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TRAIL受体DR5、DcR1在宫颈癌组织中的表达
目的 检测TRAIL受体DR5、DcR1在宫颈癌中的表达及意义,探讨其在诱导肿瘤细胞凋亡中的作用. 方法 采用免疫组化ElivisionTM plus法检测DR5、DcR1在正常宫颈组织、官颈上皮内瘤样病变(CIN)和官颈癌组织中的表达情况,并分析其与临床病理的关系. 结果 DR5在正常宫颈组织中阳性表达率为10.00％,显著低于CIN组(80.00％)和宫颈癌组(92.86％),差异具有统计学意义(P＜0.01)；DcR1在正常宫颈组织、CIN组织和宫颈癌组织中阳性表达率分别为90.00％、90.00％和97.62％,各组间差异无统计学意义(P＞0.05).DR5、DcR1的阳性表达率与官颈癌的临床分期、病理分型以及淋巴结转移无明显相关性. 结论 DR5和DcR1在宫颈癌中均为高表达,可能成为新的治疗靶点.
关键词： 子宫颈癌 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 DR5 DcR1 -
退变腰椎间盘中细胞凋亡及DR4、DcR1的表达
目的 检测死亡受体DR4及诱骗受体DcR1的表达、腰椎间盘中髓核组织细胞凋亡率.方法 采用原位DNA片段末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学方法 对退变组的36例退变腰椎间盘髓核组织及对照组的22例创伤腰椎间盘髓核组织进行检测.结果 36例退变腰椎间盘组织细胞凋亡率为52 41%,DR4细胞阳性率为53 24%,DcR1细胞阳性率为24 36%;22例创伤腰椎间盘组织细胞凋亡率为35 47%,DR4细胞阳性率为32 53%,DcR1细胞阳性率为30 54%.两组间细胞凋亡率、DR4蛋白表达差异均有统计学意义(P<0 05).两组间DcR1蛋白表达差异无统计学意义(P>0 05).两组髓核内DR4染色阳性细胞率与TUNEL阳性细胞率之间呈正相关(r=0 865,P<0 01).两组髓核内DcR1阳性细胞率与TUNEL阳性细胞率无关,差异无统计学意义(P>0 05).结论 腰椎间盘中可能存在TRAIL/DR4诱导的凋亡途径,DR4可能在腰椎间盘退行性变发生和发展中发挥重要作用.
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细菌双杂交系统在细胞外蛋白质相互作用中的应用
目的:探索应用细菌双杂交系统在细胞外蛋白质之间相互作用的可行性.方法:应用Stratagene BacterioMatch two hybrid system,以pTRG构建编码TRAIL细胞外可溶性区域序列融合表达质粒;以pBT构建编码DR4、DR5、OPG等的细胞外区域序列融合表达质粒.重组质粒分别相应共转化报告菌株XL1-Blue MRF,报道基因产物以抗羧苄青霉素和β-半乳糖苷酶活性作为转录激活的指标.结果:pTRG-TRAIL与pBT-DR4,pTRG-TRAIL与pBT-DR5及对照组分别共转化后在高浓度羧苄青霉素(500 μg/ml以上)筛选下宿主菌呈转录激活状态,pTRG-TRAIL与pBT-OPG 组共转化后在低浓度羧苄青霉素(250 μg/ml以下)筛选下宿主菌呈转录激活状态,用X-Gal-PETG平皿可以进一步验证阳性克隆.对照组pTRG-TRAIL与pBT-LGF2,pBT-DR4、pBT-DR5或pBT-OPG与pTRG-Gal11 4组共转化后呈阴性.结论:所用的双杂交序列皆为编码这些蛋白质的细胞外区域,而这些蛋白质本身的相互作用已有其他报道验证,所以细菌双杂交系统可以用于细胞外蛋白质的相互作用研究.
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膀胱移行细胞癌组织中DcR1基因启动子区甲基化状态和蛋白表达相关性的分析
目的 检测膀胱移行细胞癌中DcR1基因启动子区甲基化状态,探讨其甲基化改变与蛋白表达关系.方法 采用甲基化特异性PCR法(MSP法)检测膀胱移行细胞癌及正常膀胱粘膜组织中DcR1基因启动子区甲基化的水平.采用免疫组织化学染色法检测DcR1表达.结果 37例膀胱移行细胞癌组织中,DcR1启动子区甲基化发生率为37.83％ (14/37),正常膀胱粘膜组织未发现甲基化,有显著性差异(P＜0.01).在不同分级,分期膀胱移行细胞癌组织中的差异无显著性.免疫组化显示:DcR1阳性表达率在正常组织中为100％,在肿瘤组织中为62.17％ (23/37),与正常组织比较有显著性差异.14例异常甲基化的膀胱移行细胞癌组织中有11例未检测到DcR1的表达,而23例未甲基化膀胱移行细胞癌组织中有3例未检测到,二者比较有显著性差异(P＜0.01).结论 膀胱移行细胞癌组织中,DcR1基因启动子区甲基化与临床分期和病理分级无显著相关性.DcR1基因启动子区甲基化可能是其蛋白不表达的原因之一.
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TRAIL及其受体DR4、DcR1在大肠癌及癌旁组织中的表达
目的研究人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand, TRAIL)及其受体DR4、DcR1在大肠癌和癌旁组织中的表达及意义.方法采用免疫组化SP法检测42例大肠癌及其癌旁5cm组织、25例正常大肠粘膜组织中TRAIL及其受体DR4、DcR1表达水平.结果 TRAIL及DR4在大肠癌、癌旁组织及正常大肠粘膜组织中的表达呈递增趋势,而DcR1的表达则与之相反(P<0.05);TRAIL和DR4在中、低分化癌中的表达明显低于高分化癌中的表达,而DcR1的表达则与之相反(P<0.01);TRAIL、DR4、DcR1的表达与肿瘤的病理类型、Duke's分期及淋巴结转移与否等因素无关(P>0.05).结论 TRAIL、DR4、DcR1可能与大肠癌的发生、发展密切相关;DR4可能在TRAIL诱导的凋亡通路中发挥一定作用,而DcR1的表达与否一定程度上决定了TRAIL能否发挥其生物效应.
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TRAIL及其受体在乳腺癌组织中的表达及意义
目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体(DR4、DR5、DcR1、DcR2)在乳腺癌组织的表达及意义.方法 用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测60例乳腺癌及对应的正常乳腺组织中TRAIL及其受体的表达.结果 乳腺癌组织中TRAIL、DcR1、DcR2表达均低于正常乳腺组织(P＜0.05),且TRAIL及其受体的表达与乳腺癌的分期、分级等无关(P＞0.05).结论 TRAIL及其受体在乳腺癌凋亡过程中起着重要的作用,TRAIL及其诱骗受体低表达同乳腺癌的发生关系密切.
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FasL、TRAIL及其受体DcR1在宫颈癌中的表达
目的:探讨FasL、TRAIL及其受体DcR1在宫颈癌中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组化SP法对10例正常宫颈组织、18例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和40例宫颈癌组织中FasL、TRAIL及DcR1的表达情况进行检测,并结合患者年龄、肿瘤分化程度、组织类型、有无淋巴结转移等临床病理因素进行综合分析.结果:FasL在正常宫颈、CIN和宫颈癌组织中的表达呈递增趋势;宫颈癌组织中,FasL阳性表达随组织学分级的降低而升高;有淋巴结转移者FasL阳性表达明显高于无淋巴结转移者;TRAIL及DcR1在正常宫颈组织中的表达高于宫颈癌组织,宫颈癌组织中,TRAIL阳性表达随组织学分级降低而降低.结论:FasL,TRAIL及DcR1的异常表达在宫颈癌变过程中起到了一定的作用.
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TRAIL及其受体在正常心脏组织的免疫组织化学定位
目的:观察正常人心脏组织中TRAIL及其受体DR4、DR5、DcR1和DcR2的表达分布情况,为进一步明确这些分子在心肌损伤中的作用机制提供形态学依据.方法:用抗TRAIL及其受体的单克隆抗体(mAb),应用免疫组织化学染色技术,检测正常人心脏组织中TRAIL及其受体DR4、DR5、DcR1和DcR2的表达.结果:TRAIL及其受体DR4、DR5、DcR1和DcR2在正常人心脏组织中均有表达,表达产物主要分布于胞浆内,胞膜上也有表达.结论:TRAIL及其受体可能参与某些病理状态下心肌细胞的凋亡过程.
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TRAIL及其受体在直肠癌中的表达及意义
目的:探讨人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)及其受体DR4、DR5、DcR1、DcR2在直肠癌及癌旁组织中的表达及意义.方法:采用免疫组化EliVision法检测37例直肠癌及其癌旁组织和10例正常直肠粘膜组织中TRAIL及其受体DR4、DR5、DcR1、DcR2表达水平.结果:TRAIL在正常直肠粘膜组织、癌旁及直肠癌组织中的表达呈递减趋势,而DR4、DR5的表达则与之相反(P＜0.05);TRAIL在中、低分化癌中的表达与高分化癌中的表达无差异,而DR4、DR5、DcR1、DcR2在中、低分化癌中的表达高于高分化癌中的表达(P＜0.05);TRAIL及其受体的表达与肿瘤的病理类型、患者的年龄、性别等因素无明显相关性(P＜0.05).结论:TRAIL在直肠癌中表达较正常直肠粘膜组织减弱,DcR1、DcR2在直肠癌中的表达高于DR4、DR5,提示TRAIL及其受体可能与直肠癌的发生、发展密切相关,为临床应用提供了一定的理论依据.
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TRAIL受体DR5 、DcR1在子宫内膜癌中的表达及临床意义
目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体DR5 、DcR1在子宫内膜癌中的表达及临床意义.方法:采用免疫组化ElivisionTM plus法检测DR5 、DcR1在10例正常子宫内膜、12例增生性子宫内膜及42例子宫内膜癌中的表达.结果:子宫内膜癌中DR5的阳性表达率为36/42(85.71%),明显高于正常子宫内膜3/10 (30.00%),(P<0.01).正常子宫内膜中DcR1的阳性表达率为100.00%,明显高于子宫内膜癌19/42(45.24%),(P<0.01).在子宫内膜癌中,DR5的阳性表达与病理分级及肌层浸润呈反比.结论:子宫内膜癌中DR5的高表达使TRAIL用于子宫内膜癌的治疗在理论上具有可行性;子宫内膜癌中DcR1的表达可能导致TRAIL诱导的凋亡耐受.
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TRAIL及其受体DR5、DcR1在宫颈癌中的表达
目的:探讨TRAIL及其受体DR5、DcR1在宫颈癌中的表达及其临床意义.方法: 应用免疫组化SP法对10例正常宫颈组织、18例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和40例宫颈癌组织中TRAIL、DR5及DcR1的表达情况进行检测,并结合患者年龄、肿瘤分化程度、组织类型、有无淋巴结转移等临床病理因素进行分析.结果: TRAIL及DcR1在正常宫颈组织中的表达高于宫颈癌组织;宫颈癌组织中,TRAIL阳性表达随组织学分级降低而降低;DR5在正常宫颈、CIN和宫颈癌组织中的表达呈递增趋势.结论: TRAIL、DR5及DcR1的异常表达在宫颈癌变过程中起一定的作用.
