜在恶性、恶性组有25%~70%的复发转移率.术后1年、3年、5年生存率分别为91.7%、75%和40%.结论:GIST无特异性临床表现,CD117阳性有特异性诊断价值;良恶性判断主要以手术所见和组织学特征为依据;手术完整切除是治疗的关键,恶性预后极差.
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超声内镜在胃癌诊断和分期中的价值
目的:评估超声内镜在胃癌诊断中的应用价值.方法:106例患者于术前行超声内镜、胃镜检查与组织活检病理检查,并将其分期结果与术后病理学检查分期结果比较.结果:胃镜结合病理活检诊断率93.4%(99/106),超声内镜诊断率为85.0%(90/106).两者联合运用诊断率为100%.超声内镜对胃癌术前分期结果准确率达到81.1%(86/106);淋巴结转移准确率为72.2%(70/97).结论:超声内镜对诊断胃癌有较高的临床价值,并可有效地判断胃癌的分期和淋巴转移状况.
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海绵窦海绵状血管瘤的影像特征及其鉴别诊断
目的:探讨海绵窦区海绵状血管瘤的影像特征及其鉴别诊断,提高影像定性诊断率.方法:6例经手术病理证实的海绵窦区海绵状血管瘤患者,全部行头颅MRI平扫和增强扫描,其中1例行DSA检查,2例行CT检查.结果:MRI平扫病灶形态呈哑铃状或足底向外的葫芦状,T1WI呈等、低信号,T2WI呈均匀明显高信号,增强后明显强化.CT表现呈圆形略高密度均一肿块,增强后同样明显强化,DSA不显影,术前影像定性诊.断准确率50%(3/6).结论:海绵窦区海绵状血管瘤CT表现与其它实体肿瘤相比无特异性,定性诊断困难,MRI表现有其特异性,呈哑铃形或葫芦状的等、长T1,长T2信号改变,较具有特征性,但需与脑膜瘤、垂体瘤及神经源性肿瘤鉴别.
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困难条件下的气管切开术
目的:探讨困难条件下气管切开术的方法和经验,以期缩短手术时间,减少并发症,降低死亡率.方法:回顾性总结我科5年来施行的困难条件下气管切开术36例.结果:36例困难条件下的气管切开术全部获得成功,未出现严重并发症及与气管切开术有关的死亡病例.结论:环状软骨弓在绝大多数情况下都可作为气管切开术明显和稳定的参考标志.3度呼吸困难的患者,条件允许时好先经口或经鼻插管,变紧急气管切开为常规气管切开,能降低手术意外的发生.
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甲状腺乳头状癌细针穿刺涂片细胞学诊断(附16例报告)
目的:探讨甲状腺乳头状癌针吸细胞学特点.方法:对16例经组织学证实的甲状腺乳头状腺癌术前细胞学涂片进行回顾分析,重点观察细胞学及其结构在诊断上的特点.结果:甲状腺乳头状癌针吸细胞学常呈团状结构,细胞排列成乳头状,大部分可见纤维轴心,少部分乳头无纤维轴心.细胞团及散在细胞内可见核淡染、核内假包涵体及核沟.结论:甲状腺乳头状癌细针穿刺细胞学检查表现为:①细胞团乳头状结构.②核淡染、核内假包涵体、核沟.为诊断甲状腺乳头状癌的可靠指标.
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卵巢上皮癌组织中HMGA1的表达及其意义
目的:探索卵巢上皮癌组织中HMGA1的表达及其对卵巢癌诊断与预后的意义.方法:通过半定量RT-PCR法分析36例卵巢癌和36例正常卵巢上皮组织中HMGA1的表达情况.结果:36例正常卵巢上皮组织中均未检测到HMGA1的转录产物;36例卵巢上皮癌组织中,有26(72.0%)例HMGA1呈阳性表达;HMGA1在原发性卵巢上皮浸润癌中的表达与病理分级相关,21例G3的卵巢癌组织中有18例(86.0%)呈阳性表达,而10例G1和G2的卵巢癌组织中仅有4(40.0%)例呈阳性表达(P<0.001),与临床分期及病理分型无关(P>0.05).结论:HMGA1在卵巢癌组织中呈过度表达状态,与卵巢上皮浸润癌病理分级相关,可作为卵巢癌诊断与良恶性鉴别诊断指标.
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预防静脉注射吡柔吡星对局部组织损害新法
静脉注射吡柔吡星(THP)是治疗乳腺癌的常用化疗药物之一.但在静脉给药过程中,常出现静脉炎引起局部皮肤疼痛、发红等.若药物外漏可致局部组织坏死.为减轻患者的痛苦,我们在静脉注射THP后,用50%硫酸镁冷湿敷(温度2℃~8℃),预防THP对局部组织损害,收到良好的效果,现介绍如下.
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舌癌切除前臂皮瓣移植舌再造术患者健康教育
舌癌常以手术为主要治疗手段,术后辅以化疗,为达到治疗目的,恢复舌的生理功能,一般将舌切除1/2以上的病例即刻用皮瓣修复行舌再造术,由于前臂游离皮瓣的成活率高,故临床上多被采用.
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老年肿瘤患者术后肺炎的临床分析
术后肺炎属医院感染性疾病,是外科术后常见的并发症,在老年肿瘤患者中尤其常见.如何防治是一个非常重要的课题,也是术后死亡的重要原因[1].现对我院32例普通外科老年肿瘤病人术后肺炎的发病原因及防治分析总结报告如下.
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腮腺恶性中瘤术后放疗的护理
20多年来放射治疗作为腮腺恶性肿瘤术后综合治疗的一种有效方式已被广泛接受,术后放疗局部复发率明显下降,生存率显著上升.现将40例术后放疗患者的护理体会总结如下.
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26例皮瓣游离移植修复小腿恶性肿瘤保肢术后皮肤缺损患者的围手术期护理
通过对26例小腿恶性肿瘤保肢术后皮肤缺损行皮瓣游离移植手术患者术前病人、环境、器械及用药准备、术中器械护士和巡回护士配合等问题的分析,提出手术间的管理、配合的标准流程;术后患肢皮瓣的护理,是该手术护理配合的关键.
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多发性骨髓瘤肾损害34例临床特征和相关因素分析
目的:探讨多发性骨髓瘤肾损害的误诊漏诊原因.方法:对34例多发性骨髓瘤患者肾脏损害的临床表现及实验室检查进行统计学分析.结果:肾脏损害的发生率为39.1%(18/46),以慢性肾功能不全常见.骨髓浆细胞数量和尿本-周蛋白与肾功能损害之间有显著相关关系(P<0.01),贫血、β1-MG及多发性骨损害与肾脏损害有相关关系(P<0.05).首发症状缺乏特异性,误诊率70.6%.结论:骨髓浆细胞增殖及尿链蛋白产生可能是多发性骨髓瘤肾脏损害的主要原因.对于不明原因的贫血、骨痛、蛋白尿、高球蛋白血症和骨折,应及时进行本-周蛋白、免疫球蛋白及免疫电泳测定,多部位的骨髓穿刺、活检和骨X线摄片,避免误诊漏诊.联合化疗及保护肾功能可提高治疗效果,降低死亡率.
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误诊为腰椎间盘突出症的椎管内肿瘤11例诊断及治疗
目的:分析椎管内肿瘤误诊为腰椎间盘突出症的原因及治疗.方法:分析11例误诊为腰椎间盘突出症的椎管内肿瘤患者的临床表现、诊断和手术治疗.结果:术前所有误诊患者排除腰椎间盘突出症诊断,MRI检查后行手术治疗,手术切除标本经病理诊断为:神经鞘瘤8例,其中椎管内外哑铃状1例;脊膜瘤2例,血管脂肪瘤1例.所有病变均完全切除.术后随访6个月~3年,功能基本全部恢复者9例,残留右小腿外侧麻木1例,左侧臀部麻木1例,无死亡病例.结论:综合分析腰腿痛患者的临床特点与CT检查结果,才能避免误诊;MRI是目前诊断椎管内肿瘤的有效的手段;及时手术治疗能取得满意的效果.
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肢体骨转移癌综合治疗及随访分析
目的:为有效提高肢体骨转移癌患者的生存时间和质量,探讨综合治疗的原则,手术方案的选择及临床意义.方法:对1997年3月至2003年8月间41例有随访结果的肢体骨转移癌患者进行回顾性分析.根据患者一般情况,骨转移灶特征及原发肿瘤性质,给予包括外科治疗在内的个体化综合治疗.对比治疗前后疼痛缓解程度、生活质量及功能.结果:患者术后存活时间平均22.7个月,存活1年以上的患者23例(56.1%).接受综合治疗后疼痛早期缓解率为84%,其中13例接受转移灶高温诱导微波灭活自体或异体骨移植,除1例术后发生病理性骨折外,余治疗后生活质量显著提高.结论:严格根据适应证选择合理的综合治疗方案,对于延长晚期骨转移痛患者的生存时间,提高生存质量有着重要意义.微波灭活自体或异体骨移植治疗骨转移癌可获得满意疗效,尤其适用于孤立转移灶或存活期较长的肿瘤患者.
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神经纤维瘤病Ⅰ型伴下肢恶性神经鞘瘤1例
1 病例摘要患者男,36岁,蒙古族,全身体表多发结节20年,左大腿肿物8个月并切除术后4个月,肿物复发伴疼痛1个月入院.患者20年前无诱因出现躯干及四肢体表多发结节,生长缓慢,未予处理.
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腹膜后脂肪肉瘤术后短期复发1例
1 病案概况患者女,74岁,因"腹膜后脂肪肉瘤术后3年半,左下腹包块半年"于2005年11月17日入院.3年半前,患者因左下腹包块在外院行手术切除(经腹),术后病理诊断为:腹膜后脂肪肉瘤.半年前肿瘤复发,渐增大,在外院行介入治疗一次无效后遂来我院,门诊收住.
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介绍一种方便的过滤除菌方法
在细胞培养过程中,经常需要配制无菌液体,有些可采用高压蒸汽灭菌,有些则不宜采用这种方法,而应过滤除菌.我们在配制RPMI1640、DMEM、0.25%胰蛋白酶、D-Hank's液等工作中,尝试采用一种方便的过滤除菌方法,现介绍如下:
关键词: 过滤除菌
年 | 期数 |
2019 | 01 02 04 05 06 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |
1999 | 01 02 03 |